Teses - Biodiversidade de Ambientes Costeiros - São Vicente

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https://hdl.handle.net/11449/148808

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Biogeografia das espécies invasoras da herpetofauna: influência de dispersores artificiais e fatores ambientais
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-03-24) Parreira, Caroline Nunes; Nunes, Ivan Sergio [UNESP]; Vasconcelos, Tiago da Silveira [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
The colonization of invasive species can impact biodiversity, human well-being, health and the economy. For a species to become invasive, it must overcome biogeographical, physiological and biotic filters, therefore, the understanding of distribution patterns of introduced species is essential to support studies and preventive measures regarding the advance of bioinvasions. The present study aimed to estimate the areas of climatic suitability in Brazil, of the introduced herpetofauna species with high expansion potential, the anuran Eleutherodactylus johnstonei (Amphibia, Eleutherodactylidae) and the lizard Anolis porcatus (Reptilia, Dactyloidae), to evaluate the possible niche overlap with phylogenetically related species that are native to Brazil, and to verify which Brazilian ports are more susceptible to the introduction of Anolis porcatus, a species introduced due maritime trade. The species disitribution models (SDMs) showed that the bioclimatic variables related to temperature had the highest contributions in the model of Anolis porcatus and precipitation had the highest contributions in the model of Eleutherodactylus johnstonei, demonstrating the relationship between the distribution and the habits and characteristics of each of their respective groups. The areas where the exotic populations of these two species occur in Brazil are located in areas of minimum and low climatic suitability, according to the results of SDM. However, Anolis porcatus is rapidly expanding its distribution under these conditions, and its colonization may be more effective and accelerated when that species finds areas of higher climatic suitability. The area of endemicity results identified endemism areas of native species that overlap the areas of climatic suitability of Anolis porcatus and Eleutherodactylus johnstonei obtained with the SDM, suggesting possible future niche overlaps. The present study also found that ports of Salvador, Rio de Janeiro, Santos and Itapoá are more susceptible to new introductions of Anolis porcatus due maritime trades. Both introduced species can expand their distribution to areas where there are phylogenetically close native species and species with similar habits, and there may occur impacts on native species, which demonstrates the importance of studies about the biological interactions of these species, in addition to efforts to obtain a higher knowledge of its areas of occurrence. For Anolis porcatus, the importance of studies in port areas and its surroundings is highlighted, besides the implementation of measures within the scope of port management to prevent new introductions.
Além das medições convencionais: avaliação de efeitos tóxicos em danio rerio e corbicula fluminea associados a águas e sedimentos contaminados por rejeitos de mineração liberados após o acidente com a barragem de fundão no rio doce (ES-MG)
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-03-31) Pauly, Guacira de Figueiredo Eufrasio; Abessa, Denis Moledo de Souza [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
O rompimento da barragem do Fundão, de responsabilidade da Samarco/BHP, na tarde do dia 5 de novembro de 2015, liberou mais de 50 milhões de m³ de rejeitos de mineração de ferro, tendo sido considerado o maior desastre ambiental da história do Brasil até então. Dados iniciais obtidos por diversos estudos indicaram aumento imediato nos níveis de metais em águas e sedimentos na Bacia do Rio Doce, mas contraditórios, no que diz respeito aos efeitos de toxicidade aguda e crônica para alguns modelos clássicos, sendo então necessário avaliar os efeitos a partir de níveis biológicos menores, capazes de responder a exposições mais sutis. O presente estudo teve como objetivo geral avaliar efeitos biológicos associados à contaminação da água e dos sedimentos da Bacia do Rio Doce na área afetada pelo rompimento da barragem do Fundão (MG), a fim de gerar dados sobre os efeitos agudos, crônicos e subcrônicos decorrentes da contaminação por metais, estimando assim potenciais riscos ecológicos. Para isso, amostras de água e sedimentos foram coletadas em diferentes períodos após o desastre, e analisadas quimicamente, bem como os índices geoquímicos e de enriquecimento foram calculados. Concomitantemente, foram realizados ensaios com neonatos de Daphnia similis ou D. magna, em amostras de água e sedimento (interface sedimento-água), onde 5 organismos foram colocados em 4 réplicas de cada amostra, e expostos por 48h, sob condições controladas, sendo então contados os sobreviventes. Na segunda etapa do estudo, organismos adultos de Corbicula fluminea, foram coletados no Rio Ribeira de Iguape (SP), aclimatados em laboratório, e expostos aos sedimentos. Em cada réplica, contendo cerca de 4 cm de sedimento e cerca de 1 L de água de diluição, foram introduzidos 10 organismos. O sistema-teste foi mantido a 25°C e fotoperíodo de 12:12 (claro-escuro), sob aeração. Após 14 dias, os organismos foram sacrificados e as partes moles foram removidas. Foram realizadas análises de bioacumulação de metais, com cálculo do fator de bioacumulação (BAF), bem como analisados os biomarcadores glutationa reduzida (GSH), glutationa-S-transferase (GST), glutationa peroxidase (GPx), lipoperoxidação (LPO), danos em DNA, atividade de acetilcolinesterase (AChE) e metalotioneína (MT). Por fim, foram realizados ensaios de toxicidade crônica com embriões da espécie Danio rerio, expostos às amostras de água. Após a obtenção dos ovos fecundados, estes foram transferidos para microplacas de 24 poços com capacidade de 2 ml contendo as amostras de água, e observados a cada 24 horas em microscópio eletrônico, verificando-se a coagulação, pigmentação do corpo e dos olhos, formação de somitos, desprendimento da 17 cauda, eclosão e letalidade. Os resultados obtidos revelaram altos níveis de metais em água e sedimentos em amostras coletadas imediatamente ao colapso da barragem, com redução das concentrações ao longo do tempo. Os índices geoquímicos demonstraram ausência de contaminação ou contaminação moderada, com altos índices de enriquecimento de Mn no alto rio Doce, de acordo com os valores de EF. Foi observada toxicidade ocasional em Daphnia ssp., porém não correlacionada com os metais medidos. Foi observada bioacumulação importante (BAF>1) para Zn em C. fluminea, porém os efeitos causados na biota quanto ao estudo de biomarcadores não foram relacionados diretamente pela contaminação do rejeito de mineração sobre os ecossistemas. Apesar das concentrações de metais acima da legislação, não foi observada diferença estatística significativa com relação ao controle para a sobrevivência ou outros efeitos negativos nos embriões de D. rerio expostos às amostras de água coletadas ao longo da BRD. Os resultados obtidos sugerem, portanto, baixa biodisponibilidade dos metais liberados pelos rejeitos, ao menos nos ambientes dulciaquícolas.
Caracterização do perfil e atividade biológica de peptídeos de cavalo marinho Hippocampus reidi
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-03-17) Correa, Claudia Neves; Castro, Leandro Mantovani de [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A biodiversidade encontrada no ambiente marinho e a sua diversidade química é uma fonte ilimitada para a bioprospecção de substâncias com potencial para o desenvolvimento de novos fármacos. O cavalo marinho é um peixe teleósteo, reconhecido na Medicina Tradicional Chinesa por possuir propriedades medicinais. Nos últimos anos, o uso de metodologias específicas em modelos experimentais e linhagens celulares revelaram a presença de um conjunto de peptídeos provenientes do metabolismo intracelular e que podem atuar na comunicação celular. Neste contexto o objetivo deste trabalho foi caracterizar o perfil de peptídeos naturais encontrados em tecidos de cavalo marinho Hippocampus reidi, através de um protocolo de rápida inativação da proteólise pelo calor e espectrometria de massas, além de uma investigação inicial da atividade biológica de algumas sequências identificadas através de um ensaio para verificar um efeito antioxidante. Os resultados obtidos durante o desenvolvimento deste estudo são apresentados em três capítulos. No capítulo 1, a análise do peptidoma de brânquias permitiu a identificação de 1080 peptídeos em brânquias. Os fragmentos variaram de 5 a 38 aminoácidos e a principal localização subcelular da proteína precursora foi o citoplasma (58%) seguido pelo núcleo (22%) e mitocôndria (5%). Fragmentos N e C-terminal foram 18% e 15% respectivamente, resultados semelhantes a outros estudos de peptidoma. O mais frequente resíduo de aminoácido na posição N-terminal foi alanina, seguido por serina, na posição P1 o resíduo de aminoácido mais encontrado foi arginina, seguido por lisina. Entre as proteínas precursoras com maior número de peptídeos identificados estão proteínas ribossomais, histona e hemoglobina cadeia alfa. Fragmentos de Moronecidin-like, descrito como peptídeo antimicrobiano, também foram identificados em todas as amostras de brânquias analisadas. Análises de predição revelaram peptídeos com características importantes de peptídeos antimicrobianos. No capítulo 2, um ensaio de atividade antioxidante foi realizado para dois peptídeos identificados. Os peptídeos CNC1 e CNC2 não atingiram 50% de inibição de radicais com 30 minutos de reação no ensaio de DPPH, com 24 horas de reação o peptideos CNC1 atingiu 69,61% de inibição de radicais na concentração de 100 µM. No capítulo 3 é apresentado um protocolo de marcação isotópica para realização de peptidômica quantitativa. A caracterização realizada neste estudo abre novas perspectivas para investigação do potencial terapêutico de peptídeos naturais.
Avaliação do potencial de biorremediação de diesel S10 e de espuma para controle de incêndio (AFFF) por bactérias heterotróficas isoladas de sedimentos do Estuário de Santos - SP
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-02-01) Chinellato, Roberta Alves Merguizo; Oliveira, Ana Julia Fernandes de [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A utilização de petróleo como principal recurso energético é um dos fatores que contribuem para o aumento de acidentes com produtos petroquímicos, incluindo incêndios de grandes proporções, causando graves danos ambientais. A dificuldade no combate a incêndios envolvendo hidrocarbonetos com compostos comuns levou ao uso de espumas especiais para o controle de incêndio, as AFFF (Aqueous Film-Forming Foam), sendo entretanto, também prejudiciais ao ambiente e seus organismos. A biorremediação emerge como um processo simples e de baixo custo quando comparado a outras alternativas, além se ser menos agressiva e a mais adequada para manutenção do equilíbrio ecológico. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial de cepas ambientais das espécies Bacillus subtilis e Bacillus licheniformis em biodegradar diesel S10 e substâncias presentes na espuma para combate a incêndios (AFFF), em sedimento de áreas costeiras. A avaliação de biodegradação dos contaminantes, foi realizada por meio de teste com 2,6 diclorofenol-indofenol (DCPIP), respirometria de Bartha e Pramer e da análise química do contaminante por Cromatografia Gasosa Acoplada à Espectrometria de Massas (CG/MS). Os resultados obtidos mostraram a capacidade das cepas bacterianas em biodegradar substâncias presentes no diesel e na AFFF, tanto de forma isolada quanto em consórcio bacteriano. A concentração de carbonos (C) biodegradados (µmol) de AFF (6%) com o consórcio foi de 7,32E±03, enquanto que, para o diesel S10 (2,5%) a concentração de C biodegradados (µmol) foi de 1,55E±04. Após a biodegradação de Bartha e Pramer, os resultados apresentam uma degradação de até 6x da concentração inicial, a análise de CG/MS apresentou mudanças no perfil cromatográfico do diesel, demonstrando uma degradação dos compostos, principalmente do perfil cromatográficos dos BTEX (Benzeno, Tolueno, Etilbenzeno e O-Xileno), na [2,5%] nota-se que o benzeno foi totalmente degradado. Os resultados destacaram a importância da utilização de cepas ambientais na biorremediação, propiciando a diminuição do período adaptativo e uma rápida ação de biorremediação dos ambientes contaminados. O presente trabalho demonstrou que as cepas selecionadas são eficientes em remediar a contaminação por estes tipos de compostos, tendo grande potencial para estudos futuros que permitam sua utilização em outros compostos comerciais.
Avaliação e aprimoramento dos dados pesqueiros de elasmobrânquios no litoral sul de São Paulo, sudeste do Brasil
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-10-19) Santos, Paulo Roberto Santos dos; Garrone-Neto, Domingos; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A baixa qualidade dos boletins de pesca, ausência completa de dados para alguns anos ou áreas e o distanciamento entre aqueles que monitoram a pesca com aqueles que vivem dela, são dois dos principais desafios a serem superados no aprimoramento da gestão de pesca de elasmobrânquios no Brasil. A utilização do conhecimento ecológico local (CEL) dos integrantes das comunidades pesqueiras e o conhecimento científico (CC) de pesquisadores no monitoramento da pesca, é uma boa estratégia para auxiliar nessa questão. No presente trabalho, com base em ações desenvolvidas em uma área considerada hotspot de biodiversidade e que apresenta um dos monitoramentos pesqueiros mais antigos do Brasil, foi estruturada uma sequência de capítulos para testar a hipótese que um monitoramento integrado, unindo o CEL e CC pode gerar dados mais adequados para a gestão pesqueira. Os três primeiros capítulos foram produzidos para se estabelecer um panorama real entre as três vertentes de dados utilizados, o CC histórico e contemporâneo, CEL e o monitoramento pesqueiro clássico (MPC). No capítulo 1, já publicado, verificou-se que a área de estudo, mesmo com uma lacuna de 40 anos na produção de estudos direcionados à biodiversidade de elasmobrânquios, apresenta o registro de 62 espécies (36 tubarões e 26 raias). No capítulo 2, identificou-se um rico histórico pesqueiro revelado pelo CEL dos pescadores, com boa capacidade de identificação de alguns grupos de espécies e descrição dos eventos relacionados a pesca de tubarões e raias, incluindo mais uma espécie de tubarão registrada. No capítulo 3, após uma avaliação da qualidade taxonômica e a participação de categorias de pesca de diferentes níveis taxonômicos, identificou-se que as informações obtidas para a elaboração dos capítulos 1 e 2 não estão refletidas nos boletins de pesca oficiais, onde menos de 20% das espécies que são consideradas recursos pesqueiros estão representadas e mais de 90% das informações coletadas fazem referência a uma categoria de pesca, com resolução taxonômica muito baixa (e.g. “cações-agrupados”). As informações dos três primeiros capítulos formaram a base do quarto, onde foi construído um monitoramento pesqueiro participativo (MPP), baseado no auto-reporte de pescadores, guias de pesca e comerciantes, a fim de testar uma estratégia de aprimoramento dos dados pesqueiros de tubarões e raias. Neste capítulo, foi registrado uma grande participação popular, resultando no monitoramento de 1061 viagens, com reportes de alta qualidade taxonômica e identificação de 55 espécies, com a adição de uma nova espécie de tubarão e outra de raia, em relação à riqueza encontrada nos três primeiros capítulos. A vara de mão e o emalhe de fundo foram os aparelhos de pesca mais representativos na pesca amadora e comercial, respectivamente. Concentrações de áreas de pesca foram observadas nas entradas dos estuários, próximo a ilhas costeiras, fundos de cascalho e parcéis. Valores de captura por unidade de esforço (CPUE) por kg e por número de indivíduos mostraram um declínio anual, mas sem diferenças sazonais. Entretanto, houve uma marcada mudança sazonal na composição de espécies. Espécies de extinção, proibidas de retenção a bordo/comercialização (Sphyrna spp., Squatina spp. e Atlantoraja spp.) e permitidas (Rhizoprionodon spp., Carcharhinus brevipinna, C. limbatus, C. falciformis e Galeocerdo cuvier) foram presentes nos desembarques e descartes (reportados espontaneamente). Informações morfométricas (comprimento total, furcal, eviscerado, entre dorsais etc.) também foram obtidas em todas as amostragens presenciais, assim como peso e sexo. Desta forma, a grande quantidade de informações refinadas obtidas de modo participativo neste capítulo (que também incluiu o registro após o fim das coletas, de mais duas novas espécies de tubarões e outra de raia e a redescoberta de uma população de um tubarão após 50 anos), permite aceitar a hipótese de estudo, indicando a metodologia participativa como de grande importância para o avanço da gestão de pesca de elasmobrânquios no Brasil.
O licenciamento ambiental e a recuperação da Mata Atlântica em áreas de preservação permanente de cursos d’água na Baixada Santista
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-09-12) Moschetto, Fernanda Augusto; Freitas, Débora Martins de [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
O presente estudo apresenta informações a respeito de como as ações de recuperação florestal são conduzidas por indústrias e empreendimentos privados em Áreas de Preservação Permanente – APPs de cursos d’água na região da Baixada Santista, litoral do estado de São Paulo. A Baixada Santista apresenta um dos maiores índices de cobertura da Mata Atlântica do estado e está inserida em um dos maiores centros de endemismo desse hotspot. Ao mesmo tempo, está suscetível à expansão urbana devido principalmente ao seu polo industrial e à presença do Porto de Santos, fato que ocasionou a degradação de rios e córrregos por empresas na região. Para o desenvolvimento da pesquisa, processos de licenciamento foram consultados nas agências da Companhia Ambiental do Estado de São Paulo – Cetesb visando à identificação das APPs de cursos d’água impactadas na Baixada Santista e que foram recuperadas através do plantio de mudas. Dentre os processos, destacam-se autorizações emitidas pela Cetesb para supressão e demais intervenções nas margens dos recursos hídricos, Termos de Compromisso de Recuperação Ambiental - TCRAs, projetos de recuperação florestal elaborados pelos empreendedores, Autos de Infração Ambiental etc. Através de visitas de campo, as espécies plantadas nas APPs foram identificadas para avaliação da efetividade das ações de recuperação florestal e para a análise das incoerências constantes nos projetos apresentados pelos empreendimentos à Cetesb. Posteriormente, foi avaliado o cumprimento às resoluções vigentes que orientam as ações de recuperação no estado de São Paulo. Buscou-se também avaliar se alguma APP de curso d’água na região deixou de ser recuperada através da conservação ex situ ocasionada pela compensação ambiental. Análises de sensoriamento remoto foram realizadas de modo complementar para identificação da perda de cobertura vegetal na região de estudo ao longo dos anos. Os dados apresentados podem contribuir para a tomada de decisões sobre o procedimento licenciamento ambiental, para ações efetivas de recuperação florestal em áreas de Mata Atlântica e para a recuperação e conservação da biodiversidade desse hotspot.
Morfo-anatomia floral e biologia reprodutiva de Selenicereus setaceus (Salm-Dyck) Berger (Cactaceae) em São Thomé das Letras, Minas Gerais, Brasil
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-08-24) Sampaio, Paulo de Salles Penteado; Almeida, Odair Jose Garcia de [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Cactos epífitos, hemiepífitos e escandentes compreendem cerca de 10% do total de espécies de Cactaceae e são o grupo menos estudado nesta família, sendo que a flor das cactáceas apresenta características estruturais importantes para compreender a taxonomia e filogenia da família. A evolução de um hipanto de origem receptacular levou a possibilidade do desenvolvimento de um tubo floral longo nos grupos mais derivados, uma inovação chave que permitiu uma maior diversidade de polinizadores. Estudos sobre a biologia reprodutiva, morfologia, anatomia e ontogenia floral de Selenicereus são escassos e a maioria deles tem um viés agrícola, com foco nas pitaias comerciais, nenhum deles abordando o Selenicereus setaceus, o que limita o entendimento da diversidade morfológica das estruturas florais, bem como a evolução destas não somente no gênero Selenicereus como em Cactaceae. Assim, o objetivo desta tese foi descrever a morfologia, ontogenia e anatomia floral do cacto epífito/escandente Selenicereus setaceus, utilizando técnicas tradicionais de histologia vegetal e compreender, também, a biologia reprodutiva desta espécie estudando seu ciclo floral, fenologia reprodutiva, produção de néctar, visitantes florais, polinizadores potenciais e seu sistema reprodutivo. Experimentos com métodos de exclusão foram realizados para monitorar o sucesso reprodutivo e determinar quais visitantes florais eram polinizadores potenciais e tratamentos de polinização foram realizados para determinar seu sistema reprodutivo. A morfologia floral do S. setaceus segue o padrão da Tribo Hylocereeae, gênero Selenicereus e também está de acordo com o padrão morfológico para flores de Cactaceae esfingófilas. O ovário é sincárpico unilocular, apresenta uma epiderme interna com tricomas, os funículos são ramificados com um tronco central ligado a placenta portando óvulos circinótropos, bitegumentados, em número médio de 2.763 óvulos. O androceu apresenta cerca de 390 estames com anteras bitecas, basifixas com quatro sacos polínicos apresentando muitos grãos de pólen por flor com uma média de 521.690 grãos apresentados em mônades, grandes (86-96,3 µm), 3 colpados com exina espinulosa e perfurada. O néctar floral é produzido em uma câmara nectarífera onde o néctar é produzido e acumulado em uma região localizada acima do ovário, expandida e alongada ocupando grande extensão no tubo floral, sendo do tipo difusa. A ontogenia mostrou que os primórdios de androceu e gineceu surgem já nos primeiros estágios do desenvolvimento do botão floral; em um mesmo eixo num plano horizontal, sendo que o androceu possui um padrão centrífugo de desenvolvimento e o gineceu apresentando somente uma cavidade e primórdios de carpelos já unidas neste estágio de desenvolvimento inicial; comprovando então uma fusão congenital e não ontogenética. A formação do tubo floral com a cavidade nectarífera em seu interior e o crescimento em extensão destas estruturas só ocorre faltando metade do tempo para a antese; os tricomas da epiderme nectarífera se apresentam desenvolvidos somente na pre-antese faltando dois dias para a antese; já os tricomas do canal estilar e lobos do estigma estão bem desenvolvidos faltando 10 dias para a antese. O botão floral leva 41 dias para atingir a antese e a maturação dos frutos 63 dias. Os horários de início da antese ocorrem por volta das 16h, 2h antes do pôr do sol, e a flor está totalmente aberta por volta das 20h30, com 30 cm de comprimento e 29 cm de diâmetro e o término da antese ocorre por volta das 11h. O néctar apresentou uma concentração média de soluto de 28,3% e volume médio de 133 µL. As abelhas Apis mellifera foram os visitantes mais frequentes e os principais polinizadores das flores de S. setaceus, principalmente no período entre 05h00-06h00 quando foi observada a maior frequência e número de visitas; sendo que os visitantes noturnos foram muito escassos, com apenas uma visita registrada para a mariposa Manduca rustica, outro polinizador potencial. A polinização natural teve alta taxa de frutificação (89,8%); a população estudada é autocompatível; e frutifica através de autopolinização manual e espontânea que ocorre através do contato físico entre as anteras e os lobos do estigma durante o fechamento das flores. Este estudo comprovou que o Selenicereus setaceus apesar de se enquadrar na síndrome da esfingofilia com uma flor fenotipicamente especializada, possui uma polinização natural ocorrendo, principalmente, pela extensão da antese floral até às 11h do dia seguinte e visitação diurna realizada por Apis mellifera, além da autopolinização espontânea. A população do S. setaceus está mudando seu sistema de polinização devido à escassez do polinizador noturno e apresentando um sistema de polinização generalista com diferentes mecanismos de transporte de pólen, ou seja, a autopolinização e a polinização cruzada realizada pelas abelhas, a autopolinização e a polinização cruzada por mariposas e a autopolinização espontânea estão garantindo a produção de frutos e sementes no S. setaceus em São Thomé das Letras. A autopolinização espontânea ou realizada pelas Apis mellifera é uma garantia para a segurança reprodutiva e manutenção da espécie no local de estudo, como indicado pela baixa taxa de fertilização dos óvulos disponíveis nas flores fenotipicamente especializadas, devido à raridade local da mariposa esfingídea.
Avaliação dos efeitos biológicos da interação microplástico, triclosan e 17α etinil-estradiol em espécies estuarinas tropicais: Uma abordagem ecotoxicológica.
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-03-31) Nobre, Caio Rodrigues; Pereira, Camilo Dias Seabra; Gusso-Choueri, Paloma Kachel; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Os efluentes domésticos são uma mistura complexa de diferentes substâncias, incluindo microplásticos e fármacos e produtos para cuidados pessoais (FPCPs). Microplásticos apresentam afinidade com substâncias hidrofóbicas tais como o hormônio sintético 17α etinil-estradiol o bactericida triclosan, e podem interagir em ambientes aquáticos atuando como vetores de dispersão dessas substâncias, com potenciais efeitos a biota. Nesse contexto, o presente estudo tem como objetivo avaliar efeitos tóxicos de microplásticos contaminados com FPCPs através de uma abordagem ecotoxicológica empregando organismos estuarinos. Os organismos ostra do mangue (Crassostrea brasiliana), caranguejo-uçá (Ucides cordatus) e robalo (Centropomus undecimalis) foram expostos a tratamentos: controle (C); microplásticos sem contaminação (MP); e microplástico contaminado com 17α etinil-estradiol (MPE); microplástico contaminado com triclosan (MPT). Os organismos foram expostos por 3 e 7 dias. Para as ostras e os caranguejos, a posteriori à exposição, 10 organismos/ tratamento/ tempo tiveram sua saúde celular avaliada mediante ao ensaio de estabilidade da membrana lisossômica na hemolinfa. Após o encerramento dos ensaios também foram separados tecidos de 7 organismos para as análises de biomarcadores bioquímicos (EROD, DBF, GST, GPx, GSH, LPO, danos em DNA e ChE) nas ostras (brânquias, glândulas digestivas e músculos adutores), caranguejos (brânquias, hepatopâncreas e músculos) e GST, GPx, GSH, LPO, danos em DNA e ChE em peixes (brânquias, fígado, intestino, músculo e cérebro). Os 3 organismos restantes de cada espécie foram separados para determinações analíticas nos níveis de 17α etinil-estradiol e triclosan. Ambas as substâncias avaliadas EE2 e TCS tiveram sua presença detectada na água e nos organismos expostos. Ao serem inseridas no meio experimental as partículas de polietileno sem contaminação e contaminadas com EE2 e TCS foram capazes de promover efeitos bioquímicos nas enzimas de fase I, fase II, sistema anti-oxidante, levar ao estresse oxidativo e desencadear danos em DNA e efeitos neurotóxicos e citotóxicos nas três espécies modelos C. brasiliana, U. cordatus e C. undecimalis nos diferentes tecidos avaliados. Ao compararmos os efeitos das substâncias adsorvidas pelos MPs, o TCS mesmo em menor concentração se mostrou mais tóxico que o EE2 para as espécies modelos. Quando os organismos foram comparados entre si o fator espécie se mostrou o mais relevante para ocorrência de efeitos dos MPs de uma maneira geral. A partir dos dados obtidos é possível inferir que os microplásticos de polietino associados aos FPCPs 17α etinil-estradiol e triclosan conferem risco aos ecossistemas estuarinos tropicais e as espécies Crassostrea brasiliana, Ucides cordatus e Centropomus undecimalis podendo gerar perturbações ecológicas à cadeia alimentar estuarina.
Estudo ecotoxicológico do biocida antiincrustante DCOIT (SEA-NINE™) em invertebrados marinhos neotropicais
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-03-11) Campos, Bruno Galvão de; Abessa, Denis Moledo de Souza [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Após a proibição das tintas anti-incrustantes à base de tributilestanho, o DCOIT (4,5-Dicloro-2- octilisotiazol-3(2H)-ona) tornou-se um dos biocidas anti-incrustantes mais utilizados. Além de ser considerado um contaminante pseudopersistente em áreas com alto tráfego de embarcações e tóxico para espécies não-alvo, a bioacumulação e a transferência trófica de DCOIT em organismos marinhos permanece desconhecido. O presente estudo está dividido em três capítulos que: I) apresentam, como revisão crítica, uma compilação de dados toxicológicos e ambientais dos biocidas mais comuns, e usa essas informações para uma avaliação de risco ecológico (ERA) dos 11 biocidas anti-incrustantes aprovados pela UE (PT21), que indicaram que DCOIT, diuron, diclofluanida, clorotalonil, CuSCN, Cu2O, medetomidina e zineb representam risco para ecossistemas costeiros. II) avaliou a degradação de DCOIT, Irgarol, Diuron e Diclofluanida durante uma fase de equilíbrio de sedimentos de 24 horas em três tempos e concentrações através de modelos de degradação cinética, resultando nas seguintes meias-vidas: DCOIT e Diuron: < 5 h; diclofluanida < 2 h; e Irgarol < 6h. Os resultados também indicaram que exceto diclofluanida, os biocidas anti-incrustantes mostraram que em 6 horas de equilíbrio a taxa de degradação é reduzida drasticamente. III) Investigou os efeitos subletais (bioquímicos, celular e histopatológico) de concentrações ambientalmente relevantes de DCOIT na ostra neotropical Crassostrea brasiliana exposta a concentrações crescentes de DCOIT. este estudo mostrou que o DCOIT causa efeitos negativos sobre C. brasiliana em todos os níveis de organização biológica. IV) Avaliou a toxicidade da água e do sedimento total do DCOIT no seguintes espécies: Perna perna (bivalve), Echinometra lucunter (ouriço-do-mar) Artemia sp (crustáceo), Nitrocra sp (copépode) e Tiburonella viscanna (anfípode). Os dados de toxicidade foram usados para calcular os pontos finais de perigo e risco ambiental que foram comparados com valores obtidos para as espécies temperadas, revelando que os organismos pelágicos tropicais estavam em média 1,7 vezes mais sensível ao DCOIT em comparação com espécies não tropicais. Para sedimentos DCOIT possivelmente apresenta risco na Coréia, Japão, Espanha, Malásia, Indonésia, Vietnã e Brasil. V) Investigou a bioacumulação, biomagnificação e transferência trófica de DCOIT e SiNC-DCOIT (um alternativa de nanoengenharia e menos toxica comaprado com o DCOIT) da microalga Tetraselmis chuii ao mexilhão Mytilus galloprovincialis durante a uptake de 24h e depuração de 72h, o que mostrou que os mexilhões internalizaram e metabolizaram rapidamente tanto DCOIT e SiNC-DCOIT, sendo considerados não bioacumuláveis. No entanto, a exposição via alimentar indicou que DCOIT e SiNC-DCOIT tem capacidade de biomagnificação. VI) avaliou os efeitos subletais de curto e longo prazo de formas nanoestruturadas de biocidas (DCOIT; Ag; SiNC-DCOIT; SiNC-DCOIT Ag) e a nanocápsula “vazia” (SiNC) em juvenis de Crassostrea gigas após 96 h e 14 dias de exposição, indicando que o SiNC-DCOIT apresentou um perfil de toxicidade inferior ao biocida livre. No geral, nossos resultados geraram dados ecotoxicológicos importantes para um contexto que permitirá previsões mais precisas de risco para o ambiente marinho. Os resultados também indicou que as áreas costeiras próximas a portos e marinas são hotspots de contaminação de antiincrustantes sendo considerados os locais mais ameaçados, exigindo, portanto, um controle rigoroso das taxas de liberação e regulamentação rigorosa sobre essas áreas
Estudo ecotoxicológico e avaliação do risco ambiental da cocaína em ecossistemas marinhos
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-01-31) Fontes, Mayana Karoline; Pereira, Camilo Dias Seabra; Maranho, Luciane Alves; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Os esgotos urbanos representam uma importante fonte de poluição em ecossistemas marinhos, devido, principalmente, ao aumento populacional em regiões metropolitanas costeiras e à ineficiência dos processos de coleta, tratamento e disposição de efluentes domésticos. Entre as principais substâncias que podem ser encontradas nos efluentes estão os produtos farmacêuticos, de cuidados pessoais e drogas ilícitas, tais como a cocaína, que é considerada como um sério problema de saúde pública. Os emissários submarinos representam o principal mecanismo de liberação de contaminantes de preocupação emergente (como as drogas ilícitas) no ambiente marinho. Estudos anteriores identificaram a presença de cocaína (COC) em água superficial continental e costeira, bem como efeitos biológicos em concentrações ambientalmente relevantes. Dessa forma, o presente trabalho tem como objetivo a realização de uma avaliação do risco ambiental de cocaína em ambientes costeiros através de uma metodologia escalonada que contemple a quantificação em matrizes ambientais na Baía de Santos (água superficial, sedimento e mexilhões) e ensaios ecotoxicológicos empregando como modelos o mexilhão Perna perna e o peixe Anguilla anguilla. Os mexilhões foram expostos a duas diferentes concentrações de cocaína (200 ng.l-1 e 2000 ng.l-1), a um controle de água do mar e um controle de solvente, por 168h. Ao todo, foram 21 mexilhões divididos em 2 aquários por tratamento. Após os períodos de exposição (48h, 96h e 168h), 7 mexilhões eram aleatoriamente retirados dos aquários e submetidos à avaliação de citotoxicidade (pelo ensaio do Tempo de Retenção do Vermelho Neutro) e posteriormente eram excisados para retirada de tecidos (músculo adutor, glândula digestiva, brânquia e gônadas) para análise de biomarcadores (dopamina- DOPA; 5-hydroxytryptamine- 5-HT – serotonina; acetilcholinesterase- AChE; monoamina oxidase- MAO; ciclooxigenase- COX; transporte mitocrondrial de elétrons- MET; lipidios totais- TLP; 7-ethoxiresorufin O-deetilase – EROD; dibenzilfluoresceina dealkilase – DBF; glutationa S-transferase – GST; glutationa peroxidase – GPX; DNA danos em DNA; e peroxidação lipídica – LPO). A capacidade da cocaína bioacumular nos mexilhões também foi verificada. Além disso, peixes (Anguilla anguilla) também foram expostos à cocaína (20 ng.l−1) para investigar potenciais danos histopatológicos, imunohistoquímicos (3β-hidroxisteroide dehidrogenase- 3β-HSD; 17β- hidroxisteroid dehidrogenase- 17β-HSD type 3; e P450 aromatase) e endócrinos (hormonônio folículo estimulante- FHS; hormônio luteinizante- LH and cortisol) da cocaína em vertebrados. Os resultados demonstram que a cocaína foi encontrada na Baía de Santos em concentrações variando de 1.91 – 203.6 ng.l−1, sendo as maiores concentrações detectadas na primavera/verão, período que coincide com o aumento populacional na Baixada Santista devido ao início da alta temporada. No sedimento, as concentrações quantificadas variaram de 0.94 – 46.85 ng.g−1. A cocaína também foi detectada no tecido de mexilhões coletados na Baía em concentrações variando de 0.914-4.58 μg·kg−1 (peso úmido). O fator de bioacumulação calculado variou de 163 – 1454 l·kg−1. Quanto às vias metabólicas investigadas, foram observadas alterações nas atividades de EROD e DBF, além de GST e GPx, indicando comprometimento na metabolização e resposta antioxidante. A exposição à cocaína provocou citotoxicidade nos mexilhões, que foi observada pela reduzida estabilidade da membrana lisossomica dos hemócitos, além do aumento significativo de peroxidação lipídica e danos em DNA. A cocaína aumentou os níveis de neurotransmissores (dopamine e serotonina) nos mexilhões em todas as concentrações testadas. Já após 168h foi observada uma redução nos níveis de AChE e COX. Além disso, foi observada um aumento nos níveis de MET e TLP em ambas as concentrações. Os peixes expostos à cocaína apresentaram um atraso no desenvolvimento e maturação dos folículos ovarianos, fato que pode comprometer a reprodução desses organismos. Isso também foi demonstrado pela menor expressão de 3β-HSD, e P450 aromatase, bem como menores níveis de FHS e LH. Os resultados indicam que concentrações ambientalmente relevantes de cocaína, mesmo na ordem de ng.l-1 são capazes de afetar negativamente a saúde dos animais marinhos a partir de perturbações no sistema reprodutivo e citogenotoxicidade. A avaliação de risco realizada apontou para quocientes situados entre os níveis moderado e alto para Baía de Santos. É preciso melhorar a estrutura de coleta e tratamento de esgoto em regiões costeiras a fim de minimizar o descarte de efluentes contaminados com drogas ilícitas em ambientes marinhos. Além disso, é importante que essas substâncias sejam incluídas em programas de monitoramento da qualidade de água, a fim de se estabelecerem parâmetros de segurança que permitam a preservação dos recursos naturais e da saúde humana.
Infecção experimental por Leishmania (Leishmania) infantum em hamsters: alterações morfofuncionais do cólon.
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-01-10) Chucri, Thaís Martins; Mari, Renata de Britto [UNESP]; Passero, Luiz Felipe Domingues [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A degradação ambiental e as mudanças climáticas são alguns dos fatores que contribuem para uma maior ocorrência de doenças. Dentre elas, a leishmaniose visceral (LV), uma importante zoonose com letalidade de aproximadamente 95%. É uma infecção sistêmica crônica e quando o parasito atinge o trato gastrointestinal pode provocar alterações morfofisiológicas significativas. No entanto, pouco se sabe sobre o impacto causado por Leishmania no sistema nervoso entérico (SNE). Os neurônios desse plexo desempenham importante papel em manter o peristaltismo e auxiliar na resposta imune do órgão. Diante do exposto e dada a importância do SNE para manter a homeostase do organismo, o objetivo desse estudo foi investigar o comprometimento morfofisiológico das subpopulações de neurônios NADH-dp e NADPH-dp e histopatológico do intestino grosso de hamsters infectados experimentalmente.
Influência de Fatores Físicos na Ecologia e Dinâmica Populacional de Epialtus brasiliensis Dana, 1852 (Brachyura: Majoidea: Epialtidae), em Associação ao Sargassum C. Agardh, 1820 (Fucales: Phaeophyceae) no Litoral Norte do Estado de São Paulo
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-12-10) Vilano, Wagner Ferreira; Souza, Marcelo Ricardo de; Pinheiro, Marcelo Antônio Amaro [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Costões rochosos, são ecossistemas complexos que sofrem influência de diversas variáveis e processos, sendo extremamente relevantes ao estabelecimento de diversas espécies. Neste sentido, o presente estudo avalia aspectos da geologia, geomorfologia e energia hídrica em quatro costões rochosos de Ubatuba (SP), Litoral Norte do Estado de São Paulo (Brasil), verificando sua influência sobre parâmetros bióticos, representados por Sargassum. e caranguejo do fital, E. brasiliensis. Neste contexto, os costões rochosos foram caracterizados em sua extensão quanto a geologia, geomorfologia, declividade, complexidade e sombreamento, além da energia hídrica, neste caso empregando um modelo computacional SWAN. Além disso, foi avaliada a biometria (tamanho) e densidade de E. brasiliensis, em relação às algas pardas do gênero Sargassum. Para realização do trabalho, as amostras de Sargassum, foram obtidas mensalmente durante um ano (agosto/2011 a julho/2012), em dois períodos (diurno e noturno), em quatro costões rochosos do litoral de Ubatuba, SP. No contexto geológico geral, os costões estudados são formados por granitos compostos basicamente por quartzo, feldspato, moscovita e biotita, sendo amplamente diversificado quanto ao foliamento e fratura, variando sua forma, compreendendo desde paredões verticais a pequenos blocos encaixados. Os costões da Fortaleza e Lamberto foram similares quanto a declividade (p=0,856), com médias variando de 15 a 31º. Fortaleza e Domingas Dias foram os costões mais próximos quanto à complexidade (p=0,476), diferindo do costão do Lamberto, que foi o mais distinto em complexidade (p=0,013). A intensidade luminosa diferiu entre os costões (p=0,000), com similaridade entre Fortaleza e Domingas Dias (p=0,802). A energia das ondas diferiu de intensidade entre os costões (p=0,045). Durante o estudo, um total de 7.889 indivíduos de E. brasiliensis foram capturados (3.570 machos e 4.319 fêmeas), O tamanho dos exemplares (largura da carapaça) variou de 1,4 a 11,9 mm (5,1±1,5 mm) e a abundância total de E. brasiliensis apresentou assimetria positiva em todos os costões analisados. A densidade total dos caranguejos (ind./kg) não diferiu entre Baías (F=2,71; p=0,106) ou entre os costões (F=0,99; p=0,400), enquanto para LC houve diferenças entre os costões (F=91,96; p=0,000). O comprimento da alga (CA), indicou diferença significativa entre os costões (F=51,33; p=0,000). Os animais maiores (LC) foram encontrados no costão rochoso do Lamberto com o inverso ocorrendo no Perequê-Mirim, já para as algas, a maior média foi registrada no costão do Lamberto (38,7±8,7cm), sendo menor para o costão da Domingas Dias (12,7±2,5cm). As diferenças registradas entre os parâmetros analisados em E. brasiliensis, sugerem a influência do tamanho das frondes de Sargassum. em seu desenvolvimento e estabelecimento no habitat, uma vez que a complexidade do substrato (alga substrato) proporciona diferentes situações no assentamento e permanência em suas frondes. Os resultados obtidos neste estudo evidenciam uma proximidade dos costões tanto por fatores abióticos como pelos bióticos, com maior similaridade entre os costões de uma mesma baía (Baía da Fortaleza: Fortaleza e Domingas Dias; e Baía do Flamengo: Perequê-Mirim e Lamberto), bem como entre os dois embaiamentos.
Avaliação de moléculas bioativas como inibidores do sistema antioxidante de peroxirredoxinas 2-Cys típicas (AhpC) em bactérias
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-03-03) Santos, Melina Cardoso dos; Oliveira, Marcos Antonio de [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
O aumento da resistência aos antibióticos por microrganismos tem crescido vertiginosamente e especialistas têm alertado quanto à rápida ineficácia dos medicamentos frente a linhagens de bactérias super-resistentes. A resistência de bactérias aos antibióticos pode estar diretamente relacionada ao estresse oxidativo, pois antibióticos distintos possuem a capacidade convergente de produzir espécies reativas de oxigênio, que causam danos às macromoléculas, em especial ao DNA, acentuando as taxas de mutação o que pode contribuir para o aparecimento de linhagens super-resistentes. Espécies reativas de oxigênio e nitrogênio também são produzidas pelo sistema imunológico de hospedeiros para combater patógenos e estudos indicam que a inibição da expressão de enzimas antioxidantes de patógenos é capaz de gerar um aumento intracelular significativo dessas espécies, o que interfere de forma substancial na sua sobrevivência. Recentemente foi demonstrado que um composto natural denominado adenantina (Adn) é capaz de inibir a atividade peroxidásica de peroxirredoxinas (Prx) 2-Cys típicas de humanos (PrxI e PrxII), resultando na mortalidade de células tumorais, mas apresentando baixa toxicidade para células normais. As Prx 2-Cys são capazes de decompor hidroperóxidos utilizando um resíduo de cisteína (CysP) e sua a alta reatividade sobre diferentes tipos de hidroperóxido é alcançada por interações com os resíduos de Thr/Ser e Arg, absolutamente conservados entre as Prx 2-Cys. Em conjunto, CysP, Thr/Ser e Arg, recebem o nome de tríade catalítica (TC). As Prx 2-Cys típicas também estão presentes em bactérias e são denominadas de AhpCs, sendo consideradas como uma das frentes de defesa oxidativas fundamentais para o patógeno. Em projeto anterior, avaliamos os efeitos da presença do resíduo de Thr ou Ser na TC de duas Prx-2 Cys típicas de levedura sobre a atividade inibitória de Adn. Demonstramos então que Adn possui maior afinidade por enzimas contendo Ser na TC e que a presença da Ser nesta posição existe essencialmente em procariotos, sobretudo em bactérias. No presente estudo, dando continuidade a este trabalho, verificamos que AhpCs contendo uma Ser na TC são mais resistentes à superoxidação e apresentariam ainda uma atividade de holdase em situações de estresse térmico mais acentuada do que AhpCs contendo uma Thr nessa posição. Uma vez que o estresse oxidativo e térmico são barreiras impostas à infecção por bactérias pelo organismo hospedeiro, a inibição desse sistema de defesa poderia constituir uma estratégia de importância no combate a esses patógenos. Nesse sentido, avaliamos a capacidade inibitória de Adn sobre AhpCs e verificamos que Adn apresenta maior afinidade por AhpC de Escherichia coli (EcAhpC), independente da presença de Thr ou Ser na TC (EcAhpCWT e EcAhpCT44S) do que para as isoformas de humanos, apresentando um valor de IC50 ≈ 5 e 50 vezes inferior do que para PrxI e PrxII, respectivamente. Adicionalmente, observamos que Adn também inibiu a atividade de Trx de E. coli (EcTrx1) com maior eficiência que a Trx de humanos. Verificamos ainda que Adn mostrou-se tóxica para bactérias Gram-positivas, apresentando valores de IC50 na faixa de 110-140µM, e para Gram-negativa (E. coli) quando tratadas com polimixina B nonapeptídeo (PMBN). Uma vez que PMBN também apresenta atividade antibiótica, sua utilização em associação com Adn pode representar uma potencial nova terapia antimicrobiana. Adicionalmente, realizamos uma triagem de compostos naturais oriundos da biota florística do Estado de São Paulo e identificamos uma molécula capaz de inibir a atividade peroxidásica de EcAhpC com eficiência semelhante à Adn, além de inibir também EcTrx1 com menor eficiência. Este composto representa o primeiro inibidor de Prx da classe das lactonas sesquiterpênicas, além de ser também o primeiro inibidor proveniente da biodiversidade brasileira. Por fim caracterizamos uma nova tiól proteína de X. fastidiosa e demonstramos que ela é capaz de proteger as células bacterianas contra o cianeto e o estresse oxidativo gerado por H2O2. Coletivamente os resultados obtidos neste trabalho contribuem para a descoberta de novas abordagens de combate a bactérias patogênicas.
Densidade, tamanho e potencial extrativo do caranguejo-uçá (Ucides cordatus): uma análise integrativa, com foco na pesca e conservação
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2020-11-18) Matsunaga, Akeme Milena Ferreira; Pinheiro, Marcelo Antonio Amaro [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A utilização dos dados de densidade, estrutura e potencial extrativo do caranguejo-uçá consiste em imprescindível subsídio para o manejo da pesca. Portanto, a presente análise permite uma avaliação de uso e conservação do estoque pesqueiro em comento, coexistente à análise da densidade e tamanho do caranguejo-uçá em nível latitudinal, nível de inundação e sazonalidade; dos fatores abióticos e bióticos que influenciam a distribuição espacial de Ucides cordatus e do potencial extrativo deste recurso. Os resultados obtidos indicam um notório padrão que vem sendo mantido para esta espécie, mesmo com o passar dos anos, regido principalmente pelo nível de inundação promovido pelas marés, por ser fator primário e condicionador das demais variáveis que influenciam a densidade e estrutura da espécie. A espécie apresenta uma área de ocorrência (AO) associada a todo o sedimento, mas com densidade diferenciada, sendo menor em áreas de maior inundação (indivíduos reprodutivos) e maior nas reduzidas áreas de “apicum” (indivíduos juvenis), que são mais internas e de ocorrência diferencial na costa brasileira. Estudos acerca de potencial extrativo para utilizar como medidas de gestão constituem-se em uma ferramenta a mais na defesa e manutenção dos estoques pesqueiros concomitantemente de quem desse recurso detém sua sobrevivência. Assim, ficando evidente a preocupação com uso sustentável dos recursos pesqueiros aliados a obtenção de melhores resultados econômicos e sociais. Os resultados indicam que as margens de manguezal são mais indicadas para a extração sustentável deste recurso, enquanto os exemplares jovens utilizam as áreas de apicum para seu recrutamento, devendo, portanto, serem preservados para a manutenção dos estoques populacionais da espécie.
Conectividade entre ecossistemas terrestre, água doce e marinho via fluxo de matéria orgânica
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2020-11-18) Fortuna, Monique D'Assunção; Christofoletti, Ronaldo Adriano [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A conectividade ecológica entre ecossistemas é um processo dinâmico influenciado tanto por fatores físicos quanto fatores biológicos podendo afetar do indivíduo até a comunidade. O objetivo central da tese foi avaliar a influência de paisagens marinhas compostas por ecossistemas terrestre, de água doce e marinho no fluxo de matéria orgânica pela cadeia trófica. Primeiro foi investigado o tipo de via alimentar, pelágica ou bentônica, que promove a interação entre os ambientes. A interação foi avaliada pela variação de isótopos estáveis de δ13C e δ15N nas espécies de grupos funcionais. Foi observada a variação espacial e temporal dos organismos, sendo que os filtradores bivalves foram o grupo com maior interação entre os ambientes, especialmente com o ambiente terrestre. Esta interação não aumentou com a estação chuvosa, em que era esperado o maior consumo de fontes alimentares de origem terrestres pelos organismos, devido ao maior aporte desta fonte alimentar. A principal fonte alimentar para as espécies foram as macroalgas, independente da variação espacial das paisagens e temporal. Foi realizado um experimento complementar para avaliar o efeito da paisagem terrestre na variação isotópica de animais suspensívoros (mexilhões e cracas). Os animais foram transplantados de costões rochosos marinhos para outros costões com influência de aporte terrestre, e foi avaliada a alteração no perfil isotópico dos organismos. Além disso, cracas foram transplantadas para diferentes paisagens no limite superior e inferior do entremarés testando a importância da zonação vertical nos processos de conectividade entre paisagens. Os mexilhões refletiram a composição isotópica do novo habitat, com variação entre o tipo de paisagem, reforçando a interação entre os ecossistemas pelos filtradores. Não foi possível avaliar a influência da paisagem na alteração alimentar de C. bisinuatus devido ao efeito do aparato experimental. Por fim, foi investigado o efeito da interação entre os ambientes costeiro e marinho nos aspectos individuais de filtradores. Foi avaliado o investimento energético em crescimento e reprodução nos mexilhões em águas costeiras enriquecidas pelo sistema de ressurgência no Chile e no Brasil. Foi visto que a condição individual e o investimento em reprodução dependeram do local, e o crescimento da espécie de mexilhão chileno foi maior nas paisagens de ressurgência. Este efeito pode refletir em um melhor desempenho da população em determinados costões rochosos. Assim, os resultados dos estudos desenvolvidos nesta tese sugerem a interação entre os ambientes terrestre e marinho, com variação espaço temporal. Este estudo trouxe importantes avanços do conhecimento sobre o entendimento da influência em diferentes níveis: paisagem, zonação vertical e indivíduos, considerando aspectos de conectividade do ambiente e populacionais.
Influência de processos de planejamento espacial marinho sobre a governança da aquicultura
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2020-02-21) Miraldo, Marcel Câmara [UNESP]; de Freitas, Débora Martins [UNESP]; Valenti, Wagner Cotroni [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Zonas costeiras possuem grande diversidade de recursos e a disputa pelo uso destes recursos pode envolver atores locais e externos. O planejamento espacial eficiente destes territórios é essencial e, aliado ao desenvolvimento e melhoria do sistema de governança costeira são as principais ferramentas para que cada setor tenha seu espaço de atuação definido e que todos os atores possam participar do processo de planejamento de maneira informada e efetiva. No entanto, é essencial a identificação da ocorrência alguns problemas comuns, como representatividade reduzida, participação de atores sem conhecimentos técnicos relativos ao zoneamento costeiro e à realidade do local, a baixa interação com pesquisadores e falta de qualidade do monitoramento e reavaliação dos procedimentos empregados. A recente implantação de um processo de zoneamento da maricultura no Brasil, os Planos Locais de Desenvolvimento da Maricultura, teve como um de seus objetivos diminuir os diversos conflitos de uso de área entre a maricultura e outras atividades marinhas, como a pesca artesanal. Delimitar áreas específicas para a realização da atividade pode melhorar sua gestão e governança, beneficiando não apenas os produtores como também outros setores interessados na atividade. A partir da percepção dos produtores, os conflitos existentes foram avaliados como de baixa relevância. O principal problema decorrente do processo foi o aumento da dificuldade de acesso ao crédito. Para fortalecer a governança da maricultura em Penha deve-se melhorar a comunicação entre governo e produtores, incentivar a difusão de conhecimento técnico-científico, melhorar os sistemas de fiscalização, conciliar os conflitos internos dos produtores e aumentar a participação dos órgãos de pesquisa e extensão. Portanto, processos de Planejamento Espacial Marinho e governança participativa podem ser efetivos, mesmo com falhas recorrentes em diferentes regiões. Incentivar a maior participação das comunidades locais e órgãos de pesquisa e extensão nestas ações pode auxiliar a aumentar a aceitação destes processos tanto pelas partes interessadas como pelo público em geral.
Subsídios para gestão ambiental dos impactos das tintas anti-incrustantes no brasil
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2019-10-30) Rojas, Erika Guisande; Junior, Teodoro Vaske; Fernandez, Marcos Antônio dos Santos; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A utilização de tintas anti-incrustantes é mandatória para embarcações e outras estruturas submersas na água do mar. Existem diversas vantagens em utilizar estas tintas como ganho em tempo e em velocidade de operações, e menor gasto de combustível, pois a bioincrustação aumenta a rugosidade da superfície e diminui a hidrodinâmica das embarcações. Em geral, a maioria destas tintas contém biocidas que evitam que os organismos incrustantes consigam se estabelecer sobre a superfície das embarcações. Esses biocidas por sua vez, acabam por serem liberados das pinturas provocando danos aos ecossistemas, como, por exemplo, o imposex, que é a masculinização de fêmeas de moluscos gastrópodes, um problema de disrupção endócrina causada pelo tributilestanho (TBT). Novos biocidas surgiram no mercado global após o banimento do TBT como alternativas menos danosas, porém muitos estudos comprovam efeitos prejudiciais a biodiversidade aquática, principalmente quando combinados. No Brasil, as regulamentações ambientais que dizem respeito às tintas anti-incrustantes são a Norman 23 da Marinha do Brasil, que estabelece as diretrizes para os sistemas anti-incrustantes, e a Resolução Conama 357, que estabelece os padrões de qualidade de águas. Esses dois documentos estão relacionados apenas ao uso do TBT, que foi banido em 2008. Em relação aos novos biocidas não existe nada neste aspecto, embora a Normam 23 tenha opção de incluir outros biocidas, caso necessário. O presente estudo tem por objetivo uma avaliação da possível vulnerabilidade da biodiversidade dos ecossistemas marinhos e costeiros para as novas tintas anti-incrustantes, dentro das opções atualmente oferecidas no mercado. Para alcançar este objetivo foi utilizada uma metodologia inovadora elaborada em três etapas:1) Análise de legislação: Compilação e análise dos instrumentos regulatórios e normativos para as tintas anti-incrustantes de outras regiões do mundo: Europa, Estados Unidos, Canadá, Nova Zelândia, Austrália, Japão e China somados e comparados à legislação do Brasil. 2) Pesquisa de mercado: Nos principais websites de fabricantes e de venda de tintas anti-incrustantes em escala global, com a finalidade de identificar lacunas no sistema e conhecer as principais tintas que estão sendo comercializadas no Brasil e no mundo. Através do levantamento desses dados, foram encontradas e minunciosamente analisadas as folhas de segurança (MSDS), e identificadas a composição, através do número CAS de cada substância; e as informações ecológicas de cada tinta. Os resultados do projeto forneceram um panorama realístico e atual sobre o que está sendo comercializado no mundo e sugere o que está em uso. 3) A última etapa é uma contextualização das outras duas e contém uma proposta com diretrizes, visando a proteção ambiental da biodiversidade dos ecossistemas marinhos e costeiros no Brasil.
Avaliação da concentração de metais no caranguejo-uçá (Ucides cordatus) na costa amazônica brasileira: Implicações para conservação ambiental e saúde pública
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2019-07-18) Freitas, Ádria de Carvalho; Pinheiro, Marcelo Antonio Amaro; Fernandes, Marcus Emanuel Barroncas; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Na região Amazônica muitas áreas de manguezal ainda se encontram conservadas. Entretanto, atividades antrópicas de degradação e contaminação, especialmente por metais, começam a alcançar escalas preocupantes, podendo afetar esse ecossistema e seus recursos. O objetivo do presente estudo foi avaliar a contaminação e bioacumulação de metais (Cu, Cd, Cr, Pb e Mn) pelo caranguejo-uçá (Ucides cordatus) e o risco potencial para a saúde humana pela ingestão desse crustáceo, considerado um recurso pesqueiro de grande importância na região amazônica. Amostras de espécimes de U. cordatus, água, sedimento, e folhas de Rhizophora mangle foram coletadas em áreas de manguezais, sendo uma conservada e outra antropizada para ambos os estados do Pará e Maranhão. As concentrações metálicas nas amostras bióticas e abióticas foram quantificadas por Espectrometria de Emissão Óptica por Plasma Acoplado Indutivamente (ICP-OES), com posterior estimativa do Fator de Bioacumulação e de análises multinível para os metais avaliados. Para avaliação do risco de consumo humano foram estimados o consumo diário (EDI), o quociente de risco (THQ) e o número de refeições elegíveis por mês (CRmm). As concentrações de metais no sedimento estavam abaixo dos níveis estabelecidos pela legislação, diferindo do observado para as amostras de água, onde Cu, Mn e Pb, cujos valores estavam acima dos limites estabelecidos para águas estuarinas. Mesmo sendo em sua maioria de origem natural, observou-se que esses elementos estão biodisponíveis e estão sendo incorporados pela biota. As concentrações de Cu, Cr e Pb estiveram acima dos limites estabelecidos para consumo na carne e brânquias do caranguejo-uçá. Dependendo do nível de exposição da população local, o consumo de U. cordatus, pode representar um risco para a saúde humana, especialmente no caso de crianças abaixo de 12 anos. Os maiores THQs foram estimados para o consumo simultâneo de todas as estruturas avaliadas. O cobre foi categorizado pelo menor número de refeições seguras de caranguejos por mês. Assim, conclui-se que a exposição da população amazônica aos caranguejos contaminados com metais deve ser considerada em estudos ambientais e de saúde pública pelo possível risco de efeitos sistêmicos.
Caracterização funcional, estrutural e modificação racional da ASNaseM: Um novo fármaco para o tratamento da Leucemia Linfoide Aguda?
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2019-04-10) Schultz, Leonardo [UNESP]; Oliveira, Marcos Antônio de [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
L-asparaginases (ASNases) bacterianas são importantes biofármacos utilizados no tratamento de leucemia linfoide aguda (LLA), uma vez que este tipo tumoral é dependente da disponibilidade de asparagina (Asn) extracelular. As ASNases bacterianas são capazes de hidrolisar eficientemente Asn em ácido aspártico (Asp) e amônia (NH3), diminuindo a disponibilidade de Asn para células tumorais e induzindo apoptose. Comercialmente, indústrias farmacêuticas internacionais produzem ASNases de Escherichia coli e Erwinia chrysanthemi, entretanto, ASNase de nenhuma origem é produzida pelas indústrias farmacêuticas brasileiras. Adicionalmente, o tratamento com estas enzimas produz efeitos colaterais, entre eles imunogênicos, que estão relacionados com a alta massa molecular da enzima (140kDa) e neurológicos, atribuídos a atividade secundária de glutaminase (GLNase). Neste contexto, fontes alternativas destas enzimas e também a auto-suficiência em suas produções são importantes para mitigar os efeitos colaterais e evitar falhas no tratamento devido a flutuações internacionais de sua fabricação. Neste trabalho, realizamos a caracterização de uma ASNase de levedura, denominada de ASNaseM que compartilha elevada homologia (maior que 30% de identidade e 40% de similaridade) com as enzimas bacterianas utilizadas no tratamento da LLA e que possui todos os aminoácidos envolvidos na catálise conservados, sugerindo uma fonte alternativa potencial para o tratamento da LLA. Experimentos de cromatografia de exclusão molecular revelaram uma enzima com tempo de retenção referente a um monômero (~45 kDa), e através de espectroscopia de dicroísmo circular, foi possível observar que ASNaseM é termorresistente, mantendo sua estrutura secundária em temperaturas maiores que 40ºC, apresentando Tm = 54,35 ± 0,37°C, o que pode ser resultado das 4 pontes de dissulfetos formados por 8 de 10 cisteínas, como observado pelo ensaio de quantificação de grupos sulfidrilas livres utilizando o reagente DTNB. Os parâmetros cinéticos foram determinados por ensaio espectrofotométrico acoplado a glutamato desidrogenase e a enzima apresentou comportamento alostérico com coeficiente de Hill = 2,125 e S0.5 ~ 0,35 mM e a eficiência catalítica foi na ordem de 101 M-1s-1 e atividade específica de aproximadamente 108 UI/mg. Adicionalmente, uma característica que está relacionada com diversos efeitos colaterais, observada nas enzimas comerciais, que é a atividade secundária de GLNase, não foi detectada para ASNaseM. Através de ensaios de citotoxicidade utilizando as linhagens ReH e Molt-4 (células neoplásicas), foi possível detectar atividade citotóxica. Também foram realizadas mutações sítio dirigidas visando conferir à ASNaseM a atividade de GLNase. Também buscamos o ganho de atividade de GLNase por meio de substituições pontuais de amnioacidos que conferem ou abolem em bactérias esta atividade, entretanto, nossos resultados revelaram que as enzimas mutadas não apresentaram ganho de atividade de GLNase, o que indica que apesar das semelhanças existentes com as enzimas bacterianas, o ganho de atividade de GLNase é um fenômeno complexo e necessita de investigações adicionais. Também realizamos análises in silico de sequências primárias de ASNases, em conjunto com a avaliação de estruturas tridimensionais, para ampliar o conhecimento de aspectos evolutivos destas enzimas e propor uma classificação criteriosa de ASNases. Os resultados da análise revelam que a ASNase de levedura, se posiciona evolutivamente distinta de outras enzimas e também auxiliaram na identificação de ASNases que podem possuir propriedades importantes como biofármacos alternativos apresentando alta atividade de ASNase ou ausência de atividade de GLNase.
Efeitos das mudanças climáticas na fisiologia, comportamento e distribuição de caranguejos chama-maré
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2019-01-18) Vianna, Brunna da Silva; Costa, Tânia Marcia; Augusto, Alessandra da Silva; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Organismos do entremarés são frequentemente expostos a temperaturas extremas e as alterações climáticas podem trazer consequências negativas para estes organismos. Neste trabalho, avaliamos os efeitos do aumento da temperatura e redução do pH nas respostas fisiológicas e comportamentais de caranguejos chama-maré. Leptuca uruguayensis e Leptuca leptodactyla ocorrem tipicamente em habitat vegetado e não-vegetado de regiões estuarinas, apesar de coabitarem diversas áreas dos ecossistemas do entremarés. Realizamos experimentos para obtenção das respostas fisiológicas e comportamentais de ambas espécies ao aumento da temperatura. Minuca mordax foi exposta ao aquecimento e redução do pH da água para avaliação das respostas fisiológicas. Também estimamos a futura distribuição de M. mordax em cenários de mudanças climáticas. As duas espécies de Leptuca apresentaram diferenças nas adaptações fisiológicas (em relação ao consumo de oxigênio) e nos mecanismos de termorregulação, em consonância com a seleção de habitat e distribuição geográfica de cada espécie. Leptuca uruguayensis selecionou micro-habitat com temperatura inferior enquanto L. leptodactyla estava em um substrato com maior temperatura, mas apresentou características conhecidas por promoverem a dissipação de calor e reduzirem a taxa de desidratação, como tamanho e quelípodo maiores e coloração clara. As atividades comportamentais na superfície também foram afetadas pela elevação da temperatura, aumentando o tempo dentro da toca e reduzindo a taxa de alimentação, o que possivelmente alterou a excreção da amônia e índice hepatossomático. O comportamento de “waving display” não foi afetado pela temperatura, sugerindo relação com outros fatores como presença de fêmeas e competidores. O aumento da temperatura e redução do pH causaram alterações nas respostas fisiológicas (consumo de oxigênio, excreção de amônia, índice hepatossomático e osmorregulação) de Minuca mordax, efeitos agravados pela exposição combinada destes dois fatores. A distribuição dos caranguejos chama-maré poderá se expandir para maiores latitudes enquanto que temperaturas extremas poderão comprometer a sobrevivência dos organismos do entremarés em habitats nas baixas latitudes. A longo prazo, a exposição às altas temperaturas poderá resultar num suprimento energético ineficiente e comprometer funções fisiológicas, comportamentais, bem como as interações sociais. Por fim, as mudanças climáticas podem impactar negativamente a fisiologia, o comportamento e a distribuição dos caranguejos chama-maré em ambientes do entremarés.

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