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dc.contributor.advisorToledo, Karina Alves de [UNESP]
dc.contributor.authorSouza, Priscila Silva Sampaio de [UNESP]
dc.date.accessioned2017-04-12T18:13:33Z
dc.date.available2017-04-12T18:13:33Z
dc.date.issued2017-03-03
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11449/150156
dc.description.abstractO Vírus Sincicial Respiratório Humano (hRSV) atua como um dos principais agentes etiológicos das mais de 15 milhões de infecções do trato respiratório inferior em crianças e idosos anualmente. A despeito de décadas de inúmeras pesquisas em busca de compostos anti-hRSV, atualmente não existem vacinas ou medicamentos eficazes contra esta infecção viral. Dentre os leucócitos presentes nas vias aéreas de indivíduos acometidos por hRSV, os neutrófilos são predominantes e se mostram em estado de ativação, incluindo a indução da liberação das NETs. As NETs, compostas por DNA e proteínas granulares/nucleares tem sido descritas como eficientes na captura e eliminação de diversos microrganismos. Em relação ao hRSV, o vírus induz a liberação das NETs no tecido pulmonar de indivíduos infectados, mas as consequências desse evento ainda não foram elucidadas. O objetivo deste trabalho foi investigar se as NETs possuem algum efeito anti-hRSV. Para tanto, foram realizados ensaios in vitro e in silico. NETs geradas a partir do estímulo com PMA e avaliadas por eletroforese apresentaram longos fragmentos de DNA e proteínas de peso molecular próximos daqueles determinados para elastase, catepsina G, mieloperoxidase e histonas. As NETs apresentaram índices de citotoxicidade celular abaixo de 50%, com uma CC50 >67μg/mL. Ensaio virucida realizado com diferentes MOIs (0.1, 0.5 e 1.0), mostraram eficiência das NETs (CE50 ≅ 1 e IS ≅ 66). As interações obtidas in silico demonstram forte interação entre as proteínas elastase e histonas com a proteína F-hRSV, pré e pós-fusão, em regiões importantes para a infecção/replicação do vírus. Os dados obtidos indicam que as NETs tem um promissor papel antiviral e este efeito pode estar relacionado à sua ação direta na captura de partículas virais e/ou na interferência da atividade de fusão da proteína F. Em conclusão, nossos resultados associados a dados prévios da literatura, apontam que o contato do hRSV com os neutrófilos induz a liberação das NETs e que estas agem na neutralização do vírus.pt
dc.description.abstractAnnualy the Human Respiratory Syncytial Virus (hRSV) acts as one of the main etiological agents of more than 15 million infections in the lower respiratory tract of children and elderly. Despite decades of extensive research in search of anti-hRSV compounds, there are currently no vaccines or effective drugs against this viral infection. Among the present leukocytes in the airways of individuals affected by hRSV, the neutrophils are predominant and are shown in activation state, including the induction of the release of NETs. NETs, composed by DNA and glanular/nuclear proteins have been described as efficient in capturing and eliminating several microorganisms. Regarding hRSV, the virus induces the release of NETs in the lung tissue of infected individuals, but the consequences of this event have not yet been elucidated. The goal of this study was to investigate whether the NETs have some anti-hRSV effect. For that purpose, assays were performed in vitro and in silico. NETs generated from the stimulation with PMA and evaluated by electrophoresis showed long DNA fragments and proteins of molecular weight close to those determined for elastase, cathepsin G, myeloperoxidase, and histones. The NETs presented cellular cytotoxicity indices below 50%, with CC50 >67μg/mL. Virucide assay performed with different MOIs (0.1, 0.5 and 1.0), showed efficiency of the NETs (CE50 ≅ 1 and IS ≅ 66). The interactions obtained in silico demonstrate strong interaction between elastase and histone proteins with the F-hRSV protein, pre and postfusion, in important regions for the infection/replication of the virus. The data obtained up to date indicate that the NETs have a promising antiviral role and this effect may be related to its direct action in the capture of viral particles and/or interference of the fusion activity of F protein. In conclusion, our results associated with previous literature data, indicate that the contact of the hRSV with neutrophils induces the release of NETs and that these act in the neutralization of the virus.en
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Estadual Paulista (UNESP)
dc.subjectRedes extracelulares dos neutrófilospt
dc.subjectVírus sincicial respiratóriopt
dc.subjectDocking molecularpt
dc.subjectAntiviraispt
dc.subjectNeutrophil exatracellular trapsen
dc.subjectRespiratory syncytial virusen
dc.subjectAntiviralsen
dc.subjectMolecular dockingen
dc.titleRedes Extracelulares de Neutrófilos (NETs) possuem promissora atividade anti-hRSV através de sua interação com a proteína F viralpt
dc.title.alternativeNeutrophil Extracellular Traps (NETs) have promising anti-hRSV activity through their interaction with viral F proteinen
dc.typeDissertação de mestrado
dc.contributor.institutionUniversidade Estadual Paulista (UNESP)
dc.rights.accessRightsAcesso aberto
unesp.graduateProgramMicrobiologia - IBILCEpt
unesp.knowledgeAreaOutrapt
unesp.researchAreaVirologia
unesp.campusUniversidade Estadual Paulista (UNESP), Instituto de Biociências Letras e Ciências Exatas, São José do Rio Pretopt
unesp.embargo24 meses após a data da defesapt
dc.identifier.aleph000883922
dc.identifier.file5772565774304020
dc.identifier.capes33004153074P9
dc.identifier.lattes5772565774304020
dc.identifier.orcid0000-0001-7212-6794
unesp.author.lattes5772565774304020[6]
unesp.author.orcid0000-0001-7212-6794
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