Dissertações - Patologia - FMB

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    Disfunção mitocondrial, mutagenicidade e genotoxicidade como possíveis mecanismos de ação do Diuron e seus metabólitos (DCA e DCPMU) em Zebrafish
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-08-29) Peixoto, Paloma Vitória Lima [UNESP]; Camargo, João Lauro Viana de; Pereira, Lilian Cristina [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A aplicação de praguicidas na agricultura tem sido associada a contaminações ambientais e riscos para a saúde humana. Nesse contexto, o herbicida Diuron (3-(3,4-Diclorofenil)-1,1-dimetilureia) é o quinto mais utilizado no Brasil e tem gerado preocupação devido à sua persistência em águas e solos, bem como sua degradação, que resulta em metabólitos potencialmente tóxicos, como a 3-(3,4-diclorofenil)-1-metilureia (DCPMU) e a 3,4-dicloroanilina (DCA). A avaliação toxicológica utilizando o organismo-modelo Zebrafish (Danio rerio) é relevante devido à semelhança e conservação do metabolismo de xenobióticos e do material genético, sendo aproximadamente 70% similar ao dos humanos. O objetivo deste estudo foi analisar as alterações na função mitocondrial e os potenciais efeitos mutagênicos e genotóxicos do Diuron, DCA e DCPMU em Zebrafish em concentrações ambientalmente relevantes (0,5-100 µmol/L) . O ensaio de Consumo Mitocondrial de Oxigênio (OCR) em embriões (24 hpf) utilizando o Respirômetro de Alta Resolução permitiu compreender a toxicidade mitocondrial in vivo. Por outro lado, o potencial genotóxico foi avaliado no estágio embrio-larval (96 hpf) por meio do Ensaio do Cometa, enquanto a determinação da mutagenicidade em peixes adultos foi realizada utilizando o Teste do Micronúcleo (MN) e a avaliação de Anormalidades Nucleares (AN) em eritrócitos. Os resultados demonstraram que a exposição imediata aos compostos não causou alterações no OCR. O Diuron causou danos primários ao DNA em todas as concentrações testadas e AN a partir de 10,0 µmol/L. O DCA apresentou genotoxicidade (0,5-5,0 µmol/L) e causou pleomorfismo nuclear (AN) (5,0-10,0 µmol/L). O DCPMU causou danos ao DNA em todas as concentrações testadas e AN em 1,0-10,0 µmol/L. Este estudo evidenciou que os compostos são genotóxicos, mas não mutagênicos em exposições agudas, uma vez que não foi identificado aumento na frequência de MN. Espera-se que esses resultados possam contribuir para a compreensão dos mecanismos de ação do herbicida e seus metabólitos, subsidiando a elaboração de regulamentações que promovam o uso seguro do Diuron.
  • ItemDissertação de mestrado
    Diversidade genética do gene MICA em populações mundiais
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-07-27) Ciriaco, Viviane Aparecida de Oliveira; Castelli, Erick da Cruz [UNESP]; Castro, Camila Ferreira Bannwart [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O gene MICA codifica glicoproteínas expressas em situações de estresse celular, como no caso de infecções, câncer e estresse oxidativo. Quando MICA é expresso na membrana, a molécula interage com o receptor ativador NKG2D presente na superfície de células Natural Killer (NK), linfócitos Tαβ CD8 e linfócitos Tγδ, levando a morte das células-alvo. Porém, essa proteína pode ser liberada na forma solúvel, quando isso acontece, ela interage com o mesmo receptor ativador NKG2D, mas leva a regulação negativa das células NK. O gene MICA é altamente polimórfico, com mais 531 alelos descritos até o momento, alguns desses polimorfismos apresentam impacto funcional descritos. MICA também pode estar ausente em alguns indivíduos, devido a uma deleção de 100pb que acontece entre os genes HLA-B e MICB, deletando toda a região de MICA, dessa forma, não há produção da molécula de MICA. Assim, este trabalho utilizou um pipeline de bioinformática utilizando o hla-mapper para trabalhar com os polimorfismos dos genes MICA e criamos uma estratégia específica para analisar a deleção do gene. Analisamos a diversidade de MICA em mais de 5.000 amostras de populações do mundo todo, incluindo amostras brasileiras, população altamente miscigenada. Encontramos MICA*del em todas as populações analisadas, exceto na Oceania, com maior frequência na população asiática e americana, especialmente em amostras com ancestralidade nativo americanas. A maioria das amostras com a deleção de MICA, são heterozigotas e apresentam ao menos uma cópia funcional da molécula de MIC, porém encontramos duas amostras com a deleção completa de MICA e MICB nulo, sugerindo que outros mecanismos devem compensar a ausência das moléculas MIC.
  • ItemDissertação de mestrado
    Avaliação do potencial reparador de matriz de quitosana associada a óxido de grafeno funcionalizado com FGF2: aplicações no tratamento da mucosite oral
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-04-26) Santos, Florença Sayuri Mikawa dos; Nogueira, Maria Renata Sales [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A mucosite oral é um efeito colateral grave no tratamento do câncer que afeta a qualidade de vida dos pacientes. A prevenção e o tratamento eficazes dessa condição são urgentemente necessários, pois as abordagens atuais são apenas paliativas. Nesse sentido, os biopolímeros de quitosana e o óxido de grafeno estão sendo estudados como possíveis terapias. O objetivo deste estudo foi desenvolver e caracterizar compostos bioativos feitos de quitosana associada ao óxido de grafeno e FGF2, a fim de contribuir com o tratamento da mucosite oral em pacientes oncológicos. Foram produzidos hidrogéis e membranas bioadesivas, combinados em grupos: Quitosana (CH); Quitosana com FGF2 (CH/FGF); Quitosana com óxido de grafeno (CH/GO); Quitosana com óxido de grafeno e FGF2 (CH/GO/FGF); Controle (CTRL); Controle com FGF2 (CTRL/FGF). Os biomateriais foram avaliados em períodos de 0, 24, 48, 72 e 96 horas. Os hidrogéis foram avaliados em testes físico-químicos de centrifugação e características organolépticas. As membranas foram avaliadas em testes de espessura, porosidade, absorção de líquidos e degradação de massa. Os biomateriais também foram avaliados quanto as respectivas propriedades antimicrobianas. Os resultados indicaram que os hidrogéis permitiram a formação de halos de inibição para Escherichia coli e Staphylococcus aureus e Candida albicans. As membranas apresentaram somente capacidade de inibição por contato, nas áreas subjacentes de disco-difusão. A biocompatibilidade e capacidade de promover migração celular dos biomateriais, foi investigada em fibroblastos NIH/3T3. A comparação entre os grupos mostrou diferenças estatisticamente significantes a partir de 48 horas nas membranas CH/GO e CH/GO/FGF, onde as áreas de fenda foram menores do que o grupo CTRL (p = 0,047; 0,030). Após 72 horas, todos os grupos de membranas (CH, CH/FGF, CH/GO e CH/GO/FGF) promoveram redução significativa das fendas, em comparação a CTRL (p = 0,003; 0,005; 0,004; 0,001) e CTRL/FGF (p = 0,019; 0,035; 0,022; 0,010). Após 96 horas, todos as membranas também demonstraram fendas reduzidas em relação aos controles, CTRL (p = 0,003; 0,002; 0,004; 0,004) e CTRL/FGF (p = 0,016; 0,012; 0,020; 0,020). Os resultados da avaliação de citotoxicidade, pelo ensaio MTT, mostraram que a maioria das preparações de hidrogel e membrana de quitosana apresentou viabilidade celular acima do limite de citotoxicidade. Alguns grupos de hidrogel, no entanto, demonstraram médias abaixo de 70%, indicando um possível efeito citotóxico desses materiais sobre os fibroblastos. Nossos resultados permitiram concluir que os compostos bioativos produzidos com quitosana, óxido de grafeno e FGF2 têm potencial terapêutico para tratar lesões de mucosite oral e, prospectivamente, outros tipos de úlceras cutâneas e mucosas. Vale destacar que as membranas de quitosana com óxido de grafeno e FGF2, apresentaram melhor desempenho físico-químico do que as preparações em hidrogel, além de serem menos citotóxicas e mais eficazes na promoção da migração celular.
  • ItemDissertação de mestrado
    Efeito da clofazimina sobre a mielinização de nervos isquiáticos em modelo murino de lesão neural traumática e infecção por Mycobacterium leprae
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-03-16) Gonçalves, Graziela Aparecida Silva; Nogueira, Maria Renata Sales [UNESP]; Nascimento, Dejair Caitano do; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A hanseníase é uma neuropatia periférica infecciosa, causada por Mycobacterium leprae (M. leprae), que acomete predominantemente seres humanos e pode gerar incapacidades físicas irreversíveis. A característica de cronicidade dessa infecção, limita o entendimento sobre mecanismos precoces de interação patógeno-hospedeiro. Sabe-se que, a sobrevivência intracelular de M. leprae depende de alterações no metabolismo lipídico das células de Schwann e macrófagos. Tais alterações metabólicas, podem estar entre os fatores de interferência na remielinização dos nos nervos periféricos de pacientes com hanseníase. A biogênese de lipídios também pode ser afetada por um dos quimioterápicos utilizados no tratamento da hanseníase, a clofazimina (CFZ). Considerando que, lipídios são extremamente demandados durante a mielinização, cabe questionar se a CFZ poderia impactar negativamente a regeneração dos nervos periféricos. Os modelos animais no estudo da hanseníase costumam se concentrar em longas janelas tempo, restringindo observações precoces sobre alterações maquinaria celular frente à infecção por M. leprae. O objetivo primário do presente estudo foi, portanto, comparar dois modelos murinos de lesão do nervo isquiático, via trauma por esmagamento e inoculação intraneural com M. leprae, ao longo de 03, 14, 28 e 90 dias. Propôs-se ainda, investigar o impacto da infeção neural por M. leprae e do tratamento com CFZ, sobre a expressão gênica e de proteínas envolvidas na homeostasia lipídica e de mielina, pela técnica de imunofluorescência. Para tanto, foram utilizados camundongos nude atímicos (NU-Foxn1nu), divididos em cinco grupos e duplicados quanto ao tratamento ou não com CFZ (N = 03/grupo): CSH (lesão por esmagamento); ML (infectado por M. leprae); ML/CSH (infecção e esmagamento); NaCl (veículo cloreto de sódio); SHAM (cirurgia simulada). A função motora de cada animal foi avaliada por teste de marcha, empregando-se índice funcional do isquiático. A função nociceptiva foi investigada por estimulação mecânica, via analgesímetro eletrônico Von Frey. Os dados de SFI indicaram lesão neural em 03 dias, exceto nos animais do grupo SHAM. Os grupos mais afetados foram aqueles submetidos ao modelo de esmagamento, acompanhado ou não de infecção, seguido por reparação tecidual ao longo de 28 dias. A análise de nocicepção à estimulação mecânica também mostrou melhora após 28 dias, e recuperação em 90 dias. No entanto, o grupo infectado por M. leprae, sem tratamento, apresentou limiar inferior a quase todos os grupos no período experimental mais tardio, sugerindo a presença de dor associada a processos inflamatórios decorrentes da infecção. A imunodetecção de ADRP foi aumentada em camundongos infectados por M. leprae, quando comparado a todos os demais grupos. HSL esteve elevada após 28 dias de administração da droga, nos grupos ML_cfz e ML/CSH_cfz. A produção de MPZ se apresentou diminuída em nervos ciáticos infectados, tratados com CFZ, em 90 dpi. Os resultados desse estudo indicam que, o modelo animal aqui apresentado pode contribuir para a compreensão de fatores precoces associados à neuropatia hansênica. O aumento de ADRP em momentos iniciais de infecção in vivo por M. leprae, corrobora achados prévios e destaca a precocidade da ação desse patógeno sobre produção lipídica de células-alvo no microambiente neural. O efeito negativo da CFZ sobre a regulação de MPZ pode sugerir uma interferência na remielinização periférica e deve ser alvo de investigações futuras.
  • ItemDissertação de mestrado
    Papéis da conexina 43 e panexina 1 durante o processo de carcinogênese do cólon
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-04-28) Santo, Sara Gomes Espírito; Romualdo, Guilherme Ribeiro; Barbisan, Luis Fernando [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O Câncer Colorretal (CCR) é o quarto tipo de câncer mais incidente e terceiro mais letal no mundo. Sua etiologia é multifatorial, predominantemente esporádica e está associada ao estilo de vida do paciente. O início dessa doença é morfologicamente caracterizado pelo desenvolvimento de lesões pré-neoplásicas: focos de criptas aberrantes (FCA), que evoluem para adenomas e posteriormente para o CCR. A Conexina 43 (Cx43) e a Panexina 1 (Panx1) são proteínas formadoras de hemicanais envolvidos em diferentes funções biológicas, além de ambas poderem atuar estimulando ou inibindo a carcinogênese, conforme o tipo e estágio do câncer. No entanto, pouco se sabe sobre a ação dessas proteínas no CCR, onde suas funções ainda devem ser compreendidas. Portanto, este trabalho avaliou o papel da Cx43 e da Panx1 sob os estágios iniciais da carcinogênese colorretal. Para tanto, fêmeas de camundongos da linhagem C57BL/6J heterozigotos para Cx43+/- , knockout (KO) para Panx1-/- ou wild type, foram submetidas a um modelo de carcinogênese colorretal quimicamente induzida por seis aplicações intraperitoneais de 1,2-dimetilhidrazina (DMH, 20 mg/kg). Os animais foram eutanasiados oito horas (semana 7) ou 30 semanas (semana 37) após a última aplicação de DMH, tempo estipulado para avaliar a toxicidade colônica subaguda e o desenvolvimento de lesões (pré)neoplásicas, respectivamente. Na semana 7, a deficiência em Cx43 não promoveu alterações colônicas pelos efeitos deletérios induzidos pela DMH, enquanto que o KO para Panx1 aumentou a genotoxicidade em sangue periférico, os níveis de malondialdeído no cólon e a apoptose nas criptas colônicas. Na semana 37, os camundongos Cx43+/- apresentaram um aumento na multiplicidade de FCA, mas nenhuma alteração foi observada quanto a incidência, multiplicidade, volume, proliferação, crescimento e na imunoexpressão da β-catenina em adenomas colorretais. Já os animais Panx1-/- apresentaram aumento no número médio de criptas aberrantes (CA), FCA e na multiplicidade de CA/FCA. Similar aos resultados encontrados, a avaliação in silico de adenomas humanos não revelou correlação da expressão da Cx43 com marcadores de proliferação, apoptose e β-catenina. Os resultados indicam um papel discreto da Cx43 e um possível papel protetivo da Panx1 nos estágios iniciais da carcinogênese colorretal quimicamente induzida em camundongos.
  • ItemDissertação de mestrado
    Comparação das características nucleares da neoplasia tireoidiana folicular não invasiva com características nucleares do tipo carcinoma papilífero, do carcinoma papilífero de tireoide subtipo folicular e do carcinoma folicular através da análise digital de imagens em amostra citológica.
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-04-12) Yamamoto, Fabio Massahito; Xavier Júnior, José Cândido Caldeira; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    INTRODUÇÃO: Neoplasia tireoidiana folicular não invasiva com características nucleares do tipo carcinoma papilífero (NIFTP) é um diagnóstico histológico. Além disso, existe grande sobreposição dos resultados na citologia de NIFTP, carcinoma papilífero de tireoide subtipo folicular (CPTSF) e carcinoma folicular (CF). Nos dias de hoje, não há substratos morfológicos para diferenciar essas entidades no exame citológico e assim, levantamos a hipótese, se a análise computadorizada das imagens nucleares, através da patologia digital, poderia auxiliar nessa diferenciação. OBJETIVO: Comparar material citológico de NIFTP e seus principais diagnósticos diferenciais, CPTSF e CF quanto aos parâmetros morfométricos e morfológicos nucleares através de técnica de análise digital de imagens, a fim de fortalecer a identificação de NIFTP ainda no pré-operatório. MÉTODOS: Estudo observacional analítico e retrospectivo que avaliou variáveis morfométricas nucleares do material citológico de nódulos tireoidianos, do período de 2017 a 2021, classificados histologicamente como CPTSF, NIFTP e CF no Instituto de Patologia de Araçatuba (IPAT), São Paulo, Brasil. Analisou-se cinco casos de cada entidade e dois citopatologistas revisaram todos os casos de acordo com o Sistema Bethesda. Informações clínicas como sexo, idade, tamanho do tumor e localização (lobo esquerdo, lobo direito, istmo) foram coletadas do relatório da punção aspirativa por agulha fina (PAAF). Imagens citológicas foram fotografadas e 1170 células de cada entidade foram analisadas digitalmente usando o software ImageJ, por análise cega. Um traçado manual e cuidadoso dos limites de cada núcleo na imagem fotografada foi realizado usando uma ferramenta de desenho para extração de dados. A avaliação morfométrica incluía área, perímetro, largura, altura e circularidade. Variáveis numéricas foram descritas pela média, mediana e seu mínimo e máximo (mín.; máx.). Kruskal-Wallis e teste de Dunn foram utilizados e as diferenças foram consideradas estatisticamente significativas se p < 0.05. RESULTADOS: Em todas as categorias, estavam distribuídos 4 mulheres e 1 homem. Entre os casos de CPTSF, a idade mediana foi de 48 anos. Quatro casos foram classificados como suspeitos para malignidade e um como maligno de acordo com o Sistema Bethesda. Todos os casos foram estadiados como pT1b pN0, com mediana do tamanho do nódulo de 1.3cm. Entre os casos de NIFTP, a mediana da idade foi de 40 anos. Todos os casos foram classificados como suspeitos para malignidade e a mediana do tamanho do nódulo foi de 1.5cm. Entre o CF, a mediana da idade foi de 45 anos, três casos foram classificados como suspeitos para neoplasia folicular/suspeito para neoplasia folicular, um caso suspeito para malignidade e um caso como atipia de significado indeterminado/neoplasia folicular de significado indeterminado. Nas três categorias analisadas, o tamanho do tumor foi diferente entre os grupos, sendo maior no grupo do CF (CPTSF: média: 1.4 cm vs. NIFTP: 1.54 cm vs. CF: 5.66 cm; p = 0.009). Em relação a análise nuclear, todas as variáveis tiveram diferença entre os grupos (p < 0.001), inferindo dessa forma, pelas variáveis serem interdependentes que o tamanho nuclear foi maior no grupo da NIFTP, que por sua vez foi maior que no grupo do CF. (NIFTP > CF > CPTSF). Quando avaliou-se dois grupos entre si, apenas a circularidade nuclear não foi diferente entre NIFTP e CF (p = 0.152). DISCUSSÃO/CONCLUSÃO: Comparativamente, a análise das imagens digitais com ênfase nos parâmetros nucleares foi diferente quanto ao tamanho entre NIFTP, CPTSF e CF em amostra citológica. Dessa forma, este instrumento tem potencial em acrescentar informações que possam auxiliar no diagnóstico dessas entidades ainda no pré-operatório. Sendo assim, mais estudos são necessários para criação de protocolos para estimular a aplicabilidade dos parâmetros morfológicos e morfométricos nucleares com enfoque na patologia digital para utilização de algoritmos e ferramentas que auxiliem na rotina diagnóstica do citopatologista.
  • ItemDissertação de mestrado
    Malformações arteriovenosas cerebrais não rotas: revisão sistemática e metanálise de morbimortalidade nos estudos ARUBA- elegíveis.
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-10-07) Pinheiro, Leon Cleres Penido; Rodrigues, Maria Aparecida Marchesan [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Malformações arteriovenosas (MAVs) são lesões vasculares de alto fluxo relacionadas a conexões anômalas entre artérias e veias, através de um emaranhado de vasos malformados denominados nidus. MAVs são lesões raras no cérebro, mas constituem importante causa de sangramento em adultos jovens. Hemorragia cerebral é a manifestação clínica mais frequente, ocorre na metade dos portadores de MAVs e são fatais no primeiro episódio de sangramento em 25% dos casos. Outros fatores de risco para sangramento, além de hemorragia prévia, incluem localização profunda da lesão, drenagem venosa profunda e associação com aneurismas. O diagnóstico de MAV é confirmado por exames de imagem, como tomografia computadorizada, ressonância magnética e por exames angiográficos. O tratamento para MAVs com sangramento prévio pode ser feito por ressecção microcirúrgica da lesão, embolização endovascular, radiocirurgia estereotáxica ou por combinação destes procedimentos. Para MAVs íntegras não há consenso sobre a conduta mais adequada, se deve ser feito acompanhamento clínico ou intervenção terapêutica, tendo em vista os riscos relacionados ao tratamento. Em síntese, a escolha do tipo de tratamento deve considerar vários indicadores, como tamanho e local da lesão, drenagem vascular, a idade e o contexto clínico do paciente, bem como a experiência do serviço e os riscos relacionados ao tratamento.
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    Avaliação de doenças de pele, ansiedade, depressão e qualidade do sono em mulheres com endometriose: um estudo transversal
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-04-03) Sakiyama, Paula Hitomi; Miot, Hélio Amante [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Fundamentos: Endometriose é uma doença crônica estrogênio-dependente, na qual, apesar da patogênese incerta, há envolvimento do sistema imunológico e resposta inflamatória. A pele, da mesma forma, apresenta doenças em que aspectos imunológicos, inflamatórios e hormonais estão envolvidos. Apesar dos possíveis fatores fisiopatológicos em comum, há poucos estudos que avaliam a coexistência de endometriose e dermatoses inflamatórias. As contingências crônicas ligadas à endometriose e às dermatoses associam-se com distúrbios afetivos e do sono, e, atualmente, discute-se também uma interação bidirecional entre esses elementos. Objetivo: Avaliar as prevalências de doenças de pele, ansiedade, depressão e prejuízo da qualidade do sono em portadores de endometriose, comparadas às de pessoas sem a doença. Métodos: Estudo transversal, no qual foram incluídas 835 pessoas com endometriose (diagnóstico confirmado por ginecologista), recrutadas a partir de grupos no Facebook e em um ambulatório de ginecologia, e 309 mulheres sem a doença (controles). Os participantes foram interrogados sobre a presença de doenças de pele (autorreferidas na amostra online e confirmadas por exame físico na amostra presencial de casos e de controles sem a doença) e responderam a questões sobre aspectos demográficos, clínicos, Escala Hospitalar de Ansiedade e Depressão (HADS) e Índice de Qualidade do Sono de Pittsburgh (PSQI). Variáveis quantitativas foram representadas pelas médias e desvios-padrão, e comparadas pelo teste t de Student, e as qualitativas pelo seu percentual e intervalo de confiança de 95% (IC95%), sendo comparadas pelo teste do qui-quadrado de Pearson, teste exato de Fisher, ou qui-quadrado de tendência. A dimensão do efeito das associações entre as variáveis foi estimada pela razão de prevalências (RP), e seu IC95%, estimado por um modelo linear generalizado (regressão de Poisson), ajustado pela idade, composição corporal, cor de pele e escolaridade. O valor de p<0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Resultados: A maior parte da amostra de endometriose foi composta por pessoas entre 31 e 40 anos, brancas, que ingressaram no ensino superior e de composição corporal normal. A maioria apresentava diagnóstico da doença entre 1 e 10 anos (71,3%) e identificação inicialmente clínica (73,3%), mas 48,9% afirmou já ter realizado cirurgia (visualização direta das lesões). Identificou-se maior prevalência de urticária crônica (RP = 7,5; IC95% = 1,8–31,1), alopecia areata (RP = 4,6; IC95% = 1,4–15,2) e psoríase (RP = 4,8; IC95% = 1,2–19,5), assim como de escores altos de ansiedade (RP = 1,9; IC95% = 1,7–2,2), depressão (RP = 2,2; IC95% = 1,8–2,6), e má qualidade de sono (RP = 1,7; IC95% = 1,5–1,9), no grupo com endometriose, comparado com os controles. Conclusões: Urticária crônica, alopecia areata, psoríase, ansiedade, depressão e sono de má qualidade são mais prevalentes em portadores de endometriose, quando comparados aos controles sem a doença.
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    Eficácia e segurança do creme de colchicina 0,5 por cento versus creme de 5-fluorouracil 5 por cento no tratamento do campo de cancerização cutâneo: um ensaio clínico randomizado
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-02-23) Teixeira, Amanda Soares; Miot, Hélio Amante [UNESP]; Miola, Anna Carolina [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Fundamentos: O tratamento das queratoses actínicas (QAs) e do campo de cancerização cutâneo (CCC) visa prevenir a ocorrência de neoplasias como o carcinoma espinocelular. 5-Fluorouracil (5-FU) é droga de escolha para tratar CCC e a colchicina (COL) tópica revelou-se promissora, apesar de poucos ensaios clínicos disponíveis. Objetivo: Avaliar a eficácia do creme de COL 0,5% versus creme de 5-FU 5% no tratamento do CCC. Método: Ensaio clínico randomizado, aberto e autocontrolado. Quarenta e cinco pacientes (90 antebraços), com três a dez QAs em cada antebraço, utilizaram creme de COL 0,5% duas vezes ao dia por sete dias em um antebraço, e creme 5-FU 5% duas vezes ao dia por 21 dias no antebraço contralateral. A avaliação clínica foi realizada pela contagem de QAs, sua escala de gravidade (EGQA) e escala de fotoenvelhecimento dos antebraços (EFA). Os pacientes foram avaliados após 14 dias do início do tratamento quanto a efeitos colaterais, e os desfechos foram avaliados 90 dias após a inclusão, sendo o desfecho primário o clearance completo de QAs e os defechos secundários o clearance parcial (redução de 50% na contagem de QA), a percentual de redução na contagem de QAs, redução na EFA, na EGQA, e avaliação de efeitos adversos. A amostra foi dimensionada a fim de detectar uma diferença de mais de 10% de redução na contagem de QAs entre os grupos, com poder de 0,8, alfa de 0,05, e estimativa de dropout de 20%, resultando nos 90 antebraços estudados. Todos os pacientes incluídos no estudo e randomizados fizeram parte da população ITT (intention to treat). As contagens de QA, EGQA e EFA foram comparados de acordo com o tempo e para os grupos (ao longo do tempo) pelo modelo linear generalizado de efeitos mistos, estrutura de covariância robusta, covariância matriz autoregressiva tipo 1, comparação post-hoc de Sidak, e ajuste de probabilidade gama negativa ou binomial, quando indicado. Os casos faltantes tiveram seus valores imputados pelo modelo misto. A significância foi definida como valor de p <0,05. O tamanho do efeito entre os grupos foi estimado pelo bootstrap (1000 reamostragens). Resultados: A idade média dos participantes foi de 67,3 anos e 62% eram mulheres. Após 90 dias, 5-FU levou a redução percentual de 75% na contagem de QAs dos antebraços submetidos a 5-FU (IC 95%: 66%–83%) e de 64% nos tratados com COL (55%–72%), porém, sem diferenças entre si (p=0,069). No D14, COL foi associado a mais dor, edema e descamação, enquanto 5-FU ocasionou mais crostas. Em D90, houve clearance completo das QAs em 37% dos antebraços (IC 95% 24%–49%) e clearance parcial em 85% (IC 95% 76%–93%), versus 17% (IC 95% 7%–27%) e 78% (IC 95% 66%–88%) para COL. Quanto a EFA e EGQA, houve melhora com o tempo em ambos os grupos, sem diferenças quanto à EFA (p=0,654) e com superioridade do 5-FU em relação a COL na análise da EGQA. Limitações: Estudo unicêntrico. Conclusões: 5-FU e COL são eficazes para tratamento do CCC, sem perfil de superioridade clínica. COL provocou mais dor, edema e descamação, mas 5-FU ocasionou mais crostas.
  • ItemDissertação de mestrado
    Remodelamento cardíaco em modelo experimental de obesidade: Efeito anti-inflamatório do extrato das folhas de bergamota
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-02-14) Vieira, Taynara Aparecida; Camacho, Camila Renata Corrêa; Pereira, Lilian Cristina; Ferron, Artur Junio Togneri; Ferron, Artur Junio Togneri; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Introdução: Tendo em vista a importância da inflamação na patogênese dos distúrbios relacionados à obesidade, incluindo o remodelamento e a disfunção cardíaca, a busca por diferentes estratégias terapêuticas anti-inflamatórias naturais são promissoras. A bergamota (Citrus bergamia) é uma fruta cítrica utilizada para a produção de óleo essencial e estudos demonstram resultados propícios com ação antioxidante e anti-inflamatória. Objetivo: Investigar o efeito anti-inflamatório do extrato das folhas de bergamota (FB) no remodelamento cardíaco em modelo experimental de obesidade. Metodologia: Ratos Wistar machos (n=32) foram distribuídos em 2 grupos: dieta controle (C, n=16 animais) e dieta rica em açúcar e gordura (HSF, n=16 animais) por 20 semanas. Após detectado remodelamento cardíaco por ecocardiografia, os grupos foram redistribuídos em: controle + placebo (C, n=6); controle + extrato das folhas de bergamota (C+FB, n=6); HSF + placebo (HSF, n=6); HSF + extrato das folhas de bergamota (HSF+ FB, n=6) por 10 semanas. A concentração do extrato foi 50mg/kg de peso, diluído em água e administrado diariamente por gavagem; os grupos placebo receberam água também por gavagem. Foram avaliados: parâmetros nutricionais e metabólicos, parâmetros cardiovasculares, marcadores inflamatórios cardíacos, atividade da metaloproteinase-2 (MMP-2) miocárdica e a expressão proteica do colágeno tipo III miocárdico. Resultados: O grupo HSF apresentou obesidade, dislipidemia, hipertensão arterial sistólica, resistência à insulina, remodelamento e disfunção cardíaca; além dessas alterações, apresentou inflamação cardíaca e diminuição da atividade da MMP-2 ativa; a suplementação com FB foi eficaz em melhorar no grupo HSF a resistência à insulina, o remodelamento, a função cardíaca, bem como a inflamação, a atividade da MMP-2 ativa e a expressão proteica de colágeno tipo III miocárdico. Conclusão: O efeito anti-inflamatório da suplementação com FB melhorou a atividade das metaloproteinases atenuando o remodelamento e a disfunção cardíaca induzidos pela obesidade.
  • ItemDissertação de mestrado
    Efeitos da suplementação de carnosina sobre a doença hepática gordurosa associada às alterações metabólicas induzidas por dieta em ratos
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-02-15) Grandini, Núbia Alves; Moreto, Fernando; Corrêa, Camila Renata [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A obesidade é um problema de saúde pública que acomete bilhões de pessoas ao redor do mundo. O alto consumo de dietas ricas em açúcar e gordura está relacionado ao desenvolvimento da doença hepática gordurosa associada às alterações metabólicas (MAFLD). A carnosina (CAR) é um dipeptídeo natural, que possui ação antioxidante e anti-inflamatória, e vem sendo estudada para o tratamento e prevenção de doenças. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi verificar os efeitos da suplementação de CAR sobre a MAFLD induzida por dieta em ratos. Foram utilizados 24 ratos Wistar machos distribuídos em 2 grupos alimentados com diferentes dietas para indução da MAFLD: normocalórica (n=12) e hipercalórica rica em lipídeos e carboidratos simples (n=12). Após 17 semanas os animais foram redistribuídos em grupos experimentais para avaliação do tratamento (4 semanas): grupo controle com dieta normocalórica (Co,n=6), grupo controle com dieta normocalórica suplementado com CAR (Co+CAR, n=6), grupo MAFLD com dieta hipercalórica (MAFLD, n=6) e grupo MAFLD com dieta hipercalórica suplementado com CAR (MAFLD+CAR, n=6). Os animais receberam água e ração ad libitum, e a CAR foi administrada na dose de 250mg/kg/dia, por via intraperitoneal. Os grupos que receberam a dieta hipercalórica também receberam sacarose na água de beber numa concentração de 25%. O grupo MAFLD apresentou maior índice de adiposidade, pressão arterial sistólica, glicemia, IPGTT (Intraperitoneal Glucose Tolerance Test), triglicerídeos e colesterol plasmáticos e hepáticos, insulina, HOMA (Homeostasis Model Assessment), bem como esteatose hepática, AOPP (Advanced Oxidation Protein Products) plasmática e hepática, e menor expressão de PPAR-α (Peroxisome Proliferator-activated receptor α) em comparação ao grupo Co. A CAR atenuou os níveis de triglicerídeos e colesterol plasmáticos e hepáticos, IPGTT, esteatose hepática, macrófagos CD68+ e AOPP plasmática e hepática, além de aumentar os níveis de colesterol HDL e PPAR-α em comparação ao grupo MAFLD não tratado. A CAR atuou em importantes processos fisiopatológicos da MAFLD, podendo ser um composto terapêutico para o controle da doença.
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    Efeito do extrato das folhas de bergamota (Citrus bergamia) sobre o estado RedOx-Inflamatório nos órgãos alvo da obesidade
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-02-16) Siqueira, Juliana Silva [UNESP]; Correa, Camila Renata [UNESP]; Ferron, Fabiane Valentini Francisqueti; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Introdução: O alto consumo de alimentos industrializados ricos em carboidratos simples e gordura saturada está associado a um balanço energético positivo e acúmulo de gordura. Esse cenário contribui para o aumento dos índices de obesidade na população mundial nas últimas décadas. A disfunção do tecido adiposo tem sido relatada como um fator importante nos estágios iniciais das comorbidades associadas à obesidade a partir de vários mecanismos diretos e indiretos, como secreção desregulada de adipocinas, infiltração de macrófagos, inflamação, defesa antioxidante reduzida e estresse oxidativo que podem atuar em vários processos metabólicos, como hipertensão, dislipidemia, resistência à insulina e disfunções de tecidos e órgãos, como coração, fígado e rins, conhecidos como órgãos-alvo da obesidade. A adição de compostos bioativos, ricos em polifenóis, no hábito alimentar atua de forma benéfica pois, além de reduzir a inflamação e o estresse oxidativo gerados por dietas obesogênicas, podem ser facilmente introduzidos na rotina alimentar dos indivíduos através do consumo de frutas, legumes e vegetais. O objetivo desse tra- balho foi avaliar o efeito do extrato de folhas de bergamota (Citrus bergamia) sobre o tratamento de parâmetros do estado RedOx/inflamatório nos órgãos alvos da obesidade (fígado, rins, coração e tecido adiposo) em animais submetidos a dieta rica em açúcar e gordura. Materiais e Métodos: 48 ratos Wistar machos foram distribuídos em 2 grupos experimentais recebendo dieta controle (Controle, n=24) e dieta rica em açúcar e gordura (HSF, n=24) por 20 semanas. Posteriormente, os animais foram selecionados e redistribuídos para o início do tratamento de 10 semanas com extrato da folha de bergamota (Fo) por gavage (50mg/kg animal) em 4 grupos: dieta controle (Controle, n=10), dieta controle + Fo (Controle+Fo, n=10), dieta rica em açúcar e gordura (HSF, n=10) e dieta rica em açúcar e gordura + Fo (HSF+Fo, n=10). Os animais foram avaliados quando ao perfil nutricional, metabólico e hormonal; função cardíaca, hepática e renal; parâmetros inflamatórios e do estresse oxidativo. Resultados: Foi possível observar que os animais que consumiram a di- eta HSF apresentaram obesidade, dislipidemia, hiperglicemia, resistência insulínica, hipertensão, disfunção cardíaca, hepática e renal, inflamação e estresse oxidativo nos órgãos-alvo da obesidade. O tratamento com Fo mostrou proteção, demonstrando redução de triglicérides, insulina e resistência insulínica; aumento de níveis séricos de HDL colesterol; e redução da inflamação e do estresse oxidativo no tecido adiposo, coração, fígado e rins. Conclusão: Desta forma, o tratamento com extrato das folhas de bergamota mostrou-se capaz de atuar nos parâmetros metabólicos sistêmicos, bem como sobre a recuperação do cenário redox/inflamatório em diferentes tecidos de animais obesos.
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    Proteômica dos osteossarcomas caninos: uma descrição e comparação entre os sexos
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-12-19) Battazza, Alexandre; Rocha, Noeme Sousa [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Osteossarcoma é a neoplasia óssea primária mais comum em cães, altamente agressivo, invasivo e com alto potencial metastático, sendo os machos mais afetados do que as fêmeas. Apesar dos avanços no tratamento, o prognóstico continua ruim e os pacientes não ultrapassam dois anos de sobrevida. As disparidades na incidência entre os sexos oferecem oportunidades para investigação da biologia tumoral, diagnóstico precoce, estratégias terapêuticas e determinação do prognóstico. Para tanto, comparou-se a proteômica de tecido ex vivo de osteossarcomas apendiculares caninos entre os sexos. Foram colhidas amostras de osteossarcomas de 4 machos e 4 fêmeas. O tecido foi cortado em pequenos fragmentos, acrescido de tampão RIPA, sonicado e centrifugado para obtenção do extrato de proteínas (sobrenadante). A concentração de proteínas totais foi mensurada e confirmada por SDS-PAGE. Então a digestão tríptica foi conduzida e a proteômica foi realizada por espectrometria de massas (Orbitrap LC-MS). Um total de 9 proteínas foram diferencialmente mais abundantes nos machos (P < 0.05), das quais todas já foram descritas em um ou mais tipos de câncer com papel na carcinogênese ou na resposta terapêutica. Este estudo é pioneiro na avaliação das disparidades proteicas entre os sexos no osteossarcoma canino, e amplia o conhecimento sobre o tema, podendo servir de base para futuros estudos sobre vias da oncogênese, resistência terapêutica e de marcadores prognósticos.
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    Eficácia e segurança da nicotinamida 5% creme na estabilização do campo de cancerização cutâneo: um ensaio clínico randomizado, duplo-cego e placebo-controlado
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-01-26) Martins, Ivanka Miranda de Castro; Miola, Anna Carolina [UNESP]; Miot, Hélio Amante [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Fundamentos: O campo de cancerização cutâneo (CCC) é uma área que possui alterações genômicas e subclínicas decorrentes da exposição solar crônica, com maior predisposição ao desenvolvimento de lesões pré-neoplásicas e neoplásicas. As queratoses actínicas (QAs) são consideradas marcadores de atividade dessa área. Tratamentos que visem à estabilização do campo podem reduzir a incidência de QAs e de tumores cutâneos. A nicotinamida (NIC), também conhecida como niacinamida, possui efeito na quimioprevenção do câncer de pele, pois atua no reparo do DNA, diminui a inflamação, reprime a depleção de energia celular e reduz os efeitos da imunossupressão cutânea causados pela radiação ultravioleta. Esse trabalho objetivou avaliar a eficácia e segurança do creme de NIC 5% na estabilização do campo de cancerização cutâneo, em imunocompetentes. Casuística e métodos: Ensaio clínico randomizado, duplo-cego e placebo controlado para avaliar a eficácia e segurança da NIC 5% creme na estabilização no campo de cancerização. Foram incluídos 26 pacientes imunocompetentes do ambulatório de Dermatologia da FMB-UNESP, com 3-10 QAs em cada antebraço. Após a inclusão, foi realizada criocirurgia com nitrogênio líquido, por 10 segundos, nas QAs de ambos os antebraços, randomizados para receber, após 14 dias da realização da criocirurgia, uma das seguintes intervenções: NIC 5% creme, duas vezes por dia durante 56 dias; ou placebo (PLAC), na mesma posologia. Para cada paciente, o estudo teve duração de 70 dias e, durante esse tempo, foram fornecidos tubos de filtro solar de amplo espectro FPS 30 (Loreal Solar Expertise Supreme®) para aplicação em ambos os antebraços. Todos os pacientes foram reavaliados após 28 e 70 dias. A avaliação clínica foi realizada pela contagem de QAs, escala de gravidade das queratoses actínicas (EGQA), escala de fotoenvelhecimento dos antebraços (EFA) e questionário sobre efeitos adversos e tolerabilidade. O desfecho primário foi a redução percentual da contagem de QAs no D70. Os desfechos secundários foram: o clearance completo das lesões, redução da atividade do CCC, analisada pelo EGQA e EFA no D70. Todos os participantes incluídos no estudo fizeram parte da população ITT (intention to treat). A contagem de QAs, EGQA e EFA foram comparadas de acordo com o tempo e os grupos por modelo linear generalizado de efeitos mistos. A significância foi definida como valor p<0,05. Resultados: Ambos os tratamentos melhoraram todos os desfechos, sem diferença entre eles. As contagens de QAs reduziram em 61% (IC95% 50 a 72%; p<0,01) para o grupo NIC; e em 56% (IC 95% 44 a 68%; p<0,01) para o grupo PLAC. O clearance completo foi atingido em 21% (IC95% 7 a 37%) dos participantes do grupo NIC, e em 17% (IC95% 4 a 31%) dos participantes do grupo PLAC (p=0,44). O uso de NIC foi bem tolerado e não houve predileção entre os tratamentos (p=0,99). Limitações: Estudo monocêntrico, interrompido na análise interina por futillidade da intervenção. Conclusão: O tratamento tópico com nicotinamida 5% creme foi seguro em idosos imunocompetentes, porém, não promoveu estabilização do campo de cancerização ou melhora do aspecto da pele comparado ao placebo, após criocirurgia.
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    Caracterização clínica e epidemiológica de pacientes idosos com psoríase: um estudo transversal
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-01-26) Cagnon, Giovana Viotto [UNESP]; Miot, Helio Amante [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Fundamentos: Há poucos estudos dedicados à caracterização da população geriátrica com psoríase, que apresenta particularidades quanto às manifestações clínicas e limitações terapêuticas. Como psoríase tem comportamento de doença crônica, aumentando sua prevalência com a idade, o incremento da expectativa de vida no Brasil demanda conhecimento sobre o comportamento da doença entre idosos. Objetivo: Caracterizar idosos com psoríase, oriundos de serviço terciário, do ponto de vista clínico-epidemiológico, presença de comorbidades, fragilidade física, e o impacto afetivo. Comparar esses aspectos com adultos com psoríase, e idosos sem a doença. Método: Estudo transversal envolvendo 64 pacientes idosos com psoríase, 64 adultos jovens com psoríase, e 64 idosos sem a doença. Foram avaliados aspectos clínico-demográficos, escala de depressão de Beck, e Skindex 16. Nos pacientes idosos, foram avaliados indicadores de fragilidade física: handgrip, teste da cadeira, fadiga e perda ponderal >5%. Resultados: Em idosos, a idade média (DP) do início da psoríase foi 44 (13) anos, homens representaram 47% da amostra, a prevalência de artrite foi 22%, e de acometimento ungueal, 72%. Corticoide tópico foi mais empregado entre idosos com psoríase (100%), que nos adultos (86%), sem diferença entre os demais tratamentos sistêmicos. Diabetes mellitus ocorreu em 30% dos idosos. Hipertensão arterial (59%), dislipidemia (52%), depressão (34%) e fadiga (59%) foram mais prevalentes entre idosos com psoríase que entre controles saudáveis. Limitações: Estudo realizado em serviço público de referência para psoríase, sendo que todos estavam sob tratamento. Conclusões: Idosos com psoríase, oriundos de serviço terciário, apresentaram maior comprometimento afetivo, comorbidades metabólicas e fragilidade física, que controles idosos.
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    Avaliação de NETs em pacientes pós-COVID com tromboembolismo
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-12-12) Dezen, Ana Laura Ortega; Dias-Melicio, Luciane Alarcão [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O SARS-CoV-2, vírus responsável pela pandemia de COVID-19 – síndrome respiratória aguda grave, ao infectar o indivíduo, induz a ativação das respostas imunológicas e inflamatória, aumentando a quantidade de células fagocíticas - principalmente neutrófilos (PMN), assim como os níveis de citocinas pró-inflamatórias, tendo como finalidade o enfrentamento viral. No entanto, quando desreguladas, essas citocinas podem causar extensa lesão tecidual devido a indução de uma tempestade inflamatória, podendo levar o indivíduo à óbito. Acredita-se que a liberação das redes extracelulares de neutrófilos (NETs), mecanismo de eliminação de patógenos, estejam relacionadas com o agravamento da doença e formação de trombos. Estudos já demonstraram um aumento na concentração de marcadores específicos de NETs em amostras séricas e purificadas de PMN, assim como em autópsias de indivíduos acometidos pela COVID-19, indicando correlação de severidade e complicações no quadro clínico dos pacientes. Casos de tromboembolismo também se encontraram aumentados na COVID-19, mesmo naqueles indivíduos recebendo tromboprofilaxia e até mesmo em momentos posteriores à infecção aguda pelo SARS-CoV-2, associando a desregulação do estado inflamatório, a ativação plaquetária e o sistema complemento induzidos pelas NETs na COVID-19. Assim, este estudo teve como objetivo avaliar a liberação de NETs por neutrófilos humanos, in vitro, de pacientes pós-COVID que apresentaram ou não eventos tromboembólicos em decorrência da doença. Nossos resultados demonstram que pacientes pós-COVID, que sofreram eventos tromboembólicos devido a COVID-19, liberaram níveis mais elevados de NETs, além de apresentarem diferenças na conformação das redes. Esses resultados sugerem o importante papel modulador das NETs nos processos imunológicos, inflamatórios e vasculares devido à sua presença persistente em pacientes pós-COVID.
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    Identificação de marcadores de resistência e suscetibilidade em casais discordantes na infecção por SARS-CoV-2
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-12-14) Ferreira, Thayná Ruiz; Dias-Melicio, Luciane Alarcão [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O sistema imunológico é essencial para controlar e eliminar patógenos como o SARS-CoV-2, agente da COVID-19 que vem sendo transmitida desde dezembro de 2019. Fatores como o uso adequado de máscaras e outras medidas de proteção individual, status socioeconômico, e acesso aos serviços de saúde são algumas variáveis que podem explicar a variação de incidência e mortalidade da doença entre os indivíduos expostos. A determinação de possíveis diferenças de resposta entre indivíduos expostos à mesma cepa viral em casais discordantes para a infecção pode representar um caminho importante para um melhor entendimento das respostas dos infectados. Assim, focando a resposta de neutrófilos de casais que tiveram diagnóstico positivo e negativo para COVID-19, objetivamos identificar e avaliar após diferentes estímulos: a expressão de receptores ACE2, TLR4 e TLR9; a produção de diferentes citocinas em sobrenadante; e a liberação de NETs, em busca de possíveis marcadores de resistência e suscetibilidade. Um recrutamento foi realizado através de formulário online com inclusão de casais com diagnóstico discordante confirmado por teste molecular, e que tenham se infectado antes do recebimento das doses da vacinação. A coleta de sangue venoso periférico foi realizada para o isolamento de neutrófilos e agonistas de TLRs (LPS e ODN CpG) e SARS-CoV-2 inativado foram utilizados para desafio destas células. A detecção das expressões de ACE2, TLR4 e TLR9 foi realizada utilizando diferentes anticorpos conjugados a fluorocromos por citometria de fluxo. A liberação de NETs séricas e em sobrenadante de cultura foi quantificada com auxílio do kit Quant-iT™ PicoGreen™ dsDNA Assay e anticorpo anti-elastase. O kit LEGENDplex™ Human Essential Immune Response Panel (13-plex) foi utilizado para quantificação de citocinas em sobrenadante. A análise estatística foi realizada considerando nível de significância de 5%, de acordo com a distribuição dos dados e com auxílio do SAS Analytics Software e GraphPad Prism 6. Após os estímulos encontramos algumas diferenças de respostas entre os casais. Foram detectadas variações de neutrófilos ACE2+. Quando as células dos indivíduos COVID-19 negativo foram estimuladas com ODN CpG, a porcentagem aumentou e foi superior aos indivíduos positivos. Além disso, esse grupo apresentou as maiores porcentagens de neutrófilos TLR4+ sem estímulo e após SARS-CoV-2 inativado. Apesar disso, neutrófilos do grupo COVID-19 positivo apresentaram níveis de TLR4 mais elevados. Para a expressão de TLR9, esse comportamento é invertido quando estimulado com SARS-CoV-2 inativado. Em relação à liberação de NETs, neutrófilos do COVID-19 positivo produziram mais NETs (mesmo sem a infecção aguda), principalmente em níveis séricos e sem estímulo. Após estímulos, COVID-19 negativo apresentou os níveis mais altos comparativamente e também são capazes de produzir mais IL-8. Assim, há uma indicação de diferença de resposta entre neutrófilos pertencentes a diferentes grupos que podem representar alguns fatores de resistência e suscetibilidade à infecção por SARS-CoV-2.
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    Avaliação de mediadores da resposta inflamatória na interface materno-fetal: Estudo in vitro de infecção bacteriana, isolada ou em combinação com Mycoplasma hominis, em células amnióticas epiteliais imortalizadas
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-11-21) Cursino, Geovanna Cristofani [UNESP]; Silva, Márcia Guimarães da [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    To evaluate the mediators of the inflammatory response, in an in vitro model, of immortalized epithelial amniotic cells (hFM-AECs) challenged by different bacterial species, alone and in combinations with Mycoplasma hominis, and the interference of this stimulus on the epithelial-mesenchymal transition. In vitro assay with hFM-AECs challenged with different species were performed in diferente moments. Supernatants were collected for quantification of IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-13, GM-CSF, TNF-α, HBD-1, HBD-2 and HBD-3 by ELISA. For analyses of EMT, the cell shape index was applied. The data were subjected to a mixed effects model combined with parametric bootstrapping.One Way ANOVA and paired T-test were used for the EMT analysis. (a) Elevated levels of IL-6, IL-8, GM-CSF and HBD-1 were detected in relation to the reference when stimulated with Fusobacterium nucleatum, alone or in combination with M. hominis; (b) IL-13 levels were decreased in relation to the reference after stimulation with F. nucleatum, Bacteroides fragilis, Peptostreptococcus anaerobius and Streptococcus agalactiae alone and in combination with M. hominis; (c) Different isolates or combination with M. hominis stimulated EMT. F. nucleatum alone or in combination with M. hominis, have an important capacity to induce a characteristic inflammatory signature. Bacterial combinations stimulate EMT.
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    Triagem de Doença de Fabry (DF) através de estudo imuno-histoquímico para globotriaosilceramida (Gb3) em pacientes com lesões de esclerose glomerular segmentar e focal e imunofluorescência negativa para depósitos em biópsias renais por agulha grossa
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-10-07) Zogheib, Rodrigo José Pizzello; Domingues, Maria Aparecida Custodio [UNESP]; Viero, Rosa Marlene [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Contexto: A doença de Fabry (DF) é um distúrbio de armazenamento lisossomal ligado a X, causado pela atividade deficiente da enzima α-galactosidase A, resultando no acúmulo de glicoesfingolipídios, particularmente a globotriaosilceramida (Gb3) e globotriaosilesfingosina (liso-Gb3). Esses lipídios se acumulam progressivamente na circulação e em praticamente todas as células e órgãos, resultando no desenvolvimento de uma desordem multissistêmica. Esses pacientes estão sob alto risco de desenvolver síndrome nefrótica devido à deposição glomerular de Gb3, especialmente envolvendo os podócitos, podendo resultar em lesões glomerulares de esclerose segmentar e focal, mesmo em estágios iniciais da doença, elencando a Glomeruloesclerose Segmentar e Focal (GESF) como um importante diagnóstico diferencial. O objetivo do estudo é pesquisar depósitos de Gb3 por imunoistoquímica em biópsias renais de pacientes com lesões glomerulares de esclerose. Método: Realizada pesquisa de Gb3 por imunoistoquímica em 27 biópsias renais analisadas no Departamento de Patologia da Faculdade de Medicina de Botucatu, no período de 2015-2019, com diagnóstico de GESF. Resultados: Não foram detectados depósitos de Gb3 por meio da imunoistoquímica nas vinte e sete biópsias renais analisadas. Conclusão: A DF compromete o parênquima renal manifestando-se principalmente por síndrome nefrótica, podendo evoluir para doença renal crônica necessitando de terapia renal substitutiva. Novos estudos de triagem da DF devem ser incentivados em casos subclínicos, especialmente em pacientes com biópsias renais com lesões crônicas de etiologia pouco definida e pacientes com doença renal crônica em tratamento dialítico.
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    Fatores associados à gravidade das queratoses actínicas da face e couro cabeludo em uma amostra brasileira: um estudo transversal
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-08-11) Gioppo, Ingrid Stresser; Miot, Hélio Amante [UNESP]; Miola, Anna Carolina [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Fundamentos: Queratoses actínicas (QAs) são proliferações queratinocíticas atípicas com risco de malignização. Sua gênese é influenciada por vários fatores como exposição solar, imunossupressão e idade. Alguns estudos as associaram ao uso de drogas fotossensibilizantes (como os inibidores da enzima conversora de angiotensina e os bloqueadores do receptor de angiotensina, entre outros) e bloqueadores do canal de cálcio (BCC). O objetivo deste estudo foi avaliar os fatores individuais, comportamentais e de exposição associados à gravidade das QAs faciais e de couro cabeludo. Métodos: Estudo transversal multicêntrico realizado no Hospital Geral de Curitiba-PR, no Instituto Lauro de Souza Lima em Bauru-SP e no Hospital de Clínicas de Botucatu-SP, envolvendo indivíduos imunocompetentes com pelo menos uma QA na face ou couro cabeludo. Foram avaliados elementos demográficos, exposição solar, fotoproteção, tabagismo, uso de álcool, antecedentes pessoais ou familiares de câncer de pele, e o uso regular de medicações nos últimos seis meses. O principal desfecho do estudo foi a gravidade das QAs, avaliada através da escala de gravidade Actinic Keratosis Area and Severity Index (AKASI). A variação dos escores AKASI foi avaliada através de um modelo linear generalizado hierárquico, ajustado para o sexo, idade, fototipo e calvície. Ao final foi realizada uma análise de sensibilidade utilizando a contagem total de QAs como variável dependente. Resultados: Foram avaliados 252 pacientes, com idades que variaram entre 44 e 92 anos, predomínio de sexo masculino (52%), fototipos I e II (78%), e histórico pessoal de câncer de pele (54%). Nessa amostra, somente 22% dos participantes faziam uso regular de protetor solar, 12% usavam algum tipo de BCC e 61% usavam alguma medicação fotossensibilizante. O modelo final indicou idade, fototipo, histórico de câncer de pele e uso de BCC como fatores independentes de risco. Aderência ao uso de protetor solar esteve associada à menor gravidade das QAs avaliadas. Medicamentos fotossensibilizantes não foram indicados como fatores de risco, nessa amostra. Conclusões: Idade, fototipos claros e histórico pessoal de câncer de pele foram confirmados como fatores de gravidade para QAs, enquanto a aderência à fotoproteção foi redutora do efeito. O uso de BCC associou-se a maior gravidade das QAs na face e couro cabeludo.