Desenvolvimento de kit para quantificação enzimática de etanol

dc.contributor.advisorValentini, Sandro Roberto [UNESP]
dc.contributor.advisorGattas, Edwil Aparecida de Lucca [UNESP]
dc.contributor.authorLopes, Karina Rateiro [UNESP]
dc.contributor.institutionUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.date.accessioned2015-03-23T15:21:04Z
dc.date.available2015-03-23T15:21:04Z
dc.date.issued2011
dc.description.abstractA dosagem do etanol durante a produção de medicamentos, bebidas e combustíveis tem se mostrado bastante importante para o aumento de rendimento dos processos e qualidade dos produtos. Embora existam vários métodos para determinar a concentração do etanol, os enzimáticos são os mais interessantes por serem rápidos, precisos, de fácil manuseio e baixo custo. O objetivo geral desse trabalho foi a elaboração de um Kit de quantificação enzimática de etanol, utilizando a enzima álcool desidrogenase I recombinante de S. cerevisiae (Adh1). Para isso, o gene codificador da enzima álcool desidrogenase I (ADH1) de levedura foi clonado no vetor pET28a para expressão em E. coli (BL21). Em seguida, a produção e solubilidade da enzima álcool desidrogenase I foi determinada, sendo definida uma condição ideal de produção e purificação da proteína recombinante por cromatografia de afinidade. A atividade enzimática da álcool desidrogenase I purificada foi determinada através de ensaios já padronizados na literatura (UV), bem como sua estabilidade em diversas condições de tempo e temperatura. Os resultados obtidos aqui demonstraram que a enzima obtida apresentou boa atividade biológica in vitro, com sensibilidade na detecção de no mínimo 2,3 x 10–4 g/L de etanol em 2 minutos. Além disso, a proteína purificada teve sua atividade preservada quando estocada a - 20°C durante 120 dias, características que possibilitarão que a enzima álcool desidrogenase I recombinante, purificada pela metodologia apresentada nesse trabalho, seja utilizada em um kit de quantificação enzimática de etanol rápido, preciso e de baixo custopt
dc.format.extent37 f.
dc.identifier.aleph000678216
dc.identifier.citationLOPES, Karina Rateiro. Desenvolvimento de kit para quantificação enzimática de etanol. 2011. 37 f. Trabalho de conclusão de curso (Farmácia-Bioquímica) - Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, 2011.
dc.identifier.filelopes_kr_tcc_arafcf.pdf
dc.identifier.lattes5333250355049814
dc.identifier.lattes4006598610021833
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11449/119682
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.rights.accessRightsAcesso aberto
dc.sourceAleph
dc.subjectÁlcoolpt
dc.subjectEnzima álcool desidrogenasept
dc.subjectEtanolpt
dc.titleDesenvolvimento de kit para quantificação enzimática de etanolpt
dc.typeTrabalho de conclusão de curso
unesp.advisor.lattes4006598610021833[2]
unesp.author.lattes5333250355049814
unesp.campusUniversidade Estadual Paulista (Unesp), Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Araraquarapt
unesp.undergraduateFarmácia-Bioquímica - FCFARpt

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