Comparação da taxa de detecção do DNA do EBV em amostras de saliva total e células exfoliadas de pacientes com leucoplasia bucal através da nPCR

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Data

2016-09-26

Autores

Franco, Carolline Vitor Alves [UNESP]

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Editor

Universidade Estadual Paulista (Unesp)

Resumo

The aim of this essay was to compare the detection rate of Epstein-Barr virus (EBV) DNA in total saliva samples with samples of exfoliated cells, obtained through the use of cytobrush of patients with oral leukoplakia, through n-PCR. In the laboratory phase, the DNA was extracted from the samples according to the instructions of the DNA extraction Kit QIAamp® DNA mini kit and all samples were submitted to spectrophotometry to verify presence and integrity of the DNA. Subsequently the PCRs were performed for β-globin, with primers PCO3 and PCO4 (260pb). To verify the presence of human DNA, an analysis was performed using 2% agarose gel electrophoresis. n-PCR was performed with initiator oligonucleotides for the EBV's DNA. All samples were tested in duplicate and the n-PCR products were subjected to 8% polyacrylamide gel electrophoresis. It was verified the existence of association between variables of both groups studied by applying statistical tests (Chi-square or Fisher's exact Test) with a significance level of 5%. Saliva and exfoliated cells samples collected in the laboratory phase for DNA extraction and PCR for β-globin, which was positive for all samples, showing a good quality DNA. EBV's reaction standardization revealed that 80% of the samples (24 patients) of cytobrush were positive for the presence of the virus. In this analysis the prevalence was in males who presented positivity in 84% of cases (16 patients). As for the analysis of the saliva samples, the positivity was 77% (23 patients) also maintaining the prevalence of male with 69.5% of cases (16 patients). However the research showed no statistical significance in the comparison of the detection rate of Epstein-Barr virus (EBV) DNA in samples evaluated of patients with oral leukoplakia
O objetivo deste trabalho foi comparar a taxa de detecção do DNA do Epstein Barr vírus (EBV) em amostras de saliva total e células exfoliadas, em 30 pacientes com leucoplasia bucal, através da nPCR. Na fase laboratorial realizou-se a extração de DNA das amostras segundo as instruções do Kit de extração de DNA QIAamp® DNA mini kit e todas as amostras foram submetidas à espectrofotometria para verificação da presença e integridade do DNA. Posteriormente utilizou-se as PCRs para β-globina, com os primers PCO3 e PCO4 (260pb), seguindo com a análise através da eletroforese em gel de agarose 2% para a verificação da presença do DNA humano. Foi executada nPCR com os ologonucleotídeos iniciadores para o DNA do EBV. Todas as amostras foram testadas em duplicata e os produtos da nPCR submetidos à eletroforese em gel de poliacrilamida 8%. Utilizou-se os testes estatísticos (Qui-quadrado ou Teste exato de Fisher) com nível de significância de 5%. Obteve-se como resultado que 80% das amostras (24 pacientes) de citobrush foram positivas para a presença do EBV. Das amostras positivas, 84% eram homens, com média de idade de 59 anos. Já na análise quanto as amostras de saliva, a positividade foi de 77% (23 pacientes) mantendo também a prevalência do gênero masculino com 69,5% dos casos (16 pacientes). No entanto a pesquisa não apresentou significância estatística na comparação da taxa de detecção do DNA do Epstein-Barr vírus nas amostras avaliadas de pacientes com leucoplasia bucal

Descrição

Palavras-chave

Leucoplasia bucal, Herpesvirus humano 4, Carcinoma de células escamosas, Leukoplakia, Oral

Como citar

FRANCO, Carolline Vitor Alves. Comparação da taxa de detecção do DNA do EBV em amostras de saliva total e células exfoliadas de pacientes com leucoplasia bucal através da nPCR. 2016. 37 f. Trabalho de conclusão de curso (bacharelado - Odontologia) - Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho, Faculdade de Odontologia de Araçatuba, 2016.