RESSALVA Atendendo solicitação do(a) autor(a), o texto completo desta Trabalho de conclusão de residência será disponibilizado somente a partir de 21/02/2027. UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA “JÚLIO DE MESQUITA FILHO” FACULDADE DE MEDICINA VETERINÁRIA E ZOOTECNIA, CAMPUS BOTUCATU, SP AVALIAÇÃO DE DIFERENTES ANTICOAGULANTES E O POTENCIAL USO EM TRANSFUSÕES SANGUÍNEAS DE JABUTIS-PIRANGA (Chelonoidis carbonarius) MYLENA OLIVEIRA MIRANDA Botucatu 2024 UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA “JÚLIO DE MESQUITA FILHO” FACULDADE DE MEDICINA VETERINÁRIA E ZOOTECNIA, CAMPUS BOTUCATU, SP MYLENA OLIVEIRA MIRANDA AVALIAÇÃO DE DIFERENTES ANTICOAGULANTES E O POTENCIAL USO EM TRANSFUSÕES SANGUÍNEAS DE JABUTIS-PIRANGA (Chelonoidis carbonarius) Trabalho de Conclusão da Residência em Medicina Veterinária apresentado à Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade “Júlio de Mesquita Filho”, Campus de Botucatu, SP, para obtenção do título de Residente em Medicina Veterinária. Área de: Animais silvestres Preceptor: Profa. Titular Sheila Canevese Rahal Botucatu 2024 FICHA CATALOGRÁFICA ELABORADA PELA SEÇÃO TÉC. AQUIS. TRATAMENTO DA INFORM. DIVISÃO TÉCNICA DE BIBLIOTECA E DOCUMENTAÇÃO - CÂMPUS DE BOTUCATU - UNESP BIBLIOTECÁRIA RESPONSÁVEL: ROSANGELA APARECIDA LOBO-CRB 8/7500 Miranda, Mylena Oliveira. Diferentes anticoagulantes e o potencial uso em transfusões sanguíneas de jabutis-piranga (Chelonoidis carbonarius)/ Mylena Oliveira Miranda. - Botucatu, 2024. Trabalho acadêmico (residência - Medicina Veterinária) - Universidade Estadual Paulista (UNESP), Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Orientador: Sheila Canavese Rahal Capes: 50500007 1. Hematologia. 2. Anticoagulantes. 3. Transfusão de sangue. 4. Répteis. 5. Jabutis. MYLENA OLIVEIRA MIRANDA AVALIAÇÃO DE DIFERENTES ANTICOAGULANTES E O POTENCIAL USO EM TRANSFUSÕES SANGUÍNEAS DE JABUTIS-PIRANGA (Chelonoidis carbonarius) Trabalho de conclusão de residência apresentada à Universidade Estadual Paulista (UNESP), Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ), Botucatu, para obtenção de título de Residente em Animais silvestres. Área de concentração: Animais silvestres Data da defesa: 21/02/2025 Banca examinadora: Profa. Dra. Sheila Canevese Rahal UNESP – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia – Campus de Botucatu. Profa. Dra. Cláudia Valéria Seullner Brandão UNESP – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia – Campus de Botucatu. Dra. Jeana Pereira da Silva UNESP – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia – Campus de Botucatu. MIRANDA, MYLENA OLIVEIRA. Avaliação de diferentes anticoagulantes e o potencial uso em transfusões sanguíneas de jabutis-piranga (Chelonoidis carbonarius). Botucatu, 2024. 21p. Trabalho de Conclusão de Residência em Medicina Veterinária (área de animais silvestres) - Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Campus de Botucatu, Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”. RESUMO O jabuti-piranga (Chelonoidis carbonarius; Spix,1824) é um testudine terrestre endêmico do Brasil. O número de répteis mantidos como animais de estimação tem aumentado, o que cresce também a demanda de atendimentos veterinários, por essas espécies geralmente apresentarem sinais clínicos muito discretos é necessário associar exames complementares ao exame clínico, como análise hematológica. Devido as diferenças entre os eritrócitos dos répteis em comparação aos mamíferos, também há diferenças no processamento do sangue e a utilização de anticoagulantes. Em relação a transfusão sanguínea, há pouca informação sobre o método mais adequado para sua realização nesses animais. O objetivo do estudo foi avaliar a viabilidade do sangue total de jabuti-piranga em três anticoagulantes, com foco na aplicação para transfusão sanguínea. Para tanto, foram utilizados sete jabutis-piranga hígidos, provenientes do CEMPAS. A colheita de sangue foi realizada mediante contenção química com propofol na veia jugular. Foram colhidos 5 mL de sangue de cada indivíduo e logo em seguida, distribuído em tubos com heparina de sódio, citrato de sódio e CPDA. As amostras foram processadas com intervalos de imediatamente após a colheita, 8, 24, 48 e 72 horas, obtendo-se os parâmetros hematológicos. Os dados foram avaliados estatisticamente. As hemácias, percentual de hematócrito, PT, contagem de leucócitos, heterofilos e azurófilos apresentaram diferenças estatísticas. O citrato e CPDA apresentaram intercorrências como coagulação e intensa hemólise do plasma no decorrer do tempo. A heparina apresentou maior estabilidade em relação ao hematócrito e pouca variação nos valores de PT, leucócitos e azurófilos, além de ser o único anticoagulante que não apresentou hemólise. Essa estabilidade demonstra um melhor desempenho da heparina em relação aos outros anticoagulantes testados. Palavras-chave: hematologia, répteis, jabuti. MIRANDA, MYLENA OLIVEIRA. Evaluation of different anticoagulants and their potential use in blood transfusions of red-footed tortoises (Chelonoidis carbonarius). Botucatu, 2024. 21p. Trabalho de Conclusão de Residência em Medicina Veterinária (área de animais silvestres) - Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Campus de Botucatu, Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”. ABSTRACT The red-footed tortoise (Chelonoidis carbonarius; Spix,1824) is a terrestrial turtle endemic to Brazil. The number of reptiles kept as pets has increased, which has also increased the demand for veterinary care. As these species generally present very discreet clinical signs, it is necessary to associate complementary tests with the clinical examination, such as hematological analysis. Due to the differences between reptile erythrocytes compared to mammals, there are also differences in blood processing and the use of anticoagulants. Regarding blood transfusion, there is little information about the most appropriate method for performing them in these animals. The aim of this study was to evaluate the viability of whole blood from the red-footed tortoise in three anticoagulants, focusing on its application for blood transfusions. For this purpose, seven healthy red-footed tortoises from CEMPAS were used. Blood collection was performed using chemical restraint with propofol in the jugular vein. 5 mL of blood were collected from each individual and distributed into tubes containing sodium heparin, sodium citrate, and CPDA. The samples were processed at intervals of immediately after collected, 8, 24, 48, and 72 hours to obtain the hematological parameters. The data were statistically evaluated. The red blood cells, hematocrit percentage, PT, white blood cell count, heterophils, and azurophils showed statistical differences. Citrate and CPDA presented complications such as coagulation and intense hemolysis of the plasma over time. Heparin showed greater stability regarding hematocrit with little variation in PT values, white blood cells, and azurophils, and was the only anticoagulant that did not show hemolysis. This stability demonstrates better performance of heparin compared to the other anticoagulants tested. Key words: hematology, reptile, tortoise. SUMÁRIO 1- Introdução ...................................................................................................9 2- Materiais e métodos.................................................................................11 3- Resultados ...............................................................................................13 4- Discussão..................................................................................................18 5- Conclusão ................................................................................................20 6- Referências ..............................................................................................21 9 1 INTRODUÇÃO Os répteis são membros da classe Reptilia, composta por quatro ordens diversas, entre as quais a ordem Testudines, constituída pelos cágados, jabutis e tartarugas (LONG, 2016). Mundialmente são reconhecidas 10.700 espécies de répteis, sendo a ordem Testudines a segunda com mais representantes (RHODIN et al., 2017). No Brasil ocorrem 37 espécies verificadas de testudines, sendo considerado o terceiro país com maior riqueza de espécies de répteis no mundo (COSTA e BÉRNILS, 2018). Os répteis desempenham papéis importantes nos ecossistemas, tais como predadores, presas, dispersores de sementes, ou como espécies comensais (BÖHM et al., 2013). A complexidade desses indivíduos, por serem ectotérmicos e ocuparem diversos nichos ecológicos, provêm uma valiosa visão sobre a saúde da biodiversidade e condição dos microclimas, tornando-os importantes bioindicadores (SCHEELINGS, 2015). O jabuti-piranga (Chelonoidis carbonarius; Spix,1824) é um testudine terrestre (MENDOZA et al., 2023). A espécie é endêmica da América Central e Sul, sendo que no Brasil tem ampla distribuição em florestas e savanas das regiões nordeste, centro-oeste, sudeste e sul (SHIBUYA et al., 2021). Esses animais apresentam dieta onívora e variada, incluindo frutas, folhas, flores, fungos e pequenos insetos (LAUTENSCHLAGER et al., 2022). A espécie não foi avaliada pela IUCN (International Union for Conservation of Nature), o que impossibilita estimar o tamanho da população in situ e seu estado de conservação, mas é fato que o número de espécimes tem decaído pela perda de habitat, caça e tráfico (LAUTENSCHLAGER et al., 2022; MENDOZA et al., 2023). Além dos indivíduos de vida livre, o número de répteis mantidos como animais de estimação não- convencionais tem aumentado, demonstrando crescente demanda de atendimento nas clínicas e hospitais veterinários e, com isso, avanço na medicina de répteis (ANDRADE et al., 2012; LONG, 2016). Na clínica de répteis, em especial dos testudines, a análise hematológica se destaca como um parâmetro crucial para monitorar a saúde do animal, visto que geralmente apresentam sinais clínicos discretos (MURO et al., 1998; LÓPEZ- OLVERA et al., 2003; GARCIA et al., 2021). A colheita do sangue, uso de anticoagulante e armazenamento corretos permitem uma análise mais fidedigna 10 e, no caso de transfusão sanguínea, é essencial para segurança do doador e do receptor (PERPIÑÁN et al., 2010; PHILLIPS et al., 2017). Os répteis apresentam eritrócitos nucleados, com núcleo elíptico e vida útil mais longa (TROIANO et al., 2000; HEATLEY e RUSSEL, 2019). A vida útil de 600-800 dias leva a um maior tempo de regeneração dessas células, podendo ser superior a 60 dias (CITAL e GOODNIGHT, 2016). Entre as espécies de répteis, os testudines apresentam os maiores eritrócitos (HEATLEY e RUSSEL, 2019). Devido as diferenças entre os eritrócitos dos répteis em comparação aos mamíferos, também há diferenças em relação ao processamento do sangue e a utilização de anticoagulantes (CITAL e GOODNIGHT, 2016). Nos mamíferos o anticoagulante mais utilizado é o EDTA (ácido etilenodiamino tetra-acético) (HARR et al., 2005). Entretanto, em répteis o uso do EDTA é limitado, em particular nos testudines, visto que em algumas espécies, incluindo jabutis pode causar hemólise (PERPIÑÁN et al., 2010; RODRÍGUEZ- ALMONACID et al., 2022). Como alternativa, os anticoagulantes heparina e citrato de sódio têm apresentado menores alterações nas análises clínicas do sangue de testudines (MURO et al., 1998; PERPIÑÁN et al., 2010; PHILLIPS et al., 2017; GARCIA et al., 2021). O anticoagulante mais utilizado em humanos e pequenos animais para transfusão sanguínea é o CPDA (Citrate Phosphate Dextrose Adenine) (NEVAREZ et al., 2011). Foi também utilizado em transfusões sanguíneas de Alligator mississippiensis e Terrapene carolina carolina (MEHALICK et al., 2007; NEVAREZ et al., 2011; LOUIS et al., 2020). A transfusão sanguínea em répteis é recomendada em casos de anemia severa, com sinais clínicos de descompensação (LOUIS et al., 2020). Os motivos mais comuns para indicação dessa terapêutica são: perda aguda de sangue decorrente de trauma, doença crônica severa ou infecciosa levando à anemia, além da estabilização para procedimentos cirúrgicos (CITAL e GOODNIGHT, 2016). Entretanto, ainda há pouca informação sobre o método mais adequado para realização de transfusão sanguínea nesses animais (HEATLEY e RUSSEL, 2019). Por conta da dificuldade para encontrar doadores e de poucos estudos sobre armazenamento do sangue a longo prazo, a transfusão sanguínea em 21 6 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ANDRADE, R. S. et al. Anatomia ultrassonográfica de fígado, baço e trato urogenital em jiboias. 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