2021

AMJAD ABU HASNA 

AÇÃO ANTIMICROBIANA, CITOTOXICIDADE, 

COMPOSIÇÃO QUÍMICA E RADIOPACIDADE DE 

CIMENTOS BIOCERÂMICOS REPARADORES 



 
 

   
 

AMJAD ABU HASNA 

 

 

 

 

 

 

AÇÃO ANTIMICROBIANA, CITOTOXICIDADE, COMPOSIÇÃO 

QUÍMICA E RADIOPACIDADE DE CIMENTOS BIOCERÂMICOS 

REPARADORES 

 

 

 

 

 

Tese apresentada ao Instituto de Ciência e Tecnologia, Universidade Estadual 

Paulista (Unesp), Campus de São José dos Campos, como parte dos requisitos 

para obtenção do título de DOUTOR, pelo Programa de Pós-Graduação em 

ODONTOLOGIA RESTAURADORA. 

Área: Endodontia. Linha de pesquisa: Estudos clínicos e laboratoriais de 

materiais e técnicas endodônticas. 

 

 

Orientador: Prof. Adj. Cláudio Antonio Talge Carvalho 

 

 

São José dos Campos 

2021



Instituto de Ciência e Tecnologia [internet]. Normalização de tese e dissertação
[acesso em 2022]. Disponível em http://www.ict.unesp.br/biblioteca/normalizacao

Apresentação gráfica e normalização de acordo com as normas estabelecidas pelo Serviço de
Normalização de Documentos da Seção Técnica de Referência e Atendimento ao Usuário e
Documentação (STRAUD).

Ficha catalográfica elaborada pela Biblioteca Prof. Achille Bassi e Seção Técnica de Informática, ICMC/USP 
 com adaptações - STATI, STRAUD e DTI do ICT/UNESP. 

 Renata Aparecida Couto Martins CRB-8/8376

Abu Hasna, Amjad
   ação antimicrobiana, citotoxicidade, composição química e radiopacidade de
cimentos biocerâmicos reparadores / Amjad Abu Hasna. - São José dos Campos :
[s.n.], 2021.
   83 f. : il.

   Tese (Doutorado em Odontologia Restauradora) - Pós-Graduação em Odontologia
Restauradora - Universidade Estadual Paulista (Unesp), Instituto de Ciência
e Tecnologia, São José dos Campos, 2021.
   Orientador: Cláudio Antonio Talge Carvalho.
   

   1. Ação antibiofilme. 2. Agregado trióxido mineral. 3. Citotoxicidade. 4.
Cinco óxidos minerais. 5. Composição química. I. Antonio Talge Carvalho,
Cláudio, orient. II. Universidade Estadual Paulista (Unesp), Instituto de
Ciência e Tecnologia, São José dos Campos. III. Universidade Estadual
Paulista 'Júlio de Mesquita Filho' - Unesp. IV. Universidade Estadual
Paulista (Unesp). V. Título.



 
 

   
 

BANCA EXAMINADORA 

 

Prof. Adj. Cláudio Antonio Talge Carvalho (Orientador) 

Universidade Estadual Paulista (Unesp) 

Instituto de Ciência e Tecnologia  

Campus de São José dos Campos 

 

Prof. Assoc. Jose Luiz da Silva Lage Marques 

Universidade de São Paulo (USP) 

Faculdade de Odontologia  

Campus de São Paulo 

 

Prof. Dr. Carlos Henrique Ferrari 

Centro Universitário Uningá 

Instituição Hodos Pós Graduação 

Campus Brasília  

 

Profa. Tit. Marcia Carneiro Valera 

Universidade Estadual Paulista (Unesp) 

Instituto de Ciência e Tecnologia  

Campus de São José dos Campos 

 

Profa. Adj. Ana Paula Martins Gomes  

Universidade Estadual Paulista (Unesp) 

Instituto de Ciência e Tecnologia  

Campus de São José dos Campos 

 

São José dos Campos, 06 de dezembro de 2021. 



 
 

   
 

DEDICATÓRIA  

 

 

Ao meu pai, in memoriam...? Não sei! Bom, tentar de novo:  

 

Ao meu pai, meu eterno herói, meu exemplo maior, meu homem grande, 

meu humano perfeito, ao homem que possui o rosto mais feliz da vida, ao 

homem que possui o sorriso mais franco, os sentimentos mais verdadeiros, a 

alma mais pura, o abraço mais carinhoso, ao meu primeiro e único amigo, meu 

pai, sorria pai, eu estou alcançando o nosso sonho.  

 

À minha mãe, esta mulher guerreira, que não cansa, que luta e faz o 

papel da mãe e do pai, que apoia sem fim, ama sem fim, e dá sem fim, te 

agradeço por ser quem você é.      

 

Aos meus irmãos Ahmed, Majed e Aboud que junto a mim formam os 

quatros pilares que sustentam a casa do meu pai.    

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 



 
 

   
 

AGRADECIMENTOS  

 

 

Aos meus amigos-irmãos pelos anos que vivemos juntos, Esteban Isaí 

Flores Orozco, por ser a primeira pessoa a me dar apoio, sem me conhecer, sem 

saber meu nome, sem saber quem sou eu, por pura bondade apenas. Obrigado 

por ser um amigo verdadeiro, e um irmão de outra mãe, obrigado pelas viagens 

compartilhadas, palestras em dupla, festas, atendimentos, obrigado por ser 

companheiro. Guilherme Schmitt de Andrade, o namorado da minha amiga, 

como gosto de falar para te irritar, meu irmão, você sabe quem é você na minha 

vida acadêmica e pessoal, admiro a pessoa que você é, continue voando. 

 

À minha amiga Daiane Pereira, a parceira, e a companheira, desde a 

época da especialização, e até hoje, não me largou, e espero que nunca largue. 

Nossos projetos sem fins virão. 

 

Às minhas colegas e amigas da pós-graduação, Rayana Durate 

Khoury, a primeira parceira, no mestrado, no PAADES, no doutorado, nas 

disciplinas, nos projetos, nos artigos, obrigado por ser companheira nisso tudo. 

A Cassia Cestari Toia, a minha linda amiga, parceira de projetos, a sonhadora 

como ninguém e merecida como ninguém, obrigado pelos anos que vivemos 

juntos, e por mais anos que vivermos. A Bruna e Giovanna, as últimas a entrar 

no grupo de amigos de endodontia, todos nós ganhamos com vocês, ganhamos 

duas amigas lindas e maravilhosas. Obrigado a todas vocês pelos momentos 

bons que passamos juntos. 



 
 

   
 

Ao meu amigo Carlos Henrique Ferrari, um colega, que se tornou 

amigo, irmão, parceiro, não é por nada, apenas por ele ser Carlos, a pessoa que 

ajuda sem esperar nada em troca, que se disponha por nada. 

 

À minha querida amiga Marina Gullo, minha primeira amiga da 

UNESP e do Brasil, a primeira a falar comigo Português e Inglês, a primeira a 

me apresentar para os colegas da restauradora, obrigado por fazer parte da 

minha jornada. 

 

Aos meus amigos, Ingrid e Mauro, o casal que me deu apoio desde o 

primeiro dia, o casal que esteve presente nos dias de conquistas batendo palmas 

para mim, e nos dias tristes dando apoio e compartilhando as forças, obrigado de 

coração. 

 

Ao casal mineiro mais perfeito, Jaiane e Ricardo, obrigado por fazerem 

parte da minha vida pessoal e profissional, obrigado por me ensinar tanto, 

obrigado por estarem ao meu lado nos momentos difíceis e nos tempos leves. 

 

Ao meu amigo, Amir, meu conterrâneo que compartilho com ele as boas 

lembranças da minha terra amada. Obrigado por fazer parte da minha jornada. 

 

Ao meu orientador, Prof. Adj. Cláudio Antonio Talge Carvalho, essa 

pessoa que tornou o doutorado uma viagem leve, um aprendizado gostoso, uma 

caminhada que eu com certeza farei de novo, obrigado pela orientação, apoio e 

amizade. 

 



 
 

   
 

À Profa. Tit. Marcia Carneiro Valera, a pessoa que não pode faltar na 

minha lista de agradecidos, desde o primeiro dia que me recebeu na UNESP 

com braços abertos, e me ensinou docência, me ensinou sobre a vida, corrigiu 

meu português, me ensinou a postura de um professor e pesquisador, me deu 

apoio e não largou mão, essa pessoa eu devo muito a ela do que eu me torno 

hoje, e não posso ser ingrato, só tenho que a agradecer. 

 

À Profa. Adj. Ana Paula Martins Gomes, a pessoa que torna tudo leve 

e gostoso, a pessoa que eu trabalhei muito pouco junto, porém a que marcou 

muito a minha vida pessoal e profissional, a pessoa que não pode faltar na minha 

banca da defesa. 

 

À Profa. Adj. Luciane Dias de Oliveira, a pessoa mais alegre da 

faculdade, a mais produtiva, prima de coração, agradeço por disponibilizar os 

seus laboratórios para eu executar este trabalho, agradeço a parceira nos projetos 

e nos artigos, muitos ainda para sair. Você é uma das pessoas que farão falta na 

minha banca. 

 

Ao Prof. Adj. Cesar Rogério Pucci, o professor que deu total apoio para 

mim até saírem os nossos primeiros artigos, e que se tornou depois um amigo e 

parceiro, estou muito grato pela amizade. E ao Prof. Adj. Eduardo Bresciani, 

que faz falta na minha banca, mas a pessoa que eu mais admiro. Obrigado pelo 

apoio e pela amizade. 

 

Ao Prof. Adj. José Luiz Lage Marques, o meu exemplo profissional 

com sua postura como professor, pesquisador e clínico. Agradeço todos os 



 
 

   
 

ensinamentos passados durante o curso de especialização, e agradeço por aceitar 

fazer parte da minha banca.   

 

Aos meus colegas, as professoras Bruna, Mirian, e Taty, e o professor 

Enrico que fazem meus dias mais leves, e fazem parte da minha vida 

profissional e pessoal, obrigado por tudo de coração.  

 

Às minhas alunas, as pessoas que entraram há pouco tempo na minha 

vida, mas a tornaram alegre, a minha favorita Lara, meu orgulho imensurável. 

As preferidas, Marina, Luma, Nathalia Marchetti e Nathalia Oliveira, vocês 

são muito especiais na minha vida, tenho orgulho de cada uma de vocês. 

 

Às minhas queridas orientadas, Alana, a pessoa que entrou na minha 

vida e a marcou; e a Larissa Marques, Marcelle Simões e Ana Luisa 

Theodoro, obrigado por me permitirem ser coorientador dos seus trabalhos, e 

obrigado por se tornarem amigas e colegas de profissão.  

 

Aos meus amigos, Lucas de Paula Ramos e Tiago Moreira, obrigado 

pela parceria e todo apoio na execução do trabalho, sem vocês esse trabalho não 

seria concluído. 

 

Ao Prof. Adj. Sérgio Lúcio Pereira de Castro Lopes, obrigado pelo 

apoio e parceira na execução do trabalho. 

 



 
 

   
 

Aos colegas Carolina, Caroline, Felipe, Fernando, Gustavo e Thaís, e 

ex-colegas de pós-graduação Tatiane Sampaio Bittencourt, Diego Rabello, e 

Miguel Christian Castillo, obrigado pela amizade. 

 

À Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho” - Unesp, 

Instituto de Ciência e Tecnologia de São José dos Campos.  

 

Ao Programa de Pós-graduação em Odontologia Restauradora, na pessoa 

do coordenador Prof. Adj. Alexandre Luiz Souto Borges. Aos docentes do 

Programa de Pós-graduação em Odontologia Restauradora. Agradeço pela 

oportunidade de ser um discente do programa. 

 

À CAPES pela concessão de bolsa.  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 



 
 

   
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

“Felizmente, eu ando na montanha e 

olho de cima para as nuvens em baixo” 

 

Mahmoud Darwish 



 

SUMÁRIO 
 
 
 

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS......................................................12 
 
RESUMO...........................................................................................................13 
 
ABSTRACT.......................................................................................................14 
 
1 INTRODUÇÃO..............................................................................................15 
 
2 REVISÃO DE LITERATURA.....................................................................19 
 
2.1 Agregado trióxido mineral "MTA"..........................................................19 
 
2.1.1 Ação antimicrobiana do MTA................................................................20 
 
2.1.2 Citotoxicidade do MTA...........................................................................21 
 
2.1.3 Composição química e radiopacidade do MTA....................................23 
 
2.2 Agregado trióxido mineral reparador de alta plasticidade.....................25 
 
2.3 Cimento de cinco óxidos minerais “5MO” ...............................................26 
 
3 PROPOSIÇÃO................................................................................................29 
 
4 MATERIAL E MÉTODOS...........................................................................30 
 
4.1 Avaliação da ação antimicrobiana dos cimentos......................................30 
 
4.1.1 Determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e 
concentração microbicida mínima (CMM) dos grupos experimentais........30 
 
4.1.2 Avaliação da atividade antibiofilme dos grupos experimentais pelo 
teste de MTT......................................................................................................33 
 
4.2 Avaliação da citotoxicidade dos grupos experimentais............................33 
 
4.3 Avaliação da composição química dos cimentos biocerâmicos...............38 
 
4.3.1 Análise dispersiva de energia por raio X (EDAX) e microscopia 
eletrônica de varredura (MEV) ...................................................................... 38 
 
4.3.2 Difração de raios-X...................................................................................40 
 
4.4 Avaliação da radiopacidade dos cimentos biocerâmico ..........................40 
 
4.5 Análise estatística.........................................................................................42 



 
5 RESULTADO.................................................................................................43 
 
5.1 Avaliação antimicrobiana dos cimentos....................................................43 
 
5.1.1 CIM e CMM dos cimentos.......................................................................43 
 
5.1.2 A viabilidade celular dos microrganismos em biofilmes pelo teste de  
MTT....................................................................................................................43 
 
5.2 A citotoxicidade pelo teste de MTT........................................................... 46 
 
5.3 Avaliação da composição química dos cimentos biocerâmico.................50 
 
5.3.1 Análise dispersiva de energia por raio X (EDAX) e microscopia 
eletrônica de varredura (MEV)........................................................................50 
 
5.3.2 Difração de raio X (DRX)........................................................................57 
 
5.4 Avaliação da radiopacidade dos cimentos biocerâmico...........................58 
 
6 DISCUSSÃO...................................................................................................60 
 
7 CONCLUSÃO.................................................................................................66 
 
REFERÊNCIAS.................................................................................................67 



 
 

   
 

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS 

 

 

5MO  Cinco óxidos minerais 

Ca(OH)2  Hidróxido de cálcio 

CIM Concentração inibitória mínima  

CMM Concentração microbicida mínima  

DMSO Dimetilsulfóxido 

DMEM Dulbecco's modified Eagle medium 

DO Densidade óptica 

DRX Difração de raios-X 

EDS/ EDAX Espectroscopia de raios-X por dispersão em energia  

MEV Microscopia eletrônica de varredura  

MTA  Agregado trióxido mineral 

MTA HP Agregado trióxido mineral reparador de alta plasticidade 

(Mineral Trioxide Aggregate Repair HP) 

NaCl Solução fisiológica  

NaOCl Hipoclorito de sódio 

PBS tampão fosfato-salino 

SFB Soro fetal bovino 

solução de MTT  3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5- Diphenyltetrazolium 

Bromide 

 

 

 

 

 

 



 
 

   
 

Abu Hasna A. Ação antimicrobiana, citotoxicidade, composição química e 

radiopacidade de cimentos biocerâmicos reparadores [tese]. São José dos 

Campos (SP): Universidade Estadual Paulista (Unesp), Instituto de Ciência e 

Tecnologia; 2021. 

 

 

RESUMO 

 

 

Os cimentos biocerâmicos possuem diversas aplicações clinicas na área de 

endodontia. Este estudo teve como objetivo avaliar a ação antimicrobiana do 

cimento de cinco óxidos minerais “5MO”, do agregado trióxido mineral “MTA” 

que já é um material consagrado, como também do agregado trióxido mineral 

reparador de alta plasticidade “MTA HP”, e comparar a capacidade dos mesmos 

na eliminação de microrganismos anaeróbios, comumente encontrados em 

infecções endodônticas primárias por meio de teste de MTT; avaliar e comparar 

também a biocompatibilidade dos mesmos através testes de citotoxicidade de 

MTT sobre cultura de macrófagos de camundongos (RAW 264.7) e osteoblastos 

(MG-63); avaliar a composição química dos mesmos através da microscopia 

eletrônica de varredura “MEV”  acoplada a  espectroscopia de raios X por 

dispersão em energia “EDS ou EDAX” e avaliar a fase por difração de raios-

X “DRX”; além de avaliar a sua radiopacidade. Neste estudo, foi observada a 

atividade antibiofilme efetiva dos grupos experimentais sobre alguns 

microrganismos anaeróbios incluindo Porphyromonas gingivalis, 

Porphyromonas endodontalis, Parvimonas micra, Fusobacterium nucleatum e 

Prevotella intermedia, por outro lado, os mesmos foram biocompatíveis sobre os 

macrófagos e osteoblastos após 5 min de contato. Além disso, foram 

encontrados principais componentes químicos em que a presença de titânio, 

enxofre e potássio e a ausência de tungstênio no 5MO o torna diferente do MTA 

e do MTA HP, e a presença de estrôncio no MTA HP o torna diferente do 5MO 

e do MTA. Todos os biocerâmicos avaliados apresentaram uma radiopacidade 

adequada para serem utilizados clínicamente de acordo com o protocolo para 

radiopacidade de materiais dentários, publicado pela International Standards 

Organization (ISO). Sendo assim, os cimentos biocerâmicos 5MO, MTA HP, e 

MTA possuem ação antimicrobiana efetiva contra todos os microrganismos 

anaeróbios analisados, são biocompatíveis, possuem componentes químicos em 

comum, e possuem radiopacidade adequada para o uso clínico de material 

dentário. 

 

 

Palavras-chave: Ação antibiofilme. Agregado trióxido mineral. Cinco óxidos 

minerais. Citotoxicidade. Composição química. Radiopacidade. 



 
 

   
 

Abu Hasna A. Antimicrobial action, cytotoxicity, chemical composition and 

radiopacity of reparative bioceramic cement. [doctorate thesis]. São José dos 

Campos (SP): São Paulo State University (Unesp), Institute of Science and 

Technology; 2021. 

 

 

ABSTRACT 

 

 

Bioceramic cements have several clinical applications in endodontics. This 

study aimed to evaluate the antimicrobial action of the cement of five mineral 

oxides "5MO", mineral trioxide aggregate "MTA" which is already an 

established material, as well as the mineral trioxide aggregate repair high 

plasticity "MTA HP", and to compare their ability to eliminate anaerobic 

microorganisms, commonly found in primary endodontic infections by means of 

MTT test; to evaluate and compare their biocompatibility through MTT 

cytotoxicity tests on mouse macrophage cultures (RAW 264.7) and osteoblasts 

(MG-63); evaluate their chemical composition through scanning electron 

microscopy “SEM” coupled with energy dispersion X-ray spectroscopy “EDS 

or EDAX” and evaluate the phase by X-ray diffraction “XRD”; in addition to 

evaluating its radiopacity. In this study, all tested bioceramic cements were 

effective over some anaerobic microorganisms including Porphyromonas 

gingivalis, Porphyromonas endodontalis, Parvimonas micra, Fusobacterium 

nucleatum and Prevotella intermedia, on the other hand, they were 

biocompatible on macrophages and osteoblasts after 5 minutes of contact. In 

addition, main chemical components were found in which the presence of 

titanium, sulfur and potassium and the absence of tungsten in 5MO makes it 

different from MTA and MTA HP, and the presence of strontium in MTA HP 

makes it different from 5MO and MTA. All evaluated bioceramic cements 

presented adequate radiopacity to be used clinically according to the protocol 

for radiopacity of dental materials, published by the International Standards 

Organization (ISO). Thus, 5MO, MTA HP, and MTA bioceramic cements have 

effective antimicrobial action against all tested anaerobic microorganisms, are 

biocompatible, have chemical components in common, and have adequate 

radiopacity for the clinical use of dental material. 

 

 

Keywords: Anti-biofilm action. Mineral trioxide aggregate. Five mineral oxides. 

Cytotoxicity. Chemical composition. Radiopacity. 

 

 

 



15 

 

   
 

1 INTRODUÇÃO 

 

 

O tratamento endodôntico conservador visa proteger a polpa exposta 

através da indução da formação de dentina secundária (Pincemaille, 1950) 

considerando a capacidade de tecido pulpar inflamado em regenerar e formar 

um tecido mineralizado (Bubenik, 1954) aplicando o conceito chamado 

“capeamento pulpar” (Nyborg, 1955) que é uma técnica conhecida desde o 

século XVIII como a aplicação de um material não irritante sobre uma polpa 

ferida para desinflamar o tecido pulpar (not stirring up the fire) e manter o dente 

funcional (Barrett, 1877), acreditando-se que a pressão criada ao cobrir a polpa 

agredida com um material bioativo apresentaria um efeito fundamental no 

reparo da mesma (Kalnins, 1957). 

Na endodontia contemporânea, o capeamento pode ser indireto sobre 

uma estrutura fina de dentina sem exposição pulpar, ou direto sobre uma polpa 

exposta (Swift, Trope, 1999). Por outro lado, a pulpotomia é a remoção da polpa 

coronária mantendo a polpa radicular (Tobin, 1946). Todos esses procedimentos 

encaixam-se sob a técnica de apicogênese visando o desenvolvimento 

fisiológico contínuo e a formação final da raiz de dentes com rizogênese 

incompleta que possuem uma polpa viva que sofreu alguma irritação patológica 

(Tenca, Tsamtsouris, 1978). 

Já para a polpa necrosada, apicificação é a técnica de escolha, na qual 

um dente permanente imaturo não vital, que perdeu sua capacidade de 

desenvolvimento radicular, é induzido a formar uma barreira calcificada 

(Torabinejad, Walton, 2009). Por outro lado, outra técnica mais contemporânea 

está ganhando um espaço aumentado na endodontia regenerativa, é conhecida 

como revascularização visando o restabelecimento da vascularização no espaço 

pulpar após lesões traumáticas (Andreasen et al., 2018) por meio da aplicação de 



16 

 

   
 

um material bioativo sobre um coágulo sanguíneo estimulado (Iwaya et al., 

2001), visando restaurar a vascularização (Huang, Lin, 2008), permitindo assim 

a diferenciação de células tronco a formar tecidos igual a dentina (Torabinejad, 

Walton, 2009). 

O agregado trióxido mineral “MTA” é um material reparador bioativo 

derivado do cimento de Portland (Torabinejad, 1993), que tem sido efetivo em 

vários procedimentos clínicos como um material reparador e regenerador, 

servindo efetivamente em diversas situações clínicas de apicogênese incluindo o 

capeamento pulpar e como material reparador em casos de ápice incompleto 

onde necessita de tratamento endodôntico parcial (pulpotomia) (Dammaschke et 

al., 2010; Moradi et al., 2006; Linsuwanont et al., 2017), além disso, é indicado 

para a mesma finalidade em casos de polpa necrosada, tanto para apicificação 

(Linsuwanont et al., 2018) quanto para revascularização pulpar (Saeki et al., 

2014; Yadav et al., 2015). Uma outra aplicação do MTA é como material de 

selamento de perfurações laterais e em furcas (Alsulaimani, 2018; Lee et al., 

1993). 

O MTA foi escolhido após décadas do uso do cimento de hidróxido de 

cálcio “Ca(OH)2” que foi amplamente estudado para avaliar a sua eficácia como 

material reparador no manejo de casos de rizogênese incompleta incluindo 

pulpotomia e capeamento pulpar apresentando resultados interessantes (Cvek, 

1972; Schröder, 1972). O Ca(OH)2 foi o material de escolha após vários estudos 

que aprovaram a sua ação regeneradora e reparadora (Cvek, 1972; Matsuzaki et 

al., 1990) até o surgimento do MTA. 

Uma novidade nesta área é o cimento de cinco óxidos minerais “5MO” 

que também é um material derivado do cimento de Portland, que foi 

desenvolvido para tratar vários tipos de acidentes e complicações endodônticas. 

O 5MO também demonstrou ser efetivo em casos de capeamento pulpar quando 

comparado ao cimento de Ca(OH)2 (Dycal) (Ala Rachi et al., 2014), sendo 



17 

 

   
 

interessante ampliar os estudos sobre este cimento inovador. Além do agregado 

trióxido mineral reparador de alta plasticidade (Mineral Trioxide Aggregate 

Repair HP) “MTA HP”, um cimento à base de silicato, de alta plasticidade e 

propriedades físicas aumentadas (Silva et al., 2016) com biocompatibilidade e 

biomineralização semelhante ao MTA (Cintra et al., 2017), apresentando 

também um grau adequado de compatibilidade celular com células-tronco da 

polpa dental humana (Tomás-Catalá et al., 2018).  

Os cimentos reparadores endodônticos têm demonstrado comportamento 

clínico eficiente comprovado em diversos estudos (Abu Hasna et al. 2020c, Ala 

Rachi et al., 2014; Al-Nahlawi et al., 2021; Alsulaimani, 2018; Cintra et al., 

2017; 2020ª; Matsuzaki et al., 1990), no entanto, a ação antimicrobiana destes 

materiais sobre bactérias de importância odontológica tem sido pouco explorada. 

A ação antimicrobiana é um fator extremamente relevante que deve ser avaliada 

devido a importância da desinfecção e de manter a assepsia da região selada 

com estes cimentos para garantir o sucesso do tratamento endodôntico (Delboni 

et al., 2017). É importante destacar que existe uma relação entre a infecção 

polimicrobiana dos canais radiculares, especialmente causada por bactérias 

anaeróbias estritas dos gêneros Fusobacterium, Parvimonas, Prevotella, 

Porphyromonas, Dialister e Treponema, e facultativas do gênero Streptococcus 

com os sinais e sintomas clínicos (Siqueira, Rôças, 2013). E mais 

especificamente, no perfil microbiano da infecção endodôntica primária foi 

observada a presença de diversos microrganismos anaeróbios Gram-positivos e 

Gram-negativos incluindo Porphyromonas gingivalis, Porphyromonas 

endodontalis, Parvimonas micra, Fusobacterium nucleatum e Prevotella 

intermedia entre outros (Machado et al., 2020), tornando-se assim importante 

estudar a ação antimicrobiana dos cimentos reparadores sobre estes 

microrganismos. 

Por outro lado, apesar do sucesso clínico apresentado pelo MTA, MTA 



18 

 

   
 

HP e 5MO (Ala Rachi et al., 2014; Alsulaimani, 2018; Cintra et al., 2017), ainda 

faltam estudos sobre a biocompatibilidade do MTA HP e 5MO sendo que a 

biocompatibilidade é de extrema importância e deve ser avaliada por ter efeito 

direto sobre o êxito desse tipo de tratamento endodôntico (Schweikl et al., 

2006). Portanto, o teste de citotoxicidade pode ser realizado para avaliar a 

atividade metabólica das células que ficarão em contato com os materiais 

(Camilleri, Pitt Ford, 2006; Williams, 2008; Peng et al., 2021). 

A composição química destes materiais é um outro fator relevante a ser 

explorado para entender o seu comportamento e a sua reação com os outros 

materiais (Khan et al., 2016). A composição química possui efeito direto no pH 

do material e nas substâncias que podem ser liberadas durante esta reação como 

íons de cálcio, arsênio e chumbo (Camilleri et al., 2012; Nassar et al., 2020; 

Sáez et al., 2017). Por outro lado, a composição química dos cimentos afeta 

diversas propriedades físicas como o tempo de cura ou endurecimento do 

material, a alteração cromática de dentes causada pelos cimentos, a 

radiopacidade dos cimentos para diferenciá-los radiograficamente de outros 

materiais e outras estruturas adjacentes (Ber et al., 2007; Borges et al., 2011; 

Guimarães et al., 2015), além de outras propriedades físicas como microdureza, 

capacidade de selamento e infiltração marginal (Aksel et al., 2018; Camargo et 

al., 2012). 

Diante do exposto, nota-se a necessidade de avaliar ação antimicrobiana, 

citotoxicidade, análise morfológica, composição química e radiopacidade do 

cimento 5MO, em comparação com os cimentos MTA HP e MTA.  Podendo, 

assim, contribuir com a comunidade acadêmica no uso de mais alternativas de 

cimentos reparadores que possam proporcionar resultados clínicos promissores. 

 



19 

 

   
 

2 REVISÃO DE LITERATURA 

 

 

2.1 Agregado trióxido mineral  

 

 

É um material reparador que foi lançado primeiramente em 1993 como 

um material de selamento de perfurações laterais da raiz dentária, comparado à 

amálgama e um cimento restaurador intermediário de óxido de zinco-eugenol 

(IRM) em que foi concluído que o MTA mostrou o melhor comportamento, a 

menor infiltração marginal e a menor tendência de extravasamento (Lee et al., 

1993). No mesmo ano e nos próximos dois anos, o MTA foi estudado como 

material de preenchimento da extremidade da raiz (plug) avaliando a sua 

capacidade de selamento, infiltração por corante, e a infiltração bacteriana 

respectivamente (Torabinejad et al., 1993, 1994, 1995d). Além disso, o MTA foi 

estudado amplamente depois avaliando a sua capacidade em fechamento das 

perfurações na região da furca (Ford et al., 1995), a sua adaptação marginal e 

suas propriedades físicas e químicas (Torabinejad et al., 1995a, 1995e). 

Os resultados positivos relatados nos últimos estudos por diversos 

autores chamaram a atenção ao MTA a ser estudado de forma mais extensa 

apresentando o MTA como material reparador novo, inventado pelo professor 

Mahmoud Torabinejad, tendo um grande impacto na prática endodôntica e 

melhorando a taxa de sucesso em todos os consultórios odontológicos 

mundialmente (Asgary et al., 2013) após a sua aprovação pela Administração de 

Alimentos e Medicamentos dos Estados Unidos Americanos (The United States 

Food and Drug Administration - FDA) em 1998 e o seu lançamento no mercado 

em 1999 primeiramente pela Dentsply Tulsa (Dentsply Tulsa, Johnson City, TN) 

com o nome ProRoot MTA nos Estados Unidos Americanos (Schmitt et al., 



20 

 

   
 

2001), e posteriormente no Brasil pela Angelus (Angelus, Londrina, Brasil) 

como nome comercial Angelus MTA em 2001 e sendo aprovado pela FDA em 

2011. 

 

 

2.1.1 Ação antimicrobiana do MTA 

 

 

A ação antimicrobiana do MTA foi avaliada sobre nove bactérias 

facultativas incluindo: Streptococcus faecalis, Streptococcus mitis, 

Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, Lactobacillus spp., 

Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Bacillus subtilis, e 

Escherichia coli B e sete bactérias anaeróbicas estritas incluindo: Prevotella 

buccae, Bacteroides fragilis, P. intermedia, Prevotella melaninogenica, 

Fusobacterium necrophorum, F. nucleatum e Peptostreptococcus anaerobius  

comparado à amálgama, óxido de zinco-eugenol (IRM) e Super EBA em que foi 

concluído que o MTA teve um efeito antibacteriano em algumas das bactérias 

facultativas e nenhum efeito em qualquer uma das bactérias anaeróbias estritas  

(Torabinejad et al., 1995b). 

Além disso, a ação antimicrobiana do MTA foi avaliada em comparação 

ao Ca(OH)2 sobre S. aureus, E. faecalis, P. aeruginosa, B. subtilis, e contra 

Candida albicans e o Ca(OH)2 mostrou-se mais efetivo (Estrela et al., 2000). 

Porém, (Al-Hezaimi et al., 2005) concluíram que o MTA tanto o nacional 

(Angelus) quanto o ProRoot apresentam um poder antimicrobiano efetivo contra 

S. mutans, Streptococcus sanguis e S. salivarius. Além disso, (Ribeiro et al., 

2010) concluíram que o MTA em condições aeróbicas provocou atividade 

antimicrobiana por indução de espécies reativas de oxigênio.  

Associar o MTA com outros materiais como óxido de zircônio (ZrO2), 



21 

 

   
 

pentóxido de niobio (Nb2O5), nanopartículas de hidroxiapatita (HAn) e 

nanopartículas de prata (AgNPs) foi relatado na literatura, aumentado assim a 

sua ação antimicrobiana (Guerreiro Tanomaru et al., 2014, 2016; Vazquez-

Garcia et al., 2016). 

(Prestegaard et al., 2014) avaliaram o efeito antimicrobiano do MTA 

sozinho sem outras associações comparado o Ca(OH)2 sobre E. faecalis 

verificando que o Ca(OH)2 foi mais efetivo. Além disso, outros estudos 

mostraram que o MTA como material reparador possui um poder 

antimicrobiano limitado (Farrugia et al., 2017) e não é eficaz contra biofilme de 

microcosmo multiespécies (Jardine et al., 2019). 

 

 

2.1.2 Citotoxicidade do MTA 

 

 

A citotoxicidade do MTA foi avaliada em comparação com a amálgama, 

óxido de zinco-eugenol IRM e Super EBA em que foi concluído que o MTA foi 

o menos tóxico seguido por amálgama, Super EBA e óxido de zinco-eugenol 

IRM sobre células L929 de camundongo (Torabinejad et al., 1995c). 

Comparando o efeito citotóxico dos mesmos materiais sobre fibroblastos de 

ligamento periodontal humano, o Super EBA e o MTA foram os menos tóxicos 

após exposição de 24 h (Keiser et al., 2000). Inversamente, um outro estudo 

avaliou o efeito do MTA, óxido de zinco-eugenol IRM, amálgama, e Retroplast 

sobre fibroblastos e macrófagos de camundongo e mostrou após 24 h resultados 

negativos, em que todos os materiais avaliados inibiram a proliferação celular 

(Haglund et al., 2003). De Deus et al. (2005) verificaram que a citotoxicidade do 

MTA diminui-se com o tempo permitindo o restabelecimento da cultura celular.  



22 

 

   
 

Diversos radiopacificadores foram adicionados ao MTA, assim a sua 

citotoxicidade foi estudada, em que o óxido de bismuto, o mais utilizado com o 

cimento de Portland, encontra-se biocompatível com as células imortalizadas do 

ligamento periodontal humano por 10 min (Kim et al., 2008) e com o tecido 

conjuntivo subcutâneo por 7 e 60 dias (Coutinho-Filho et al., 2008). Assim, 

outro estudo relatou a biocompatibilidade de pentóxido de nióbio (Nb2O5) 

como outro radiopacificador associado com o cimento de Portland (Silva et al., 

2015). 

Nos anos seguintes, diversos estudos relatados na literatura mostraram 

que o MTA não possui citotoxicidade ou um leve grau de citotoxicidade sobre 

diversas linhagens de células utilizando métodos de avaliação diferentes (Asgary 

et al., 2012; Chang et al., 2014; Saberi et al., 2016; Rodríguez-Lozano et al., 

2017; Yoshino et al., 2013). 

Porém, em um estudo mais recente sugeriu que existe um possível efeito 

citotóxico do MTA ao tecido pulpar quando há contato direto (Tsai et al., 2018), 

ainda, outro estudo revelou que o MTA possui um grau de citotoxicidade sobre 

células-tronco da polpa dentária (Youssef et al., 2019), porém sobre a mesma 

linhagem de células, um outro estudo mostrou que o MTA é biocompatível 

(Omidi et al., 2020). Assim, torna-se a necessário um estudo mais atual sobre a 

citotoxicidade do MTA sobre linhas diferentes de células humanos de interesse 

odontológico.  

 

 

 

 

 

 



23 

 

   
 

2.1.3 Composição química e radiopacidade do MTA  

 

 

Na patente do MTA foi descrito que o mesmo consiste em 50-75% (em 

peso) de óxido de cálcio e 15-25% de dióxido de silício. O óxido de bismuto foi 

adicionado para proporcionar radiopacidade ao material (Torabinejad, 1993), o 

mesmo autor e o inventor do MTA no seu primeiro estudo avaliando a 

composição química do MTA concluiu que o mesmo possui íons de cálcio e 

fósforo como moléculas principais e que o MTA é mais radiopaco do que Super-

EBA e óxido de zinco-eugenol IRM (Torabinejad et al., 1995a). 

O MTA é um cimento biocerâmico derivado do cimento de Portland, a 

diferença na composição química entre os dois é a presença do óxido de bismuto 

no MTA (Estrela et al., 2000). O MTA cinza foi a primeira versão lançada 

comercialmente (Schmitt et al., 2001) e causava um escurecimento dos dentes 

tratados, assim, sugeriu-se a criação e o lançamento de uma nova versão da cor 

do dente (tooth colored MTA) ou a conhecida comercialmente como a versão 

branca para evitar o potencial escurecimento do MTA cinza por motivos 

cosméticos (Holland et al., 2002). Porém, a composição química entre as duas 

versões, cinza e branca, é a mesma sem diferença significante exceto ao trióxido 

de alumínio (Al2O3), óxido de magnésio (MgO) e, especialmente, óxido de 

ferro (FeO) que se-encontram mais concentrados na MTA cinza (Asgary et al., 

2005).  

Não há diferença significativa na radiopacidade entre o MTA cinza e 

branco, porém, essa radiopacidade é maior do que a do cimento de Portland. 

Apesar da diferença na composição química entre as duas versões do MTA, e 

entre o MTA e o cimento de Portland (Islam et al., 2006). A composição 

química do MTA foi alterando como é observado nos estudos encontrados na 



24 

 

   
 

literatura, em que ausência de íons bismuto e presença de íons potássio eram as 

principais diferenças entre o MTA e o cimento de Portland, e a quantidade 

significativa de ferro encontrada no MTA cinza quando comparado ao MTA 

branco (Song et al., 2006). 

Essa diferença na composição entre o MTA e o cimento de Portland, 

chamou atenção dos pesquisadores de associar o óxido de bismuto ao cimento 

de Portland e avaliar os resultados, em que o primeiro estudo relatou que 

adicionar 20% de óxido de bismuto ao cimento de Portland tem maior potencial 

para ser usado como alternativa ao MTA (Kim et al., 2008). Outro estudo 

afirmou que ainda o MTA possui radiopacidade maior (Coutinho-Filho et al., 

2008) e que o MTA branco e o cimento Portland branco com óxido de bismuto 

15% apresentaram a radiopacidade necessária para um cimento endodôntico 

(Bueno et al., 2009) sugerindo assim essa associação como alternativa viável ao 

MTA (Hwang et al., 2009). 

Outros radiopacificadores, além do oxido de bismuto, foram sugeridos 

como sulfato de bário, dióxido de titânio, óxido de zinco, pó de ouro e liga de 

prata / estanho em que os melhores resultados forma encontrado com a liga de 

prata / estanho e o pó de ouro (Camilleri, Gandolfi 2010) e em outros estudos 

foram sugeridos o pentóxido de nióbio “Nb2O5” como radiopacificador 

alternativo (Mestieri et al., 2014), o óxido de zircônio (ZrO2) (Guerreiro 

Tanomaru et al., 2014), nanopartículas de hidroxiapatita (HAn) (Guerreiro 

Tanomaru et al., 2016) e nanopartículas de prata (AgNPs) (Vazquez-Garcia et 

al., 2016), em que todos apresentaram resultados promissores para a 

radiopacidade e as propriedades físicas e biológicas do cimento de Portland  

A composição química do MTA possui efeito direto no seu potencial de 

escurecimento, assim como o veículo que reage com o MTA (Guimarães et al., 

2015). Entretanto, mesmo com o surgimento do MTA branco ainda continuou a 



25 

 

   
 

causar escurecimento nos dentes tratados (Salem-Milani et al., 2017), por isso 

foi sugerida uma adição de óxido de zinco ZnO em várias concentrações a fim 

de inibir a alteração cromática dentária sem interferir na radiopacidade do MTA 

(Marciano et al., 2017).  

O veículo utilizado na manipulação do MTA possui efeito também na 

sua composição química, em que os precipitados formados após manipular com 

água destilada são principalmente o carbonato de cálcio e hidróxido de cálcio, 

enquanto o precipitado após manipular com a solução tampão fosfato-salina 

“PBS” foi o fosfato de cálcio amorfo (Han et al., 2010). Por outro lado, a técnica 

de manipulação manual ou mecânica também altera os precipitados formados 

(Basturk et al., 2018). 

 

 

2.2 Agregado trióxido mineral reparador de alta plasticidade “MTA HP” 

 

 

É uma nova versão do MTA que possui alta plasticidade segundo o 

fabricante. Segundo (Cintra et al., 2017), o MTA HP foi avaliado em 

comparação com os dois MTA convencionais, MTA Angelus e ProRoot MTA, 

sobre linhagem de fibroblastos L929 e o MTA HP apresentou 

biocompatibilidade semelhante ao MTA Angelus e aumento da viabilidade dos 

fibroblastos em comparação ao mesmo cimento após um período mais longo. 

Além disso, o efeito do MTA HP sobre a viabilidade celular das células-tronco 

da polpa dental humana demonstrou aumento adequado na viabilidade celular e 

a análise por MEV revelou um alto grau de proliferação e fixação celular 

comparado com várias versões do MTA (Tomás-Catalá et al., 2017). Em outro 

estudo realizado pela mesma equipe, e comparando o MTA HP com outros 



26 

 

cimentos biocerâmicos, concluiu-se que o MTA HP apresentou grau adequado 

de citotoxicidade com o mesmo tipo de células-tronco e com bom grau de 

migração celular (Tomás-Catalá et al., 2018). Outro estudo revelou que o MTA 

e MTA HP mantiveram a viabilidade celular de osteoblastos e além disso, pela 

análise do MEV foi observado um alto grau de proliferação celular (Ferreira et 

al., 2019). A sua ação antimicrobiana foi avaliada em comparação com outro 

cimento biocerâmico (iRoot BP Plus) sobre bactéria aeróbia e anaeróbia em que 

o último foi mais efetivo (ElReash et al., 2019). 
 

O MTA HP possui uma radiopacidade igual à do MTA convencional 

dada pela presença do radiopacificador tungstato de cálcio (Guimarães et al., 

2018; Ferreira et al., 2019). Além disso, é considerado como material bioativo 

devido à presença aumentada de aluminato de cálcio e a sua habilidade rápida e 

eficaz em formação de revestimento de superfície de fosfato de cálcio cristalino 

(Jiménez-Sánchez et al., 2019a, 2019b). 
 

Conforme o fabricante (Angelus), a principal diferença entre o MTA e 

MTA HP é na substituição da água destilada por um líquido que contém água e 

mais um plastificante orgânico que dá ao produto uma alta plasticidade e a 

substituição do radiopacificador (de Óxido de Bismuto para Tungstato de 

Cálcio), garantindo a ausência de descoloração dental. 
 
 
 

 

2.3 Cimento de cinco óxidos minerais “5MO” 
 
 
 
 

 

O 5MO é um cimento odontológico reparador desenvolvido para tratar 

todos os acidentes e complicações endodônticas. O 5MO mostrou eficiência em 

casos de capeamento pulpar comparado ao Ca(OH)2 Dycal. Este material é 

semelhante ao MTA (ProRoot), desenvolvido pelo Dr. Maysour Ala Rachi 



27 

 

   
 

(Número da patente Síria: 5770) (Ala Rachi et al., 2014). 

Poucos estudos na literatura foram desenvolvidos para investigar o 5MO 

e suas propriedades físicas, biológicas e químicas. Na literatura consultada, há 

dois relatos de casos clínicos utilizaram o 5MO como material de preenchimento 

da extremidade da raiz “plug” após realizar apicectomia. O primeiro caso de um 

dente adjacente de um odontoma complexo em que não foram observados sinais 

e sintomas de inflamação ao longo de doze meses de controle, porém, com 

neoformação óssea observada radiograficamente na região da lesão. Portanto, 

foi concluído que o 5MO parece ser um cimento biocerâmico eficaz com 

características reparadoras (Flores Orozco et al., 2019). O outro relato de caso é 

de um dente com perfuração lateral onde foi feita apicectomia e 

descontaminação com o auxílio da terapia fotodinâmica. Neste caso foi 

observada uma neoformação óssea na região periapical do dente e boa adaptação 

marginal após 12 meses e foi concluído que o 5MO é eficaz em induzir o reparo 

da lesão periapical e selamento da área periapical exposta do dente, sugerindo 

que o sucesso alcançado dependeu principalmente da desinfecção do canal 

radicular e do sítio cirúrgico alcançado com o auxílio da terapia fotodinâmica 

antimicrobiana usando o azul de metileno com fotossensibilizador junto com 

laser diodo de baixa potência (Abu Hasna et al., 2020c). 

O 5MO foi comparado ao MTA como material de capeamento pulpar em 

96 dentes anteriores de cães saudáveis. Ambos os materiais de capeamento 

pulpar foram utilizados nas cavidades classe V que foram preparadas nos dentes. 

Após a exposição da polpa, os materiais de capeamento pulpar foram aplicados 

diretamente na polpa exposta. Após 7 e 90 dias, os animais foram sacrificados e 

os espécimes foram examinados em microscópio óptico de luz para estimar a 

quantidade de inflamação pulpar e formação de dentina na interface do material 

de capeamento. Não houve diferença significativa entre os materiais MTA e 

5MO em termos de resposta pulpar, formação de tecido duro e preservação de 



28 

 

   
 

tecido pulpar normal. Pela avaliação histológica: após 7 dias de capeamento 

pulpar direto, ambos os grupos apresentam inflamação severa e moderada, sem 

formação de dentina. Após 90 dias de capeamento pulpar direto, uma ponte 

calcificada foi formada diretamente abaixo do material de capeamento no local 

da lesão em ambos os grupos MTA e 5MO; ambos os grupos não mostraram 

sinais de inflamação. Sendo assim, foi concluído que não há diferença 

significativa entre MTA e 5MO quando usado como material de capeamento 

pulpar direto (Darweesh et al., 2020). 

Em outro relato de caso mais recente, o 5MO foi testado com material 

para preenchimento de duas perfurações (furca e broca de pino) de canal 

radicular e induzir cicatrização clínica e radiográfica nos tecidos periodontais 

com / sem o uso de matriz esponjosa de colágeno, o 5MI foi efetivo em ambos 

os casos após acompanhamento de três anos (Al-Nahlawi et al., 2021). 

 

 



29 

 

   
 

3 PROPOSIÇÃO 

 

 

Este trabalho teve como objetivo avaliar os cimentos 5MO, MTA HP e 

MTA quanto:   

 

a) ação antimicrobiana sobre bactérias anaeróbias de interesse 

endodôntico: P. gingivalis, P. endodontalis, P. micra, F. nucleatum e 

P. intermedia na forma planctônica e em biofilme;  

b) citotoxicidade utilizando cultura de macrófagos de camundongos 

(RAW 264.7) e osteoblastos (Mg-63); 

c) análise morfológica por meio da MEV; 

d) análise da composição química e estrutura por meio de EDS/EDAX e 

avaliação da fase por DRX; 

e) análise da radiopacidade. 

 



30 

 

   
 

4 MATERIAL E MÉTODOS 

 

 

4.1 Avaliação antimicrobiana dos cimentos 

 

 

4.1.1 Determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e 

concentração microbicida mínima (CMM) dos grupos experimentais 

 

 

Cinco cepas diferentes de P. gingivalis (ATCC 33277), P. endodontalis 

(ATCC 35406), P. micra (ATCC 23195), F. nucleatum (ATCC 25586) e P. 

intermedia (ATCC 33563). Os inóculos preparados a partir do crescimento de 

cultura de 24 h incubadas em câmara de anaerobiose Whitley DG250 

Workstation (Don Whitley Scientific Limited, West Yorkshire, BD17 7SE, Reino 

Unido) em ágar Brucella (Himedia, Mumbai, Índia) enriquecido com sangue. Os 

inóculos foram padronizados em espectrofotômetro (Espectrofotômetro visível 

V-5000, Shanghai Metash Instruments Co., Ltd, China) (1 × 108 cells / mL), 

sendo que a densidade óptica foi 600 nm para todos e o comprimento da onda 

foi 0,80 nm para todos os microrganismos exceto ao F. nucleatum que foi 1,0 

nm. 

Os grupos experimentais foram: I) solução salina (grupo controle 

negativo) (Eurofarma, São Paulo, SP, Brasil); II) hipoclorito de sódio “NaOCl” 

2,5% (Biodinâmica, Ibiporã, PR, Brasil) (grupo controle positivo); III) 5MO 

(Golden Yatti LLC Muscat, Omã) que foi manipulado conforme as instruções do 

fabricante (Quadro 1) na proporção 0,085 g pó / 0,25 ml líquido 

(aproximadamente 3×Pó : 1×líquido); IV) MTA HP (Angelus, Londrina, Brasil) 

que foi manipulado conforme as instruções do fabricante (Quadro 1) na 



31 

 

   
 

proporção 0,085 g pó / 0,25 ml líquido (aproximadamente 3×Pó : 1×líquido); e 

V) MTA (Angelus, Londrina, Brasil) foi manipulado conforme as instruções do 

fabricante (Quadro 1) na proporção 0,085 g pó / 0,25 ml líquido 

(aproximadamente 3×Pó : 1×líquido). 

 

 

Quadro 1 - A composição química dos cimentos testados conforme o fabricante 

 

Material  Fabricante  Composição  

5MO (Golden Yatti LLC 

Muscat, Omã) 

CaO, SiO2, TiO2, Al2O3 e MgO 

MTA HP Angelus Indústria 

de Produtos 

Odontológicos S/A 

A diferença entre o MTA e o MTA HP está 

na substituição da água destilada por um 

líquido que contém água e outro plastificante 

orgânico que confere ao produto alta 

plasticidade. A substituição do 

radiopacificador (de Óxido de Bismuto por 

Tungstato de Cálcio), garantindo o 

ausência de descoloração dentária. 

MTA Angelus Indústria 

de Produtos 

Odontológicos S/A 

SiO2, K2O, Al2O3, Na2O, Fe2O3, SO3, 

CaO, Bi2O3, MgO. 

Fonte: Elaborado pelo autor. 

 

 

Para a determinação da CIM dos grupos experimentais foi utilizado o 

método de microdiluição em caldo, segundo Clinical and Laboratory Standards 

Institute (CLSI), norma M11-A7 (Patel et al., 2015). O teste foi realizado em 

microplacas de 96 poços (TPP, Zollstrasse, Suíça), onde foram adicionados 100 



32 

 

   
 

µL/ de meio de cultura (caldo Brucella) (Himedia, Mumbai, Índia) por poço. 

No primeiro poço de cada fileira, foram adicionados os discos dos 

cimentos manipulados conforme as instruções dos fabricantes, e nos grupos 

controles foram adicionados 100 µL de NaOCl 2.5% ou de solução salina 

estéril. Foi realizada a maceração dos cimentos relativos aos grupos 

experimentais com o meio de cultura, de onde partiram uma série de 10 

diluições seriadas de todos os grupos experimentais. Logo em seguida, 100 µL 

dos inóculos padronizados foram adicionados em cada poço, e as placas foram 

incubadas por 24 h em anaerobiose a 37°C. A CIM foi determinada quando não 

apresentava turvações que indicassem crescimento microbiano.  

 

 

4.1.2 Avaliação da atividade antibiofilme dos grupos experimentais pelo 

teste de MTT 

 

 

Foi avaliada a ação dos cimentos sobre os biofilmes monotípicos dos 

mesmos microrganismos utilizados anteriormente. Cinco inóculos diferentes 

foram preparados e padronizados em espectrofotômetro (1 × 108 UFC / mL) em 

solução fisiológica (NaCl 0,9%) (Eurofarma, São Paulo, SP, Brasil). Depois, em 

microplacas de 96 poços, foram adicionados em cada poço 100 µL de inóculo 

correspondente. Em seguida, as placas foram submetidas à incubação (37°C) sob 

agitação (75 rpm) por 90 min. Posteriormente, o sobrenadante foi descartado, e 

foram adicionados 100 µL de caldo Brucella e as placas foram incubadas (37°C) 

por 7 dias em anaerobiose, com substituição do meio de cultura a cada 48 hs. 

Passado o período de formação de cada biofilme, estes foram colocados em 

contato com os materiais a serem avaliados por período de 24 h incubados 

(37°C) em anaerobiose. Posteriormente, foi realizado o teste de mensuração do 



33 

 

   
 

biofilme (MTT). Foram realizados 2 experimentos independentes, com 5 

repetições cada, totalizando n=10 para cada grupo experimental.  

Após contato com materiais de acordo com os grupos experimentais, o 

biofilme foi preparado para o teste de MTT. Para isso, foram adicionados 100 

µL de solução de MTT “3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5- Diphenyltetrazolium 

Bromide” (Sigma-Aldrich, Missouri - USA), a placa foi incubada ao abrigo da 

luz por 1 h em câmara de anaerobiose a 37ºC. Passado o período de incubação, 

foi retirada a solução de MTT e adicionado 100 µL de Dimetilsulfóxido 

“DMSO” (Sigma-Aldrich, Saint Louis, USA) e a placa foi novamente incubada 

a 37ºC em estufa por 10 min e colocada no agitador constante por 10 min. Após 

isso, a placa foi lida em leitora de microplaca em 570 nm (BIO-TEK 

INSTRUMENTS, INC. Highland Park Winooski, Vermont, EUA). As 

densidades ópticas “DO” obtidas foram convertidas em percentual de 

viabilidade das células do microrganismo, pela fórmula:  

 

% Viabilidade = (DO Grupo Tratado × 100) / Média DO Grupo Controle) 

 

 

4.2 Avaliação da citotoxicidade dos grupos experimentais  

 

 

A avaliação da citotoxicidade dos grupos experimentais foi realizada por 

meio do teste colorimétrico MTT, que analisa a atividade mitocondrial celular, 

após contato com os meios condicionados por 5 min e 24 h. Para tanto, foram 

utilizadas culturas de macrófagos de camundongos (RAW 264.7) (Rio de 

Janeiro Cell Bank -APABCAM – RJ, Brasil) e osteoblastos (MG-63) (Rio de 

Janeiro Cell Bank -APABCAM – RJ, Brasil). 

Após descongelamento, as células foram mantidas em frascos de cultivo 



34 

 

   
 

celular (TPP, Zollstrasse, Suíça), cultivadas em meio de Dulbecco's modified 

Eagle medium “DMEM” (LGC Biotecnologia, Cotia, Brasil) suplementado com 

10% de soro fetal bovino “SFB” (Invitrogen, New York, EUA), incubadas em 

estufa à temperatura de 37°C, com umidade atmosférica, com 5% de CO2. Foi 

realizada troca do meio de cultura a cada 48 h e quando fosse observado estado 

de subconfluência das células, caracterizado pela ocupação de mais de 70% do 

frasco (Figura 1), as células eram transferidas para outro frasco celular.  

Para utilização nos testes, a monocamada de células foi desagregada do 

fundo do frasco de cultura com 0,25% de ácido tripsina-

etilenodiaminotetracético (Cultilab, Campinas, SP, Brasil). Em seguida, as 

células foram ressuspendidas em meio DMEM + 10% SFB e transferidas para 

um tubo tipo falcon onde foram centrifugadas por 5 min à 2000 rpm. A 

quantificação do número de células viáveis foi realizada pelo teste de exclusão 

com azul de Trypan (0,4%, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, EUA). 

 

 

Figura 1 - As células em meio DMEM observadas em microscópio óptico.  

 

 

Legenda: Lado esquerdo: macrófagos, lado direto: osteoblastos.  

Fonte: Elaborada pelo autor. 



35 

 

   
 

Após cultivo celular, em microplacas de 96 poços foram adicionados 200 

µL de meio DMEM e suplementado com 10% de SFB contendo 2 x 104 células 

viáveis. Estas placas foram incubadas (37°C, com 5% de CO2) por 24 h para que 

ocorresse aderência celular (Figura 2). 

Em seguida, o sobrenadante foi descartado, as células foram lavadas com 

PBS. Foram utilizados poços-controles, contendo apenas células com meio de 

cultura. O período de incubação foi de 5 min e 24 h. O número de poços foi 

igual a 10 para todos os grupos. 

 

 

Figura 2 – Placa de 96 poços contendo meio de cultivo com células 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 

 

 

Para preparo de cimentos biocerâmicos, os mesmos foram manipulados 

numa placa de 24 poços onde 100 mg de cada cimento foi manipulado com a 

quantidade certa do próprio líquido seguindo as instruções do fabricante. Já no 

grupo Ca(OH)2 (Biodinâmica Química e Farmacêutica LTDA, Paraná, Brasil) 



36 

 

   
 

foi a considerada a proposição (1:1) (pó: líquido). O grupo do Ca(OH)2 foi 

acrescentado nesse teste devido a sua biocompatibilidade para servir como 

grupo de controle positivo e foi manipulado com água destilada. 

Transcorridos os períodos após a espatulação dos materiais, cada poço 

contendo os cimentos, foi preenchido com 2 mL do meio de cultura (DMEM) 

suplementado com soro fetal bovino a 10% e as placas permaneceram em estufa 

com 5% CO2 a 37°C por 24 h (Figura 3). A quantidade de 100 µL do meio 

tratado em contato com cada cimento por poço foi aplicada. O grupo de NaOCl 

foi utilizado como grupo de controle. 

 

 

Figura 3 - Os cimentos manipulados e incubados com 2 mL de meio DMEM.  

 

 

A coluna esquerda mostra os cimentos manipulados e o meio de cultura aplicado sobre os mesmos. A 

coluna direita mostra somente os cimentos após remoção do meio de cultura  

Fonte: Elaborada pelo autor. 

 



37 

 

   
 

Para verificação da viabilidade da cultura, foi realizada análise da 

atividade mitocondrial das células viáveis pelo método de redução do brometo 

de 3(4,5-dimetiltiazol-2-yl)2,5-difeniltetrazólio (MTT) em formazina. A solução 

de MTT foi preparada a partir da suspensão de 0,5 mg do pó de MTT (Sigma 

Aldrich Co., Alemanha) em 1 mL de PBS estéril (Cultilab, Campinas, SP, 

Brasil). 

Foram adicionados 100 µL da solução de MTT por poço e as placas 

foram incubadas (37°C, com 5% de CO2) por 1 h, abrigadas da luz. 

Posteriormente, esta solução foi descartada e foram adicionados 100 µL de 

dimetilsulfóxido (DMSO – Sigma) por poço para expor os cristais de formazina 

produzidos, após absorção do sal de MTT, por células viáveis (Figura 4). 

 

 

Figura 4 - DMSO aplicado para expor os cristais de formazina produzidos, após 

absorção do sal de MTT, por células viáveis 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 



38 

 

   
 

Após incubação de 10 min e agitação em shaker, por igual período, a 

absorbância dos poços foi lida em leitora de microplacas com comprimento de 

onda de 570 nm. As densidades ópticas (DO) obtidas foram convertidas em 

percentual de viabilidade celular empregando-se a seguinte fórmula:  

 

% Viabilidade = (DO Grupo Tratado × 100) / Média DO Grupo Controle) 

 

 

4.3 Avaliação morfológica e da composição química dos cimentos 

biocerâmicos  

 

 

4.3.1 Análise dispersiva de energia por raio X (EDAX) e microscopia 

eletrônica de varredura (MEV)  

 

 

A composição química foi determinada por análise dispersiva de energia 

por raio X (EDAX) também conhecida como (EDS ou EDX) por MEV 

(MIRA3-TESCA, Brno-Kohoutovice, Czech Republic). Esta análise foi feita 

primeiramente para o pó de cada cimento biocerâmico (5MO, MTA HP e MTA) 

em que uma fina camada de pó de cada cimento foi dispersa sobre uma placa de 

polimetilmetacrilato montada em um stub de alumínio. O EDAX foi usado para 

determinar os elementos componentes dos cimentos. 

Posteriormente, foi feita análise morfológica dos cimentos biocerâmicos 

em forma de pó, e em forma de discos dos cimentos manipulados conforme as 

instruções dos fabricantes. Os cimentos foram compactados entre duas placas de 

vidro em moldes de silicone de (5 mm × 2 mm) até o total endurecimento dos 

cimentos. Após, os cimentos foram colocados em placas de Petri e guardados na 



39 

 

   
 

estufa em umidade 100% por 3 dias a 37 °C, quando foram tratados de uma das 

seguintes formas: 

a) Mantidos com umidade de 100% a 37 °C (controle). 

b) Imersos em água destilada por 4 h seguido por secagem ao ar por 12 h. 

Logo em seguida, os discos foram montados em um aluminum stub, e 

todos os stubs (três de pó de cada cimento, três de discos controle, três de discos 

imersos em água) foram revestidos com carbono para condutividade elétrica. As 

amostras foram visualizadas em MEV (Figura 5). 

 

 

Figura 5 - Imagens ilustrativas dos discos visualizados em MEV de esquerda 

para direita (5MO, MTA HP, MTA), respectivamente 

   

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 

 

 

Imagens dos diferentes componentes da microestrutura do material em 

diferentes ampliações no modo de retroespalhamento de elétrons foram 

capturadas com uma ampliação de até 5k, 10k, 20k, 50k × e a espectroscopia de 

energia dispersiva das diferentes fases foi realizada. 

 



40 

 

   
 

4.3.2 Difração de raio X (DRX) 

 

 

A análise de fase foi realizada usando difração de raios X (DRX) em um 

difratômetro automatizado de pó de cada grupo experimental usando radiação 

Cu Kα e um monocromador de cristal secundário. As amostras foram 

apresentadas na forma de pó em um único porta-amostras de cristal, o que evita 

picos de difração indesejados. A identificação da fase foi realizada pelo uso de 

um software de correspondência de busca utilizando o banco de dados do 

International Center for Diffraction Data (ICDD) (International Center for 

Diffraction Data, Newtown Square, PA, EUA).   

 

 

4.4 Avaliação da radiopacidade dos cimentos biocerâmicos 

 

 

A radiopacidade dos cimentos biocerâmicos foi avaliada segundo a 

metodologia proposta por (Beyer-Olsen, Orstavik 1981) utilizando uma escala 

de alumínio Step Wedge (cunha em degraus) com espessura crescente (1 até 8 

mm) e os discos dos cimentos preparados conforme as instruções dos 

fabricantes. Os cimentos foram compactados em anéis de silicone com 5 mm de 

diâmetro e 2 mm de altura utilizando esse tamanho único em todos. 

Os discos biocerâmicos e a escala do alumínio foram fixados com 

adesivo no sensor tipo CCD de um aparelho de telerradiografia com intuito de se 

manter a padronização dos fatores de distância entre receptor de imagem e fonte 

de raios X, e obter-se uma imagem digital.  

O aparelho radiográfico utilizado foi um ORTHOPHOS XG 5 (Dentsply 

Sirona, York, PA, EUA) operando com parâmetros de aquisição de 60 Kvp, 10 



41 

 

   
 

mA, tempo de exposição de 9,1s. Uma única aquisição foi feita (Figura 6) e a 

imagem obtida foi submetida à análise de intensidade pixel em um programa de 

análise de imagens (ImageJ 1.53e, Wayne Rasband and Contributors, National 

Institute of Health, EUA).  

 

 

Figura 6 - Radiografia dos cimentos biocerâmicos junto com a escala de 

alumínio 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 

 

 

Foram determinadas com a ferramenta de seleção, regiões de interesse 

(ROI) correspondentes às imagens dos cimentos e a cada um dos degraus da 

escala de alumínio (steps), individual e progressivamente de forma a se obter 

por meio do histograma de distribuição de valores de pixels (média, desvio 

padrão, valores máximo e mínimo). Foi então realizada uma análise comparativa 

entre os valores médios relativos aos cimentos e aqueles correspondentes aos 

degraus da escala, encontrando-se assim a equivalência mais próxima entre a 

densidade dos materiais estudados e a espessura em milímetros de alumínio 

(mm de Al). 



42 

 

   
 

4. 5 Análise estatística  

 

 

Todos os dados foram submetidos a teste de normalidade, e depois 

analisados com teste de Kruskal Wallis complementado com teste de Dunn, 

considerando α ≤ 0,05 nível de significância usando o GraphPad Prism 6 (La 

Jolla, CA, EUA)  

. 

 

 

 



43 

 

   
 

5 RESULTADO 

 

 

5.1 Avaliação antimicrobiana dos cimentos 

 

 

5.1.1 CIM e CMM dos cimentos  

 

 

Devido a turvação do meio de cultura pelos cimentos, não foi possível 

determinar o CIM e CMM dos cimentos. Entretanto, as mesmas concentrações 

indicadas pelos fabricantes na proporção 0,085 g pó / 0,25 ml líquido 

(aproximadamente 3×Pó : 1×líquido) foram utilizadas nos próximos testes 

microbiológicos.   

 

 

5.1.2 A viabilidade celular dos microrganismos em biofilme pelo teste de 

MTT 

 

 

Todos os grupos experimentais foram efetivos contra todos os biofilmes 

microbianos avaliados apresentando redução estatística significativa (P. 

gingivalis P < 0.0001, P. micra P < 0.0001, F. nucleatum P < 0.0001, P. 

intermedia P < 0.0001) em comparação ao grupo controle (Figuras 7,8,9 e 10).  

 

 

 

 



44 

 

   
 

Figura 7 – Diferença estatística da viabilidade microbiana (calculada pela 

refletância) e redução (em%) no biofilme de P. gingivalis pelo teste de MTT 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 

 

 

Figura 8 – Diferença estatística da viabilidade microbiana (calculada pela 

refletância) e redução (em%) no biofilme de P. micra pelo teste de MTT 

 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 



45 

 

   
 

Figura 9 – Diferença estatística da viabilidade microbiana (calculada pela 

refletância) e redução (em%) no biofilme de F. nucleatum pelo teste de MTT 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 

 

 

Figura 10 – Diferença estatística da viabilidade microbiana (calculada pela 

refletância) e redução (em%) no biofilme de P. intermedia pelo teste de MTT 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 



46 

 

   
 

Porém, sobre P. endodontalis, não houve diferença estatística 

significativa entre os cimentos biocerâmico. O MTA foi semelhante ao grupo de 

NaOCl, por outro lado o 5MO e HP foram semelhantes ao grupo controle 

(Figura 11). 

 

 

Figura 11 - Diferença estatística da viabilidade microbiana (calculada pela 

refletância) e redução (em%) no biofilme de P. endodontalis pelo teste de MTT 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 

 

 

5.2 A citotoxicidade pelo teste de MTT  

 

 

Os grupos Ca(OH)2 e 5MO foram estatisticamente semelhantes ao grupo 

controle após aplicação sobre os macrófagos por 5 min se-apresentou uma 

biocompatibilidade adequada, porém os grupos HP e MTA tiveram diferença 

significativa do grupo controle. O grupo NaOCl foi o mais citotóxico com 



47 

 

   
 

diferença significativa de todos os grupos experimentais menos os grupos HP e 

MTA. Por outro lado, não houve diferença significativa entre os grupos 

Ca(OH)2, 5MO, HP e MTA (Figura 12). 

 

 

Figura 12 - A diferença estatística calculada pela fluorescência de células entre 

os grupos experimentais e a redução da viabilidade celular de macrófagos (em 

%) após aplicação dos grupos experimentais por 5 min 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 

 

 

Na aplicação dos grupos experimentais por 24 h, os mesmos resultados 

foram encontrados, porém, o grupo HP foi estatisticamente diferente do NaOCl. 

Mais uma vez, não houve diferença significativa entre os grupos Ca(OH)2, 

5MO, HP e MTA. Destaque-se que os grupos do 5MO e Ca(OH)2 foram 

estatisticamente semelhantes ao grupo controle (Figura 13). 



48 

 

   
 

Figura 13 - A diferença estatística calculada pela fluorescência de células entre 

os grupos experimentais e a redução da viabilidade celular de macrófagos (em 

%) após aplicação dos grupos experimentais por 24 h 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 

 

 

Com relação a cultura de osteoblastos, todos os grupos experimentais 

apresentaram viabilidade celular estatisticamente semelhante ao grupo controle, 

sendo diferentes do grupo NaOCl que foi citotóxico (Figura 14). 

 



49 

 

   
 

Figura 14 - A diferença estatística calculada pela fluorescência de células entre 

os grupos experimentais e a redução da viabilidade celular de osteoblastos (em 

%) após aplicação dos grupos experimentais por 5 min 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 

 

 

Porém, após aplicação por 24 h sobre os osteoblastos, somente o 

Ca(OH)2 foi igual ao grupo controle. O Ca(OH)2 não apresentou diferença 

significativa com o grupo 5MO. O grupo 5MO foi igual aos grupos HP, MTA, e 

NaOCl que não tinham diferença estatística entre si (Figura 15). 

 

 



50 

 

   
 

Figura 15 - A diferença estatística calculada pela fluorescência de células entre 

os grupos experimentais e a redução da viabilidade celular de osteoblastos (em 

%) após aplicação dos grupos experimentais por 24 h 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 

 

 

5.3 Avaliação morfológica e da composição química dos cimentos 

biocerâmicos 

 

 

5.3.1 Análise dispersiva de energia por raio X (EDAX) e microscopia 

eletrônica de varredura (MEV) 

 

 

O EDAX dos cimentos avaliados em forma de pó mostrou que o 5MO é 



51 

 

   
 

composto principalmente de cálcio, oxigênio, bismuto, carbono, titânio, silício e 

quantidades menores de alumínio, enxofre, magnésio, potássio e ferro; e que o 

pó do MTA HP é composto principalmente de cálcio, oxigênio, tungstênio e 

antimônio; e que o pó do MTA é composto cálcio, oxigênio, bismuto e silício e 

de quantidades menores de carbono e alumínio (Quadro 2). 

A presença de titânio, enxofre e potássio e a ausência de tungstênio no 

5MO o torna diferente do MTA e do MTA HP, e a presença de tungstênio e 

antimônio no MTA HP o torna diferente do 5MO e do MTA (Figura 16). 

As imagens do MEV mostraram pequenas partículas irregulares 

intercaladas com algumas partículas alongadas semelhantes a agulhas no grupo 

do 5MO; pequenas partículas irregulares com algumas partículas maiores bem 

como partículas alongadas no grupo do MTA HP, e partículas cristalinas no 

grupo do MTA (5K, 10K, 20k e 50k ×) (Figuras 17, 18, 19 e 20). 

 

 

Quadro 2 - A composição química dos cimentos testados conforme o teste 

EDAX 

 

Material  Composição química 

5MO Ca, O, Bi, C, Ti, Si, Al, S, Mg, K e Fe 

MTA HP Ca, O, W e Sb 

MTA Ca, O, Bi, Si, C e Al. 

Fonte: Elaborado pelo autor. 

 

 

 



52 

 

   
 

Figura 16 - A composição química dos disco do 5MO, MTA HP, MTA 

respectivamente 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 



53 

 

   
 

Figura 17 - Imagens ilustrativas do pó de 5MO (primeira linha), MTA HP 

(segunda linha) e MTA (terceira linha) (50K e 100K ×) 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 



54 

 

   
 

Figura 18 - Imagens ilustrativas dos discos de 5MO (controle) (coluna 

esquerda), e após imersão em água por 4 h (coluna direta) (5K, 10K, 20K e 50K 

×) 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 



55 

 

   
 

Figura 19 - Imagens ilustrativas dos discos de MTA HP (controle) (coluna 

esquerda), e após imersão em água por 4 h (coluna direta) (5K, 10K, 20K e 50K 

×) 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 



56 

 

   
 

Figura 20 - Imagens ilustrativas dos discos de MTA (controle) (coluna 

esquerda), e após imersão em água por 4 h (coluna direta) (5K, 10K, 20K e 50K 

×) 

 

 

Fonte: Elaborada pelo autor. 



57 

 

   
 

5.3.2 Difração de raio X (DRX) 

 

 

A análise de fase mostrou que a principal diferença entre o 5MO e MTA 

é a presença de dióxido de titânio “anatásio” (TiO2) que é um composto que 

possui atividade bactericida. Ambos, o 5MO e o MTA possuem oxido de 

bismuto (Bi2O3) e silicato tricálcio “alite” (Ca3O5Si). Por outro lado, o MTA 

HP possui tungstato de cálcio (CaWO4) (Figura 21). 

 

 

Figura 21 - A análise de fase dos cimentos biocerâmicos 

 

Legenda: (Bi=Bi2O3, CaSi=Ca3O5Si, Ti=TiO2 (anatase), W=CaWO4) 

Fonte: Elaborada pelo autor. 

 



58 

 

   
 

5.4 Avaliação da radiopacidade dos cimentos biocerâmicos 

 

 

Os histogramas dos cimentos biocerâmicos mostraram que o 5MO 

possui uma radiopacidade corresponde aproximadamente aos 7º - 8º degraus da 

escala do alumínio (7-8 mm de alumínio) (média entre os dois degraus); o MTA 

HP possui uma radiopacidade corresponde ao 8º degrau (8 mm) da escala do 

alumínio e ultrapassa a sua média; e que o MTA possui uma radiopacidade 

corresponde ao 6º degrau (6 mm) da escala do alumínio (Figura 22).   

 

 

Figura 22 - Histograma da intensidade pixel dos cimentos biocerâmicos e a 

escala do alumínio 

 

 

Legendas: A) = histograma do 5MO; B) = histograma do MTA HP; C) = histograma do MTA; D-K) = 

histograma dos oito degraus da escala do alumínio 

Fonte: Elaborada pelo autor. 

 



59 

 

   
 

De acordo com o protocolo para radiopacidade de materiais dentários, 

publicado pela International Standards Organization (ISO) (International 

Organization For Standardization 2012) estes devem apresentar uma 

radiopacidade igual ou superior àquela apresentada pela mesma espessura de 

alumínio, uma vez que este metal possui radiopacidade similar à da dentina 

(Devito et al.,, 2004). 

 

 

 

 



60 

 

   
 

6 DISCUSSÃO 

 

O sucesso do tratamento endodôntico consiste principalmente em 

redução da carga microbiana do sistema de canais radiculares (Haapasaloc 

1989), tornando assim relevante o estudo da ação antimicrobiana de qualquer 

material utilizado no tratamento endodôntico incluindo solução irrigadora, 

medicação intracanal, material obturador, ou cimento biocerâmico (Abu Hasna 

et al., 2020a, 2020b; Carvalho et al., 2020; Estrela et al., 2000). 

O MTA é um cimento biocerâmico que possui ação antimicrobiana 

comprovada em alguns estudos relatados na literatura. Segundo (Torabinejad et 

al., 1995b) o MTA possui efeito antibacteriano sobre algumas bactérias 

facultativas, porém, não possui efeito sobre bactérias anaeróbias estritas em 

comparação com amálgama, óxido de zinco-eugenol, Super EBA. A ação 

antimicrobiana do MTA varia conforme a sua concentração (Al-Hezaimi et al., 

2005), assim, ficam entendidos de alguma forma, os resultados controversos 

relatados na literatura (Ribeiro et al., 2010). No presente estudo, foi verificado 

que o MTA possui ação antimicrobiana efetiva contra todos os microrganismos 

testados uma vez que o mesmo reduziu de forma significativa a viabilidade do 

biofilme comprovado pelo teste de MTT. 

Os cimentos biocerâmicos reparadores não foram testados ainda sobre os 

microrganismos anaeróbios usados no presente estudo, tornando esta pesquisa 

pioneira e inovadora neste tema, trazendo contribuição relativa. Jardine et al., 

(2019) demonstraram que o MTA não é eficaz contra biofilme de microcosmo 

multiespécies. Por outro lado, em outro estudo foi relatado que o MTA possui 

poder antimicrobiano significante sobre E. faecalis e S. mutans (Morita et al., 

2021).  

Assim, ElReash et al. (2019), levantaram a bandeira que a ação 

antimicrobiana dos cimentos à base de silicato de cálcio contra espécies 



61 

 

   
 

bacterianas estritamente anaeróbicas ainda é questionável. Apesar de Queiroz et 

al. (2021) concluíram que o MTA HP possui um poder antimicrobiano contra E. 

faecalis, ainda um estudo mais recente, não inibiu o crescimento planctônico de 

S. mutans, mas foi capaz de reduzir o biofilme de S. mutans (Silva et al., 2021). 

No presente estudo, o MTA HP foi efetivo contra todos os microrganismos 

avaliados exceto P. endodontalis no teste de MTT.  

O 5MO é um cimento que ainda não teve suas propriedades estudadas, 

portanto, foi indicado o uso do 5MO associado com a terapia fotodinâmica para 

garantir uma desinfecção adequada (Abu Hasna et al., 2020c), essa indicação 

vale ainda aos outros biocerâmicos desde que a ação antimicrobiana dos 

mesmos seja questionável (Jardine et al., 2019). No presente estudo, o 5MO 

apresentou um poder antimicrobiano efetivo contra todos os microrganismos 

avaliados no teste de MTT exceto sobre P. endodontalis. 

O NaOCl foi utilizado neste estudo como grupo controle devido a sua 

ação antimicrobiana comprovada e relatada na literatura sobre diversos 

microrganismos (Abu Hasna et al., 2020b) e ainda sua ação contra as 

endotoxinas e as metaloproteinases da matriz “MMPs” (Carvalho et al., 2016, 

2020). 

Por outro lado, o estudo da ação antimicrobiana de qualquer material 

com aplicação clínica deve ser complementado com estudos sobre a 

biocompatibilidade do mesmo (Camilleri, Pitt Ford 2006). O MTA é menos 

tóxico que a amálgama, Super EBA, e IRM sobre células L929 de camundongo 

(Torabinejad, Hong, Pitt Ford, et al., 1995b), e mesmo que a citotoxicidade 

começa alta, a tendência é diminuir-se gradualmente com o tempo (De Deus et 

al., 2005). 

O MTA foi indicado para uso clínico desde que apresentou uma 

biocompatibilidade sobre os osteoblastos MG63 (Mitchell et al., 1999) e essa 

biocompatibilidade aumenta com o tempo após 72 h (Pelliccioni et al., 2004). 



62 

 

   
 

Estudos mais recentes ainda comprovaram a biocompatibilidade do MTA sobre 

os osteoblastos MG63 após 5 dias (Willershausen et al., 2013; Attik et al., 2014) 

demonstrando um potencial considerável para o uso dos biocerâmicos como 

materiais reparadores (Gomes-Cornélio et al., 2016). No presente estudo, foi 

revelado que todos os biocerâmicos foram compatíveis sobre os osteoblastos 

MG63 após 5 min, porém somente o 5MO permaneceu biocompatível após 24 h. 

O MTA apresenta também biocompatibilidade sobre os macrófagos 

(Assmann et al., 2015), assim também o MTA Fillapex, uma versão comercial 

do MTA, que foi biocompatível sobre os macrófagos de camundongo após 4 h 

(Braga et al., 2015) e sobre a mesma linhagem testada no presente estudo 

também foi biocompatível após 1 e 2 dias (Zhu et al., 2017; Tu et al., 2019). No 

presente estudo o MTA foi biocompatível sem ter diferença significativa entre 

os grupos Ca(OH)2, 5MO, HP e MTA após 5 min e 24 h. 

Assim também, o MTA HP apresenta uma biocompatibilidade 

semelhante ao do MTA sobre os fibroblastos L929 e células-tronco da polpa 

dentária humana após 24, 48, e 72 h, sendo que essa biocompatibilidade 

aumenta com o tempo (Cintra et al., 2017; Tomás-Catalá et al., 2017). MTA HP 

apresenta biocompatibilidade adequada sobre os osteoblastos após 24, 48, e 72 h 

(Ferreira et al., 2019). No presente estudo, foi verificado que somente após 5 

min, o MTA HP foi biocompatível, sendo que esses resultados controversos 

podem ser explicados pelo pH do cimento no momento de aplicação (Collado-

González et al., 2019). 

A biocompatibilidade do 5MO não foi estudada ainda, de modo que os 

resultados apresentados são pioneiros e visam contribuir de forma relevante para 

a área de endodontia, uma vez que a biocompatibilidade do 5MO foi semelhante 

aos grupos de Ca(OH)2 e controle após 5 min de aplicação sobre os macrófagos 

de camundongo, e semelhante aos grupos de Ca(OH)2, MTA HP e MTA após 24 

h. Ainda mais, foi estatisticamente igual a todos os grupos avaliados exceto ao 



63 

 

   
 

grupo de NaOCl após 5 min de contato com os osteoblastos, e semelhante ao 

grupo de Ca(OH)2 após contato por 24 h, apresentando assim uma 

biocompatibilidade adequada. 

No teste de citotoxicidade do atual estudo, o Ca(OH)2 foi utilizado como 

grupo de controle positivo devido a sua biocompatibilidade relatada na literatura 

(Peng et al., 2021), e o NaOCl como controle negativo devido a sua 

citotoxicidade relatada na literatura (Jeong et al., 2021).  

O MTA é um cimento biocerâmico derivado do cimento de Portland, a 

diferença na composição química entre os dois é a presença do óxido de bismuto 

no MTA (Estrela et al., 2000). Conforme o fabricante (Angelus), a principal 

diferença entre o MTA e MTA HP é na substituição do radiopacificador (de 

óxido de bismuto para tungstato de cálcio), garantindo a ausência de 

descoloração dental. Esses resultados foram encontrados no presente estudo na 

análise XRD, em que o óxido de bismuto encontra-se na composição do MTA e 

do 5MO e o tungstato de cálcio se encontra na composição do MTA HP.  

No presente estudo foi demonstrado que o MTA possui fase química  de 

silicato tricálcio “alite” e o óxido de bismuto, esses resultados concordam com 

outros relatados na literatura (Camilleri, 2008; Belío-Reyes et al., 2009; 

Cianconi et al., 2016; Guven et al., 2014), sendo que essa composição junto com 

a morfologia do MTA que apareceu em formato de partículas alongadas e 

agulhas são afetadas pelo pH ambiental, pela presença de íons, e pela 

contaminação com sangue (Bozeman et al., 2006; Lee et al., 2004; Song et al., 

2016). Ainda, a cristalinidade apresentada pelos biocerâmicos após manipulados 

é afetada pela hidratação dos mesmos (Akhavan et al., 2016; Yamamoto et al., 

2017), e também, a hidratação é afetada pela técnica de manipulação e inserção 

(Basturk et al., 2018). 

Na literatura consultada, não há estudo sobre a composição química do 

MTA HP e o 5MO, de modo que o presente estudo demonstrou a presença de 



64 

 

   
 

titânio, enxofre e potássio e a ausência de tungstênio no 5MO, o que torna o 

5MO diferente do MTA e do MTA HP, e a presença de tungstênio e antimônio 

no MTA HP o torna diferente do 5MO e do MTA (Figura 22). 

Na análise do DRX, foi revelada a presença do dióxido de titânio 

“anatásio” (TiO2) no 5MO que é um composto que possui atividade 

antimicrobiana (Fu et al., 2005; Baran et al., 2021) e apresenta uma 

biocompatibilidade aumentada (Wachesk et al., 2021), justificando assim o 

comportamento antimicrobiano do 5MO e a sua biocompatibilidade apresentada 

no atual estudo.   

O MTA apresenta uma radiopacidade maior que a do Super-EBA e IRM 

(Torabinejad et al., 1995a), porém, outro estudo mais recente, mostrou que o 

Sealer 26 e IRM apresentam uma radiopacidade maior que a do MTA, e que a 

radiopacidade do MTA é semelhante à do Super EBA (Tanomaru-Filho et al., 

2008). Por outro lado, o MTA apresenta uma radiopacidade maior que a do 

cimento de Portland que se encontra em diferentes formulações comerciais 

(Danesh et al., 2006; Islam et al., 2006). A radiopacidade dos cimentos 

biocerâmicos varia dependendo do radiopacificador, da proporção de pó / água, 

e do veículo  (Camilleri, Gandolfi 2010; Cavenago et al., 2014; Guimarães et al., 

2015). 

Em geral, todos os biocerâmico apresentam uma radiopacidade maior 

que a da dentina (Vivan et al., 2009), respeitando o protocolo para radiopacidade 

de materiais dentários, publicado pela International Standards Organization 

(ISO) (International Organization For Standardization, 2012). No presente 

estudo, todos os biocerâmico avaliados mostraram uma radiopacidade adequada, 

em que o 5MO possui uma radiopacidade corresponde aproximadamente aos 7º 

- 8º degraus da escala do alumínio (7-8 mm de alumínio) (média entre os dois 

degraus); o MTA HP possui uma radiopacidade corresponde ao 8º degrau (8 

mm) da escala do alumínio e ultrapassa a sua média; e o MTA possui uma 



65 

 

   
 

radiopacidade corresponde ao 6º degrau (6 mm) da escala do alumínio. Esses 

resultados concordam com os relatados na literatura, sendo que os cimentos à 

base de MTA apresentaram radiopacidade dentro das especificações da 

American National Standard Institute/American Dental Association. 

A radiopacidade varia também entre os diferentes tipos do MTA 

(Mendes et al., 2017, Souza et al., 2015;), porém, o MTA HP apresenta uma 

radiopacidade semelhante à do MTA ( Galarça et al., 2018Guimarães et al., 

2018;). Já no presente estudo, o MTA HP apresentou uma radiopacidade maior 

que à do MTA demonstrada pela presença do tungstato de cálcio (Guimarães et 

al., 2018).  

Finalmente, de acordo com os resultados obtidos no presente estudo foi 

demonstrado que o cimento do 5MO e do MTA HP podem ser usados como 

alternativos ao MTA devido as suas capacidades antimicrobianas e a 

biocompatibilidade apresentada por ambos, além de possuírem radiopacidade 

adequada para o uso clínico de materiais dentários.  



66 

 

   
 

7 CONCLUSÃO 

 

 

Diante dos resultados obtidos neste estudo podemos concluir que: 

 

•  Todos os biocerâmicos apresentaram um poder antimicrobiano 

efetivo promovendo redução da viabilidade dos biofilmes microbianos 

de P. gingivalis, P. endodontalis, P. micra, F. nucleatum e P. 

intermedia; 

•  Todos os biocerâmicos apresentaram biocompatibilidades 

semelhantes em 5 min sobre macrófagos e osteoblastos, entretanto, o 

5MO apresentou biocompatibilidade superior após 24 h sobre os 

macrófagos superior aos demais; 

• O 5MO possui pequenas partículas irregulares intercaladas com 

algumas partículas alongadas semelhantes a agulhas; o MTA HP 

possui pequenas partículas irregulares com algumas partículas maiores 

bem como partículas alongadas; e o MTA possui partículas cristalinas; 

• O óxido de bismuto é o radiopacificador do MTA e do 5MO, e o 

tungstato de cálcio é o radiopacificador do MTA HP; 

• A principal diferença entre o 5MO e o MTA com relação a sua 

composição química é a presença de titânio, enxofre e potássio e a 

ausência de tungstênio no 5MO; 

• O dióxido de titânio “anatásio” (TiO2) que é um composto que possui 

atividade bactericida explica a ação antimicrobiana e 

biocompatibilidade do 5MO; 

• Os cimentos biocerâmicos avaliados apresentam um grau adequado de 

radiopacidade.       

 



67 

 

   
 

REFERÊNCIAS 

 

 

Abu Hasna A, Khoury RD, Toia CC, Gonçalves GB, de Andrade FB, et al. In 

vitro evaluation of the antimicrobial effect of N-acetylcysteine and 

photodynamic therapy on root canals infected with enterococcus faecalis. Iran. 

Endod. J. 2020a Oct;15(4):236-45. doi:10.22037/iej.v15i4.26865 

Abu Hasna A, Pereira Da Silva L, Pelegrini FC, Ferreira CLR, de Oliveira LD, 

Carvalho CAT. Effect of sodium hypochlorite solution and gel with/without 

passive ultrasonic irrigation on Enterococcus faecalis, Escherichia coli and their 

endotoxins. F1000Res. 2020b Jun 24;9:642. doi: 

10.12688/f1000research.24721.1. PMID: 33149896; PMCID: PMC7573735. 

Abu Hasna A, Pereira Santos D, Gavlik de Oliveira TR, Pinto ABA, Pucci CR, 

Lage-Marques JL. Apicoectomy of Perforated Root Canal Using Bioceramic 

Cement and Photodynamic Therapy. Int J Dent. 2020c Dec 9;2020:6677588. 

doi: 10.1155/2020/6677588. PMID: 33376491; PMCID: PMC7746471. 

Akhavan H, Mohebbi P, Firouzi A, Noroozi M. X-ray Diffraction Analysis of 

ProRoot Mineral Trioxide Aggregate Hydrated at Different pH Values. Iran 

Endod J. 2016 Spring;11(2):111-3. doi: 10.7508/iej.2016.02.007. Epub 2016 

Mar 20. PMID: 27141218; PMCID: PMC4841345. 

Aksel H, Küçükkaya Eren S, Askerbeyli Õrs S, Karaismailoğlu E. Surface and 

vertical dimensional changes of mineral trioxide aggregate and biodentine in 

different environmental conditions. J Appl Oral Sci. 2018 Dec 

10;27:e20180093. doi: 10.1590/1678-7757-2018-0093. PMID: 30540071; 

PMCID: PMC6296284. 

Al-Hezaimi K, Al-Hamdan K, Naghshbandi J, Oglesby S, Simon JH, Rotstein I. 

Effect of white-colored mineral trioxide aggregate in different concentrations on 

Candida albicans in vitro. J Endod. 2005 Sep;31(9):684-6. doi: 

10.1097/01.don.0000157983.12835.e0. PMID: 16123707. 

Ala Rachi MN, Al-Nahlawi TF and Kouki MT. New Five Minerals Oxides Pulp 

Capping Material Compared with Dycal. Dental Materials 30, p. e126. 2014. 

Al-Nahlawi T, Ala Rachi M, Abu Hasna A. Endodontic Perforation Closure by 

Five Mineral Oxides Silicate-Based Cement with/without Collagen Sponge 



68 

 

   
 

Matrix. Int J Dent. 2021 Sep 7;2021:4683689. doi: 10.1155/2021/4683689. 

PMID: 34539787; PMCID: PMC8443381. 

Alsulaimani RS. Immediate and Delayed Repair of 2 Sizes of Furcal 

Perforations in Dogs' Teeth Using Mineral Trioxide Aggregate Cement. J 

Endod. 2018 Jun;44(6):1000-6. doi: 10.1016/j.joen.2018.02.026.  

Andreasen JO, Andreasen FM, Andreasen L. Textbook and Color Atlas of 

Traumatic Injuries to the Teeth. 5th ed. Uinted Kingdom: Wiley; 2018. 

Asgary S, Parirokh M, Eghbal MJ, Brink F. Chemical differences between white 

and gray mineral trioxide aggregate. J Endod. 2005 Feb;31(2):101-3. doi: 

10.1097/01.don.0000133156.85164.b2. PMID: 15671818. 

Asgary S, Moosavi SH, Yadegari Z, Shahriari S. Cytotoxic effect of MTA and 

CEM cement in human gingival fibroblast cells. Scanning electronic microscope 

evaluation. N Y State Dent J. 2012 Mar;78(2):51-4. PMID: 22685917. 

Asgary S, Motazedian HR, Parirokh M, Eghbal MJ, Kheirieh S. Twenty years of 

research on mineral trioxide aggregate: a scientometric report. Iran Endod J. 

2013 Winter;8(1):1-5. Epub 2013 Jan 20. Erratum in: Iran Endod J. 2013 

Spring;8(2):84. PMID: 23411944; PMCID: PMC3570971. 

Assmann E, Böttcher DE, Hoppe CB, Grecca FS, Kopper PM. Evaluation of 

bone tissue response to a sealer containing mineral trioxide aggregate. J Endod. 

2015 Jan;41(1):62-6. doi: 10.1016/j.joen.2014.09.019. Epub 2014 Nov 4. PMID: 

25447498. 

Attik GN, Villat C, Hallay F, Pradelle-Plasse N, Bonnet H, Moreau K, et al. In 

vitro biocompatibility of a dentine substitute cement on human MG63 

osteoblasts cells: Biodentine™ versus MTA(®). Int Endod J. 2014 

Dec;47(12):1133-41. doi: 10.1111/iej.12261. Epub 2014 Mar 20. PMID: 

24517569. 

Baran W, Cholewiński M, Sobczak A, Adamek E. A New Mechanism of the 

Selective Photodegradation of Antibiotics in the Catalytic System Containing 

TiO2 and the Inorganic Cations. Int J Mol Sci. 2021 Aug 13;22(16):8696. doi: 

10.3390/ijms22168696. PMID: 34445408; PMCID: PMC8395856. 

Barrett WC. Pulp Capping. Am J Dent Sci. 1877 Apr;10(12):552-5. PMID: 

30752882; PMCID: PMC6100989. 



69 

 

   
 

Basturk FB, Nekoofar MH, Gunday M, Dummer PMH. X-ray diffraction 

analysis of MTA mixed and placed with various techniques. Clin Oral Investig. 

2018 May;22(4):1675-80. doi: 10.1007/s00784-017-2241-9. Epub 2017 Dec 29. 

PMID: 29288401. 

Belío-Reyes IA, Bucio L, Cruz-Chavez E. Phase composition of ProRoot 

mineral trioxide aggregate by X-ray powder diffraction. J Endod. 2009 

Jun;35(6):875-8. doi: 10.1016/j.joen.2009.03.004. Epub 2009 Apr 19. PMID: 

19482189. 

Ber BS, Hatton JF, Stewart GP. Chemical modification of proroot mta to 

improve handling characteristics and decrease setting time. J Endod. 2007 

Oct;33(10):1231-4. doi: 10.1016/j.joen.2007.06.012. Epub 2007 Jul 19. PMID: 

17889696. 

Beyer-Olsen EM, Orstavik D. Radiopacity of root canal sealers. Oral Surg Oral 

Med Oral Pathol. 1981 Mar;51(3):320-8. doi: 10.1016/0030-4220(81)90062-1. 

PMID: 6938892. 

Borges AH, Pedro FL, Semanoff-Segundo A, Miranda CE, Pécora JD, Cruz 

Filho AM. Radiopacity evaluation of Portland and MTA-based cements by 

digital radiographic system. J Appl Oral Sci. 2011 May-Jun;19(3):228-32. doi: 

10.1590/s1678-77572011000300009. PMID: 21625738; PMCID: PMC4234334. 

Bozeman TB, Lemon RR, Eleazer PD. Elemental analysis of crystal precipitate 

from gray and white MTA. J Endod. 2006 May;32(5):425-8. doi: 

10.1016/j.joen.2005.08.009. Epub 2006 Feb 17. PMID: 16631841. 

Braga JM, Oliveira RR, de Castro Martins R, Vieira LQ, Sobrinho AP. 

Assessment of the cytotoxicity of a mineral trioxide aggregate-based sealer with 

respect to macrophage activity. Dent Traumatol. 2015 Oct;31(5):390-5. doi: 

10.1111/edt.12190. Epub 2015 Jun 18. PMID: 26086068. 

Bubenik J. [Regenerating capacity of injured dental pulp]. Prakt Zubn Lek. 

1954;2(4):74-83. Czech. PMID: 13194470.  

Bueno CE, Zeferino EG, Manhães LR Jr, Rocha DG, Cunha RS, De Martin AS. 

Study of the bismuth oxide concentration required to provide Portland cement 

with adequate radiopacity for endodontic use. Oral Surg Oral Med Oral Pathol 

Oral Radiol Endod. 2009 Jan;107(1):e65-9. doi: 10.1016/j.tripleo.2008.09.016. 

PMID: 19101486. 



70 

 

   
 

Camargo CH, Fonseca MB, Carvalho AS, Camargo SE, Cardoso FG, Valera 

MC. Microhardness and sealing ability of materials used for root canal 

perforations. Gen Dent. 2012 Nov-Dec;60(6):e393-7. PMID: 23220318. 

Camilleri J, Pitt Ford TR. Mineral trioxide aggregate: a review of the 

constituents and biological properties of the material. Int Endod J. 2006 

Oct;39(10):747-54. doi: 10.1111/j.1365-2591.2006.01135.x. PMID: 16948659. 

Camilleri J. Characterization and chemical activity of Portland cement and two 

experimental cements with potential for use in dentistry. Int Endod J. 2008 

Sep;41(9):791-9. doi: 10.1111/j.1365-2591.2008.01439.x. PMID: 18798923. 

Camilleri J, Gandolfi MG. Evaluation of the radiopacity of calcium silicate 

cements containing different radiopacifiers. Int Endod J. 2010 Jan;43(1):21-30. 

doi: 10.1111/j.1365-2591.2009.01621.x. PMID: 19891720. 

Camilleri J, Kralj P, Veber M, Sinagra E. Characterization and analyses of acid-

extractable and leached trace elements in dental cements. Int Endod J. 2012 

Aug;45(8):737-43. doi: 10.1111/j.1365-2591.2012.02027.x. Epub 2012 Mar 6. 

PMID: 22394277. 

Carvalho AS, Oliveira LD, Cardoso FG, Oliveira FE, Valera MC, Carvalho CA. 

Limewater and Polymyxin B Associated with NaOCl for Endotoxin 

Detoxification in Root Canal with Necrotic Pulp. Braz Dent J. 2016 Sep-

Oct;27(5):573-7. doi: 10.1590/0103-6440201600934. PMID: 27982236. 

Carvalho CAT, Hasna AA, Carvalho AS, Vilela PDGF, Ramos LP, Valera MC, 

et al. Clinical Study of Sodium Hypochlorite, Polymyxin B And Limewater 

Effect on MMP-3,-8,-9 In Apical Periodontitis. Braz Dent J. 2020 Mar-

Apr;31(2):116-1. doi: 10.1590/0103-6440202003081. PMID: 32556009. 

Cavenago BC, Pereira TC, Duarte MA, Ordinola-Zapata R, Marciano MA, 

Bramante CM, et al. Influence of powder-to-water ratio on radiopacity, setting 

time, pH, calcium ion release and a micro-CT volumetric solubility of white 

mineral trioxide aggregate. Int Endod J. 2014 Feb;47(2):120-6. doi: 

10.1111/iej.12120. Epub 2013 May 3. PMID: 23647286. 

Chang SW, Lee SY, Kum KY, Kim EC. Effects of ProRoot MTA, 

Bioaggregate, and Micromega MTA on odontoblastic differentiation in human 

dental pulp cells. J Endod. 2014 Jan;40(1):113-8. doi: 

10.1016/j.joen.2013.09.036. Epub 2013 Nov 1. PMID: 24332001. 



71 

 

   
 

Cianconi L, Palopoli P, Campanella V, Mancini M. Composition and 

microstructure of MTA and Aureoseal Plus: XRF, EDS, XRD and FESEM 

evaluation. Eur J Paediatr Dent. 2016 Dec;17(4):281-5. PMID: 28045315. 

Cintra LTA, Benetti F, de Azevedo Queiroz ÍO, de Araújo Lopes JM, Penha de 

Oliveira SH, Sivieri Araújo G, et al. Cytotoxicity, Biocompatibility, and 

Biomineralization of the New High-plasticity MTA Material. J Endod. 2017 

May;43(5):774-8. doi: 10.1016/j.joen.2016.12.018. Epub 2017 Mar 18. PMID: 

28320539. 

Collado-González M, López-García S, García-Bernal D, Oñate-Sánchez RE, 

Tomás-Catalá CJ, Moraleda JM, et al. Biological effects of acid-eroded MTA 

Repair HP and ProRoot MTA on human periodontal ligament stem cells. Clin 

Oral Investig. 2019 Oct;23(10):3915-24. doi: 10.1007/s00784-019-02822-2. 

Epub 2019 Jan 25. PMID: 30684060. 

Coutinho-Filho T, De-Deus G, Klein L, Manera G, Peixoto C, Gurgel-Filho ED. 

Radiopacity and histological assessment of Portland cement plus bismuth oxide. 

Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 2008 Dec;106(6):e69-77. 

doi: 10.1016/j.tripleo.2008.07.028. Epub 2008 Oct 16. PMID: 18926734. 

Cvek M. Treatment of non-vital permanent incisors with calcium hydroxide. I. 

Follow-up of periapical repair and apical closure of immature roots. Odontol 

Revy. 1972;23(1):27-44. PMID: 4504474. 

Dammaschke T, Stratmann U, Wolff P, Sagheri D, Schäfer E. Direct pulp 

capping with mineral trioxide aggregate: an immunohistologic comparison with 

calcium hydroxide in rodents. J Endod. 2010 May;36(5):814-9. doi: 

10.1016/j.joen.2010.02.001. Epub 2010 Mar 15. PMID: 20416425. 

Danesh G, Dammaschke T, Gerth HU, Zandbiglari T, Schäfer E. A comparative 

study of selected properties of ProRoot mineral trioxide aggregate and two 

Portland cements. Int Endod J. 2006 Mar;39(3):213-9. doi: 10.1111/j.1365-

2591.2006.01076.x. PMID: 16507075. 

Darweesh F, Shahawy T, Zaghloul N, Almowaqee M. Impact of a New Silicate-

Based Capping Material on Healing Potentiality of Traumatically Exposed 

Healthy Dog’s Dental Pulp. Egypt. Dent. J. 2020 Apr;66(2):981–9. doi: 

10.21608/EDJ.2020.24580.1042 



72 

 

   
 

Delboni MG, Gomes BP, Francisco PA, Teixeira FB, Drake D. Diversity of 

Enterococcus faecalis Genotypes from Multiple Oral Sites Associated with 

Endodontic Failure Using Repetitive Sequence-based Polymerase Chain 

Reaction and Arbitrarily Primed Polymerase Chain Reaction. J Endod. 2017 

Mar;43(3):377-82. doi: 10.1016/j.joen.2016.10.042. Epub 2017 Jan 26. PMID: 

28131414. 

De Deus G, Ximenes R, Gurgel-Filho ED, Plotkowski MC, Coutinho-Filho T. 

Cytotoxicity of MTA and Portland cement on human ECV 304 endothelial cells. 

Int Endod J. 2005 Sep;38(9):604-9. doi: 10.1111/j.1365-2591.2005.00987.x. 

PMID: 16104973. 

ElReash AA, Hamama H, Eldars W, Lingwei G, Zaen El-Din AM, Xiaoli X. 

Antimicrobial activity and pH measurement of calcium silicate cements versus 

new bioactive resin composite restorative material. BMC Oral Health. 2019 Nov 

4;19(1):235. doi: 10.1186/s12903-019-0933-z. PMID: 31684929; PMCID: 

PMC6829974. 

Estrela C, Bammann LL, Estrela CR, Silva RS, Pécora JD. Antimicrobial and 

chemical study of MTA, Portland cement, calcium hydroxide paste, Sealapex 

and Dycal. Braz Dent J. 2000;11(1):3-9. PMID: 11210272. 

Farrugia C, Baca P, Camilleri J, Arias Moliz MT. Antimicrobial activity of 

ProRoot MTA in contact with blood. Sci Rep. 2017 Jan 27;7:41359. doi: 

10.1038/srep41359. PMID: 28128328; PMCID: PMC5269669. 

Ferreira CMA, Sassone LM, Gonçalves AS, de Carvalho JJ, Tomás-Catalá CJ, 

García-Bernal D, et al. Physicochemical, cytotoxicity and in vivo 

biocompatibility of a high-plasticity calcium-silicate based material. Sci Rep. 

2019 Mar 8;9(1):3933. doi: 10.1038/s41598-019-40365-4. PMID: 30850648; 

PMCID: PMC6408552. 

Flores Orozco EI, Abu Hasna A, Teotonio de Santos Junior M, Flores Orozco 

EI, Falchete Do Prado R, Rocha Campos G, et al. Case Report: Interdisciplinary 

management of a complex odontoma with a periapical involvement of superior 

anterior teeth. F1000Res. 2019 Aug 29;8:1531. doi: 

10.12688/f1000research.20337.1. PMID: 31824665; PMCID: PMC6880268. 

Ford TR, Torabinejad M, McKendry DJ, Hong CU, Kariyawasam SP. Use of 

mineral trioxide aggregate for repair of furcal perforations. Oral Surg Oral Med 



73 

 

   
 

Oral Pathol Oral Radiol Endod. 1995 Jun;79(6):756-63. doi: 10.1016/s1079-

2104(05)80313-0. PMID: 7621036. 

Fu G, Vary PS, Lin CT. Anatase TiO2 nanocomposites for antimicrobial 

coatings. J Phys Chem B. 2005 May 12;109(18):8889-98. doi: 

10.1021/jp0502196. PMID: 16852057. 

Galarça AD, Da Rosa WLO, Da Silva TM, da Silveira Lima G, Carreño NLV, 

Pereira TM, et al. Physical and Biological Properties of a High-Plasticity 

Tricalcium Silicate Cement. Biomed Res Int. 2018 Nov 27;2018:8063262. doi: 

10.1155/2018/8063262. PMID: 30622963; PMCID: PMC6288567. 

Gomes-Cornélio AL, Rodrigues EM, Mestieri LB, Falcoski Tde O, Soares CP, 

Guerreiro-Tanomaru JM, et al. Cytotoxicity and genotoxicity of calcium 

silicate-based cements on an osteoblast lineage. Braz Oral Res. 2016 May 

20;30(1):S1806-83242016000100247. doi: 10.1590/1807-3107BOR-

2016.vol30.0048. PMID: 27223138. 

Guerreiro Tanomaru JM, Storto I, Da Silva GF, Bosso R, Costa BC, Bernardi 

MI, et al. Radiopacity, pH and antimicrobial activity of Portland cement 

associated with micro- and nanoparticles of zirconium oxide and niobium oxide. 

Dent Mater J. 2014;33(4):466-70. doi: 10.4012/dmj.2013-328. Epub 2014 Apr 

29. PMID: 24786343. 

Guerreiro-Tanomaru JM, Vázquez-García FA, Bosso-Martelo R, Bernardi MI, 

Faria G, Tanomaru M Filho. Effect of addition of nano-hydroxyapatite on 

physico-chemical and antibiofilm properties of calcium silicate cements. J Appl 

Oral Sci. 2016 May-Jun;24(3):204-10. doi: 10.1590/1678-775720150422. 

PMID: 27383700; PMCID: PMC5022225. 

Guimarães BM, Tartari T, Marciano MA, Vivan RR, Mondeli RF, Camilleri J, 

et al. Color stability, radiopacity, and chemical characteristics of white mineral 

trioxide aggregate associated with 2 different vehicles in contact with blood. J 

Endod. 2015 Jun;41(6):947-52. doi: 10.1016/j.joen.2015.02.008. Epub 2015 

Mar 19. PMID: 25799532. 

Guimarães BM, Prati C, Duarte MAH, Bramante CM, Gandolfi MG. 

Physicochemical properties of calcium silicate-based formulations MTA Repair 

HP and MTA Vitalcem. J Appl Oral Sci. 2018 Apr 5;26:e2017115. doi: 

10.1590/1678-7757-2017-0115. PMID: 29641748; PMCID: PMC5912399. 



74 

 

   
 

Guven Y, Tuna EB, Dincol ME, Aktoren O. X-ray diffraction analysis of MTA-

Plus, MTA-Angelus and DiaRoot BioAggregate. Eur J Dent. 2014 

Apr;8(2):211-215. doi: 10.4103/2278-344X.130603. PMID: 24966772; PMCID: 

PMC4054052. 

Haapasalo M. Bacteroides spp. in dental root canal infections. Endod Dent 

Traumatol. 1989 Feb;5(1):1-10. doi: 10.1111/j.1600-9657.1989.tb00330.x. 

PMID: 2598878. 

Haglund R, He J, Jarvis J, Safavi KE, Spångberg LS, Zhu Q. Effects of root-end 

filling materials on fibroblasts and macrophages in vitro. Oral Surg Oral Med 

Oral Pathol Oral Radiol Endod. 2003 Jun;95(6):739-45. doi: 

10.1067/moe.2003.231. PMID: 12789158. 

Han L, Okiji T, Okawa S. Morphological and chemical analysis of different 

precipitates on mineral trioxide aggregate immersed in different fluids. Dent 

Mater J. 2010 Oct;29(5):512-7. doi: 10.4012/dmj.2009-133. Epub 2010 Sep 1. 

PMID: 20823620. 

Holland R, Souza Vd, Nery MJ, Faraco Júnior IM, Bernabé PF, Otoboni Filho 

JA, et al. Reaction of rat connective tissue to implanted dentin tubes filled with a 

white mineral trioxide aggregate. Braz Dent J. 2002;13(1):23-6. PMID: 

11870957. 

Huang GT, Lin LM. Letter to the editor: comments on the use of the term 

"revascularization" to describe root regeneration. J Endod. 2008 May;34(5):511; 

author reply 511-2. doi: 10.1016/j.joen.2008.02.009. Epub 2008 Mar 14. PMID: 

18436023. 

Hwang YC, Lee SH, Hwang IN, Kang IC, Kim MS, Kim SH, et al. Chemical 

composition, radiopacity, and biocompatibility of Portland cement with bismuth 

oxide. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 2009 

Mar;107(3):e96-102. doi: 10.1016/j.tripleo.2008.11.015. Epub 2009 Jan 20. 

PMID: 19157923. 

International Organization For Standardization 2012. ISO - ISO 6876:2012 - 

Dentistry — Root canal sealing materials [Online]. Available at: 

https://www.iso.org/standard/45117.html [Accessed: 17 March 2021]. 



75 

 

   
 

Islam I, Chng HK, Yap AU. Comparison of the physical and mechanical 

properties of MTA and portland cement. J Endod. 2006 Mar;32(3):193-7. doi: 

10.1016/j.joen.2005.10.043. PMID: 16500224. 

Iwaya SI, Ikawa M, Kubota M. Revascularization of an immature permanent 

tooth with apical periodontitis and sinus tract. Dent Traumatol. 2001 

Aug;17(4):185-7. doi: 10.1034/j.1600-9657.2001.017004185.x. PMID: 

11585146. 

Jardine AP, Montagner F, Quintana RM, Zaccara IM, Kopper PMP. 

Antimicrobial effect of bioceramic cements on multispecies microcosm biofilm: 

a confocal laser microscopy study. Clin Oral Investig. 2019 Mar;23(3):1367-72. 

doi: 10.1007/s00784-018-2551-6. Epub 2018 Jul 18. PMID: 30022269. 

Jeong JW, Sarmast ND, Terlier T,