RESSALVA 

 

 

 

 
Atendendo solicitação do(a) 

autor(a), o texto completo desta 

dissertação será disponibilizado 

somente a partir de 23/03/2025. 



 

 

 

 

 

 

Rayara Nogueira de Freitas 
 

 

 

Avaliação dos parâmetros bioquímicos, funcionais, 

histomorfométricos e estado redox das glândulas salivares de ratos 

Wistar tratados com o anticonvulsivante valproato de sódio  

 

 

 

 

 

 

Araçatuba - SP 

2023 



 

 

 

 

Rayara Nogueira de Freitas 
  

 

Avaliação dos parâmetros bioquímicos, funcionais, 

histomorfométricos e estado redox das glândulas salivares de ratos 

Wistar tratados com o anticonvulsivante valproato de sódio 

 

 

 

 

Dissertação apresentada à Faculdade de 

Odontologia de Araçatuba da Universidade 

Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho” – 

UNESP, como parte dos requisitos para obtenção 

do título de Mestre em Ciências, área de 

concentração Saúde Bucal da Criança. 

 

Orientador: Prof. Ass. Dr. Antonio Hernandes 

Chaves Neto 

 

 

  

  

 Araçatuba - SP 

2023 



 

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

  

Catalogação-na-Publicação (CIP)  

Diretoria Técnica de Biblioteca e Documentação – FOA / UNESP 

  
  Freitas, Rayara Nogueira de.  

F866a  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  

  Avaliação dos parâmetros bioquímicos, funcionais, 

histomorfométricos e estado redox das glândulas salivares de 

ratos Wistar tratados com o anticonvulsivante valproato de 

sódio / Rayara Nogueira de Freitas. - Araçatuba, 2023   

37 f. : il. ; tab.  

  Dissertação (Mestrado) – Universidade Estadual   
Paulista, Faculdade de Odontologia de Araçatuba  
  Orientador: Prof. Antonio Hernandes Chaves Neto  

  1. Anticonvulsivantes 2. Ácido valproico 3. Saliva  
4. Glândula parótida 5. Glândula submandibular 6. Estresse 

oxidativo I. T.  

      Black D27  

      CDD 617.645  

Claudio Hideo Matsumoto – CRB-8/5550  

 

 

 



AGRADECIMENTOS 

 

A Deus pela saúde e oportunidade que me deu de conhecer as pessoas que fizeram com que 

esta caminhada fosse especial.  

 

À minha família, em especial minha mãe Rejane de Nogueira de Souza, que sempre esteve 

e estará ao meu lado, amparando, amando e cuidando, e que sempre torceu pelo meu sucesso. Muito 

obrigada por sempre me incentivar e acreditar que eu seria capaz de superar os obstáculos que a vida 

me apresentou.  

 

Ao meu namorado, Gladiston William Lobo Rodrigues por sempre me incentivar, motivar, 

e vibrar a cada conquista minha, e sempre me encorajando há nunca desistir dos meus sonhos, e que 

sempre esteve presente nos momentos mais difíceis. Sou eternamente grata a você. 

 

Ao meu orientador, Prof. Dr. Antonio Hernandes Chaves Neto, que confiou em mim, me 

concedendo a oportunidade de desenvolver este estudo. Muito obrigada, pelos ensinamentos, 

conselhos, mas principalmente, pela paciência com a qual guiaram o meu aprendizado, e por 

desempenhar tal função com dedicação e amizade. Foi uma honra ter tido a oportunidade de trabalhar 

com um educador tão comprometido, capaz e habilidoso quanto o senhor. 

 

Aos meus amigos, Gabriela Alice Fiais, Lucas Guilherme Leite da Silva, Douglas Sadrac 

de Biagi Ferreira e Marcelo Kawaguchi, por compartilharem tantos momentos de descobertas e 

por todo o companheirismo ao longo deste percurso. Foi um prazer imenso poder conhecê-los. 

Sempre me lembrarei de vocês com muito carinho. Não há palavras que possam exprimir a minha 

gratidão a vocês. 

 

À Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”, na pessoa do diretor da 

Faculdade de Odontologia de Araçatuba Prof. Glauco Issamu Miyahara e do vice-diretor Prof. 

Alberto Carlos Botazzo Delbem. 

 

À Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), pelo apoio 

financeiro (CAPES Código de financiamento 001). 

 

À Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP – Processo: 

2021/10656-7), pelo apoio financeiro, concedida ao aluno de iniciação cientifica Lucas Guilherme 

Leite da Silva.  



 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

“Não existem sonhos impossíveis para aqueles que realmente acreditam 

que o poder realizador reside no interior de cada ser humano. Sempre que 

alguém descobre esse poder, algo antes considerado impossível, se torna 

realidade.” 

 

Albert Einstein 



FREITAS, RN. Avaliação dos parâmetros bioquímicos, funcionais, histomorfométricos e 

estado redox das glândulas salivares de ratos Wistar tratados com o anticonvulsivante 

valproato de sódio. 2023. 37 f. Dissertação (Mestrado em Ciências, área de concentração Saúde 

Bucal da Criança) - Faculdade de Odontologia, Universidade Estadual Paulista, Araçatuba, 2023. 

 

                                                                       RESUMO 

O presente estudo investigou os efeitos do anticonvulsivante valproato de sódio (VPA) nas glândulas 

salivares por meio de parâmetros bioquímicos, funcionais, histomorfométricos e estado redox. Para 

tanto, vinte e quatro ratos Wistar (5 semanas de idade) foram divididos aleatoriamente em três grupos 

(n=08/grupo): grupo (Controle) tratados com solução salina 0,9% (m/v); grupo (VPA100) tratados 

com 100 mg/kg de VPA; grupo (VPA400) tratados com 400 mg/kg de VPA na forma de xarope 

(Depakene®, Abbott Laboratórios do Brasil, Ltda.). Após 21 dias consecutivos de tratamento por 

gavagem intragástrica, a saliva total induzida pela pilocarpina foi coletada para determinação do 

fluxo salivar, pH, capacidade tamponante, proteína total, amilase, fosfato, cálcio, potássio, sódio e 

cloreto. Nas glândulas salivares foram realizadas análises histomorformétricas, capacidade oxidante 

total, peroxidação lipídica, proteína carbonilada, capacidade antioxidante total, ácido úrico, 

glutationa reduzida (GSH), superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa peroxidase 

(GPx). Os resultados foram submetidos análise de variância (One-Way ANOVA) seguido do teste 

post hoc de Tukey (p < 0,05). O fluxo salivar, pH, capacidade tamponante, proteína total, potássio, 

sódio e cloreto foram semelhantes entre os grupos. Contudo, fosfato e cálcio reduziram no VPA400, 

enquanto a amilase foi maior nos grupos VPA100 e VPA400. Não detectamos nas glândulas salivares 

diferenças significantes nas áreas de ácinos, ductos e tecido conjuntivo entre os grupos. Não houve 

mudanças significativas no estado redox das glândulas submandibulares. Por sua vez, nas glândulas 

parótidas detectamos redução da capacidade oxidante total e peroxidação lipídica nos grupos 

VPA100 e VPA400, aumento da SOD no VPA400, além da maior concentração de ácido úrico nos 

grupos VPA100 e VPA400. Conclui-se que o tratamento crônico com VPA modificou a composição 

bioquímica da saliva total e causou distúrbios do estado redox da glândula parótida em ratos. 

 

Palavras-chave: Anticonvulsivantes. Ácido valproico. Saliva. Glândula parótida. Glândula 

submandibular. Estresse oxidativo.   

 

 



FREITAS, RN. Evaluation of biochemical, functional, histomorphometric parameters and 

redox status of the salivary glands of male Wistar rats treated with the anticonvulsant sodium 

valproate. 2023. 37 f. Dissertação (Mestrado em Ciências, área de concentração Saúde Bucal da 

Criança) - Faculdade de Odontologia, Universidade Estadual Paulista, Araçatuba, 2023. 

 

ABSTRACT 

The present study investigated the effects of the anticonvulsant sodium valproate (VPA) on the 

salivary glands through biochemical, functional, histomorphometric parameters and redox status. For 

this, twenty-four Wistar rats (5 weeks old) were randomly divided into three groups (n=08/group): 

group (Control) treated with 0.9% saline solution (w/v); group (VPA100) treated with 100 mg/kg of 

VPA; group (VPA400) treated with 400 mg/kg of VPA in the form of syrup (Depakene®, Abbott 

Laboratórios do Brasil, Ltda.). After 21 consecutive days of treatment via intragastric gavage, total 

saliva induced by pilocarpine was collected to determine salivary flow, pH, buffering capacity, total 

protein, amylase, phosphate, calcium, potassium, sodium, and chloride. In the salivary glands, 

histomorphometric analysis, total oxidant capacity, lipid peroxidation, carbonyl protein, total 

antioxidant capacity, uric acid, reduced glutathione (GSH), superoxide dismutase (SOD), catalase 

(CAT) and glutathione peroxidase (GPx) were performed. The results were subjected to analysis of 

variance (One-Way ANOVA) followed by Tukey's post hoc test (p < 0.05). Salivary flow, pH, 

buffering capacity, total protein, potassium, sodium and chloride were similar between groups. 

However, phosphate and calcium were reduced in VPA400, while amylase was higher in VPA100 

and VPA400 groups. We did not detect significant differences in the areas of acini, ducts and 

connective tissue in the salivary glands between the groups. There were no significant changes in the 

redox state of the submandibular glands. In turn, in the parotid glands, we detected a reduction in the 

total oxidant capacity and lipid peroxidation in the VPA100 and VPA400 groups, an increase in SOD 

in the VPA400, in addition to a higher concentration of uric acid in the VPA100 and VPA400 groups. 

It is concluded that chronic treatment with VPA modified the biochemical composition of whole 

saliva and caused disturbances in the redox state of the parotid gland in rats. 

Keywords: Anticonvulsants. Valproic acid. Saliva. Parotid gland. Submandibular gland. Oxidative 

stress.  

 

 

 



LISTA DE FIGURAS 

Figure 1- Effects of VPA on histomorphometric parameters in rat salivary glands. Staining: 

hematoxylin and eosin. 400x magnification. Photomicrographs of the parotid gland (A, B, and C) and 

submandibular gland (G, H, and I) and graphical representation of the percentage of the acinar area 

(D and J), duct area (E and K), and connective tissue (F and L). Abbreviations and symbols: (white 

asterisks) acinar secretory units; (black asterisks) striated ducts; (arrows) intercalated ducts; (GCT) 

granular convoluted tubules; (ct) connective tissue. Results were obtained by analysis of variance 

(One-Way ANOVA) followed by Tukey's post hoc test. For all analyses, p < 0.05 probability levels 

were considered statistically significant..............................................................................................30 

Figure 2- Effects of VPA on salivary flow rate (A), salivary pH (B), salivary buffering capacity (C), 

salivary total protein (D), amylase (E), phosphate (F), calcium (G), potassium (H), sodium (I) and 

chloride (J) from Wistar rats. Data are expressed as mean ± standard deviation. Results were obtained 

by analysis of variance (One-Way ANOVA) followed by Tukey's post hoc test (*p < 0.05; **p < 

0.01). For all analyses, p < 0.05 probability levels were considered statistically significant...............31 

Figure 3- Effects of VPA on total oxidant capacity (A), lipid oxidative damage - TBARs (B), and 

carbonyl protein (C) in parotid and submandibular glands of Wistar rats. Data are expressed as mean 

± standard deviation. The results were obtained by analysis of variance (One-Way ANOVA) followed 

by Tukey's post hoc test (**p < 0.01; ****p < 0.0001). For all analyses, p < 0.05 probability levels 

were considered statistically significant..............................................................................................32 

Figure 4 – Effects of VPA on total antioxidant capacity (A), uric acid (B), and GSH (C) of parotid 

and submandibular glands in Wistar rats. Data are expressed as mean ± standard deviation. Results 

were obtained by analysis of variance (One-Way ANOVA) followed by Tukey's post hoc test. (*p < 

0.05). For all analyses, p < 0.05 probability levels were considered statistically significant...............33 

Figure 5- Effects of VPA on SOD (A), CAT (B), and GPx (C) activities in the parotid and 

submandibular glands of Wistar rats. Data are expressed as mean ± standard deviation. Results were 

obtained by analysis of variance (One-Way ANOVA) followed by Tukey's post hoc test. (*p < 0.05). 

For all analyses, p < 0.05 probability levels were considered statistically significant........................34 

 

 

 



LISTA DE TABELA 

Table 1- Effects of VPA on ALT and AST activities, body mass, feed consumption and water intake, 

salivary gland mass and index, and salivary glands total protein in rats. Data are expressed as mean 

± standard deviation. Results were obtained by analysis of variance (One-Way ANOVA) followed 

by Tukey's post hoc test. For all analyses, p < 0.05 probability levels were considered statistically 

significant. ......................................................................................................................................... 35 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 



 

 

SUMÁRIO 
 

Abstract ...................................................................................................................... 12 

Introduction ............................................................................................................... 13 

Materials and methods .............................................................................................. 14 

Results ......................................................................................................................... 18 

Discussion ................................................................................................................... 19 

Conclusion .................................................................................................................. 23 

References .................................................................................................................. 24 

Figures ........................................................................................................................ 31 

Tables .......................................................................................................................... 36 

ANEXO: Aprovação da comissão de ética no uso de animais .............................. 37 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 



Evaluation of biochemical, functional, and histomorphometric parameters and redox status of the salivary glands 

of male Wistar rats treated with the anticonvulsant sodium valproate 

 

Rayara Nogueira de Freitas1, Lucas Guilherme Leite da Silva2, Gabriela Alice Fiais1,4, Douglas Sandrac de Biagi Ferreira2, 

Allice Santos Cruz Veras3,4, Giovana Rampazzo Teixeira3,4, Sandra Helena Penha Oliveira2,4, Rita Cássia Menegati 

Dornelles2,4, Ana Cláudia de Melo Stevanato Nakamune2, Walid D. Fakhouri5, Antonio Hernandes Chaves-Neto1,2,4*. 

 

1Programa de Pós-Graduação em Ciências - Saúde Bucal da Criança, Universidade Estadual Paulista (Unesp), Faculdade 

de Odontologia, Araçatuba, São Paulo, Brazil. 

2Departamento de Ciências Básicas, Universidade Estadual Paulista (Unesp), Faculdade de Odontologia, Araçatuba, São 

Paulo, Brazil. 

3Departamento de Educação Física, Universidade Estadual Paulista (Unesp), Faculdade de Ciências e Tecnologia, 

Presidente Prudente, SP, Brazil. 

4Programa de Pós-Graduação Multicêntrico em Ciências Fisiológicas - SBFis, Universidade Estadual Paulista (Unesp), 

Faculdade de Odontologia, Araçatuba, São Paulo, Brazil. 

5Center for Craniofacial Research, Department of Diagnostic and Biomedical Sciences, School of Dentistry, University 

of Texas Health Science Center at Houston, Houston, TX, USA. 

 

 

Correspondence to: 

Professor Antonio Hernandes Chaves-Neto  

Address: Department of Basic Sciences, São Paulo State University (Unesp), School of Dentistry, Araçatuba, Rodovia 

Marechal Rondon, km 527/528, CEP 16018-805, Araçatuba, SP, Brazil. 

Phone: +55 18 3636 2869 

E-mail: antonio.hernandes@unesp.br 

 

 

 

*Artigo redigido conforme as diretrizes de submissão da revista Clinical Oral Investigation: 

https://www.springer.com/journal/784/submission-guidelines