Annelise Katrine Carrara Prieto 

 

 

Metabolismo oxidativo sérico em 

ratos diabéticos com lesão periapical. 

 

 

 
Dissertação apresentada à Faculdade de 
Odontologia de Araçatuba, Universidade 
Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho” – 
UNESP como parte dos requisitos para 
obtenção do título de Mestre em Endodontia 

 

Orientador: Prof. Dr. Luciano Tavares Angelo 
Cintra 

  Co-orientador: Prof. Dr. Paulo César Ciarlini 

 

2014 

 



 
 

 
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Catalogação na Publicação (CIP) 

Serviço Técnico de Biblioteca e Documentação – FOA / UNESP 

 
 Prieto, Annelise Katrine Carrara. 
P626m  Metabolismo oxidativo sérico em ratos diabéticos  
 com lesão periapical / Annelise Katrine Carrara Prieto. -  
 Araçatuba, 2014 
  98 f. : il. ; tab. + 1 CD-ROM 
 
  Dissertação (Mestrado) – Universidade Estadual Paulista,  
 Faculdade de Odontologia de Araçatuba 
  Orientador: Prof. Luciano Tavares Angelo Cintra 
  Coorientador: Prof. Paulo César Ciarlini 
 
  1. Diabetes Mellitus 2. Periodontite apical 3. Stress 
 oxidativo 4. Antioxidantes I. Título 
 
    Black D24 
    CDD 617.67 
 

 
 



 
 

 
 

DADOS CURRICULARES 

 

Annelise Katrine Carrara Prieto 

 

 

Nascimento                        22-09-1988  

                                                              Diadema-SP  

 

Filiação                                      Valentina Aparecida Carrara 

                                            Ramón Dario Prieto Benitez  

 

2006/2011                         Curso de Graduação em Odontologia pela 

Faculdade de Odontologia de Araçatuba - 

Universidade Estadual Paulista “Júlio de 

Mesquita Filho”.          

   

2012/2014                  Curso de Mestrado em Ciência Odontológica, área 

de concentração em Endodontia pela Faculdade 

de Odontologia de Araçatuba - Universidade 

Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”. 

 

Associações                        Sociedade Brasileira de Pesquisas Odontológicas  

                                    Associação Internacional de Pesquisas 

Odontológicas 

 

 

 

 

 



 
 

 
 

 

À minha mãe Valentina, que fez o possível e o impossível para me 

educar e não poupou esforços para me entender, apoiar e incentivar. Este 

momento não seria possível sem o seu amor, dedicação e esforço. Estaremos 

sempre unidas pelo nosso amor, você é o meu anjo da guarda, te amo! 

 

À minha segunda mãe, minha avó Regina, que sempre me incentivou. 

Meu exemplo de mulher forte, guerreira e objetiva. Obrigada por todo amor, 

atenção e cuidado que tem por mim. Te amo muito! 

 

Aos meus tios Valdir e Luis Carlos, as duas pessoas mais 

esforçadas e responsáveis que conheço. Vocês me inspiram! Este trabalho 

jamais se realizaria sem o apoio, carinho, incentivo e compreensão de vocês! 

Amo-os! 

 

Ao meu noivo, companheiro e amigo Alstyn, este trabalho não existiria 

sem o seu amor, paciência e incentivo. Obrigada por me levantar cada vez que 

desanimava, e estar do meu lado em todos os momentos, te amo! 

 

Dedico este trabalho a minha família, que é responsável por todos os 

meus passos, nada do que sou seria possível sem vocês. O meu amor, respeito e 

admiração cresce a cada dia por cada um! 

 



 
 

 
 

Ao meu orientador, Luciano Tavares Angelo Cintra, pela paciência, 

dedicação e compromisso que teve comigo e com o nosso trabalho.  Seus 

ensinamentos me deram base para a vida acadêmica. Admiro seu 

profissionalismo, competência, dedicação e persistência no seu exercício como 

professor de graduação, pós-graduação e pesquisador.  Considero-me 

afortunada por ter estado sob sua orientação estes anos!  

 

Ao meu co-orientador, Paulo César Ciarlini, pela colaboração 

imprescindível para a realização deste trabalho.  Obrigada pela paciência, 

competência e dedicação! 

 

À amiga de pós-graduação, Mariane Maffei Azuma, pelo auxílio, 

companheirismo, compromisso e dedicação que teve comigo e com o trabalho. 

Obrigada por fazer meu curso de mestrado inesquecível! Este trabalho não se 

realizaria sem a sua ajuda! 

  

Ao professor, Mauro Juvenal Nery, pela amizade, incentivo e ajuda, 

desde a graduação. O Professor me introduziu à endodontia e fez a  diferença 

no meu aprendizado. Você é Espetacular! 

 

Ao pós-graduando em Ciência Animal da Faculdade de Medicina Veterinária de 

Araçatuba, Luis Gustavo Narciso, pelo auxílio intensivo na realização 

deste trabalho. Obrigada pela paciência, disposição e compreensão! 



 
 

 
 

 

A Deus, por ter permitido a realização deste sonho, me guiado em todos os 

momentos e colocado pessoas maravilhosas ao meu lado durante esta 

caminhada. 

 

À Faculdade de Odontologia de Araçatuba, pela formação 

acadêmica e oportunidades de aprendizado. 

 

À Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo, 

pela concessão da bolsa de mestrado. 

 

À secretaria de Pós-graduação da Faculdade de Odontologia, 

de Araçatuba pela orientação e suporte acadêmico. 

 

Ao Professor de Endodontia da Faculdade de Odontologia de Araçatuba, João 

Eduardo Gomes Filho, pelos ensinamentos valiosos durante o curso de 

graduação e pós-graduação. Obrigada por todas as contribuições dadas ao 

trabalho! 

  

Ao Professor de Endodontia da Faculdade de Odontologia de Araçatuba, Eloi 

Dezan Júnior, pela paciência, otimismo, perseverança e competência que 

sempre conduziu a clínica de Endodontia. Obrigada por todo o ensinamento e 

auxílio que me proporcionou! 

 

 

 



 
 

 
 

Aos funcionários do departamento de Odontologia Restauradora da Faculdade 

de Odontologia de Araçatuba, Nelci Vieira e Cláudia Neves, pelo auxílio 

efetivo e indispensável ao trabalho. Pela amizade, apoio, paciência, 

compreensão e incentivo. Muito obrigada pelos ótimos momentos! 

 

Aos funcionários do departamento de Odontologia Restauradora da Faculdade 

de Odontologia de Araçatuba, Peterson, Elaine e Graziele, pela ajuda, 

paciência, amizade e bons momentos compartilhados no laboratório de 

endodontia! 

 

À pós-graduanda em Ciência Animal da Faculdade de Medicina Veterinária de 

Araçatuba, Jucilene Souza, por todo o auxílio prestado ao trabalho. 

Obrigada pela colaboração e paciência!   

 

Ao medico veterinário, Alstyn Momette, pelo serviço prestado aos ratos do 

biotério de Endodontia, que compuseram o trabalho. Obrigada pelo auxílio e 

sugestões oferecidas! 

 

À amiga, Loiane Massunari, pelo carinho, apoio, ajuda e incentivo que me 

deu durante todo o curso de mestrado. Obrigada pelo ombro amigo em todos 

os momentos que precisei, pelos conselhos, e os ótimos momentos e risadas 

compartilhadas. Ter te conhecido no mestrado fez diferença para mim!  

 

Ao amigo, Diego Valentim, que sempre esteve disposto a me ajudar, ouvir e 

torcer por mim. Obrigada pelo incentivo, companheirismo, auxílio, conversas e 

pela amizade durante estes anos de pós-graduação! 

 



 
 

 
 

Às amigas Lucianetes, Luciana Ferreira Louzada, Renata Oliveira 

Samuel, Francine Benetti, Marcela Ito e Mariane Maffei 

Azuma, muito obrigada pelos momentos, conversas, risadas e experiências 

compartilhadas! Vocês fizeram a alegria no meu mestrado, tenho orgulho de ter 

feito parte deste grupo de pesquisa tão unido, sério e competente! Orgulho em 

ser uma Lucianete! Obrigada a todas vocês pela ajuda, apoio e incentivo! 

 

À amiga, Ìndia Olinta Azevedo, pelas conversas, franqueza, apoio e ajuda 

oferecida. Muito obrigada!  

 

Aos amigos, Paulo Duarte e Simone Wanatabe, pela amizade, ajuda, 

apoio, bons momentos, e exemplo de profissionais dedicados e responsáveis. 

 

Aos amigos de pós-graduação, Ludmilla Santos, Christine Men 

Martins, Marcelo Wayama, Gabriely Rezende e Carlos Bueno, 

pelo bom convívio e experiências compartilhadas. 

 

À amiga, Adilene Ângulo Gastélum, pela amizade, apoio e incentivo. 

Amizade que surgiu graças à Endodontia e que continua mesmo com a distância 

México-Brasil. Muito obrigada pelos bons momentos! 

 

As amigas, Ana Paula Moreira e Vanessa Carvalho, pela amizade, 

incentivo, apoio e ombro amigo. Porque as amizades verdadeiras continuam 

mesmo a distância! 



 
 

 
 

À amiga, Rita de Cássia Nunes, pelas inúmeras vezes que me escutou, 

incentivou, ajudou, solucionou meus problemas e respondeu minhas dúvidas. 

Muito obrigada por estar sempre perto quando precisei! 

 

Ao amigo, Rafael Astholfi, pelo companheirismo, auxílio e bons momentos 

vividos na pós-graduação. Obrigada por tudo e por me apresentar meu grande 

amor! 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 



 
 

 
 

 

"Lembremo-nos de que o homem 

interior se renova sempre. A luta 

enriquece-o de experiência, a dor 

aprimora-lhe as emoções e o 

sacrifício tempera-lhe o caráter. O 

Espírito encarnado sofre constantes 

transformações por fora, a fim de 

acrisolar-se e engrandecer-se por 

dentro". 

 
Chico Xavier 

 



 
 

 
 

PRIETO, AKC. Metabolismo oxidativo sérico em ratos diabéticos com lesão periapical. 

2014. Dissertação (Mestrado) – Faculdade de Odontologia, Universidade Estadual 

Paulista, Araçatuba, 2014. 

RESUMO 

Este trabalho teve como objetivo avaliar a influência da infecção endodôntica associada 

ou não à diabetes, nas concentrações séricas dos antioxidantes endógenos albumina, 

bilirrubina e ácido úrico, da capacidade antioxidante total (TAC) e do parâmetro 

oxidante malonaldeído (MDA) em soro sanguíneo de ratos Wistar. Foram utilizados 40 

ratos divididos em 4 grupos: euglicêmicos (C); euglicêmicos com lesão periapical (LP); 

diabético (D) e diabético com lesão periapical (D+LP). A diabetes foi induzida 

quimicamente pela utilização da droga Aloxano, via intramuscular, na dose de 150 

mg/kg, e a lesão periapical, por meio da exposição pulpar do primeiro molar superior  

direito ao meio bucal durante 30 dias. Após este período, foi coletado o sangue, através 

de punção cardíaca para obtenção do soro, e também, as hemimaxilas, para o 

processamento histológico. No soro foi realizada a mensuração da albumina pela técnica 

verde de bromocresol, bilirrubina por Van der Bergh, ácido úrico pela uricase, TAC 

pela captura do radical livre ABTS, e MDA pelo ensaio das substâncias reativas ao 

ácido tiobarbitúrico (TBARS). Na análise histológica foram avaliadas a intensidade e 

extensão da inflamação, reabsorção radicular e tamanho da lesão. Os valores foram 

analisados pelos testes de análise de variância (ANOVA) e de Tukey (p<0,05). Os 

valores obtidos em escores foram analisados estatisticamente, por meio dos testes de 

Kruskal-Wallis e Dunn (p<0,05). Nos ratos diabéticos (D e D+LP) houve um aumento 

da concentração de MDA e ácido úrico e uma diminuição de albumina em relação aos 

ratos euglicêmicos (C e LP). O grupo D+LP comparado ao D apresentou um aumento 

de ácido úrico e diminuição de albumina. A análise histológica mostrou que a lesão 

periapical de ratos diabéticos (D+LP) possui maior severidade quando comparada com a 

dos ratos euglicêmicos (LP). A lesão periapical associada com a diabetes altera o status 

antioxidante, diminuindo a concentração sérica de albumina e aumentando a de ácido 

úrico. 

 Palavras-chave: Diabetes. Lesão periapical. Estresse oxidativo. 



 
 

 
 

PRIETO, AKC. Oxidative metabolism in blood serum of diabetic rats with or without 

periapical lesion. 2014. Faculdade de Odontologia, Universidade Estadual Paulista, 

Araçatuba, 2014.   

ABSTRACT 

This study aimed to evaluate the influence of endodontic infection associated with or 

without diabetes, in the serum concentrations of endogenous antioxidants albumin, 

bilirubin and uric acid, total antioxidant capacity (TAC) and oxidant parameter, 

malondialdehyde (MDA) in blood serum of the Wistar. It were used 40 rats in 4 groups: 

euglycemic (E); euglycemic with periapical lesion (PL); diabetic (D) and diabetic with 

periapical lesion (D + PL). Diabetes was chemically induced by alloxan  

intramuscularly at a dose of 150 mg/kg and periapical lesion by exposure right first 

molar to the oral environment for 30 days. After this period, blood was collected via 

cardiac puncture to obtain serum, and also the hemi-jaws for histological processing. 

Albumin measurement by bromocresol green technique, bilirubin by Van der Bergh, 

uric acid by uricase, TAC by capturing the free radical ABTS, and MDA by assay of 

thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) were performed in serum. In the 

histological analysis, the intensity and extent of inflammation, root resorption and bone 

loss were evaluated. The values were analyzed by analysis of variance tests (ANOVA) 

and Tukey‟s test (p < 0.05). The values obtained for scores were statistically analyzed 

by the Kruskal- Wallis test and Dunn‟s tests (p < 0.05). In diabetic rats (D and D + PL) 

there was an increase in the concentration of MDA and uric acid while decrease in 

albumin compared to euglycemic rats (E and PL).  D + PL group compared to D 

showed an increase of uric acid and decreased albumin. Histological analysis showed 

periapical lesion of diabetic rats (D + PL) has a greater severity when compared with 

the euglycemic rats (PL). Periapical lesion associated with diabetes changes the 

antioxidant status, reducing serum levels of albumin and increasing serum levels of uric 

acid. 

Keywords: Diabetes. Periapical Lesion. Stress Oxidative. 

 

 

 



 
 

 
 

Lista de tabelas 

Página 

Tabela 1 - Distribuição dos grupos experimentais de acordo com os 
procedimentos locais e condições sistêmicas dos animais: 42 

Tabela 2 - Média e desvio padrão da massa corporal inicial e final em 

mg/dl. 
50 

Tabela 3 - Média e desvio padrão da glicemia em mg/dl. 50 

Tabela 4 - Média e desvio padrão da concentração sérica de albumina em 

mg/dl.  
51 

Tabela 5 - Média e desvio padrão da concentração sérica de ácido úrico 

em mg/dl. 
52 

Tabela 6 - Média e desvio padrão da concentração sérica de bilirrubina em 

mg/dl. 
53 

Tabela 7 - Média e desvio padrão da concentração sérica de TAC em 

mmol / L. 
54 

Tabela 8 - Média e desvio padrão da concentração sérica de MDA em 

µmol/L. 
55 

Tabela 9 - Representação dos scores atribuídos para os critérios de 

intensidade do infiltrado inflamatório e extensão da inflamação, reabsorção 

óssea e das médias de área da lesão periapical (µm2). 

62 

  

  

 

 

 

 

 

 

 

 



 
 

 
 

Lista de figuras 

Página 

Figura 1 - Injeção de aloxano via intramuscular em rato Wistar. 41 

Figura 2 - (A) punção caudal para obtenção de sangue; (B) mensuração da 

glicemia; (C) resultado obtido da mensuração glicêmica . 
41 

Figura 3 - (A) exposição do primeiro molar superior direto por meio da 

broca Ln; (B) primeiro molar superior direito com exposição pulpar 

realizada. 

41 

Figura 4 -(A) punção cardíaca no ventrículo esquerdo; (B) armazenamento 

em tubos a vácuo para obtenção do soro. 
44 

Figura 5- Espectrofotômetro automatizado. 44 

Figura 6 - Representação gráfica da média e desvio padrão da 

concentração sérica de albumina em mg/dl. 
52 

Figura 7 - Representação gráfica da média e desvio padrão da 

concentração sérica de ácido úrico em mg/dl. 
53 

Figura 8 - Representação gráfica da média e desvio padrão da 

concentração sérica de bilirrubina em mg/dl. 
54 

Figura 9 - Representação gráfica da média e desvio padrão da 

concentração sérica de TAC em mmol/L. 
55 

Figura 10 - Representação gráfica da média e desvio padrão da 

concentração sérica de MDA em µmol/L. 
56 

Figura 11- Imagens representativas de espécime do grupo E: (a, b) aspecto 

microscópico do periápice dentário evidenciando normalidade nos tecidos 

pulpares e periapicais [10x e 100x - H.E.]; (c) pré-dentina e dentina 

íntegras, camada de odontoblastos organizada [400x – H.E]; (d) ausência 

de inflamação [400x – H.E.]. 

58 

Figura 12 - Imagens representativas do grupo LP: (a) aspecto 

microscópico panorâmico do periápice dentário evidenciando presença de 

inflamação, desorganização do ligamento periodontal e  área de reabsorção 

óssea [10x - H.E.]; (b) Periápice dentário evidenciando presença de 

infiltrado inflamatório crônico [100x - H.E.]; (c) presença de infiltrado 

inflamatório crônico e moderada área de reabsorção cementária [400x – 

H.E.]; (d) tecido pulpar necrosado [400x – H.E.]. 

59 



 
 

 
 

Figura 13 - Imagens representativas do grupo D: (a, b)  periápice dentário 

demonstrando tecidos pulpares e periodontais com aspectos de 

normalidade  [10x e 100x - H.E.]; (c) polpa dentária demostrando dentina, 

pré-dentina e odontoblastos com aspectos de normalidade [400x – H.E.]; 

(d) periápice com ausência de inflamação e integridade tecidual [400x - 

H.E.]. 

60 

Figura 14 - Imagens representativas do grupo D+LP: (a, b) aspecto 

microscópico panorâmico do periápice dentário evidenciando presença de 

inflamação, desorganização do ligamento periodontal e  área de reabsorção 

óssea [10x e 100x - H.E.]; (c) necrose do tecido pulpar e reabsorção 

cementária [400x – H.E.];  (d) infiltrado inflamatório agudo com grande 

concentração de neutrófilos [400x – H.E]. 
 

61 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 



 
 

 
 

Lista de abreviaturas 

 

ABTS       2,2 azinobis (3-etilbenzotiazolina-6-ácido sulfônico)  

AGE          produtos finais de glicação avançada 

AGPI        ácidos graxos poliinsaturados  

ANOVA    análise de variância  

CAT           catalase 

DM            diabetes mellitus 

DNA          ácido desoxirribonucleico 

DP             doença periodontal 

DRC          doença renal crônica  

EDTA        ácido etilenodiamino tetra-acético 

eNOS         óxido nítrico sintase endotelial 

EO              estresse oxidativo 

FRAP         ferric-reducing ability of plasma 

GPx            glutationa peroxidase 

GSH            glutationa reduzida 

GSR            glutationa 



 
 

 
 

GST            glutationa transferase 

LP               lesão periapical 

LPO            lipoperoxidação  

MDA           malonaldeído  

MTA           mineral trioxido agregado  

NADPH     nicotinamida adenina dinucleótido fosfato reduzida 

NFkB         fator nuclear kappa B 

NO              óxido nítrico 

ORAC         oxygen-radical absorbancy capacity 

PA               periodontite apical 

PAI-1         inibidor do ativador do plasminogênio - tipo 1 

PKC            proteína quinase C 

RAGE         receptor de produtos finais de glicação avançada 

RL               radical livre 

ROS            espécies reativas ao oxigênio  

SOD            superóxido dismutase 

TAC            capacidade antioxidante total 

TBARS       substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico  



 
 

 
 

TEAC          trolox equivalent antioxidante capacity  

TGF-α         fator de transformação do crescimento - alfa 

TGF-β1      fator de transformação do crescimento - beta  

TRAP         total radical trapping antioxidante parameter    

VEFG          fator de crescimento do endotélio vascular  

  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 



 
 

 
 

Sumário 

Página 

I- Introdução                                                                                      20 

  

II-Revisão de literatura  24 

  

III-Objetivos 36 

  

IV-Material e Método 38 

  

V-Resultados 49 

  

VI-Discussão 64 

  

VII-Conclusão 70 

  

VIII-Referências  72 

  

IX- Anexos 92 

 

  



 
 

 
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Introdução



 
 

21 
 

  I- INTRODUÇÃO 

Antioxidantes são substâncias capazes, em baixas concentrações, de competir 

com outros substratos oxidáveis e, portanto, atrasar significativamente ou inibir a 

oxidação (Halliwell & Gutteridge, 2007). Assim, os antioxidantes possibilitam ao 

organismo a manutenção de seu estado redox. O sistema de defesa antioxidante nos 

seres vivos pode atuar de três formas: como antioxidantes de prevenção, que impedem a 

formação de radicais livres; como varredores, impedindo o ataque de radicais livres às 

células; e de reparo, favorecendo a remoção de danos da molécula de ácido 

desoxirribonucleico (DNA) e a reconstituição das membranas celulares danificadas 

(Jacob, 1985; Strain & Benzie, 1998).  

Os antioxidantes podem ser enzimáticos e não enzimáticos. Os enzimáticos 

correspondem a superóxido dismutase, catalase e peroxidase; os não enzimáticos 

endógenos compreendem bilirrubina, glutationa, ácido úrico e albumina, e os não 

enzimáticos adquiridos pela dieta são alfa tocoferol, beta caroteno, ácido ascórbico, 

carotenóides e bioflavonóides (Sies, 1985 ; Papas, 1999). Quando há uma deficiência 

destes antioxidantes ou um aumento na produção de radicais livres há um estado de 

estresse oxidativo. 

O estresse oxidativo é relacionado com diversas patologias como hepatite B (Xia 

et al., 2013), diabetes tipo 1 (Răchişan et al., 2014), diabetes tipo 2 (Liani et al., 2012) 

doenças vasculares (Bachschmid et al., 2012), doenças pulmonares crônicas (Gorowiec 

et al., 2012), hipertensão (Pakdeechote et al., 2014) artrite reumatóide (Hassan et al., 

2011), doença arterial coronária (Tayal et al., 2012), aterioesclerose (Hulsmans et al., 

2012), AIDS (Awodele et al., 2012), câncer (Valko et al., 2006), doença periodontal 

(Patel et al., 2012; Masi et al., 2011; Allen et al., 2011) e infecção endodôntica (Wolle 

et al., 2013). 

 O metabolismo oxidante do organismo é fundamental para a compreensão dos 

mecanismos envolvidos nos danos teciduais (Chapple  et al., 2007) e contribui para 

terapias que visam mediar o estresse oxidativo (Kim et al., 2012; Stvolinsky et al., 

2012; Gao et al., 2012) inclusive relacionada a lesões periapicais (Wolle et al., 2012; 

Wolle et al., 2013) e doença periodontal (Tilakaratne & Soory, 2012). 

Como já mencionado, o estresse oxidativo está relacionado à diabetes, tanto tipo 

1 quanto tipo 2,  possuindo papel na sua patogênese (Maritim et al., 2003;  West et al., 

2000; Rahimi et al., 2005). A diabetes mellitus (DM) é uma doença metabólica 

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=Pakdeechote%20P%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=24772821


 
 

22 
 

caracterizada por hiperglicemia devido aos defeitos na secreção de insulina, ou da ação 

da insulina, ou ainda ambos. A hiperglicemia crônica está associada a danos a longo 

prazo, disfunção, e falha de vários órgãos, principalmente olhos, rins, nervos, coração e 

vasos sanguíneos. Segundo dados da Federação Internacional de Diabetes, em 2013, 

382 milhões de pessoas no mundo tinham diabetes e este número deverá subir para 592 

milhões até 2035. No Brasil 11,9 milhões de pessoas são portadoras (9% da população) 

da doença diabetes, ocupando o 4º lugar no ranking dos países com maior número de 

diabéticos (Guariguata et al., 2014). 

Há estudos que mostram alta prevalência de infecção endodôntica em pacientes 

diabéticos descontrolados (Bender & Bender, 2003; Brito et al.,2003; Fouad & 

Berleson, 2003a; Fouad, 2003b; Iwana et al., 2003; Segura Egea et al., 2012). Uma das 

consequências da infecção endodôntica é o desenvolvimento de periodontite apical (PA) 

(Colic et al., 2010), que histologicamente, é caracterizada por um tecido granulomatoso 

infiltrado por células inflamatórias (Lukic et al., 2008), e é formada em resposta ao 

estímulo antigênico contínuo proveniente dos canais radiculares infectados (Zhang et 

al., 2005; Xiong et al., 2009).  

Sabe-se que os pacientes diabéticos têm maior perda dentária decorrente do 

insucesso endodôntico (López-López et al., 2011; Wang et al., 2011; Ng et al., 2011), 

fato que indica a deficiente resposta do organismo diabético frente às infecções (Fouad 

& Burleson, 2003a), devido à alteração da circulação pulpar (Tennenberg et al., 1999), 

disfunção microbicida de polimorfonucleares (Bender & Bender, 2003) e aumento da 

carga bacteriana (Iwana et al., 2006). No entanto, evidências que suportam a 

patogênese, progressão e resolução das infecções endodônticas em pacientes com DM 

são ainda escassas e inconclusivas (Ferreira et al., 2014). Alguns trabalhos relacionam a 

lesão periapical com o metabolismo oxidativo, mostrando aumento de parâmetros 

oxidantes e diminuição de antioxidantes (Cherkashin et al., 1989; Dezerega et al., 

2012).  

Dentre os parâmetros antioxidantes podemos destacar a capacidade antioxidante 

total (TAC), que é uma visão geral das interações entre os antioxidantes, (Maxwell et 

al., 2006), e não apenas a soma das capacidades antioxidantes de cada componente, já 

que eles interagem entre si, apresentando efeitos sinérgicos ou inibitórios (Kuskoski et 

al., 2005).  



 
 

23 
 

A avaliação de TAC inclui a mensuração de antioxidantes não enzimáticos, tanto 

de natureza lipofílica como hidrofílica (Kuskoski et al., 2005), tais como albumina, 

GSH, ácido ascórbico, α-tocoferol, β-caroteno, ácido úrico, bilirrubina, e flavonoides 

(Prior & Cao, 1999). Há estudos que relacionaram TAC com as infecções bucais, 

particularmente a doença periodontal, processos cariosos e dor temporomandibular 

(Akalin et al., 2009; Žilinskas et al., 2011; Kumar et al., 2011). A avaliação isolada de 

antioxidantes endógenos, tais como albumina, bilirrubina e ácido úrico também se 

mostra uma alternativa confiável para se estabelecer parâmetros que influenciam no 

desequilíbrio fisiológico tecidual (Kim et al., 2012). 

Além do estudo de TAC e dos antioxidantes endógenos de forma isolada, a 

avaliação de parâmetros oxidantes complementa o entendimento do estresse oxidativo 

tecidual. A lipoperoxidação lipídica (LPO) é uma das principais consequências do 

estresse oxidativo e um indicador indireto da ação dos radicais livres (Halliwell et al., 

1990). Uma das técnicas mais utilizadas para mensurar a LPO é a mensuração de 

malonaldeído (MDA), que é um dialdeído formado como produto secundário durante a 

oxidação de ácidos graxos poli-insaturados. 

Investigações sobre oxidantes e antioxidantes em modelos experimentais com 

lesão pulpar são escassos na literatura e não existem estudos que associam a lesão 

periapical de origem endodôntica à diabetes com enfoque na avaliação do estresse 

oxidativo. Com isso, buscou-se investigar a influência da infecção endodôntica e 

consequente lesão periapical associada à diabetes no metabolismo oxidativo sérico.



 
 

 

 

 

 

Revisão de Literatura 
 

 



 
 

25 
 

II- REVISÃO DE LITERATURA 

I- Estresse oxidativo, diabetes e complicações.  

O termo estresse oxidativo (EO) foi cunhado em 1985 por Helmut Sies e desde 

então diversos estudos foram realizados buscando esclarecer seu papel nos processos 

fisiológicos e patológicos. O estresse oxidativo resulta do desequilíbrio entre as 

concentrações de radicais livres (RLs) e antioxidantes, o que leva a uma alteração 

fisiológica tecidual (Halliwell & Gutteridge, 2007). 

O oxigênio desempenha um papel duplo na célula: é essencial para organismos 

aeróbios, mas também pode gerar RLs (Gaté et al., 1999). RL é um átomo ou molécula 

que possui número ímpar de elétrons em sua última camada eletrônica, o que o deixa 

altamente reativo (Halliwell & Gutteridge, 1990; Halliwell, 1992). Eles são formados 

constantemente em consequência do metabolismo fisiológico ou das alterações 

patológicas e, quando produzidos em exagero, são nocivos e alteram a estrutura 

molecular de carboidratos, proteínas, lipídeos e DNA, trazendo prejuízo a essas 

moléculas essênciais (Haliwell & Gutteridge, 2007). Os RLs oriundos do oxigênio são 

chamados de espécies reativas de oxigênio (ROS). 

Os RLs são gerados a partir do oxigênio triplete, o qual respiramos, que é 

reduzido e forma uma nova espécie, o ânion superóxido. Este processo é mediado por 

enzimas como NADPH oxidase, xantina oxidase e glucose oxidase como também por 

componente redox reativo como a semi-ubiquinona e a cadeia de transporte de elétrons 

na mitocôndria (Deby & Goutier, 1990; Fridovichi, 1978). Quando protonado o ânion 

superóxido é denominado radical hidroperoxila, e possui facilidade em iniciar 

destruição de membranas biológicas (Halliwell & Gutteridge, 1990). O radical 

superóxido também pode ser transformado em peróxido de hidrogênio, por meio da 

enzima superóxido dismutase (SOD) (Chance et al., 1979). Este radical é um metabólito 

do oxigênio de vida longa, que consegue atravessar camadas lipídicas e reagir com o 

Fe++ aumentando sua toxicidade (Scott et al., 1991). O peróxido de hidrogênio na 

presença de metais de transição como o íon ferroso converte-se em radical hidroxila 

(Chance et al., 1979), este RL possui alta reatividade no seu próprio sítio de produção, 

portanto, se produzido próximo ao DNA e este fixado a um metal, poderá causar 

modificações de bases purínicas e pirimidínicas, que levam à inativação ou mutação do 



 
 

26 
 

DNA. O radical hidroxila também atua na inativação de várias proteínas, oxidando 

grupos sulfidrilas a pontes dissulfeto, e iniciando assim a oxidação dos ácidos graxos 

poliinsaturados das membranas celulares (Halliwell & Gutteridge, 1986). 

Os RLs existem em células e tecidos biológicos em baixas concentrações 

(Halliwell & Gutteridge, 2007) que são determinadas pelo equilíbrio entre as suas taxas 

de produção e depuração ou por meio de antioxidantes (Droge, 2002). Eles estão 

envolvidos na patogênese de várias doenças, incluindo a diabetes, que é causada pela 

destruição autoimune das células-β pancreáticas com consequente deficiência de 

insulina, ou anormalidades que resultam na resistência à ação da insulina. Deficiência 

de ação e secreção existe no mesmo paciente frequentemente, e nem sempre é claro qual 

anormalidade, sozinha, é a principal causa da hiperglicemia. A deficiência da ação da 

insulina nos tecidos alvo resulta em anormalidades no metabolismo de carboidratos, 

lipídeos e proteínas (American Diabetes Association, 2014). 

Na diabetes há um aumento na produção de RLs (Baynes, 1999; Young, 1995) ou 

deficiência nas defesas antioxidantes (McLennan et al., 1991), e o EO é apontado como 

participante nas complicações diabéticas (Ceriello, 2000; Baynes, 1991). 

A hiperglicemia é o fator causador do aumento do EO em diabéticos, ela causa 

um excesso na produção do radical superóxido na cadeia de transporte de elétrons 

mitocondrial (Nishikawa et al., 2000; Browlee, 2005;) que em consequência ativa cinco 

vias, a formação de produtos finais de glicação avançada (AGEs), o aumento da 

expressão do receptor de AGEs, o RAGE, o aumento do fluxo da via dos polióis, 

ativação da proteína kinase C (PKC), e a hiperatividade da via hexosamina, todas 

envolvidas nas complicações diabéticas (Browlee, 2005; Giacco & Brownlee, 2010). 

 Os AGEs, ligações entre carboidratos e proteínas, podem ocorrer formando 

bases de Schiff, as quais dão origem a produtos Amadori, este é um processo reversível 

que depende das concentrações da glicemia. No entanto, quando ocorrem modificações 

em sua estrutura, por meio de reações de desidratação e oxidação, estes produtos se 

tornam mais reativos, e com a capacidade de realizar ligações irreversíveis com as 

proteínas, causando alteração da funcionalidade proteica (Sakurai e Tsuchiya, 1988; 

Rocha et al., 2006; Goldim et al., 2006). A formação dos AGEs, não realiza apenas a 

glicação e fragmentação de proteínas, eles também estão envolvidos no processo de 



 
 

27 
 

auto-oxidação da glicose que geram por sua vez mais ROS (Hunt et al., 1990, Zyzak et 

al., 1995).  

Outro fator que induz as complicações diabéticas é a ligação dos AGEs aos 

seus receptores RAGEs, que existem em macrófagos, células endoteliais vasculares e 

células de músculo liso vascular, esta ligação provoca a produção de ROS, que por sua 

vez ativa o fator de transcrição pleiotrópico, fator nuclear kappa B (NFkB), causando 

várias alterações patológicas na expressão genética (Goldin et al., 2006). 

O fluxo aumentando da via dos polióis causado pela hiperglicemia aumenta a 

atividade das enzimas aldose redutase e sorbitol desidrogenase, estas provocam 

acúmulo intracelular de sorbitol e frutose, que provoca um aumento redox devido ao 

consumo NAPDH, que é um cofator necessário para regenerar a glutationa reduzida 

(GSH), que por sua vez é um importante limpador de RLs, induzido, portanto, o EO 

intracelular (Giacco & Browlee, 2010). 

 A proteína C quinase (PKC), é um sinalizador intracelular envolvidos na 

regulação de muitas funções vasculares. Quando ativada pela glicose, a PKC ativa 

NAD(P)H oxidases, levando ao aumento na formação de RLs (Inoguchi et al., 2003), 

induzindo a expressão do fator VEGF (Williams et al., 1997), diminuindo a produção de 

óxido nítrico (NO) (Ganz & Seftel, 2000) e inibindo a expressão de óxido nítrico sintase 

endotelial (eNOS) (Kuboki et al., 2000).   

E por último a hiperglicemia também é capaz de aumentar a via hexosamina, na 

qual a frutose-6-fosfato é desviada da glicólise servindo de substrato para a enzima 

glutamina, este processo esta envolvido no aumento da transcrição de TGF-α (fator de 

transformação do crescimento - alfa), TGF-β1 (fator de transformação do crescimento - 

beta)  e PAI-1 (inibidor do ativador do plasminogênio - tipo 1) (Sayeski & Kudlow, 

1996; Kolm-Litty et al.,1998; Giacco & Browlee, 2010). 

Os mecanismos resultantes da hiperglicemia e do consequente aumento de 

ROS (espécies reativas de oxigênio) estão envolvidos na patogenia da micro e da 

macroangiopatia diabética.  Na microangiopatia, como consequência direta da 

hiperglicemia intracelular, e na macroangiopatia, decorrente do aumento no fluxo de 

ácidos graxos (Giacco & Browlee, 2010). A macroangiopatia está associada ao infarto 

do miocárdio, acidente vascular cerebral e gangrena de membros inferiores (Monteiro et 



 
 

28 
 

al., 2007), e a microangiopatia nos processos patológicos como retinopatia, nefropatia e 

neuropatia diabética, pois nestes tecidos há independência de insulina para a captação 

de glicose (Browlee, 2005).  

 

II- Diabetes e infecções endodônticas  

A hiperglicemia causa glicação não enzimática de proteínas, e a persistência da 

hiperglicemia acaba levando a formação de AGEs, onde as ligações com proteínas são 

irreversíveis. Portanto, quando a glicose se liga a proteínas de longa vida como 

albumina e colágeno, estes compostos se depositam na membrana basal causando 

espessamento de capilares, que leva a microangiopatia (Vlassara & Palace, 2002; 2003; 

Basta et al., 2004), os capilares diabéticos possuem uma tendência à agregação 

plaquetária gerando a lentificação do fluxo sanguíneo capilar (Huntley, 1995).   

As alterações microvasculares são observadas na polpa dental diabética, que 

conduz a uma diminuição no fluxo sanguíneo pulpar (Amatyakal et al., 2006) 

promovendo uma menor oxigenação do tecido pulpar (Leite et al., 2008), supressão 

microbicida de neutrófilos, dificuldades do sistema de defesa humoral e celular de 

comparecer ao local da injúria, e aumento da probabilidade de infecções anaeróbias 

(Bender & Bender, 2003), conduzindo a necrose pulpar (Catanzaro et al., 2006). Em 

consequência a contínua agressão que a polpa sofre em decorrência da hiperglicemia, 

ocorre um contínuo quadro de inflamação, confirmado pela presença de componentes 

inflamatórios, como calicreína e mieloperoxidase (Catanzaro et al., 2006), e também a 

ocorrência de estresse oxidativo, indicado pelas alterações dos parâmetros oxidantes e 

antioxidantes (Leite et al., 2008). Outra característica da polpa diabética é sua matriz 

extracelular alterada devido à diminuição de colágeno, presença de AGEs e aumento da 

colagenase (Catanzaro et al., 2006), conduzindo a alterações de sua arquitetura celular. 

É bem elucidado que a polpa dentária, na presença de hiperglicemia é incapaz de 

desempenhar sua capacidade de defesa. Portanto, agentes infecciosos, traumas, ou até 

mesmo procedimentos curativos e estéticos, como capeamento pulpar, restauração de 

cavidades profundas e clareamento, não conseguem provocar na polpa uma resposta 

protetora eficiente (Leite et al., 2008).  No estudo de Garber et al., 2009, a polpa dental 



 
 

29 
 

de rato foi incapaz de promover a formação de ponte de dentina em decorrência do 

capeamento pulpar com MTA, mostrando sua dificuldade em reparação. 

Estudos mostram que a diabetes é capaz de aumentar a progressão e severidade 

de lesões periapicais (Kohsaka et al., 1996; Foaud et al., 2002; Iwama et al., 2003; 

Armada- Dias, 2006; Kodama et al., 2011; Nakahara et al., 2012), permitir o aumento 

bacteriano intracanal e, diminuir a quimiotaxia (Iwama et al., 2006) em modelos 

animais, e que esse quadro pode ser melhorado pelo controle glicêmico (Nakahara et al., 

2013). 

 Não é apenas a polpa dental que está mais frágil na condição diabética, o estudo 

de Yeh et al., 2012 mostra que a hiperglicemia em combinação com redução salivar, 

leva a diminuição de proteínas de mineralização e matriz do esmalte, deixando o dente 

um alvo mais susceptível a penetração bacteriana. As lesões periapicais são 

consequências tanto do aumento da susceptibilidade à cárie (Kodama et al., 2011; 

Nakahara et al., 2012; Yeh et al., 2012), como também, da via de anacorese (Bender & 

Bender, 2003).  

Estudos clínicos e epidemiológicos reforçam a influência da diabetes nas 

infecções endodônticas, já que, em pacientes diabéticos existe uma maior prevalência de 

periodontite apical, tratamento endodôntico, probabilidade de casos assintomáticos, 

risco de extração após o tratamento endodôntico, pior prognóstico para dentes obturados 

e maior probabilidade de envolvimento periodontal (Brito et al., 2003; Fouad 

&Burleson, 2003; Wang et al., 2011; López-López et al., 2011; Marotta et al., 2012 

Ferreira et al., 2014). Outra particularidade clínica é a frequência com que pacientes 

diabéticos apresentam calcificações pulpares (Bender & Bender, 2003), fato que pode 

ser explicado pelo aumento da expressão de osteopontina em pacientes diabéticos 

(Inagaki et al., 2010). 

Devido à potencialização que a diabetes causa nos processos infeciosos, 

enfatiza-se a necessidade de pesquisar a microbiologia e as reações imunoinflamatórias 

envolvidas nas infecções endodônticas diabéticas, que poderá levar a investigações de 

terapias eficazes focadas no tratamento endodôntico (Foaud, 2003b; Lima et al., 2013).   

 As modificações que a diabetes realiza tanto na polpa dentária como nos 

processos infeciosos que originam a lesão periapical está claramente confirmada pela 



 
 

30 
 

literatura, cabendo mais investigações a respeito da fisiopatologia dos fatores que 

conduzem essas modificações. Por outro lado, a influência que o processo infeccioso 

endodôntico exerce no organismo diabético, possui muitas lacunas. Existem estudos que 

apontam a influência da infecção local na condição sistêmica diabetes, piorando o 

quadro do controle glicêmico, por meio do aumento da hemoglobina glicada (Cintra et 

al., 2014a), aumentando a carga inflamatória, elevando as concentrações séricas de IL-

17 (Cintra et al., 2014b), interferindo no perfil lipídico, aumentando o triglicérides 

(Cintra et al., 2013a), alterando o hemograma (Cintra et al., 2014c) e indicando uma 

influencia na disfunção renal, por meio do aumento de creatinina (Cintra et al., 2013b). 

O estudo de Astolphi et al., 2013 relata que a lesão periapical em ratos normais, é capaz 

de provocar alterações no sinal e na sensibilidade de insulina. E estudos que relacionam 

terapias sistêmicas no intuito de amenizar as lesões periapicais (Wolle et al., 2013; Liu 

et al., 2012). 

 

III- Estresse oxidativo e alterações pulpares e periapicais 

Os primeiros trabalhos a relacionar o metabolismo oxidativo e endodontia foram o 

de Niamonitos et al., 1985 e Cherkashin et al., 1989. O primeiro, inserindo uma 

experimentação com um antioxidante endógeno (vitamina E) com o fim de propiciar o 

reparo da lesão periapical, o qual obteve bons resultados. E o segundo, mensurando 

produtos de peroxidação lipídica no sangue de pacientes portadores de granuloma 

apical, encontrando alterações destes produtos. Desde então, outros trabalhos 

relacionaram os parâmetros antioxidantes e oxidantes com as alterações pulpares. 

Estudos em polpas inflamadas humanas mostram que há um aumento da enzima 

antioxidante catalase, SOD, e dos produtos finais de peroxidação lipídica, MDA (Ge et 

al., 1996. Esposito et al., 2003), indicando que a polpa possui mecanismo de defesa 

endógeno contra a toxicidade das espécies reativas de oxigênio. A análise especifica de 

parâmetros do metabolismo oxidativo na presença da diabetes se limita ao estudo de 

Leite et al., 2008 que encontrou uma maior concentração de catalase em polpas de ratos 

diabéticos. O estudo na LP indica que há um aumento de oxidante total no próprio 

tecido da LP, enquanto que, o fluido gengival do dente portador de periodontite apical 

assintomática mostrou uma diminuição de TAC em relação ao controle e aos dentes 

com canal tratado (Dezerega et al., 2012). A prevenção dos danos oxidativos ao tecido 



 
 

31 
 

pulpar e periapical por meio de antioxidantes é alvo de recentes pesquisas, e tem 

apresentado bons resultados.  E o caso do antioxidante tempol, que administrado via 

oral, foi capaz de amenizar o estabelecimento de LP em ratos com cardiomiopatia, 

(Wolle et al., 2012). No entanto, o mesmo antioxidante tempol administrado em ratos 

diabéticos induzidos experimentalmente não foi eficiente para diminuir a extensão das 

LP (Wolle et al., 2013). Já o antioxidante astaxantina testado via oral em ratos 

diabéticos foi capaz de estimular glutationa peroxidase, mas não apresentou efeitos em 

SOD (Leite et al., 2010a). Em cultura de células pulpares submetidas ao estresse 

oxidativo por glicose, o antioxidante davalliactone foi capaz de reduzir a produção de 

H2O2, a toxicidade celular e as moléculas inflamatórias que perturbam as células da 

polpa (Lee et al, 2013). A associação astaxantina, óleo de peixe administrados via oral 

diminuíram os substratos oxidativos em polpa de ratos normais, por meio da redução 

das enzimas SOD e glutationa redutase (GSR) (Leite et al, 2012).   

O efeito tópico de antioxidantes também foi analisado, por meio do estudo da 

catalase como agente capeador direto em dentes de cães com exposições classe V, 

mostrando que aos sete dias não houve diferença no reparo, porém, aos 90 dias houve 

um maior reparo observado histologicamente em relação ao controle não tratado 

(Alaçam et al., 2000).  E também, por meio do estudo da enzima antioxidante SOD no 

tratamento de canal de molares de ratos portadores de lesão induzida, os resultados 

mostraram que a SOD pode controlar a inflamação periapical e induzir a proliferação de 

dentina e cemento, indicando que a SOD pode ser um material biocompatível ideal para 

o tratamento de canal (Baumgarder &Sulfaro, 2001). 

 

IV- Parâmetros antioxidantes  

Antioxidantes protegem o organismo contra a ação oxidativa dos RLs, pois em 

baixas concentrações conseguem atrasar ou inibir a oxidação do substrato, podendo ser 

encontrados no organismo e nos alimentos (Dias et al., 2010). 

Existem os antioxidantes que possuem atividade enzimática, que são os 

compostos capazes de bloquear a iniciação da oxidação removendo os RLs, e os não 

enzimático que interagem com os RLs e são consumidos durante a reação. As defesas 

antioxidantes enzimáticas incluem a atividade da superóxido dismutase (SOD), catalase 



 
 

32 
 

(CAT), glutationa peroxidase (GPx), glutationa redutase (GSR) e glutationa transferase 

(GST). Dentre as principais defesas antioxidantes não enzimáticas estão as vitaminas C 

e E, carotenóides, flavonóides, bilirrubina, ácido úrico, albumina, e glutationa (GSH), 

todos sendo captadores de radicais.  As defesas antioxidantes podem ser produzidas 

endogenamente ou adquiridas pela dieta (Kaliora et al., 2006; Cotinguiba et al., 2013). 

A albumina é a proteína mais abundante no sistema circulatório e possui funções 

benéficas como: regulação da pressão oncótica e uma grande capacidade de ligação e 

transporte de metabólitos (Scatchard et al., 1945). No sistema circulatório atua como o 

principal antioxidante presente, sendo constantemente sujeita ao estresse oxidativo 

(Halliwell, 1988). Ela atua por meio de seus vários sítios de ligações retendo os RLs, 

porém, quando submetida ao processo de glicação ocorre deficiência em suas 

propriedades antioxidantes, o que é devido ao fato de que é modificada estruturalmente 

e funcionalmente (Chesne et al., 2006; Rondeau et al., 2008). A albumina também é 

uma alternativa como marcador glicêmico de períodos curtos (2 a 4 semanas) 

(Yoshiuchi, 2008), e um importante marcador de lesão renal, seja uma lesão renal 

primária ou em consequências a doenças sistêmicas como hipertensão e diabetes.  

Outro antioxidante endógeno é a bilirrubina, que é originada do catabolismo do 

grupo heme da hemoglobina (Roy-Chowdhury et al., 2008; Ryter., 2012). A enzima 

heme oxigenase quebra o tetrapirrol cíclico em biliverdina, monóxido de carbono e 

ferro ferroso, por sua vez, a biliverdina é transformada em bilirrubina por meio da ação 

da enzima biliverdina redutase (Hayashi et al., 2004). A bilirrubina era considerada pela 

medicina apenas como produto residual do metabolismo da hemoglobina (Vitekand & 

Ostrow, 2009), no entanto, se mostrou com propriedades antioxidantes em modelos 

experimentais sendo considerado, um potente catalizador de oxigênio (Stocker et al., 

1987b), e redutor do estresse oxidativo global (Fuhua et al., 2012). Estudos relatam que 

a concentração de bilirrubina é inversamente associada com o risco de aterosclerose 

periférica (Vítek e Schwertner, 2007; Schwertner & Vítek, 2008; Vítek & Ostrow, 

2009; Lin et al., 2010), calcificação arterial coronária (Tanaka et al., 2009), e acidente 

vascular cerebral isquêmico (Kim et al., 2009). Estes estudos indicam que, baixas 

concentrações de bilirrubina sérica estão associadas a um maior risco dessas condições 

patológicas; em\quanto que, concentrações ligeiramente elevadas de bilirrubina 

fornecem proteção. 



 
 

33 
 

O terceiro antioxidante endógeno a ser estudado é o ácido úrico, um ácido 

orgânico fraco, produto final de degradação dos nucleotídeos de purina (George & 

Struthers, 2009) e catalisado pela enzima hepática xantina oxiredutase (Schulz et al., 

2011), sendo molécula antioxidante mais abundante no sangue (Spanou  et  al.,  2012), e 

fornecendo até 60% da capacidade antioxidante no sangue humano (Parmar, 2008). Este 

antioxidante possui propriedades quelantes de metal, sendo capaz de realizar a limpeza 

de radicais superóxido, hidroxilas, e oxigênio singlet, bem como bloquear a formação 

do forte oxidante peroxinitrito (Johnson  et  al., 2003; Keizman et al., 2009). O ácido 

úrico é capaz de atuar como protetor no processo de envelhecimento e em doenças 

neurológicas (Johnson et al., 2009; Scott & Hooper, 2001) e ao mesmo tempo estar 

associado a desordens cardiovasculares (Lippi  et  al., 2008; Edwards, 2008, 2009; 

Holme et al., 2009.), hipertensão, doença progressiva renal (Verdecchia et al., 2000; 

Johnson et al., 2003; Men & Punzo, 2008), acidente vascular cerebral (Kin et al., 2009); 

diabetes mellitus tipo 2, (Dehghan et al., 2008), resistência a insulina e síndrome 

metabólica (Puig & MartÃnez, 2008; Oda et al., 2009), o que faz deste antioxidante um 

paradoxo (Sautin & Jonhson, 2008). 

 

V- Mensuração da capacidade antioxidante total 

Ao contrário da análise isolada de cada antioxidante, a mensuração da capacidade 

antioxodante total apresenta a acumulação e interação que existe entre eles no plasma 

ou soro, formando um parâmetro que é capaz de revelar o equilíbrio redox existente in 

vivo. 

Existem na literatura muitos testes utilizados para mensurar a capacidade 

antioxidante total, e eles variam quanto ao tipo de radicais gerados, indicador de 

oxidação, e método usado para detecção e quantificação. São os chamados ensaios de 

captação, em todos eles um radical é gerado e reage com moléculas-alvo, para produzir 

cor, fluorescência, quimioluminescência, perda ou ganho de sinais de ressonância do 

spin eletrônico. A presença de antioxidantes altera esses sinais, o que permite sua 

análise quantitativa. Dentre os testes utilizados, existe o Total Radical - Trapping 

Antioxidant Parameter – TRAP, Oxygen-Radical Absorbancy Capacity - ORAC, Ferric-

Reducing Ability of Plasma - FRAP, Trolox Equivalent Antioxidant Capacity ou Teste 



 
 

34 
 

do ABTS – TEAC (Halliwell & Gutteridge, 2007). TRAP e ORAC são métodos que 

envolvem reações de transferência de átomos de hidrogênio e FRAP e TEAC, 

transferência de elétrons (Huang et al., 2005). 

O TEAC baseia-se na inibição do cátion radical 2,2„ azinobis (3-etilbenzotiazolina-

6-ácido sulfônico) (ABTS+•), por antioxidantes. No método original há ativação de 

metamioglobina como peroxidase, em presença de ABTS. O complexo perferril da 

hemeproteína produziria o cátion radical ABTS+ de cor azul esverdeada. A adição desse 

radical a um meio contendo antioxidantes consegue avaliar por meio do grau de 

descoloração, a capacidade antioxidante do mesmo. Alguns autores sugerem o uso de 

oxidação química de ABTS, com utilização de reagentes como dióxido de manganês ou 

persulfato de potássio, uma vez que outros antioxidantes podem contribuir para reduzir 

o radical ferrimioglobina formado durante a reação. O percentual de inibição de 

ABTS+• é determinado em função da concentração e do tempo. Quando a medida é 

relativa à reatividade do trolox, como padrão, sob as mesmas condições, o teste é 

denominado TEAC, expresso como unidades equivalentes de trolox que correspondem 

a mmol/L. Este método é aplicável para o estudo de antioxidantes lipossolúveis e 

hidrossolúveis (Re et al., 1999).   

Além da análise dos antioxidantes, a mensuração de parâmetros oxidantes também 

proporciona o entendimento do quadro do estresse oxidativo tecidual. Quando há 

produção excessiva de RLs a capacidade de ação dos antioxidantes é superada e ocorre 

oxidação de biomoléculas, como lipídeos, proteínas e DNA (Halliwell & Whiteman, 

2004). A oxidação lipídica leva a lipoperoxidação (LPO) da membrana celular, que 

origina lesões celulares, já que ocorrem alterações na estrutura da membrana levando a 

destruição de sua estrutura, prejuízo dos mecanismos de trocas metabólicas e morte 

celular (Benzie, 1996).  

 

VI- Lipoperoxidação 

A LPO pode ser dividida em três etapas, iniciação, propagação e terminação. Na 

fase de iniciação ocorre a interação de ROS com os ácidos graxos poliinsaturados 

(AGPI), abstraindo o hidrogênio de um grupamento metil, deixando o carbono deste 



 
 

35 
 

grupamento instável, o qual se estabiliza por um rearranjo molecular formando dieno 

conjugado, que se combina com oxigênio formando o radical peroxil, o qual é capaz de 

interagir com outra molécula lipídica abstraindo hidrogênio, e assim dá inicio a 

propagação da LPO, uma fase de reação em cadeia. É necessário ressaltar que na fase de 

propagação há formação de dienos conjugados e hidroperóxidos, que são marcadores 

primários de LPO, eles resultam da combinação dos radical peroxil com os hidrogênios 

abstraídos. A última fase da LPO é a terminação que se dá pela aniquilação dos radicais, 

que reagem entre si formando moléculas estáveis, nesta fase também ocorre clivagem, 

dismutação e rearranjo dos radicais peroxila que geram produtos secundários da LPO, 

como o MDA, que são utilizados como marcadores secundários da LPO (Halliwell & 

Gutteridge, 2007).  

O MDA é um dialdeído formado pela clivagem beta dos AGPI peroxidados durante 

a LP, a sua determinação é umas das técnicas de avaliação de oxidação lipídica mais 

frequentemente utilizada. Em meio ácido e aquecido o MDA reage com compostos 

nucleofílicos como ácido tiobarbitúrico, produzindo cromógenos que podem ser 

determinados por absorção no visível ou fluorescência (Benzie, 1996; Lima & Abdalla, 

2001). 

 



 
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Objetivos 
 

 

 



 
 

37 
 

III- OBJETIVOS 

Objetivo geral: 

Verificar a inter-relação entre LP e diabetes por meio de parâmetrosdo metabolismo 

oxidativo.   

Objetivos específicos  

• estabelecer a influência da infecção endodôntica, associada ou não a diabetes, 

nos antioxidantes endógenos albumina, bilirrubina e ácido úrico; 

• avaliar a influência da infecção endodôntica na capacidade antioxidante total 

sérica em ratos euglicêmicos e diabéticos; 

• verificar a inter-relação da infecção endodôntica com o estresse oxidativo sérico 

por meio da quantificação do MDA em ratos com e sem diabetes; e  

• realizar análise microscópica do tecido pulpar e periapical de ratos euglicêmicos 

e diabéticos.  

 

 

 



 
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Material e Métodos 
 

 

 



 
 

39 
 

IV- MATERIAL E MÉTODOS   

1- Material 

1.1-Animais 

Foram utilizados 40 ratos machos (Rattus albinus, Wistar), pesando 

aproximadamente 250g, provenientes do biotério da Faculdade de Odontologia de 

Araçatuba - UNESP.  Na chegada dos animais ao biotério de Endodontia, os ratos foram 

submetidos a um protocolo de vermifugação com uma solução de ivermectina 1% 

(Ivomec – Merial - Paulínia- São Paulo- Brasil), em uma dose de 0,3ml diluídos em 1L 

de água, a qual foi exposta aos animais durante três dias, e ao término, se esperou sete 

dias da metabolização da droga, para iniciar os experimentos. Os animais foram 

mantidos em gaiolas com mini-isolador (Série VentiLife, Alesco – Monte Mor, Brasil) 

que injeta o ar diretamente no mini-isolador, com fluxo contínuo e de baixa velocidade, 

o que garante uma troca de ar ideal e equilíbrio da pressão interna.  Cada gaiola 

abrigava 4 animais, e todas elas estavam acopladas no rack ventilado (Série VentiLife, 

Alesco – Monte Mor, Brasil), foi utilizada maravalha estéril em todas as gaiolas, 

durante todo o período experimental. Os animais foram alimentados durante todo o 

período experimental com dieta sólida e água filtrada “ad libitum”. Os procedimentos 

experimentais propostos neste estudo foram aprovados pelo comitê de conduta ética no 

uso de animais em experimentação (CEUA –Unesp / 00582-2012) (anexo 1).  

1.2-Doses empregadas 

 Para anestesia foi empregado via intramuscular uma associação de um sedativo à 

base de xilazina a 2% (Rompum-Bayer S. A., São Paulo, SP, Brasil) na dosagem de 10 

mg por kilograma de peso corporal e um anestésico à base de Cloridrato de Ketamina a 

10% (Francotar- Virbac do Brasil Ind. e Com. Ltda., Roseira,  SP, Brasil) na dosagem 

de 80 mg por kilograma de peso corporal. 

Para a indução da diabetes foi utilizado via intramuscular uma dose de 

150mg/kg de aloxano (Sigma Aldrich Corp., St. Louis, MO, USA), dissolvida em 

tampão citrato (0.01M; pH 4,5). 

 

 



 
 

40 
 

2-Métodos 

2.1-Indução da diabetes  

Metade dos animais (20 ratos) receberam uma dose de 150mg/kg de aloxano 

dissolvida em tampão citrato (0.01M; pH 4,5), via intramuscular (Figura 1). A outra 

metade recebeu solução salina como placebo. No sexto dia após a indução, foi realizada 

a dosagem de glicose sanguínea para confirmação da hiperglicemia, a qual foi realizada 

por meio de uma punção com agulha hipodérmica 27G 13 X 0,4 mm (Nipro 

Corporation, Honjo-Nishi, Kita-ku, Osaka, Japan) na extremidade da cauda do animal 

seguida por uma compressão para obtenção de uma gota de sangue. Na sequência, 

utilizando o aparelho para glicemia e às fitas glicotestes (Accu-Check Performa-Roche-

Diagnostics Corporation Indianapolis, IN, USA) os valores foram obtidos e foram 

selecionados os ratos que obtiveram resultados acima de 250 mg/dl para compor o lote 

de animais diabéticos (figura 2). Outros animais foram adicionados ao estudo até o total 

de 20 ratos diabéticos. 

2.2-Indução da infecção endodôntica  

Após a confirmação da hiperglicemia, 10 ratos euglicêmicos e 10 ratos 

diabéticos foram anestesiados. Realizou-se a exposição pulpar do primeiro molar 

superior direito de cada animal, empregando-se uma broca em aço carbono esférica 

(Broca Ln Long Neck- Maillefer, Dentsply Ind. E Com. Ltda. Petrópolis, RJ, Brazil) 

com 0,1mm de diâmetro na ponta. Desta forma, todas as exposições pulpares foram 

padronizadas em diâmetro. A profundidade foi limitada pela espessura do teto da 

câmara pulpar, até o rompimento do mesmo (sensação de caída) (figura 3). 

2.3-Divisão em grupos 

Os grupos foram formados de acordo com as condições sistêmicas e os 

procedimentos locais de indução das lesões periapicais podem ser visualizados na tabela 

1. 

 

 

 



 
 

41 
 

 
Figura 1. Injeção da droga aloxano via intramuscular, em rato Wistar. 
 

Figura 2. (A) punção caudal para obtenção de sangue; (B) mensuração da glicemia; (C) 
resultado obtido da mensuração glicêmica. 
 

 
Figura 3. (A) exposição do primeiro molar superior direto por meio da broca Ln; (B) 
primeiro molar superior direito com exposição pulpar realizada. 

A B C 

A B 



 
 

42 
 

Tabela 1 – Distribuição dos grupos experimentais de acordo com os procedimentos 

locais e condições sistêmicas dos animais. 

  Condição local 
Sem lesão pulpar Com Lesão Pulpar 

Condição sistêmica 
Normal E LP 

Diabético D D+LP 

 

Os 40 ratos em estudo foram divididos em 4 grupos experimentais, contendo 10 animais 
cada: 

 Grupo Controle (E): ratos euglicêmicos; 

 Grupo com lesão pulpar (LP): ratos euglicêmicos e portadores de infecção 

endodôntica induzida;  

 Grupo diabético (D): ratos hiperglicêmicos; 

 Grupo diabético com lesão pulpar: (D+LP): ratos hiperglicêmicos e portadores 

de infecção endodôntica induzida. 

2.4-Sacrifício dos animais e coleta das amostras 

a-Obtenção do tecido sanguíneo 

Decorridos os 30 dias pós-operatórios, os ratos foram anestesiados conforme 

protocolo descrito anteriormente. Foi realizada a coleta de 5 ml de sangue de cada 

animal, por meio de punção cardíaca com agulha 22G 25 X 0,7 mm (Figura 4). O 

sangue coletado foi armazenado em tubos a vácuo jateado com gel ativador de coágulo 

em suas paredes (vacuotainer BD) e permaneceu em repouso por 20 minutos para ser 

centrifugado a 3000 rpm por 10 minutos para obtenção do soro. Após a coleta 

sanguínea, os animais foram mortos com sobredose anestésica seguida de deslocamento 

cervical. 

 
b- Obtenção das maxilas 

 Após confirmação de morte dos animais, removeu-se toda a pele da face direita 

e esquerda do animal com dois cortes com tesoura (S.S.White / Duflex, Rio de Janeiro, 

RJ, Brasil), situados no ângulo da boca, separando a mandíbula e maxila.  Empregando 



 
 

43 
 

uma lâmina intercambiável nº15 (Becton, Dickinson Ind. Cir. Ltda. Curitiba, PR, 

Brasil), montada em cabo de bisturi (S.S.White / Duflex, Rio de Janeiro, RJ, Brasil), foi 

realizada uma incisão em profundidade no palato do animal ao nível de plano sagital 

mediano acompanhando a sutura intermaxilar separando a maxila direita maxila direita 

da esquerda.  Separadas as maxilas, foi realizado outro corte com tesoura tangenciando 

a face distal dos molares superiores direitos, possibilitando a obtenção da hemimaxila 

direita. Em seguida, as hemimaxilas foram colocadas em frascos individuais 

devidamente identificados, contendo solução formalina tamponada (10%) em pH 

neutro. Após 48 horas as peças foram lavadas em água corrente por um período de 5 

horas para a remoção de toda solução de fixação. Após lavagem, as peças foram 

desmineralizadas em solução de EDTA (ácido etilenodiamino tetra-acético) a 18%. Na 

sequência, as hemimaxilas foram lavadas em água corrente, desidratadas em álcool, 

diafanizadas em xilol e incluídas em parafina. A orientação no momento da inclusão 

permitiu a realização de cortes teciduais do elemento dentário e estruturas de suporte em 

seu sentido longitudinal. Uma vez incluídas as peças foram cortadas em micrótomo 

Leica RM 2045 (Leica Microsystems, Nussloch – Germany), e os cortes com 6 µm  de  

espessura  foram  selecionados de forma  semi-seriada. Foram escolhidos os cortes 

teciduais que evidenciaram a câmara pulpar, o trajeto do canal principal e a lesão 

periapical. Para cada espécime, 10 lâminas com 3 cortes teciduais cada, foram 

preparadas e coradas com Hematoxilina e Eosina. 

2.5-Forma de análise dos resultados 

2.5.1-Determinação dos antioxidantes endógenos e da capacidade 

antioxidante total.  

  As análises bioquímicas séricas foram realizadas, conforme orientações dos 

fabricantes, em espectrofotômetro automatizado (BS-200 Chemistry Analyzer. 

Mindray. High-tech Industrial Park, Nanshan. China) (figura 5) a 37°C, previamente 

ajustado com calibrador e soros controles nível I e II comerciais (Biosystems, 

Barcelona, Espain). 

 

 



 
 

44 
 

 

 
Figura 4. (A) punção cardíaca no ventrículo esquerdo de rato Wistar; (B) 
armazenamento em tubos à vácuo para obtenção do soro.  
 

 

 
Figura 5: Espectrofotômetro automatizado. 

 

A B 



 
 

45 
 

2.5.1a - Antioxidantes endógenos  

Todos os antioxidantes endógenos, albumina, bilirrubina e ácido úrico tiveram 

sua concentração determinada por meio de kits comerciais (BIOSYSTEMS S. A - 

Barcelona – Espanha). Os protocolos de mensuração dos antioxidantes endógenos 

foram determinados conforme a orientação do fabricante. A albumina foi mensurada 

pelo método verde de bromocresol, o ácido úrico pelo método uricase e a bilirrubina 

pelo método sulfanilico diazotado (anexo 2). 

 

2.5.1b- Determinação da capacidade antioxidante total 

 A capacidade antioxidante total foi determinada por método colorimétrico que se 

baseia na captura da molécula ABTS+ (2,2 'azinobis 3 etilbenzotiazolina-6-sulfonato). O 

antioxidante presente na amostra reage com o ABTS+ (azul esverdeado) levando este a 

seu estado reduzido (ABTS) e incolor (EREL, 2004) (anexo 3). 

 

2.5.2- Determinação das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico 

(TBARS) 
 A peroxidação lipídica sérica foi determinada pela quantificação de MDA pelo 

método de TBARS (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico) pelo método de Hunter 

modificado, com auxílio de uma leitora automática de microplacas de 96 poços e 

absorbância 545 nm (anexo 4). 

 

2.8-Análise microscópica  

A análise microscópica foi realizada em todos os grupos (E, LP, D e D+LP) de 

forma descritiva e quantitativa em cortes teciduais representativos de cada grupo. A 

análise quantitativa foi realizada em função das variáveis: infiltrado inflamatório quanto 

à sua intensidade e extensão; presença de reabsorções radiculares e perda de estrutura 

óssea periapical. Foram atribuídos escores de 1 a 4 para os critérios intensidade e 

extensão do infiltrado inflamatório e para a presença de reabsorções radiculares. Para a 



 
 

46 
 

mensuração da área da lesão periapical, se empregou programa de imagens específico 

(Leica QWin Plus - Leica Microsystems, Nussloch  –Germany). 

Os critérios considerados para cada análise segundo cada escore foram: 

a – Intensidade do infiltrado inflamatório 

A intensidade do processo inflamatório foi analisada em conformidade com o 

número médio aproximado de células inflamatórias presentes em diferentes campos de 

um mesmo espécime, examinados em aumento de 400x junto ao periápice dentário 

(Holland et al., 2007) (Quadro 1). 

 

Quadro 1 – Escores para o critério intensidade do infiltrado inflamatório 

Escore 1 Células inflamatórias ausentes ou em número desprezível; 

Escore 2 Infiltrado inflamatório discreto (menos de 10 células por campo); 

Escore 3 Infiltrado inflamatório moderado (entre 10 e 25 células por campo); 

Escore 4 Infiltrado inflamatório intenso (mais que 25 células por campo) 

 

b – Extensão do infiltrado inflamatório 

A extensão do infiltrado inflamatório foi estabelecida após uma verificação 

prévia de todos os espécimes. Após esta primeira análise a máxima magnitude da 

inflamação foi considerada e os critérios estabelecidos para o período de análise 

(Quadro 2). 

 

Quadro 2 – Escores para o critério extensão do infiltrado inflamatório junto ao 

tecido periapical 

Escore 1 Células inflamatórias ausentes ou em número desprezível; 

Escore 2 
Células  inflamatórias  ocupando  extensão  de  até  300µm  do  ápice  

radicular; 

Escore 3 
Células  inflamatórias  ocupando  extensão  de  até  600µm  do  ápice  

radicular; 

Escore 4 
Células inflamatórias ocupando  extensão  maior  que  600µm  do  ápice 

radicular. 

 



 
 

47 
 

c – Presença de reabsorções radiculares  

A presença de reabsorções radiculares foi analisada em conformidade com o 

número médio de lacunas de reabsorção presentes em diferentes campos, de um mesmo 

espécime, examinados em aumento de 400x junto ao periápice dentário (Quadro 3). 

 

Quadro 3 – Escores para o critério presença de reabsorções radiculares  

Escore 1 Ausência de lacunas de reabsorção; 

Escore 2 Presença discreta de lacunas de reabsorção cementária (menos de 3 

lacunas por campo); 

Escore 3 Presença moderada de lacunas de reabsorção cementária e reabsorção 

dentinária ao acaso (mais de 3 e menos de 6 lacunas por campo); 

Escore 4 Presença intensa de lacunas de reabsorção cementária e reabsorção 

dentinária (mais que 6 lacunas por campo). 

 

 

d – Área da lesão periapical 

Foram selecionados cortes representativos de cada espécime dos grupos com 

doença pulpar com e sem diabetes (Grupos LP e D+LP) para verificar a área da lesão 

periapical proveniente da infecção endodôntica. Foi empregado o software Leica QWin 

Plus  (Leica Microsystems, Nussloch – Germany) e os valores foram expressos em 

micrometro quadrado (µm2) obtidos em medidas de área. 

2.6 – Análise estatística 

Análises séricas: Por se tratar de valores absolutos os dados foram tabulados e 

expostos por meio das médias observadas em cada grupo, em função do período 

experimental. Foi aplicada a análise de variância (ANOVA), seguido pelo teste de 

comparações múltiplas, o teste de Tukey. 

Análise histológica: Para os dados na forma de escores foram aplicados os testes 

não paramétricos de Kruskal-Wallis (Siegel et al., 1956) e quando observada alguma 

diferença significante, realizou-se o cruzamento entre os grupos, pelo teste de 

comparações múltiplas de Dunn  (Dunn, 1958). Foi empregado o teste de Mann 

Whitney (Siegel et al., 1956) para comparação entre dois grupos isoladamente. Por se 

tratar de avaliação por meio de escores, os dados foram expostos nas tabelas referentes 



 
 

48 
 

aos testes estatísticos por meio de postos médios. Para os valores absolutos da 

mensuração da lesão periapical, coletados por meio da análise histométrica, foi 

realizada a análise da variância (ANOVA) seguida do teste de Tukey para comparação 

entre as médias. Por se tratar de avaliação métrica os dados foram expostos por meio 

das médias dos valores observados em cada grupo, em função dos períodos de 

observação. 

Para todos os testes empregados (bioquímicos e histológicos) foi considerado o 

nível de significância de 5% (p<0,05). Todos os valores expressos na forma de escores 

ou por medidas foram analisados com o Software Pacotico (Microsoft Visual FoxPro, 

Direitos: Eymar Sampaio Lopes). 

 

 

 

 

 

 



 
 

  

 

 

 

 

Resultados 



 
 

50 
 

III -RESULTADOS 

1- Massa corporal e glicemia  
Realizou-se a mensuração da massa corporal inicial (dia 0) e a final (dia 36). Ao 

início do experimento,  os ratos apresentavam massa corporal  média de 260g. Após a 

indução da diabetes com aloxano, os ratos dos grupos diabéticos (D e D+LP) perderam 

massa corporal em comparação aos euglicêmicos (p =0,0001) (tabela 2). 

A mensuração da glicose sanguínea foi realizada nos dias 0, 6 e 36 (tabela 3). A 

mensuração no dia 0, momento da indução da diabetes, revelou que todos os ratos 

estavam euglicêmicos ao início do experimento. No dia 6 (indução da infecção 

endodôntica) verificou-se a eficácia da droga em induzir diabetes, os grupos D e D+LP 

apresentaram um aumento significativo da glicemia (p = 0,0001). No último dia 

experimental (dia 36) houve a confirmação de que os ratos dos grupos diabéticos (D e 

D+LP) permaneciam hiperglicêmicos.  

Tabela 2 – Média e desvio padrão da massa corporal inicial e final em mg/dl. 

Grupos Dia 0 Dia 36 N 

E 269,8±20,65 a 410±31,08a 10 

LP 268,1±23,57 a 381,1±31,50a 10 

D 273,5±11,72 a 210±38,33b 10 

D+LP 260±24,16 a 211,4±30,51b 10 

Letras iguais sobrescritas na mesma coluna indicam ausência de diferença estatística 
(p>0.05). Letras diferentes sobrescritas na mesma coluna (a,b) indicam diferença 
estatística (p<0,05). 

 
 
Tabela 3 – Média e desvio padrão da glicemia em mg/dl. 

Grupos Dia 0 Dia 6 Dia 36 N 

E 73,7±9,80a 79,8±11,06a 95±7,33a 10 

LP 79,8±9,14a 82,8±8,97a 89±8,78a 10 

D 73,5±12,29a 597,3±6,26b 586±20,96b 10 

D+LP 74,4±7,86a 555,4±51,88c 600±0,00b 10 

Letras diferentes sobrescritas na mesma coluna (a,b,c) indicam diferença estatística 
(p<0,05). 

 



 
 

51 
 

2- Análise Bioquímica 

 Os parâmetros antioxidantes (albumina, ácido úrico, bilirrubina e capacidade 

antioxidante total) e o oxidante (MDA) foram mensurados e suas medias expressas em 

tabelas e gráficos. 

 

Albumina 

A concentração sérica de albumina encontrada aos 30 dias após a indução da 

lesão periapical nos grupos estudados está expressa na tabela 4. Observou-se 

comparando os grupos diabéticos (D, D+LP) com os euglicêmicos (E, LP) um 

decréscimo na concentração de albumina (p=0,0001). Indicando que a diabetes foi 

determinante para essa diminuição. Também foi evidenciado na presença de lesão 

periapical  uma diminuição da albumina nos grupos diabéticos com diferença estatística 

significativa, utilizando teste T de Student na comparação dois a dois (p=0,0475). 

 
Tabela 4 – Média e desvio padrão da concentração sérica de albumina em mg/dl. 

Letras sobrescritas diferentes (a,b,c) em colunas representam diferença estatística 
(p<0,05). 

 

 

 

 

 

 
 
 
 
 
 
 

Grupos Albumina (mg/dl) n 

E 22,67±2,22a 10 
LP 23,87±1,79a 10 
D 19,93±2,62b 10 

D+LP 17,86±2,05c 10 



 
 

52 
 

Figura 6 – Representação gráfica da média e desvio padrão da concentração sérica de 
albumina em mg/dl. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

 

 

 

 

Letras diferentes (a,b,c) representam diferença estatística (p<0,05). 

 

Ácido Úrico 

A concentração sérica de ácido úrico nos grupos estudados (tabela 5) apresentou 

um aumento nos grupos diabéticos (D e D+LP) em relação aos euglicêmicos (E e LP) e 

entre os grupos diabéticos, o grupos D+LP apresentou maior concentração de ácido 

úrico comparado ao grupo D (p= 0,0001). 

 

 

Tabela 5 – Média e desvio padrão da concentração sérica de ácido úrico em mg/dl.  

Letras sobrescritas diferentes (a,b,c) em colunas representam diferença estatística 
(p<0,05). 

 

 

Grupos Ácido Úrico (mg/dl) N 

E 0,92±0,37a 10 
LP 1,25±0,86a 10 
D 2,28±0,85b 10 

D+LP 3,36±0,94c 10 

 

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

E LP D D+LP

a 

a 

b 

c 



 
 

53 
 

Figura 7– Representação gráfica da média e desvio padrão da concentração sérica de 
ácido úrico em mg/dl. 

 

Letras diferentes (a,b,c) representam diferença estatística (p<0,05). 

 

Bilirrubina 

A concentração sérica de bilirrubina não apresentou diferença estatística entre os 

grupos estudados (p = 0,0955) (tabela 6). 

Tabela 6– Média e desvio padrão da concentração sérica de bilirrubina em mg/dl. 

 
Letras sobrescritas iguais (a) em colunas representam ausência diferença estatística 
(p<0,05). 

 
 
 
 
 

 
 
 
 
 

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

4

E LP D D+LP

Grupos Bilirrubina (mg/dl) n 

E 0,15±0,05a 10 

LP 0,13±0,06a 10 

D 0,12±0,05a 10 

D+LP 0,09±0,04a 10 

a

 

a

 

b

 

c

 



 
 

54 
 

Figura 8 – Representação gráfica da média e desvio padrão da concentração sérica de 
bilirrubina em mg/dl.  

 
 

 

Letras iguais representam ausência de diferença estatística (p>0,05). 

 

Capacidade Antioxidante Total 

Na tabela 7, observamos que assim como as concentrações de bilirrubina, a 

capacidade antioxidante total não apresentou diferença estatística entre os grupos 

estudados (p=0,0610). 

 

Tabela 7 – Média e desvio padrão da concentração sérica de TAC em mmol/L. 

Letras sobrescritas iguais em colunas representam ausência diferença estatística 
(p>0,05). 

 

 

 

 

0

0,02

0,04

0,06

0,08

0,1

0,12

0,14

0,16

0,18

E LP D D+LP

a 

a 

a 

a 

Grupos TAC (mmol/L) N 

E 0,82±0,06a 10 
LP 0,86±0,07a 10 
D 0,87±0,09a 10 

D+LP 0,95±0,10a 10 



 
 

55 
 

Figura 9 – Representação gráfica da média e desvio padrão da concentração sérica de 

TAC em mmol/L. 

 

 
Letras iguais indicam ausência diferença estatística (p>0,05). 

 

Malonaldeído 

 O MDA atua como um marcador de estresse oxidativo.  Nos grupos estudados 

sua concentração sérica teve um aumento na presença da diabetes (grupos D e D+LP) 

comparado com os grupos euglicêmicos (E e LP) (p = 0,0001) (tabela 8).  

 

Tabela 8 – Média e desvio padrão da concentração sérica de MDA em µmol/L. 

Letras sobrescritas diferentes (a,b) em colunas representam diferença estatística 
(p<0,05) 
 

 

0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

1

E LP D D+LP

Grupos MDA (µmol/l) N 

E 6,49±2,45a 10 

LP 5,08±2,67a 10 

D 11,04±2,64b 10 

D+LP 11,86±4,34b 10 

a 
a a

a



 
 

56 
 

Figura 10 – Representação gráfica da média e desvio padrão da concentração 

sérica de MDA em µmol/L. 

 
Letras diferentes (a,b) representam diferença estatística (p<0,05). 

 

 

3-Análise Microscópica 

Grupo euglicêmico (E) 

Observou-se tecido pulpar com aspectos de normalidade denotando homeostasia 

deste tecido. As estruturas pré-dentinária e dentinária apresentaram-se íntegras e 

dispostas em continuidade com a camada de odontoblastos, também organizada.  

Poucas células inflamatórias estavam dispersas e, ao acaso, caracterizando ausência de 

inflamação. Os vasos sanguíneos apresentavam-se congestos e a densidade do 

fibrosamento caracterizou polpa jovem com potencial de reparo. O cemento, ligamento 

e osso alveolar apresentaram-se íntegros e isentos de processo inflamatório ou 

reabsorção. A inserção conjuntiva e o epitélio juncional demonstraram aspectos de 

normalidade e integridade tecidual.  Este grupo serviu de parâmetro para a análise dos 

demais (figura 11) (tabela 9). 

 

 

 

0

2

4

6

8

10

12

14

E LP D D+LP

b 

b 

a 

a 



 
 

57 
 

Grupo com lesão periapical (LP) 

Pôde-se observar em todos os espécimes analisados presença de tecido 

necrosado em toda a cavidade pulpar e inflamação no periápice dentário. Observou-se a 

predominância de infiltrado inflamatório do tipo crônico. Presença de reabsorção 

cementária, dentinária e óssea. A região do ligamento periodontal, junto ao vértice 

apical, apresentou-se desorganizada, com presença de tecido necrosado e inflamação 

subjacente. Todas as lesões encontradas foram de características compatíveis com 

granuloma periapical com origem devido à necrose pulpar (figura 12) (tabela 9). 

 

Grupo de ratos diabéticos (D) 

De forma semelhante ao grupo euglicêmico, foi observado tecido pulpar com 

aspecto de normalidade. A estrutura dentinária e a pré-dentina apresentaram-se íntegras, 

assim como a camada de odontoblastos.  Poucas células inflamatórias estavam presentes 

e dispersas na polpa dentária denotando ausência de inflamação.  Os vasos sanguíneos 

apresentaram-se congestos e a densidade celular e fibrosamento caracterizaram polpa 

jovem com potencial de reparo. O grupo D serviu como um segundo controle, a fim de 

se estabelecer parâmetros para a análise. O que os diferencia é o quadro da diabetes 

presente no grupo D. Analisando-os comparativamente percebe-se que a diabetes não 

alterou a integridade do endodonto no período analisado (figura 13) (tabela 9) 

 

Grupo de ratos diabéticos com lesão periapical (D+LP) 

De forma semelhante ao grupo euglicêmico com lesão pulpar, observou-se em 

todos os espécimes, tecido necrosado em toda a cavidade pulpar.  Junto ao periápice 

evidenciou-se a predominância de infiltrado inflamatório do tipo agudo, presença de 

microabscessos e intensa concentração de neutrófilos.  Observou-se a presença de 

reabsorção cementária e dentinária na superfície apical e em regiões de ramificações 

radiculares.  Junto ao tecido ósseo foram encontradas lacunas de reabsorção ativa em 

toda a periferia do granuloma. A região do ligamento periodontal apresentou-se 

desorganizadas com presença de tecido necrosado e inflamação subjacente.  Assim 

como observado no grupo LP, todas as lesões encontradas foram de características 

compatíveis com granuloma periapical (figura 14) (tabela 9). 



 
 

58 
 

Figura 11 - Imagens representativas de espécime do grupo E: (a, b) aspecto 
microscópico do periápice dentário evidenciando normalidade nos tecidos pulpares e 
periapicais [10x e 100x - H.E.]; (c) pré-dentina e dentina íntegras, camada de 
odontoblastos organizada [400x – H.E]; (d) ausência de inflamação [400x – H.E.]. 



 
 

59 
 

Figura 12:  Imagens representativas do grupo LP: (a) aspecto microscópico panorâmico 
do periápice dentário evidenciando presença de inflamação, desorganização do 
ligamento periodontal e  área de reabsorção óssea [10x - H.E.]; (b) Periápice dentário 
evidenciando presença de infiltrado inflamatório crônico [100x - H.E.]; (c) presença de 
infiltrado inflamatório crônico e moderada área de reabsorção cementária [400x – H.E.]; 
(d) tecido pulpar necrosado [400x – H.E.].  
 



 
 

60 
 

Figura 13:  Imagens representativas do grupo D: (a, b)  periápice dentário 
demonstrando tecidos pulpares e periodontais com aspectos de normalidade  [10x e 
100x - H.E.]; (c) polpa dentária demostrando dentina, pré-dentina e odontoblastos com 
aspectos de normalidade [400x – H.E.]; (d) periápice com ausência de inflamação e 
integridade tecidual [400x - H.E.]. 



 
 

61 
 

Figura 14: Imagens representativas do grupo D+LP: (a, b) aspecto microscópico 
panorâmico do periápice dentário evidenciando presença de inflamação, desorganização 
do ligamento periodontal e  área de reabsorção óssea [10x e 100x - H.E.]; (c) necrose do 
tecido pulpar e reabsorção cementária [400x – H.E.];  (d) infiltrado inflamatório agudo 
com grande concentração de neutrófilos [400x – H.E]. 



 
 

62 
 

Tabela 9- Representação dos scores atribuídos para os critérios de intensidade do 

infiltrado inflamatório e extensão da inflamação, reabsorção óssea e das médias de área 

da lesão periapical (µm2). 

Critérios de 
análise 

GRUPOS 

Scores E LP D D+LP 

Intensidade 
da 

inflamação 

1 10/10 0/10 10/10 0/10 

2 0/10 1/10 0/10 0/10 

3 0/10 7/10 0/10 3/10 

4 0/10 2/10 0/10 7/10 

Mediana 1a 3b 1a 4b 

Extensão da 
inflamação 

1 10/10 0/10 10/10 0/10 

2 0/10 3/10 0/10 0/10 

3 0/10 5/10 0/10 2/10 

4 0/10 2/10 0/10 8/10 

Mediana 1a 3b 1a 4c 

Presença de 
Reabsorções 
radiculares 

1 10/10 0/10 10/10 0/10 

2 0/10 1/10 0/10 0/10 

3 0/10 8/10 0/10 4/10 

4 0/10 1/10 0/10 6/10 

Mediana 1a 3b 1a 4c 

Área  da 
lesão 

periapical 

Média 

(µm2) 
0a 75,4x104±11,2b 0a 93,6x104±19,3c 

Letras sobrescritas diferentes (a,b,c) em linhas representam diferença estatística 
(p<0,05). 
 

Após a comparação entre os 4 grupos experimentais (E x LP x D x D+LP) para 

os critérios intensidade do infiltrado inflamatório, extensão do infiltrado inflamatório e 

para a presença de reabsorções radiculares, foram observadas diferenças esperadas 

quando entre o grupo E ou D com os grupos de infeção local presente (Grupos LP e 

D+LP). Este aspecto revela que a indução da infecção endodôntica promoveu alterações 

nos tecidos periapicais de forma significante quando comparado ao grupo de ratos sem 

infecção. Por outro lado a presença da diabetes isoladamente não promoveu o 

aparecimento de inflamação ou reabsorção radicular em nenhum dos tecidos estudados 

no período estudado. Quando se comparou o grupo LP x D+LP, encontrou-se diferenças 



 
 

63 
 

estatísticas nos critérios extensão da inflamação, área da LP e reabsorções radiculares. 

Porém, o critério intensidade da inflamação apesar de apresentarem frequências de 

escores diferentes, o teste de Kruskal Wallis não foi sensível para detectar tal diferença, 

assim, optou-se pelo cruzamento isolado por meio do teste Mann Whitney. Após o 

cruzamento entre os grupos com doença pulpar associada ou não a diabetes (LP x 

D+LP) por meio do teste Mann Whitney, pôde-se observar que: a intensidade da 

inflamação foi diferente (p=0,0238) (tabela 9). 

 

  



 
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Discussão 
 



 
 

65 
 

VII- DISCUSSÃO 

No presente estudo foram utilizados ratos Wistar, devido a similaridade 

anatômica dos tecidos pulpares e periapicais em relação aos humanos. Nestes animais 

são identificados o complexo dentinho pulpar, as fibras colágenas do ligamento 

periodontal, o cemento celular e acelular e o osso alveolar. Com relação à estrutura dos 

tecidos dentários dos ratos Wistar, as dimensões de cada estrutura são diferentes dos 

humanos, entretanto a utilização de grupos controle permite identificar a  destruição 

tecidual dos grupos experimentais em proporções relativas às originais.  

Modelos diabéticos em animais, dentro da pesquisa científica, conduzem a 

esclarecimentos e descobertas da doença humana, o que proporciona avanços clínicos, 

terapêuticos e preventivos aos pacientes. Há diversas opções para obter um modelo 

experimental da diabetes mellitus. A escolha do presente estudo foi o método químico 

utilizando a  droga aloxano que, segundo a revisão de literatura de Rohilla & Shahjad 

2012, é um modelo reproduzível e confiável. O  sucesso desta droga depende  da via de 

administração, da dose da droga e do estado nutricional do animal (Fredeuriuk et al., 

2004). Existem trabalhos recentes com modelo animal diabético induzido por aloxano 

(Ezejiofor et al., 2013; Zhao et al., 2014; Omeh et al., 2014; Lachin et al., 2014), 

incluindo estudos específicos de animais diabéticos e relações orais (Leite et al., 2010a; 

Leite et al., 2010b; de Almeida et al., 2008). O aloxano possui dois mecanismos de ação 

na indução da diabetes, um deles interfere na secreção de insulina pela células beta, por 

meio da inibição específica da glucoquinase, que é o sensor de glicose da célula beta, e 

o outro mecanismo é o da formação de espécies reativas de oxigênio que resulta na 

necrose seletiva das células beta causando um estado de diabetes dependente de insulina 

(Lenzen, 2008). A diabetes induzida por aloxano apresenta no animal sintomas típicos 

da diabetes no homem, tais como perda de peso, polidipsia, poliúria, glicosúria, 

cetonúria, hiperglicemia e cetonemia (Lenzen e Panten, 1988).  

Quanto ao método de indução da infeção pulpar, observou-se que ele produziu 

alterações semelhantes entre os espécimes de um mesmo grupo. Este aspecto denota que 

a indução foi realizada com sucesso e pode ser empregada em pesquisas que envolvem 

os tecidos do endodonto, assim como demonstrado em outros estudos (Iwama et al., 

2003, 2006; Armada-Dias et al., 2006; Kakehashi et al., 1965; Garber et al., 2009, 

Cintra et al., 2012). 



 
 

66 
 

Os ratos diabéticos (D e D+LP) apresentaram perda de massa corporal durante o 

período experimental, com diferença estatística em relação aos ratos normais (E e LP). 

Essa diferença na massa corporal se deve ao fato, de que a diminuição de insuliina 

conduz o metabolismo ao estado catabólico causando grave depleção de reservas 

energéticas e proteínas, principalmente as encontradas no músculo esquelético (Nair et 

al., 1983,1995; Hebert & Nair, 2010).  

Quanto aos resultados obtidos com a análise glicêmica, podemos considerar que 

os grupos de ratos euglicêmicos (E e LP) apresentaram médias glicêmicas semelhantes, 

demonstrando que uma única infecção endodôntica não é capaz de influenciar na 

concentração glicêmica de ratos não diabéticos até o período estudado. 

Observou-se que a associação diabetes e infecção local de origem endodôntica 

não conseguiu elevar a concentração glicêmica (grupos D e D+LP). Portanto, uma única 

LP não foi capaz de aumentar significativamente a glicemia em ratos diabéticos, assim 

como visto no estudo de Armada-Dias et al. Por outro lado, a presença da doença 

periodontal se mostra capaz de influenciar no controle metabólico (Jung et al., 2014), e 

possivelmente a lesão periapical associada a doença periodontal potencializa esse 

aumento glicêmico (Cintra et al., 2013). 

Quanto aos resultados obtidos com a análise microscópica, os critérios 

intensidade e extensão do infiltrado inflamatório nos grupos sem LP (E e D) não 

apresentaram inflamação, ou seja, a presença da diabetes não induziu ou favoreceu o 

aparecimento de inflamação nos tecidos pulpares e periapicais até o período de 30 dias. 

Por outro lado, com relação aos grupos com LP (LP e D+LP) houve aumento da 

extensão e da intensidade do infiltrado inflamatório quando a diabetes estava presente, e 

estes achados estão de acordo com outros estudos que se propuseram a avaliar a 

infecção endodôntica em associação com a diabetes (Fouad et al., 2002; Iwama et al., 

2003; Armada-Dias et al., 2006; Cintra et al., 2014ab). Desta forma, confirma-se a 

evidência de que a diabetes influencia na progressão da inflamação junto aos tecidos 

bucais estendendo o processo inflamatório mais rapidamente, de forma a comprometer a 

integridade tecidual em menor período de tempo. 

No que diz respeito à presença de reabsorções radiculares, foi observado uma 

diferença entres os grupos com LP (LP e E) e sem (D e D+LP), mostrando que a 

presença da doença pulpar promove o aparecimento de reabsorções radiculares. A 



 
 

67 
 

literatura demonstra estudos que avaliaram a presença de bactérias, sua distribuição no 

sistema de canais e sua relação com a presença de lacunas de reabsorção em casos de 

necrose pulpar (Tanomaru-Filho et al., 2005; Tanomaru et al., 2008; Guo & Wang 

2009; Borlina et al., 2010), e assim como evidenciado no presente estudo, a presença de 

reabsorções radiculares está diretamente associada à presença de microrganismos no 

interior dos túbulos dentinários e ramificações do canal principal (Borlina et al., 2010). 

As reabsorções radiculares ocorreram em maior número no grupo D+LP do que no 

grupo LP, este pode ser atribuído a condição diabética, que dificulta a defesa do 

organismo, favorecendo a proliferação bacteriana nos canais radiculares (Iwana et al., 

2006). 

As lesões periapicais do grupo D+LP foram maiores do que as do grupo LP, 

desta forma, confirma-se que a diabetes influencia na rápida progressão da inflamação 

junto aos tecidos bucais no período de 30 dias.  As lesões periapicais maiores em 

diabéticos se deve ao fato que a condição hiperglicêmica interfere na função de 

macrófagos (Garber et al., 2009), circulação sanguínea pulpar (Bender & Bender, 2003), 

crescimento e diferenciação celular de osteoblastos (Zayzafoon et al., 2000), 

homeostase óssea (Mathieu et al., 2005) e carga bacteriana (Iwana et al., 2006). 

Quanto à análise dos parâmetros do metabolismo oxidativo, no soro sanguíneo, 

em modelo diabético experimental com lesão periapical induzida, encontramos 

diferenças estatísticas em alguns parâmetros analisados. Alguns parâmetros não foram 

possíveis de comparar com os dados presentes na literatura, devido à ausência de 

estudos semelhantes. Muitas vezes partiu-se para a comparação em estudos que 

abordavam os mesmos parâmetros, porém na doença periodontal, já que, esta possui 

patogênese semelhante a periodontite apical, sendo ambas as  desordens inflamatórias 

em resposta a um agressor que resulta no aumento de mediadores inflamatórios seguido 

de destruição tecidual (Silva et al , 2007). 

A albumina, antioxidante endógeno,  analisada pelo método  verde de 

bromocresol, no soro dos grupos de ratos diabéticos (D e D+LP) apresentou  uma 

diminuição  de sua concentração   em relação aos grupos euglicêmicos (E e LP). Este 

decréscimo é explicado pela própria condição da doença diabetes, a hiperglicemia, que é 

responsável por desencadear vários eventos como a formação de produtos finais de 

glicação avançada, espécies reativas de oxigênio, ativação da proteína kinase C, fatores 



 
 

68 
 

de crescimento , que conduzem a formação de lesões renais por diferentes mecanismos 

como lesão endotelial, hipertrofia e mudança da arquitetura glomerular renal (Fierro, 

2009; Heras et al., 2001; Wendt et al., 2003; Lee et al., 1989). Quando há continuidade 

do descontrole glicêmico, ocorre a microalbuminúria, que é sinal clínico da nefropatia 

diabética (Mogensen & Christensen, 1984; Mogesen, 1987), persistindo o descontrole 

glicêmico, está condição evolui para o quadro de doença renal crônica (DRC), que tem 

como um de seus sinais clínicos a proteinúria, incluindo a albumina (Remuzzi et al., 

1997). Com a grande perda de albumina na urina, ocorre a hipoalbuminemia, que é 

umas das variáveis mais frequentemente utilizadas para avaliar o estado nutricional e/ou 

inflamatório de um paciente com DRC (Greene et al., 2005). 

Na mensuração da albumina, a LP foi capaz de alterar a concentração do 

antioxidante no soro sanguíneo em ratos diabéticos aos 30 dias experimentais. É 

interessante ressaltar que, na literatura científica, não há estudos que correlacionam LP 

com albumina sérica. 

A concentração sérica do antioxidante endógeno ácido úrico, dosada pelo 

método enzimático colorimétrico uricase, foi estatisticamente maior nos grupos de ratos 

diabéticos (D e D+LP) em relação aos euglicêmicos (E e LP). A diabetes causa 

nefropatia e posteriormente doença renal crônica (DRC), e o ácido úrico é um marcador 

de DRC (Nakagawa et al., 2006), o que explica a hiperuricemia nos ratos diabéticos. O 

aumento de ácido úrico no grupo D+LP em relação ao D é sugestivo de que LP foi 

capaz de potencializar o quadro diabético.  Estudos que relacionam LP e ácido úrico são 

ausentes na literatura. Existem evidências que a DP agrava o quadro de DRC, devido ao 

aumento da carga inflamatória, principalmente a proteína C reativa (Menon et al., 2003; 

Wahid et al., 2013), fato que pode ser extrapolado para a LP.  

A bilirrubina, mensurada, por meio do método, Van Der Bergh, não apresentou 

diferença estatística entre os grupos, aos 30 dias experimentais. Acredita-se que 

bilirrubina e diabetes possuem uma relação inversa (Cheriyath et al., 2010), e um dos 

mecanismos é via heme oxigenase, que aumenta a produção e sensibilidade da insulina 

melhorando o metabolismo da glicose (Ndisang & Jadhav, 2009). Até o presente 

momento, não há estudos que envolvam bilirrubina e LP, no entanto, uma correlação 

inversa entre bilirrubina e doença periodontal é  destacada,  sugerindo que há um 

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Cheriyath%20P%5Bauth%5D


 
 

69 
 

envolvimento da bilirrubina na inibição de vias inflamatórias comuns a doença 

periodontal (Chapple et al, 2007). 

 A avaliação de TAC sérica realizada não mostrou diferença estatística. Existe 

ausência de  estudos, que avaliam TAC sérica associada a LP envolvendo ou não 

diabetes. Contudo na literatura, relata-se aumento de TAC no tecido da LP (Dezerega et 

al, 2012), e aumento de TAC sérica na presença de DP (Žilinskas et al, 2011; Chapple et 

al, 2007), porém, sem envolvimento com diabetes.  

O parâmetro oxidante avaliado no presente modelo de estudo foi o produto final 

da peroxidação lipídica, o MDA, que teve sua concentração sérica aumentada na 

presença da diabetes (grupos D e D+LP) comparado aos grupos euglicêmicos (E, LP). 

Elevadas concentrações de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico são observadas 

nos estudos com modelos diabéticos, segundo a revisão de Maritim et al,  2003. A 

elevação da concentração de MDA na condição diabética deve-se à hiperglicemia, que 

induz a formação de RLs, entre eles, o radical hidroxil, que captura o hidrogênio do 

lipídeo da membrana plasmática celular, promovendo a LPO (Brunzell & Chait, 1994; 

Kawamura et al., 1994). Investigações em modelos diabéticos induzidos por aloxano 

(Mohan & Das, 1998; Sailaja et al., 2000) mostraram um aumento de MDA nestes 

animais, que vão  ao encontro  do  presente estudo. 

Em relação a influencia da LP no MDA sérico,  notou-se que na presença da 

diabetes houve um ligeiro aumento da concentração do oxidante no grupo D+LP em 

relação ao grupo D, porém, sem diferença estatística. A literatura relata aumento de 

produtos finais de LPO no tecido da LP e nas hemácias dos portadores desta, mostrando 

uma influencia da LP no contexto sistêmico (Cherkashin et al., 1989; Marton et al., 

1993), assim como a DP,  que é capaz de aumentar a concentração sérica de MDA 

sanguíneo (Sobaniec & Sobaniec-Lotowska, 2000; Dalai et al., 2013; Sonoki et al., 

2006).  

Diante dos resultados do metabolismo oxidativo, é interessanten ressaltar que as 

alterações encontradas nas concentrações séricas dos antioxidantes (aumento de ácido 

úrico e diminuição de albumina) devido à presença da LP no rato diabético, revela uma 

interação entre LP e diabetes, evidenciando que a LP é capaz de potencializar a DRC 

em ratos diabéticos. 

 

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%C5%BDilinskas%20J%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=21829050
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=%C5%BDilinskas%20J%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=21829050
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=Cherkashin%20SI%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=2772928
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=Cherkashin%20SI%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=2772928
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=Cherkashin%20SI%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=2772928


 
 

 

 

 

 

 

 

 

 

Conclusão 
 

 

 



 
 

71 
 

VIII- CONCLUSÃO 

Concluiu-se que: 

 Quanto à análise dos parâmetros do metabolismo oxidativo: 

 

- a diabetes influência nas concentrações séricas de MDA, albumina e 

ácido úrico; 

- a infecção endodôntica  diminui as concentrações séricas de albumina e 

aumenta de ácido úrico em ratos diabéticos. 

 

 Quanto à análise microscópica: 

-A diabetes potencializa o desenvolvimento da doença endodôntica induzida, 

aumentando a extensão e intensidade da inflamação, a presença de reabsorções 

radiculares externas e área da lesão periapical. 

 

 

 

 



 
 

 

 

 

 

Referências 



 
 

73 
 

IX- REFERÊNCIAS 

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