RESSALVA Atendendo solicitação do(a) autor(a), o texto completo desta dissertação será disponibilizado somente a partir de 08/11/2023. UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA – UNESP CÂMPUS DE JABOTICABAL EFEITOS DA ESTIMULAÇÃO TÁTIL NO BEM-ESTAR DE BEZERROS NELORE PUROS E CRUZADOS RECÉM- NASCIDOS Mariana Parra Cerezo Médica Veterinária Zootecnista 2022 UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA – UNESP CÂMPUS DE JABOTICABAL EFEITOS DA ESTIMULAÇÃO TÁTIL NO BEM-ESTAR DE BEZERROS NELORE PUROS E CRUZADOS RECÉM- NASCIDOS Mariana Parra Cerezo Orientador: Prof. Dr. Mateus J. R. Paranhos da Costa 2022 Dissertação de mestrado apresentada à Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias - Unesp, Campus de Jaboticabal, como parte das exigências para obtenção do título de Mestre em Zootecnia, Especialidade: Etología Aplicada e Bem-Estar Animal DADOS CURRICULARES DO AUTOR Mariana Parra Cerezo nasceu em Manizales, Caldas, Colômbia no dia 11 de março de 1998. Em 2015 ingressou no curso de Bacharelado em Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidad de Caldas – Faculdade de Ciências Agropecuárias, obtendo o título de Médica Veterinária Zootecnista em setembro de 2020. Durante a graduação pertenceu ao grupo de pesquisas em Bem-estar animal da Universidade de Caldas. Ingressou no Grupo de Pesquisas em Etologia e Ecologia Animal (ETCO) da UNESP campus Jaboticabal para realizar o estágio de conclusão de curso em fevereiro de 2020. Em agosto de 2020 ingressou no curso de mestrado no Programa de Pós- graduação em Zootecnia da Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho” – Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias de Jaboticabal, dedicando-se a área de Bem-estar e Comportamento de animais domésticos. AGRADECIMENTOS Agradecer faz o teu coração falar... Queria começar por meus pais, minhas fontes de inspiração e de fortaleza diária, eles que desde pequena me incentivaram a cumprir meus sonhos e nunca desistir deles, professores não só da teoria, mas também da vida. Ao meu irmão Daniel por ser meu companheiro e amigo desde criança, quem me faz sorrir e acreditar na bondade das pessoas. A toda minha família, os que estão presentes em vida e os que culminaram seu percorrido dela, meus avos que são anjos em vida e os meus maiores fãs, as pessoas que mais se alegram por nossas conquistas e as celebram como próprias, meus padrinhos que desde antes de nascer me esperavam e têm me acompanhado a cada etapa de forma incondicional. Agradeço ao meu orientador, o professor Mateus Paranhos porque ainda sem me conhecer em 2020 me deu a chance de fazer parte do grupo ETCO, acreditou no meu potencial para continuar fazendo parte dele e apesar dos obstáculos, culminar o mestrado, ele é um dos meus modelos não só como profissional, mas como pessoa, e além de grata me sinto orgulhosa de ser orientada ele. Adicional, agradeço a minha professora Marlyn Romero, que me orientou durante a minha graduação e foi por ela que eu conheci o trabalho do professor e me encorajou para viajar para o Brasil para continuar minha formação acadêmica, ela é outra fonte de inspiração de admiração. Agradecer a todas as pessoas que fizeram parte deste processo, especialmente a Jaira, quem compartilhou desde o momento zero que chequei no Brasil os dias comigo, a irmã com o que Brasil me presenteou, companheira de estágio, de confinamento, de apartamento, de roles, de filmes, de secretos, de risadas e de choro. Certeza de que a pos graduação não teria sido igual sem ela e sem sua família que me acolheu, tenho muito orgulho dela e da incrível profissional em que está se tornando, te amo Jai. A Mayara que esteve presente para me acompanhar e ajudar sempre precisava, uma pessoa amorosa, inteligente e super dedicada, outra amiga que levo para a vida e a toda sua família incrível. “Somo em três”. Queria agradecer de forma especial a Victor Brusin, uma pessoa imprescindível para o desenvolvimento deste trabalho, trabalho que era dele, mas por coisas do destino eu continuei, mas que é resultado de um trabalho conjunto e do qual me sinto muito grata de ter participado. Tenho muita admiração por ele desde que fiz meu estágio pela dedicação com a que faz cada coisa e por cada conquista que ele já alcançou e as que estão por vir. A todos os amigos que fiz no Brasil, Valentina, João, Caio, Maria José, Karen, Ana Maria, Natalia, Sergio e Alejandro e cada uma das pessoas que conheci lá, amigos brasileiros e colombianos que fizeram essa etapa mais leve e feliz. Aos integrantes do grupo ETCO, os que tive o prazer de conhecer de forma presencial e aos virtuais, Lara, Pedro, Renan, Laura, Joseph, André, Luane, Julia, Paula, Suellen S, Suelen C, Ana Flavia, Lucas, são pessoas incríveis com uma vocação muito linda, espero que a vida permita nos reencontrar de novo. Agradecer as minhas amigas da Colômbia, Valeria, Manuela, Juliana, Maria del Mar, Camila, Laura, as incondicionais e com as que compartilhei os melhores momentos da minha vida, aquelas que te apoiam em todas as loucuras e aventuras. Agradecer a Carmen Perez, Frederico Simioni e a toda a equipe de trabalho da agropecuária Orvalho das Flores e da Fazenda fortaleza por abrir as portas para pesquisa e para o bem-estar animal. Tive o prazer de visitar as duas fazendas e sem dúvida posso dizer que são modelos, referentes e os exemplo que eu sempre vou dar para as pessoas ao falar de bem-estar e de aplicação de boas práticas. Agradecer a FCAV e a Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) pela oportunidade de fazer pós-graduação em uma das melhores universidades do país e de latino américa. O presente trabalho foi realizado com apoio da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Código de Financiamento 001 Finalmente agradecer a vida por me permitir chegar até aqui, por me dar a chance de conhecer pessoas incríveis e vivenciar momentos inolvidáveis. “El camino no es largo si el destino vale la pena” EFEITOS DA ESTIMULAÇÃO TÁTIL NO BEM-ESTAR DE BEZERROS NELORE PUROS E CRUZADOS RECEM-NASCIDOS RESUMO: O objetivo com este estudo foi avaliar o efeito da estimulação tátil no bem-estar de bezerros de corte recém-nascidos da raça Nelore. O estudo foi realizado na Agropecuária Orvalho das Flores, município de Araguaiana, MT, Brasil, com 111 bezerros (50 machos e 61 fêmeas) de dois grupos genéticos, Nelore (NEL, N = 61) e cruzados Abeerden Angus x Nelore (F1ANxN = 50), sendo 34 fêmeas NEL e 27 F1AN, e 27 machos NEL e 23 F1AN. Os bezerros nasceram entre agosto e setembro de 2019 (N = 76) e entre janeiro e fevereiro de 2020 (N = 35). Os animais foram divididos aleatoriamente em dois tratamentos, definidos pela aplicação de estimulação tátil nos bezerros durante o manejo de rotina (CE, N = 53) ou o manejo de rotina sem estimulação (SE, N = 58). As coletas de dados foram realizadas nos bezerros com aproximadamente três dias de idade, durante a realização dos manejos de cura do umbigo e identificação. Foram realizadas avaliações do comportamento, registrando-se as expressões faciais dos bezerros (utilizando 12 categorias previamente definidas) e as avaliações qualitativas do comportamento (QBA), com 16 termos. Foram medidas também as frequências cardíacas (FC) dos bezerros durante a realização dos procedimentos, levando- se em conta três momentos: FC1 = quando o bezerro estava sendo posicionado em decúbito lateral sobre uma almofada, FC2 = durante os procedimentos de identificação e FC3 = após a finalização dos procedimentos de identificação. As diferenças entre essas medidas foram calculadas. Os bezerros foram pesados no dia da realização do manejo e na desmama, realizada aos oito meses de idade, aproximadamente; com esses dados foram calculados os ganhos médios diários (GMD) dos bezerros. Os dados das expressões faciais foram analisados utilizando os testes de qui-quadrado e exato de Fisher, enquanto os dados do QBA foram submetidos a análise de componentes principais (PCA). Para a análise das FC, foram calculadas médias por tratamentos, que foram comparadas pelo teste t de Student. Para avaliar se houve diferenças entre tratamentos nos três momentos em que as FC foram medidas, foi realizada uma análise de variância de uma via. Coeficientes de correlação de Pearson foram estimados para avaliar a associação dos índices do PCA com a FC e o GMD. Foram utilizados modelos lineares para avaliar efeito de sexo, grupo genético e tratamento sobre o GMD e sobre os índices do PCA. As categorias de expressão facial que se associaram com os tratamentos foram movimentos da cabeça (>50% dos animais SE manteve a cabeça parada durante o manejo vs >50% dos animais CE empurrou para os lados pelo menos uma vez), terceira pálpebra (visível em mais do 70% dos animais SE vs 56% no CE) e rugas no focinho (72% de animais com linhas de expressão pelo menos uma vez no SE vs 47% para o grupo CE). A análise do QBA identificou dois componentes, o primeiro (PC1) explicou 56,78% da variação total dos dados e refletiu a emocionalidade positiva e negativa dos bezerros e o segundo (PC2) explicou 21.95% da variação dos dados e refletiu o nível de resposta aumentada ou diminuída (arousal) dos bezerros. As médias da FC dos animais nos três momentos de medição foram mais baixas nos animais CE que os SE (FC1: 173,68 vs 180,46, FC2: 167,45 vs 170,31 e FC3: 162,533 vs 171,98 bpm, respectivamente), além disso houve uma diminuição maior nas FCs nos animais CE. Foi observada correlação significativa negativa (r = -0,341) entre o índice obtido no PC2 e a diferença entre FC3 e FC2. Dentro de cada um dos tratamentos também foi encontrada correlação significativa entre as duas variáveis (rs = -0,351, p = 0.011 para o grupo SE e rs = -0,332, p = 0.011 pra o grupo CE). Foram encontradas correlações significativas entre o GMD e os dois índices do PCA dependendo do ano de nascimento dos bezerros, para 2019 houve correlação negativa com PC1 (indicando que GMD mais altos foi associado com emocionalidade mais positiva) e positiva com PC2 (indicado que GMD mais altos esteve associado com maior nível de resposta). Em 2020 foi encontrada correlação positiva só com o índice PC2, com interpretação similar à de 2019. Houve efeito significativo de tratamento, grupo genético e de sexo aninhado no grupo genético no GMD em 2019, com médias de GMD mais altas para os animais CE (0,957±0,020 e 0,902±0,020 kg/dia para CE e SE, respectivamente) e para os animais cruzados (1,065±0,027 vs 0,794±0,014, para F1AN e NEL, respectivamente). Machos e fêmeas F1AN apresentaram maior GMD que os NEL (fêmeas: 0,991±0,044 e 0,752±0,019 kg/dia e machos: 1,140±0,034 e 0,836±0,021 kg/dia para F1AN e NEL, respectivamente). Em 2020 não houve efeito significativo de nenhuma das variáveis incluídas no modelo no GMD. Tratamento e grupo genético apresentaram efeitos significativos nos índices de PC1 (emocionalidade) e PC2 (nível de resposta), com médias de PC1= -0,470±0,119 e PC2 = 0,619±0,111 para os animais CE e de PC1 = 0,454±0,115 e PC2 = -0,536±0,107 nos animais SE. Os bezerros NEL apresentaram emocionalidade mais positiva (média = -0,198±0,111) e níveis de resposta menores (média = -0,136±0,103) que os F1AN (médias: 0,183±0,122 e 0,219±0,114, respectivamente). Concluímos que a estimulação tátil apresentou efeito positivo no bem-estar dos bezerros recém-nascidos durante os primeiros manejos e no desempenho até o desmame. Palavras-chave: manejo, bovinos de corte, expressão facial, avaliação qualitativa do comportamento EFFECTS OF TACTILE STIMULATION ON THE WELFARE OF NEWBORN PURE AND CROSSED NELORE CALVES ABSTRACT: The aim of this study was to assess the effects of tactile stimulation on the welfare of newborn Nellore beef calves. The study was carried out at Agropecuária Orvalho das Flores, municipality of Araguaiana, MT, Brazil, with 111 calves (50 males and 61 females) from two genetic groups, Nellore (NEL, N = 61) and Abeerden Angus x Nellore (F1AN, N = 50), with 34 females NEL and 27 F1AN=27 and 27 males NEL and 23 F1AN. The calves were born between August and September 2019 (N = 76) and between January and February 2020 (N = 35). The animals were randomly divided into two treatments, defined by the application of tactile stimulation in the calves (CE, N = 53) or handling routine (SE, N = 58). Data collection was performed when calves were around three days of age, during the handling procedures for navel care and calf’s identification. Behavior assessments were performed, recording the calves' facial expressions (using 12 previously defined categories) and rating the qualitative behavior assessments (QBA), with 16 terms. The heart rates (HR) of the calves were also measured during the procedures, considering three moments: FC1 = when the calves were being restrained and positioned in the lateral decubitus on a cushion, FC2 = during identification procedures, and FC3 = after the completion of the identification procedures. The differences between these measures were calculated. The calves were weighed on the day of handling and at weaning, at approximately eight months of age; with these data, the average daily weight gain (ADG) of each calf was calculated. Facial expression data were analyzed using chi-square and Fisher's exact tests, while QBA data were subjected to principal component analysis (PCA). The FC means per treatment were calculated and compared using Student's t test. To assess whether there were differences between treatments at the three times when FC were measured, a one-way analysis of variance was performed. Pearson's correlation coefficients were estimated to assess the association between PCA indices and FC and ADG. Linear models were used to assess the effect of sex, genetic group, and treatment on ADG and PCA indices. The facial expression categories that were associated with the treatments were 'head movements' (>50% of SE animals kept their head still during handling vs >50% of CE animals pushed sideways at least once), 'third eyelid' (visible in more than 70% of SE animals vs 56% in CE) and 'snout wrinkles' (72% of animals with expression lines at least once in SE vs 47% for the CE group). The QBA analysis identified two principal components, the first (PC1) explained 56.78% of the total variation of the data and reflected the positive or negative emotionality of the calves and the second (PC2) explained 21.95% of the data variation and reflected the increased or reduced level of response (arousal) of the calves. The FC means of the three measurement moments were lower in CE than in SE animals (FC1: 173.68 vs 180.46, FC2: 167.45 vs 170.31 and FC3: 162.53 vs 171.98 bpm, respectively), in addition there was a greater decrease in FC in CE animals. A significant negative correlation (r = -0.341) was observed between the index obtained in PC2 and the difference between FC3 and FC2. Within each of the treatments, significant correlations were also found between the two variables (r = -0.351, p = 0.011 for the SE group and r = -0.332, p = 0.011 for the CE group). Significant correlations were found between ADG and the two PCA index depending on the year of calves’ birth, for 2019 there was a negative correlation with PC1 (indicating that higher ADG was associated with more positive emotionality) and positive correlation with PC2 (indicating that higher ADG higher was associated with a higher level of response). In 2020, a positive correlation was found only with the PC2 index, with an interpretation similar to that of 2019. There was a significant effect of treatment, genetic group and sex nested in the genetic group in the ADG in 2019, with higher means for CE animals (0.957±0.020 and 0.902±0.020 kg/day for CE and SE, respectively) and crossbred animals (1.065±0.027 vs 0.794±0.014, for F1AN and NEL, respectively). F1AN males and females presenting higher ADG means than NEL (females: 0.991±0.044 and 0.752±0.019 and males: 1.140±0.034 and 0.836±0.021 kg/day for F1AN and NEL, respectively). In 2020 there was no significant effect of any of the variables included in the model on the ADG. Treatment and genetic group had significant effects on PC1 (emotionality) and PC2 (response level) index, being: PC1= -0.470±0.119 and PC2 = 0.619±0.111 for CE animals and PC1 = 0.454±0.115 and PC2 = -0.536±0.107 in the SE animals. NEL calves showed more positive emotionality (mean = -0.198±0.111) and lower response levels (mean = -0.136±0.103) than F1AN calves (mean: 0.183±0.122 and 0.219±0.114, respectively). We concluded that tactile stimulation had a positive effect on the welfare of newborn beef calves during the first handling procedures and on performance until weaning. Keywords: handling, beef cattle, facial expression, qualitative behavior assessment 1 CAPÍTULO 1 – Considerações gerais 1. INTRODUÇÃO Os modelos de produção de bovinos de corte a nível mundial têm passado por fortes mudanças ao longo dos últimos anos, principalmente devido as demandas da população relacionadas às questões de qualidade e inocuidade dos alimentos, sustentabilidade e bem-estar animal (Grandin, 2007; Robinson et al., 2011; Paranhos da Costa & Sant'Anna, 2016). As exigências da população por produtos de origem animal que sejam de qualidade obrigam aos produtores a desenvolver estratégias de criação e manejo de baixo estresse e que não comprometam a eficiência produtiva como é a adoção de boas práticas de bem-estar animal em cada uma das fases da cadeia de produção, desde a cria ao abate do animal (Grandin, 2007; Briske, 2017). A fase de cria dos bezerros é crucial para garantir um animal saudável e com bom desenvolvimento ao médio e longo prazo. No Brasil a cria de bezerros é realizada geralmente em sistemas de criação a pasto, ou seja, condições extensivas, as quais limitam as possibilidades de contato frequente dos animais com humanos, com as interações ocorrendo principalmente durante a realização de manejos específicos que podem ser interpretados como aversivos, como ocorre com a marcação com ferro quente, aplicação de medicamentos e vacinas, castração e mochação (Lay Jr. et al., 1992; Becker & Lobato, 1997; Adcock & Tucker, 2018). Nesse sentido é importante garantir uma boa relação entre os humanos e os bezerros nas primeiras etapas de vida e assim minimizar os efeitos dos contatos negativos, considerando que uma boa qualidade na interação precoce tem impacto positivo na eficiência dos manejos posteriores e na diminuição dos riscos de acidentes de trabalho (Boivin et al., 1994; Hemsworth et al., 2000), por outro lado, quando os animais são expostos a experiências pouco prazerosas pode resultar na expressão de estados emocionais negativos (Proctor & Carder, 2015). Uma das práticas que podem promover o contato positivo e neutralizar o efeito aversivo das rotinas habituais são as práticas considerados gentis, entre elas, a aplicação de estimulação tátil, que já vem sendo estudada em diversas espécies de 2 mamíferos, simulando o comportamento realizado pela mãe com as crias, que é a lambida social ou allogrooming (Kiley-Worthington & de la Plain, 1985; Schanberg & Field, 1987). Esse comportamento tem várias funções, dentre elas limpeza, termorregulação e formação do vínculo social, além de se caracterizar como um estímulo prazeroso. (Sato et al., 1991; Alea et al., 1999; Waiblinger et al., 2002; Mellor & Gregory, 2003, De Freslon et al., 2020). Os resultados de estudos realizados com a aplicação de estimulação tátil em leitões, bezerros leiteiros e potros mostraram melhoria na interação humano-animal, redução do medo e diminuição na mortalidade e morbilidade (Oliveira et al., 2015; Schmidek et al., 2018; Silva-Antunes & Paranhos da Costa, 2021). Outros estudos em crias de camundongos demonstraram taxas de crescimento aumentadas, diminuição da liberação de hormônios corticosteroides associados ao estresse, diminuição da frequência cardíaca e aumento da imunidade com a aplicação de estimulação tátil (Schanberg & Field, 1987; Imanaka et al., 2008; Falcone et al., 2017). No entanto em outras espécies, como no caso dos bovinos de corte, estudos avaliando aplicação de manejos gentis como a estimulação tátil ainda são limitados. Considerando que os primeiros dias de vida do bezerro representam um dos períodos mais sensíveis para o animal é importante garantir a formação de um vínculo social positivo com os manejadores e proporcionar experiencias que sejam interpretadas positivamente (Waiblinger, 2017). Assim o objetivo com esta dissertação foi avaliar o efeito da estimulação tátil no bem-estar de bezerros de corte recém-nascidos nelore puros e cruzados, testando a hipótese que a estimulação tátil, mesmo quando aplicada com pouca frequência e por curto período de tempo promoverá um efeito positivo no bem-estar de bezerros de corte recém-nascidos amenizando os efeitos negativos do manejo de rotina. No caso de confirmação da hipótese, espera-se oferecer recomendações de práticas de manejo para as fazendas comerciais de cria de bovinos de corte que promovam o bem-estar dos bezerros. 52 5. Conclusões Com base nos nossos resultados podemos concluir que adoção da estimulação tátil como uma rotina durante o manejo dos bezerros de corte recém-nascidos e mesmo só aplicada em uma oportunidade, tem potencial para promover o bem-estar dos bezerros amenizando o manejo geral demonstrado pela expressão de estados emocionais positivos e diminuindo frequência cardíaca como indicador de baixo estresse, sem prejudicar a eficiência da rotina, considerando que é um manejo obrigatório dentro das fazendas de cria e que pode ser estressante para os animais. A estimulação também tem potencial de impactar positivamente o desempenho dos animais. Entretanto, deve-se considerar que os bezerros apresentam respostas diversas aos manejos baseados nas diferenças individuais explicadas em parte pelo temperamento devido à ausência de experiencias previas que condicionem a reação. 53 6. Referências bibliográficas Adcock, S. J., & Tucker, C. B. (2018). Painful procedures: when and what should we be measuring in cattle? In. Tucker, C. B. (Ed.). Advances in Cattle Welfare, p. 157-198. Dusford, UK: Woodhead Publishing. Bacher, L. M., Prieur, V., Veissier, I., & Boivin, X. (2022). Association between breeding bulls’ reactivity to humans or handling and their daily behaviour and growth. Animal, 16(7), 100568. Barbosa, P. F. (1998). Cruzamento industriáis e a produção de novilhos precoces. In: Simposio Sobre Producao Intensiva de Gado de Corte, 1998, Campinas. Anais... Campinas: CBNA, 1998. p. 100-114. Becker, B.G., & Lobato, J.F.P. (1997). Effect of gentle handling on the reactivity of zebu crossed calves to humans. 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