José Carlos Yamashita 

 

 

 

 

 

 

 

AVALIAÇÃO DA MICROBIOTA E DA REPARAÇÃO 

APICAL E PERIAPICAL APÓS PREPARO 

BIOMECÂNICO DE CANAIS RADICULARES COM 

DIFERENTES SOLUÇÕES IRRIGADORAS, EM 

DENTES DE CÃES COM REAÇÃO PERIAPICAL 

CRÔNICA 

 

 

 

 
 
 
 
 

Araraquara 

2004 



 

José Carlos Yamashita 

 

 

 

AVALIAÇÃO DA MICROBIOTA E DA REPARAÇÃO APICAL E 

PERIAPICAL APÓS PREPARO BIOMECÂNICO DE CANAIS 

RADICULARES COM DIFERENTES SOLUÇÕES 

IRRIGADORAS, EM DENTES DE CÃES COM REAÇÃO 

PERIAPICAL CRÔNICA. 

 

 

 

 

Tese apresentada á Faculdade de Odontologia de 

Araraquara da Universidade Estadual Paulista “ Júlio 

de Mesquita Filho”, como parte dos requisitos para 

obtenção do título de doutor em Odontologia – Área  

de Endodontia 

 

 

Orientador:  Prof Dr. Mário Tanomaru Filho 

 
 

Araraquara 

2004 



 

 

 

 

 
Yamashita, José Carlos 

Avaliação da microbiota e da reparação apical e periapical após 
preparo biomecânico de canais radiculares com diferentes soluções 
irrigadoras, em dentes de cães com reação periapical crônica./José Carlos 
Yamashita.- Araraquara: [s.n.], 2004. 

197 f.; 30 cm. 

Tese (Doutorado) – Universidade Estadual Paulista , Faculdade 
de Odontologia. 

Orientador: Prof. Dr. Mário Tanomaru Filho 
 

1. Clorexidina. 2. Irrigantes do canal radicular. 3. Preparo de 
canal radicular. 



 

Dados Curriculares 

JOSÉ CARLOS YAMASHITA 
 
 
NASCIMENTO  21. 05. 1964, São Paulo – SP 

FILIAÇÃO José Yamashita 

Megumi Yamashita 

1982/1985 Curso de Graduação em Odontologia. 

Faculdade de Odontologia - USP, Bauru-SP 

1994/1995 Curso de Especialização em Endodontia. 

APCD-Regional Bauru. 

1997/2004 Professor Assistente das disciplinas de Endodontia e 

Clínica Integrada, da Faculdade de Odontologia da 

Universidade do Sagrado Coração, Bauru-SP. 

1998/2000 Curso de Pós–Graduação em Endodontia – Mestrado. 

Faculdade de Odontologia de Araraquara, da 

Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita 

Filho”. 

2001/2004 Curso de Pós–Graduação em Endodontia – Doutorado.  

Faculdade de Odontologia de Araraquara, da 

Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita 

Filho”. 

  

Associações: SBPqO e APCD



 

Todo trabalho envolve um universo muito maior que seu simples 

autor.  Ao protagonista é necessária a participação de um número sem fim 

de colaboradores. A estes que direta ou indiretamente, e até  aqueles que 

inconscientemente me auxiliaram,  dedico este trabalho. 

 

Dedico meu trabalho à FAMÍLIA, no mais amplo sentido desta 

palavra. Aquela que participa e nos incentiva desde a nossa concepção, 

nos encoraja nas dificuldades, nos auxilia durante as necessidades, se 

frustra numa derrota, mas compartilha a alegria de uma conquista. 

Independente dos laços de sangue, a família participou diretamente para 

a realização de mais um trabalho. 

 

À DEUS, que muito antes de alcançarmos a maturidade para nos 

darmos conta, já nos acolhe, motiva e protege como filhos.  

 

Aos meus pais, José e Megumi e meus filhos Vitor e Lia. Minhas 

raízes e meus frutos. Pela base sólida e retidão, ofereço a vocês esta 

conquista. Tento manter vivo o exemplo de luta e dedicação, transmitindo 

força para a próxima geração.  

 

À minha Renata pelo prazer que temos em compartilhar e planejar, 

juntos, nossas vidas.  



AGRADECIMENTOS ESPECIAIS 

 

Agradeço ao Prof. Dr. Mário Tanomaru Filho, que com 

maestria conduziu esta orientação, ofereceu-me sua amizade, paciência, 

experiência e compartilhou seus conhecimentos. Ao amigo Mario 

Tanomaru Filho agradeço a oportunidade de poder atingir minha 

“maioridade acadêmica”. Ao ver em você um talento expoente na 

endodontia, com um presente e futuro brilhantes, tenho orgulho e fico feliz 

por ter participado, como orientado, de sua história. 

 

Agradeço ao Prof. Dr. Mário Roberto Leonardo, pela 

oportunidade de ingressar e compreender as prioridades de um curso de 

Pós-graduação. Sempre enxergaremos no Sr. a figura mítica do exemplo 

de pesquisador, defensor da Endodontia Biológica, incontestável por sua 

competência, profissionalismo e amor pleno a ciência e arte da 

Endodontia.  

 

Obrigado Prof. Dra. Léa Assed Bezerra da Silva, pelas 

contribuições e sugestões que foram dadas. Pelo exemplo de dedicação e 

competência, e ainda pela oportunidade de enxergar a importância do 

trabalho em equipe. 

 



À Profa. Dra. Izabel Yoko Ito pelos conhecimentos 

compartilhados e pelo exemplo de profissional, pesquisadora e 

professora. Agradeço, ainda, a sua equipe técnica, do laboratório de 

microbiologia da Faculdade de Farmácia de Ribeirão Preto-USP, que 

viabilizaram o estudo microbiológico. 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 



AGRADEÇO 

 

Ao Prof. Dr. Romeu Magnani pela colaboração na análise 

estatística do estudo microbiológico. 

 

Ao Prof. Dr. Marco Antonio Hungaro Duarte pela 

colaboração na análise estatística do estudo histopatológico. 

 

Aos Profs. Drs. da Disciplina de Endodontia da FOAr. 

Roberto de Miranda Esberard, Idomeo Bonetti Filho, Renato de 

Toledo Leonardo e Fábio Luiz de Camargo Villela Berbert, pela 

atenção e ensinamentos dedicados. Agradeço ainda ao Prof. Dr. Jaime 

Maurício Leal, pelos conhecimentos e exemplo demonstrados. 

 

Aos Professores do curso de Pós-graduação pela 

atenção dispensada, disponibilidade e dedicação. 

 

A equipe de Endodontia da Universidade do Sagrado 

Coração. Muito mais que companheiros e incentivadores, os Profs. 

Sylvio de Campos Fraga, Milton Carlos Kuga, Marco Antonio 

Hungaro Duarte e Eliane Cristina Gullin de Oliveira, são minha família 

da USC. 

 



A Universidade do Sagrado Coração, nas pessoas das Irmãs 

Jacinta Turollo Garcia e Marizabel Leite, pelo esforço e incentivo na 

formação de seu corpo docente.  

 

A Faculdade de Odontologia de Araraquara da Universidade 

Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”, nas pessoas do Diretor     

Prof. Dr. Ricardo Samih Georges Abi Rached. e do Vice-diretor 

Roberto Miranda Esberard. 

  

Ao funcionário Edson Luís Mori e funcionários do Biotério 

do campus da UNESP-Araraquara, pela participação na parte 

experimental com os cães. Pela competência e carinho que dedicaram 

aos animais. 

 

Ao funcionário da Disciplina de Odontopediatria da 

Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto – USP, Marco Antônio dos 

Santos, pelo auxílio prestado no processamento histológico. 

 

Ao Sr. Júlio César de Matos e equipe, pelo empenho na 

qualidade da documentação fotográfica e sua impressão. 

  



Aos Funcionários da Seção de Pós-Graduação da 

Faculdade de Odontologia de Araraquara da Universidade Estadual 

Paulista “Júlio de Mesquita Filho”. 

 

Aos Funcionários da Biblioteca da Faculdade de 

Odontologia de Araraquara da Universidade Estadual Paulista “Júlio de 

Mesquita Filho”. 

 

Aos Funcionários da Disciplina de Endodontia da 

Faculdade de Odontologia de Araraquara da Universidade Estadual 

Paulista “Júlio de Mesquita Filho”. 

 

Aos colegas do curso de Pós-Graduação, em especial aos 

da área de Endodontia: Fábio e José Maurício. Agradeço a convivência 

durante mais um desafio em nossas vidas. 

 

Ao CNPq, pelo apoio financeiro à realização deste trabalho. 

 

Aos alunos, de todos os níveis, a quem desejamos 

contribuir na formação. Nos estimulando a buscar informações e tentar 

dar os exemplos, até aqui recebidos. 

 

 

 



 

 

 

 

 

Sumário 

1.Introdução.................................................................. 13 

2.Revisão de literatura................................................... 19 

3.Proposição................................................................. 75 

4.Material e método....................................................... 77 

5.Resultado.................................................................. 99 

6.Discussão.................................................................. 136 

7.Conclusão.................................................................. 163 

8.Referências................................................................ 166 

Resumo........................................................................ 190 

Abstract ....................................................................... 193 

Anexo........................................................................... 196 

 
 

 



 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

 

 

 

 

INTRODUÇÃO



Introdução 14 

1. Introdução 

 

O tratamento de canal radicular é constituído de 

várias fases interdependentes, com objetivo fundamental de 

permitir, ou mesmo promover, a reparação dos tecidos apicais 

e da região periapical. O tratamento endodôntico em dentes 

sem vitalidade pulpar e com reação periapical crônica 

apresenta maior dificuldade em função da infecção 

estabelecida, a qual desempenha importante papel no 

desenvolvimento e manutenção das lesões periapicais 

(BYSTRÖM et al.26, 1987; SJÖGREN et al.143, 144, 1991, 1997; 

SUNDQVIST et al.153, 1998).  

Nestas situações tem sido demonstrada maior 

quantidade de bactérias anaeróbias, particularmente as gram-

negativas (FABRICIUS  et al.38, 1982; SUNDQVIST et al.152, 1989; 

ABOU-RASS e BOGEN1, 1998; SUNDQVIST151, 1992; MOLANDER et 

al.98, 1998), sua disseminação por todo o sistema de canais 

radiculares (SHOVELTON129, 1964; ANDO e  HOSHINO6, 1990; 

BERRUTI et al.17, 1997; PETERS et al.112, 2001), grande 

concentração de endotoxinas bacterianas (SCHEIN e 

SCHILDER123, 1975; P ITTS et al.115, 1982; SCHONFELD et al.124, 

1982; HORIBA et al.66, 1992) e presença de infecção extra-

radicular (LEONARDO et al.85, 2002, NORI et al.103, 2002) 



Introdução 15 

justificando a maior dificuldade na terapia endodôntica. Como 

conseqüência das implicações microbiológicas, são 

observados menores índices de sucesso após tratamento 

endodôntico de dentes com lesão periapical (HOLLAND et al.64, 

1983; SUNDQVIST et al.152, 1989; LEONARDO e  S ILVA79, 1998, 

S ILVA et al.134, 2002, TANOMARU F ILHO et al.160, 2002).  

Dentre as fases que compõem o tratamento 

endodôntico radical, o preparo biomecânico visa a limpeza dos 

canais radiculares, remoção de restos orgânicos e 

inorgânicos, neutralização do conteúdo séptico-tóxico, assim 

como a modelagem do canal radicular, proporcionando a sua 

dilatação e atribuindo conformação cônica (LEONARDO78, 

1998). Durante o preparo biomecânico, a atuação química da 

solução irrigadora tem importante papel em associação à ação 

mecânica do instrumento endodôntico, o qual apresenta 

dificuldade de atuação em toda superfície do canal radicular 

em função da complexidade anatômica do sistema de canais 

radiculares (PETERS  et al.112, 2001; WU et al.172, 2003).  

Como solução irrigadora, o hipoclorito de sódio 

tem sido amplamente difundido e empregado (BAUMGARTNER e 

CUENIN12, 1992; CHEUNG e STOCK29, 1993; WALTON e RIVERA 167, 

1996; WEST e ROANE 169, 2000). Propriedades importantes são 

atribuídas à solução de hipoclorito de sódio, para obtenção da 



Introdução 16 

limpeza do sistema de canais radiculares. Dentre elas a 

capacidade de dissolução de tecido orgânico (GROSSMAN e 

MEIMAN53, 1941; GORDON, et al.49, 1981; YANG et al.174, 1995; 

SÓ et al.145, 1997; HASSELGREN et al.59, 1988); baixa tensão 

superficial (BERBERT et al.16, 1980; LEONARDO78, 1998), 

neutralização parcial do conteúdo séptico-tóxico dos canais 

radiculares, dupla ação detergente e ação imediata 

(LEONARDO78, 1998). 

Um outro aspecto importante na escolha de uma 

solução irrigadora endodôntica para dentes sem vitalidade 

pulpar está relacionado à sua atividade antimicrobiana, a qual 

tem sido demonstrada para a solução de hipoclorito de sódio 

(OHARA  et al.104, 1993; GEORGOPOULOU et al.46, 1994; YESILSOY 

et al.175, 1995; AYHAN et al.8, 1999; S IQUEIRA  JR. et al.137, 138, 

1999, 2000). De acordo com Leonardo et al.82 (1998), para o 

tratamento de dentes sem vitalidade pulpar e com reação 

periapical crônica, é recomendado o emprego da solução 

concentrada de hipoclorito de sódio, devido a sua maior 

eficácia antimicrobiana que as soluções diluídas (FOLEY et 

al.43, 1983; OHARA et al.104, 1993; AYHAN et al.8, 1999).  

No entanto, quando em concentrações elevadas, 

esta solução pode prejudicar a reparação dos tecidos apicais 

e periapicais, atuando como irritante tecidual (SPANGBERG et 



Introdução 17 

al.148, 1973, LEONARDO et al.83, 1984; BECKING13, 1991; 

CYMBLER e ARKADA NI32, 1994; YESILSOY et al.175, 1995; MEHRA  

et al.97, 2000, TANOMARU et al.162 2002). 

Dessa maneira, têm sido propostas soluções 

irrigadoras alternativas, que tenham ação antimicrobiana e ao 

mesmo tempo sejam biocompatíveis (JEANSONNE  e WHITE69, 

1994; LEONARDO et al.89, 1999, TANOMARU F ILHO et al.162, 2002; 

ONÇAG et al.105, 2003). Dentre elas, merece destaque a 

solução de digluconato de clorexidina a 2%, com comprovada 

atividade antimicrobiana (JEANSONNE  e WHITE69, 1994; 

YESILSOY et al.175, 1995; GOMES et  al.48, 2001; ONÇAG et al.105, 

2003), bem como efeito antibacteriano residual por períodos 

prolongados (HELING et al.61, 1992; JEANSONNE  e WHITE69, 

1994; WHITE  et al.170, 1997; LEONARDO et al.89, 1999, LENET et 

al.77, 2000). 

O efeito residual da solução de clorexidina após 

emprego como solução irrigadora endodôntica, propriedade 

conhecida como substantividade, pode desempenhar 

importante ação na desinfecção dos canais radiculares. 

Porém, não é conhecida a sua eficácia em relação ao sistema 

de canais radiculares após preparo biomecânico e influência 

desta atuação sobre a reparação dos tecidos periapicais.  



Introdução 18 

Assim, torna-se oportuna a avaliação do efeito 

do preparo biomecânico utilizando diferentes soluções 

irrigadoras sobre as condições de desinfecção do sistema de 

canais radiculares e conseqüentemente sobre a reparação dos 

tecidos apicais e periapicais em dentes com lesão periapical.  



 

 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

 
REVISÃO DE LITERATURA 



Revisão de Literatura 20 

2. Revisão de Literatura 

 

Grossman e Meiman53, em 1941, estudaram o 

potencial dissolvente sobre polpas humanas da soda clorada, 

solução de enzima, solvente de mucina, ácido hidroclorídrico, 

a 10%, hidróxido de potássio (em solução aquosa a 20%), 

solução aquosa de hidróxido de cálcio a 25%, solução de 

ácido sulfúrico a 50% e exsudato leitoso de Carica papaya 

(papaína). Os autores enfatizavam a eliminação do tecido 

necrótico para o sucesso endodôntico. As observações foram 

feitas em períodos de 1, 2, 3, 6, 24, 48, e 72 horas. 

Constataram maior eficiência da soda clorada, sendo esta a 

única capaz de dissolver o tecido pulpar em menos de 2 

horas. As outras substâncias estudadas levaram 24 horas ou 

mais. 

Spangberg et al.148, em 1973, avaliaram a 

toxicidade e efeito antimicrobiano de alguns anti -sépticos 

empregados em endodontia. Foram testados: paraclorofenol 

canforado, solução de clorexidina a 0,05%, formocresol, iodeto 

de potássio, PMC, solução de NaOCl a 0,5 e 5,25% e álcool 

iodado. Foi constatado que o efeito tóxico da solução de 

NaOCl, clorexidina, iodeto de potássio e álcool iodado é 

muitas vezes maior que sua ação antimicrobiana. Foi 



Revisão de Literatura 21 

considerado que a solução irrigadora ideal é aquela que 

combina o máximo de ação antimicrobiana com uma toxicidade 

mínima. Nenhuma das soluções avaliadas apresentou estas 

características. Em casos de necrose pulpar e contaminação 

dos túbulos dentinários é necessário um efeito antimicrobiano 

maior, a solução NaOCl deve ser a escolhida. A concentração 

de 5,25% é mais eficiente que o necessário para este fim, 

portanto concentrações menores devem ser usadas para 

possibilitar uma correta correlação entre fatores biológicos e 

antimicrobianos. Neste estudo destacaram que a solução de 

NaOCl a 0,5% com pH 8,9 como tendo atividade 

antimicrobiana e baixa toxicidade. A solução de clorexidina a 

0,05% apesar de baixo efeito tóxico apresentou pouca ação 

antimicrobiana, além de pequena capacidade de limpeza dos 

canais radiculares. A solução de NaOCl em baixa 

concentração foi considerada a melhor escolha por associar 

baixo nível de toxicidade com melhor efeito antimicrobiano e 

dissolvente de resíduos. 

McComb e Smith94, em 1975, examinaram canais 

tratados sob diferentes formas de irrigação, empregando MEV. 

Utilizando dentes humanos extraídos, que tiveram seus canais 

radiculares preparados empregando as seguintes soluções 

irrigadoras: NaOCl a 1 e 6%; NaOCl a 6%+peróxido de 



Revisão de Literatura 22 

hidrogênio a 3%; REDTA; RC-Prep; e ácido poliacrílico a 20%. 

Os autores observaram a formação de uma camada amorfa 

composta por dentina, restos necróticos e bactérias na 

superfície do canal radicular após a instrumentação. Nenhuma 

das técnicas propostas foi capaz de remover completamente a 

camada residual e os restos formados na superfície. A 

associação da solução de hipoclorito de sódio e peróxido de 

hidrogênio não foi mais eficiente que o uso da água na 

remoção de restos. Concluíram que as técnicas estudadas 

foram inadequadas, no que se refere a produzir uma superfície 

de parede radicular limpa. Ressaltaram ainda que o uso de 

agentes irrigantes apresenta grande importância na limpeza 

dos canais radiculares, merecendo maiores estudos in vitro e 

in vivo. 

Gordon et al.49, em 1981, estudaram a ação 

dissolvente de várias diluições de solução de NaOCl (0, 1, 3 e 

5%) sobre polpas vitais e necróticas de bovinos. As polpas 

foram observadas em períodos variando de 2 a 10 minutos. A 

solução de NaOCl a 0% não foi capaz de dissolver a polpa 

vital e teve ação limitada sobre a polpa necrótica. As 

concentrações de 3 e 5% apresentaram eficácia semelhante, 

dissolvendo cerca de ¾ da polpa vital, após 2 minutos. As 

concentrações de 1, 3 e 5% foram capazes de dissolver 90% 



Revisão de Literatura 23 

da polpa necrótica após 5 minutos. Concluíram que o uso de 

concentrações mais baixas da solução de NaOCl deve ser 

indicado, por ser menos agressivas aos tecidos que as 

concentrações maiores. 

Ringel et al.120, em 1982, compararam, in vivo, 

em tratamento endodôntico de dentes com necrose pulpar, a 

ação bactericida das soluções de NaOCl e clorexidina, usadas 

como soluções irrigadoras de canais radiculares. Os 

resultados mostraram que a solução de NaOCl a 2,5% foi 

significativamente mais eficaz, sob o ponto de vista 

antimicrobiano, em relação a solução de clorexidina a 0,2%. 

Delany et al.34, em 1982, realizaram estudo in 

vitro, avaliando a capacidade antimicrobiana da solução de 

clorexidina a 0,2%. Quarenta dentes com polpa necrótica 

recém-extraídos tiveram seus canais radiculares preparados 

simulando situação clínica, empregando como solução 

irrigadora clorexidina ou solução salina. Realizadas as 

culturas microbianas durante, imediatamente após e 24hs 

após, concluíram que a clorexidina auxilia na redução das 

bactérias remanescentes no sistema de canais radiculares, 

sendo assim eficaz, quando utilizada como solução irrigadora  

ou curativo de demora. 



Revisão de Literatura 24 

Byström e Sundqvist24, em 1983 realizaram 

avaliação da atividade antibacteriana da solução de hipoclorito 

de sódio a 0,5% utilizada como irrigante endodôntico. Foram 

biomecanizados 30 dentes com necrose pulpar e lesão 

periapical, cujas coroas estavam intactas. As amostras iniciais 

foram positivas com 80% de incidência de anaeróbios. 

Realizaram um total de cinco preparos, com intervalos de 2 a 

4 dias, e a cada sessão nova colheita. Ao final do 

experimento, dos 15 dentes tratados com solução salina, oito 

apresentaram cultura negativa. Enquanto no grupo tratado 

com solução de hipoclorito, 3 ainda apresentavam bactérias 

viáveis.  

Azevedo e Leonardo9, em 1983, realizaram 

avaliação microbiológica da eficiência de preparo biomecânico 

de dentes anteriores de humanos, sem vitalidade pulpar e sem 

reação periapical visível radiograficamente. Os resultados 

mostraram que o preparo endodôntico empregando o líquido 

de Dakin proporcionou 85% de testes bacteriológicos 

negativos, após um ou dois preparos. Em apenas 10,5% dos 

casos foi necessário o emprego de um curativo de demora 

após o preparo biomecânico. 

Foley et al.43, em 1983, avaliaram in vitro, a 

eficácia de algumas soluções irrigadora na eliminação de B. 



Revisão de Literatura 25 

melaninogenicus e P. anaerobius do sistema de canais 

radiculares. Foram avaliados o Clorox (solução de NaOCl a 4-

6%) e Gly-Oxide nas concentrações originais ou diluídos; 

utilizados isolados ou alternadamente. Mostraram que o 

Clorox concentrado e Clorox alternado com Gly-Oxide 

apresentaram atividade antimicrobiana. Enquanto que o Gly-

Oxide isoladamente teve eficiência variável e a solução salina 

foi completamente ineficaz.  

Byström e Sundqvist25, em 1985, realizaram 

preparo biomecânico em 60 dentes unirradiculados, com 

necrose pulpar e lesão periapical, os quais foram divididos 

aleatoriamente em 3 grupos, sendo empregadas como solução 

irrigadora a solução de hipoclorito de sódio a 0,5%; a 5% ou a 

associação das soluções de hipoclorito de sódio a 5% e EDTA 

a 15%. Após 2 a 4 dias da primeira sessão, foram realizadas 

culturas bacteriana, que se mostraram positivas em 60, 50 e 

55% dos casos, respectivamente. Realizada segunda sessão, 

após novo período de 2 a 4 dias, o crescimento bacteriano foi 

observado em 40, 30 e 15% dos casos; 80% das espécies 

isoladas eram anaeróbios. Não houve diferença estatística 

entre as duas concentrações diferentes da solução de 

hipoclorito de sódio; porém houve entre estas e a associação 

hipoclorito+EDTA. Mesmo após o segundo preparo 



Revisão de Literatura 26 

biomecânico houve persistência de várias espécies 

bacterianas nos canais radiculares. 

A ação dissolvente das soluções de hidróxido de 

cálcio, hipoclorito de sódio a 0,5%, ou sua associação, sobre 

tecido muscular necrótico de porco, foram avaliadas por 

Hasselgren et al.59, em 1988. Constataram que as amostras de 

tecido colocadas em solução de hipoclorito de sódio a 0,5% 

não foram totalmente dissolvidas após 12 dias. No entanto, 

quando a solução era renovada a cada 30 minutos, o tecido foi 

dissolvido em 3 horas. As amostras colocadas em solução de 

hidróxido de cálcio mostraram aumento de volume e peso nas 

primeiras 24 horas, com perda gradativa de volume após este 

período até completa dissolução após 12 dias. O pré-

tratamento com hidróxido de cálcio por 30 minutos permitiu a 

dissolução do tecido pela solução de hipoclorito de sódio em 

90 minutos. Quando pré-tratados por 24 horas ou 7 dias a 

dissolução ocorreu em 60 minutos. 

Ostarvik e Haapasalo106, em 1990, compararam a 

desinfecção de canais por curativos de demora e soluções 

irrigadoras. Como modelo experimental empregaram cilindros 

de dentina bovina, contaminados com E. faecalis, S. sanguis, 

E. coli ou P. aeruginosa. Os resultados apresentados 

mostraram que a solução irrigadora de maior potencial 



Revisão de Literatura 27 

antimicrobiano foi o iodeto de potássio iodado, entretanto a 

solução de NaOCl a 5,25% apresentou eficiência considerável. 

A clorexidina a 2% não foi mais potente que a solução de 

NaOCl. Outra importante conclusão obtida foi que a presença 

da camada residual retardou, porém não eliminou, a ação dos 

medicamentos testados. 

Harisson et al.58, em 1990, estudaram a ação 

antimicrobiana das soluções de NaOCl nas concentrações de 

2,62% e 5,25%, contra S. faecalis e C. albicans. Cones de 

papel inoculados com os microrganismos foram expostos às 

soluções por 60s ou 120s, e então incubados em meio 

apropriado. Mostraram atividade antimicrobiana semelhante 

em ambas as concentrações. 

Cervone et al.27, em 1990, avaliaram in vitro o 

efeito antimicrobiano da clorexidina através de um sistema de 

liberação controlada, em adesivo vinílico. Utilizaram 

microrganismos de campo, isolados de bolsas periodontais, 

cáries e tecido pulpar necrótico. Os adesivos contendo 

clorexidina foram colocados sobre placas de ágar, semeados 

com os diversos microrganismos. Incubadas em condições de 

aerobiose e anaerobiose e examinadas, quanto aos halos de 

inibição. O dispositivo de liberação controlada inibiu o 

crescimento de todos os microrganismos testados. 



Revisão de Literatura 28 

Baumgartner e Cuenin12, realizaram em 1992 

estudo com MEV com o objetivo de avaliar a capacidade de 

desbridamento de diferentes concentrações da solução de 

NaOCl depositas por cânula ou ultra-som, em superfícies 

instrumentadas ou não. Os autores utilizaram pré-molares de 

raiz única, sendo somente uma parede, vestibular ou lingual, 

instrumentada. As concentrações utilizadas foram: 5,25%; 

2,5%; 1% e 0,5% num volume de 3mL (ou 10 segundos de 

ultra-som) de solução a cada troca de instrumento. Como 

resultados, não foram encontradas diferenças em relação às 

diversas soluções e formas de irrigação, nas superfícies 

instrumentadas. Nas superfícies não instrumentadas, as 

concentrações de 1%, 2,5% e 5,25% apresentaram áreas 

livres de restos pulpares e pré-dentina expondo calcosferitos, 

independente do uso ou não do ultra-som. A solução de NaOCl 

a 0,5% removeu a maior parte dos remanescentes pulpares 

porém algumas fibrilas foram observadas. 

Heling et al.61, em 1992, avaliaram o efeito da 

clorexidina como medicação intracanal, in vitro utilizando 

cilindros de dentina bovina inoculadas com S. faecalis. Os 

medicamentos testados foram a solução de gluconato de 

clorexidina a 0,2%, clorexidina num dispositivo de liberação 

controlada (1,2mg) e paramonoclorofenol canforado. No grupo 



Revisão de Literatura 29 

controle não foi utilizada qualquer medicação. Na leitura 

óptica dos meios de cultura com espectrofotômetro, os grupos 

experimentais apresentaram melhores resultados 

antimicrobianos que o grupo controle. 

Heling et al.62, em 1992, avaliaram a atividade 

antimicrobiana da clorexidina comparando-a com o hidróxido 

de cálcio na desinfecção e prevenção de infecção secundária 

do sistema de canais radiculares. Foi utilizada dentina 

radicular bovina inoculada com S. faecalis. Nos grupos 

experimentais utilizaram duas formulações diferentes de 

clorexidina num dispositivo de liberação controlada; hidróxido 

de cálcio e a solução salina foi empregada como controle. Os 

resultados mostraram que a clorexidina reduziu 

significativamente a contaminação primária e secundária, nos 

moldes do experimento. O hidróxido de cálcio não apresentou 

esta capacidade nos períodos testados, de até 7 dias. 

Briseño et al.20, em 1992, realizaram estudo, in 

vitro, para avaliação da eficácia de duas soluções irrigadoras 

endodônticas, em diferentes concentrações e sob diferentes 

métodos de irrigação sobre E. coli e S. mutans. Os autores 

inocularam canais radiculares de dentes extraídos 

instrumentados. Após manter o inóculo por 30min no canal, 

estes foram irrigados, utilizando 5mL das soluções irrigadoras 



Revisão de Literatura 30 

de acordo com os seguintes métodos: 1-solução salina, 

manualmente; 2- solução de NaOCl a 1% com ultra-som; 3- 

solução de NaOCl  a 2% com ultra-som; 4- NaOCl a 1%, 

manualmente; 5- NaOCl a 2%, manualmente; 6- solução 

Fokalhydran I (diacetato de clorexidina), manualmente; 7- 

solução Fokalhydran II (diacetato de clorexidina), 

manualmente. Feita a irrigação, foram coletadas amostras e 

determinadas as unidades formadoras de colônia  (ufc). Foi 

realizada também avaliação de remoção das bactérias por 

MEV. Os resultados mostraram que as soluções de 

Fokalhydran tiveram menor efeito bactericida comparado à 

solução de NaOCl. Por sua vez, quando em concentração a 

1%/manual, a solução de NaOCl  obteve resultados similares a 

1%/ultra-som e 2%/manual a solução a 2% associada ao ultra-

som foi a menos eficaz. Os dados obtidos por MEV ou ufc 

foram similares. 

Vahdaty et al.165, em 1992, testaram a eficiência 

antimicrobiana das soluções de NaOCl e clorexidina nas 

concentrações de 0,2 e 2%, como controle foi utilizada 

solução salina. O estudo in vitro foi realizado em cilindros de 

dentina bovina inoculada com E. faecalis. Após irrigação, 

removeu-se dentina em diferentes profundidades, e estas 

raspas foram levadas para cultura. Os resultados mostraram 



Revisão de Literatura 31 

que as soluções foram igualmente eficientes, em 

concentrações semelhantes. Houve redução significativa nos 

primeiros 100µm de túbulos dentinários, porém, 50% das 

amostras permaneceram infectadas após a irrigação. 

Ohara et al.104, em 1993, avaliaram o efeito de 

soluções irrigadoras endodônticas sobre bactérias anaeróbias. 

Este estudo in vitro, manteve os microrganismos em contato 

com as soluções em teste, as quais foram incubadas para 

avaliação de crescimento. Os resultados mostraram que a 

clorexidina foi mais eficiente que o peróxido de hidrogênio, 

solução de NaOCl e EDTA. As soluções de hidróxido de cálcio 

e salina mostraram-se totalmente ineficazes. 

Jeansonne e White69, em 1994, compararam in 

vitro, a atividade antimicrobiana do gluconato de clorexidina a 

2% e da solução de NaOCl a 5,25%. Utilizaram dentes com 

necrose pulpar recém-extraídos, instrumentados e irrigados 

com as soluções propostas e solução salina. Mantidos após 

instrumentação em ambiente anaeróbio por 24 horas. Ambas 

as soluções avaliadas reduziram significantemente o número 

das unidades formadoras de colônia em relação à solução 

salina. Porém não houve diferença significante entre elas. 

Cymbler e Ardakani 32, em 1994, relataram caso 

clínico em que ocorreu injeção acidental de solução de 



Revisão de Literatura 32 

hipoclorito de sódio nos tecidos periapicais, apresentando 

como conseqüência uma reação severa com dor intensa, 

edema e parestesia. 

Em 1994, Georgopoulou et al.46, avaliaram a 

atividade antimicrobiana do ácido cítrico a 25% e da solução 

de hipoclorito de sódio a 2,5%, após períodos de 5, 15, 30, e 

60 minutos. Foram utilizadas espécies bacterianas (cocos 

gram-positivos e bacilos gram-negativos) isoladas de canais 

radiculares de dentes infectados de humanos. Os testes 

revelaram que o ácido cítrico apresentou efeito antimicrobiano 

sobre anaeróbios, principalmente os cocos, porém foi menos 

eficaz que a solução de hipoclorito de sódio. 

Em 1994, Pupo et al.118, avaliaram a capacidade 

antimicrobiana de irrigantes endodônticos. Os autores 

utilizaram cones de guta-percha contaminados com S. faecalis 

e S. albus, expostos aos irrigantes por 5 ou 10 minutos. Foram 

avaliadas as soluções de: NaOCl nas concentrações de 0,5, 1 

e 5%; ácido cítrico a 1,1 e 50%; EDTA; água de cal; tergentol 

e solução salina. A solução de NaOCl se mostrou eficaz em 

todas as concentrações. O ácido cítrico mostrou apenas ser 

bacteriostático na concentração de 50% por 10 min contra S. 

albus . A água de cal mostrou efeito bacteriostático em ambos 



Revisão de Literatura 33 

os períodos. As demais soluções não apresentaram atividade 

antimicrobiana. 

Yesilsoy et al.175, em 1995, estudaram o efeito 

antimicrobiano e tóxico de soluções irrigadoras endodônticas. 

Utilizaram soluções de hipoclorito de sódio nas concentrações 

de 0,5, 2,5 e 5,25% e gluconato de clorexidina a 0,12%. As 

soluções foram avaliadas contra 4 diferentes microrganismos 

e com relação a reação subcutânea em modelo animal. Os 

autores verificaram resultados semelhantes entre as soluções 

mais concentradas de NaOCl e a clorexidina. De acordo com 

as condições de estudo, demonstraram que a clorexidina tem 

potencial para uso endodôntico. 

Gomes e al.47, em 1996, avaliaram a microbiota 

endodôntica após procedimentos biomecânicos, realizando 

colheita microbiana em dentes imediatamente após preparo 

com irrigação com solução de hipoclorito de sódio a 2,5%; e 

após 7-10 dias. A incubação foi feita sob anaerobiose, e foram 

isoladas 51 espécies na primeira colheita. O numero de cepas 

variou de 1 a 9. Anaeróbios obrigatórios foram cultivados em 

73% dos canais e facultativos em 69%. Os anaeróbios 

prevalecentes foram Peptostreptococcus (45,2%) e Prevotella 

(38,1%). Na segunda amostragem, 40 espécies foram 

isoladas, com número de cepas variando de 1 a 8 por canal. 



Revisão de Literatura 34 

Os anaeróbios isolados foram somente em 52% dos canais, 

enquanto que os facultativos foram recuperados em 64,3%. 

Streptococcus millieri  (33,3%) e Peptostreptococcus micros 

(23,8%) foram as espécies predominantes na segunda 

colheita. A suscetibilidade dos microrganismos ao preparo 

biomecânico foi variável. Gêneros como Enteroccocus, 

Veillonela, Porphiromonas, Propionobacterium aumentara de 

numero na segunda colheita. Outros gêneros como 

Staphylococcus, Bacteróides, Fusobacterium mantiveram os 

mesmos níveis. Concluíram que o preparo biomecânico foi 

ineficiente na eliminação da infecção endodôntica e a 

susceptibilidade aos procedimentos foi variável. 

Estudando a microbiota de dentes humanos com 

reação periapical e câmara pulpar intacta, Sydney e 

Estrela154, em 1996, avaliaram sua suscetibilidade ao preparo 

biomecânico. Os autores encontraram uma redução qualitativa 

de aproximadamente 50% dos anaeróbios após 

instrumentação com solução salina. Quando a solução de 

hipoclorito de sódio a 1% foi empregada, esta redução foi mais 

significativa. Bactérias gram-positivas foram mais resistentes 

ao preparo biomecânico, com maior incidência de 

Peptostreptococcus prevoti  e Clostridium histolyticum . 



Revisão de Literatura 35 

Berutti et al.17, em 1997, estudaram, in vitro, a 

capacidade de penetração de irrigantes endodônticos em 

túbulos dentinários infectados por S. faecalis. Nos grupos 

experimentais utilizaram os seguintes regimes de irrigação: 

grupo A - solução de hipoclorito de sódio a 5%, seguido de 

EDTA a 10% e solução fisiológica; e no grupo B – solução de 

EDTA a 10%, agente tensoativo (Triton), hipoclorito de sódio a 

5% e irigação final com solução fisiológica. O exame 

histomicrobiológico (coloração de Brown e Brenn) revelou 

infecção residual desde as paredes do canal até  uma 

profundidade de 300µm no grupo A. No segundo grupo foi 

observada área livre de infecção até uma profundidade de 

130µm, e áreas de infecção variadas a partir deste limite. 

Algumas áreas no terço cervical e não foi encontrada 

presença de microrganismos nos túbulos dentinários. 

Sugeriram que o agente tensoativo melhora a capacidade de 

penetração das soluções irrigadoras utilizadas. 

Em 1997, Só et al.145, estudaram o tempo 

necessário para a dissolução tecidual por diversas marcas 

comerciais e diferentes concentrações de soluções de 

hipoclorito de sódio. Foram utilizadas línguas de hamsters, 

simulando o tecido pulpar. Os resultados mostraram que a 

capacidade de dissolução está diretamente relacionada à 



Revisão de Literatura 36 

concentração do cloro da solução. As diferentes marcas 

comerciais, com mesmas concentrações mostraram resultados 

diversos. Os autores atribuem estes resultados à fatores como 

condições de armazenagem e estabilidade da solução. 

White et al.170, em 1997, realizaram estudo in 

vitro, para verificar a substantividade da solução de 

clorexidina como solução irrigadora endodôntica. Realizaram a 

instrumentação de dentes extraídos, empregando soluções de 

clorexidina a 2 e 0,12%, sendo os canais radiculares 

preenchidos, em seguida, com água destilada. Foram 

realizadas cole tas do canal radicular, com cones de papel 

absorvente, em diferentes períodos de tempo (6, 12, 24, 48 e 

72hs) após o tratamento. A clorexidina a 2% apresentou 

atividade antimicrobiana em todos os períodos. A solução com  

0,12%  apresentou atividade em menor grau, sendo detectada 

nos períodos de 6 a 24hs. Concluíram que a clorexidina 

mantém a substantividade, ou efeito residual, quando utilizada 

em irrigação endodôntica. 

Siqueira Jr et al.139, avaliaram em 1997 a 

eficiência da solução de hipoclorito de sódio a 4% na 

eliminação de E. faecalis inoculados no canal radicular. Os 

autores utilizaram os seguintes métodos de irrigação: 

Irrigação com 2mL da solução, agitado com lima manual e 



Revisão de Literatura 37 

mantida por 5min; irrigação com 2mL da solução e agitação 

por meio de ultra-som por 1min; irrigação com a solução 

alternadamente com solução de peróxido de hidrogênio a 3%; 

e grupo controle irrigado com solução salina. Após colheita e 

incubação não foram encontradas diferenças significantes 

entre os grupos experimentais, que foram superiores ao grupo 

controle. Demonstraram a importância da ação antimicrobiana 

da solução de hipoclorito de sódio a 4%. 

Sjögren et al.144, em 1997, realizaram estudo in 

vivo, avaliando o prognóstico de dentes com periodontite 

apical tratados em sessão única. Foram tratados 

endodonticamente 55 dentes com condição de necrose pulpar 

e reação periapical. Após o preparo biomecânico, foram 

realizadas colheitas microbianas com técnicas anaeróbias. 

Poucas bactérias foram detectadas, apenas 22 dos 55 casos 

tratados. Reparo apical foi proservado por 5 anos, estes 

ocorreram completamente em 94% dos casos de cultura 

negativa. Nos casos de cultura positiva o índice de sucesso foi 

de 68%. Demonstram a importância da eliminação dos 

microrganismos do sistema de canais radiculares, que não 

pode ser alcançada somente com instrumentação, irrigação 

com solução de hipoclorito de sódio e obturação; não é 

possível erradicar a infecção do sistema de canais radiculares 



Revisão de Literatura 38 

sem a utilização de um curativo de demora com ação 

antimicrobiana. 

Kuruvilla e Kamath74, em 1998, avaliaram, in 

vivo, a atividade antimicrobiana das soluções de NaOCl a 

2,5%, clorexidina a 0,2% e a associação de ambas, como 

irrigante endodôntico. 40 casos clínicos de tratamento de 

dentes anteriores com necrose pulpar e reação periapical 

visível radiograficamente foram selecionados. Estes foram 

irrigados com as soluções de NaOCl, clorexidina, 

hipoclorito+clorexidina e salina. Foram feitas coletas 

microbianas antes e após a irrigação. Mostraram que a 

combinação dos agentes irrigadores resultou em menor 

quantidade de culturas positivas após irrigação. Os autores 

acreditam na possibilidade da formação de cloridrato de 

clorexidina, aumentando seu potencial ionizante. 

Lindskog et al.92, em 1998, propuseram um 

modelo animal para investigação do efeito terapêutico da 

clorexidina sobre a reabsorção radicular externa. Utilizando 

incisivos reimplantados intencionalmente de macacos, 

demonstraram que, com o uso de um curativo de demora à 

base de gel de clorexidina houve diminuição da inflamação e 

reabsorção nos dentes tratados. 



Revisão de Literatura 39 

Heling e Chandler60, em 1998, avaliaram a 

eficácia das soluções de NaOCl a 1%, EDTA a 17%, 

clorexidina e peróxido de hidrogênio em diferentes 

concentrações, em seqüência ou em combinação, como 

irrigantes endodônticos. Raízes de incisivos de bovinos 

infectados com E. faecalis, foram expostos às soluções 

irrigadoras. As amostras foram incubadas e analisadas por 

espectrofotometria. As soluções de clorexidina e NaOCl 

apresentaram efeito antimicrobiano semelhante. As soluções 

de clorexidina e peróxido de hidrogênio apresentaram efeitos 

sinérgicos, em combinações específicas. Ainda, vislumbraram 

a possibilidade da utilização destes dados na erradicação de 

infecções endodônticas persistentes por E. faecalis.  

Siqueira Jr et al.136, em 1998, avaliaram, in vitro, 

o efeito antimicrobiano de 6 soluções irrigadoras contra 4 

cepas de anaeróbios gram-negativos e 4 cepas de anaeróbios 

facultativos, em teste de difusão em ágar. Com base nos 

resultados obtidos, ordenaram as soluções de acordo com sua 

capacidade antimicrobiana: solução de NaOCl a 4%; solução 

de NaOCl a 2,5%; clorexidina a 2%; clorexidina a 0,2%, EDTA 

e ácido cítrico; e solução de NaOCl a 0,5%. 

Segura et al.125, em 1999, compararam em 

cultura de células, o efeito de soluções irrigadoras 



Revisão de Literatura 40 

endodônticas sobre a adesão de macrófagos peritoniais de 

ratos. Mostraram que ambas as substâncias avaliadas 

inibiram, in vitro, a capacidade de adesão dos macrófagos em 

superfícies de plástico. O digluconato de clorexidina a 0,12% 

foi menos potente que a solução de NaOCl a 2,5%. 

Considerando-se que a adesão dos macrófagos é o primeiro 

passo na reação inflamatória, no caso de extravasamento das 

soluções irrigadoras para o ligamento periodontal, a sua 

inibição por estes agentes estudados pode levar à alteração 

da resposta inflamatória e de reparo na região periapical. 

Para avaliar a eficiência da desinfecção de 

túbulos dentinários, in vitro, de alguns irrigantes 

endodônticos, Buck et al.21 em 1999, testaram as soluções de 

NaOCl a 0,5%; clorexidina a 0,12%; RC-prep; Betadine iodine, 

e água esterilizada. Utilizaram dentina humana inoculada com 

M. luteus ou B. megaterium . Os resultados mostraram que os 

irrigantes testados alcançaram os túbulos dentinários em 

profundidade, numa concentração suficiente para eliminar os 

microrganismos, porém clinicamente, a eficiência do irrigante 

será dependente do tipo de microrganismo encontrado no 

túbulo. 

Em 1999, Siqueira Jr et al.137, estudaram a ação 

antimicrobiana das soluções de hipoclorito de sódio a 1 e 



Revisão de Literatura 41 

5,25% sobre as seguintes bactérias anaeróbias: P. 

endodontalis, P. gingivalis, P. intermédia e P. nigrescens, 

utilizando método de difusão em agar. Mostraram que as duas 

concentrações apresentaram ação satisfatória. A concentração 

de 5,25% proporcionou os maiores halos de inibição do 

crescimento bacteriano. 

Sen et al.126, em 1999, investigaram, in vitro, a 

atividade de soluções de NaOCl e clorexidina sobre dentina 

inoculada com Candida albicans. Os canais com e sem 

camada residual, foram inoculados e incubados por 10 dias. 

Depois foram tratados com as soluções de NaOCl a 1 e 5% e 

clorexidina a 0,12%, durante 1min, 5min, 30min e 1h, e então 

incubados novamente. Mostraram na presença da camada 

residual, a ocorrência de atividade anti -fúngica, após 1h em 

todos os grupos. No caso de ausência desta camada, somente 

a solução de NaOCl a 5% mostrou alguma atividade no 

período de 30 min. Concluíram que as condutas de ação anti -

fúngica, nos tratamentos endodônticos, principalmente em 

pacientes predispostos a candidíase oral, devem ser 

reavaliadas. 

Leonardo et al.89, em 1999, realizaram estudo in 

vivo, da atividade antimicrobiana da solução de clorexidina 

como solução irrigadora endodôntica. Realizaram coletas 



Revisão de Literatura 42 

microbianas em dentes de humanos com necrose pulpar e 

lesão periapical instrumentados manualmente e irrigados com 

solução de clorexidina a 2%. As coletas foram realizadas 

imediatamente após a instrumentação e 48hs após, sendo os 

canais radiculares mantidos vazios e com selamento 

coronário. Mostraram que o tratamento obteve 100% de 

redução de S. mutans e 77,78% de eficiência contra 

microrganismos anaeróbios na segunda coleta. Ainda, 

demonstraram, in vitro, a atividade antimicrobiana residual da 

clorexidina após um período de 48hs. 

Aibel e Stevens2, em 1999, estudaram em cultura 

de células o efeito da clorexidina na produção de IL -6 por 

macrófagos de camundongos. Realizaram medidas pelo ELISA 

da interleucina produzida por células estimuladas por LPS não 

tratado e por LPS tratado com clorexidina. Houve diminuição 

da produção de IL -6 nos grupos tratados com a clorexidina, 

porém o tratamento não causou a inativação do LPS. 

Jung et al.70, em 1999. conduziram estudo para  

avaliação da eficiência da clorexidina na prevenção de 

reinfecção coronária dos tratamentos endodônticos. Foram 

utilizados canais de dentes bovinos, instrumentados, 

autoclavados e imersos em clorexidina, solução de NaOCl e 

solução salina, por 5min, antes de serem obturados. As raízes 



Revisão de Literatura 43 

foram montadas de tal forma que na porção coronária pudesse 

ser colocado o inóculo e numa câmara apical foi posta um 

meio de cultura. A turbidez do meio foi observada em 80% dos 

espécimes tratados com solução salina e 70% com solução de 

NaOCl após 24hs. O tratamento com clorexidina previniu a 

turbidez em 80% dos espécimes, demonstrando maior 

eficiência na prevenção da infiltração bacteriana. 

Santa Cecília122, em 1999, estudou as 

propriedades físico-químicas e biológicas de uma solução 

irrigadora experimental (CLOR-IN, solução clorada com 1,5% 

de cloro). Foram realizados testes comparando a solução 

experimental com a solução de hipoclorito de sódio a 1% e 

solução salina. Os resultados do teste edemogênico 

mostraram que a solução de hipoclorito de sódio a 1% foi 

menos irritante. No teste de contato em olho de cobaia, os 

resultados demonstraram a seguinte ordem decrescente de 

irritabilidade: solução de hipoclorito de sódio a 1%, solução 

experimental e solução salina. Na avaliação da ação 

antimicrobiana a solução experimental foi mais eficaz. Quanto 

ao teor de cloro, a solução experimental mostrou estabilidade 

de cloro ativo até 120 horas do preparo da solução. Quanto a 

capacidade de dissolução de tecido orgânico, a solução 

experimental não mostrou capacidade dissolvente. 



Revisão de Literatura 44 

D’Arcangelo et al.33, em 1999, realizaram estudo 

in vitro, avaliando o efeito antimicrobiano de diferentes 

soluções irrigadoras. Foram utilizadas cepas padrão de 

anaeróbios facultativos, microaerófilos e anaeróbios estritos, 

bactérias freqüentemente encontradas nas infecções 

endodônticas. As seguintes soluções irrigadoras foram 

avaliadas: Cetrimide a 0,2% + clorexidina a 0,2%, cetrimide a 

0,2% + clorexidina a 1%, cetrimide a 0,2% +clorexidina a 

0,5%, cetrimide a 0,2% + clorexidina a 0,4%, cetrimide a 0,2% 

+ clorexidina a 0,3%, clorexidina a 0,2% + cetrimide a 1%, 

clorexidina a 0,2% + cetrimide a 0,5%, clorexidina a 0,2% + 

cetrimide a 0,4%, clorexidina a 0,2% + cetrimide a 0,3%, 

NaOCl a 5, 3, 1 e 0,5%. Os períodos de avaliação foram de 

10, 20 e 30min. Mostraram que todos os agentes irrigantes 

testados apresentaram forte efe ito bactericida, sem apresentar 

diferenças entre eles. Concluíram que pelo poder bactericida a 

associação clorexidina + cetrimide pode ser utilizada 

satisfatoriamente como solução irrigadora endodôntica. 

Ayhan et al.8 em 1999 verificaram o efeito 

antimicrobiano de seis irrigantes endodônticos contra 

diferentes microrganismos. Foram utilizadas cepas de 

Staphyloccocus aureus, Enteroccocus faecalis, Streptoccocus 

salivarius, S. pyogenes, Escherichia coli e Candida albicans. 



Revisão de Literatura 45 

Discos de papel com 6mm de diâmetro, embebidos na solução 

irrigadora foram colocadas sobre uma placa de petri semeada 

com os microrganismos. Após incubação as zonas de inibição 

foram medidas e registradas. Os resultados mostraram que a 

solução de NaOCl a 5,25% obteve os maiores halos de 

inibição, mostrando maior atividade antimicrobiana, a mesma 

solução em baixa concentração (0,5%) mostrou significante 

redução desta atividade. Paramonoclorofenol mostrou maior 

halo de inibição quando comparado ao álcool a 21%, NaOCl a 

0,5% e clorexidina a 2%. A solução salina mostrou não ter 

atividade antimicrobiana. 

Para avaliar a atividade antimicrobiana residual 

de diferentes regimes de irrigação endodôntica, White et al.171 

em 1999, utilizaram dentes extraídos de humanos 

biomecanizados com solução de hipoclorito de sódio, 

clorexidina e associação de hipoclorito de sódio com 

clorexidina. Após instrumentação os canais foram secos com 

pontas de papel absorvente e preenchidos com solução salina 

nos períodos de 6, 12, 24, 48 e 72 horas. As pontas de papel 

contendo o fluido do canal foram colocadas em placas 

inoculadas com S. mutans para avaliação antimicrobiana. 

Mostraram atividade antimicrobiana em todos os períodos, não 



Revisão de Literatura 46 

existindo diferença estatisticamente significante entre os 

grupos testados. 

Em estudo, in vitro, Komorowsky et al.73, em 

2000, avaliaram o efeito residual ou substantividade da 

clorexidina por um período de 21 dias. Utilizaram 60 

fragmentos padronizados de dentina bovina, livres de smear 

layer, divididas em três grupos experimentais. Os espécimes 

foram imersos nas seguintes soluções: salina esterilizada, 

NaOCl a 2,5%, e clorexidina a 0,2%. Metade dos espécimes 

foi tratada por 5 min e outra metade por 7 dias. Os fragmentos 

tratados foram incubados em meio de cultura contendo E. 

faecalis. Após 21 dias a superfície dentinária foi raspada com 

uma broca esterilizada e as raspas levadas a um meio de 

cultura. Mostraram que os espécimes tratados com clorexidina 

por um período de 7 dias, tiveram menor colonização pelo E. 

faecalis que os outros grupos, demonstrando ser este, um 

potencial medicamento intra-canal, se utilizado por um período 

de 7 dias. 

Numa revisão de literatura e relato de casos 

clínicos, Hulsmann e Hahn67 descrevem a importância da 

solução de hipoclorito de sódio como irrigante endodôntico, 

assim como os riscos de possíveis acidentes com seu uso. Os 

autores reforçam a importância na técnica de irrigação e 



Revisão de Literatura 47 

indicação da concentração a ser utilizada. Em casos de risco 

ou após acidentes desta natureza, soluções não irritantes 

como solução salina ou clorexidina devem ser recomendadas. 

Shuping et al.130, em 2000, avaliaram a redução 

de bactérias dos canais radiculares pela instrumentação 

rotatória e irrigação com solução de hipoclorito de sódio a 

1,25%. Selecionados canais com necrose pulpar e periodontite 

apical crônica. Foram realizadas culturas anaeróbias antes, 

durante e após o preparo biomecânico, e ainda foi avaliado 

após a utilização de curativo de demora à base de hidróxido 

de cálcio. As bactérias foram quantificadas e valores do 

logaritmo decimal utilizados para a análise estatística. Antes 

do preparo, foi confirmada a infecção endodôntica. Após a 

utilização da solução de hipoclorito de sódio reduziu 

significantemente a quantidade de bactérias nos canais 

radiculares, quando comparado com a irrigação com solução 

salina. A irrigação com a solução de NaOCl produziu 61,9% de 

culturas negativas, por outro lado a utilização de curativo de 

demora à base de hidróxido de cálcio, por uma semana, 

produziu cultura negativa em 92,9% dos canais, demonstrando 

redução significante. Demonstraram que o preparo 

biomecânico com instrumentação rotatória e solução de NaOCl 

é importante para a redução da infecção endodôntica, porém o 



Revisão de Literatura 48 

uso do curativo de demora com hidróxido de cálcio 

complementa esta ação. 

Siqueira Jr et al.138 em 2000, avaliaram, in vitro, 

a redução da população bacteriana após preparo biomecânico 

utilizando diferentes concentrações de solução de hipoclorito 

de sódio. Utilizaram raízes de dentes extraídos de humanos, 

inoculadas com Enteroccocus faecalis. Durante a 

instrumentação endodôntica utilizaram como irrigante as 

soluções de hipoclorito de sódio nas concentrações de 1, 2,5 e 

5,25%, no grupo controle a irrigação foi feita com solução 

salina. Amostras colhidas antes e após a instrumentação, 

foram semeadas em ágar Mitis salivarius e incubadas, sendo 

as unidades formadoras de colônia registradas. Ainda, 

avaliaram o efeito de inibição das soluções no teste de difusão 

em agar. Mostraram efeito na redução no número de bactérias, 

sem diferença significante entre as diferentes concentrações. 

As soluções de hipoclorito de sódio foram mais ativas que a 

solução salina. As três concentrações da solução de 

hipoclorito de sódio apresentaram grandes halos de inibição 

contra o E. faecalis. Os autores sugerem que as trocas 

regulares e o maior volume de solução podem manter o efeito 

antimicrobiano, compensando a maior concentração. 



Revisão de Literatura 49 

Haapasalo et al.54 em 2000, apresentaram 

modelo experimental in vitro para testar a possível inativação 

de medicamentos endodônticos pela dentina. Foram estudadas 

as soluções saturadas de hidróxido de cálcio, hipoclorito de 

sódio a 1%, acetato de clorexidina a 0,5 e 0,05%, iodeto de 

potássio a 2/4% e 0,2/0,4%. Pó de dentina esterilizado foi 

adicionado aos medicamentos e o E. faecalis foi o 

microrganismo teste. Mostraram que o pó de dentina inibiu o 

efeito de todos os medicamentos testados. A eficácia 

antimicrobiana da solução de hidróxido de cálcio foi 

totalmente abolida com a presença do pó de dentina, 

similarmente o iodeto de potássio perdeu seu efeito. A 

clorexidina a 0,05% e o NaOCl a 1% tiveram sua ação 

reduzida porém não eliminada. 

Para avaliar a substantividade de diferentes 

medicamentos endodônticos, Lenet et al.77 em 2000, 

realizaram estudo in vitro utilizando canais radiculares de 

dentes de bovinos. A dentina foi exposta a solução de 

clorexidina num veículo de liberação controlada (contendo 

25% de clorexidina) e em forma de gel; utilizaram, ainda, a 

pasta à base de hidróxido de cálcio e soro fisiológico. Após 

contato por 7 dias os canais foram inoculados com E. faecalis 

durante 21 dias. Decorrido este período amostras de dentina 



Revisão de Literatura 50 

em diferentes profundidades foram obtidas e incubadas. A 

densidade óptica das culturas foi medida. O soro fisiológico 

apresentou a maior densidade óptica, não mostrando atividade 

antimicrobiana. A clorexidina em dispositivo de liberação 

controlada mostrou menor densidade óptica que a pasta de 

hidróxido de cálcio até a 0,2mm de profundidade de dentina. 

As amostras com clorexidina gel mostraram os melhores 

resultados. Os autores sugeriram que a aplicação deste por 7 

dias em dentina bovina proporciona atividade antimicrobiana 

residual por pelo menos 21 dias. 

Em 2000, Mehra et. al.97, relataram a formação 

de hematoma facial durante tratamento endodôntico após a 

utilização da solução de hipoclorito de sódio. Apesar de ser 

uma solução de ampla utilização deve-se conhecer e prevenir 

os acidentes, devido ao seu potencial citotóxico e de 

destruição tecidual, que ainda hoje ocorrem quando esta 

solução não é mantida nos limites do sistema de canais 

radiculares. 

Marley et al.95 em 2001 avaliaram, in vitro, o 

efeito da irrigação de canais radiculares com solução de 

clorexidina no selamento apical de obturações endodônticas. 

Utilizaram grupos experimentais com 10 dentes extraídos 

cada. Os canais foram irrigados durante o preparo 



Revisão de Literatura 51 

biomecânico com as soluções de clorexidina a 0,12%; 

hipoclorito de sódio a 5,25% ou solução salina. As obturações 

foram realizadas com três diferentes cimentos endodônticos, 

Roth’s 811, AH 26 ou Sealapex, pela técnica da condensação 

lateral ativa. A infiltração foi medida pelo método de filtração 

de fluido após períodos de 90 e 180 dias. Mostraram não 

haver diferença significante entre os grupos experimentais em 

selamento apical nos dois períodos de observação. 

Em 2001, Lima et al.90 estudaram a ação de 

medicamentos endodônticos sobre o biofilme de E. faecalis. 

Utilizaram clorexidina gel a 2%, clorexidina+detergente, 

clindamicina a 2%, clindamicina+detergente, clorexidina+óxido 

de zinco+detergente, clindamicina+metronidazol a 

10%+detergente, e um grupo controle. Obtiveram biofilmes, 

com 1 dia e 3 dias, de culturas dos microrganismos sobre 

membranas de celulose. As membranas então foram cobertas 

com 1ml de cada medicamento testado e incubada por 1 dia a 

37°C, após este período, cada membrana foi levada para 

neutralização do medicamento com solução salina e 

centrifugada. A suspensão foi então semeada em placas 

contendo ágar Mitis salivarius. As unidades formadoras de 

colônia foram contadas após 48 horas. Os resultados 

mostraram que apenas os medicamentos contendo clorexidina 



Revisão de Literatura 52 

a 2% foram capazes de inibir o crescimento do biofilme de E. 

faecalis de 1 ou 3 dias. 

No ano de 2001, Ferraz et al.41, realizaram 

estudo para avaliar as seguintes substâncias irrigadoras: 

solução de clorexidina a 2%, gel de clorexidina a 2% e solução 

de NaOCl a 0,5; 1; 2,5; 4 e 5,25%. Os autores avaliaram a 

ação antimicrobiana das soluções pelo método de difusão em 

ágar, capacidade de remoção do smear layer por MEV e 

eliminação de E. faecalis, in vitro. Concluíram que: A 

clorexidina em solução ou gel apresentou os maiores halos de 

inibição contra os microrganismos testados. O gel de 

clorexidina promoveu maior remoção de smear layer que a 

solução de clorexidina e a solução de hipoclorito de sódio a 

5,25%. Com o gel de clorexidina e a solução de hipoclorito de 

sódio a 5,25% observaram culturas negativas mais 

rapidamente que com os demais agentes irrigadores, quando 

em contato com o E faecalis. 

Para comparar o efeito do iodeto de potássio, 

hidróxido de cálcio e clorexidina a 2% contra A. israelii, 

Basson e Tait11, conduziram estudo in vitro, em 2001. 

Utilizaram dentes extraídos de humanos inoculados com o 

microrganismo, e mantidos em contato com os medicamentos 

por períodos de 3, 7 e 60 dias. Mostraram que a clorexidina foi 



Revisão de Literatura 53 

melhor em todos períodos, eliminando os microrganismos. O 

iodeto de potássio manteve viabilidade em 25% e o hidróxido 

de cálcio viabilidade em 50% dos casos. 

Hales et al.57, em 2001, apresentaram um 

protocolo para tratamento e manejo de acidente com solução 

de hipoclorito de sódio durante o tratamento endodôntico, 

reforçando a necessidade de conhecimento e prevenção com o 

uso deste irrigante. 

Gomes et al.48, em 2001, avaliaram in vitro a 

atividade antimicrobiana de diferentes concentrações da 

solução de hipoclorito de sódio (0,5, 1, 2,5 e 5,25%) e 

clorexidina (forma gel e líquido; nas concentrações de 0,2, 1 e 

2%) contra E. faecalis. Foram utilizadas 2ml de suspensão de 

cultura dos microrganismos em solução salina misturadas com 

1ml das soluções a serem avaliadas nos seguintes intervalos 

de tempo: 10, 30 e 45 segundos; 1, 3, 5, 10, 20, e 30 minutos; 

1 e 2horas. Decorridos os períodos experimentais os tubos 

foram incubados durante 7 dias à 37°C. Os tubos que 

apresentaram turbidez após a incubação foram considerados 

como crescimento positivo. Mostraram que a clorexidina na 

forma líquida nas concentrações de 0,2%, 1% e 2% e a 

solução de NaOCl a 5,25% foram os irrigantes mais eficientes. 

Entretanto o tempo que a clorexidina a 0,2% e a 2% na forma 



Revisão de Literatura 54 

gel necessitaram de apenas 30seg e 1min respectivamente 

para produzirem culturas negativas. Concluíram que todos os 

irrigantes testados apresentam atividade antimicrobiana, 

sendo esta dependente da concentração e tipo utilizado. 

Nery102, em 2001, avaliou a influência dos 

irrigantes endodônticos no reparo de lesões apicais de dentes 

de cães tratados endodonticamente. Foram determinados os 

grupos experimentais, irrigando com as diferentes soluções: 

solução de NaOCl a 1 e 2,5%; soro fisiológico; e endo-PTC+ 

NaOCl a 1%. Todos os canais foram obturados com guta-

percha e cimento Sealapex na mesma sessão. Mostrou 

melhores condições de reparo nos grupos que utilizaram as 

soluções de NaOCl a 1% e 2,5%, com resultados semelhantes 

entre si. No grupo que empregou o endo-PTC, foi observado 

maior quantidade de detritos, apresentando os piores 

resultados de reparo apical e periapical. 

Em 2001, Estrela et al.35, realizaram estudo in 

vitro para avaliar a influência de diferentes veículos dos 

curativos de demora endodônticos à base de hidróxido de 

cálcio, na sua ação antimicrobiana. Utilizaram pontas de papel 

absorvente que foram imersas por 3min em várias suspensões 

microbianas. As pontas de papel foram então colocadas em 

placas de Petri e cobertas com os curativos de demora com os 



Revisão de Literatura 55 

seguintes veículos: solução salina; PMCC; clorexidina a 1%; 

lauril sulfato sódio a 3%; e Otosporin. Após períodos de 1min, 

48h, 72h e 7 dias, os cones de papel foram incubados. 

Apresentaram atividade antimicrobiana após 48h para as 

culturas de S. mutans, E. faecalis, S. aureus, P. aeruginosa, 

B. subtilis, C. albicans e cultura mista, independente do 

veículo utilizado. 

Em 2001, Portenier et al.117 examinaram e 

compararam a inibição do efeito antimicrobiano de solução 

saturada de hidróxido de cálcio, acetato de clorexidina, e 

iodeto de potássio por pó de dentina, hidroxiapatita, e 

albumina bovina. Utilizaram metodologia semelhante a de 

Haapasalo et al. (2001), em que uma suspensão de cultura de 

E. faecalis foi exposta as soluções experimentais durante 1 

hora sob incubação. Mostraram a inativação total da solução 

de hidróxido de cálcio. A clorexidina (a 0,05%) foi fortemente 

inibida pela albumina, porém menos pela dentina e quase 

nenhuma inibição pela hidroxiapatita. O iodeto de potássio 

apresentou uma redução de capacidade antimicrobiana 

semelhante ao da clorexidina. Concluíram que a inibição dos 

antimicrobianos testados ocorreram por diferentes 

mecanismos, e diferentes componentes da dentina podem 

causar esta inativação. A solução saturada de hidróxido de 



Revisão de Literatura 56 

cálcio é particularmente sensível a ação dos componentes 

orgânicos e inorgânicos da dentina. 

Leonardo et al.87, em 2001, avaliaram in vitro a 

atividade antimicrobiana de alguns irrigantes endodônticos 

contra cocos gram-posit ivos (M. luteus, S. aureus, E. faecalis, 

S. epidemitis, S. mutans e S. sobrinus); bacilos gram-

negativos (E. coli e P. aeruginosa) e C albicans. Utilizaram a 

técnica de difusão em camada dupla. Sobre as placas de petri 

semeadas foi colocado um disco de papel absorvente (6mm) 

em pontos eqüidistantes embebidos em uma das soluções 

(detergente de mamona, clorexidina a 2% e NaOCl a 0,5%), as 

placas foram mantidas por duas horas para pré-difusão e 

incubadas por 24 horas a 37°C. Após a incubação os meios 

foram otimizados com cloreto de trifeniltetrazolio a 0,05%. Os 

halos de inibição foram então medidos. Mostraram que a 

solução de clorexidina inibiu todos os microrganismos; o 

detergente de mamona inibiu os gram-positivos e a solução de 

hipoclorito de sódio a 0,5% foi eficaz apenas contra o 

S.aureus. 

Spratt et al.149, em 2001, avaliaram, in vitro, a 

eficiência antimicrobiana de alguns irrigantes endodônticos 

contra biofilmes de microrganismos isolados de infecções 

endodônticas.  Os biofilmes de P. intermédia, P. micros, S. 



Revisão de Literatura 57 

intermedius, F. nucleatum e E. faecalis foram gerados sobres 

discos de filtro.  Utilizaram prata coloidal a 5ppm, solução de 

hipoclorito de sódio a 2,25%, solução de clorexidina a 0,2%, 

povidine iodetado a 10%(PVPI) ou PBS (controle) sobre os 

biofilmes em tempos de 15min ou 1h. O efeito antimicrobiano 

foi avaliado após centrifugação, diluição semeadura, 

incubação e contagem das ufc. Mostraram que as bactérias 

foram susceptíveis, em diferentes graus, dependendo do 

irrigante avaliado e do tempo de exposição.  A prata coloidal 

foi ineficiente, enquanto que a solução de NaOCl foram mais 

eficiente seguido pelo PVPI  e a clorexidina. Apesar deste 

resultado, pela revisão de estudos realizada, consideraram 

que as soluções de NaOCl e clorexidina possuem atividade 

antimicrobiana adequada para serem utilizados como irrigante 

endodôntico. A contradição é atribuída, no caso das infecções 

polimicrobianas, pela quebra de possíveis interações 

benéficas entre os microrganismos, complementando a 

atividade antimicrobiana sobre espécies individualmente. 

Em 2001, Buck et al.22 testaram a eficácia de 

irrigantes endodônticos na eliminação de bactérias que 

colonizam túbulos dentinários de dentes humanos. Utilizaram 

raízes de dentes extraídos de humanos esterilizados e 

inoculados com cultura de E. faecalis. Os canais então foram 



Revisão de Literatura 58 

expostos durante 1 min às seguintes soluções irrigadoras: 

hipoclorito de sódio a 0,525%; EDTA a 0,2% e clorexidina a 

0,12%, a água destilada foi utilizada como grupo controle. 

Foram cultivadas raspas de dentina obtidas de dife rentes 

profundidades da dentina nos terços apical médio e cervical 

das raízes. A solução de hipoclorito de sódio apresentou os 

melhores resultados, ao passo que as soluções de EDTA e 

clorexidina apresentaram resultados melhores que a água 

destilada. Observaram maior quantidade de bactérias 

remanescente na dentina mais distante da polpa, estes 

achados foram feitos em todos os terços do canal. 

Knight et al.72, em 2001, relata caso de 

anafilaxia em paciente após introdução de cateter na uretra. 

Em teste dérmico subseqüente a paciente apresentou 

resultado negativo ao látex e lignocaina a 2%, porém positivo 

à clorexidina a 1% (substâncias presentes no cateter). Relatos 

como este ainda são em pequeno número, mas a incidência 

vem crescendo. A clorexidina deve ser reconhecida como 

potencial causa de anafilaxia. 

Lauerma75, em 2001, relatou caso clínico de 

paciente que apresentou reação de hipersensibilidade 

imediata e tardia após uso de anti -séptico sobre a pele, a 

base de digluconato de clorexidina. Considera que pelo seu 



Revisão de Literatura 59 

uso difundido, a clorexidina apresenta casos relativamente 

raros de manifestações alérgicas. Relatos de desconforto do 

paciente frente ao uso de substancias que contenham 

clorexidina devem ter seus riscos encarados seriamente. 

Buck et al.23, em 2001, avaliaram in vitro 

capacidade de diferentes irrigantes endodônticos e do 

hidróxido de cálcio na detoxificação de LPS bacteriano. O LPS 

foi misturado com uma das soluções irrigadoras experimentais 

durante 30 minutos. Com o hidróxido de cálcio o contato foi 

por 1, 2 ou 5 dias. A inativação do LPS foi determinada pela 

quantificação de ácidos graxos livres por técnica de 

espectrofotometria de massa/cromatrografia gasosas com 

monitoramento seletivo de íons. Os resultados mostraram 

pequena quebra de LPS quando em contato com água, 

solução de clorexidina a 0,12%, solução de hipoclorito de 

sódio a 2,6%, etanol a 95% e solução de 

clorexidina+hipoclorito de sódio. O contato prolongado com o 

hidróxido de cálcio e com uma associação alcalina de 

etanol+clorexidina+hipoclorito de sódio durante 10 minutos 

detoxificaram a molécula de LPS por hidrólise. 

Chang et al.28 em 2001, avaliaram em cultura de 

células do ligamento periodontal de humano o efeito citotóxico 

das soluções irrigadoras de NaOCl e clorexidina. O estudo 



Revisão de Literatura 60 

sugere que ambos os irrigantes produzem dano aos tecidos 

vitais. A relevância clínica, contudo, deve ser avaliada de 

acordo com outras variáveis como concentração das soluções, 

tempo e área de exposição. 

Para testar a eficácia de medicamentos e 

irrigantes endodônticos contra Candida albicans, Ferguson et 

al.40 (2002), efetuaram estudo in vitro, em 2001. Avaliaram a 

suscetibilidade da cepa padrão ATTC64342 às solução de 

hipoclorito de sódio, peróxido de hidrogênio, digluconato de 

clorexidina, e solução saturada de hidróxido de cálcio 

determinando a concentração inibitória mínima (CIM). 

Mostraram que a concentração inibitória mínima da solução de 

hipoclorito de sódio foi <10µg/mL, do peróxido de hidrogênio 

foi de 234µg/mL e da clorexidina <0,65µg/mL. A solução 

saturada de hidróxido de cálcio não apresentou atividade 

inibitória. As cepas foram colocadas em contato direto com 

pasta de hidróxido de cálcio e para-monoclorofenol canforado, 

comumente utilizados como medicamentos endodônticos. 

Ambos foram agentes antifúngicos eficazes. 

Em 2002, Sukawat e Sriswan150 realizaram 

estudo para testar a eficácia antimicrobiana de diferentes 

pastas de hidróxido de cálcio utilizando dentina humana 

infectada com E. faecalis como modelo experimental in vitro. 



Revisão de Literatura 61 

Raízes de dentes extraídos de humanos após inoculação 

foram preenchidas com as três pastas experimentais, à base 

de hidróxido de cálcio P.A., acrescido de: água destilada, 

solução de clorexidina a 0,2% ou para-monoclorofenol 

canforado(PMCC). Após período de 7 dias a porção de dentina 

interna de cada canal foi removida com broca e incubada em 

meio de cultura. A quantificação das bactérias foi feita por 

espectrofotometria do meio de cultura pós 24 horas. 

Mostraram que o melhor resultado foi obtido com a pasta 

contendo PMCC. As pastas, aquosa e com clorexidina, se 

mostraram ineficientes contra este tipo de microrganismo. 

Em 2002, Almyroudi et al.5 , realizaram estudo in 

vitro para avaliar a eficiência de vários medicamentos 

endodônticos. Foi utilizado modelo experimental com canais 

radiculares de dentes extraídos de humanos biomecanizados e 

contaminados com E. faecalis. Nestes canais foram colocados 

solução salina, pasta aquosa de hidróxido de cálcio, gel de 

clorexidina a 1%, pasta com gel de clorexidina+hidróxido de 

cálcio e Periochip® com uma gota de solução salina. As raízes 

foram incubadas a 37°C e avaliadas em períodos de 72hs, 8 

dias e 14 dias. Os resultados mostraram ser satisfatórios para 

a pasta de hidróxido de cálcio nos períodos de 3 e 8 dias, 

sendo no período de 14 dias ineficaz. As diferentes 



Revisão de Literatura 62 

formulações com clorexidina mostraram se eficazes em todos 

os períodos. O gel de clorexidina e a pasta com 

clorexidina+hidróxido de cálcio obteve um melhor resultado 

que o Periochip®, porém sem diferença significante. 

Siqueira et al.141, em 2002, avaliaram a eficácia 

de diferentes técnicas de instrumentação e regimes de 

irrigação endodôntica na redução de população bacteriana. Os 

autores utilizaram canais radiculares inoculados com E. 

faecalis, divididos nos seguintes grupos experimentais: 

técnica de rotação alternada (TRA), instrumentos manuais de 

NiTi e irrigação com solução de NaOCl a 2,5%; TRA e 

irrigação com solução de NaOCl a 2,5% combinada com ácido 

cítrico; TRA e irrigação combinada com solução de NaOCl a 

2,5% e solução de clorexidina a 2%; e instrumentos rotatórios 

“Great tapers” e irrigação com solução de NaOCl a 2,5%. 

Como grupo controle foi utilizada instrumentação por TRA e 

solução salina como irrigante. O conteúdo dos canais após o 

preparo foram semeados em agar Mitis salivari us  e incubados 

para verificação de unidades formadoras de colônia. 

Mostraram não haver diferença entre os grupos experimentais, 

apesar de todos estes terem resultados melhores que o grupo 

controle. 



Revisão de Literatura 63 

Com o objetivo de avaliar a capacidade de 

neutralização da endotoxina por preparo biomecânico com 

diferentes soluções irrigadoras e curativo de demora à base 

de hidróxido de cálcio, Tanomaru156, em 2002, realizou estudo 

in vivo. Canais de dentes de cães preenchidos com LPS, 

foram biomecanizados coadjuvados com solução de hipoclorito 

de sódio a 1, 2,5 e 5%; clorexidina a 2% e solução fisiológica. 

Um grupo foi mantido com LPS no seu interior e um grupo 

ainda foi biomecanizado com solução fisiológica e preenchido 

com curativo de demora (Pasta Calen). Na avaliação 

histológica observou que quando não se utilizou o curativo de 

demora, houve maior intensidade de infiltrado inflamatório, 

espessamento do ligamento periodontal, reabsorção 

cementária e óssea. Concluiu que o preparo biomecânico 

somente não foi capaz de inativar o LPS. O curativo à base de 

hidróxido de cálcio mostrou ser eficaz na inativação dos 

efeitos negativos da endotoxina. 

Zehnder et al.176, em 2002, realizaram estudo 

com diferentes soluções de hipoclorito de sódio nas 

concentrações de 2,5 e 0,5%, tamponadas ou não. Foram 

avaliadas as características de dissolução de tecido e 

antimicrobiana contra E faecalis. Mostraram que não houve 

melhor desempenho das soluções tamponadas, e a solução de 



Revisão de Literatura 64 

Dakin (pH 9) obteve resultados semelhantes a solução de 

hipoclorito a 0,5% não tamponada (ph 12). O efeito de 

dissolução de tecido e antimicrobiano mostrou se maior onde 

a quantidade de clorina livre foi maior, e não pela 

osmolaridade, pH ou capacidade tampão 

Tanomaru Filho et al.160, em 2002, realizaram 

estudo in vivo para avaliar o efeito de diferentes irrigantes 

endodônticos e curativo de demora à base de hidróxido de 

cálcio no reparo apical e periapical de dentes com lesão de 

origem endodôntica. Utilizando modelo experimental em cães 

com dentes com necrose pulpar e lesão periapical crônica, 

estes tiveram seus canais biomecanizados irrigando-se com 

solução de hipoclorito de sódio a 5,25% ou clorexidina a 2%. 

As raízes foram obturadas imediatamente com 

Sealapex®+guta-percha ou foi aplicado curativo com pasta à 

base de hidróxido de cálcio durante 15 dias e obturação da 

mesma forma após este período. Após 210 dias os animais 

foram mortos e realizados cortes histológicos das áreas 

periapicais, coradas com hematoxilina/eosina e tricrômicro de 

Mallory. Apresentaram melhores reparos histológicos nos 

grupos tratados com curativo de demora, com relação àqueles 

obturados imediatamente. Nos grupos de obturação imediata a 

irrigação com solução de digluconato de clorexidina 



Revisão de Literatura 65 

apresentou melhor reparo que a irrigação com solução de 

hipoclorito de sódio. 

Para realizar avaliação in vitro de concentração 

inibitória mínima e concentração bactericida mínima, Ferreira 

et al.42 (2002), utilizaram as seguintes cepas padrão: 

Fusobacterium nucleatum  ATCC 25586, Prevotella nigrescens 

ATCC 33563, Clostridium perfringens ATCC 13124 e 

Bacteroides fragilis ATCC 25285. Foram avaliados diferentes 

anti -sépticos endodônticos. Mostraram que todas as 

substâncias estudadas apresentaram atividade antimicrobiana, 

sendo que o digluconato de clorexidina a 2% foi o mais eficaz, 

seguido pelo detergente de mamona a 10%, 

paramonoclorofenol canforado e solução de hidróxido de 

cálcio a 10%. 

Estrela et al.37 (2002) discutiram os mecanismos 

de ação das soluções de hipoclorito de sódio e sua 

importância no tratamento de canais radiculares. As reações 

de saponificação, neutralização amino ácidas, destruição de 

fosfolipídios e cloraminação promovem alterações 

biossintéticas celulares, no metabolismo e inibição enzimática 

irreversível nas bactérias, e conseqüente atividade 

antimicrobiana. Os fatores citados ainda promovem a 

capacidade de dissolução tecidual. Estas características 



Revisão de Literatura 66 

fazem da solução de hipoclorito de sódio o irrigante 

endodôntico mais amplamente utilizado no mundo. 

Num relato clínico em 2002, Oztan109 mostrou 

resultado favorável de tratamento endodôntico conservador em 

dente portador de necrose pulpar e lesão periapical extensa. 

O autor recomendou o uso de irrigação com gluconato de 

clorexidina a 0,2%, curativo de demora (pasta aquosa à base 

de hidróxido de cálcio) e cimento à base de hidróxido de 

cálcio (Apexit) para o controle da infecção endodôntica 

resultando em sucesso do tratamento. 

Para determinar eletroquimicamente a corrosão 

promovida por alguns irrigantes endodônticos em instrumentos 

endodônticos de aço inoxidável, Oztan et al.110 (2002), 

utilizaram como método de extrapolação de Tafel. Mostraram 

que as soluções de gluconato de clorexidina a 0,2%, de NaOCl  

e de NaOCl+KOH causam severa corrosão. A primeira pelo 

seu baixo pH (5,72), e os outros pela ação dos íons Cl-  

liberados. A solução de EDTA a 17% apresentou o menor 

índice de corrosão. 

Em 2002, Tanomaru Filho et al.162, realizaram 

estudo in vivo, para avaliar a resposta inflamatória produzida 

por diferentes irrigantes endodônticos. Injetaram na cavidade 

peritoneal de camundongos isogênicos, os seguintes irrigantes 



Revisão de Literatura 67 

endodônticos: solução de hipoclorito de sódio a 0,5%, solução 

de clorexidina a 2% e solução salina fosfatada (PBS) como 

grupo controle. Mostraram resposta inflamatória com grande 

migração neutrofílica e de células mononucleares na cavidade 

peritoneal, provocada pela solução de hipoclorito de sódio a 

0,5%. Tanto a solução de clorexidina como o grupo controle 

não induziram a uma reação inflamatória significante. 

Estrela et al.36 (2003) realizaram estudo, in vitro, 

para avaliar o efeito antimicrobiano das soluções de 

hipoclorito de sódio a 2% e digluconato de clorexidina a 2%. 

Foram utilizados os testes de difusão em ágar e exposição 

direta com os seguintes microrganismos: S. aureus, E. 

faecalis, P. aeruginosa, B. subtilis, C. albicans e ainda uma 

mistura destes. O teste de exposição direta foram feitos com 

tempos de 5, 10 e 30 min. Os melhores resultados da solução 

de hipoclorito de sódio foram observados nos testes de 

exposição direta, enquanto a clorexidina mostrou melhores 

resultados nos testes de difusão em ágar. Os autores 

demonstraram que a magnitude do efeito antimicrobiano sofre 

influência do método, indicador biológico e tempo de 

exposição adotados. 

Em 2003, Ferguson et al.39, avaliaram o 

selamento apical de dentes extraídos que utilizaram solução 



Revisão de Literatura 68 

salina, de hipoclorito de sódio a 5,25% ou digluconato de 

clorexidina a 0,12% como irrigantes endodôntico. Foram 

utilizados, ainda três diferentes cimentos obturadores (Roth’s 

811, AH 26 e Sealapex). A infiltração foi observada por meio 

do método de filtração de fluido nos períodos de 270 e 360 

dias. Mostraram que a combinação Sealapex/solução salina 

apresentou a maior infiltração no período de 270 e 360 dias. 

Não foram observadas diferenças entre os grupos que 

utilizaram solução de hipoclorito de sódio ou clorexidina. 

Grewehr et al.50 (2003) avaliaram as soluções de 

ácido etilenodiamino tetracético a 17%(EDTA), hipoclorito de 

sódio a 1% (NaOCl), comparando com uma mistura de NaOCl 

a 0,5% e EDTA a 8,5% (NaOCl-EDTA). Foram verificadas as 

interações químicas na atividade quelante de cálcio e 

liberação de clorinas, dissolução de tecido e propriedades 

antimicrobianas. Mostraram que na quelação do cálcio a 

presença do NaOCl teve pequeno efeito quando comparado 

com a ação do EDTA puro. Por sua vez houve redução de 

clorina disponível na mistura quando comparada ao NaOCl 

puro. No teste de dissolução de tecido o NaOCl foi mais 

efetivo e entre O EDTA e NaOCl-EDTA não houve diferença. 

No teste de difusão em agar contra E faecalis e C albicans o 

resultando mostrou melhor desempenho dos grupos do EDTA 



Revisão de Literatura 69 

e NaOCl-EDTA sem apresentar diferença entre eles. 

Concluíram que o EDTA manteve sua capacidade de quelação 

de íons cálcio e atividade antimicrobiana quando combinado 

com NaOCl. O NaOCl por sua vez perdeu na disponibilidade 

de clorina e na capacidade de dissolução de tecido quando 

misturado ao EDTA. Clinicamente recomendaram irrigação 

copiosa com NaOCl para eliminar os remanescentes EDTA que 

possam interferir, garantido a eficiência do NaOCl. 

Com o objetivo de avaliar in vitro, por MEV, a 

limpeza da superfície da parede de canais radiculares por 

diferentes soluções irrigadoras, Yamashita et al.173, em 2003, 

utilizaram dentes recém-extraídos de humanos, divididos em 

quatro grupos experimentais, nos quais utilizou as seguintes 

soluções irrigadoras: solução fisiológica, solução de 

clorexidina a 2%, solução de hipoclorito de sódio a 2,5% e 

solução de hipoclorito de sódio a 2,5%+EDTA. A limpeza das 

paredes dos canais radiculares foi avaliada nos terços 

cervical, médio e apical em cada espécime, por atribuição de 

escores. Demonstraram que a melhor limpeza da superfície 

das paredes dos canais radiculares foi obtida pela associação 

da solução de hipoclorito de sódio a 2,5% e EDTA, seguida 

pela solução de hipoclorito de sódio a 2,5% (p<0,05), sendo 

esta semelhante à solução de clorexidina apenas no terço 



Revisão de Literatura 70 

cervical. A solução de clorexidina a 2% e a solução fisiológica 

apresentaram resultados inferiores aos grupos anteriores e 

semelhantes entre si, nos três terços do canal radicular 

(p>0,05). Em todos os grupos experimentais observaram 

melhor limpeza no terços cervical e médio, com piores 

resultados para o terço apical. 

Em 2003, Önçag et al.105, realizaram estudo 

onde avaliaram a propriedades antimicrobianas e toxicidade 

de irrigantes endodônticos. Testaram as soluções de 

hipoclorito de sódio a 5,25% (NaOCl), digluconato de 

clorexidina a 2% (CHX) e uma associação de digluconato de 

clorexidina a 0,2% com cetrimide a 0,2% de nome comercial 

Cetrexidin (CET). Realizaram testes antimicrobianos contra E. 

faecalis, in vitro e  estudo in vivo realizando culturas antes a 

após (48h) preparo biomecânico de dentes decíduos com 

polpa necrosada. A avaliação de toxicidade foi realizada 

injetando-se a solução irrigadora em sub-cutâneo de ratos. 

Mostraram que o efeito antimicrobiano in vivo e in vitro do 

CHX e CET semelhantes entre si e maior que do NaOCl. A 

toxicidade da CHX e CET é menor e o reparo nas áreas onde 

este foi injetado tende a ser mais rápido que com o uso do 

NaOCl. Concluíram que a CHX e o CET foram mais eficientes, 

tiveram maior ação antimicrobiana residual e menor toxicidade 



Revisão de Literatura 71 

que o NaOCl, sendo assim indicados como irrigante 

endodôntico em tratamentos de dentes decíduos. 

Haumann e Love56, em 2003, fizeram uma 

revisão de literatura enfocando a biocompatibilidade de 

algumas soluções antimicrobianas utilizadas na endodontia 

contemporânea. Destacam a importância e os testes utilizados 

experimentalmente para esta avaliação. Abordaram as 

soluções de hipoclorito de sódio, EDTA e clorexidina, e ainda 

o hidróxido de cálcio, drogas antiinflamatórias e antibióticas e 

fenol e seus derivados. A solução de hipoclorito de sódio (pH 

11 a 12) é relatada como de uso tradicional nas diferentes 

concentrações, variando de 0,5 a 5,25%. Tendo como 

características importantes a ação antimicrobiana e 

capacidade de dissolver tecidos. Esta mesma capacidade 

torna a solução irritante aos tecidos apicais, com inúmeros 

relatos de injeção acidental além ápice e conseqüentes 

reações teciduais violentas. A clorexidina (pH 5 a 7) um 

bisguanídeo catiônico com ação antimicrobiana inespecífica, 

de amplo espectro e substantividade. Tem sido sugerida como 

substituta da solução de hipoclorito de sódio, nos casos de 

risco de extrusão. Salientam esta não é isenta de risco, e 

relatos de pacientes com sintomas de hipersensibilidade e 

reação anafilática com o uso tópico da clorexidina.  



Revisão de Literatura 72 

Em 2003, Siqueira et al.140, avaliaram, a 

eficiência de alguns medicamentos utilizados como curativos 

intracanal contra C. albicans. Cilindros de dentina foram 

imersos nos medicamentos: hidróxido de cálcio 

(CaOH)+glicerina (GLI); CaOH+gluconato de clorexidina a 

0,12% (CHX); CaOH+paramonoclorofenol canforado 

(PMCC)+GLI; e CHX+óxido de zinco (Ozn), em períodos de 

1hora, 2 dias e 7 dias. Então foram lavados com solução 

salina e incubados. Mostraram maior eficiência do 

CaOH+PMCC e CHX+Ozn, desinfectando a dentina em 1hora. 

A associação de CHX+CaOH foi ineficaz, mesmo após período 

de 7 dias. 

Em 2003, Haenni et al.55, compararam a 

capacidade de alcalinização de dentina e antimicrobiana de 

irrigantes endodônticos isoladamente ou de pastas a base de 

hidróxido de cálcio utilizando estes como veículos. Foram 

avaliadas as soluções salina, NaOCl a 1%, clorexidina a 0,5% 

e iodeto de potássio a 7,5%. Todas as pastas levaram a 

alcalinização da dentina de forma semelhante os irrigantes 

isolados não promoveram alcalinização. A atividade 

antimicrobiana foi avaliada contra E. faecalis e C. albicans, 

em teste de difusão em agar. Novamente as pastas obtiveram 

resultados semelhantes entre si. A clorexidina isoladamente 



Revisão de Literatura 73 

obteve maior halo de inibição que na pasta. Concluíram que o 

potencial de alcalinização do hidróxido de cálcio se mantém 

mesmo quando é associado a substâncias ácidas ou alcalinas, 

quanto ao potencial antimicrobiano, este não aumenta com a 

adição dos irrigantes endodônticos. 

Lin et al.91, 2003, avaliaram a eficiência da 

atividade antimicrobiana do hidróxido de cálcio e solução de 

clorexidina a 012%, individualmente ou combinados, contra E. 

faecalis e difusão em Agar. Mostraram que a clorexidina 

obteve o melhor efeito antibacteriano. A combinação de 

hidróxido de cálcio e clorexidina mostrou melhor desempenho 

que o hidróxido de cálcio somente, mas a combinação não foi 

melhor que a clorexidina.  

Weber et al.168 (2003), avaliaram, in vitro, o 

efeito antimicrobiano residual das soluções de hipoclorito de 

sódio a 5,25% (NaOCl) e clorexidina a 2% (CHX), sendo os 

grupos, ainda, subdivididos em utilização de ultra-som ou não, 

durante 1 minuto. Após o preparo biomecânico com os 

irrigantes propostos, os canais foram preenchidos com 

solução fostatada tamponada e colhidas amostras, para 

estudo microbiológico, em tempos de 24, 48, 72, 96, 120, 144 

e 168 horas. Realizaram estudo de difusão em agar com cepa 

padrão de S. sanguis. Mostraram que o efeito antimicrobiano 



Revisão de Literatura 74 

residual da CHX foi superior ao do NaOCl. O ultra-som 

aumentou os halos de inibição da CHX. A CHX mostrou 

atividade residual mesmo após 168 horas.  



 

 
 
 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

PROPOSIÇÃO 
 



Proposição 76 

3. Proposição 

 

 

O presente estudo teve como objetivo a 

avaliação das condições microbiológicas antes e 30 dias após 

o preparo biomecânico dos canais radiculares de dentes de 

cães com lesão periapical utilizando como soluções 

irrigadoras as soluções de hipoclorito de sódio a 2,5%, 

digluconato de clorexidina a 2% e soro fisiológico.  

Ainda, foi analisado o efeito do preparo 

biomecânico com as diferentes soluções irrigadoras sobre as 

condições histopatológicas da região apical e periapical. 



 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

MATERIAL E MÉTODO 



Material e Método 78 

4. Material e Método 

 

4.1. Procedimentos experimentais  

 

4.1.1. Indução das lesões apicais crônicas. 

 

Foram utilizados 4 cães, de ambos os sexos, 

sem raça definida, de uma mesma ninhada, com 

aproximadamente 1 ano de idade e pesando entre 10 e 15 Kg. 

Os animais foram mantidos por um período de 30 a 45 dias 

anteriormente às intervenções endodônticas sob cuidados 

relacionados à dieta, medicações e vacinas. Durante esta fase 

e em todo o período experimental, eles foram mantidos no 

Biotério da Faculdade de Odonto logia de Araraquara- Campus-

UNESP. 

O projeto de pesquisa foi avaliado e aprovado 

pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal da Faculdade 

de Odontologia de Araraquara- UNESP (Ofício CEEA-FOAr 

nº38/2002) (Anexo). 

Os dentes selecionados para o estudo foram os 

segundos, terceiros e quartos pré-molares inferiores e 

segundos e terceiros pré-molares superiores, totalizando 40 

dentes, com 80 raízes, divididas em 4 grupos experimentais.  



Material e Método 79 

Para cada intervenção, os animais foram pré-

anestesiados com injeção intramuscular de 2 mL de Rompum 

(Cloridrato de dihidroxiazina – Bayer do Brasil S/A, Produtos 

Veterinários, Ind. Bras., São Paulo-SP) e, posteriormente, 

anestesiados com  solução de Nembutal Sódico (Thionembutal 

– Aboot Laboratórios do Brasil Ltda., Rio de Janeiro-RJ), na 

dosagem de 15 mg/Kg de peso do animal, aplicada na veia 

tibial de uma das patas do animal. Durante os procedimentos 

operatórios, o animal foi mantido com solução isotônica de 

cloreto de sódio (Darrow Laboratório S/A – São Paulo SP) 

administrada endovenosamente e, quando necessário, 

efetuada a complementação anestésica. 

Após a anestesia e realização de tomadas 

radiográficas periapicais, dos dentes selecionados, pela 

técnica da bissetriz, realizou-se a limpeza mecânica das 

coroas dentais com curetas periodontais e gaze esterilizada. A 

seguir, anestesia terminal infiltrativa foi realizada na área 

periapical dos dentes empregados na pesquisa utilizando 

anestésico à base de Cloridrato de Prilocaína com 

Felipressina (Citanest 3% - Astra Química e Farmacêutica). 

As aberturas coronárias foram realizadas com 

brocas esféricas carbide número 4, em turbina de alta 

velocidade refrigerada a ar e água, de modo a se obter duas 



Material e Método 80 

aberturas, uma mesial e outra distal, mantendo-se a ponte de 

esmalte com o objetivo de prevenir fraturas coronárias. As 

aberturas oclusais foram complementadas com pontas 

diamantadas tronco-cônicas de extremidade inativa número 

3081 (K.G. Sorensen – São Paulo-SP), também em alta 

rotação. 

Com base nas radiografias para diagnóstico, foi 

efetuada a exploração dos canais radiculares com limas tipo K 

no 25 (Dentsply Maillefer, Ballaigues, Suiça), até o nível do 

“platô” apical, o qual foi utilizado como referência para a 

remoção da polpa radicular. Removida a polpa coronária, a 

irrigação da câmara pulpar foi realizada com soro fisiológico, 

acondicionado em tubetes anestésicos, empregando-se 

seringa do tipo Carpule e agulha descartável longa (27 G-

Becton Dickinson, Ind. Cirúrgica Ltda., Juiz de Fora, MG). A 

seguir, com limas tipo K número 25 neste níve l, foram 

realizadas tomadas radiográficas para odontometria, com o 

objetivo de determinar o Comprimento Real do Dente (CRD) e 

o Comprimento Real de Trabalho (CRT), situado 

aproximadamente a 1,5 mm aquém do CRD. 

A partir da medida odontométrica, foi realizado o 

arrombamento do forame apical com auxílio de limas tipo K de 

no 20, até a de nº 30, no Comprimento Real do Dente (CRD), 



Material e Método 81 

previamente estabelecido pelo exame radiográfico, 

determinando o Instrumento Apical Foraminal (IAF). Os canais 

radiculares permaneceram expostos ao meio bucal durante 

sete dias, com o objetivo de permitir contaminação. 

Decorrido este período, sob nova anestesia 

geral, foi efetuada a irrigação/aspiração da câmara pulpar com 

soro fisiológico e após a secagem foi realizada colocação de 

uma mecha de algodão na câmara pulpar, sendo a abertura 

coronária selada com cimento à base de óxido de zinco e 

eugenol de presa rápida (Pulposan – S. S. White Artigos 

Dentários Ltda., Rio de Janeiro, RJ). Após 60 dias do 

selamento provisório, controles radiográficos foram realizados 

para constatação das imagens radiolúcidas sugestivas de 

reação periapical crônica. 

 

4.1.2. 1ª Colheita microbiológica. 

 

Os grupos experimentais foram então, 

distribuídos de modo que cada animal recebesse as quatro 

variáveis. Assim, em cada hemi-arco, de cada animal, foi 

utilizada uma das soluções irrigadoras experimentais ou foi 

realizado o grupo controle (Quadro 1). Em função da perda de 

um elemento dentário, o total de raízes utilizadas no estudo 

microbiológico foi de 78. 



Material e Método 82 

 

QUADRO 1 – Distribuição dos grupos experimentais, em função da 

solução irrigadora empregada, relacionado à 

avaliação microbiológica. 

Grupos 

experimentais 
Solução irrigadora 

Número de 

raízes 

11   Clorexidina a 2% 20 

2 Hipoclorito de sódio a 2,5% 20 

3 Soro fisiológico 20 

4 
Controle - Sem preparo 

biomecânico 
18 

 

Realizado o isolamento dos dentes de um 

quadrante com dique de borracha, anti -sepsia do campo 

operatório com álcool a 70% e 0,3% de iodo, e neutralização 

com álcool/éter (em partes iguais), o selamento coronário e 

mecha de algodão da câmara pulpar foram removidos. A 

seguir, a coleta de material dos canais radiculares para 

avaliação da condição microbiológica foi efetuada, 

empregando-se dois cones de papel absorvente para cada 

canal radicular. Os cones de papel foram colocados 

imediatamente nos tubos de ensaio contendo fluído para 

transporte reduzido (RTF) e encaminhados para 

processamento microbiológico. 

 



Material e Método 83 

Composição do fluido de transporte reduzido –RTF: 

Solução salina 1     75,mL 

Solução salina 2     75mL 

Bicarbonato de sódio a 8%  5mL 

Ditiotreitol a 1%    20mL 

Água destilada q.s.p.   1L 

 

Composição da solução salina 1 : 

 Fosfato de dipotássico 0,6g 

 Água destilada q.s.p.  100mL 

 

Composição de solução salina 2 : 

 Cloreto de sódio     12g 

 Fosfafato monopotássico   0,6g 

 Sulfato de amônio    12g 

 Sulfato de magnésio    0,25g 

 Água destilada q.s.p.    100mL 

 

 

4.1.3. Preparo biomecânico dos canais radiculares. 

 

O preparo biomecânico seguiu a distribuição do 

Quadro 1, desta forma: No grupo 1 utilizou-se a solução de 

digluconato de clorexidina a 2% (CHX - Instituto de Química 

de Araraquara,UNESP- SP). No grupo 2 utilizou-se a solução 

de hipoclorito de sódio a 2,5% (NaOCl -Instituto de Química de 

Araraquara,UNESP- SP). No grupo 3 utilizou-se a solução 



Material e Método 84 

fisiológica de cloreto de sódio a 0,9% (Soro - Darrow 

Laboratório S/A – São Paulo SP). E finalmente no grupo 4 os 

canais radiculares não foram manipulados, servindo como 

grupo controle. 

Abundante irrigação/aspiração/inundação foi 

executada na entrada dos canais radiculares. Empregou-se 

uma seringa Luer de 10mL e agulha hipodérmica 30x5, 

inicialmente com 5mL de uma das soluções irrigadoras de 

acordo com o grupo experimental.  

A “neutralização” do conteúdo séptico-tóxico foi 

realizada por meio da técnica clássica sendo utilizadas limas 

tipo K no sentido coroa-ápice associadas à solução irrigadora 

até alcançar o CRT, nos grupos 1, 2 e 3. 

Para o preparo biomecânico foram empregadas 

limas tipo K no CRT, 1,5 mm aquém do CRD, até que a 

dilatação alcançasse o instrumento de no 70 ou 60 para o 

segundo-pré-molar inferior. A cinemática de emprego do 

instrumento foi de limagem contra todas as paredes, até que o 

mesmo não se prendesse ao canal radicular, quando foi usado 

o instrumento seguinte. Após o preparo biomecânico, foi 

realizado o desbridamento do forame apical com o IAF, 

empregado em todo o comprimento do dente, para remoção de 

possíveis raspas de dentina na região do forame apical. 



Material e Método 85 

Durante todo o preparo biomecânico, foi 

realizada irrigação/aspiração/inundação dos canais 

radiculares, com a solução irrigadora estudada, sendo 

empregados 2 mL de solução a cada troca de instrumento. Ao 

término do preparo realizou-se irrigação com 2 mL solução 

fisiológica nos grupos 1, 2 e 3. Após secagem foi realizada 

inundação dos mesmos com solução de ácido 

etilenodiaminotetracético (EDTA) a 15% (EDTA Trissódico, 

Biodinâmica Química e Farmacêutica Ltda., SP), mantida sob 

agitação por 3 minutos com auxílio de uma lima tipo K no 40. 

Ao final, realizou-se irrigação/aspiração com 2mL soro 

fisiológico e secagem dos canais radiculares por meio de 

pontas de papel absorvente esterilizadas (Tanariman Ind. 

Ltda., Manacapurú, AM). 

Os canais radiculares permaneceram sem 

curativo de demora após o preparo biomecânico e emprego da 

solução de EDTA, sendo apenas acomodada uma mecha de 

algodão esterilizada no nível da entrada dos canais 

radiculares, seguida da colocação de base com cimento de 

policarboxilato de zinco (Durelon, ESPE, Alemanha) e 

restauração da cavidade oclusal com cimento ionomérico 

fotopolimerizável (V itremer, 3M ESPE, E.U.A.), de acordo com 

recomendação da norma ISO 740568, 1997. 



Material e Método 86 

4.1.4. 2ª Colheita microbiológica. 

 

Decorrido o período experimental de 30 dias, 

foram realizadas novas tomadas radiográficas e, após o 

isolamento e anti -sepsia de cada um dos quadrantes, foi 

realizada a remoção do selamento coronário e da mecha de 

algodão das câmaras pulpares, seguida da coleta de material 

dos canais radiculares para avaliação das condições 

microbiológicas, de forma idêntica à coleta inicial. Os cones, 

após coleta fo ram colocados nos de tubos de ensaio contendo 

fluído para transporte reduzido (RTF) e encaminhados para 

processamento microbiológico. 

 

4.1.5  Fixação para preparo histopatológico. 

 

Durante o período experimental de 30 dias, os 

animais foram mantidos no Biotério do Câmpus da UNESP – 

Araraquara. Após este período, realizada a coleta 

microbiológica, os animais foram mortos por sobredose 

anestésica. As maxilas e mandíbulas foram removidas e as 

peças fixadas em solução de cacodilato de sódio em 

associação com sacarose e glutaraldeído (SOARES146, 1999). 

 



Material e Método 87 

Composição da solução fixadora  

Solução aquosa de glutaraldeído a 25%   50mL 

Sacarose        5g 

Solução tamponada de cacodilato de sódio (pH 7,4) 1L 

Solução de hidróxido de sódio 0,1N   qsp 

 

4.2. Avaliação microbiológica. 

 

4.2.1. Metodologia do estudo microbiológico.  

 

4.2.1.1. Diluição e Semeadura. 

 

No laboratório de Microbiologia da Faculdade de 

Farmácia de Ribeirão Preto -USP, os tubos contendo as 

amostras microbiológicas receberam 4 a 6 perólas de vidro e 

uma aleta metálica esterilizada, as quais a seguir foram 

agitadas por 2 minutos no aparelho Mixtrom-Toptronix (São 

Paulo), regulado em velocidade máxima, para dessorção dos 

microrganismos. A seguir, diluições decimais seriadas foram 

realizadas, em PBS, em fluxo laminar, até a diluição de 10-4. 

Um volume de 0,05 mL das amostras puras e de cada diluição 

foi depositado em placas, com auxílio de pipeta centesimal 

esterilizada, contendo ágar-sangue (As), ágar sangue 

enriquecido (Ask) (TCHAOU et al.163, 1995) e ágar Miti s 

salivarius (Ms). A seguir, foram distribuídos uniformemente, 

com auxílio de bastão de vidro em L, esterilizado. 

 



Material e Método 88 

Composição do agar sangue 

Infusão de cérebro de bezerro 200g 

Infusão de coração 250g 

Proteose peptona 10g 

Dextrose 2g 

Cloreto de sódio 5g 

Fosfato dissódico 2,5g 

 

No preparo deste meio, utilizou-se o produto 

desidratado Brain Heart Infusion (Difco), sendo 37g 

adicionados a 1l de água destilada contendo 1,5% de agar. 

Após resfriamento foi adicionado 5% de sangue desfibrinado 

de coelho, 0,5mg/mL de menadiona (Merck). Distribuiu-se 5mL 

do meio de cultura em placas de Petri (10x60). 

 

Composição do agar Mitis salivarius (Ms)  

Triptose 10g 

Proteose peptona 5g 

Dextrose 1g 

Sacarose 50g 

Fosfato dipotássico 4g 

Azul de tripan 5g 

Cristal violeta 0,0008g 

Agar 15g 

 

 

 



Material e Método 89 

Utilizou-se o Mitis salivarius Agar (Difco) 

rehidratado em água destilada. Distribuiu-se 5mL do meio de 

cultura em placas de Petri (10x60). 

 

Composição do agar sangue enriquecido (Ask) 

Infusão de cérebro de bezerro 200g 

Infusão de coração 250g 

Proteose peptona 10g 

Dextrose 2g 

Cloreto de sódio 5g 

Fosfato disódico 2,5g 

 

Com a mesma base do As, utilizou-se o produto 

desidratado Brain Heart Infusion (Difco). Rehidratado e a este 

se adicionou, após resfriamento, 5% de sangue desfibrinado 

de coelho, 5mg/mL de hemina (Difco) e 0,1mg/mL de 

menadiona (Merck). Distribuiu-se 5mL do meio de cultura em 

placas de Petri (10x60). 

A incubação das placas de As foi feita em 

condições de ae