RESSALVA Atendendo a solicitação do(a) autor(a), o texto completo desse trabalho será disponibilizado no repositório a partir de 18/12/2025. 2023 AMANDA ROSSATO BIOFUNCIONALIZAÇÃO DE MATRIZ COLÁGENA ESTÁVEL EM VOLUME UTILIZANDO FIBRINA RICA EM PLAQUETAS INJETÁVEL (I-PRF) PARA O TRATAMENTO DE RECESSÃO GENGIVAL UNITÁRIA: estudo clínico randomizado São José dos Campos 2023 AMANDA ROSSATO BIOFUNCIONALIZAÇÃO DE MATRIZ COLÁGENA ESTÁVEL EM VOLUME UTILIZANDO FIBRINA RICA EM PLAQUETAS INJETÁVEL (I-PRF) PARA O TRATAMENTO DE RECESSÃO GENGIVAL UNITÁRIA: estudo clínico randomizado Tese apresentada ao Instituto de Ciência e Tecnologia, Universidade Estadual Paulista (Unesp), Campus de São José dos Campos, como parte dos requisitos para obtenção do título de DOUTOR, pelo Programa de Pós-Graduação em BIOPATOLOGIA BUCAL. Área: Periodontia. Linha de pesquisa: Estudos sobre microbiologia, imunologia, patogênese e terapia em Periodontia e Implantodontia. terapia em Periodontia e Implantodontia [Coloque aqui a linha de pesquisa]. Orientador: Prof. Assoc. Mauro Pedrine Santamaria Instituto de Ciência e Tecnologia [internet]. Normalização de tese e dissertação [acesso em 2024]. Disponível em http://www.ict.unesp.br/biblioteca/normalizacao Apresentação gráfica e normalização de acordo com as normas estabelecidas pelo Serviço de Normalização de Documentos da Seção Técnica de Referência e Atendimento ao Usuário e Documentação (STRAUD). Ficha catalográfica elaborada pela Biblioteca Prof. Achille Bassi e Seção Técnica de Informática, ICMC/USP com adaptações - STATI, STRAUD e DTI do ICT/UNESP. Renata Aparecida Couto Martins CRB-8/8376 Rossato , Amanda Funcionalização de matriz colágena estável em volume utilizando Fibrina Rica em Plaquetas injetável (i-PRF) para o tratamento de Recessão Gengival unitária / Amanda Rossato . - São José dos Campos : [s.n.], 2023. 98 f. : il. Tese (Doutorado) - - Universidade Estadual Paulista (Unesp), Instituto de Ciência e Tecnologia, São José dos Campos, 2023. Orientador: Mauro Pedine Santamaria. 1. Recessão gengival. 2. Fibrina Rica em Plaquetas. 3. Biomateriais. 4. Xenoenxertos. 5. Autoenxertos. I. Santamaria, Mauro Pedine, orient. II. Universidade Estadual Paulista (Unesp), Instituto de Ciência e Tecnologia, São José dos Campos. III. Universidade Estadual Paulista 'Júlio de Mesquita Filho' - Unesp. IV. Universidade Estadual Paulista (Unesp). V. Título. BANCA EXAMINADORA Prof. Assoc. Mauro Pedrine Santamaria (Orientador) Universidade Estadual Paulista Instituto de Ciência e Tecnologia Campus São José dos Campos Profa. Assoc. Andrea Carvalho de Marco Universidade Estadual Paulista Instituto de Ciência e Tecnologia Campus São José dos Campos Profa. Dra. Maristela Lobo Maia Pós-graduação Centro Universitário SENAC São Paulo Unidade São Paulo Prof. Dr. Thiago Marchi Martins Universidade Federal de Pelotas UFPEL Campus Pelotas – RS Prof. Dr. Lucas Araújo Queiroz Prática Privada Instituto Queiroz Odontologia Unidade Teresina – PI São José dos Campos, 18 de dezembro de 2023. DEDICATÓRIA Aos meus pais, Carlos Alberto Rossato e Solange Oliveira Rossato, com amor e profunda gratidão. Este título também lhes pertence. Se cheguei até aqui, foi graças ao esforço e amor incondicional que sempre me proporcionaram. Vocês são o meu maior exemplo e orgulho. AGRADECIMENTOS A Deus, por ter me permitido chegar até aqui e por me abençoar muito mais do que eu mereço, e à Nossa Senhora Aparecida, por sempre interceder por mim e pela minha família. Aos meus pais, Carlos Alberto Rossato e Solange Oliveira Rossato, e avós, Dorival Antônio Rossato (in memorian), Tereza Sversutti Rossato e Francisco Santana Oliveira, pois tive a oportunidade de chegar até aqui graças a uma vida de muita luta e esforço de vocês. Ao meu namorado, Giovanni Abeni dos Santos, pelo apoio incondicional, paciência e amor. Obrigada por ser o meu ponto de paz. Ao meu orientador, Prof. Dr. Mauro Pedrine Santamaria, por ter despertado meu interesse pela investigação científica ainda durante minha graduação, além de todo apoio e paciência. Obrigada por todo conhecimento compartilhado conosco durante a nossa formação como docentes, clínicos e pesquisadores. Às amigas que a pós-graduação me deu - Laís Ferraz, Manuela Miguel, Ana Bonafé, Cássia Araújo e Victória Lima - e à minha co-orientada de iniciação científica (agora, colega de profissão) Camila Bonjorni, agradeço por "carregarem o piano" comigo com muita lealdade e paciência. Sem vocês, esse trabalho não seria possível. Às técnicas Jacqueline Bueno, Marcia Garcia e Valéria Santos da Silva por toda prestatividade e amizade. Vocês tornaram mais leve a rotina exaustiva da pesquisa clínica. Aos meus pacientes do ICT Unesp. Obrigada por acreditarem no meu trabalho. Ao Prof. Marcelo Pereira Nunes pelas contribuições fundamentais durante a idealização deste trabalho e pelo suporte e apoio. À UNESP - Universidade Estadual Paulista, na pessoa do diretor do Instituto de Ciência e Tecnologia de São José dos Campos, Prof. Cesar Rogério Pucci e da vice-diretora Profa. Symone Cristina Teixeira. Ao Programa de Pós-graduação em Ciências Aplicadas à Saúde Bucal, na pessoa do coordenador Prof. Dr. Alexandre Borges Couto e aos docentes do Programa. À Geistlich Pharma Brazil, pela doação das matrizes colágenas usada neste estudo. À Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) pela concessão da bolsa de Doutorado, através do processo nº 88887.529121/2020-00, no período de 01/03/2020 a 18/12/23. "A smooth sea never made a skilled sailor". Franklin Delano Roosevelt SUMÁRIO LISTA DE FIGURAS ................................................................................... 8 LISTA DE TABELAS ................................................................................ 10 LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS ............................................... 11 RESUMO ..................................................................................................... 13 ABSTRACT ................................................................................................ 14 1 INTRODUÇÃO ....................................................................................... 15 2 PROPOSIÇÃO ......................................................................................... 19 3 MATERIAL E MÉTODOS .................................................................... 20 3.1 População do estudo ............................................................................. 20 3.1.1 Tamanho da amostra ......................................................................... 20 3.1.2 Critérios de inclusão .......................................................................... 21 3.1.3 Critérios de não inclusão ................................................................... 22 3.1.4 Aspectos éticos .................................................................................... 22 3.2 Plano de pesquisa .................................................................................. 23 3.2.1 Terapia inicial .................................................................................... 23 3.2.2 Randomização, ocultamento da alocação e cegamento .................. 24 3.2.3 Tratamento ......................................................................................... 24 3.2.4 Protocolo de obtenção do i-PRF ....................................................... 25 3.2.5 Procedimento cirúrgico ..................................................................... 27 3.3 Medidas clínicas .................................................................................... 34 3.4 Análise estética profissional ................................................................. 38 3.5 Medidas dos parâmetros centrados no paciente ................................ 39 3.5.1 Estética ................................................................................................ 39 3.5.2 Hipersensibilidade dentinária .......................................................... 40 3.5.3 Morbidade pós-operatória ................................................................ 41 3.6 Eventos pós-operatórios ....................................................................... 41 3.6.1 Edema ................................................................................................. 41 3.7 Análise estatística .................................................................................. 42 4 RESULTADO .......................................................................................... 44 4.1 RG .......................................................................................................... 49 4.2 PS ............................................................................................................ 49 4.3 NIC ......................................................................................................... 50 4.4 ATQ ........................................................................................................ 50 4.5 ETQ ........................................................................................................ 50 4.6 Mudanças nos parâmetros clínicos após 6 meses pós-operatórios ... 51 4.6.1 Redução da recessão gengival (RecRed) .......................................... 52 4.6.2 Porcentagem de recobrimento radicular (%RC) ........................... 53 4.6.3 Recobrimento radicular completo (CRC) ....................................... 53 4.6.4 Ganho ATQ ....................................................................................... 53 4.6.5 Ganho ETQ ....................................................................................... 54 4.6.6 Subanálises ......................................................................................... 54 4.7 Avaliação estética profissional ............................................................. 58 4.8 Parâmetros centrados no paciente ...................................................... 61 4.8.1 Estética ................................................................................................ 61 4.8.2 Hipersensibilidade dentinária ......................................................... 62 4.8.3 Morbidade pós-operatória ................................................................ 62 4.9 Eventos pós-operatórios ....................................................................... 63 4.9.1 Edema ................................................................................................. 63 5 DISCUSSÃO ............................................................................................ 65 6 CONCLUSÃO .......................................................................................... 82 REFERÊNCIAS .......................................................................................... 83 APÊNDICE A (Diário pós-operatório) ..................................................... 97 ANEXO A (Certificado CEP) .................................................................... 98 LISTA DE FIGURAS Figura 1 – Obtenção da Fibrina Rica em Plaquetas Injetável (i-PRF) ............... 26 Figura 2 – Funcionalização da matriz colágena (FG) com Fibrina Rica em Plaquetas injetável (i-PRF) ................................................................................. 27 Figura 3 – Sequência esquemática dos passos cirúrgicos comuns a todos os grupos (retalho posicionado coronariamente) ................................................................ 30 Figura 4 – Sequência do procedimento cirúrgico realizado no grupo CAF ....... 31 Figura 5 – Sequência do procedimento cirúrgico realizado no grupo CAF+FG+i- PRF ..................................................................................................................... 32 Figura 6 – Sequência do procedimento cirúrgico realizado no grupo CAF + FG ............................................................................................................................ 33 Figura 7 – Representação esquemática das medidas dos parâmetros clínicos ... 37 Figura 8 – Escala analógica visual (VAS) para análise estética ......................... 40 Figura 9 – Escala analógica visual (VAS) para análise da hipersensibilidade dentinária ............................................................................................................ 41 Figura 10 – Diagrama de fluxo do estudo .......................................................... 46 Figura 11 – Casos ilustrativos com seis meses de acompanhamento pós- operatórios .......................................................................................................... 48 Figura 12 – Avaliação estética profissional (RES) (n=66) ................................. 61 LISTA DE TABELAS Tabela 1– Dados demográficos dos pacientes incluídos no estudo (n=66) ........ 47 Tabela 2– Parâmetros clínicos no baseline, três e seis meses (n=66) ................. 49 Tabela 3– Alterações nos parâmetros clínicos após seis meses (n=66) ............. 53 Tabela 4 – Regressão logística ........................................................................... 58 Tabela 5– Regressão linear ................................................................................. 59 Tabela 6– Parâmetros centrados no paciente no baseline (BL) e aos 6 meses pós- operatórios (n=66) .............................................................................................. 62 Tabela 7– Morbidade pós-operatória (n=66) ...................................................... 64 Tabela 8– Edema tecidual avaliado ao 7º dia pós-operatório (n=66) ................. 65 LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS ACO Altura da crista óssea ALMG Alinhamento da junção mucogengival AP Altura das papilas ATQ Altura de tecido queratinizado CAF Retalho posicionado coronariamente CG Cor do tecido gengival CMG Contorno da margem gengival CTG Enxerto de tecido conjuntivo subepitelial CRC Recobrimento radicular completo EGF Fator de crescimento epidérmico EROs Espécies reativas de oxigênio ETQ Espessura de tecido queratinizado FG Matriz colágena estável em volume (Geistlich Fibro-Gideâ) HD Hipersensibilidade dentinária IGF Fator de crescimento insulínico IL-1β Interleucina-1β IP Índice de placa i-PRF Fibrina rica em plaquetas injetável IG Índice gengival JCE Junção cemento-esmalte LP Largura das papilas LRG Largura da recessão gengival MC Matriz colágena MG Margem gengival MMP-9 Metaloproteinase de matriz-9 NF-kB Fator nuclear kappa B NIC Nível de inserção clínica NO Óxido nítrico PDGF Fator de crescimento derivado de plaquetas PMPOI Posição da margem gengival no pós-operatório imediato PRP Plasma Rico em Plaquetas PRF Plasma Rico em Fibrina PS Profundidade de sondagem RES Escala de recobrimento radicular RecRed Redução da recessão gengival RC Recobrimento radicular RCFmáx Força centrífuga relativa máxima RG Recessão Gengival RGR Recessão gengival relativa RT1 Recessão gengival tipo 1 (Cairo et al., 2011) SS Sangramento à sondagem TGF-β Fator de crescimento transformador β TNF-a Fator de necrose tumoral-a TTG Textura do tecido gengival VAS Escala analógica visual VEGF Fator de crescimento endotelial vascular Rossato A. Funcionalização de matriz colágena estável em volume utilizando Fibrina Rica em Plaquetas injetável (i-PRF) para o tratamento de Recessão Gengival unitária [tese]. São José dos Campos (SP): Universidade Estadual Paulista (Unesp), Instituto de Ciência e Tecnologia; 2023. RESUMO Substitutos de enxerto de tecido conjuntivo têm sido amplamente utilizados para superar as limitações dos enxertos autógenos no tratamento de defeitos dos tecidos moles periodontais e peri-implantares. No entanto, o desempenho clínico desses biomateriais ainda é inferior. A biofuncionalização de matrizes colágenas usando fibrina rica em plaquetas injetável (i-PRF) foi proposta como uma estratégia para aprimorar a bioatividade e, portanto, a eficácia clínica desses substitutos mucosos. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do uso da matriz colágena estável em volume (FG) biofuncionalizada com i-PRF no tratamento de recessões gengivais unitárias (RGs) do ponto de vista clínico, estético e de parâmetros centrados no paciente. Para tal, foram selecionados 66 pacientes portadores de RGs unitárias RT1, os quais foram alocados aleatoriamente em um dos seguintes grupos: grupo CAF (n=22), retalho posicionado coronariamente (CAF); grupo CAF+FG (n=22), CAF associado à FG; e grupo CAF+FG+i-PRF (n=22), CAF associado à FG biofuncionalizada com i-PRF. Após 6 meses, os três grupos apresentaram taxas de recobrimento radicular significativas [CAF: 69,1% (2,02 ± 1,06 mm); CAF+FG: 67,44% (1,7 ± 0,81 mm) e CAF+FG+i-PRF: 64,92% (1,64 ± 0,80 mm), sem diferença entre os grupos (p=0,33). Os grupos que receberam os biomateriais forneceram um maior ganho em espessura de tecido queratinizado (ETQ) (CAF: 0,12 ± 0,2 mm; CAF+FG: 0,43 ± 0,24 mm; CAF+FG+i-PRF: 0,48 ± 0,25 mm; p=0,000). Não foram observadas diferenças significativas em termos de altura de tecido queratinizado em nenhum dos grupos e tempos avaliados (p>0,05). Todos os grupos apresentaram redução significativa da hipersensibilidade dentinária e melhorias nas condições estéticas (p>0,05). Também não foram observadas diferenças em termos de dor e morbidade pós- operatórias (p>0,05). Dentro das limitações do presente estudo, conclui-se que as três abordagens forneceram resultados semelhantes e satisfatórios após 6 meses de acompanhamento. A adição da FG, biofuncionalizada ou não com i-PRF, proporcionou benefícios adicionais em termos de ganho de ETQ. Palavras-chave: Recessão gengival. Fibrina Rica em Plaquetas. Biomateriais. Xenoenxertos. Autoenxertos. Rossato A. Volume-stable collagen matrix (VCMX) biofunctionalized wit injectable platelet-rich fibrin (i-PRF) for the treatment of single gingival recession: randomized clinical trial [doctorate thesis]. São José dos Campos (SP): São Paulo State University (Unesp), Institute of Science and Technology; 2023. ABSTRACT Soft tissue graft substitutes have been widely used to overcome the limitations of autogenous grafts in the treatment of periodontal and peri-implant soft tissue defects. However, the clinical performance of these biomaterials is still inferior. The biofunctionalization of collagen matrices using injectable platelet-rich fibrin (i-PRF) has been proposed as a strategy to enhance the bioactivity and, therefore, the clinical efficacy of these biomaterials. Thus, the aim of this study was to evaluate the effectiveness of using biofunctionalized volume-stable collagen matrix (VCMX) with i-PRF in the treatment of single gingival recessions (GRs) from clinical, esthetic, and patient-centered parameters. For this purpose, 66 patients with single RT GRs were selected and randomly allocated to one of the following groups: CAF group (n=22), coronally advanced flap (CAF); CAF+VCMX group (n=22), CAF combined with VCMX; and CAF+ VCMX +i- PRF group (n=22), CAF combined with biofunctionalized VCMX with i-PRF. After 6 months, all three groups exhibited significant root coverage rates [CAF: 69.1% (2.02 ± 1.06 mm); CAF+FG: 67.44% (1.7 ± 0.81 mm); and CAF+FG+i- PRF: 64.92% (1.64 ± 0.80 mm), with no difference between the groups (p=0.33). The groups that received the biomaterials showed a greater gain in keratinized tissue thickness (KTT) (CAF: 0.12 ± 0.2 mm; CAF+FG: 0.43 ± 0.24 mm; CAF+FG+i-PRF: 0.48 ± 0.25 mm; p=0.000). No significant differences were observed in terms of keratinized tissue height in any of the groups and assessed time points (p>0.05). All groups showed a significant reduction in dentin hypersensitivity and improvements in esthetic conditions (p>0.05). No differences were also observed in terms of post-operative pain and morbidity (p>0.05). Within the limitations of this study, it is concluded that all three approaches provided similar and satisfactory results after 6 months of follow-up. The addition of VCMX, whether biofunctionalized or not with i-PRF, provided additional benefits in terms of keratinized tissue thickness gain. Keywords: Gingival Recession. Dental Esthetics. Tooth Cervix. Tissue Scaffolds. Tissue Engineering. 82 6 CONCLUSÃO Dentro das limitações deste estudo, conclui-se que as três abordagens (CAF, CAF+FG e CAF+FG+i-PRF) foram efetivas para a redução da recessão gengival e forneceram resultados semelhantes e satisfatórios após 6 meses de acompanhamento pós-operatório. A adição da FG, seja biofuncionalizada ou não com i-PRF, proporcionou benefícios clínicos adicionais em termos de ganho de espessura do tecido queratinizado. _______________________ * Baseado em: International Committee of Medical Journal Editors Uniform Requirements for Manuscripts Submitted to Biomedical journals: Sample References [Internet]. Bethesda: US NLM; c2003 [cited 2020 Jan 20]. U.S. National Library of Medicine; [about 6 p.]. Available from: http://www.nlm.nih.gov/bsd/uniform_requirements.html 83 REFERÊNCIAS* Al-Maawi S, Herrera-Vizcaíno C, Orlowska A, Willershausen I, Sader R, Miron RJ, et al. 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