RESSALVA Atendendo solicitação do(a) autor(a), o texto completo deste trabalho será disponibilizado somente a partir de 24/02/2026. UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA FACULDADE DE MEDICINA VETERINÁRIA E ZOOTECNIA POTENCIAL IMUNOGÊNICO DA MEMBRANA PLAQUETÁRIA EM SINOVITES INDUZIDAS EM EQUINOS MARIANA FUCHS GOEDEL Botucatu 2024 MARIANA FUCHS GOEDEL POTENCIAL IMUNOGÊNICO DA MEMBRANA PLAQUETÁRIA EM SINOVITES INDUZIDAS EM EQUINOS Trabalho de Conclusão da Residência em Medicina Veterinária apresentado à Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade “Júlio de Mesquita Filho”, Campus de Botucatu, SP, para obtenção do título de Residente em Medicina Veterinária. Área de Cirurgia de Grandes Animais Preceptora Prof. Dr.ª Ana Liz Garcia Alves Botucatu 2024 FICHA CATALOGRÁFICA ELABORADA PELA SEÇÃO TÉC. AQUIS. TRATAMENTO DA INFORM. DIVISÃO TÉCNICA DE BIBLIOTECA E DOCUMENTAÇÃO - CÂMPUS DE BOTUCATU - UNESP BIBLIOTECÁRIA RESPONSÁVEL: ROSANGELA APARECIDA LOBO-CRB 8/7500 Goedel, Mariana Fuchs. Potencial imunogênico da membrana plaquetária em sinovites induzidas em equinos / Mariana Fuchs Goedel. - Botucatu, 2024 Trabalho acadêmico (residência - Medicina Veterinária) - Universidade Estadual Paulista (UNESP), Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Botucatu Orientador: Ana Liz Garcia Alves Capes: 50501070 1. Plasma rico em plaquetas. 2. Sinovite. 3. Equinos. Palavras-chave: Lisado plaquetário; PRP; Sinovite. MARIANA FUCHS GOEDEL POTENCIAL IMUNOGÊNICO DA MEMBRANA PLAQUETÁRIA EM SINOVITES INDUZIDAS EM EQUINOS Trabalho de Conclusão de Residência, apresentado a Universidade Estadual Paulista ‘’Júlio de Mesquita Filho’’, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Botucatu, como parte das exigências para a obtenção do título de Residente em Medicina Veterinária. Área de Concentração: Cirurgia de Grandes Animais Data da defesa: 24/02/2025 BANCA EXAMINADORA ________________________________________ Prof. Dr. Ana Liz Garcia Alves Professora Titular em Cirurgia de Grandes Animais ________________________________________ Prof. Marcos Jun Watanabe Professor Assistente em Cirurgia de Grandes Animais ________________________________________ Prof. Celso Antonio Rodrigues Professor Titular em Cirurgia de Grandes Animais GOEDEL, MARIANA FUCHS. Potencial imunogênico da membrana plaquetária em sinovites induzidas em equinos. Botucatu, 2024. 20 p. Trabalho de Conclusão da Residência em Medicina Veterinária (área de Cirurgia de Grandes Animais) – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Campus de Botucatu, Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”. O plasma rico em plaquetas (PRP) possui diversos fatores de crescimento almejados para aplicação terapêutica, principalmente em casos de osteoartrite. No entanto, o PRP possui fatores que atuam nas vias anabólica, catabólica, pró-inflamatória e anti-inflamatória. Isso se deve, em partes, pelo fato de que a membrana plaquetária expressa antígenos, podendo gerar uma resposta inflamatória nos casos de aplicações alogênicas. Dessa forma, a utilização do lisado plaquetário (LP) compreende uma alternativa de tratamento alogênico, uma vez que nele, a membrana plaquetária é removida e preservado os fatores de crescimento. Portanto, a finalidade deste estudo foi de comparar o uso do PRP autólogo em relação ao LP, após a indução experimental de sinovite aguda através de lipopolissacarídeos (LPS) da membrana plasmática de bactérias gram negativas (0,25 ng por articulação). Para isso, foram utilizados 20 equinos hígidos sendo a sinovite induzida na articulação radiocárpica. Os animais foram divididos em 4 grupos. No grupo basal, foi realizada apenas a artrocentese, sem indução da sinovite. No grupo sinovite, a sinovite foi induzida e administrado 2 mL de solução tampão fosfato-salino (PBS) nos mesmos momentos dos grupos tratados. O grupo PRP e o grupo LP, nos quais foi induzida a sinovite e foi realizado o tratamento após 2 horas da indução. Para avaliação laboratorial, foram colhidas amostras seriadas de líquido sinovial nos momentos 0, 4, 8, 24, 48 horas e 7 dias, além do exame físico individual de cada animal nos mesmos momentos experimentais. Na análise dos resultados do líquido sinovial não foram identificadas diferenças significativas entre grupos para células nucleadas, neutrófilos e proteínas. Em contraponto, foi possível detectar que houve diferença estatística (p<0,05) na comparação entre grupos na concentração de linfócitos, que indicou diferença entre o grupo controle e o grupo PRP. Portanto, o uso do LP não apresentou diferença significativa no processo inflamatório quando comparado ao uso do PRP. Dessa forma, a membrana plaquetária não gerou reações inflamatórias adicionais a sinovite, contrapondo a hipótese do seu potencial imunogênico em aplicações alogênicas de PRP. Palavras-chave: Sinovite, PRP, Lisado plaquetário. GOEDEL, MARIANA FUCHS. Immunogenic potential of the platelet membrane in induced synovitis in horses. Botucatu, 2024. 20 p. Trabalho de Conclusão da Residência em Medicina Veterinária (área de Cirurgia de Grandes Animais) – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Campus de Botucatu, Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”. Platelet-rich plasma (PRP) has a number of growth factors that are targeted for therapeutic application, especially in cases of osteoarthritis. However, PRP has factors that act in the anabolic, catabolic, pro-inflammatory and anti-inflammatory pathways. This is partly due to the fact that the platelet membrane expresses antigens, which can generate an inflammatory response in cases of allogeneic applications. Thus, the use of platelet lysate (PL) is an alternative to allogeneic treatment, since it removes the platelet membrane and preserves the growth factors. Therefore, the aim of this study was to compare the use of autologous PRP with that of PL after experimental induction of acute synovitis using lipopolysaccharides (LPS) from the plasma membrane of gram- negative bacteria (0.25 ng per joint). For this purpose, 20 healthy horses were used and the synovitis was induced in the radiocarpal joint. The animals were divided into 4 groups. In the baseline group, only arthrocentesis was performed, without inducing synovitis. In the synovitis group, synovitis was induced and 2 mL of phosphate-buffered saline (PBS) was administered at the same times as the treated groups. The PRP group and the LP group, in which synovitis was induced and treatment was carried out 2 hours after induction. For laboratory evaluation, serial samples of synovial fluid were taken at 0, 4, 8, 24, 48 hours and 7 days, as well as an individual physical examination of each animal at the same experimental times. In the analysis of the synovial fluid results, no significant differences were identified between groups for nucleated cells, neutrophils and proteins. In contrast, it was possible to detect that there was a statistical difference (p<0.05) in the comparison between groups in the concentration of lymphocytes, which indicated a difference between the control group and the PRP group. Therefore, the use of LP showed no significant difference in the inflammatory process when compared to the use of PRP. Thus, the platelet membrane did not generate additional inflammatory reactions to synovitis, countering the hypothesis of its immunogenic potential in allogeneic PRP applications. Key words: Synovitis, PRP, Platelet lysate. SUMÁRIO 1. INTRODUÇÃO 7 2. REVISÃO BIBLIOGRÁFICA 7 3. MATERIAIS E MÉTODOS 8 3.2. Animais 8 3.3. Artrocentese: 9 3.4. Indução da sinovite aguda: 9 3.5. Processamento do PRP: 10 3.6. Processamento do LP: 11 3.7. Exame geral e específico: 11 3.8. Coleta do líquido sinovial: 11 3.9. Análise do líquido sinovial: 12 3.10. Estatística: 12 4. RESULTADOS 12 5. DISCUSSÃO 15 6. CONCLUSÃO 17 REFERÊNCIAS: 18 1 1 7 1. INTRODUÇÃO Atualmente, a osteoartrite (OA) equina pode ser considerada como um conjunto de desordens caracterizadas por um estágio final comum: deterioração progressiva da cartilagem articular, acompanhada de mudanças na estrutura óssea e de tecidos moles da articulação (MCILWRAITH et al., 2012). A intensidade da inflamação na OA é maior durante a fase inicial (BENITO et al., 2005). A sinovite (inflamação da membrana sinovial), ocorre a partir de lesões no ambiente articular. Este processo desencadeia a liberação de mediadores inflamatórios que contribuem para o processo osteoartrítico, incluindo metaloproteinases (MMP), agrecanases, prostaglandinas, radicais livres, bem como interleucina- 1 e fator de necrose tumoral-α (TNFα) (MCILWRAITH et al., 2012). O plasma rico em plaquetas (PRP) é um volume de plasma autólogo que tem uma concentração de plaquetas acima da linha de base (MARX, 2001). O efeito terapêutico do PRP é decorrente, principalmente, da degranulação dos grânulos α, com a liberação de uma série de fatores de crescimento (BOSCH et al., 2010). A degranulação de grânulos α no sítio da lesão promove o recrutamento de outras plaquetas, leucócitos e proteínas plasmáticas, iniciando o processo inflamatório (ZANDIM, 2012). Diante do exposto, este trabalho objetiva verificar o potencial imunogênico da membrana plaquetária na articulação de equinos com indução experimental de sinovite aguda, através do uso do LP e do PRP halogênicos. 2. REVISÃO BIBLIOGRÁFICA 18 REFERÊNCIAS: AKBARZADEH, S., MCKENZIE, M. B., RAHMAN, M. M., & CLELAND, H. Allogeneic Platelet-Rich Plasma: Is It Safe and Effective for Wound Repair? European Surgical Research, v. 62, n. 1, p. 1–9. S. Karger AG, 2021. Disponível em . Acesso em: 18 set. 2024; BENITO, M. J., VEALE, D. J., FITZGERALD, O., VAN DEN BERG, W. B., & BRESNIHAN, B. Synovial tissue inflammation in early and late osteoarthritis. Annals of the Rheumatic Diseases. v.64, n.9, p.1263–1267, 2005. Disponível em . Acesso em: 18 set. 2024; BERTONE, A. L.; PALMER, J. L; JONES, J. Synovial fluid cytokines and eicosanoids as markers of joint disease in horse. Vet. Surg., Ohio, v.30, n.6, p.528-38, 2001; BOSCH, G., VAN SCHIE, H. T. M., DE GROOT, M. W., CADBY, J. A., VAN DE LEST, C. H. A., BARNEVELD, A., & VAN WEEREN, P. R. 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