RESSALVA Atendendo solicitação do(a) autor(a), o texto completo desta dissertação será disponibilizado somente a partir de 17/03/2027 Campus de Araçatuba - Faculdade de Odontologia RUAN HENRIQUE DELMONICA BARRA Avaliação dos efeitos da suplementação oral com Biotina na progressão e tratamento da periodontite experimental Araçatuba – SP 2025 RUAN HENRIQUE DELMONICA BARRA Avaliação dos efeitos da suplementação oral com Biotina na progressão e tratamento da periodontite experimental Dissertação apresentada à Universidade Estadual Paulista (UNESP), Faculdade de Odontologia de Araçatuba, para obtenção do título de Mestre em Odontologia, Área de Concentração: Periodontia Orientador: Prof. Dr. Juliano Milanezi de Almeida Araçatuba – SP 2025 Catalogação na Publicação (CIP) Diretoria Técnica de Biblioteca e Documentação – FOA / UNESP Barra, Ruan Henrique Delmonica. B268a Avaliação dos efeitos da suplementação oral com Biotina na progressão e tratamento da periodontite experimental / Ruan Henrique Delmonica Barra. – Araçatuba, 2025 43 f. : il.; tab. Dissertação (Mestrado) – Universidade Estadual Paulista (UNESP), Faculdade de Odontologia, Araçatuba Orientador: Prof. Juliano Milanezi de Almeida 1. Biotina 2. Periodontite I.T. 3. Conjuntivo Black D6 CDD 617.64 Claudio Hideo Matsumoto CRB-8/5550 Dedicatória À minha mãe, Karla Terezinha Barra, que sempre foi meu pilar e minha melhor amiga. A senhora, com sua força inabalável, sacrificou seus próprios sonhos para possibilitar a realização dos meus. Enfrentou todos os desafios com coragem e determinação, sempre me proporcionando o melhor. Mesmo distantes fisicamente, seu amor e carinho me alcançaram em todos os momentos. Sua dedicação em cada etapa da minha vida, como ouvinte atenciosa, apoio contínuo, torcedora fervorosa e filha dedicada para minha avó, foi uma fonte de tranquilidade para mim. Sou eternamente grato pela profundidade do seu cuidado, pela sua paciência, por compreender minhas dificuldades e viver meus problemas como se fossem seus. Sua presença me dá confiança para enfrentar qualquer desafio, e seu exemplo de força e resiliência é uma inspiração constante. Obrigado por tudo, a senhora é o meu maior tesouro e minha motivação diária. À memória da minha avó, Tereza Barra, cuja afeição marcou profundamente minha vida. Até o fim afirmava que seu sonho era me formar e assim o fez, mesmo nas dificuldades da doença, sempre encontrou uma forma de me encorajar e demonstrar seu amor. Sua sabedoria, suas lições e seu exemplo de generosidade são tesouros que guardarei para o resto da vida. Sem a senhora, eu nada seria; sua força, determinação e compaixão continuam a me motivar diariamente. Carrego comigo as lembranças dos momentos que passamos juntos, desde as conversas tranquilas na varanda de casa até as orientações valiosas que me guiavam. Seus conselhos de seguir atrás dos meus sonhos ecoam em minha mente. Sua memória vive em meu coração e em cada passo que dou, trazendo-me conforto e inspiração. Este trabalho é uma homenagem à sua influência duradoura em minha vida e ao impacto positivo que teve sobre mim. Agradecimentos Especiais AGRADECIMENTOS ESPECIAIS A Deus por Sua presença permanente e por fortalecer minha fé nos momentos de dificuldade ao longo deste mestrado. Sou grato pela orientação espiritual encontrada no terreiro que foi fundamental para cada conquista, pela proteção através dos meus guias que sempre me acompanharam, pela sabedoria concedida e por iluminar meu caminho com amor, paz e equilíbrio. Ao meu orientador e mentor, Prof. Dr. Juliano Milanezi de Almeida, por ter me acolhido na periodontia desde a graduação e por ter confiado em mim, especialmente ao me orientar no mestrado. No senhor encontrei um amigo, além de um professor. Sua paciência, liderança e sabedoria foram fundamentais para meu crescimento acadêmico e pessoal, e me sinto honrado por ter sido guiado por alguém tão dedicado e humano. Sempre soube enxergar o lado positivo dos desafios, transmitindo confiança e apoio, e me fazendo acreditar no meu potencial mesmo nos momentos de maior dificuldade. A relação de respeito, amizade e companheirismo que construímos nessa caminhada é algo que levarei para a vida. Orgulho-me imensamente de ser seu orientado, e sou grato, não apenas pelos ensinamentos acadêmicos, mas pelos valores de ética, empatia e perseverança que o senhor me transmitiu. Agradeço por tudo que aprendi com o senhor, tanto no aspecto profissional quanto pessoal. Ao Prof. Dr. Edilson Ervolino, por sua disponibilidade e apoio. Sua orientação foi importante na condução deste trabalho, sempre demonstrando paciência, clareza e um compromisso exemplar com o ensino. A forma como o senhor transmite seus vastos conhecimentos, com humildade e dedicação, sempre foi uma grande fonte de inspiração para mim. Agradeço, especialmente, pela contribuição significativa não só para a conclusão deste trabalho, mas também pela parceria com a equipe e por todo o apoio na reta final do mestrado. A sua postura como docente e pesquisador, aliada à sua didática e empatia, me ensina diariamente o valor da dedicação e do respeito pelo aprendizado. Serei eternamente grato pela oportunidade de ter contado com sua orientação. Ao Prof. Dr. Henrique Rinaldi Matheus, por todo o apoio, amizade e ensinamento. Sua amizade foi essencial para que eu superasse os desafios do mestrado com mais leveza e confiança. Além de ser um grande professor, com uma sabedoria ímpar, você sempre se mostrou presente e disposto a me ajudar, seja com conselhos acadêmicos ou pessoais. Agradeço profundamente por tudo o que compartilhou comigo e por estar ao meu lado nesse caminho de crescimento e aprendizado. Mais do que isso, você se tornou uma grande fonte de inspiração Agradecimentos Especiais para mim. Sua dedicação, ética e paixão pelo que faz me motivam a seguir em frente e me fazem querer ser um pouco do que você é – ser capaz de transmitir conhecimento com tanta sabedoria, humanidade e generosidade. Espelho-me em você como profissional e como ser humano, e sei que, se um dia eu alcançar um nível mínimo de sua grandeza, já terei conquistado algo muito significativo. Ao Prof. Dr. Marcelo Coelho Goiato e à Prof. Dra. Daniela Micheline dos Santos, pela orientação e pelos ensinamentos valiosos, desde a graduação até o mestrado. Agradeço pelas contribuições significativas de ambos para o meu desenvolvimento, sempre com dedicação e competência. O apoio constante dos senhores e o compromisso com a excelência foram essenciais para o meu desenvolvimento acadêmico. É um privilégio contar com a experiência e os ensinamentos de ambos no projeto clínico que tive a honra de participar, e sou muito grato por todo o aprendizado proporcionado. Fico extremamente feliz em ter a oportunidade de aprender com a expertise dos senhores e receber o constante apoio de ambos. Ao Prof. Dr. Francisley Ávila Souza e à Prof. Dra. Roberta Okamoto, por aceitarem compor minha banca de Exame Geral de Qualificação do Mestrado. Suas contribuições foram fundamentais para o meu crescimento acadêmico, e a orientação que me ofereceram, com seus valiosos conhecimentos e experiências, enriqueceram ainda mais minha formação. Sou profundamente grato pelo apoio, pelas críticas construtivas e pelo cuidado com que trataram este momento tão importante na minha jornada. Agradeço também por terem dedicado seu tempo e por terem sido tão generosos com suas observações, que certamente contribuirão para o aprimoramento do meu trabalho e para meu desenvolvimento como pesquisador. Ao Prof. Dr. Luiz Guilherme Fiorin, por sua amizade sincera e orientação dedicada. Sua sabedoria, generosidade e excelência como profissional foram essenciais não só para o meu desenvolvimento acadêmico, mas também para o meu crescimento pessoal. Agradeço imensamente por estar sempre ao meu lado, oferecendo apoio, conselhos e, acima de tudo, confiança. Você, além de ser um amigo exemplar, é um profissional cuja dedicação e rigor na pesquisa me inspiram a buscar constantemente a excelência e a me aprimorar. Nossa amizade é um presente que levo comigo para toda a minha jornada, e sou eternamente grato por tudo o que aprendi com você e por todo o incentivo que me dá para ser uma versão melhor de mim mesmo, tanto na pesquisa quanto na vida. Aos meus colegas e amigos de pós-graduação, em especial a Bianca Rafaeli Piovezan, Elisa Mara de Abreu Furquim, Gabriela Carrara Simionato e Otávio Augusto Pacheco Agradecimentos Especiais Vitória, pela colaboração e pelo apoio incondicional nas fases deste trabalho e de outros projetos da nossa equipe. A convivência com vocês foi enriquecedora e fonte de aprendizado. A paciência, os conselhos valiosos e os ensinamentos compartilhados, bem como o ambiente leve no laboratório foram essenciais para meu crescimento. Juntos, aprendi a valorizar ainda mais o caminho da pesquisa e a importância da parceria na busca pelo conhecimento. À minha primeira orientanda de iniciação científica, Ester Oliveira Santos, embora devido à “guarda compartilhada”, por ser, além de uma parceira de pesquisa, uma amiga leal e dedicada. Sua presença se tornou necessária para o grupo e para a minha vida. Agradeço profundamente pela paciência e contribuição na minha caminhada. Não me recordo do início da nossa amizade, mas se transformou em uma conexão sólida e duradoura. Tenho orgulho de vê-la seguir seu caminho na pós-graduação e celebro suas vitórias com a mesma alegria com que celebraria as minhas próprias. Aos alunos de iniciação científica da Disciplina de Periodontia, da equipe do Prof. Juliano Milanezi de Almeida: Beatriz Okuyama, Carol Trogilo, Clara Valério Chung, Gabrielli Batturi, Giovana Lobo Firmo e Layra Bueno Garcia, pelo empenho e dedicação. Vocês foram essenciais no desenvolvimento das pesquisas e no avanço do conhecimento na área. A colaboração de todos foi imprescindível, e sou profundamente grato pelo comprometimento e pela busca insistente pela excelência. Ao Kevin, que me escolheu como seu companheiro, sempre me oferecendo apoio e se tornando um porto seguro. Sua presença firme e seu carinho me impulsionaram a ser uma pessoa melhor, tanto na vida pessoal quanto profissional. A cada desafio enfrentado, você esteve ao meu lado, com paciência e dedicação, acreditando em mim até quando eu mesmo duvidava. Sua força e sabedoria são fontes de inspiração, e sou eternamente grato por ter você ao meu lado, compartilhando sonhos, conquistas e até mesmo as dificuldades. Agradeço por cada gesto de carinho e por cada palavra de incentivo, e sem você, minha jornada seria muito mais difícil. Aos amigos que tive a sorte de encontrar durante a minha jornada em Araçatuba: Amanda, Ana Lívia, Artur, Bianca, Bruna, Gisele, Guilherme, Isadora, Izabela, Jéssica, Larissa, Letícia Antunes, Letícia Gabriella, Letícia Ikejiri, Victor Hugo, Felipe, Vinicius, Eduarda e Vitória, por estarem ao meu lado desde o nosso primeiro encontro. A presença de cada um de vocês foi fundamental para tornar esse percurso mais leve, mais prazerosa e repleta de momentos inesquecíveis. Com o apoio e a amizade de todos, enfrentei os desafios com mais Agradecimentos Especiais confiança e disposição. Sou verdadeiramente grato por cada um de vocês ter compartilhado um pedaço dessa trajetória comigo. Aos meus amigos de infância Domênica, Lara, Marco Antônio e Sarah, por se tornarem parte essencial da minha família. Sou grato pelo apoio em minhas decisões e pela amizade que, apesar da distância, nunca se enfraqueceu ao longo dos anos. Agradeço por serem sempre um refúgio acolhedor e por trazerem alegria à minha vida. Pela compreensão diante das minhas ausências e pela maneira generosa com que celebram minhas conquistas, sem jamais deixar de estar ao meu lado. Ter amigos como vocês, com quem posso contar e dividir tanto os desafios quanto as vitórias, é uma dádiva imensurável. Agradecimentos AGRADECIMENTOS À Direção da Faculdade de Odontologia de Araçatuba – UNESP, em nome do Diretor, Prof. Tit. Alberto Carlos Botazzo Delbem, e Vice-Diretor, Prof. Luciano Tavares Angelo Cintra. À Coordenação do curso de Pós-Graduação em Odontologia, na pessoa de seu Coordenador Prof. Dr. Wirley Gonçalves Assunção e da Vice-Coordenadora Prof. Dra. Roberta Okamoto, pela ajuda dada ao desenvolvimento de um curso de excelência. À Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior – Brasil (CAPES) - Código de Financiamento 001, e CNPq. Aos professores da Faculdade de Odontologia de Araçatuba – UNESP, pela dedicação e ensinamentos proporcionados durante o curso. Aos funcionários da Biblioteca da Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”, Câmpus de Araçatuba, pela colaboração, ensinamentos e por fazerem da biblioteca um lugar agradável e alegre. Em especial à Ana Cláudia Martins Grieger Manzatti, por toda dedicação e paciência com a formatação do trabalho. Aos funcionários da Seção de Pós-Graduação, Valéria de Queiroz Marcondes Zagatto, Cristiane Regina Lui Matos, Lilian Sayuri Mada Pinheiro e demais, pela paciência, ajuda e por estarem sempre disponíveis. Aos funcionários do Departamento de Diagnóstico e Cirurgia, Renato Gomes de Oliveira, Paulo Roberto Gratão e Marco Aurélio de Oliveira Ianner, que sempre estiveram dispostos a dar o melhor. Aos funcionários do Biotério, especialmente ao João, e aos da Seção de Materiais, da Seção de Divisão Técnica Acadêmica, da Seção de Divisão Técnica Administrativa, da Seção de Diretoria de Atividades Auxiliares e da Seção de Diretoria Técnica de Informática. Aos funcionários da STAEPE, Mauricio, Patrick, Carlos e Samuel, por toda ajuda no desenvolvimento das atividades de Graduação e Pós-Graduação. Aos funcionários da Triagem, Esterilização, Distribuição de Materiais, Lavanderia e Limpeza, fundamentais no funcionamento das atividades clínicas. Agradecimentos Aos funcionários da Manutenção, que sempre estiveram à disposição, atendendo prontamente. Aos Vigias, por zelarem pela nossa universidade e cuidarem dela. A todos os funcionários da Faculdade de Odontologia de Araçatuba – UNESP, por proporcionarem o funcionamento e conforto da Instituição. Aos alunos do curso de Graduação da Faculdade de Odontologia de Araçatuba – UNESP, pelo bom convívio e companheirismo. À Comissão de Ética no Uso de Animais – CEUA, pelo apoio e aprovação dos projetos, garantindo a condução ética e responsável das pesquisas realizadas. Aos animais experimentais, minha profunda gratidão e respeito. No mais, expresso minha mais profunda gratidão a todos que contribuíram, direta ou indiretamente, para a realização deste trabalho. Epígrafe “Não fostes feitos para viver como bestas, mas para seguir a virtude e o conhecimento.” Dante Alighieri, Inferno, Canto XXVI Resumo RESUMO Barra RHD. Avaliação dos efeitos da suplementação oral com Biotina na progressão e tratamento da periodontite experimental [dissertação]. Araçatuba: Universidade Estadual Paulista (UNESP), Faculdade de Odontologia; 2025. A periodontite é uma doença inflamatória crônica multifatorial que afeta os tecidos de suporte dos dentes, podendo levar à perda dentária. Dentre os fatores envolvidos na progressão da doença, destaca-se a resposta imunoinflamatória do hospedeiro, que pode ser influenciada por elementos nutricionais. A biotina (vitamina B7) desempenha um papel essencial na homeostase metabólica e na síntese de proteínas estruturais, sendo capaz de modular a síntese de colágeno e processos de remodelação óssea. Este estudo investigou os efeitos da suplementação oral com biotina na progressão da periodontite experimental induzida em ratos, com e sem tratamento mecânico por raspagem e alisamento radicular (RAR). Foram utilizados 100 ratos Wistar distribuídos aleatoriamente em grupos experimentais, que receberam a administração via gavagem de solução de biotina ou água destilada, submetidos à indução da periodontite e tratados com raspagem e alisamento radicular. Os tecidos periodontais foram analisados por microtomografia computadorizada (µCT), análise histométrica, histopatológica, polarização por Picrosírius-red e imunoistoquímica para avaliação de alterações nos tecidos ósseo e conjuntivo. Os resultados indicaram que a suplementação com biotina teve um efeito singelo frente a perda óssea alveolar e favoreceu de forma satisfatória a organização das fibras colágenas, particularmente quando associada ao tratamento mecânico. Os achados sugerem que a biotina pode influenciar no manejo da periodontite, contribuindo positivamente para o reparo do tecido conjuntivo periodontal. Estudos adicionais são necessários para elucidar os mecanismos subjacentes e avaliar sua aplicabilidade clínica. Palavras-chave: biotina; periodontite; raspagem e alisamento radicular. Abstract ABSTRACT Barra RHD. Evaluation of the effects of oral supplementation with Biotin on the progression and treatment of experimental periodontitis [dissertação]. Araçatuba: Universidade Estadual Paulista (UNESP), Faculdade de Odontologia; 2025. Periodontitis is a chronic multifactorial inflammatory disease that affects the supporting tissues of the teeth and can lead to tooth loss. Among the factors involved in the progression of the disease, the host's immunoinflammatory response stands out, which can be influenced by nutritional elements. Biotin (vitamin B7) plays an essential role in metabolic homeostasis and in the synthesis of structural proteins, being able to modulate collagen synthesis and bone remodeling processes. This study investigated the effects of oral biotin supplementation on the progression of experimental periodontitis induced in rats, with and without mechanical treatment by scaling and root planing (SRP). One hundred Wistar rats were randomly distributed into experimental groups, which received administration via gavage of biotin solution or distilled water, submitted to periodontitis induction and treated with scaling and root planing. Periodontal tissues were analyzed by microcomputed tomography (µCT), histometry, histopathology, Picrosirius-red polarization and immunohistochemistry to evaluate bone changes and inflammatory response. The results indicated that biotin supplementation had a simple effect on alveolar bone loss and satisfactorily favored the organization of collagen fibers, particularly when associated with mechanical treatment. The findings suggest that biotin may influence the management of periodontitis, contributing positively to the repair of periodontal connective tissue. Additional studies are needed to elucidate the underlying mechanisms and evaluate its clinical applicability. Keywords: biotin; periodontitis; scaling and root planing. Lista de Figuras LISTA DE FIGURAS Figura 1. Linha do tempo 64 Figura 2. Modelo das regiões de interesse 64 Figura 3. Gráfico da Porcentagem de Osso na Furca (POF) 65 Figura 4. Fotomicrografias da progressão da PE 66 Figura 5. Fotomicrografias dos controles negativos 67 Figura 6. Fotomicrografias dos tratamentos da PE 68 Figura 7. Gráfico da análise de microtomografia computadorizada 69 Figura 8. Fotomicrografias da microtomografia computadorizada 70 Figura 9. Gráfico da porcentagem de fibras amarelo-esverdeadas na furca 71 Figura 10. Gráfico da porcentagem de fibras amarelas avermelhadas na furca 71 Figura 11. Fotomicrografias da análise de Picrosírius-red 72 Figura 12. Fotomicrografias da imunomarcação para TRAP 73 Figura 13. Gráfico da imunomarcação para TRAP 74 Figura 14. Fotomicrografias da imunomarcação para OCN 75 Figura 15. Gráfico da imunomarcação para OCN 76 Lista de Tabelas LISTA DE TABELAS Tabela 1. Porcentagem de osso em furca (POF) 59 Tabela 2. Fração de volume ósseo em furca 59 Tabela 3. Porcentagem de fibras amarelo-esverdeadas na região de furca acima do osso alveolar 60 Tabela 4. Porcentagem de fibras amarelas avermelhadas na região de furca acima do osso alveolar 61 Tabela 5. Imunomarcação para TRAP 62 Tabela 6. Scores do padrão de imunomarcação para TRAP 63 Lista de Abreviaturas e Siglas LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS °C Graus Celsius AF Área total de furca µCT Microtomografia computadorizada AD Água destilada AO Área ocupada por osso EDTA Ácido etilenodiaminotetracético Bio Biotina BR Brasil cGMP Guanosina monofosfato cíclico CONCEA Conselho Nacional de Controle de Experimentação Animal EUA Estados Unidos da América g Grama IL Interleucina IL-1α Interleucina 1 alfa IL-1β Interleucina 1 beta IL-6 Interleucina 6 IL-8 Interleucina 8 kg Quilograma mg Miligrama ml Mililitro OCN Osteocalcina OPG Osteoprotegerina PE Periodontite experimental POF Porcentagem de osso na furca RAR Raspagem e alisamento radicular (RAR) ROI Região de Interesse SASP Fenótipo secretor associado à senescência T-CD4+ Linfócito T auxiliar TRAP Fosfatase ácida resistente ao tartarato μm Micrômetro Sumário SUMÁRIO 1 INTRODUÇÃO 17 2 PROPOSIÇÃO 23 2.1 Objetivos Gerais 23 2.2 Objetivos Específicos 23 3 MATERIAL E MÉTODO 25 3.1 Animais 25 3.2 Cálculo Amostral e Randomização 25 3.3 Grupos Experimentais 26 3.4 Protocolo de Administração de Biotina ou Água Destilada 26 3.5 Sedação e Anestesia 27 3.6 Indução de Periodontite Experimental 27 3.7 Raspagem e Alisamento Radicular 27 3.8 Períodos Experimentais e Obtenção das Amostras 27 3.9 Microtomografia Computadorizada (µCT) da Fração de Volume Ósseo 28 3.10 Processamento Laboratorial 28 3.11 Processamento Imunoistoquímico 29 3.12 Análise dos Resultados 29 3.12.1 Análise Histométrica da POF 29 3.12.2 Análise Histopatológica dos Tecidos Periodontais 30 3.12.3 Análise de microtomografia computadorizada (µCT) da fração de volume ósseo 30 3.12.4 Método de Polarização com Picrosírius-red 31 3.12.5 Análise Imunoistoquímica 31 3.12.6 Análise Estatística 32 4 RESULTADOS 33 4.1 Análise Histométrica da POF 33 4.2 Análise Histopatológica dos Tecidos Periodontais 33 4.3 Análise de microtomografia computadorizada (µCT) da fração de volume ósseo 35 4.4 Análise de Polarização com Picrosírius-red 36 4.5 Análise Imunoistoquímica 37 4.5.1 Padrão de imunomarcação para TRAP 37 4.5.2 Padrão de imunomarcação para OCN 37 5 DISCUSSÃO 38 Sumário 6 CONCLUSÃO 46 REFERÊNCIAS 47 TABELAS E FIGURAS 59 ANEXO 77 17 1 INTRODUÇÃO Dentre as doenças periodontais, a periodontite é a doença inflamatória crônica mais comum, ocorrendo em um segmento considerável da população adulta, e envolve a inflamação e a destruição dos tecidos de suporte do dente, como o osso alveolar, o ligamento periodontal e o cemento.1-4 Tal doença resulta na destruição e degradação dos tecidos periodontais por meio da ação de substâncias nocivas liberadas pelos microrganismos periodontopatogênicos, juntamente com a ação inflamatória proveniente da resposta imunológica do paciente, podendo ocasionar perda óssea alveolar e, ainda mais agravante, a perda do elemento dental.4-6 A periodontite tem uma etiologia complexa, atuando em vários níveis: ao nível microbiano, baseada na presença de comunidades microbianas disbióticas com potencial para inflamação destrutiva; ao nível do hospedeiro, com base em fatores genéticos que podem predispor ou proteger contra doenças; e ao nível de fatores ambientais e estado de saúde sistêmico, que modificam a resposta inata do hospedeiro em direção protetora ou destrutiva. Consequentemente, a disbiose por si só pode não necessariamente desenvolver a periodontite, mas pode iniciar a doença no contexto de outros fatores de risco associados ao genótipo do hospedeiro, como o estresse, a dieta ou o comportamento de risco, exemplificado pelo tabagismo.7-10 A disbiose da microbiota periodontal significa um desequilíbrio na abundância relativa ou na influência de espécies microbianas, as quais desempenham papéis distintos que se sinergizam para formar uma entidade patogênica, podendo causar doença em tecidos orais ou extraorais de indivíduos suscetíveis.7,8 Embora uma base genética para a periodontite seja apoiada por estudos com gêmeos e pela agregação familiar de formas graves da doença, a implicação de genes específicos identificados – como IL-1, IL-6, TNF-α, FCGR2A, C5, CD14, WNT5A – é discutível. Essa incerteza provavelmente é atribuída ao fato de que a periodontite crônica é uma doença poligênica, na qual múltiplos genes contribuem cumulativamente para o risco geral da desordem, influenciando a resposta imune do hospedeiro e a composição estrutural da microbiota.11-13 Mas não são somente as substâncias liberadas pelos microrganismos que causam a inflamação e a consequente destruição dos tecidos periodontais; a resposta imune e a forma como todo o sistema de defesa do hospedeiro responde à disbiose influenciam diretamente a quantidade de destruição causada pela periodontite.7,8 Uma de suas características é o acúmulo maciço de neutrófilos, que podem ser encontrados no tecido conjuntivo gengival, no epitélio juncional e, especialmente, na bolsa periodontal, onde constituem a esmagadora 18 maioria dos leucócitos recrutados. Qualquer desvio da atividade normal dos neutrófilos causa a interrupção da homeostase do tecido periodontal, levando a formas distintas da doença, desde a periodontite de início precoce em crianças com defeitos congênitos até a periodontite crônica em adultos.14,15 Nessa condição, a literatura revela que os neutrófilos podem causar a destruição do tecido periodontal por meio da liberação de enzimas degradativas ou substâncias citotóxicas, como, por exemplo, espécies reativas de oxigênio. Também é discutida a capacidade dos neutrófilos de induzir a reabsorção óssea osteoclástica por meio da expressão de RANKL ligado à membrana, mas apenas se estiverem próximos ao osso.16,17 Os neutrófilos também podem mediar efeitos destrutivos indiretos, promovendo o recrutamento quimiotático de células T CD4+ produtoras de interleucinas (IL), as quais foram relacionadas às condições autoimunes e inflamatórias. Estudos mostram que as células T induzem um infiltrado inflamatório rico em células B, que não possuem um papel totalmente definido na periodontite, embora se pense que a resposta de anticorpos não seja protetora, visto que a capacidade das células B de produzir citocinas inflamatórias e metaloproteinases de matriz pode contribuir ainda mais para o dano tecidual. Logo, a inibição da inflamação parece ser fundamental para o tratamento da periodontite.18,19 É interessante ressaltar que o envelhecimento é outro fator associado a um declínio na regulação e função imunológica, o que, por sua vez, pode predispor ao aumento da suscetibilidade à periodontite.9 Após o natural encurtamento dos telômeros devido às sucessivas divisões celulares, as células somáticas normais entram em uma parada do crescimento chamada senescência celular, que ocorre devido à replicação incompleta do DNA.20 Agora, essas células senescentes secretam uma gama de proteínas solúveis, incluindo fatores de crescimento, proteases, citocinas, quimiocinas e componentes da matriz extracelular, dependendo do tipo de célula e do ambiente. As interleucinas IL-1α, IL-1β, IL-6 e IL-8 são importantes fatores SASP (fenótipo secretor associado ao estado senescente). Esses SASP são secretados principalmente para funcionar como uma ferramenta de comunicação com células imunes vizinhas e facilitar a depuração de células senescentes. Tais células são importantes durante o reparo tecidual e são altamente antigênicas, sendo eliminadas pelo sistema imunológico.21 No entanto, com o envelhecimento, esse equilíbrio delicado é perturbado, e as células senescentes se acumulam nos tecidos, resultando em estresse inflamatório crônico por meio de um SASP persistente, que agora induz um ambiente pró-inflamatório. O aumento dos fibroblastos senescentes do ligamento periodontal, associados a um perfil de expressão gênica 19 pró-inflamatório, foi apontado pela literatura e associado à atividade celular in vitro reduzida.21,22 Uma vez compreendidas estas condições, vale destacar que as terapias para o tratamento das doenças periodontais rotineiramente incluem manejos cirúrgicos, não cirúrgicos e terapias coadjuvantes com o uso de medicamentos, sendo que todas possuem como principal objetivo o controle do biofilme, para devolver a homeostase entre os microrganismos e o hospedeiro, eliminando assim a disbiose e controlando a inflamação. Hoje em dia, o tratamento mecânico convencional, que consiste na raspagem e alisamento radicular (RAR) realizados com instrumentos manuais e/ou ultrassônicos, é considerado o padrão ouro na terapia periodontal.23,24 Observando de uma maneira mais ampla, percebe-se que o tratamento periodontal se tornou mais focado e agora visa reduzir todos os achados clínicos indesejáveis para um nível biologicamente e individualmente tão baixo quanto possível.7 Em geral, isso é obtido por: tratar as doenças periodontais, como infecções oportunistas modificadas por respostas inflamatórias do hospedeiro; controlar a inflamação e infecção; reduzir os fatores predisponentes; controlar os fatores modificadores; e fornecer avaliação contínua e cuidados periodontais de suporte.25,26 Entretanto, esse modelo de terapia atual perde potencial por ser extremamente dependente dos cuidados do paciente. Aqueles pacientes que se adequam a um modelo educacional de higiene bucal e cuidados periodontais conseguem ter sucesso na terapia periodontal, a qual, embora seja muito bem-sucedida para estes, para outros é totalmente insatisfatória e não produz os resultados clínicos desejados para a saúde periodontal.27,28 Sendo assim, as doenças periodontais são consideradas doenças complexas e, embora as evidencias demonstrem sua grande relação com bactérias, possuem resultados de tratamento variáveis, por dependerem da resposta imunoinflamatória do paciente, a qual se sugere ser regulada por fatores ambientais e genéticos específicos do indivíduo.28 Após reconhecer que as doenças periodontais são doenças crônicas multifatoriais e complexas, fica claro que fatores como estilo de vida, nível de escolaridade e fatores socioeconômicos podem ter um impacto significativo em sua manifestação clínica.9 Dentro desse contexto, a periodontia personalizada é uma abordagem inovadora que leva em conta as diferenças individuais nos genes, ambientes, estilo de vida e comportamento, visando analisar o paciente de forma individual, e não apenas submetendo o indivíduo a um protocolo padrão de tratamento.28-30 A literatura vem relacionando o sucesso da terapia com condições provenientes do próprio hospedeiro, sendo uma delas a dieta.28,31 Nesse cenário, 20 merecem destaque os estudos com suplementos nutricionais, os quais têm sido reconhecidos como um dos maiores avanços médicos na atualidade.32 Posto que a contribuição da dieta e nutrição, e, em particular, vitaminas e outros micronutrientes, tem sido suspeitada por décadas, só recentemente é que seu papel na fisiologia humana, e o impacto de suas deficiências sobre a saúde e a doença periodontal, têm sido estudados em detalhes.33 A maioria desses micronutrientes tem sido associada à prevalência de periodontite. No entanto, o papel que desempenham na melhoria dos resultados da terapia periodontal permanece pouco estudado. Muitos desses micronutrientes podem influenciar numerosas funções biológicas, incluindo imunidade inata e adaptativa, bem como a cicatrização de feridas, mostrando que há uma clara necessidade de avaliar a deficiência e a suplementação de micronutrientes em pacientes no manejo periodontal personalizado.31-34 Dadas essas circunstâncias, vale ressaltar ainda que o uso de suplementos alimentares ricos em micronutrientes para aumentar a regeneração tecidual e melhorar o desempenho da atividade física é muito popular, especialmente na população que busca um estilo de vida mais saudável.35 Alguns dos efeitos atribuídos a esses suplementos estão relacionados a tecidos e processos fisiológicos que podem desempenhar um papel relevante na cicatrização e regeneração periodontal, como a biotina (Bio), uma vitamina pertencente ao complexo B. Um estudo clínico randomizado em humanos, realizado em 2014, demonstrou a melhora na saúde periodontal, através da avaliação do índice gengival de Loe e Silness e da mobilidade dentária, de pacientes que receberam a suplementação com bebidas que continham essa vitamina em comparação com o grupo que não teve intervenção, após o tratamento periodontal cirúrgico.36 A biotina, também conhecida como vitamina H ou vitamina B7, é uma vitamina hidrossolúvel essencial para o bom funcionamento do corpo, relacionada à produção de glicogênio e proteínas, sendo importante para manter a saúde da pele e dos cabelos, garantir energia nas células e manter a produção de proteínas.37-40 Estudos recentes têm demonstrado que essa vitamina possui um potencial favorável para a manutenção óssea, por meio da estimulação da guanilato ciclase solúvel (GCS).41-46 Em doses farmacológicas, a B7 pode ativar diretamente a forma nativa do GCS, promovendo a produção de GMP cíclico (cGMP), um ativador de proteínas envolvidas na mediação de estrógeno em osteoclastos e osteoblastos. Em estudos com roedores e uma ampla administração oral de biotina, foi demonstrado que a ingestão de biotina aumenta os níveis de GCS.43-46 Como a biotina, em altas doses, é clinicamente bem tolerada47, pode ser considerada uma estratégia válida para auxiliar na densidade óssea, que é prejudicada em situações de doença periodontal. 21 Estudos com aves de corte ressaltam a importância da biotina para a manutenção e qualidade do tecido ósseo.48 Nesses estudos comparativos, a dieta suplementada com biotina promoveu uma maior qualidade nos ossos das aves, quando analisados histomorfometricamente, comparando seu tamanho, densidade e qualidade da modelagem óssea.48,49 Padrões de modelagem cortical e resultados da histomorfometria na região medial da diáfise da tíbia sugerem que a deficiência de biotina altera a atividade formadora de osso em frangos de corte, o que pode contribuir para o desenvolvimento de deformidades esqueléticas.49 Ainda sobre o efeito da biotina no tecido ósseo, um estudo de 2015 elucida sua capacidade na adesão de células neoformadoras de osso, como os osteoblastos.50 Scaffolds foram preparados com um sistema de ligação de biotina para analisar a adesão de células semelhantes a osteoblastos. Os ensaios histológicos revelaram que este grupo teve a adesão e proliferação de células aumentadas significativamente, quando comparado aos demais grupos. Nas análises imuno-histoquímicas, foi possível observar a maior diferenciação osteoblástica de células MG-63, além da grande expressão de colágeno tipo I, osteopontina e expressão gênica de fosfatase alcalina. A produção aumentada de osteocalcina (OCN) pode ser observada em sete dias nos grupos com o sistema ligante de biotina, elucidando que essa vitamina tem excelentes propriedades biológicas, adequadas para uso na terapia de tecidos ósseos.50 Ademais, a literatura tem demonstrado que a capacidade de redução relacionada à idade na síntese de colágeno pode ser tratada pela administração de peptídeos de colágeno orais, juntamente com outros micronutrientes específicos da pele, como é o caso da biotina, o que afeta diretamente a senescência, desacelerando o envelhecimento celular.51 Essa vitamina desempenha um papel crucial na síntese e maturação do colágeno, o qual é fundamental para a integridade e funcionalidade do tecido conjuntivo.52 A biotina atua como um cofator em diversas reações enzimáticas envolvidas no metabolismo de macronutrientes, incluindo a síntese de aminoácidos como glicina e prolina, que são cruciais para a formação da estrutura do colágeno.53 Além disso, este micronutriente participa da ativação de enzimas da família das carboxilases, responsáveis pela biotransformação de compostos essenciais para a formação do colágeno, como o ácido ascórbico, que atua como um potente antioxidante e cofator necessário para a hidroxilação de prolina e lisina — processos vitais para a estabilização da tripla hélice do colágeno.54 A deficiência em biotina pode resultar em uma diminuição na síntese de colágeno,55 levando ao comprometimento da integridade do tecido conjuntivo, que desempenha um papel fundamental na saúde e manutenção do periodonto.56 22 A integridade do tecido conjuntivo periodontal é fundamental para a resistência e estabilidade dos dentes, pois fornece suporte estrutural e nutricional, além de servir como meio de comunicação entre as células imunológicas e os tecidos adjacentes.57 Este tecido, rico em colágeno, confere robustez e elasticidade, facilitando a adaptação das estruturas periodontais às forças oclusais durante a mastigação. A presença de fibroblastos também é vital para a cicatrização e regeneração em resposta a lesões ou inflamações, como as observadas na doença periodontal.56 A degradação do tecido conjuntivo, frequentemente associada a processos inflamatórios, pode resultar em comprometimento da função periodontal, perda de suporte dental e, consequentemente, em mobilidade dentária e edentulismo, tornando sua manutenção essencial para a preservação da integridade da saúde periodontal e prevenção das doenças periodontais.58,59 Embora o número de publicações investigando o efeito do uso de suplementos alimentares esteja aumentando, seus efeitos nos tecidos periodontais são pouco conhecidos. Assim, a compreensão dos efeitos da biotina como suplemento alimentar voltado para a manutenção da qualidade periodontal, tanto em situações de normalidade quanto de doença, se faz necessária. Ante o exposto, é notável que a literatura revela o potencial da suplementação vitamínica com biotina em mecanismos que podem atuar sobre a doença periodontal e influenciar na dinâmica do periodonto. Seu efeito positivo para o tecido ósseo e conjuntivo, de forma geral, é evidenciado pela bibliografia, mas estudos que direcionem sua ação na região periodontal, como no osso alveolar, por exemplo, ainda não foram realizados. Portanto, o objetivo do presente estudo é avaliar os efeitos de organismos suplementados com biotina em situações de normalidade, de doença periodontal ativa e de doença periodontal tratada. 46 6 CONCLUSÃO Diante do exposto e considerando as limitações do presente estudo, é possível concluir que a suplementação oral com biotina apresenta potencial modulador positivo na progressão e tratamento da periodontite experimental induzida em ratos, especialmente no que diz respeito ao tecido conjuntivo da região da furca, uma vez que os animais suplementados com essa vitamina apresentaram maior maturação das fibras colágenas. 47 REFERÊNCIAS 1. Pihlstrom BL, Michalowicz BS, Johnson NW. Periodontal diseases. Lancet. 2005;366(9499):1809-20. doi: 10.1016/S0140-6736(05)67728-8 2. Madhavi B, Prasanna JS, Rani KR. Comparison of pre- and postsurgical periodontal therapeutic effects on serum sclerostin in confirmed periodontitis cases. J Oral Res Rev. 2023;15(1):8-13. doi: 10.4103/jorr.jorr_12_22 3. 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