VITOR HUGO FARINA 

EFEITOS DA Calcarea phosphorica 6CH E DO 
ALENDRONATO NA REPARAÇÃO DE LESÃO ÓSSEA EM 

RATAS OVARIECTOMIZADAS 

2010



VITOR HUGO FARINA 

EFEITOS DA Calcarea phosphorica 6CH E DO ALENDRONATO NA 
REPARAÇÃO DE LESÃO ÓSSEA EM RATAS OVARIECTOMIZADAS 

Tese apresentada à Faculdade de Odontologia de São José dos 
Campos, Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”, 
como parte dos requisitos para obtenção do título de Doutor, pelo 
Programa de Pós-Graduação em BIOPATOLOGIA BUCAL, Área 
Patologia.

Orientadora Profa. Dra. Adriana Aigotti Haberbeck Brandão 

 
 
 

São José dos Campos
2010



Apresentação gráfica e normalização de acordo com: 
Alvarez S, Coelho DCAG, Couto RAO, Durante APM. Guia prático para 
Normalização de Trabalhos Acadêmicos da FOSJC. São José dos 
Campos: FOSJC/UNESP; 2008 
 
 

 
F226a Farina, Vitor Hugo.  

    Efeitos da Calcarea phosphorica 6CH e do alendronato na reparação da 
lesão óssea em ratas ovariectomizadas /  Vitor Hugo Farina. __ São José 
dos Campos : [s.n.], 2010 
   140f. : il.  

 
    Tese (Doutorado em Biopatologia Bucal ) – Faculdade de Odontologia de 
São Jose dos Campos, Universidade Estadual Paulista, 2010. 

 Orientador: Prof. Dr. Adriana Aigotti Haberbeck Brandão 
 

 
 

 1. Osteoporose. 2. Difosfonatos. 3. Alendronato. 4. Calcarea phosphorica. 5. 
Alopatia. 6. Homeopatia. I. Brandão, Adriana Aigotti Haberbeck. II. 
Universidade Estadual Paulista. Faculdade de Odontologia de São José dos 
Campos. III. Título 
 

tD12 
 

Ficha catalográfica elaborada pelo Serviço Técnico de Biblioteca e Documentação da 
Faculdade de Odontologia de São José dos Campos – UNESP 

 

AUTORIZAÇÃO 
 

Autorizo a reprodução e divulgação total ou parcial deste  trabalho, por 
qualquer meio convencional ou eletrônico, desde  que citada a fonte.  
 
São José dos Campos, 12 de Maio de 2010 .  
Assinatura :  
E-mail: odontofarina@uol.com.br 



BANCA EXAMINADORA 

Profa. Dra. Adriana Aigotti Haberbeck Brandão (Orientadora) 

Faculdade de Odontologia de São José dos Campos 

Universidade Estadual Paulista - UNESP 

Profa. Dra. Janete Dias Almeida 
Faculdade de Odontologia de São José dos Campos 

 Universidade Estadual Paulista - UNESP 

Profa. Dra. Juliana Mazzonetto Teófilo  

Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto  

Universidade de São Paulo - USP 

 

Profa. Dra. Giselle Segnini Senra 

Profa. Dra. Ana Lia Anbinder 
Faculdade de Odontologia de São José dos Campos 

Universidade Estadual Paulista - UNESP 

 

 

São José dos Campos, 20 de julho de 2010 

 

 



DEDICATÓRIA 

 

À minha família e a todas as pessoas de meu 

relacionamento, parentes, amigos, colegas, professores, 

que durante estes anos me acompanharam de perto, ou 

às vezes à distância, dando apoio, aconselhando e 

incentivando.  

Que todo o empenho dedicado a este estudo seja mais um 

passo em busca do conhecimento e possa trazer alguma 

contribuição ao desenvolvimento da ciência. 

 

 



AGRADECIMENTO ESPECIAL 

 

Agradeço de modo muito especial à minha orientadora, 

Professora Doutora Adriana Aigotti Haberbeck Brandão, 

por ter sido agraciado com sua orientação, agora pela 

segunda vez. Seu acolhimento sempre carinhoso foi 

fundamental e serviu como novo estímulo para seguir em 

frente. Sua competência profissional aliada a uma 

disponibilidade quase ilimitada em todas as fases do 

curso certamente ficarão em minha lembrança. Para 

mim estes anos de convivência foram muito agradáveis e 

positivamente marcantes. Por isso eu desejo externar o 

meu MMUITO OBRIGADO e que Deus a abençoe sempre. 

 



AGRADECIMENTOS 

 

À Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita 

Filho”, na pessoa do Diretor da Faculdade de 

Odontologia de São José dos Campos, Professor Adjunto 

José Roberto Rodrigues e do vice-diretor Professor Doutor 

Carlos Augusto Pavanelli. 

 

Ao Professor Adjunto Luiz Antonio Guimarães Cabral, que 

ao longo destes anos de mestrado e doutorado, sempre se 

mostrou interessado em transmitir sua experiência e 

conhecimento. Sua figura marcante certamente deixará 

saudades. Muito obrigado. 

 

À Professora Adjunta Janete Dias Almeida, sempre 

presente desde meu ingresso no mestrado, por sua 

espontaneidade e alegria no relacionamento e por seu 

apoio nos momentos difíceis.  

 

À Professora Titular Yasmin Rodarte Carvalho, pela 

paciência com que transmite seus conhecimentos, 

procurando tornar simples o que é complexo. 

 



Ao Professor Titular Luiz Cesar de Moraes, e a toda  equipe 

da disciplina de radiologia que gentilmente 

disponibilizaram os equipamentos radiológicos durante 

a fase experimental deste trabalho. 

 

À minha colega e companheira de biotério Ana Lourdes 

da Silva Machado, pela amizade, por sua ajuda e pelo 

agradável convívio durante toda a fase experimental 

deste trabalho. 

 

À colega de pós-graduação Ana Paula de Lima, por sua 

dedicação e inestimável ajuda na elaboração da análise 

estatística desta tese. 

 

À Doutora Giselle Segnini Senra, pela disponibilidade, 

paciência e interesse em transmitir seus conhecimentos de 

forma tão didática. 

 

Ao Professor Assistente Ivan Balducci , pelo valioso apoio e 

orientação durante a elaboração da análise estatística. 

 

À Diretora Técnica de Serviços de Biblioteca e 

Documentação Silvana Alvarez, pela competência e 

presteza na revisão normativa, e a todos os funcionários 

da biblioteca que pacientemente colaboraram com o 

levantamento bibliográfico deste trabalho. 



Aos funcionários do biotério Lourival Jacob, Antônio 

Domingos Sávio Barbosa Maia Vasconcelos  e Marco 

Antônio Corrêa Alfredo,  pelo profissionalismo e 

colaboração na fase experimental desta pesquisa. 

 

Aos colegas de pós-graduação Celina Faig Lima e Luis 

Felipe das Chagas e Silva de Carvalho, pelos laços de 

amizade e coleguismo que se fortaleceram durante estes 

anos e a todos os colegas que de alguma forma 

contribuíram para a concretização deste trabalho. O 

meu muito obrigado. 

 

Aos animais experimentais que tiveram suas vidas 

sacrificadas em benefício da ciência. Aprendi a admirá-

los e respeitá-los ainda mais. 

 

E intencionalmente por último, a Deus, a quem devo 

tudo. Ele me deu força, coragem e proporcionou esta 

enorme riqueza de experiências. Muito obrigado! 

 

 

 

 

 

 

 



EPÍGRAFE 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

“Deus é o invisível evidente.” 

 

                                                             Victor Hugo 



SUMÁRIO
 

 

 

 

RESUMO...................................................................................................11 

LISTA DE FIGURAS.................................................................................12 

LISTA DE TABELAS................................................................................14 

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS...................................................16 

INTRODUÇÃO..........................................................................................17 

REVISÃO DA LITERATURA....................................................................19 

2.1 Tecido ósseo......................................................................................19 

2.2 Remodelação óssea..........................................................................21 

2.3 Osteoporose......................................................................................26 

2.4 Reparo ósseo.....................................................................................31 

2.5 Bisfosfonatos.....................................................................................34 

2.6 Alendronato.......................................................................................38 

2.7 Homeopatia........................................................................................42 

2.8 Calcarea phosphorica.......................................................................46 

3 PROPOSIÇÃO.......................................................................................50 

4 MATERIAL E MÉTODO.........................................................................51 

4.1 Manuseio geral dos animais.............................................................51 

4.2 Anestesia............................................................................................52 

4.3 Ovariectomia......................................................................................52 

4.4 Execução da lesão óssea e tratamento...........................................54 

4.5 Sacrifício dos animais.......................................................................57 

4.6 Comprovação da ovariectomia........................................................57 

4.7 Avaliação da densidade óptica das tíbias.......................................57 

4.8 Análise histológica............................................................................59 

4.9 Avaliação histomorfométrica das tíbias..........................................60 

4.10 Análise estatística...........................................................................64 



5 RESULTADO.........................................................................................66 

6 DISCUSSÃO........................................................................................106 

7 CONCLUSÃO......................................................................................122 

8 REFERÊNCIAS....................................................................................123 

ANEXO A................................................................................................138 

ANEXO B................................................................................................139 

ABSTRACT.............................................................................................140 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 



Farina VH. Efeitos da Calcarea phosphorica 6CH e do alendronato na 
reparação de lesão óssea em ratas ovariectomizadas [tese]. São José 
dos Campos: Faculdade de Odontologia de São José dos Campos, 
Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”; 2010. 
  
 
 
                                                            

RESUMO

A osteoporose é uma das doenças mais prevalentes entre os idosos. Há 
na literatura poucos relatos sobre a ação de medicamentos homeopáticos 
no tratamento da osteoporose e na reparação óssea na vigência desta 
doença. O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação do medicamento 
homeopático Calcarea phosphorica 6CH (CP) em comparação ao 
medicamento alopático alendronato (A) na reparação óssea em ratas 
ovariectomizadas. Foram utilizados quatro grupos de 30 ratas, sendo três 
grupos submetidos à ovariectomia (OVZ) e um à cirurgia sham. Após 60 
dias foi realizada uma lesão monocortical nas tíbias de todas as ratas e 
iniciados os tratamentos: I- OVZ/tratado com A (1,2 mg/ml, três vezes por 
semana/animal), II- OVZ/tratado com CP (2 glóbulos/1 ml 
água/dia/animal), III- OVZ/tratado com água (1 ml/dia/animal) e IV- sham 
tratado com água (1 ml/dia/animal). Os animais (n= 6) foram sacrificados 
após 3, 6, 10, 17 e 28 dias da confecção da lesão óssea. As tíbias foram 
fixadas em formol 10%, submetidas à análise radiográfica, descalcificadas 
e submetidas à análise histológica/histomorfométrica. Os resultados 
mostraram que CP estimulou proliferação tecidual intensa com formação 
de calo mais volumoso que os demais grupos nas fases iniciais da 
reparação, no entanto este calo mostrou grande quantidade de tecido 
mole que foi rapidamente remodelado. A quantidade proporcional de 
tecido ósseo no calo variou entre os diferentes tratamentos, mas a 
quantidade de osso ao final do experimento foi semelhante entre os 
grupos. Enquanto com A formou-se inicialmente bastante osso que 
mostrou resistência à remodelação, com CP houve pouca formação 
óssea inicial, que aumentou até o final do experimento. Concluiu-se que a 
Calcarea phosphorica estimulou a reparação óssea por um mecanismo de 
ação diferente do alendronato e que o alendronato foi a melhor opção 
para tratar lesões ósseas sendo a Calcarea phosphorica melhor que a 
ausência de tratamento.  
 
 
 
Palavras-chave: Osteoporose. Difosfonatos. Alendronato. Calcarea phosphorica. 
Alopatia. Homeopatia. 



LISTA DE FIGURAS 

Figura 1 -  Sequência cirúrgica da ovariectomia …..........................54 

Figura 2 -  Sequência cirúrgica do defeito ósseo..............................56 

Figura 3 -  Tomada radiográfica da tíbia...........................................58 

Figura 4 -  Delimitação da área A......................................................61 

Figura 5 -  Delimitação da área B......................................................61 

Figura 6 -  Seleção das trabéculas....................................................62 

Figura 7 -  Trabéculas isoladas.........................................................63 

Figura 8 -  Gráfico de densidade óptica dos grupos S e O...............68 

Figura 9 -  Gráfico densidade óptica dos grupos A, O e CP.............72 

Figura 10 -  Gráfico da área de preenchimento do defeito ósseo dos 

grupos S e O....................................................................77 

Figura 11 - Gráfico da área de preenchimento do defeito ósseo dos 

grupos A, O e CP.............................................................81 

Figura 12 -  Gráfico da área de osso neoformado na área de 

preenchimento dos defeitos ósseos dos grupos S e O ..85 

Figura 13 -  Gráfico da área de osso neoformado na área de 

preenchimento dos defeitos ósseos dos grupos A, O e 

CP....................................................................................89 

Figura 14 -  Aspecto da área da lesão 3 dias após a confecção do 

defeito ósseo....................................................................92 

Figura 15 -  Aspecto da área da lesão 6 dias após a confecção do 

defeito ósseo. ..................................................................95 

Figura 16 -  Aspecto da área da lesão 10 dias após a confecção do 

defeito ósseo....................................................................98 

Figura 17 -  Aspecto da área da lesão 10 dias após a confecção do 

defeito ósseo (maior aumento)........................................99 



Figura 18 -  Aspecto da área da lesão 17 dias após a confecção do 

defeito ósseo..................................................................102 

Figura 19 -  Aspecto da área da lesão 17 dias após a confecção do 

defeito ósseo (maior aumento)......................................103 

Figura 20 -  Aspecto da área da lesão 28 dias após a confecção do 

defeito ósseo..................................................................105 

 

 

 



LISTA DE TABELAS 

Tabela 1 -  Estatística descritiva dos valores de densidade óptica dos 

grupos O e S....................................................................67 

Tabela 2 - Resultado da análise ANOVA para os dados de 

densidade óptica dos grupos O e S.................................69 

Tabela 3 -  Formação de grupos homogêneos para densidade óptica 

dos grupos O e S.............................................................70 

Tabela 4 -  Estatística descritiva dos valores de densidade óptica dos 

grupos A, CP e O.............................................................71 

Tabela 5 - Resultado da análise ANOVA para os dados de 

densidade óptica dos grupos A, CP e O..........................73 

Tabela 6 -  Formação de grupos homogêneos para densidade óptica 

dos grupos A, CP e O......................................................74 

Tabela 7 -  Estatística descritiva dos valores de área de 

preenchimento do defeito ósseo dos grupos O e S.........76 

Tabela 8 -  Resultado da análise ANOVA para os dados de área de 

preenchimento do defeito ósseo dos grupos O e S.........78 

Tabela 9 -  Formação de grupos homogêneos para a área de 

preenchimento do defeito ósseo dos grupos O e S.........79 

Tabela 10 -  Estatística descritiva dos valores de área de 

preenchimento do defeito ósseo dos grupos A, CP e O 

.........................................................................................80 

Tabela 11 -  Resultado da análise ANOVA para os dados de área de 

preenchimento do defeito ósseo dos grupos A, CP e 

O......................................................................................82 



Tabela 12 -  Formação de grupos homogêneos para a área de 

preenchimento do defeito ósseo dos grupos A, CP e 

O......................................................................................83 

Tabela 13 -  Estatística descritiva dos valores de área de osso 

neoformado na área de preenchimento do defeito ósseo 

dos grupos O e S.............................................................84 

Tabela 14 -  Resultado da análise ANOVA para os dados de área de 

osso neoformado na área de preenchimento do defeito 

ósseo dos grupos O e S..................................................86 

Tabela 15 -  Formação de grupos homogêneos para área de osso 

neoformado na área de preenchimento do defeito ósseo 

dos grupos O e S.............................................................87 

Tabela 16 -  Estatística descritiva dos valores área de osso 

neoformado na área de preenchimento dos defeitos 

ósseos dos grupos A, CP e O .........................................88 

Tabela 17 -  Formação de grupos homogêneos para a área de osso 

neoformado na área de preenchimento dos grupos A, CP 

e O...................................................................................90 



LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS 

 

BMU = Unidade multicelular básica 

IFN-� = Interferon-gama  

IGF-II = fator 2 de crescimento símile a insulina 

IL-1 = Interleucina 1 

IL-3 = Interleucina 3 

IL-4 = Interleucina 4 

IL-6 = Interleucina 6 

IL-10 = interleucina 10 

IL-11 = Interleucina 11 

IL-18 = Interleucina 18 

GM-CSF = Fator estimulador de colônias de granulócitos macrófagos 

M-CSF = Fator estimulador de colônias de macrófagos 

OPG = Osteoprotegerina 

OVZ = Ovariectomia 

PDGF = Fator de crescimento derivado de plaquetas 

PGE2 = Prostaglandina E2 

PTH = Hormônio paratireoidiano 

RANK = Receptor ativador de fator nuclear kappa � 

RANKL = RANK ligante 

SHAM = Grupo de ratas falso ovariectomizadas 

TGF-� = Fator transformador de crescimento beta 

TNF = Fator de necrose tumoral 

TNF-� = Fator de necrose tumoral alfa 

TNF-� = Fator de necrose tumoral beta 

TNFR = Receptor de fator de necrose tumoral 

1,25(OH)2D3 = 1,25-dihidroxivitamina D3 



1 INTRODUÇÃO 

O aumento da expectativa de vida da população mundial 

enfatiza a necessidade de medidas de prevenção contra os males do 

envelhecimento. Os estudos de novos tratamentos que proporcionem 

melhor qualidade de vida ao idoso representam uma preocupação atual, 

sobretudo por parte dos profissionais de saúde. 

Entre os males do envelhecimento destaca-se a 

osteoporose, que é uma doença metabólica óssea frequentemente 

associada a custos econômicos significativos relacionados à 

hospitalização, cuidados ambulatoriais, institucionalização, incapacidades 

e mortes prematuras. Como complicação comum resultante desta doença, 

podemos citar as fraturas decorrentes da perda de massa óssea.

A OMS estima que a osteoporose afete cerca de 200 

milhões de mulheres em todo o mundo, sendo a doença óssea metabólica 

de maior prevalência na população mundial. No Brasil, dadas as 

dificuldades que cercam a realização de estudos epidemiológicos, ainda 

não existem números confiáveis sobre a prevalência da osteoporose. 

Atualmente, em nosso país, a população idosa acima dos 60 anos 

representa cerca de 9% do total, com tendência ao crescimento. 

Existem diversos tratamentos alopáticos para a 

osteoporose como a reposição hormonal, o uso de cálcio, vitamina D, 

calcitonina e os bisfosfonatos, tais como o risedronato e o alendronato. 

Apesar da eficácia comprovada destes medicamentos, em tratamentos 

prolongados alguns podem apresentar efeitos colaterais por vezes 

graves, como esofagite, gastrite, úlcera gástrica, osteonecrose de 

maxilares, entre outros. 



18

Terapias alternativas como a homeopatia e a fitoterapia 

são amplamente utilizadas para tratar várias doenças devido a seus 

efeitos terapêuticos e, também, por se acreditar que apresentem menos 

efeitos colaterais. Seu uso em doenças ósseas ainda é limitado. Entre as 

medicações homeopáticas podemos encontrar indicações terapêuticas 

para reparação tecidual, osteoporose e para fraturas, como a Calendula 

offcinalis, Calcarea carbonica, Calcarea fluorica, e Calcarea phosphorica, 

entre outras.

A Calcarea phosphorica, objeto deste estudo, atua no 

equilíbrio cálcio-fósforo, sendo essencial para nutrição, crescimento e 

reparação óssea. É importante para a diferenciação, multiplicação de 

células ósseas e deposição de cálcio, necessários na formação do calo 

ósseo adequado, além de apresentar tropismo pela matriz óssea.

Segundo Werkman et al. (2005), a Calcarea phosphorica

6CH apresentou-se mais eficaz nas fases iniciais do processo de reparo 

ósseo em lesões em tíbia de ratos castrados do que o risedronato. Porém, 

estudos avaliando os mecanismos de atuação da Calcarea phosphorica

no tecido ósseo ainda são escassos na literatura.

Partindo da hipótese de que a Calcarea phosphorica atua 

na reparação óssea, este trabalho tem como objetivo avaliar o potencial 

deste medicamento como terapia alternativa para as complicações da 

osteoporose.



2 REVISÃO DA LITERATURA

2.1 Tecido ósseo 

O osso é um tecido mineralizado e um dos mais 

resistentes e rígidos do corpo humano, com múltiplas funções (Harada et 

al., 2003; Allori et al., 2008a). Apresenta grande potencial de regeneração 

de forma e função após traumas e é caracterizado por ser 

metabolicamente ativo e dinâmico, apresentando constante remodelação 

(Carvalho; Ponzoni, 2002; Diniz et al., 2005). 

É um tecido conjuntivo especializado, composto por 

células e material intercelular calcificado, organizado para desempenhar o 

papel de estrutura e sustentação do corpo. Serve como alavanca para a 

musculatura, proteção para órgãos internos e medula óssea, além de 

armazenar 95% do cálcio encontrado no organismo. A porção celular é 

constituída por células osteoprogenitoras, osteoblastos, osteócitos e 

osteoclastos. A porção inorgânica é composta fundamentalmente por 

cristais de hidroxiapatita (Yong et al., 2007).  

O esqueleto adulto é constituído em 80% por osso cortical 

compacto, formando a parte externa das estruturas esqueléticas e 20% 

por osso esponjoso ou trabecular, encontrado na porção interna dos 

ossos longos, corpos vertebrais e pelve. O osso trabecular apresenta um 

metabolismo mais ativo do que o osso cortical, fornecendo suprimento 

inicial nos estados de deficiência mineral, sendo perdido rapidamente na 

osteoporose. O tecido ósseo compacto maduro é composto por cerca de 

70% de sais inorgânicos e 30% de matriz orgânica. O colágeno forma 



20

mais de 90% do componente orgânico, sendo o restante formado por 

proteoglicanos da substância fundamental e por um grupo de moléculas 

não colagênicas envolvidas na regulação da mineralização óssea (Yong 

et al., 2007). 

Existem cerca de 20 tipos diferentes de colágeno nos 

vários tecidos; nos ossos predomina quase exclusivamente o tipo I, 

embora o tipo III, V, XI e XIII podem estar presentes. O colágeno é crítico 

na reparação óssea facilitando a formação precoce de espículas nas 

áreas de fraturas (Allori et al., 2008b). 

As superfícies internas e externas dos ossos são 

revestidas por células osteoprogenitoras e tecido conjuntivo, que formam 

o endósteo e o periósteo respectivamente. Estas células têm morfologia 

semelhante à dos fibroblastos, se transformando muito facilmente em 

osteoblastos quando estimuladas, sendo importantes na nutrição e 

crescimento dos ossos, bem como na reparação das fraturas (Yong et al., 

2007; Junqueira; Carneiro, 2008). 

O que define o osso como um tecido mineralizado é a 

deposição de cálcio e fosfato. Os osteoblastos são extremamente 

sensíveis ao ambiente bioquímico ao seu redor e controlam os 

movimentos de cálcio, fosfato e outros íons dentro e fora da matriz (Allori 

et al., 2008b). 

O tecido ósseo se apresenta sob duas formas principais: 

tecido ósseo imaturo ou primário e o tecido ósseo maduro, também 

conhecido como secundário ou lamelar. O tecido ósseo imaturo não é 

somente o primeiro tecido ósseo a ser formado durante o 

desenvolvimento do esqueleto, mas é também o primeiro tecido ósseo a 

ser depositado nas reparações ósseas (Yong et al., 2007; Junqueira; 

Carneiro, 2008).  

Quanto à ossificação, o osso pode ser formado por 

ossificação endocondral ou ossificação intramembranosa. O mecanismo 



21

de deposição de matriz óssea nos dois tipos de ossificação é o mesmo. 

Uma rede trabecular ou esponjosa primária é inicialmente depositada e 

depois transformada em osso maduro. Na ossificação intramembranosa 

as células mesenquimais se diferenciam em osteoblastos formando o 

blastema ósseo, no interior dos quais os osteócitos se interconectam 

através de processos celulares e os osteoblastos permanecem na 

superfície. Na ossificação endocondral os moldes de cartilagem hialina 

são substituídos por matriz óssea. A ossificação inclui o crescimento, a 

modelagem e a remodelação do osso, processos mediados pelos 

osteoblastos e osteoclastos sob controle do hormônio da paratireóide e da 

vit. D. (Kierszenbaum, 2004; Young, 2007).  

 

2.2 Remodelação óssea 
 

 

Uma vez que o esqueleto tenha alcançado a maturidade, 

a regeneração continua na forma de substituição periódica de osso velho 

por osso novo. Este processo é chamado de remodelação e é 

responsável pela completa renovação do esqueleto adulto a cada 10 

anos. A remodelação provavelmente serve para reparar os danos por 

fadiga e para prevenir as conseqüências da idade avançada. No 

esqueleto em crescimento a remodelação tem o objetivo de expandir a 

cavidade medular, enquanto aumenta a espessura das trabéculas 

(Bandeira et al.; Manolagas, 2000).  

A massa esquelética total e sua densidade permanecem 

relativamente constantes após o término do crescimento, até a idade de 

aproximadamente 50 anos. A partir desta idade, e especialmente em 

idosos do sexo feminino, ocorre uma rápida perda de massa durante os 

primeiros 5 a 10 anos após a menopausa, em virtude da deficiência de 



22

estrógeno. Nesta fase, a reabsorção prevalece sobre a aposição, levando 

a uma gradual perda de massa óssea (Vasconcelos et al., 2002; Kanis et 

al., 2008).  

A remodelação óssea se dá pela clássica sequência 

ativação-reabsorção-formação. Após a ativação, os osteoclastos formam 

a lacuna de reabsorção. Uma vez terminada essa fase, os pré-

osteoblastos migram para a cavidade, diferenciam-se em osteoblastos e 

iniciam a formação da matriz óssea. A mineralização da matriz ocorre 

após vários dias - nesta fase sais de fosfato de cálcio amorfos (não 

cristalinos) começam a se precipitar nas zonas ocas das fibrilas 

colágenas. Estes focos de mineralização se expandem e coalescem em 

cristais de hidroxiapatita por remodelação adicional. Contudo, 20% ou 

mais do componente mineral permanecem na forma amorfa, fornecendo 

um tampão disponível para a homeostasia do cálcio do corpo todo. A 

deposição de cálcio parece estar associada às vesículas revestidas por 

membrana derivadas da membrana plasmática do osteoblasto, chamadas 

de vesículas da matriz; estas contêm fosfatase alcalina e outras 

fosfatases, as quais podem neutralizar o efeito inibitório do pirofosfato na 

deposição espontânea de sais de cálcio. Durante esse processo, alguns 

osteoblastos são enclausurados, transformando-se em osteócitos. A esse 

conjunto de células ósseas e osso novo formado dá-se o nome de 

unidade multicelular básica (BMU) (Carvalho et al., 2000; Young, 2007). 

No esqueleto adulto todos os osteoclastos e osteoblastos 

pertencem às BMU, que medem cerca de 2 mm de comprimento e 0,2 

mm de largura, com um grupamento de osteoclastos na frente, um 

grupamento de osteoblastos atrás, um sistema vascular capilar central, 

um suprimento nervoso e tecido conjuntivo associado. Em humanos 

adultos saudáveis, cerca de 3 a 4 milhões de BMUs são iniciadas por ano 

e cerca de 1 milhão estão em ação em qualquer época. Os osteoclastos 

se aderem ao osso e, em seguida, o removem por acidificação e digestão 



23

proteolítica. À medida que cada BMU avança, os osteoclastos deixam o 

sítio de reabsorção e os osteoblastos se movem em direção à área 

escavada. Inicia-se o processo de nova formação óssea pela secreção de 

osteóide, que é finalmente mineralizado em novo osso. O tempo de vida 

das BMUs é de 6 a 12 meses; muito mais do que as células que a 

compõem; por isso é necessário um suprimento contínuo de osteoclastos 

e osteoblastos vindos da medula (Parfitt AM, 1994; Boonen et al., 2004; 

Nagae et al., 2006). 

A fase de reabsorção dura em torno de duas semanas e é 

realizada pelos osteoclastos derivados de células-mãe hematopoiéticas, 

que possuem fosfatases ácidas expressas nas suas membranas 

celulares. Os osteoclastos subsistem em massas pequenas e 

concentradas que se ligam à superfície óssea e liberam enzimas 

proteolíticas, além de diversos ácidos como o ácido cítrico e ácido lático, 

liberados de vesículas secretoras. As enzimas digerem ou dissolvem a 

matriz orgânica do osso, enquanto os ácidos dissolvem os sais ósseos, 

levando à criação de um túnel com diâmetro entre 0,2 a 1 milímetro a 

alguns milímetros de comprimento. No término desse período, os 

osteoclastos desaparecem, o túnel é invadido pelos osteoblastos e em 

seguida se inicia o desenvolvimento de um novo tecido ósseo. O que 

encerra esta fase ainda não está claro, mas um elevado nível de cálcio 

local ou substâncias liberadas pela matriz parecem estar envolvidos 

(Bandeira et al., 2000; Guyton; Hall, 2006).  

A fase de formação óssea se prolonga por até quatro 

meses, até que o osso reabsorvido seja completamente substituído. A 

formação é iniciada pelos osteoblastos, células cuboidais com citoplasma 

basófilo, com alto desenvolvimento do retículo endoplasmático rugoso, 

característico de células com alta capacidade de síntese protéica. O 

aparelho de Golgi também é evoluído, fator relevante no processamento 

do colágeno e de sua extrusão. Quando os osteoblastos são inativos, sua 



24

aparência é mais semelhante à dos fibroblastos, achatados e alongados. 

O colágeno e outros constituintes da matriz orgânica são sintetizados por 

ribossomos associados ao retículo endoplasmático granular dos 

osteoblastos. Estes ficam armazenados no aparelho de Golgi e são 

secretados na superfície celular resultando na produção de osteóide. Os 

osteoblastos sintetizam colágeno tipo I e proteínas como a osteocalcina, a 

osteopontina e sialoproteínas. As proteínas produzidas pelos osteoblastos 

são depositadas na superfície óssea, de forma organizada, formando a 

matriz osteóide, onde a mineralização ocorre subsequentemente durante 

vários dias (Bandeira et al., 2000; Douglas; Douglas, 2006; Guyton; Hall, 

2006; Young et al., 2007). 

A ação entre osteoblastos e os osteoclastos se dá em 

múltiplos focos e ocorre de tal forma que a reabsorção em um local é 

equilibrada pela formação em outro, sem enfraquecimento do esqueleto. 

Considera-se o osteoclasto como a célula diretamente envolvida nesse 

processo. É altamente móvel e pode migrar ao longo das superfícies 

ósseas sendo localizado em áreas a serem reabsorvidas. Nessas áreas, 

passam a secretar enzimas hidrolíticas que dissolvem o tecido ósseo 

formando lacunas de reabsorção. O osteoclasto tem a função de limpar a 

superfície óssea permitindo o depósito de tecido ósseo pelos osteoblastos 

(Carvalho; Ponzoni, 2002). 

Um grande número de citocinas e fatores estimuladores 

de colônia estão envolvidos na remodelação. Como fatores promotores de 

reabsorção podemos citar a interleucina 1 (IL-1), interleucina 3 (IL-3), 

interleucina 6 (IL-6), interleucina 11 (IL-11), fator de necrose tumoral 

(TNF) e fator estimulador de colônias de granulócitos macrófagos (GM-

CSF). Se opondo às citocinas citadas, existem a interleucina 4 (IL-4), 

interleucina 18 (IL-18) e o interferon-gama (IFN-�), que inibem o 

desenvolvimento de osteoclastos (Kimble et al., 1995; Udagawa et al., 

1997; Bandeira et al., 2000 ).  



25

A IL-6 desempenha um papel importante em várias 

doenças caracterizadas pelo remodelamento ósseo acelerado e 

excessiva reabsorção óssea focal ou sistêmica. Ela é produzida, em altos 

níveis, por células estromais derivadas da medula óssea e por 

osteoblastos, como resposta ao estímulo por uma variedade de outras 

citocinas e fatores de crescimento tais como IL-1, TNF, fator de necrose 

tumoral beta (TNF-�) e fator de crescimento derivado de plaquetas 

(PDGF). Na presença de estrógeno sua produção é inibida (Girasole et 

al., 1992; Franchimont, 1999).  

Só, ou em conjunto com outros agentes, a IL-6 estimula a 

osteoclastogênese e promove a reabsorção óssea. O estímulo depende 

de um sinal mediado por osteoblastos, que possuem receptores para IL-6, 

os quais se ligam a ela e induzem a diferenciação do osteoclasto 

(Udagawa, 1995). 

Hormônios também participam do processo de 

remodelação. Os dois principais hormônios do sistema homeostático do 

cálcio, principalmente o hormônio paratireoidiano (PTH) e o metabólito 

ativo da vitamina D, a 1,25-dihidroxivitamina D3 [1,25-(OH)2D3], são 

potentes estimuladores da formação osteoclástica, pois estimulam a 

produção de IL-6 e IL-11 por osteoblastos. Eles possuem habilidade para 

estimular o desenvolvimento de osteoclastos e regular a absorção de 

cálcio e excreção pelo intestino e rins, sendo elementos chave na 

homeostase extracelular de cálcio. A calcitonina, o terceiro hormônio 

clássico de regulação óssea, inibe o desenvolvimento de osteoclastos, 

promovendo a apoptose destes. Muitos outros hormônios, incluindo 

estrógeno, andrógeno, glicocorticóides, TSH e T4 exercem potentes 

influências no desenvolvimento de osteoclastos e osteoblastos pela 

regulação da produção e/ou ação de várias citocinas (Bandeira et al., 

2000; Guyton; Hall, 2006; Sampath et al., 2007). 



26

Estímulos mecânicos são considerados incentivadores do 

modelamento e remodelamento ósseo. Um conceito interessante é que os 

osteócitos podem funcionar como mecanosensores através de 

canalículos de comunicação com células da medula. Estímulos 

mecânicos benéficos podem ser adquiridos mais frequentemente a partir 

de contrações da musculatura esquelética, por compressão de impacto, 

ou pelo atrito (Diniz et al., 2005; Marie, 2009). 

 A formação e a reabsorção óssea são equilibradas no 

indivíduo adulto, mas em determinadas condições há prevalência da 

reabsorção e diminuição da formação óssea, podendo resultar em 

osteoporose. 

 

 

2.3 Osteoporose 

Devido ao aumento na expectativa de vida das 

populações, a osteoporose é atualmente reconhecida como importante 

questão em termos de saúde pública. Afeta sobretudo mulheres na pós-

menopausa e se desenvolve como decorrência de uma desordem no 

turnover ósseo (processo de remodelação óssea), havendo maior 

reabsorção em relação à formação, resultando em diminuição da 

resistência e da massa óssea (Gali, 2001; Orwoll, 2003). Esta diminuição 

pode ser agravada pelo insuficiente acúmulo de tecido ósseo anterior à 

maturação do esqueleto (Guy et al., 1993). A idade e o hipoestrogenismo 

influenciam muito na osteoporose, sendo o processo controlado por uma 

complexa inter-relação de hormônios sistêmicos, força mecânica, 

citocinas, prostaglandinas e fatores locais de crescimento (Gali, 2001; 

Radominski et al., 2002). 



27

A osteoporose é a doença óssea metabólica mais 

comum, sendo caracterizada por redução da massa esquelética, com 

deterioração de sua microarquitetura, resultando em maior fragilidade 

óssea e, consequentemente, em aumento no risco de fraturas 

(Manolagas, 2000; Namkung-Matthai et al., 2001; Nakamura, 2004; 

Astácio et al., 2007; Kanis et al., 2008). 

Nos EUA, ocorrem cerca de 1,5 milhões de fraturas 

osteoporóticas por ano e as fraturas de vértebras são as mais frequentes, 

somando cerca de 750 mil. As fraturas da bacia são as mais sérias e 

cerca de 10 a 20% dos 250 mil casos anuais, resultam em morte no 

primeiro ano após a fratura; sendo que aproximadamente 30% dos 

sobreviventes tornam-se dependentes de cuidados de enfermeiro 

permanente e somente metade consegue levar vida normal e 

independente (Cauley et al., 2000; Watts, 2004a). 

É importante distinguir a osteoporose da perda óssea 

pós-menopausa, pois embora todas as mulheres percam osso após o 

término das menstruações, nem todas desenvolvem a síndrome 

osteoporótica que é caracterizada pelo colapso dos corpos vertebrais e 

por ossos longos mais susceptíveis a fraturas. A perda óssea resulta em 

osteoporose quando o osso se torna propenso à fraturas por traumas 

leves (Kalu, 1991).  

A osteoporose pode ser primária ou secundária, sendo a 

primária classificada em dois tipos: I – pós-menopausa e II – senil. A do 

tipo I ocorre na mulher, no período logo em seguida à menopausa e 

apresenta rápida perda óssea. Predominantemente atinge o osso 

trabecular e está associada à fratura de vértebras e do rádio distal. A do 

tipo II, ou senil, é relacionada ao envelhecimento e aparece por 

deficiência crônica de cálcio, aumento da atividade do paratormônio e 

diminuição da formação óssea (Gali, 2001).  



28

A osteoporose secundária ocorre como consequência de 

diversos processos patológicos, entre eles artrite reumatóide, 

hipertireoidismo, hiperparatireoidismo, distúrbios renais e mieloma 

múltiplo, além de outras condições, tais como alcoolismo crônico, 

tabagismo, imobilização, terapia prolongada com heparina, 

glicocorticóides, uso de anticonvulsivantes e hipovitaminose A (O’Mahony, 

1999; Bandeira et al.; Manolagas, 2000; Gali, 2001; El-Husseini et al.; 

Watts, 2004b; Jacobs et al., 2007). 

A osteoporose tipo I é o tipo mais comum e está 

associada à deficiência de estrógeno (Kalu et al., 1989; Kalu, 1991, 

Namkung-Matthai et al., 2001). O mecanismo pelo qual a ausência de 

estrógeno resulta em perda óssea é complexo e ainda não totalmente 

compreendido (Kalu et al., 1989; Lorenzo et al., 1998; Manolagas, 2000). 

Sabe-se que o estrógeno age, por exemplo, inibindo a produção de IL-6, 

um potente estimulador de osteoclastos, e como modulador do efeito de 

reabsorção do PTH (Allori et al., 2008a).  

Nos pacientes afetados pela osteoporose, se observa 

uma redução na quantidade de osso presente, com perda maior de osso 

trabecular em relação ao osso compacto (Radominski et al., 2002). Isto 

resulta nas características primárias da doença, ou seja, fraturas do colo 

do fêmur, da porção distal do rádio e achatamento de corpos vertebrais 

(Francis, 1998).  

O aumento da reabsorção óssea na osteoporose está 

associado ao aumento do número e da atividade de osteoclastos, bem 

como à diminuição da incidência de apoptose nestas células. 

Paralelamente, observa-se diminuição da meia vida dos osteoblastos e 

incapacidade de reparação adequada dos defeitos causados pela 

reabsorção osteoclástica (Manolagas; Riggs, 2000). 



29

A redução do estrógeno é o fator mais importante 

responsável pela gênese da osteoporose pós-menopausa, como também 

na osteoporose do homem (Bandeira et al., 2000; Harada; Rodan, 2003). 

 A diminuição dos níveis de estrogênios circulantes leva a 

uma ativação nos ciclos de remodelação óssea, com predomínio das 

fases de reabsorção em relação à formação, devido ao aumento do 

número de osteoclastos na superfície dos ossos trabeculares. Também se 

sugere que os osteoclastos se tornam mais ativos, possivelmente pela 

diminuição nas taxas de apoptose ao final da fase de reabsorção, o que 

resulta em grandes cavidades que são parcialmente reparadas pela 

atividade dos osteoblastos. Os estrogênios atuam direta e indiretamente 

no osso. A maneira direta é via receptores e a indireta é mediada por 

citocinas e fatores locais de crescimento. A perda óssea decorrente da 

menopausa é caracteristicamente associada à excessiva atividade dos 

osteoclastos, enquanto a perda óssea associada ao envelhecimento é 

mais relacionada à diminuição no número de osteoblastos (Riggs, 2000; 

Radominski et al., 2002). 

Os primeiros estudos do papel do estrógeno no 

metabolismo ósseo focaram as citocinas pró-inflamatórias IL-1, IL-6, fator 

de necrose tumoral alfa (TNF-�), fator estimulador de colônias de 

macrófagos granulócitos (GM-CSF), fator estimulador de colônias de 

macrófagos (M-CSF) e prostaglandina E2 (PGE2). Estes fatores 

aumentam a reabsorção óssea, principalmente pelo aumento do tamanho 

do pool de pré-osteoclastos na medula óssea e são inibidos pelo 

estrógeno (Riggs, 2000).  

A IL-1, IL-6, e TNF-� são as principais citocinas 

envolvidas na osteoclastogênese, ao passo que a interleucinas IL-4  

possui um efeito inibidor sobre a atividade de osteoclastos (Lorenzo et al., 

1998; Bandeira et al., 2000). 

A IL-1, um produto produzido predominantemente por 



30

monócitos/macrófagos, estimula a síntese e a liberação de PGE2, de 

proteases e colagenases (Goldring; Krane, 1987). Estudos em 

camundongos que não expressam o receptor de IL-1 mostraram que a 

ovariectomia não resultou em perda óssea (Lorenzo et al., 1998). A IL-6 

induz reabsorção por osteoclastos e é produzida por osteoblastos. 

Estudos mostram que o estrógeno previne a secreção de IL-6 pelos 

osteoblastos (Allori et al., 2008a).  

A deficiência de hormônios ovarianos leva à diminuição 

de 1,25-(OH)2D3 e à queda da absorção de cálcio intestinal sem alterar o 

metabolismo da vitamina D (Kalu et al., 1989). A absorção intestinal do 

cálcio varia também com a idade, com os níveis de vitamina D e do 

hormônio da paratireóide (PTH), podendo ainda ser influenciada por 

nutrientes da dieta (Martini, 2000). Ela ocorre primariamente no duodeno 

e jejuno e, até o momento, a 1,25(OH)2D3 é o único hormônio capaz de 

controlar a absorção de cálcio. Na ausência dele somente 7% da ingestão 

normal de cálcio é absorvida (Heilkberg, 2000). 

A ativação e a diferenciação dos osteoclastos envolvem 

uma família de proteínas biologicamente relacionadas que são receptores 

de fator de necrose tumoral (TNFR). São a osteoprotegerina (OPG), o 

receptor ativador de fator nuclear (RANK) e o RANK ligante (RANKL). 

Eles juntos regulam a função osteoclástica. O RANK é expresso em 

progenitores hematopoiéticos de osteoclastos, enquanto o RANKL é 

expresso em células pré-osteoblásticas e linfócitos T. O RANKL se liga ao 

RANK com alta afinidade e esta afinidade é essencial para a 

osteoclastogênese. A OPG age como um receptor decodificador 

bloqueando a ligação de RANKL ao seu receptor RANK.(Manolagas, 

2000; Boyle et al., 2003). 

Estudos têm demonstrado que o estrógeno inibe a 

reabsorção óssea pela indução de mudanças sutis, porém cumulativas, 



31

em múltiplos fatores reguladores estrógenos dependentes; entre eles 

estão o TNF-� TGF-� e o sistema OPG/RANKL/RANK (Riggs, 2000). 

2.4 Reparo ósseo 

 

Uma característica marcante do tecido ósseo é sua 

enorme capacidade de reparação após lesões. Esta reparação se faz a 

partir do tecido de granulação. As células indiferenciadas e jovens do 

tecido de granulação se diferenciam em células ósseas maduras, que 

produzem matriz extracelular que será mineralizada (Consolaro, 2009). 

A hemorragia resultante de trauma, leva à formação de 

coágulo sanguíneo e de fibrina, durante poucos dias. Além do coágulo 

sanguíneo, dois outros mecanismos contribuem para hemostasia: 

primeiramente uma vasoconstrição que faz diminuir o sangramento e, 

depois, uma retração do coágulo com redução do tamanho do sítio da 

ferida. A retração é causada pelas forças tracionais de plaquetas 

ativadas, resultando em condensação de fibrina no coágulo. A liberação 

de citocinas e de fatores de crescimento das plaquetas, no coágulo 

sanguíneo, tem um efeito estimulador na regeneração de fraturas. Fatores 

de crescimento derivados de plaquetas têm efeitos mitogênicos para 

fibroblastos e para células ósseas, além disso, TGF-� promove a 

formação de colágeno tipo I (Carvalho; Ponzoni, 2002). 

Como consequência da hemostasia, a circulação 

sanguínea retorna a partir de vasos obliterados danificados que se 

anastomosam com partes intactas de outros vasos. No osso, isso ocorre 

através dos canais de Volkmann, distribuídos de forma esparsa. O 

término da circulação das bordas fraturadas causa isquemia local e 

necrose, comumente observada em secções histológicas como lacunas 



32

vazias, ou células em picnose (núcleos com cromatina muito 

condensada). A necrose é causada pela falta de oxigenação dos 

osteócitos, que em osso vivo não estão mais do que a 0,1mm de um 

capilar intacto. A diapedese de leucócitos no coágulo a partir de veias pré-

capilares é causada por fatores que aumentam a adesão de células 

inflamatórias às células endoteliais, como os leucotrienos e os 

quimioatrativos. A maioria desses fatores é liberada por plaquetas 

ativadas e células endoteliais, bem como pelos próprios leucócitos. A 

trombina e os produtos da degradação dos tecidos também servem como 

atrativos químicos para leucócitos. Inicialmente, os neutrófilos são os mais 

numerosos, mas macrófagos rapidamente começam a predominar. 

Ambos os tipos de células estão envolvidos na destruição do coágulo e do 

tecido necrótico por meio da digestão intra e extracelulares. A formação 

do tecido de granulação é caracterizada por uma fase de destruição dos 

tecidos necróticos, associada a uma intensa proliferação celular e 

formação de vasos, além da síntese de matriz rica em fibronectina, 

proteoglicanos, ácido hialurônico e colágeno, principalmente dos tipos III e 

I (Carvalho; Ponzoni, 2002). 

Em seguida, o tecido de granulação vai se tornando mais 

fibroso e células mesenquimais se diferenciam em condroblastos e 

progressivamente substituem o tecido de granulação fibroso por 

cartilagem hialina. Essa ponte firme, porém flexível é conhecida como 

calo provisório. O calo provisório é, em seguida, reforçado pelo depósito 

de sais de cálcio na matriz cartilaginosa. Ao mesmo tempo o periósteo e o 

endósteo, próximos a área lesada, respondem com uma intensa 

proliferação, formando um tecido muito rico em células osteoprogenitoras. 

Os osteoblastos se formam a partir destas células, que correspondem às 

células tronco, localizadas no tecido superficial de revestimento ósseo. 

Estas células osteoprogenitoras do endósteo e periósteo são ativadas e 

depositam uma malha de tecido ósseo entrelaçado dentro e em torno do 



33

calo provisório, se transformando então em calo ósseo (Guyton; Hall, 

2006; Young et al., 2007, Junqueira; Carneiro, 2008).  

O colágeno desempenha um papel básico no processo 

de mineralização, pois oferece espaços suficientemente grandes para 

acomodar a fase mineral, favorecendo a disposição dos cristais que 

seguem a topografia das fibras colágenas. O processo de mineralização 

se inicia pela ligação do cálcio, ou fosfato, ou ambos, nas cadeias laterais 

dos resíduos de aminoácidos do colágeno. Uma vez iniciada a 

mineralização da matriz óssea, esta prossegue rapidamente de forma que 

no período de seis a doze horas, 60% a 70% da quantidade final de 

mineral já estão depositados (fase primária de mineralização). A 

mineralização subsequente ocorre muito mais lentamente e só se 

completa depois de um ou dois meses (fase da mineralização secundária) 

(Douglas; Douglas, 2006). 

A união óssea é alcançada quando o local da fratura é 

completamente obliterado por tecido ósseo entrelaçado. Sob a influência 

dos estresses funcionais, o calo vai sendo lentamente remodelado, de 

modo a formar o tecido ósseo lamelar maduro (Guyton; Hall, 2006; Young 

et al., 2007; Junqueira; Carneiro, 2008). 

O ambiente mecânico também influencia no reparo ósseo 

e independente da origem embriológica do osso, num ambiente onde há 

estabilidade mecânica ocorre favorecimento da ossificação 

intramembranosa, enquanto que num ambiente não estável a reparação 

se dá através de ossificação endocondral (Leucht et al., 2008). 

 



34

2.5 Bisfosfonatos 

Os bisfosfonatos, também chamados de difosfonatos, são 

conhecidos na indústria química desde 1865, quando o primeiro foi 

sintetizado na Alemanha, sendo o etidronato sintetizado em 1897. Foram 

primeiramente usados na indústria como anticorrosivos e atualmente são 

uma classe de compostos conhecidos por sua habilidade para prevenir 

reabsorção óssea mediada por osteoclastos. São recomendados para o 

tratamento de várias doenças que provocam aumento da reabsorção 

óssea, incluindo osteoporose pós-menopausa, doença de Paget e 

metástase óssea osteolítica (Nishikawa et al., 1996; Rodan; Fleisch, 1996; 

Fleisch, 1997; Fleisch, 2003; Castro et al., 2004, Íseri et al., 2005). 

São análogos do pirofosfato, no qual a ponte de oxigênio 

é substituída por um átomo de carbono e modificada por cadeias laterais 

de comprimentos e configurações variáveis. A presença de um átomo de 

carbono ligando os dois grupos fosfato proporciona resistência à hidrólise 

enzimática. Por outro lado, o pirofosfato, produto normal do metabolismo, 

é rapidamente degradado in vivo. As duas metades fosfóricas dos 

bisfosfonatos ligam-se fortemente à superfície de cristais de 

hidroxiapatita, especialmente nos pontos de remodelamento ósseo ativo. 

Possuem grande afinidade por cristais de fosfato de cálcio e inibem seu 

crescimento, sua agregação e dissolução. Sua afinidade por hidroxiapatita 

cálcica é a base para seu uso como inibidores da reabsorção óssea 

(Fleisch, 1997; Bandeira et al., 2000; Fleisch, 2003). 

Estruturalmente são compostos caracterizados por duas 

ligações C-P. Se as duas ligações estiverem localizadas no mesmo átomo 

de carbono, os compostos são chamados de bisfosfonatos geminais e 

são análogos ao pirofosfato, que contém um oxigênio no lugar do 

carbono. Somente os bisfosfonatos geminais parecem ter uma forte 



35

atividade no esqueleto. A estrutura P-C-P permite um grande número de 

variações possíveis, especialmente pela mudança nas duas cadeias 

laterais no carbono, o que originou os diferentes tipos comercializados: 

etidronato, clodronato, alendronato, risedronato, entre outros (Fleisch, 

1997). 

Cada bisfosfonato possui seu próprio perfil de atividade, 

determinado pela cadeia lateral ligada ao átomo de carbono. Após os 

resultados promissores mostrados pelo etidronato e clodronato, novos 

bisfosfonatos foram sintetizados contendo um átomo de nitrogênio 

primário em uma cadeia alquila (pamidronato, alendronato). Isto 

aumentou a potência anti-reabsorção em mais de cem vezes (Martin; Grill, 

2000). 

Embora o mecanismo de ação dos bisfosfonatos não 

esteja completamente elucidado, está claro que no tecido os bisfosfonatos 

inibem a reabsorção óssea, o turnover ósseo, e assim, a perda óssea. O 

efeito se deve à diminuição da geração de novas unidades de 

remodelação óssea e a uma diminuição da profundidade da erosão 

cavitária. Na célula, eles induzem o desaparecimento da borda em escova 

dos osteoclastos, inibem a diferenciação da linhagem celular macrocítica, 

que leva à formação de osteoclastos, promovem um encurtamento do 

ciclo de vida dos osteoclastos e aumentam a sobrevivência de 

osteoblastos (Nishikawa et al., 1996;  Rodan; Fleisch, 1996; Plotkin et al., 

1999; Bandeira et al., 2000). 

Em nível molecular, os bisfosfonatos que contém 

nitrogênio em sua estrutura química, agem provavelmente pela inibição 

de enzimas da via colesterol/mevalonato e pela perda de proteínas da 

prenilação, uma vez que os efeitos dos bisfosfonatos nos macrófagos e 

osteoclastos podem ser superados pela adição de intermediários desta 

via (Luckman et al., 1998). Estas enzimas são proteínas sinalizadoras que 

regulam alguns processos celulares tais como a ondulação da membrana, 



36

organização do citoesqueleto e transporte de vesículas necessárias para 

a função do osteoclasto (Martin; Grill, 2000). Os bisfosfonatos inibem a 

reabsorção óssea mais por efeito celular nos osteoclastos, do que 

simplesmente por mecanismo físico-químico (Russel et al., 1999; 

Nancollas et al., 2006). 

Um estudo que avaliou os efeitos dos bisfosfonatos sobre 

a formação de osso periosteal em animais controle e em animais com 

deficiência de estrógeno mostrou que os bisfosfonatos não inibem a 

formação óssea periosteal na ausência de estrógeno e são capazes de 

permitir estímulo normal do osso periosteal em resposta a estímulo 

anabólico de carga mecânica. Ficou claro que a redução da taxa de 

remodelamento ósseo produzida pelos bisfosfonatos se dá nos envelopes 

endocortical e intra-cortical (Feher et al., 2009). 

O depósito dos bisfosfonatos nos ossos ocorre onde o 

mineral ósseo está exposto aos fluidos circundantes, especialmente onde 

o osso é formado e reabsorvido. Após o depósito, há uma interrupção na 

atividade dos osteoclastos por interferência na ação da enzima farnesil 

pirofosfato sintase. Acredita-se, também, que os bisfosfonatos promovem 

apoptose de osteoclastos maduros. O resultado é um turnover ósseo mais 

lento, com benefícios para a integridade trabecular. Estudos 

demonstrando maior espessura trabecular após tratamentos prolongados 

sugerem que os bisfosfonatos podem também ter efeitos positivos no 

número de osteoblastos, mais provavelmente por inibir apoptose em 

osteoblastos e osteócitos. Ainda existem algumas evidências indicando 

que os bisfosfonatos podem inibir reabsorção, por indução de um fator 

inibidor de osteoclastos, pelos osteoblastos. Os bisfosfonatos se 

acumulam nos ossos, mas se tornam inativos, submersos na matriz. Foi 

demonstrado que a meia vida dos bisfosfonatos no osso, em humanos, é 

de mais de dez anos. Não oferecem benefícios extra-esqueletais e estão 

algumas vezes associados com efeitos colaterais como esofagite e/ou 



37

irritação gastrintestinal após sua ingestão (Fleisch, 2003; Boonen et al.; 

Roughead et al., 2004). 

A liberação dos bisfosfonatos ocorre por conta da longa 

meia vida que possuem, principalmente quando o osso onde eles estão 

depositados é reabsorvido novamente. O fato de o grupo P-C-P ser 

resistente à hidrólise enzimática, explica porque os bisfosfonatos não são 

metabolizados no corpo e são excretados inalterados. Desta forma, os 

bisfosfonatos liberados durante a remodelação óssea podem ser 

farmacologicamente ativos, sendo que a quantidade lançada diariamente 

na circulação após 10 anos de tratamento é estimada em cerca de 25% 

da quantidade absorvida em uma dose diária e depende da localização no 

esqueleto. Será maior para o osso esponjoso e menor para o osso 

compacto. A carga e o peso do grupo bisfosfonato limita sua penetração 

na membrana celular, o que explica a pouca absorção intestinal (1 a 

10%), que é provavelmente paracelular. São rapidamente excretados 

pelos rins, em parte por um processo de secreção tubular ativo (Martin; 

Grill, 2000). 

O tratamento com bisfosfonatos causa uma imediata 

redução na reabsorção óssea, levando a uma diminuição no cálcio sérico, 

que conduz a um aumento do PTH (Jacobs et al., 2007). 

Os bisfosfonatos são considerados a primeira linha de 

terapia para a prevenção e tratamento da osteoporose, sendo o 

alendronato um importante representante desta classe, demonstrando 

eficácia na prevenção de fraturas osteoporóticas em vários locais do 

esqueleto (Watts et al., 2004b). 

 

 

 

 



38

2.6 Alendronato 

O alendronato é um aminobisfosfonato primário e 

atualmente é o bisfosfonato mais amplamente utilizado para a 

osteoporose (Bandeira et al., 2000; Iseri et al., 2005). Faz parte do grupo 

de bisfosfonatos que contém nitrogênio em sua estrutura, o que explica 

seu efeito de redução da atividade de remodelamento ósseo normal em 

maior extensão (Astrand; Aspenberg, 2002). 

A porção bisfosfonato da molécula do alendronato lhe 

confere importantes características, como a baixa penetração pelas 

membranas celulares, o que limita sua ação na maioria das células do 

corpo, além de uma localização preferencial no osso limitando a 

exposição de tecidos não esqueléticos à droga (Hayes, 1999). 

Após a administração, o alendronato se liga à superfície 

exposta de hidroxiapatita. A acidificação do meio provocada pelos 

osteoclastos nos sítios de reabsorção causa a liberação do alendronato 

dentro do espaço definido por zona clara, aumentando sua concentração 

local, interferindo com a função de membrana do osteoclasto e em sua 

borda em escova, o que resulta na interrupção da reabsorção óssea (Sato 

et al., 1991). 

Nos Estados Unidos, o alendronato foi aprovado tanto 

para prevenção quanto para o tratamento da osteoporose (Bandeira et al., 

2000). Ele reduz o risco de novas fraturas de quadril e pulso em mulheres 

com fraturas já presentes e reduz o risco de todas as principais fraturas 

em mulheres com osteoporose (Black et al., 2000). Possui grande 

seletividade para inibir a reabsorção óssea, sem afetar a formação 

(Volpon et al., 2008). 



39

A dose de alendronato recomendada para o tratamento 

da osteoporose em humanos é de 10 mg/dia, por via oral, podendo ser 

também administrado semanalmente em doses de 70 mg/dia (Astrand; 

Aspemberg, 2002; Fleisch, 2003) 

O alendronato administrado durante o crescimento, 

maturação e envelhecimento em ratos machos e fêmeas, resultou em 

melhores propriedades mecânicas em vértebras e fêmur. Os autores do 

estudo atribuíram estes achados à influencia da inibição da reabsorção 

óssea durante o crescimento ósseo, resultando em maior massa na 

maturidade e à atenuação da reabsorção óssea durante o período em 

que normalmente ocorre a perda óssea relacionada com a idade (Guy et 

al., 1993). 

Um estudo realizado em animais de laboratório sobre a 

absorção e disposição do alendronato no organismo, revelou que após a 

administração por via oral, a absorção intestinal da droga foi muito 

pobre, sendo detectado no osso cerca de 0,9% no rato, 1,8% no cão e 

1,7% no macaco. A presença de alimento no estômago causou um 

decréscimo de absorção de 6 a 7 vezes, quando comparado com 

animais em jejum. Cerca de 30% da dose foi absorvida pelo osso nos 

primeiros 5 minutos. A meia vida da droga no osso do rato foi de 30 dias, 

para um período de análise de 11- 40 dias e de 200 dias para um 

período de análise de 40-80 dias (Lin et al., 1991). 

O alendronato possui alta afinidade pelo tecido ósseo e, 

em doses normais, não é encontrado em tecidos não calcificados. 

Contudo, quando a dose é muito elevada, algum acúmulo pode ocorrer 

em tecidos não calcificados, principalmente nos rins; além disso, em 

altas doses, ele passa a agir inibindo calcificação (Lin et al.,1992; Russel 

et al., 1999). 

Em 2008, Volpon et al. investigaram por meio de estudos 

histomorfométricos em ratas normais e osteopênicas, os efeitos do 



40

alendronato de sódio, quando administrado preventivamente em 

situações que provocam osteopenia. Foi realizada imobilização da 

região lombar, pelve e do membro posterior direito com aparelho 

gessado, com o intuito de gerar osteopenia nos animais. O alendronato 

foi administrado por via subcutânea na dose de 0,7mg/kg, uma vez por 

semana, durante 28 dias. Os autores concluíram que a dose semanal de 

0,7mg/kg foi eficaz para aumentar o volume ósseo e o número de 

trabéculas. Além disso, o alendronato foi capaz de aumentar os 

parâmetros morfométricos dos animais osteopênicos e, também dos 

animais normais. 

Um estudo comparando alendronato com risedronato 

examinou as diferenças de resposta esquelética de ratas OVZ frente à 

suspensão do tratamento. Os dados deste estudo mostraram que o 

turnover ósseo trabecular normal tende a ser restabelecido mais 

rapidamente em animais tratados com risedronato do que naqueles 

tratados com alendronato. As taxas de formação óssea permaneceram 

mais baixas no osso trabecular das tíbias e espinha em ratas tratadas 

com alendronato, quando comparadas com ratas não tratadas, controle, 

16 semanas após a suspensão do tratamento. Em contraste, os grupos 

tratados com risedronato mostraram uma recuperação gradual de 

formação de osso normal. Isto mostrou que após a interrupção do 

tratamento, em níveis de dose clínica, o alendronato parece ter um efeito 

mais persistente na supressão de turnover ósseo do que o risedronato 

(Fuchs et al., 2008). 

Roschger et al. (2001) avaliaram a qualidade da matriz 

óssea da crista ilíaca de mulheres com osteoporose, tratadas com 

alendronato, durante um período de 2 a 3 anos. Os resultados 

mostraram que o alendronato inibiu a reabsorção óssea osteoclástica, 

reduziu o turnover ósseo, diminuiu a porosidade cortical e aumentou a 

uniformidade da mineralização. Concluíram que uma melhoria na 



41

qualidade mecânica da matriz mineralizada, causada por mudanças 

estruturais, como menor porosidade cortical, associada a um positivo 

balanço ósseo, podem ser os principais fatores contribuintes da 

efetividade antifratura do alendronato. 

Estudo semelhante com pacientes que receberam 

placebo ou 5 e 10 mg/dia de alendronato, durante um período de dois a 

três anos, utilizou medidas de tomografia micro computadorizada de três 

dimensões e histomorfometria para avaliar amostras de osso ilíaco. 

Participaram mulheres de 45 a 80 anos, que já estavam na menopausa 

há pelo menos 5 anos e com osteoporose confirmada por exame de 

densitometria óssea. Uma biópsia de ilíaco de 7,5 mm foi obtida de cada 

participante. Os resultados mostraram valores superiores para o grupo 

tratado com alendronato, tanto na tomografia micro computadorizada, 

quanto na histomorfometria. Os autores atribuem esses resultados a um 

efeito de espessamento das trabéculas já existentes associada à 

diminuição da perda trabecular, uma vez que o alendronato reduz a 

reabsorção óssea reduzindo os sítios de remodelamento por unidade de 

superfície de área, assim, ocorrem menos locais de afinamento trabecular 

e as trabéculas presentes acabam sofrendo um espessamento passivo 

(Recker et al., 2005). 

Em um estudo que avaliou um total de 3658 mulheres 

com osteoporose, com e sem fraturas, tratadas com alendronato por um 

período mínimo de três anos, foi observado efeito positivo marcante sobre 

o risco de fraturas entre 12 a 18 meses após o início do tratamento. Já, a 

partir dos 6 meses após o início do tratamento, uma diminuição no risco 

de fraturas vertebrais pode ser observada (Black et al., 2000). 

Apesar dos efeitos positivos sobre a reabsorção óssea, 

de um modo geral, a administração oral dos bisfosfonatos, tem sido 

associada a efeitos adversos, como osteonecrose dos maxilares (Marx et 

al., 2007), além de efeitos gastrintestinais, incluindo gastrite, úlcera 



42

gástrica e esofagite erosiva. Tem sido demonstrado que os bisfosfonatos 

diferem em seu potencial de dano sobre a mucosa gastroesofágica, 

sendo o alendronato um dos mais nocivos (Graham,1999, Thomson et al., 

2002; Roughead et al., 2004; Íseri et al., 2005). 

 

 

2.7 Homeopatia 

A Homeopatia surgiu em 1796, idealizada pelo médico 

alemão Samuel Hahnemann, que viveu de 1755 a 1843 e publicou várias 

obras. Combateu o uso indiscriminado de alguns tipos de terapia usados 

em sua época e formou inúmeros discípulos (Correa, 1997; Correa, 

2006).  

A homeopatia é uma modalidade terapêutica para o 

tratamento de pessoas e animais e se baseia no princípio do semelhante, 

na terapia individualizada, baseada na definição ampla dos sintomas, e 

em doses infinitesimais. A palavra homeopatia é derivada das palavras 

gregas homoios, que significa igual ou semelhante, e pathos, que significa 

sofrimento (Boyd, 1993; Johnson; Boon, 2007). 

Na homeopatia, diferentemente da medicina alopática, o 

processo de diagnóstico é centrado no doente e não na doença. Esses 

preceitos já eram conhecidos por muitos médicos, desde Hipócrates até 

Hahnemann, sendo que vários deles os utilizavam - principalmente o dos 

semelhantes - em seus tratamentos e observações. Vale ressaltar, que as 

concepções hahnemannianas reviveram muito da tradição hipocrática 

como atenção ao regime alimentar, importância dos fatores climáticos, 

ecológicos, psicológicos e à existência de energia vital. Hahnemann 

postulou a existência de uma energia vital, a qual possibilita ao organismo 



43

o estabelecimento de reações aos mais variados estímulos ambientais. O 

homem é compreendido como uma unidade composta por corpo, alma e 

consciência, capaz de se manter são quando todas as sensações e 

reações se equilibram de forma harmônica. Quando há algum 

desequilíbrio dessa energia vital, ocorre uma disfunção orgânica que faz o 

homem adoecer (Correa 1997; Correa, 2006). 

Na homeopatia, o princípio da cura tem como base a “Lei 

dos Semelhantes”: Os sintomas ou síndromes que uma substância 

animal, vegetal ou mineral causa experimentalmente, em doses 

farmacológicas ou tóxicas, são os mesmos que ela poderá curar 

clinicamente quando administrada após preparo especial, em doses 

extremamente baixas, em indivíduos que apresentam esses sintomas. A 

prática da terapia individualizada baseada em sintomas é apoiada na 

premissa de que cada paciente tem uma personalidade única e um 

padrão de sintomas da doença, o que significa que a mesma doença se 

manifesta de formas sutilmente diferentes em cada pessoa (Johnson; 

Boon, 2007).  

A ciência ainda não tem uma explicação coerente a 

respeito do mecanismo de ação dos medicamentos homeopáticos 

(Poitevin, 1992). Pode-se afirmar que a água, após os procedimentos de 

preparo preconizados pela medicina homeopática tais como as diluições 

de solutos seguidas por sucussão, torna-se diferente da água inicial. 

Testes feitos com calorimetria de fluxo, microscopia eletrônica, 

conductometria e medição de pH mostraram tais indícios (Coghlan, 2001; 

Elia et al., 2004; Elia et al., 2007). 

O conceito de que o estímulo do remédio desencadeia 

uma resposta que restaura o equilíbrio biológico parece ser uma 

explicação razoável à luz da observação clínica. Este estímulo pode ser 

farmacológico em potências mais baixas, mas, parece ser de algum outro 

tipo, possivelmente eletromagnético, nas mais altas diluições. 



44

Hahnemann considerava a ação do remédio vinculada à produção de 

uma doença artificial semelhante à doença do paciente. Esta doença 

artificial estimula uma reação do corpo, que por sua vez cura a doença. O 

estímulo deve ser correto e a resposta depende do estado inicial do 

organismo. A terapia homeopática tem atraído a atenção pelo fato de 

buscar uma reação geral do organismo visando curar internamente, isto é, 

o próprio organismo é estimulado a promover a cura. De forma inversa, a 

alopatia trabalha curando externamente e eliminando de maneira radical o 

agente patogênico, bloqueando algumas respostas de defesa do 

organismo (Boyd, 1993). 

Em relação à origem, os medicamentos homeopáticos 

são preparados a partir de produtos de três reinos da natureza: vegetal, 

mineral e animal, segundo técnica própria que inclui diluições sucessivas 

em escalas geralmente centesimais e sucussões ritmadas para dinamizar 

e liberar o potencial energético do medicamento (Eizayaga, 1972; Boyd, 

1993). 

O uso de diluições é importante porque frequentemente 

as substâncias usadas para fazer os remédios são tóxicas em 

concentrações mais elevadas. O processo de diluição envolve sucussão, 

uma vigorosa agitação da substância original com álcool ou água, que 

ativa e potencializa o remédio. Os produtos homeopáticos são 

frequentemente tão diluídos que a farmacologia convencional nos diz que 

nenhuma molécula da substância original permanece no produto final 

(Johnson, Boon, 2007).  

Proposta por Hahnemann, a escala centesimal, que é 

indicada pela letra C, significa que o medicamento foi diluído na 

proporção de 1:99 (Ullman, 1988). 

Thompson e Weiss (2006) realizaram um estudo com 18 

pacientes, avaliando a ação de ingredientes ativos indicados para 

tratamentos complexos. Três condições foram avaliadas: síndrome do 



45

intestino irritado, síndrome da fadiga crônica e dermatite atópica da 

infância. De todos os casos, 7 apresentaram grande mudança no quadro 

de saúde, 6 alguma mudança e 5, nenhuma mudança durante os 8 meses 

de tratamento. Os dados mostraram que a precisão da indicação reflete o 

resultado da terapia, ou seja, a correta compreensão da situação do 

paciente se reflete na precisão da escolha do remédio. Os autores 

concluem que a homeopatia pode, justificadamente, ser considerada uma 

intervenção complexa e que isso deveria ser levado em conta nas 

avaliações experimentais clínicas no campo da pesquisa, a fim de 

caracterizar os efeitos específicos e não específicos dos medicamentos. 

Na Europa, a homeopatia tem tido boa reputação como 

alternativa efetiva em terapias veterinárias (Rajkumar et al., 2006). Nesta 

especialidade, o emprego de medicamentos diluídos e dinamizados 

obedece às mesmas razões da medicina humana, dentro das mesmas 

regras (Kossak-Romanach, 1984) 

Segundo Teixeira (2007a), a prática médica homeopática 

contribui para a humanização da medicina, por utilizar visão antropológica 

e abordagem semiológica holísticas. Procura-se valorizar os múltiplos 

aspectos da individualidade humana no processo de adoecimento e na 

escolha da substância curativa, priorizando a escuta de todas as queixas 

do enfermo. Eleva-se, assim, a qualidade da relação médico-paciente, 

fator indispensável para uma medicina humanizada. 

No Brasil a Homeopatia foi introduzida em 1840, pelo 

grande homeopata francês Benoit Mure. Foi reconhecida como 

especialidade médica em 1979 e em 1980 deu-se o referendo definitivo 

pelo Conselho Federal de Medicina, deixando, assim, de ser uma terapia 

alternativa (Correa 1997; Correa, 2006). 

Embora seja uma especialidade médica, a homeopatia 

não está presente na maioria das escolas de medicina do Brasil e os 



46

fundamentos da prática homeopática não são conhecidos pela grande 

maioria dos profissionais de saúde (Salles, 2008).  

Apesar desta dificuldade, o resultado de uma pesquisa 

realizada com estudantes de medicina revelou que os acadêmicos se 

mostraram interessados em aprender os fundamentos da homeopatia, 

posicionando-se favoravelmente à inclusão da disciplina no currículo dos 

cursos de graduação (Teixeira, 2007b). 

 

 

2.8 Calcarea phosphorica 

O cálcio desempenha um papel fundamental em muitos 

processos fisiológicos, incluindo a coagulação sanguínea, a transmissão 

de impulsos nervosos, a contração dos músculos esqueléticos, lisos e 

cardíaco, citando apenas alguns deles. Apenas 0,1% do cálcio total se 

encontra no líquido extracelular, 1% está nas células e o restante fica 

armazenado nos ossos (Guyton; Hall, 2006).  

O íon fosfato é também crucialmente importante para 

todos os sistemas biológicos. Dentro das células, o fosfato é um ânion 

que equilibra os cátions potássio e magnésio e é um importante 

constituinte da estrutura cristalina do osso e dos dentes. 

Aproximadamente 85% do fosfato corpóreo se encontra armazenado nos 

ossos, 14% a 15% nas células, e menos de 1% no líquido extracelular 

(Higdon, 2003; Berne et al., 2004; Guyton; Hall, 2006). 

 As concentrações extracelulares de fosfato e cálcio são 

muito baixas para que ocorra precipitação espontânea nos tecidos não 

mineralizados, mas são altas o suficiente para permitir deposição de 

hidroxiapatita em ambientes especializados de matriz óssea não 

mineralizada (Heilkberg, 2000). 



47

O fosfato de cálcio, também conhecido por hidroxiapatita, 

é o principal componente estrutural da matriz óssea e compreende cerca 

de 85% do fosfato do corpo (Young et al., 2007). A fórmula da 

hidroxiapatita é Ca10(PO4)6(OH)2 e tem o formato de uma placa 

achatada e longa. Os cristais de hidroxiapatita situam-se adjacentes a 

cada segmento de fibra colágena, unidos hermeticamente a ela. Os 

segmentos de fibras se justapõem uns sobre os outros, provocando 

também a sobreposição dos cristais de hidroxiapatita como espécies de 

tijolos empilhados em um muro (Guyton; Hall, 2006). 

O fosfato de cálcio é um dos materiais usados 

clinicamente para o reparo de defeitos ósseos. Tem sido estudado 

extensivamente do decorrer da última década devido à sua estreita 

semelhança com os tecidos mineralizados do corpo humano e por sua 

excelente biocompatibilidade (Zhou et al., 2007; Arisan et al., 2008).  

A ação homeopática do fosfato de cálcio (Calcarea 

phosphorica) cura várias doenças relacionadas com a formação e 

remodelação óssea, sendo prescrito para casos de formação tardia de 

calo ósseo, problemas com a união de fraturas, crescimento ósseo 

deficiente e anormal e dores ósseas e articulares na tíbia (Tyler, 1992; 

Vijnovsky, 1992)  

A Calcarea phosphorica atua no equilíbrio cálcio-fósforo. 

Tal equilíbrio é importante para uma deposição de cálcio e formação do 

calo ósseo desejável (Freitas; Castro, 1995). Além disso, possui tropismo 

sobre matriz óssea, podendo ser administrada em condições de saúde 

variadas como na fase de erupção dentária em bebês e também na 

condromalácia (Ullman, 1988; Esquivel et al., 1996). 

Poucos são os relatos na literatura científica sobre o uso 

de medicamentos homeopáticos como indutores de nova formação óssea. 

Balducci-Rosindo et al. (1999) avaliaram a ação de 

Symphytum officinale e Calendula officinallis, e sua capacidade específica 



48

de promover a reparação óssea após exodontia em camundongos. Os 

resultados obtidos através de análise histológica comparativa mostraram 

que os animais tratados apresentaram uma aceleração na maturação do 

tecido ósseo neoformado, quando comparado com o grupo controle. 

Almeida et al. (2009) estudaram a reparação de defeitos 

ósseos em mandíbulas de ratos utilizando Plumbum metalicum 30CH e 

compararam com ratos controle e ratos tratados com calcitonina. O 

completo preenchimento do defeito cirúrgico, por toda a extensão, foi 

somente observado no grupo tratado com Plumbum metalicum. Neste 

estudo as análises morfológica e histomorfométrica, mostraram níveis 

mais baixos de formação óssea nos animais tratados com calcitonina em 

comparação com os outros grupos. O estudo demonstrou que para a 

reparação de defeito ósseo guiado em mandíbula de ratos machos, o 

grupo tratado com homeopatia e o grupo controle produziram resultados 

similares. 

Igualmente, raros são os estudos que utilizaram a Calcarea

phosphorica para a avaliação da osteoporose e reparação óssea. 

Esquivel et al. (1996), realizaram um estudo de um ano de duração com 

20 mulheres portadoras de osteoporose pós-menopausa devidamente 

diagnosticada. A avaliação da mineralização óssea foi feita por 

densitometria, com 3 tomadas do colo do fêmur e da diáfise femural, a fim 

de avaliar o osso cortical e trabecular. Os controles foram feitos no 

começo, aos seis meses e aos doze meses do início do tratamento. A 

Calcarea phosphorica foi associada a outras substâncias e ao final do 

experimento os autores verificaram eficácia do tratamento homeopático 

proposto, obtendo uma melhoria importante na densidade mineral óssea. 

Werkman et al. (2006) compararam o efeito do 

risedronato sódico com Calcarea phosphorica no reparo ósseo de ratos 

machos castrados por meio de análise histológica, histomorfométrica e de 

densidade óptica. Observaram que a Calcarea phosphorica 6CH se 



49

mostrou mais eficaz nas fases iniciais do processo de reparo do que o 

risedronato. O tratamento com risedronato influenciou a reparação, 

levando a uma maior quantidade de osso em comparação com Calcarea 

phosphorica. Contudo, o osso formado sob ação do risedronato mostrou 

resistência a reabsorção, mantendo seu aspecto trabecular, enquanto a 

Calcarea phosphorica mostrou uma remodelação de osso inicialmente 

trabecular para um osso lamelar no fim do experimento. 

Nos últimos anos, tem havido um aumento no número de 

estudos pré-clínicos in vitro e em animais objetivando avaliar a atividade 

farmacológica ou eficácia de medicamentos homeopáticos em condições 

de reproduzir os testes (Conforti et al., 2007). 

No entanto, ainda há poucos relatos da avaliação 

qualitativa e quantitativa dos efeitos da Calcarea phosphorica na 

reparação óssea. Estudos mais aprofundados deste medicamento devem 

ser realizados visando ampliar a sua utilização terapêutica e a melhoria 

da qualidade de vida de pacientes com alto risco de fraturas ósseas, 

como observado na osteoporose em homens e mulheres.  

 



3 PROPOSIÇÃO 

Este trabalho teve por objetivo avaliar o potencial do 

medicamento homeopático Calcarea phosphorica 6CH na reparação de 

lesão óssea em ratas ovariectomizadas, comparando com os efeitos do 

medicamento alopático alendronato. 



4 MATERIAL E MÉTODO 

4.1 Manuseio geral dos animais 

Para a realização deste trabalho foram utilizadas 120 

ratas (Rattus novergicus, var. albinus, Wistar) com 90 dias de idade e 

peso aproximado de 320g, mantidas em gaiolas com seis animais cada, 

temperatura média de 22ºC, média de 12 horas na presença de luz e 12 

horas no escuro, alimentadas com ração Guabi Nutrilabor e água ad 

libitum, fornecidos pelo Biotério da Faculdade de Odontologia de São 

José dos Campos – UNESP.

Este experimento foi realizado de acordo com os 

Princípios Éticos para a Experimentação Animal adotado pelo Colégio 

Brasileiro de Experimentação Animal (COBEA) submetido ao comitê de 

ética para experimentação em animais da Faculdade de Odontologia de 

São José dos Campos – UNESP (nº 045/2007-PA/CEP). Todas as 

medidas possíveis foram tomadas para evitar sofrimento desnecessário 

dos animais, bem como para reduzir o número de animais utilizados e as 

perdas durante o trans e pós-operatório.

Os animais foram divididos em quatro grupos 

experimentais:

a)  Grupo A - ratas ovariectomizadas e tratadas com 

alendronato (Terapêutica – São José dos 

Campos, SP) 3,75 mg/Kg dissolvidos em 1 ml de 

água/animal/ 3 vezes por semana, por via oral 

(gavagem);



52

b)  Grupo CP - ratas ovariectomizadas e tratadas 

com Calcarea phosphorica 6CH (Pharmaciantiga 

– São José dos Campos, SP) via oral, dois 

glóbulos dissolvidos em 1 ml de água/animal/dia, 

por via oral (gavagem); 

c)  Grupo O - ratas ovariectomizadas e tratadas 

com placebo (1 ml de água/animal/dia) por via 

oral (gavagem); 

d)  Grupo S - ratas com cirurgia sham tratadas com 

placebo (1 ml de água/animal/dia) por via oral 

(gavagem).

4.2 Anestesia 

Para todos os procedimentos cirúrgicos os animais 

receberam anestesia geral com solução aquosa a 2% de cloridrato de 2-

(2,6-xilidino)-5,6-dihidro-4H-1,3 tiazina (Anasedan® - Bayer, São Paulo, 

SP, Brasil), substância sedativa e relaxante muscular, associada à 

ketamina base (Dopalen® - Agribrands do Brasil Ltda), anestésico geral, 

na proporção de 0,8:0,5 ml e administrados por via intramuscular na dose 

de 0,1 ml/100 g de peso dos animais. 

4.3 Ovariectomia

Após a depilação manual e anti-sepsia feita com álcool 

iodado da região correspondente ao ovário a ser removido, a ovariectomia 

foi realizada cirurgicamente. Com o animal posicionado lateralmente, o 



53

acesso aos ovários se deu aproximadamente a 1cm de distância da 

coluna vertebral e a 1cm abaixo da última costela. Com uma lâmina de 

bisturi n° 15 realizou-se uma incisão de 1,5cm na pele nesta região, 

paralelamente ao longo eixo do animal, seguindo-se por incisão e 

divulsão dos tecidos subjacentes até a exposição do ovário. Foi feita uma 

ligadura logo abaixo desse, com fio de algodão estérill e em seguida a 

remoção do ovário. O útero e os demais tecidos foram reposicionados e a 

sutura feita em planos com fios de seda 4.0 (Ethicon, Brasil). No local foi 

feita nova antissepssia com álcool iodado. Procedimento similar foi 

realizado no ovário contralateral do animal na mesma sessão cirúrgica. 

Após a cirurgia os animais não receberam antibiótico e permaneceram em 

gaiolas (n= 6/gaiola) recebendo ração e água ad libitum durante 60 dias, 

tempo preconizado neste experimento para a indução da osteoporose. 

A cirurgia sham, ou falsa ovariectomia, foi realizada 

seguindo os mesmos passos da cirurgia de ovariectomia acima descrita, 

com exceção da ligadura do ovário e de sua remoção. Assim, após sua 

exposição, os ovários foram reposicionados cuidadosamente na cavidade 

abdominal e a sutura realizada em planos. 

A sequência de procedimentos cirúrgicos da ovariectomia 

pode ser visualizada na Figura 1. 



54

Figura 1 - a) animal anestesiado e depilado para a cirurgia de ovariectomia; b) incisão 
da pele e camada muscular; c) amarração e excisão do ovário; d) aspecto 
final após a sutura da camada muscular e pele. 

4.4 Execução da lesão óssea e tratamento 

Em todos os animais foram realizados defeitos ósseos 

monocorticais na tíbia direita, após 60 dias da castração. Os ratos foram 

novamente anestesiados com associação de solução aquosa a 2% de 

cloridrato de 2-(2,6-xilidino)-5,6dihidro-4H-1,3 tiazina (Anasedan® - Bayer, 

São Paulo, SP, Brasil), substância sedativa e relaxante muscular e 

cloridrato de ketamina 10% (Dopalen® – Agribands do Brasil,Ltda), 

anestésico geral, na proporção de 0,8:0,5 ml e administrados por via 

intramuscular na dose de 0,1 ml/100 g de peso dos animais. 



55

Na face interna da perna foi realizada depilação manual e 

após antissepsia local, com álcool iodado, foi realizada uma incisão de 

aproximadamente 1,5cm na pele e músculo na região do terço proximal 

tibiano com lâmina de bisturi n� 15. Em seguida à exposição da face 

interna da tíbia, o periósteo e os tecidos moles foram afastados com 

espátula 7. Com o auxílio de uma broca esférica n�8, em motor de baixa 

rotação, sob irrigação constante de solução de NaCI 0,9%, foi realizada 

uma lesão monocortical de 2,5 mm de diâmetro até o limite da medula 

óssea. Após estabilização do coágulo sanguíneo sobre a lesão, a região 

foi suturada, em planos, com fio de seda 4.0 (Ethicon, Brasil).

A sequência de procedimentos cirúrgicos da lesão óssea 

pode ser visualizada na Figura 2. 



56

Figura 2 -  a) animal anestesiado e depilado para a cirurgia de defeito ósseo; b) incisão 
da pele e camada muscular; c) tíbia exposta para a confecção da lesão; d) 
aspecto da lesão monocortical, e) sutura da camada muscular; f) aspecto final 
após a sutura da camada muscular e pele. 

Os animais não receberam antiinflamatório e antibiótico 

no pós-operatório para evitar uma possível interação medicamentosa, 

especialmente com o medicamento homeopático. Além disso, estudos 

têm demonstrado que os antiinflamatórios podem atrasar o processo de 

reparação óssea (O’Connor; Lysz, 2008). 



57

Após a realização da lesão, os animais foram tratados 

com os respectivos medicamentos propostos para cada grupo: Calcarea 

phosphorica, alendronato ou água. A medicação foi iniciada no dia 

seguinte ao da cirurgia de lesão óssea.

4.5 Sacrifício dos animais

Todas as ratas foram sacrificadas, em grupos de seis 

animais, após 3, 6, 10, 17 e 28 dias a partir do início do tratamento. Para 

a realização do sacrifício foi utilizada anestesia geral seguida de secção 

aórtica. As tíbias foram retiradas e conservadas em solução de formol a 

10%, onde permaneceram por 3 dias antes das tomadas radiográficas. 

4.6 Comprovação da ovariectomia

A comprovação da eficácia do procedimento de 

ovariectomia foi realizada por meio de avaliação macroscópica da atrofia 

dos cornos uterinos.

4.7 Avaliação da densidade óptica das tíbias

As tíbias foram radiografadas pelo Sistema de Radiografia 

Digital Direta Intrabucal Visualix (Dentsply-Gendex, Milano-Italy). O 

equipamento é dotado de um dispositivo de carga acoplada CCD 

(charged-coupled device) para captura direta de imagem, constituído de 



58

um sistema ligado por cabo ao microcomputador. O aparelho de raios X 

utilizado foi o Gendex 765DC (Gendex Dental Systems, Dentsply 

International, Chicago, IL, USA) de corrente contínua 65kVp e 7mA com 

filtração de 2mm/Al, ponto focal efetivo de 0,4mm2 e área focal de 6cm. 

As tíbias foram posicionadas sobre o sensor fixado em 

uma mesa, com a face da lesão óssea centralizada na área ativa de 

30x20mm, e voltada para o cilindro, de forma a não ser observada 

sobreposição das corticais na imagem radiográfica da lesão. As tomadas 

radiográficas, com tempo de exposição de 0,05 s e com o cilindro 

posicionado com distância focal de 40 cm foram realizadas pela técnica 

do paralelismo. Figura 3 

Figura 3 – Tomada radiográfica mostrando a tíbia posicionada sobre o sensor e a 
respectiva imagem radiográfica evidenciando a região do defeito ósseo 
(seta). 

As imagens radiográficas foram obtidas com resolução de 

600 dpi, salvas em formato TIFF e a densidade óptica analisada pelo 



59

programa UTHSCSA Image Tool, versão 3.00 (University of Texas Health 

Sciences Center, San Antonio, Texas, USA). A densidade óptica foi 

medida em uma região selecionada por um círculo delimitando toda a 

área do defeito criado, demonstrada pelo programa em uma escala de 

256 níveis de cinza onde o preto correspondia ao valor zero e o branco ao 

valor 255. 

4.8 Análise histológica 

Após a realização das tomadas radiográficas, as tíbias 

foram submetidas à descalcificação com ácido etilenodiaminotetracético 

(EDTA 10%), em temperatura ambiente e sob agitação periódica.

Após a descalcificação completa, as tíbias foram 

seccionadas transversalmente em região adjacente ao limite distal do 

defeito ósseo. O fragmento contendo a lesão foi incluído no sentido da 

superfície de corte em bloco de parafina e submetido a processamento 

histológico de rotina com obtenção de cortes semi-seriados. Os cortes 

foram obtidos com aproximadamente 5 a 6 µm de espessura e 

aprofundamento de 100 µm em cada nível, somando um total de vinte 

lâminas em cada bloco. Para cada nível foram confeccionadas duas 

lâminas, uma corada com Hematoxilina e Eosina (HE – Merck & Co,Inc.) e 

a outra com Tricrômio de Masson (SIGMA Diagnostics – St. Louis,MO, 

USA).

Os cortes mais centrais do defeito foram selecionados e 

submetidos à análise, com o auxílio de microscopia de luz, avaliando-se 

os aspectos morfológicos da reparação óssea, analisando o 

desenvolvimento, substituição, maturação e remodelação das diversas 

estruturas que se formaram nas fases sequenciais do reparo ósseo: 

coágulo sanguíneo, tecido de granulação, aparecimento de células 



60

osteogênicas, trabéculas ósseas neoformadas (matriz osteóide e matriz 

mineralizada), trabéculas ósseas maduras e a remodelação das mesmas. 

4.9  Avaliação histomorfométrica das tíbias 

Para a realização da análise histomorfométrica, as lâminas 

foram fotografadas em microscópio de luz Axiophot 2 (Carl Zeiss, 

Oberköchen, Alemanha) acoplado a uma câmera digital AxioCam MRc 5 

(Carl Zeiss Oberköchen, Alemanha) que as transmite para o programa 

computacional AxioVision Release 4.7.2. As imagens digitais (formato 

JPEG) de três lâminas por animal, da região mais central do defeito, 

foram usadas para análise quantitativa do tecido ósseo neoformado. 

Inicialmente, as imagens foram analisadas com o 

programa NIH Image J (U.S. National Institutes of Health, Bethesda, 

Maryland, USA - http://rsb.info.nih.gov/ij/), versão 1.31 para Windows.

Primeiramente foi calculada a área em pixels2 de uma 

região delimitada abrangendo todo o defeito criado e o canal medular 

adjacente, chamada de área A. Figura 4. 



61

Figura 4 -  Delimitação da área abrangendo todo o defeito criado e o canal medular 
adjacente (área A). 

Posteriormente foi também calculada uma segunda área 

formada pela delimitação de toda a área preenchida por osso e tecido 

intertrabecular, chamada de área B. Figura 5. 

Figura 5 -  Delimitação da área preenchida por osso e tecido intertrabecular (área B). 



62

Usando os valores obtidos, para cada corte analisado, foi 

calculada a proporção de área preenchida por osso e tecido 

intertrabecular (área de preenchimento) em relação à área total seguindo 

a equação: 

(%) de Preenchimento = Área B x 100/ Área A 

Na etapa seguinte, foi utilizada a ferramenta magic wand

do programa Adobe Photoshop, versão 7.0, com tolerância de 60, para 

selecionar somente as trabéculas ósseas neoformadas presentes na área 

B. Figura 6. 

Figura 6 –  Seleção das trabéculas neoformadas presentes na área B utilizando a 
ferramenta magic wand do programa Adobe Photoshop.

Essas trabéculas foram copiadas e salvas como uma 

nova imagem que foi analisada pelo programa Image J para cálculo da 

área dessas trabéculas através dos seguintes passos: 



63

a) Process � Binary � Make Binary; 

b) medição da área: Analyze � Analyze Particles  

 

Com esses passos a área analisada (trabéculas) foi 

medida automaticamente em pixels2. Figura 7. 

Figura 7 –  Em azul observam-se as trabéculas ósseas neoformadas presentes na área 
B após a seleção realizada com a ferramenta magic wand do programa 
Adobe Photoshop. Em preto, observa-se a imagem transformada que foi 
analisada pelo programa Image J para o cálculo da área dessas trabéculas. 

A proporção de osso neoformado (área trabecular) foi 

então calculada através da relação entre a área ocupada somente pelas 

trabéculas ósseas neoformadas (área C) e a área preenchida por osso e 

tecido intertrabecular (área B) segundo a equação: 

 

(%) de Osso neoformado = Área C x 100/ Área B 

Esse cálculo permitiu o conhecimento da proporção entre 

trabéculas ósseas e espaço intertrabecular. 



64

Os dados foram tabulados e submetidos à análise 

estatística. Para cada animal, o valor da porcentagem de área de 

preenchimento, bem como a porcentagem de osso neoformado contida 

dentro da área de preenchimento corresponderam à média dos valores 

obtidos nas três lâminas analisadas. 

4.10 Análise estatística 

Os dados obtidos nas análises de densidade óptica e 

histomorfométrica da tíbia foram submetidos à estatística descritiva e a 

teste estatístico. Os testes utilizados, dependendo das condições de cada 

grupo foram: análise de variância ANOVA paramétrica, ANOVA não 

paramétrica de Kruskal-Wallis, testes de Tukey e de comparação múltipla 

de Dunn. O nível de significância (p) adotado foi o valor de 5%. Os 

gráficos e todos os testes foram efetuados usando o programa 

computacional MINITAB® Release 14.12.0, Statistix 8.0 e GraphPad 

Prism 5.00 for Windows, Pensylvania USA. 

A análise estatística foi elaborada para cada um dos 

métodos de avaliação utilizados neste estudo como descrito a seguir. 

Para a análise de densidade óptica, primeiramente foram 

comparados os animais tratados com placebo (sham e ovariectomizados), 

tendo como variáveis independentes a presença ou ausência de ovários e 

os períodos de 3, 6, 10, 17 e 28 dias. Como variável dependente ou 

variável resposta a densidade óptica. Esquema fatorial 2X5. 

Posteriormente foram comparadas as densidades ópticas entre os 

animais ovariectomizados, submetidos aos diferentes tratamentos, tendo 

como variáveis independentes os tratamentos com alendronato, Calcarea 

phosphorica, placebo e os períodos de 3, 6, 10, 17 e 28 dias. Como 



65

variável dependente ou variável resposta a densidade óptica. Esquema 

fatorial 3X5. 

Para a análise da área de preenchimento do defeito ósseo 

primeiramente foram comparados os animais tratados com placebo (sham

e ovariectomizados), tendo como variáveis independentes a presença ou 

ausência de ovários e os períodos de 6, 10, 17 e 28 dias. Como variável 

dependente ou variável resposta o percentual de área de preenchimento 

por osso. Esquema fatorial 2X4. Posteriormente foram comparados os 

animais ovariectomizados submetidos aos diferentes tratamentos, tendo 

como variáveis independentes os tratamentos com alendronato, Calcarea 

phosphorica, placebo e os períodos de 6, 10, 17 e 28 dias. Como variável 

dependente ou variável resposta o percentual de área de preenchimento 

do defeito. Esquema fatorial 3X4. 

Para a análise da área de osso neoformado presente na 

área de preenchimento do defeito ósseo primeiramente foram 

comparados os animais tratados com placebo (sham e ovariectomizados), 

tendo como variáveis independentes a presença ou ausência de ovários e 

os períodos de 6, 10, 17 e 28 dias. Como variável dependente ou variável 

resposta o percentual de osso neoformado. Esquema fatorial 2X4. 

Posteriormente foram comparados os animais ovariectomizados 

submetidos aos diferentes tratamentos, tendo como variáveis 

independentes os tratamentos com alendronato, Calcarea phosphorica,

placebo e os períodos de 6, 10, 17 e 28 dias. Como variável dependente 

ou variável resposta o percentual de osso neoformado. Esquema fatorial 

3X4.



5 RESULTADO 

Os resultados obtidos serão apresentados em partes nas 

quais serão analisadas respectivamente os dados referentes à; 5.1 - 

análise de densidade óptica; 5.2 - análise histomorfométrica e 5.3 - 

análise histológica descritiva. Cada análise focou um diferente aspecto da 

evolução da reparação óssea nos diferentes grupos. 

Para as análises quantitativas - de densidade óptica e 

histomorfométrica - os dados obtidos foram divididos e analisados em 

duas partes. Na primeira, foram analisados os grupos de animais que 

receberam tratamento placebo, comparando-os entre si: animais 

submetidos à cirurgia sham (S) e aqueles ovariectomizados (O). Na 

segunda, foram analisados e comparados entre si os grupos de animais 

ovariectomizados e tratados com: alendronato (A), placebo e Calcarea

phosphorica (CP). 

5.1 Densidade óptica 

5.1.1 Análise de densidade óptica dos grupos S e O  

Os dados de densidade óptica foram obtidos após a 

realização de radiografias digitais das tíbias, levando em consideração a 

região dos defeitos ósseos. 



67

As variações de densidade óptica nos grupos S e O estão 

expressas na Tabela 1, considerando as variáveis tempo de reparação 

óssea e presença/ausência de ovários. 

Tabela 1 -  Estatística descritiva dos valores médios (±desvio padrão) de 
densidade óptica dos grupos sham (S) e ovariectomizado (O), 
considerando os diferentes tempos de reparação óssea 

Tempo de reparo 
(dias) n Presença/Ausência

Ovários (m±dp) 
           S            O 

3 6 49,25
±6,15

50,00
±9,39

6 6 58,50
±11,35

47,50
±10,03

10 6 62,58
±12,89

63,83
±11,84

17 6 
68,83
±6,99

63,08
±10,21

28 6 
76,33
±12,13

61,00
±5,79

n = tamanho da amostra 
S = sham + placebo 
O = ovariectomizado + placebo 

Por meio da Tabela 1 nota-se que o grupo S apresenta 

um aumento gradual e constante dos valores de densidade óptica, do 

início ao fim do período de observação, terminando aos 28 dias com 

valores superiores aos do grupo O. Por outro lado, o grupo O exibe um 

ligeiro declínio dos valores de densidade óptica no período de 3 a 6 dias, 

sofre um aumento no período de 6 a 10 dias, apresentando, a partir daí, 

valores praticamente constantes até o final do período. Os dados da 

Tabela1 estão representados em gráfico de colunas na Figura 8. 



68

S3 S6 S10 S17 S28 O3 O6 O10 O17 O28
0

20

40

60

80

100
D

en
si

da
de

 Ó
pt

ic
a

Figura 8 -  Gráfico de colunas dos valores médios (±desvio padrão) referentes aos 
valores de densidade óptica dos grupos S e O, considerando os diferentes 
tempos de reparação óssea. 

Para avaliar a influência dos efeitos presença/ausência de 

ovários e tempo sobre a densidade óptica foi realizada uma análise por 

meio do teste ANOVA 2 fatores. Os resultados estão na Tabela 2. 



69

Tabela 2 - Resultado da análise ANOVA para os dados de densidade 
óptica dos grupos S e O 

Fonte de variação gl SQ QM F p 

Presença/ausência
ovários 1 543,00 543,004 5,45 0,0236* 

Tempo 4 3330,06 832,515 8,36 0,0000* 

Presença/ausência
ovários x Tempo 4 630,89 157,723 1,58 0,1931 

Resíduo 50 4978,79 99,576   

Total 59 9482,75    

*p<0,05 

Verificou-se por meio da tabela 2, que o efeito interação 

tempo versus presença/ausência de ovários não foi estatisticamente 

significante. Verificou-se, ainda, que os efeitos principais 

presença/ausência de ovários e tempo foram estatisticamente 

significantes.  

A ausência de ovários resultou em menores valores de 

densidade óptica com diferença estatisticamente significativa entre os 

grupos S (média 63,09) e O (média 57,08). Quanto ao efeito tempo, por 

meio do teste de Tukey, pode-se observar que os valores de densidade 

óptica foram crescentes com o passar do tempo com diferença 

estatisticamente significante entre os períodos de 28 e 17 dias em relação 

aos períodos de 6 e 3 dias. O período de 10 dias apresentou valor 

estatisticamente diferente apenas do de 3 dias (Tabela 3). 



70

Tabela 3 - Formação de grupos homogêneos por meio do teste de Tukey 
(5%). Valores médios de densidade óptica dos grupos S e O, 
considerando os diferentes tempos de reparação óssea. 

Tempo de reparo (dias)        Média Grupos Homogêneos 
28 68,667                        A  
17 65,958 A
10 63,208     AB 
6 53,000           BC 
3 49,625              C 

Médias seguidas de letras iguais não diferem estatisticamente 

5.1.2 Análise de densidade óptica dos grupos A, O e CP 

Da mesma forma que no item anterior, os dados de 

densidade óptica foram obtidos após a realização das radiografias digitais 

das tíbias, levando em consideração a região dos defeitos ósseos. As 

variações de densidade óptica nos grupos A, O e CP estão expressas na 

Tabela 4, considerando as variáveis tempo de reparação óssea e 

tratamento.



71

Tabela 4 - Estatística descritiva dos valores médios (±desvio padrão) de 
densidade óptica dos grupos A, O e CP, considerando os 
diferentes tempos de reparação óssea 

Tempo de 
reparo (dias) n

A
Tratamentos (m±dp) 

O CP 

3 6 40,58
±2,48

50,00
±9,39

44,42
±6,33

6 6 52,42
±9,36

47,50
±10,03

59,67
±8,94

10 6 69,58
±7,03

63,83
±11,84

60,50
±7,86

17 6 69,92
±8,03

63,08
±10,21

72,83
±5,89

28 6 90,33
±17,94

61,00
±5,78

61,92
±6,45

n = tamanho da amostra 
A = ovariectomizado + alendronato  
O = ovariectomizado + placebo 
CP = ovariectomizado + Calcarea phosphorica

Por meio da tabela 4 observa-se um aumento gradual e 

constante dos valores de densidade óptica para o grupo A nos intervalos 

de tempo de 3, 6 e 10 dias. Entre os tempos de 10 e 17 dias há pouca 

alteração e no intervalo de 17 a 28 dias um aumento mais significativo é 

observado. O grupo O apresenta um ligeiro decréscimo no intervalo de 3 

a 6 dias, um aumento mais significante dos 6 aos 10 dias e a partir daí se 

mantém praticamente estável até o final do período de avaliação. O grupo 

CP mostra um aumento no período de 3 a 6 dias, que se mantém estável 

até os 10 dias, sofrendo um aumento mais significante