UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA  
“JÚLIO DE MESQUITA FILHO” 

FACULDADE DE MEDICINA 

 
 
 
 

Éder Anderson Rodrigues 
 
 
 
 
 

Influência do exercício físico resistido 
sobre a remodelação cardíaca de ratos 

com infarto do miocárdio 
 

 
Dissertação apresentada à Faculdade de Medicina 
de Botucatu, Universidade Estadual Paulista “Júlio de 
Mesquita Filho”, para obtenção do título de Mestre em 
“Fisiopatologia em Clínica Médica”. Área de 
concentração: cardiologia 

                                                            
                                                                                
 
 
 

Orientadora: Profa. Adj. Marina Politi Okoshi 
 

Co-Orientadora: Dra. Aline Regina Ruiz Lima 
 

 
 
 
 
                                                            Botucatu 

                                                     2018



 

Éder Anderson Rodrigues 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Influência do exercício físico resistido 
sobre a remodelação cardíaca de ratos 

com infarto do miocárdio 
 

 
Dissertação apresentada à Faculdade de Medicina de 
Botucatu, Universidade Estadual Paulista “Júlio de 
Mesquita Filho”, para obtenção do título de Mestre em 
“Fisiopatologia em Clínica Médica”. Área de concentração: 
cardiologia. 

 
                                                            

Orientadora: Profa. Adj. Marina Politi Okoshi 

Co-Orientadora: Dra. Aline Regina Ruiz Lima 

 

 
 
 
 
 
 

 
Botucatu  

2019



 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Rodrigues, Éder Anderson. 
Influência do exercício físico resistido sobre a 

remodelação cardíaca de ratos com infarto do miocárdio / 
Éder Anderson Rodrigues. - Botucatu, 2019 
 

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual Paulista 
"Júlio de Mesquita Filho", Faculdade de Medicina de 
Botucatu 

Orientador: Marina Politi Okoshi 
Coorientador: Aline Regina Ruiz Lima 
Capes: 40101100 

 
1. Infarto do miocárdio. 2. Remodelação ventricular. 3. 

Insuficiência cardíaca. 4. Exercício. 5. Estresse 
oxidativo. 

Palavras-chave: Estresse oxidativo; Exercício resistido; 
Infarto do miocárdio; Insuficiência cardíaca; Remodelação 
cardíaca. 

FICHA CATALOGRÁFICA ELABORADA PELA SEÇÃO TÉC. AQUIS. TRATAMENTO DA INFORM. 

DIVISÃO TÉCNICA DE BIBLIOTECA E DOCUMENTAÇÃO - CÂMPUS DE BOTUCATU - UNESP 

BIBLIOTECÁRIA RESPONSÁVEL: ROSANGELA APARECIDA LOBO-CRB 8/7500 

 



 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Dedicatória



 

 

Agradecimento especial 

 

 Agradeço de maneira muito especial à minha 

orientadora Profª Adj. Marina Politi Okoshi, pela rica 

oportunidade de aprendizado dentro do campo da pesquisa. 

Obrigado por me direcionar, ensinar e por toda paciência e 

compreensão que sempre teve comigo. É muito gratificante e me 

sinto honrado em ser seu orientando. Muito obrigado!



 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Agradecimentos



 

 Primeiramente, agradeço à Capes, agência de fomento 

responsável pelo financiamento deste trabalho, sem qual o seria impossível 

a realização do mesmo. Muito obrigado! 

 Agradeço ao Universo pelo privilégio de superar todos os 

obstáculos que a vida me impôs até aqui, e pela oportunidade de 

aprendizado e crescimento pessoal através de cada dificuldade. 

 Agradeço à minha avó Dna. Ana (in memoriam), por ter feito 

tudo o que pôde para me ver bem e feliz!  

 Ao meu pai Sérgio (in memoriam) pelo cuidado e provisão 

enquanto esteve neste plano. 

 Aos meus tios, Sr. Hélio e Dna. Luzia por terem me amparado 

e me educado dentro de suas possibilidades! 

 Aos meus primos/irmãos, Luciana, Mara e Juninho pelo carinho 

e acolhimento de sempre! 

 Agradeço ao amigo Dr. David Reyes por ter me apresentado à 

Dra. Marina Politi Okoshi e por ter confiado na minha capacidade para o 

desenvolvimento do mestrado. Agradeço também o acolhimento em sua casa 

sempre que se fez necessário. Muito obrigado! 

 À minha amiga/irmã Ny, que torce sempre por mim e se orgulha 

de cada conquista minha! Você me faz acreditar que o amor da amizade 

nunca morre, e que sempre terei um lugar pra retornar quando eu não 

encontrar uma saída à minha frente! Te amo!  

 Agradeço à minha querida amiga Fabiana, a qual nunca mediu 

esforços para me ver bem e sempre esteve ao meu lado! Obrigado por tanto 

carinho! 

 Agradeço aos amigos, Rodrigo, Francisco, Claudinei, Vagson, 

Rafael, Amílton e Rafa Chaves por fazerem parte de um momento tão 

especial da minha vida, que foi o início da faculdade! Obrigado por toda 



 

ajuda, apoio e alegria que me proporcionaram e ainda me proporcionam em 

cada reencontro. Jamais me esquecerei de vocês!  

 Agradeço aos meus amigos de república (novos e antigos) que se 

tornaram minha família: Ana, Pinga, Gustavo, Vítor Tanu, Bruno, 

Maurício e Bisnaga. Obrigado por tudo! 

 Aos amigos queridos que a graduação me presenteou, e que 

ainda fazem parte da minha vida de uma maneira muito especial: Ana, 

Pinga, Josi, Anne, Bárbara, Lidi, Maurício, Guilherme, Thaís de Cássia, 

Matheus, Amanda, Aline, Sushi, e tantos outros. Muito obrigado por 

estarem por perto ainda, seja fisicamente ou por pensamento, mas a 

presença é real! Amo vocês! 

 Aos amigos que surgiram de maneira muito especial nas 

casualidades da vida: Juliana, Vítor Borges, Fabrício, Filipe, Flávio, Jeff, 

Bruninho, Gaby, Rafael Augusto e Lucas Ezias. Quando penso em vocês 

percebo que a vida é muito generosa comigo, pois me deu os melhores! 

Agradeço à Dra. Aline Regina Ruiz Lima pela co-orientação, pela paciência 

comigo em meus passos iniciais no laboratório, pelos puxões de orelha e por 

compartilhar tanto conhecimento durante as etapas de experimento. Muito 

obrigado!!!  

 Ao Prof. Adjunto Dr. Katashi Okoshi, agradeço pela avaliação 

ecocardiográfica de todos os animais, bem como pela disposição e paciência 

em nos ensinar.   

 Ao Prof. Dr. Leonardo Zornoff pela cirurgia de indução de 

infarto nos animais. 

 À Profª. Dra. Anna Angélica Henrique Fernandes, pela análise 

das enzimas antioxidantes, realizada no Laboratório de Pesquisa do 

Departamento de Química e Bioquímica do Instituto de Biociências de 

Botucatu, UNESP.   



 

 À Profª Dra. Camila Renata Correa pelas análises e avaliação 

do malonaldeído, pela paciência em ensinar e pela disposição de sempre! 

 Aos amigos do laboratório, David, Luana, Mariana, Lidi, 

Thierres, Aline, Camila, Felipe, Amanda, Leili, Marcelo, Ricardo e 

Adriana. Muito obrigado por toda a ajuda, pelos conselhos, pelas dúvidas 

esclarecidas e por tantos ensinamentos que cada um me proporciona!  

 Ao amigo Dijon Campos, pelos conselhos e ajuda em qualquer 

assunto que estivesse ao seu alcance. Obrigado! 

 Agradeço ao colega e funcionário da Unipex, Ígor Deprá por 

toda ajuda com a avaliação da expressão gênica presente neste trabalho! 

 À Ana Mengue, secretária do Departamento de Clínica Médica, 

por toda a colaboração na solução das questões burocráticas. 

 À ex-secretária da Unipex, Guiomar, por me receber com tanto 

carinho e por sempre ter me ajudado com os assuntos burocráticos deste 

trabalho! Obrigado, Gui!!! 

 Obrigado a todos os funcionários da Unipex! 

 Agradeço a todos, que de maneira direta ou indiretamente, 

contribuíram para que eu chegasse até aqui!



 

  
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Sumário



 

Sumário ii

Resumo ............................................................................................................... 1 

Introdução ........................................................................................................... 4 

Objetivos ............................................................................................................10 

Materiais e Métodos.............................................................................................12 

Resultados Parciais ..............................................................................................24 

Discussão ...........................................................................................................35 

Conclusões..........................................................................................................40 

Referências .........................................................................................................42 



 

 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Resumo



 

Resumo 2

Introdução: O exercício físico é considerado importante estratégia terapêutica para 

pacientes com insuficiência cardíaca (IC) estável. A compreensão dos benefícios do 

exercício na IC resultou, principalmente, de investigações com exercício aeróbio, 

uma vez que treinamento muscular resistido não era considerado seguro. Mais 

recentemente, exercícios resistidos têm sido recomendados na IC. Os mecanismos 

envolvidos nos efeitos do exercício resistido sobre o miocárdio ainda não estão 

esclarecidos. Neste estudo, foi avaliado os efeitos do exercício físico resistido, 

durante o processo de remodelação cardíaca, sobre alterações cardíacas 

estruturais, funcionais e moleculares induzidas por infarto do miocárdio (IM) em 

ratos. Métodos: Três meses após a indução do IM, ratos Wistar foram divididos em 

três grupos: Sham (n=20); IM sedentário (IM-Sed, n=20); IM submetido a exercício 

físico resistido (IM-R, n=20). Os ratos treinaram 3 vezes por semana durante três 

meses subindo escada com diferentes cargas. A avaliação das estruturas cardíacas 

e função ventricular foi realizada por ecocardiograma. O menor diâmetro dos 

miócitos foi analisado em cortes histológicos corados por hematoxilina e eosina. A 

avaliação do metabolismo energético, hidroperóxido de lipídeo, enzimas 

antioxidantes, malonaldeído (MDA) e carbonilação de proteínas foi realizada por 

espectrofotometria. A análise de mRNAs das subunidades da enzima NADPH oxidase 

Nox2, Nox4, p22phox e p47phox e dos genes de referência ciclofilina e 

gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (GAPDH) foi realizada por reação em cadeia 

da polimerase em tempo real após transcrição reversa (RT-PCR). A análise 

estatística foi feita por ANOVA complementada pelo teste de Tukey ou teste de 

Dunn’s. Resultados: O exercício resistido melhorou a capacidade de carga máxima 

e não alterou as estruturas cardíacas e o função do ventrículo esquerdo. Os valores 

do menor diâmetro das fibras cardíacas foram menores no grupo IM-Sed que no 

Sham e IM-R. A atividade da lactato desidrogenase foi menor no grupo IM-Sed que 

no Sham e foi restaurada pelo exercício resistido. A atividade da catalase foi menor 

nos grupos infartados. O hidroperóxido de lipídeo foi menor no grupo IM-R que no 

IM-Sed. A expressão da p47phox foi menor no grupo IM-Sed. Conclusões: Ratos com 

infarto do miocárdio apresentam remodelação cardíaca caracterizada por dilatação 

do átrio e ventrículo esquerdos, disfunção sistólica, e redução da atividade da 

lactato desidrogenase e catalase, e da subunidade p47phox do complexo da NADPH 



 

Resumo 3

oxidase no miocárdio. O exercício resistido iniciado tardiamente é seguro, bem 

tolerado, aumenta a capacidade muscular de carga máxima, reduz o estresse 

oxidativo, e preserva a atividade da lactato desidrogenase e a expressão gênica da 

subunidade p47phox do complexo da NADPH oxidase miocárdica em ratos 

infartados. 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

  

 



 

 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Introdução



 

Introdução 5

 Dentre as doenças cardiovasculares, a insuficiência cardíaca (IC) 

representa importante problema de saúde pública por ser condição de alta 

prevalência e elevada morbimortalidade, tanto em países desenvolvidos como em 

desenvolvimento1, 2. Estudos apontam que até 2035, mais de 130 milhões de 

adultos da população dos EUA são projetados para desenvolver algum tipo de 

doença cardiovascular2. No Brasil, as doenças cardiovasculares são as principais 

causas de morte, sendo responsáveis por aproximadamente 20% das mortes em 

pessoas acima de 30 anos3. Segundo dados do Sistema Único de Saúde, dentre as 

doenças cardiovasculares, a insuficiência cardíaca é a mais frequente causa de 

internação hospitalar3, 4.  

 A insuficiência cardíaca pode ser definida como síndrome clínica 

resultante de anormalidades cardíacas estruturais e/ou funcionais, adquiridas ou 

hereditárias, que prejudicam a capacidade de enchimento e ejeção ventricular5. 

Clinicamente, a insuficiência cardíaca caracteriza-se por redução da capacidade 

para exercícios físicos devido à ocorrência precoce de fadiga e dispneia aos 

esforços5. Embora os mecanismos responsáveis por esses sintomas venham sendo 

estudados nas últimas décadas, sua fisiopatologia ainda não está completamente 

esclarecida6-10. Inicialmente, considerava-se que a redução da capacidade para 

exercícios fosse causada por diminuição da função cardíaca e pulmonar e por 

alteração da perfusão tecidual decorrente de queda do débito cardíaco. Entretanto, 

a suposição inicial de que a capacidade para exercícios pudesse relacionar-se 

diretamente com a função ventricular não se confirmou, tendo sido observada 

pobre correlação entre variáveis hemodinâmicas e tolerância aos exercícios6, 11, 12. 

Mais recentemente, foi aventado que anormalidades intrínsecas da musculatura 

esquelética e descondicionamento físico pudessem estar envolvidos na redução da 

capacidade para realizar exercícios físicos13, 14.  

 As principais causas de insuficiência cardíaca são a isquemia 

miocárdica, hipertensão arterial sistêmica, miocardiopatias e doença valvar15. 

Independentemente da etiologia da insuficiência cardíaca, após a agressão cardíaca 

inicial, ocorrem alterações gênicas, moleculares, celulares, intersticiais e funcionais, 

que manifestam-se, clinicamente, como modificações no tamanho, forma e função 

do coração. Este processo é denominado remodelação cardíaca5. Tais alterações 



 

Introdução 6

podem afetar adversamente as funções cardíacas, favorecendo assim, o 

desenvolvimento da insuficiência cardíaca e aumentando o risco de morte16. Os 

mecanismos celulares e as vias de sinalização, que em envolvem essas modificações, 

são complexas e mais estudos são necessário para que se tenha uma melhor 

compreensão do quadro de remodelação cardíaca. Locatti et al17 propõem que o 

exercício físico pode ter um papel benéfico sobre o remodelamento cardíaco, 

atenuando essas modificações e melhorando a função cardíaca. 

 Atualmente, considera-se que aumento do estresse oxidativo tenha 

papel importante na fisiopatologia da remodelação cardíaca e no desenvolvimento 

da insuficiência cardíaca18. Estresse oxidativo pode ser definido como estado de 

desequilíbrio entre a produção de espécies reativas de oxigênio e nitrogênio (EROs) 

e mecanismos endógenos antioxidantes. No miocárdio, o sistema de enzimas 

antioxidantes, composto pelas enzimas superóxido dismutase (SOD), glutationa 

peroxidase (GPX) e catalase (Cat), protege as células das ações de EROs. 

Desequilíbrio entre atividades pró e antioxidantes resulta no aumento do estresse 

oxidativo19. 

 Durante a insuficiência cardíaca, há aumento do estresse oxidativo 

tanto no miocárdio como no sangue20. Diversas fontes podem contribuir para a 

geração de EROs como a cadeia mitocondrial de transferência de elétrons, a xantina 

oxidase (XO), a óxido nítrico sintase endotelial (eNOS), e a NADPH oxidase20. No 

miocárdio insuficiente, a produção de EROs é aumentada na mitocôndria. Aumento 

crônico na produção de EROs mitocondrial resulta em piora da atividade 

mitocondrial, induzindo geração de mais EROs e, consequentemente, lesão celular20. 

 A família da nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato (NADPH) 

oxidase parece ser especialmente importante para a sinalização redox 19, 21. A classe 

de proteínas NADPH oxidase constitui um grupo de enzimas cuja função é produzir 

espécies reativas de oxigênio. Ela foi inicialmente descoberta em fagócitos, há várias 

décadas, com a caracterização da isoforma Nox2, também referida como gp91phox. 

Mais recentemente, seis outros membros da família codificados por genes distintos 

foram identificados: Nox1, Nox3, Nox4, Nox5, dupla oxidase (DUOX) 1 e DUOX2. As 

isoformas predominantemente expressas nos cardiomiócitos são a Nox2 e Nox418, 

20. Estas isoformas diferem entre si quanto ao modo de ativação, à interação com 



 

Introdução 7

a pequena proteína transmembrana p22phox e à necessidade adicional de fatores 

de maturação e ativação. A Nox2 forma um complexo com a p22phox, cuja ativação 

depende da ligação com as subunidades regulatórias citosólicas, p47phox e 

p67phox. Diferentemente das outras isoformas, a Nox4 é constitutivamente ativa 

e independente de proteínas citosólicas regulatórias ou ativadoras. A função das 

enzimas NADPH oxidase é catalisar a transferência de um elétron da NADPH para 

o oxigênio molecular, gerando EROs22. 

 Em condições fisiológicas, a NADPH oxidase é quiescente. Entretanto, 

quando se torna ativada durante a contração muscular ou por estímulos 

infecciosos e pró-inflamatórios, a NADPH oxidase pode gerar grandes quantidades 

do ânion radical superóxido, que pode ser convertido em peróxido de hidrogênio 

(H2O2) pela enzima antioxidante superóxido dismutase23. A atividade da NADPH-

oxidase pode ser exacerbada por vários estímulos geralmente presentes durante a 

insuficiência cardíaca como, por exemplo, estiramento mecânico do miócito, 

angiotensina II e endotelina-120, 23. Estudos recentes demonstraram que a Nox4, 

localizada principalmente na mitocôndria de miócitos cardíacos, é responsável pela 

maior produção de EROs em situação de sobrecarga de pressão e envelhecimento20, 

23. 

 Aumento da atividade e da expressão da NADPH oxidase foi observado 

na hipertrofia ventricular esquerda (HVE) por sobrecarga de pressão e no infarto 

do miocárdio experimental 18, 20. Aumento do estresse oxidativo tem efeitos diretos 

sobre as estruturas e função cardíaca. Em excesso, as EROs causam disfunção 

contrátil devida a alterações na atividade de proteínas envolvidas no acoplamento 

excitação-contração. Adicionalmente, as EROs ativam fatores de transcrição e vias 

intracelulares envolvidas na indução de hipertrofia miocitária e apoptose e 

estimulam a proliferação de fibroblastos cardíacos. Os eventos celulares acima 

descritos estão envolvidos na disfunção do miócito e no desenvolvimento e 

progressão da remodelação do miocárdio e da matriz extracelular20, 24. As vias de 

sinalização pelas quais o estresse oxidativo leva a alterações miocárdicas ainda não 

estão completamente esclarecidas.  

 Apesar do avanço considerável no tratamento da insuficiência 

cardíaca, principalmente nas últimas décadas, sua mortalidade ainda é elevada. 



 

Introdução 8

Indivíduos com insuficiência cardíaca em classes funcionais II a III apresentam 

mortalidade de cerca de 30 % em seis anos25. O mau prognóstico da insuficiência 

cardíaca mostra que mecanismos fisiopatológicos importantes ainda permanecem 

inalterados pelas modalidades terapêuticas atuais. Mais recentemente, o exercício 

físico tem sido considerado importante estratégia terapêutica não farmacológica 

na prevenção e reabilitação de muitas doenças cardiovasculares incluindo a 

insuficiência cardíaca crônica (Downing J)26. Consequentemente, diretrizes 

internacionais1,27 e brasileiras28 para tratamento da insuficiência cardíaca passaram 

a preconizar a prática regular de exercícios físicos para pacientes estáveis, com 

insuficiência cardíaca em classes funcionais I a III de acordo com a classificação da 

New York Heart Association.  

 Desde o trabalho clássico realizado por Sullivan e cols.29, no final da 

década de 80, diversos estudos têm mostrado efeitos benéficos do exercício físico 

aeróbio, que afeta positivamente a função cardiovascular, marcadores 

inflamatórios, ativação neuro-humoral, estresse oxidativo e sistema músculo 

esquelético de pacientes com insuficiência cardíaca. Adicionalmente, a prática 

regular de exercícios melhora a capacidade funcional e qualidade de vida, aumenta 

o consumo máximo de oxigênio, e reduz taxa de reinternações hospitalares e de 

mortalidade por doença cardiovascular26, 30-32. 

 Atualmente, apesar de serem evidentes os benefícios do exercício, 

ainda não estão completamente identificados os mecanismos moleculares pelos 

quais o treinamento físico melhora a função ventricular de pacientes com 

insuficiência cardíaca. Entre os efeitos benéficos do exercício físico, destaca-se a 

ação antioxidante. O exercício físico promove aumento na expressão de enzimas 

antioxidantes e redução na expressão de enzimas pró-oxidantes. O aumento na 

atividade de enzimas antioxidantes pode ser observado em vários tecidos, após 

treinamento aeróbio ou anaeróbio33. Os radicais livres produzidos durante a 

contração muscular atuam como moléculas de sinalização, estimulando a expressão 

gênica e aumentando a atividade de enzimas antioxidantes. Adicionalmente, 

modulam vias de proteção ao estresse oxidativo promovendo, por exemplo, 

aumento de enzimas reparadoras do DNA no miocárdio34-36. 



 

Introdução 9

 A compreensão dos benefícios do exercício físico em pacientes com 

insuficiência cardíaca crônica resultou, primariamente, de investigações com 

exercício físico aeróbio, uma vez que treinamento muscular resistido não era 

considerado seguro na insuficiência cardíaca. Somente mais recentemente, foi 

observado que a prática de exercícios resistidos é não apenas segura, mas também 

associada a benefícios complementares àqueles fornecidos pelo exercício aeróbio37.  

 Em indivíduos saudáveis, a prática de exercícios resistidos resulta em 

diversos benefícios como manutenção de boa capacidade funcional, melhora da 

endurance muscular, densidade óssea, força muscular, metabolismo basal e 

resistência à insulina, além de reduzir risco de osteoporose e diabetes e auxiliar no 

controle da hipertensão arterial38. Na insuficiência cardíaca, também foram 

descritos efeitos benéficos resultantes do treinamento resistido como melhora da 

capacidade física com aumento do consumo máximo de oxigênio, melhora da força 

e endurance muscular, e aumento de enzimas oxidativas no músculo esquelético39, 

40. A somatória desses fatores resulta em melhora da performance para atividades 

de vida diária e da qualidade de vida dos pacientes37. Entretanto, os mecanismos 

envolvidos nos efeitos do exercício físico resistido no miocárdio ainda não estão 

esclarecidos.  

 Um dos modelos mais utilizados para a indução de falência cardíaca 

em ratos é a ligadura da artéria coronária esquerda, com o consequente infarto do 

miocárdio41-43. O método é prático e de baixo custo quando comparado a outros 

modelos experimentais. Além disso, mimetiza causas frequentes de insuficiência 

cardíaca em humanos, a isquemia e o infarto do miocárdio, e apresenta boa 

reprodutibilidade dos resultados quando comparados aos estudos clínicos 

subsequentes41. 

 Não está esclarecido se a prática de exercícios físicos, realizada 

durante o processo de remodelação ventricular e disfunção ventricular, porém 

antes da insuficiência cardíaca estar estabelecida, pode prevenir ou atenuar o 

processo de remodelação ventricular. Neste estudo, testaremos a hipótese que o 

exercício físico resistido, durante o processo de remodelação cardíaca, previne ou 

atenua alterações cardíacas estruturas, funcionais e moleculares induzidas por 

infarto do miocárdio.



 

 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Objetivos



 

Objetivos 11

Objetivo Geral 

 

 Avaliar os efeitos do exercício resistido, sobre alterações estruturais, 

funcionais e moleculares que ocorrem no coração de ratos com infarto do 

miocárdio.  

   

Objetivos Específicos 

 

1)  Avaliar as estruturas cardíacas e a função ventricular de ratos com infarto 

do miocárdio por ecocardiografia transtorácica;  

2)  Avaliar a atividade de enzimas antioxidantes no ventrículo esquerdo de ratos 

com infarto do miocárdio; 

3)  Analisar a expressão gênica de subunidades do complexo enzimático da 

NAPDH oxidase; 

4)  Mensurar a área seccional transversa das fibras musculares miocárdicas;



 

 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Material e Métodos



 

Material e Métodos 13

Grupos experimentais 

 

 Foram utilizados ratos Wistar machos, com peso corporal entre 200 e 

250 g, provenientes do Biotério do Campus de Botucatu da Universidade Estadual 

Paulista, UNESP. Os animais foram alimentados com ração comercial Purina® e água 

ad libitum e mantidos em gaiolas coletivas, com quatro ratos por caixa, em 

ambiente com temperatura controlada (24 ± 2ºC) e ciclos invertidos de 

luminosidade de 12 h. O protocolo de estudo foi aprovado pela Comissão de Ética 

em Experimentação Animal da Faculdade de Medicina de Botucatu, UNESP (Proc. nº 

1101). 

 O infarto agudo do miocárdio foi induzido de acordo com o método 

previamente descrito em nosso laboratório44, 45. Em resumo, os ratos foram 

anestesiados com cloridrato de cetamina (60 mg/kg) e submetidos a toracotomia 

lateral esquerda. Após exteriorização do coração, o átrio esquerdo foi afastado e a 

artéria coronária descendente anterior ligada com fio mono-nylon 5.0 entre a saída 

da artéria pulmonar e o átrio esquerdo. A seguir, o coração foi recolocado no tórax, 

os pulmões foram inflados com pressão positiva e o tórax fechado por sutura com 

algodão. Os animais pertencentes ao grupo controle foram submetidos ao mesmo 

procedimento cirúrgico, porém sem a ligação da artéria coronária, responsável pela 

produção do infarto. 

 Foram constituídos, inicialmente, dois grupos de animais: controle 

(Sham) e infarto do miocárdio (IM). Três meses após o procedimento cirúrgico, os 

animais foram submetidos a ecocardiograma transtorácico e os ratos do grupo 

infarto do miocárdio (IM) foram subdivididos em dois grupos. Dessa forma, foram 

constituídos três grupos experimentais: 1) Sham (n=20); 2) IM sedentário (IM, 

n=20); 3) IM submetido a protocolo de exercício físico resistido (IM-ER, n=20).  

 Estudos prévios de nosso laboratório em ratos com insuficiência 

cardíaca mostraram que a inclusão de 10 a 15 animais por grupo é suficiente para 

mostrar diferenças nas estruturas cardíacas, na função do ventrículo esquerdo e 

em variáveis relacionadas a análises por biologia molecular9, 46-48. Como a 

mortalidade no período pós-operatório é elevada, em torno de 40%, optamos por 

iniciar cada grupo experimental com 20 animais.  



 

Material e Métodos 14

 O protocolo de treinamento físico foi aplicado a partir do terceiro mês 

após a indução do infarto, por período de três meses. Antes e após o período de 

exercícios, foram realizadas avaliações estruturais e funcionais cardíacas por 

ecocardiograma. Em estudos prévios em nosso laboratório41, verificamos que, a 

partir do sexto mês pós-cirurgia, os animais já apresentam insuficiência cardíaca; 

portanto, optamos por iniciar o experimento três meses após a indução do infarto 

do miocárdio. 

 

Capacidade física aeróbia 

 

 A capacidade física aeróbia foi avaliada pelo teste de tolerância ao 

esforço físico, realizado antes e após o período de treinamento. O teste consistiu 

em corrida em esteira rolante, sendo iniciado na velocidade de 6 m/min, com 

incrementos de 3 m/min a cada três minutos, até a exaustão do animal. A 

velocidade máxima de corrida foi registrada e a distância total percorrida 

calculada49. Os animais foram adaptados ao ambiente de teste durante uma semana 

antes das avaliações, por 10 min/dia.  

 

Determinação da carga máxima para exercício resistido 

 

 O exercício resistido foi realizado em escada especialmente construída 

para ratos. Dois dias após a adaptação ao protocolo, cada animal foi avaliado para 

estabelecer a capacidade máxima de carga. O teste constituiu de subidas em escada 

com aumento progressivo de carga40, 50. Inicialmente, foi colocado 75% do peso 

corporal do rato e acrescido múltiplos de 15% até que fosse atingida a carga com 

a qual o rato não conseguisse subir completamente. A maior carga com a qual o 

rato foi capaz de subir o comprimento total da escada foi considerada a capacidade 

máxima deste animal. O teste foi repetido após 45 dias para ajuste da intensidade 

do exercício. 

 

  



 

Material e Métodos 15

Protocolo de exercício físico resistido 

 

 O exercício físico resistido foi realizado três vezes por semana, em dias 

alternados, com aumento gradativo de carga. Inicialmente, houve período de 

adaptação, no qual os ratos foram estimulados a subir a escada sem carga. Ao 

atingirem o topo da escada (house chamber), os animais tiveram dois minutos de 

recuperação e foram estimulados a subir a escada novamente. Esse procedimento 

foi repetido até que os ratos subissem a escada três vezes sem necessidade de 

estímulo. Posteriormente, foi adicionada carga correspondente a 15% do peso 

corporal, que foi aumentada gradativamente, conforme a tabela abaixo (Tabela 1). 

A partir da segunda semana, as sessões de treinamento consistiram de quatro 

subidas na escada com cargas correspondentes a 50%, 75%, 90% e 100% da 

capacidade máxima, previamente estabelecida para cada rato. O período de 

recuperação entre cada subida foi de 2 minutos.  O treinamento foi mantido até o 

final do período experimental, de três meses. O protocolo foi adaptado de Leite et 

al.50, 51  

 

Tabela 1: Adaptação ao protocolo de exercício físico 

Dias Carga (% peso corporal) Quantidade de subidas 

1º 0 3 

2º 15 3 

3º 30 3 

 

Avaliação estrutural e funcional do coração pelo ecocardiograma 

 

 As estruturas cardíacas e a função ventricular esquerda foram 

avaliadas por ecocardiograma transtorácico. Após anestesia com cloridrato de 

cetamina (50 mg/kg) e cloridrato de xilazina (1 mg/kg), por via intramuscular, os 

animais foram posicionados em decúbito lateral esquerdo para realização do 

ecocardiograma. Foi utilizado equipamento da marca General Electric Medical 

Systems, modelo Vivid S6 (Tirat Carmel, Israel), dotado de transdutor 

multifrequencial de 5 a 11,5 MHz. A avaliação dos fluxos transvalvar mitral e 



 

Material e Métodos 16

aórtico foi realizada com o mesmo transdutor operando em 5,0 MHz. As variáveis 

morfológicas e funcionais do coração foram obtidas de acordo com a metodologia 

previamente descrita em nosso laboratório24. Posteriormente, as estruturas 

cardíacas foram medidas manualmente com o auxílio de um paquímetro de 

precisão, de acordo com as recomendações da American Society of 

Echocardiography52. As estruturas cardíacas foram medidas em, pelo menos, cinco 

ciclos cardíacos consecutivos. As seguintes estruturas foram avaliadas: diâmetros 

diastólico (DDVE) e sistólico (DSVE) do ventrículo esquerdo (VE); espessuras 

diastólicas da parede posterior do VE (EDPP) e do septo interventricular (EDSIV) e 

diâmetros da aorta (AO) e do átrio esquerdo (AE); áreas sistólica e diastólica do VE; 

e perímetros do VE e da área infartada do VE. A espessura relativa do VE foi 

calculada como 2 x EDPP/DDVE. A massa do VE foi calculada pela fórmula 

[(DDVE+EDPP+EDSIV)3–DDVE3] x 1,04, onde 1,04 representa a densidade 

específica do miocárdio, e o índice de massa do VE pela divisão da massa do VE pelo 

peso corporal. O tamanho do infarto foi calculado pela divisão da medida 

endocárdica do segmento infartado pelo perímetro endocárdico total. A função 

sistólica do VE foi avaliada pelos seguintes índices: porcentagem de encurtamento 

endocárdico (% enc. endoc.): [(DDVE – DSVE)/DDVE]; porcentagem de 

encurtamento mesocárdico (% enc. mesoc.): [(DDVE + ½ EDPP + ½ EDSIV) – (DSVE 

+ ½ ESPP + ½ ESSIV)/(DDVE + ½ EDPP + ½ EDSIV)]; velocidade de encurtamento 

da parede posterior (VEPP), que é a tangente máxima do movimento sistólico da 

parede posterior do VE; fração de ejeção (FE): (DDVE3 – DSVE3)/DDVE3; velocidade 

máxima de deslocamento sistólico do anel mitral (onda S) obtida por Doppler 

tissular; e porcentagem de variação da área do VE. Adicionalmente, foi calculado o 

índice de performance miocárdica do VE (índice de Tei). A função diastólica do VE 

foi analisada pelos seguintes índices: razão entre os picos de velocidade de fluxo de 

enchimento inicial (onda E) e da contração atrial (onda A) do fluxo transmitral; 

tempo de desaceleração da onda E (TDE); tempo de relaxamento isovolumétrico 

(TRIV) em valor absoluto e normalizado pela frequência cardíaca (TRIVn): TRIV/(R-

R)0,5, onde R-R é a distância entre dois complexos R ao eletrocardiograma, em 

segundos; e picos de velocidade de deslocamentos diastólicos inicial do anel mitral 

(E’) e tardio do anel mitral (A’) obtidos por Doppler tissular. 



 

Material e Métodos 17

Coleta de tecidos para análise 

 

 A coleta do material foi realizada na Unidade de Pesquisa 

Experimental, UNIPEX da Faculdade de Medicina de Botucatu, UNESP. Um dia após 

a realização do ecocardiograma final, os animais foram pesados e, a seguir, 

anestesiados com injeção intraperitoneal de pentobarbital sódico (50 mg/kg) e 

eutanasiados por decapitação. Após coleta do sangue, o coração foi retirado por 

toracotomia mediana. Os átrios e o ventrículo direito foram dissecados e pesados 

separadamente. O sangue foi centrifugado a 4 ºC, amostras do soro foram 

separadas e armazenadas a -80 ºC até o momento das dosagens. O peso dos pulmões 

foi utilizado para avaliação do grau de congestão pulmonar. Fragmentos de pulmão 

foram pesados antes e após desidratação em estufa a 65 ºC por 72 horas para 

avaliar o grau de edema dos tecidos.  

 

Análise histológica do coração 

 

 Para caracterizar o grau de comprometimento do coração pelo infarto 

do miocárdio, foi realizada a mensuração da porcentagem de área infartada em 

relação à área total do VE e do menor diâmetro dos miócitos. O VE foi mantido em 

solução de formol a 10% por 24 h. A seguir, foi lavado em água corrente por 24 h 

e transferido para solução com etanol 70%. Foi realizado corte transversal do VE a 

6 mm do ápice para a base; esse corte reflete a média dos resultados de cortes de 

todo o ventrículo41, 53. O tecido miocárdico foi corado em lâmina com solução de 

hematoxilina-eosina. As medidas histológicas foram analisadas com o auxílio de 

microscópio LEICA DM LS acoplado a câmera de vídeo, que envia imagens digitais 

a computador dotado de programa de análise de imagens (Image Pro-plus, Media 

Cybernetics, Silver Spring, Maryland, USA). Foram medidos os comprimentos 

epicárdico e endocárdico dos segmentos infartado e não infartado e calculada a 

porcentagem de comprimento infartado em relação ao comprimento total do VE41. 

Em cada lâmina, foi medido o menor diâmetro das fibras musculares cardíacas, 



 

Material e Métodos 18

segundo os critérios preconizados por Dubowitz 54, em amostras de pelo menos 

150 fibras do músculo cardíaco.  

 

Avaliação metabolismo energético 

 

  Foram analisadas a atividade máxima de enzimas chave que participam 

do metabolismo de glicose: fosfofrutoquinase (PFK, E.C.2.7.1.11) e piruvato 

quinase (PK, EC 2.7.1.40); da via anaeróbica: lactato desidrogenase (LDH, EC 

1.1.1.27); do ciclo de Krebs e via aeróbica: citrato sintase (CS, E.C. 4.1.3.7) e da 

oxidação de ácidos graxos: carnitina palmitoiltransferase 1 (CPT1, EC 2.3.1.21). 

Amostras do ventrículo esquerdo (30 mg de tecido) foram homogenizadas em 50 

mM de Tris-HCl, 1 mM de EDTA, e coquetel de inibidor de protease, pH 7,4, 

utilizando esferas de zircônio (0,5 mm) durante 5 min a 4 ºC em homogenizador 

Bullet Blender® (Next Advance, Inc., NY, USA). O lisado foi centrifugado a 12000 

rpm durante 10 min a 4 ºC e o sobrenadante foi coletado. Todas as atividades 

enzimáticas foram determinadas a 25 °C utilizando espectrofotômetro de 

microplacas Spectra Max 250 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA). Para avaliação da 

atividade da fosfofrutoquinase, foi utilizado tampão de ensaio contendo 50 mM 

Tris HCl, 2 mM MgSO4, 5mM KCl, 0,2 mM NADH, 1 mM ATP, 3 mM de frutose 6 

fosfato (F6P), 2 mM de fosfoenolpiruvato (PEP), 2 U de lactato desidrogenase 

(LDH), 4 U de piruvato quinase (PK) e 0,05% triton x-100. A reação foi iniciada pela 

adição da F6P e a oxidação de NADH foi acompanhada pela medida do decréscimo 

na absorbância em 340 nm55. Para a mensuração da atividade da piruvato quinase 

(PK), foi adicionado ao homogeneizado 100 mM KH2PO4, 10 mM MgCl2, 80 mM KCl, 

0,05% Triton x 100, 9 U LDH, 0,17 mM NADH e 5 mM ADP. Como iniciador da 

reação, foi utilizado 2 mM de PEP. A leitura da absorbância foi efetuada a 340 nm 

em placas UV56. Para as análises enzimáticas de LDH, utilizamos kits comerciais da 

LABTEST, seguindo o protocolo do fabricante (LDH liquiform, Labtest, Belo 

Horizonte, MG, BR, ref. 86). A atividade da citrato sintase foi medida em mistura 

de reação contendo 100 mM de Tris-HCl, 1 mM de MgCl2, 1 mM de EDTA, 0,2 mM 

ditio-bis (ácido 2-nitrobenzóico), 0,3 mM de acetil-CoA, e 0,5 mM de oxaloacetato 

(omitido no controle), pH 8,1. A taxa de alteração da absorbância foi monitorada 



 

Material e Métodos 19

a 412 nm57. A atividade máxima da enzima carnitina palmitoiltransferase 1 foi 

avaliada utilizando tampão de ensaio (pH 8,1) constituído de 60 mM de Tris-HCl, 

1,5 mM  EDTA, 0,25 mM de DTNB, Triton X-100 0,05% (v/v) e 0,035 mM palmitoil-

CoA. A reação foi iniciada com a adição de 1,25 mM L-carnitina e as absorbâncias 

lidas a 412 nm58. 

 

Análise do hidroperóxido de lipídeo e da atividade de enzimas antioxidantes 

  

 Amostras do músculo cardíaco (200 mg) foram descongeladas e 

homogenizadas em Potter Elvehjem, com pistilo de teflon, com 5 mL de tampão 

fosfato de sódio 0,1 M, pH 7,0. Os homogenatos foram centrifugados a 10.000 rpm 

por 15 min, em centrífuga refrigerada a 4 °C. O sobrenadante foi utilizado para 

determinação de proteínas totais e análise da atividade das enzimas antioxidantes 

superóxido dismutase (SOD), glutationa peroxidase (GPX) e catalase (Cat) e 

dosagem de hidroperóxido de lipídeo. As leituras espectrofotométricas foram 

realizadas no espectrofotômetro Pharmacia Biotech (com software Swift II, 21 

England) e em leitor de microplaca (μQuant-MQX 200 com Kcjunior software, 

BioTec Instruments, USA). Todos os reagentes foram de procedência da Sigma 

Aldrich (St. Louis, MO, USA). A atividade da enzima glutationa peroxidase (GSH-Px, 

E.C. 1.11.1.9) foi determinada por meio da oxidação da glutationa em presença de 

peróxido de hidrogênio e hidroperóxido de cumene. A atividade da superóxido 

dismutase (SOD, E.C. 1.15.1.1) foi determinada pela alteração na redução do 

nitroblue-tetrazólio (NBT) por radicais superóxido gerados pela mistura NADH 

(nicotinamida adenina dinucleotídeo reduzido) e fenazina metassulfato em pH 

fisiológico. A atividade enzimática da catalase (Cat, E.C. 1.11.1.6) foi determinada 

em tampão fosfato pH 7,0, utilizando-se 12,5 uL de amostra e peróxido de 

hidrogênio (30%). As leituras espectrofotométricas foram realizadas a 240 nm. A 

concentração de hidroperóxido de lipídio foi determinada pela oxidação do Fe2+ 

(sulfato ferroso amoniacal). O Fe3+ formado reage com alaranjado de xilenol 

formando composto colorido. Leituras foram realizadas a 560 nm. As análises 

descritas nesta seção foram realizadas no Laboratório de Pesquisa do 



 

Material e Métodos 20

Departamento de Química e Bioquímica do Instituto de Biociências de Botucatu, 

UNESP, sob orientação da Prof. Associada Ana Angélica Fernandes. 

 

Quantificação de malonaldeído no miocárdio 

  

 A concentração de malonaldeído (MDA) e a carbonilação de proteínas 

foram avaliadas em homogenato (1:10 em PBS) de miocárdio do ventrículo 

esquerdo. Para a quantificação do MDA, foram utilizados 250 µL de homogenato 

para 750 µL de ácido tricloroacético 10% para precipitação de proteínas. As 

amostras foram centrifugadas (3000 rpm; por 5 min; Eppendorf® Centrifuge 

5804-R, Hamburg, Germany) e o sobrenadante retirado. Foi adicionado ao 

sobrenadante ácido tiobarbitúrico (TBA) 0,67% na proporção (1:1) e as amostras 

foram aquecidas por 15 min a 100 ºC. O MDA reagiu com o TBA na proporção 1:2 

MDA-TBA; após resfriamento, foi realizada a leitura a 535 nm em leitor de 

microplaca Spectra Max 190 (Molecular Devices®, Sunnyvale, CA, USA). A 

concentração de MDA foi obtida através do coeficiente de extinção molar (1,56x105 

M-1 cm-1) e das absorbâncias das amostras e o resultado final foi expresso em 

nmol/g de proteína.59  

 A carbonilação foi quantificada por método adaptado de Mesquita et 

al. (2014)60 em 100 µL de homogenato para 100 µL 2,4-dinitrofenilhidrazina 

(DNPH) (10 mM em HCl 2 M). As amostras foram incubadas por 10 min em 

temperatura ambiente. A seguir, foram adicionados 50 µL de NaOH (6 M) e as 

amostras foram novamente incubadas por 10 min em temperatura ambiente. A 

leitura foi realizada a 450 nm em leitor de microplaca Spectra Max 190 (Molecular 

Devices®, Sunnyvale, CA, USA). O resultado foi obtido da absorbância das amostras 

e do coeficiente de extinção molar (22000 M-1 cm-1). O resultado final foi expresso 

em nmol/mg de proteínas. 

 

  



 

Material e Métodos 21

Avaliação da expressão gênica de subunidades do complexo enzimático 

NADPH oxidase por RT-PCR em tempo real 

 

 A análise de mRNAs das subunidades da enzima NADPH oxidase Nox2, 

Nox4, p22phox e p47phox e dos genes de referência ciclofilina e gliceraldeído-3-

fosfato desidrogenase (GAPDH) foi realizada por reação em cadeia da polimerase 

em tempo real após transcrição reversa (RT-PCR). A extração de RNA total do 

ventrículo esquerdo foi realizada utilizando-se TRIzol Reagent (Invitrogen Life 

Technologies, Carlsbad, CA, USA), de acordo com método previamente descrito61. 

Resumidamente, o fragmento no ventrículo esquerdo congelado foi mecanicamente 

homogenizado em gelo com TRIzol (1 mL de TRIzol/50-100 mg de tecido) e 

incubado por 5 min à temperatura ambiente. A seguir, foram acrescentados 0,2 

mL de clorofórmio por mL de TRIzol utilizado, homogenizado vigorosamente e 

incubado por 3 min à temperatura ambiente. O material foi centrifugado a 12.000 

g por 15 min a 4 ⁰C. A fase aquosa formada após a centrifugação foi separada, 

acrescida de 0,5 mL de isopropanol (por mL de TRIzol utilizado inicialmente) e 

incubada por 10 min à temperatura ambiente para precipitação do RNA. 

 Após esse período, o material foi novamente centrifugado a 12.000 g 

por 10 min a 4 ⁰C. O sedimento formado foi lavado com 1 mL de etanol 75% (por 

mL de TRIzol utilizado inicialmente) e centrifugado a 7.500 g por 5 min a 4 ⁰C. O 

sedimento de RNA foi submetido a secagem por 10 min à temperatura ambiente e 

ressuspenso em solução 0,01% de dietilpirocarbonato (DEPC) e incubado a 60 ⁰C, 

por 10 min. Para remover qualquer contaminação de DNA, as amostras foram 

incubadas com DNase I (Invitrogen Life Technologies, CA, USA). Posteriormente, 

foi realizada a quantificação de RNA por espectrofotometria a 260 nm, utilizando-

se o fator de correção próprio para o RNA. A pureza do RNA foi considerada 

satisfatória quando a razão entre as densidades ópticas a 260 e 280 nm foram de 

aproximadamente 2,0. Um micrograma de RNA foi submetido a RT utilizando-se o 

High Capacity RNA-to-cDNA Kit (Applied Biosystems, Foster City, CA, EUA) para 

volume total de reação de 20 μL, de acordo com método recomendado pelo 

fabricante. Alíquotas de 2,5 μL (10-100 ng) do produto da RT, contendo DNA 

complementar (cDNA), foram submetidas à PCR em tempo real utilizando-se 10 μL 



 

Material e Métodos 22

2X Taqman Universal PCR Master Mix (Applied Biosystems) e 1 μL de ensaio (20X) 

contendo oligonucleotídeos iniciadores (primers) senso e antisenso e sonda 

Taqman® (Applied Biosystems, Foster City, CA, EUA) específicos para cada gene: 

NOX2 (Taqman assay Rn00576710_m1; Ref. seq. Genbank NM_023965.1), NOX4 

(Taqman assay Rn00585380_m1; Ref. seq. Genbank NM_053524.1), p22phox 

(Taqman assay Rn00577357_m1; Ref. seq. Genbank NM_024160.1) e p47phox 

(Taqman assay 20 Rn00586945_m1; Ref. seq. Genbank NM_053734.2). A 

amplificação e a análise foram realizadas utilizando o Step One PlusTM Real Time 

PCR System (Applied Biosystems, Foster City, CA, EUA), de acordo com as 

recomendações do fabricante. Os dados de expressão gênica dos genes alvo foram 

normalizados pela expressão dos genes de referência ciclofilina (Taqman assay 

Rn00690933_m1; Ref. seq. Genbank NM_017101.1) e GAPDH (Taqman assay 

Rn01775763_g1 Ref. Seq. Genbank NM_058704.1). As reações foram feitas em 

triplicata e a expressão gênica foi calculada pelo método do CT (critical threshold 

cycle) comparativo (2-ΔΔCT) 60. 

 

Análise estatística 

 

 Os resultados estão apresentados em média e desvio padrão ou 

mediana e quartis, de acordo com a distribuição. As comparações entre os grupos 

foram analisadas por ANOVA complementada pelo teste de Tukey ou teste de 

Dunn’s. O nível de significância considerado foi de 5%.



 

 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Resultados



 

Resultados 24

Caracterização dos grupos experimentais e variáveis anatômicas 

 

 Na tabela 2 está apresentada a frequência dos sinais clínico e 

patológicos de insuficiência cardíaca. Ao final do período experimental, o grupo IM-

Sed (n=09) apresentou a seguinte frequência de alterações compatíveis com 

insuficiência cardíaca: trombo em átrios em 1 rato, efusão pleural em 1, congestão 

pulmonar em 3, hipertrofia do ventrículo direito em 3 e ascite em 2 animais. No 

grupo IM-R (n=13), 3 ratos tiveram trombo em átrios, 4 efusão pleural, 3 

congestão pulmonar, 4 hipertrofia do ventrículo direito e 2 ascite. A frequência 

dos sinais de insuficiência cardíaca não diferiu entre os grupos. 

 As variáveis anatômicas estão apresentadas na Tabela 3. O peso 

corporal não diferiu entre os grupos. O peso do VD, em valores absolutos e 

normalizados pelo peso corporal, foi maior nos grupos infartados em relação ao 

Sham. O peso absoluto do pulmão foi maior no grupo IM-Sed que no Sham. O 

treinamento físico não modificou essas variáveis. 

 

Teste de esforço 

  

 No teste de esforço realizado antes e após o protocolo de exercícios, a 

distância percorrida e o tempo de permanência na esteira não diferiram entre os 

grupos (Figura 1). 

 

Teste de carga máxima 

 

 O teste de carga máxima foi realizado antes e após o período de 

exercício (Figura 3). Na avaliação inicial, o grupo IM-Sed (n=09) apresentou 

desempenho menor em relação ao Sham. O grupo IM-R (n=13) apresentou 

desempenho maior na avaliação final em relação à avaliação inicial e aos outros 

grupos. 

 

  



 

Resultados 25

Avaliação Ecocardiográfica 

  

 Na Tabela 4, estão apresentadas as variáveis cardíacas estruturais e 

nas Tabelas 5 e 6, as variáveis de função do VE antes do protocolo de exercício. Os 

grupos IM-Sed e IM-R apresentaram hipertrofia e dilatação das câmaras cardíacas 

esquerdas caracterizadas por aumento dos diâmetros sistólico e diastólico do VE, 

da espessura diastólica da parede posterior do VE, da massa do VE e das áreas 

diastólica e sistólica do VE. Funcionalmente, os grupos infartados apresentaram 

disfunção sistólica com redução das porcentagens de encurtamento endocárdico e 

mesocárdico, da velocidade de encurtamento da parede posterior do VE, da fração 

de ejeção e da porcentagem de variação da área do VE, e aumento do índice de Tei. 

Em relação à função diastólica, houve aumento da onda E mitral no grupo IM-Sed 

em relação ao Sham. As outras variáveis não diferiram entre os grupos.  

 Os dados referentes à avaliação ecocardiográfica ao final do 

experimento estão apresentados nas Tabelas 7 a 9. Os grupos com infarto do 

miocárdio mantiveram o padrão de hipertrofia e dilatação das câmaras cardíacas 

observado na avaliação inicial. Funcionalmente, os ratos infartados persistiram com 

disfunção sistólica, caracterizada por redução das porcentagens de encurtamento 

endocárdico e mesocárdico, da velocidade de encurtamento da parede posterior, da 

porcentagem de variação de área e da fração de ejeção, e aumento do índice de Tei.  

 

Análise histológica do músculo cardíaco 

 

 Na figura 2, estão expostas as imagens representativas do miocárdio 

e o gráfico com os valores do menor diâmetro das fibras cardíacas. O grupo IM-Sed 

apresentou valores menores que os grupos Sham e IM-R. 

 

Avaliação metabolismo energético 

  

 Na tabela 10, estão apresentados os resultados da atividade das 

enzimas do metabolismo energético. A atividade da lactato desidrogenase (LDH) foi 



 

Resultados 26

menor no grupo IM-Sed que no grupo Sham. A atividade das demais enzimas não 

diferiu entre os grupos. 

 

Análise da atividade de enzimas antioxidantes 

  

 A atividade da catalase (CAT) foi menor nos grupos infartados que no 

Sham. (Tabela 11). A atividade da glutationa peroxidase (GSH-Px) e da superóxido 

dismutase (SOD) não diferiu entre os grupos.  

 

Marcadores do estresse oxidativo no miocárdio 

 

 A concentração miocárdica de hidroperóxido de lipídeo foi menor no 

grupo IM-R que no IM-Sed. A concentração de malonaldeído e a carbonilação 

proteica não diferiram entre os grupos (Tabela 12). 

 

Expressão gênica das subunidades da NADPH oxidase 

  

 A expressão da subunidade p47phox da NADPH oxidase foi menor no 

grupo IM-Sed que no Sham. A expressão de Nox2, Nox4, e p22phox não diferiu 

entre os grupos (Tabela 13). 

 

Tabela 2. Frequência de sinais clínico e patológicos de insuficiência cardíaca nos 

grupos com infarto do miocárdio 

 

Frequência (%) 

IM-Sed  

(n=9)           

IM-R 

(n=13)        

Trombo em átrios 11,1 (1) 23,1 (3) 

Efusão pleural 11,1 (1) 30,8 (4) 

Congestão pulmonary 33,3 (3) 25,0 (3)* 

Hipertrofia do ventrículo direito 33,3 (3) 33,3 (4)* 

Ascite 22,2 (2) 15,4 (2) 

IM-Sed: infarto do miocárdio sedentário; IM-R: infarto do miocárdio submetido a exercício 
resistido; n: número de animais. Teste de Goodman; P > 0,05; * n=12. 

 



 

Resultados 27

Tabela 3. Variáveis anatômicas 

 

 
Sham (n=14) IM-Sed (n=9) IM-R (n=13) 

PC (g) 556 ± 39 550 ± 60 525 ± 80 

VE (U/S) 3,98 (3,61-4,11) 4,13 (3,94-4,41) 3,97 (3,57-4,15) 

VD (g) 0,24 (0,21-0,26) 0,36 (0,30-0,43)* 0,34 (0,30-0,50)* 

VD/PC (mg/g) 0,43 (0,41-0,45) 0,71 (0,52-0,86)* 0,65 (0,56-0,94)* 

VD (U/S) 3,91 (3,77-4,22) 4,38 (4,00-4,93) 4,20 (4,09-4,27) 

Átrios (mg) 0,11 (0,10-0,18) 0,15 (0,11-0,31) 0,17 (0,14-0,23) 

Átrios/PC (mg/g) 0,19 (0,16-0,31) 0,32 (0,22-0,51) 0,32 (0,22-0,51) 

Átrios (U/S) 0,19 (0,16-0,32) 0,32 (0,22-0,54) 0,33 (0,24-0,49)* 

Pulmão (g) 1,98 ± 0,68 2,98 ± 0,89* 2,64 ± 0,70 

Pulmão/PC (mg/g) 3,65 (3,19-3,70) 5,18 (4,43-7,24)* 4,82 (3,77-5,27) 

Pulmão (U/S) 4,49 (4,38-4,53) 4,28 (4,01-4,84) 4,50 (4,22-4,87) 

IM-Sed: infarto do miocárdio sedentário; IM-R: infarto do miocárdio submetido a exercício resistido; 
n: número de animais; PC: peso corporal; VE: ventrículo esquerdo; VD: peso do ventrículo direito; 
U/S: relação entre peso úmido e peso seco. Dados expressos em média ± desvio padrão ou mediana 
e percentis. Análise de variância com pós teste de Tukey ou Dunn’s; * P<0,05 vs Sham. 

 

 

 

 

           

 

 

 

 

 

 

Figura 1. Capacidade máxima de esforço avaliada em esteira antes (Inicial) e após 

(Final) período de treinamento resistido. IM-Sed: infarto do miocárdio 

sedentário; IM-R: infarto do miocárdio submetido a exercício resistido; 

n=10 ratos por grupo. Dados expressos em média ± desvio padrão; 

p>0,05.  

 

M
et

ro
s 

(m
) 

T
em

p
o

 (
m

in
) 

B A 



 

Resultados 28

 

Figura 2. Capacidade máxima de carga avaliada em teste de carga máxima antes 

(Inicial) e após (Final) treinamento resistido. IM-Sed: infarto do miocárdio 

sedentário; IM-R: infarto do miocárdio submetido a exercício resistido; 

n=10 ratos por grupo. Valores expressos em média e desvio padrão; 

ANOVA e Tukey; *p<0,05 vs Sham; &p<0,05 vs IM-Sed; #p<0,05 vs Início. 

                           

 

 
Figura 3. Cortes histológicos do miocárdio corados com hematoxilina-eosina; 

objetiva: 40X (A). Menor diâmetro das fibras musculares do miocárdio (B). 
Sham (n=10); IM-Sed: infarto do miocárdio sedentário (n=07); IM-R: 
infarto do miocárdio submetido a exercício resistido (n=10). Valores 
expressos em média e desvio padrão; ANOVA; p<0,05: * vs Sham; # vs IM-
Sed. 

  Sham IM-Sed IM-R A 

B 

D
iâ

m
et

ro
 d

as
 f

ib
ra

s 
(µ

m
) 



 

Resultados 29

Tabela 4. Avaliação ecocardiográfica inicial dos parâmetros estruturais do coração 

 Sham (n=14) IM-Sed (n=09) IM-R (n=13) 

PC inicial (g) 471 ± 47 458 ± 43 447 ± 47 

DDVE (mm) 8,07 ± 0,44 10,53 ± 0,69* 10,16 ± 1,07* 

DDVE/PC (mm/kg) 17,3 ± 1,39 23,2 ± 2,68* 22,8 ± 2,56* 

DSVE (mm) 4,10 (3,81-4,30) 8,16 (7,99-8,62)* 7,89 (7,23-8,55)* 

EDPP (mm) 1,33 (1,27-1,37) 1,65 (1,54-1,95)* 1,65 (1,49-1,74)* 

EDSIV (mm) 1,33 (1,27-1,37) 1,53 (1,36-1,89) 1,40 (1,27-1,62) 

Esp. rel. VE 0,33 (0,32-0,34) 0,30 (0,30-0,34) 0,32 (0,30-0,37) 

AO (mm) 4,01 (3,83-4,01) 3,94 (3,78-4,01) 3,83 (3,61-4,01) 

AE (mm) 5,29 (5,11-5,66) 7,66 (6,70-8,27)* 6,75 (6,27-7,41)* 

AE/AO  1,35 (1,32-1,39) 1,94 (1,67-2,27)* 1,80 (1,55-1,99)* 

AE/PC (mm/kg) 11,6 (10,4-12,3) 17,4 (13,9-19,5)* 15,3 (13,3-17,5)* 

Massa VE (g) 0,71 (0,65-0,80) 1,53 (1,28-1,69)* 1,13 (1,08-1,63)* 

Índ. MVE (g/kg) 1,54 (1,46-1,66) 3,58 (2,70-3,95)* 2,74 (2,43-3,58)* 

Área diast. (mm2) 44,2 ± 7,43 89,5 ± 14,7* 80,5 ± 14,3* 

Área sist. (mm2) 15,6 (12,5-18,0) 61,6 (55,6-72,1)* 52,2 (43,1-58,9)* 

Perímetro (mm) Sham 36,3 ± 2,88 34,4 ± 3,03 

IM perímetro (mm) Sham 15,0 ± 3,60 13,0 ± 2,97 

% de área infartada Sham 41,2 ± 7,61 37,6 ± 6,72 

IM-Sed: infarto do miocárdio sedentário; IM-R: infarto do miocárdio submetido a exercício resistido; 
n: número de animais; PC: peso corporal; DDVE e DSVE: diâmetros diastólico e sistólico do 
ventrículo esquerdo (VE), respectivamente; EDPP e EDSIV: espessuras diastólicas da parede 
posterior do VE e do septo interventricular, respectivamente; Esp. rel. VE: espessura relativa do VE; 
AO: diâmetro da aorta; AE: diâmetro do átrio esquerdo; Índ. MVE: índice de massa do VE; Área 
diast. e Área sist.: áreas diastólica e sistólica do VE, respectivamente; IM: infarto do miocárdio. 
Dados expressos em média ± desvio padrão ou mediana e percentis; análise de variância com pós 
teste de Tukey ou Dunn’s; * P<0,05 vs Sham. 

 

Tabela 5. Avaliação ecocardiográfica inicial da função sistólica do ventrículo 

esquerdo 

 Sham (n=14) IM-Sed (n=09) IM-R (n=13) 
FC (bpm) 292 ± 25 295 ± 26 275 ± 24 
% enc. endoc. 49,3 ± 4,10 20,7 ± 6,20* 21,9 ± 6,24* 
% enc. mesoc.  56,4 ± 3,58 31,4 ± 5,78* 32,4 ± 5,99* 
VEPP (mm/s) 40,5 ± 5,58 24,5 ± 7,67* 28,6 ± 8,37* 
Tei  0,47 (0,44-0,53) 0,74 (0,63-0,89)* 0,76 (0,63-0,81)* 
FE 0,86 (0,84-0,89) 0,51 (0,43-0,57)* 0,50 (0,42-0,58)* 
% variação area 65,7 ± 5,52 28,6 ± 8,19* 33,7 ± 7,59* 

IM-Sed: infarto do miocárdio sedentário; IM-R: infarto do miocárdio submetido a exercício resistido; 
n: número de animais; FC: frequência cardíaca; bpm: batimentos por minuto; % enc. endoc. e % 
enc. mesoc.: porcentagem de encurtamento endocárdico e mesocárdico, respectivamente; VEPP: 
velocidade de encurtamento da parede posterior; Tei: índice de performance miocárdica; FE: fração 
de ejeção; S: velocidade máxima de deslocamento sistólico do anel mitral das paredes lateral e 
septal e sua média. Dados expressos em média ± desvio padrão ou mediana e percentis; análise 
de variância com pós teste de Tukey ou Dunn’s; * P<0,05 vs Sham. 



 

Resultados 30

Tabela 6. Avaliação ecocardiográfica inicial da função diastólica do ventrículo 

esquerdo 

 Sham (n=14) IM-Sed (n=09) IM-R (n=13) 

E mitral (cm/s) 80,3 ± 7,53 99,1 ± 16,5* 88,5 ± 18,3 

A mitral (cm/s) 47 (45-55) 44 (21-64) 42 (23-58) 

E/A 1,65 (1,47-1,82) 2,02 (1,44-5,27) 1,63 (1,41-4,70) 

TRIVn 26 (22-26) 30 (26-33) 30 (25-32) 

TDE (ms) 48 (45-49) 39 (36-45) 43 (37-57) 

TRIV/R-R 54,8 ± 6,83 63,1 ± 10,7 62,0 ± 13,3 

IM-Sed: infarto do miocárdio sedentário; IM-R: infarto do miocárdio submetido a exercício resistido; n: número de animais; 

E/A: razão entre picos de fluxo de enchimento inicial (onda E) e da contração atrial (onda A) do fluxo transmitral; TRIV: 

tempo de relaxamento isovolumétrico; TDE: tempo de desaceleração da onda E mitral; TRIVn: TRIV normalizado pela 

frequência cardíaca; E’: velocidade de deslocamento diastólico inicial do anel mitral; A’: velocidade de deslocamento 

diastólico tardio do anel mitral. Dados expressos em média ± desvio padrão ou mediana e percentis; análise de variância e 

pós teste de Tukey ou Dunn’s; P<0,05: * vs Sham. 

 

Tabela 7. Avaliação ecocardiográfica final dos parâmetros estruturais do coração 

 
 

Sham (n=14) IM-Sed (n=09) IM-R (n=13) 

PC final (g) 552 (527-582) 531 (511-572) 526 (476-570) 

DDVE (mm) 8,34 ± 0,43 11,12 ± 0,88* 10,89 ± 0,82* 

DDVE/PC (mm/g) 15,0 ± 1,16 20,4 ± 2,34* 21,1 ± 2,68* 

DSVE (mm) 4,09 ± 0,38 8,96 ± 1,33* 8,62 ± 1,16* 

EDPP (mm) 1,42 (1,38-1,43) 1,80 (1,64-2,01)* 1,69 (1,60-1,73)* 

EDSIV (mm) 1,42 (1,39-1,45) 1,69 (1,40-1,87) 1,57 (1,31-1,73) 

Esp. rel. VE (mm) 0,34 (0,33- 0,35) 0,32 (0,30-0,36) 0,31 (0,28-0,32)* 

AO (mm) 4,21 ± 0,15 4,01 ± 0,23 4,06 ± 0,27 

AE (mm) 5,68 ± 0,46 8,23 ± 1,30* 7,80 ± 1,26* 

AE/AO 1,38 (1,24-1,44) 2,22 (1,63-2,34)* 1,86 (1,78-2,23)* 

AE/PC (mg/g) 10,1 (9,21-11,1)  15,9 (12,0-17,5)* 14,7 (12,8-17,1)* 

Massa VE (g) 0,87 (0,76-0,91) 1,66 (1,47-1,98)* 1,61 (1,39-1,78)* 

Índ. MVE (g/kg) 1,51 (1,45-1,59) 3,32 (2,75-3,97)* 3,06 (2,55-3,46)* 

Área diast (mm2) 49,2 (47,0-51,1) 89,9 (85,1-96,1)* 93,5 (79,9-105,5)* 

Área sist (mm2) 14,7 (14,1-17,7) 64,5 (55,6-72,3)* 59,5 (47,0-76,3)* 

% variação área 68,2 ± 4,25 29,7 ± 8,92* 34,5 ± 12,19* 

Perímetro (mm) - 37,2 ± 2,86 36,9 ± 3,00 

IAM perímetro 
(mm) 

- 15,5 ± 3,73 13,5 ± 4,17 

% infarto  - 41,2 ± 7,75 36,1 ± 9,44 

IM-Sed: infarto do miocárdio sedentário; IM-R: infarto do miocárdio submetido a exercício resistido; 
n: número de animais; PC: peso corporal; DDVE e DSVE: diâmetros diastólico e sistólico do 
ventrículo esquerdo (VE), respectivamente; EDPP e EDSIV: espessuras diastólicas da parede 
posterior do VE e do septo interventricular, respectivamente; Esp. rel. VE: espessura relativa do VE; 
AO: diâmetro da aorta; AE: diâmetro do átrio esquerdo; Índ. MVE: índice de massa do VE; Área 
diast. e Área sist.: áreas diastólica e sistólica do VE, respectivamente; IM: infarto do miocárdio. 
Dados expressos em média ± desvio padrão ou mediana e percentis; análise de variância com pós 
teste de Tukey ou Dunn’s; * P<0,05 vs Sham. 



 

Resultados 31

Tabela 8. Avaliação ecocardiográfica final da função sistólica do ventrículo esquerdo 

 Sham (n=14) IM-Sed (n=09) IM-R (n=13) 

FC (bpm) 280 ± 39 300 ± 32 292 ± 21 

% enc. endoc. 51,0 ± 3,26 19,8 ± 6,27* 21,1 ± 6,45* 

% enc. mesoc.  58,1 ± 2,91 30,6 ± 5,76* 31,2 ± 6,31* 

VEPP (mm/s) 41,5 ± 6,18 25,4 ± 9,35* 27,9 ± 6,20* 

Tei  0,47 (0,43-0,50) 0,61 (0,56-0,67)* 0,69 (0,59-0,72)* 

FE 0,88 (0,87-0,90) 0,46 (0,40-0,54)* 0,53 (0,42-0,59)* 

IM-Sed: infarto do miocárdio sedentário; IM-R: infarto do miocárdio submetido a exercício resistido; n: número de animais; 

FC: frequência cardíaca; bpm: batimentos por minuto; % enc. endoc. e % enc. mesoc.: porcentagem de encurtamento 

endocárdico e mesocárdico, respectivamente; VEPP: velocidade de encurtamento da parede posterior; Tei: índice de 

performance miocárdica; FE: fração de ejeção; S: velocidade máxima de deslocamento sistólico do anel mitral das paredes 

lateral e septal e sua média. Dados expressos em média ± desvio padrão ou mediana e percentis; análise de variância com 

pós teste de Tukey ou Dunn’s; * P<0,05 vs Sham. 

 

 

Tabela 9. Avaliação ecocardiográfica final da função diastólica do ventrículo 

esquerdo 

 Sham (n=14) IM-Sed (n=09) IM-R (n=13) 

E mitral (cm/s) 77,0 (74,0-85,5) 101,5 (78,5-119,5) 77,5 (72,0-121,0) 

A mitral (cm/s) 50,8 ± 14,7 38,6 ± 27,69 47,25 ± 20,7 

E/A (mm/s) 1,71 (1,41-1,80) 4,27 (1,30-5,99) 1,41 (1,24-5,53) 

TRIVn 25,4 ± 3,69 26,5 ± 5,20 27,4 ± 4,27 

TDE (ms) 49,0 (45,7-54,0) 33,0 (33,0-47,5) 39,5 (37,0-53,0) 

TRIV/R-R 54,4 ± 6,91 59,1 ± 10,9 60,4 ± 8,51 

IM-Sed: infarto do miocárdio sedentário; IM-R: infarto do miocárdio submetido a exercício resistido; 
n: número de animais; E/A: razão entre picos de fluxo de enchimento inicial (onda E) e da contração 
atrial (onda A) do fluxo transmitral; TRIV: tempo de relaxamento isovolumétrico; TDE: tempo de 
desaceleração da onda E mitral; TRIVn: TRIV normalizado pela frequência cardíaca; E’: velocidade 
de deslocamento diastólico inicial do anel mitral; A’: velocidade de deslocamento diastólico tardio do 
anel mitral. Dados expressos em média ± desvio padrão ou mediana e percentis; análise de 
variância e pós teste de Tukey ou Dunn’s; * P<0,05 vs Sham. 

 

  



 

Resultados 32

Tabela 10. Variáveis do metabolismo energético no músculo cardíaco 

 Sham (n=09) IM-Sed (n=10) IM-R (n=10) 

PFK (nmol/min*g de proteina) 23,7 (20,5 – 28,3) 21,5 (14,3 - 27,6) 25,3 (22,9 - 28,3) 

PK (nmol/min*g de proteina) 235 ± 38,8 207 ± 23,8 225 ± 40,6 

LDH (nmol/min*g de proteina) 1241 ± 131 1057 ± 128* 1129 ± 158 

CS (umol/min*g de proteina) 23,7 (20,5 - 28,3) 21,5 (14,3 - 27,6) 25,3 (22,9 - 28,3) 

CK (nmol/min*g de proteina) 30,8 ± 4,93 25,6 ± 5,25 28,8 ± 3,86 

CPT1 (nmol/min*g de proteina) 16,8 ± 4,46 21,8 ± 6,33  22,9 ± 6,76 

IM-S: infarto do miocárdio sedentário; IM-R: infarto do miocárdio submetido a exercício resistido; n: número de 
animais; PFK: fosfofrutoquinase; PK: piruvato quinase; LDH: lactato desidrogenase; CS: citrato sintase; CK: 
creatina quinase;  CPT1: carnitina palmitoiltransferase 1. Dados expressos em média ± desvio padrão ou 
mediana e percentis. Análise de variância com pós teste de Tukey ou Dunn’s; * P<0,05 vs Sham. 

 

 

Tabela 11. Atividade das enzimas antioxidantes no miocárdio 

 Sham (n=07) IM-Sed (n=08) IM-R (n=08) 

Superóxido dismutase 
(nmol/g de tecido) 

7,49 (6,22 – 8,87) 6,67 (5,67 – 7,25) 5,78 (5,36 – 6,13) 

Catalase 
(µmol/g de tecido) 

54,2 ± 8,31 47,3 ± 10,34* 40,82 ± 6,97* 

Glutationa peroxidase 
(nmol/g de proteína) 

30,0 ± 5,70 29,3 ± 6,95 29,7 ± 7,66 

IM-S: infarto do miocárdio sedentário; IM-R: infarto do miocárdio submetido a exercício resistido; n: número de 
animais. Valores expressos em média e desvio padrão ou mediana e percentis; ANOVA e Tukey; * p<0,05 vs 
Sham.  

 

 

Tabela 12. Marcadores de estresse oxidativo miocárdico 

 Sham (n=07) IM-Sed (n=08) IM-R (n=08) 

Malonaldeído  
(nmol/mg de proteína) 

4,98 (4,77 - 5,29) 5,46 (3,71 - 7,89) 4,88 (4,36 - 9,82) 

Carbonilação proteica 
(nmol/mg de proteína) 

3,12 (3,05 - 3,26) 3,02 (2,82 - 3,14)   3,14 (3,10 - 3,21) 

Hidroperóxido de lipídio 
(nmol/g de tecido) 160 (128 - 187) 204 (182 - 244) 128 (118 -152)# 

IM-S: infarto do miocárdio sedentário; IM-R: infarto do miocárdio submetido a exercício resistido; n: número de 
animais. Valores expressos em média e desvio padrão ou mediana e percentis; ANOVA e Tukey; # p<0.05 vs 
IM-Sed.  

 

 

  



 

Resultados 33

Tabela 13. Expressão gênica das subunidades do complexo enzimático NAPH oxidase 

no miocárdio 

 Sham (n=08) IM-Sed (n=06) IM-R (n=08) 

Nox2 1,00 (0,91 - 1,07) 1,43 (1,19 - 2,30) 1,74 (1,03 - 2,54) 

Nox4 1,00 ± 0,45  1,60 ± 0,41 1,43 ± 0,53 

p22phox 1,00 (0,96 - 1,03) 1,06 (0,89 - 1,20) 1,24 (0,99 - 1,37) 

p47phox 1,02 (0,85 - 1,12) 0,66 (0,60 - 0,68)* 0,78 (0,55 - 0,92) 
IM-Sed: infarto do miocárdio sedentário; IM-R: infarto do miocárdio submetido a exercício resistido; 
n: número de ratos. Valores expressos em média e desvio padrão ou mediana e percentis; ANOVA 
e Tukey ou Dunn’s; *p<0,05 vs Sham; Nox2: p<0.03.  

 

 

 

 

 

 

  

 



 

 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Discussão



 

Discussão 35

 Neste estudo, foi avaliado o efeito do treinamento físico resistido 

sobre variáveis cardíacas estruturais e funcionais, extresse oxidativo, capacidade 

antioxidante e expressão de subunidades da NADPH oxidase no miocárdio de ratos 

Wistar com infarto do miocárdio41.  

 O infarto do miocárdio em ratos é considerado um bom modelo 

experimental porque possui custo relativamente baixo e alta taxa de 

reprodutibilidade dos resultados em relação aos estudos clínicos. Além disso, 

assemelha-se com causas de insuficiência cardíaca frequentemente observadas em 

humanos, como a isquemia e o infarto62, 41.  

 O tamanho do infarto é fundamental para o desenvolvimento de 

disfunção ventricular e insuficiência cardíaca pós-infarto. Neste estudo, foram 

excluídos os ratos que apresentaram infarto de tamanho pequeno na avaliação 

ecocardiográfica inicial, pois geralmente apresentam apenas leve disfunção 

ventricular, o que dificulta a avaliação de estratégias terapêuticas. Após a análise 

histológica do coração, somente os animais com área infartada superior a 30% da 

área total do ventrículo esquerdo foram mantidos no estudo. Apesar deste cuidado 

metodológico, e do tempo longo de evolução do infarto, tivemos pequena 

porcentagem de animais com insuficiência cardíaca nos dois grupos infartados. 

Consequentemente, a frequência de ratos com insuficiência cardíaca não diferiu 

entre os grupos IM-Sed e IM-R.  

 Os animais foram submetidos ao teste de esforço para a avaliação da 

capacidade física. Neste teste, realizado antes e após o protocolo de exercício, não 

identificamos diferenças entre os grupos. No teste de carga máxima realizado antes 

do protocolo de exercício, o grupo IM-Sed teve desempenho estatisticamente 

inferior ao grupo Sham. Os ratos foram submetidos ao protocolo do exercício físico 

três meses após a indução do infarto pois, neste período, não é frequente a 

presença de insuficiência cardíaca. Assim, os ratos toleram bem o exercício e, 

adicionalmente, é possível avaliar o efeito do exercício resistido na prevenção ou 

atenuação das alterações miocárdicas decorrentes da insuficiência cardíaca.  

 No teste final de avaliação da carga máxima, o grupo IM-R apresentou 

maior carga máxima que os grupos Sham e IM-Sed, mostrando a efetividade do 

protocolo de treinamento resistido. Este resultado tem grande importância, pois 



 

Discussão 36

estudos têm mostrado que a fraqueza muscular, resultante da perda de massa 

muscular está associada a maior mortalidade em pacientes com insuficiência63-67. 

Estudo recente mostrou que o exercício físico resistido regula a expressão de 

fatores de crescimento como IGF1, MGF e NRG1, os quais estão relacionados às vias 

de sinalização da Akt e ERK 1/2, essenciais para a manutenção, regeneração ou 

crescimento da massa muscular esquelética68.  

 A avaliação das variáveis estruturais cardíacas e funcionais do 

ventrículo esquerdo foi feita por ecocardiograma, que fornece dados importantes 

para a determinação do grau de comprometimento do coração após o infarto do 

miocárdio. A análise realizada três meses após o infarto permitiu assegurar a 

homogeneidade dos grupos IM-Sed e IM-R antes do treinamento físico. Ambos os 

grupos apresentaram dilatação do átrio esquerdo e do ventrículo esquerdo, com 

disfunção sistólica moderada. 

 O mesmo padrão de remodelação cardíaca foi observado após três 

meses de treinamento. O exercício físico resistido não alterou as variáveis 

ecocardiográficas. Portanto, podemos incluir que o exercício físico, apesar de bem 

tolerado pelos ratos infartados, não levou a melhora das alterações cardíacas 

induzidas pelo infarto. Atualmente, ainda há dúvidas se pacientes pós-infarto do 

miocárdio podem ser submetidos a programa intensivo de exercícios resistidos. 

Durante o levantamento de peso, há aumento da pressão intra-arterial, que é 

transmitida ao ventrículo esquerdo durante a sístole ventricular. A elevação da 

pressão intraventricular, mesmo que por pouco período de tempo, pode induzir 

dilatação da cavidade ventricular esquerda. Este resultado, portanto, tem 

importância clínica, e sugere que o modelo de exercício resistido possa vir a ser 

testado em estudos em humanos.  

 O grupo IM-Sed apresentou menor diâmetro dos miócitos inferior ao 

do grupo Sham, o que está de acordo com a dilatação ventricular que ocorreu após 

o infarto do miocárdio. No grupo IM-R, o menor diâmetro dos miócitos foi superior 

ao do grupo IM-Sed e não diferiu dos valores do grupo Sham. Este resultado reforça 

o conceito que o exercício resistido não somente não esteve associado à dilatação 

adicional da cavidade ventricular esquerda, como também colaborou para 

preservar o menor diâmetro dos miócitos. 



 

Discussão 37

 O músculo cardíaco é altamente dependente da síntese constante de 

elevados níveis de ATP69,70. Em corações saudáveis, os cardiomiócitos geram mais 

de dois terços de suas necessidades de ATP por meio da oxidação de ácidos graxos; 

o restante do ATP é proveniente da oxidação de glicose e de outros substratos71. 

Na fase inicial da remodelação cardíaca e disfunção ventricular, observa-se 

diminuição da oxidação de ácidos graxos, por substratos competidores como 

glicose, carboidratos e corpos cetônicos72. 

 Neste estudo, foi avaliada a atividade da PK e PFK, enzimas essenciais 

na fase inicial da glicólise, da CS, enzima pertencente à via aeróbica do ciclo de 

Krebs, da LDH, da via anaeróbica e da CPT1, importante transportadora de glicose 

para o interior da mitocôndria. A única diferença observada entre os grupos, foi a 

redução da atividade da LDH no grupo IM-Sed em relação ao Sham. Portanto, não 

observamos nos animais infartados reprogramação energética bem estabelecida, 

que é frequentemente observada na remodelação patológica do ventrículo 

esquerdo. A LDH é uma importante enzima do metabolismo energético, que 

converte o piruvato em lactato e, consequentemente, o NADH em NAD+. Este 

resultado está de acordo com os dados de Muders et al. (2001)73, que verificaram 

que a atividade da LDH 1, isoforma mais abundante no miocárdio e atuante na via 

aeróbica foi reduzida, enquanto que a atividade das isoformas LDH 2 e 3 foi 

aumentada em coelhos com injúria cardíaca induzida por epinefrina.  

 O estresse oxidativo é definido como o desequilíbrio entre a produção 

de espécies reativas de oxigênio e nitrogênio e os agentes antioxidantes18, 19. As 

espécies reativas de oxigênio estão envolvidas no processo de remodelação cardíaca 

patológica74. Neste estudo, avaliamos os seguintes marcadores de estresse 

oxidativo: concentração miocárdica de malondialdeído e de hidroperóxido de 

lipídeo e carbonilação proteica. A concentração de hidroperóxido de lipídeo foi 

menor no grupo IM-R que no IM-Sed, mostrando que o exercício físico reduziu o 

estresse oxidativo miocárdico. Em relação às enzimas antioxidantes, observamos 

redução da atividade da catalase nos grupos IM-Sed e IM-R em relação ao Sham. 

Resultados semelhantes foram observados por Murtaza et al.74.  

 O complexo enzimático NADPH oxidase tem importante papel na 

geração de espécies reativas de oxigênio, as quais modulam vias de sinalização 



 

Discussão 38

intracelular relacionadas à fibrose e contração miocárdica75. Neste estudo, 

avaliamos as subunidades Nox2, Nox4, p22phox e p47phox deste complexo. A expressão 

da subunidade Nox2 é aumentada no miocárdio após infarto e parece contribuir 

para o remodelamento cardíaco adverso e disfunção contrátil nesta situação76,77. 

Esta enzima torna-se ativa para gerar O2
- após sua associação com a subunidade 

citosólica p47phox77. Thomas et al.78 sugerem que a p47phox tenha papel prejudicial 

nas doenças cardiovasculares. Neste estudo, a expressão gênica da p47phox foi menor 

no grupo IM-Sed que no Sham e normalizada pelo exercício resistido. Estudos 

adicionais são necessários para esclarecer a influência do exercício físico no 

comportamento das subunidades da NADPH oxidase. 

 Poucos autores avaliaram os efeitos do exercício resistido no processo 

de remodelação cardíaca após infarto do miocárdio. Os resultados de nosso estudo 

são divergentes dos observados recentemente por Alves et al.79, que observaram 

que o exercício resistido foi associado a melhora hemodinâmica de ratos com 

infarto do miocárdio. Diferenças no protocolo de estudo como o início do período 

de treinamento cinco semanas apenas a indução do infarto e a falta de avaliação 

da função cardíaca previamente ao início do período de exercício podem ter 

colaborado para a divergência de resultados. 



 

 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Conclusões



 

Conclusões 40

 Em conclusão, ratos com infarto do miocárdio apresentam 

remodelação cardíaca caracterizada por dilatação do átrio e ventrículo esquerdos, 

disfunção sistólica, e redução da atividade da lactato desidrogenase e catalase, e da 

subunidade p47phox do complexo da NADPH oxidase no miocárdio. 

 O exercício resistido iniciado tardiamente é seguro, bem tolerado, e 

aumenta a capacidade muscular de carga máxima em ratos com infarto do 

miocárdio. Adicionalmente, reduz o estresse oxidativo, e preserva a atividade da 

lactato desidrogenase e a expressão gênica da subunidade p47phox do complexo da 

NADPH oxidase miocárdica.



 

 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

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