Pedido nacional de Invenção, Modelo de Utilidade, Certificado de Adição de Invenção e entrada na fase nacional do PCT 29409161903379082 27/11/2019 870190124082 15:22 Número do Processo: BR 10 2019 025010 0 Dados do Depositante (71) Depositante 1 de 1 Nome ou Razão Social: UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA JULIO DE MESQUITA FILHO Tipo de Pessoa: Pessoa Jurídica CPF/CNPJ: 48031918000124 Nacionalidade: Brasileira Qualificação Jurídica: Instituição de Ensino e Pesquisa Endereço: Rua Quirino de Andrade, 215 Cidade: São Paulo Estado: SP CEP: 01049-010 País: Brasil Telefone: 11 56270217 Fax: 11 56270103 Email: auin@unesp.br Esta solicitação foi enviada pelo sistema Peticionamento Eletrônico em 27/11/2019 às 15:22, Petição 870190124082 Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 1/32 Dados do Pedido Natureza Patente: 10 - Patente de Invenção (PI) Título da Invenção ou Modelo de Utilidade (54): PROCESSO DE EXTRAÇÃO DE FLAVANONAS DE LARANJA-DA- TERRA E O REAPROVEITAMENTO DO SUBPRODUTO PARA O PREPARO DE ALIMENTOS A BASE DE DOCES E COMPOTAS Resumo: PROCESSO DE EXTRAÇÃO DE FLAVANONAS DE LARANJA-DA- TERRA E O REAPROVEITAMENTO DO SUBPRODUTO PARA O PREPARO DE ALIMENTOS A BASE DE DOCES E COMPOTAS. A invenção apresentada refere-se ao processo de extração de flavanonas do albedo da Laranja-da-Terra, para obtenção de extrato rico em flavonoides (fração solúvel), e um subproduto rico em fibras (fração insolúvel). O extrato rico em flavonoides será aplicado na produção e purificação de bioprodutos de interesse comercial (contendo alto valor agregado), enquanto o subproduto rico em fibras da extração por prensagem será reaproveitamento para a fabricação de doces e compostas. 4Figura a publicar: Dados do Procurador Nome ou Razão Social: Renan Padron Almeida Procurador: Numero OAB: Numero API: CPF/CNPJ: 33778301896 Endereço: Rua Joaquim Antunes 819 Cidade: São Paulo Estado: SP CEP: 05415012 Telefone: 1156270570 Fax: Email: renan.padron@unesp.br Esta solicitação foi enviada pelo sistema Peticionamento Eletrônico em 27/11/2019 às 15:22, Petição 870190124082 Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 2/32 Dados do Inventor (72) Inventor 1 de 5 Nome: FERNANDO MERZ JUNIOR CPF: 42233308883 Nacionalidade: Brasileira Qualificação Física: Estudante de Pós Graduação Endereço: Rodovia Araraquara Jaú, Km 01 - s/n - Campos Ville Cidade: Araraquara Estado: SP CEP: 14800-903 País: BRASIL Telefone: Fax: Email: Inventor 2 de 5 Nome: RUBENS MONTI CPF: 98207202815 Nacionalidade: Brasileira Qualificação Física: Professor do ensino superior Endereço: Rodovia Araraquara Jaú, Km 01 - s/n - Campos Ville Cidade: Araraquara Estado: SP CEP: 14800-903 País: BRASIL Telefone: Fax: Email: Inventor 3 de 5 Esta solicitação foi enviada pelo sistema Peticionamento Eletrônico em 27/11/2019 às 15:22, Petição 870190124082 Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 3/32 Nome: JULIANA CRISTINA BASSAN CPF: 33290279839 Nacionalidade: Brasileira Qualificação Física: Professor do ensino superior Endereço: Rodovia Araraquara Jaú, Km 01 - s/n - Campos Ville Cidade: Araraquara Estado: SP CEP: 14800-903 País: BRASIL Telefone: Fax: Email: Inventor 4 de 5 Nome: FERNANDO ROBERTO PAZ CEDENO CPF: 23700282893 Nacionalidade: Brasileira Qualificação Física: Engenheiro, arquiteto e afins Endereço: Rua Eletricista Manuel Martins 551, Jardim Dona Emilia Cidade: Jaú Estado: SP CEP: 17215-016 País: BRASIL Telefone: Fax: Email: Inventor 5 de 5 Esta solicitação foi enviada pelo sistema Peticionamento Eletrônico em 27/11/2019 às 15:22, Petição 870190124082 Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 4/32 Nome: FERNANDO MASARIN CPF: 28153027808 Nacionalidade: Brasileira Qualificação Física: Professor do ensino superior Endereço: Rodovia Araraquara Jaú, Km 01 - s/n - Campos Ville Cidade: Araraquara Estado: SP CEP: 14800-903 País: BRASIL Telefone: Fax: Email: NomeTipo Anexo Procuração Proc e Posse 07-2018.pdf Comprovante de pagamento de GRU 200 Comprovante GRU 30 379082.pdf SISGEN Certificado Sisgen Laranja-da-Terra.pdf Relatório Descritivo Relatório Descritivo.pdf Reivindicação Reivindicações.pdf Desenho Figuras.pdf Resumo Resumo.pdf Documentos anexados Acesso ao Patrimônio Genético Declaração Positiva de Acesso - Declaro que o objeto do presente pedido de patente de invenção foi obtido em decorrência de acesso à amostra de componente do Patrimônio Genético Brasileiro, realizado a partir de 30 de junho de 2000, e que foram cumpridas as determinações da Lei 13.123 de 20 de maio de 2015, informando ainda: Número da Autorização de Acesso: A8B75D1 Data da Autorização de Acesso: 01/10/2018 Declaro, sob as penas da lei, que todas as informações acima prestadas são completas e verdadeiras. Declaração de veracidade Esta solicitação foi enviada pelo sistema Peticionamento Eletrônico em 27/11/2019 às 15:22, Petição 870190124082 Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 5/32 Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 6/32 Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 7/32 Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 8/32 Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 9/32 Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 10/32 Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 11/32 17/04/2019 Internet Banking https://www.santandernetibe.com.br/Paginas/Compromissos/COMPROMISSOS_DETALHE_SEG_VIA.asp?txtEntidade=0033&txtCentroAlta=023… 1/1 FUNDACAO PARA O DESENVOLVIMENTO DA UNESP Agência: 0239 Conta Corrente: 13-002549-6 DETALHE DO COMPROMISSO Convênio: 0033-0239-004900019792 Conta de Débito: 0239-000430023105 Tipo de Pagamento: BLQ Outros Código de Barras: 00190000090294091619603379082179178760000007000 No. compromisso banco: 1030412000100033 No. compromisso cliente: 379082/DS1 101009853 Nome/Razão Social do Beneficiário Original: INPI - INST. NACIONAL DE PROPR Nome/Razão Social do Pagador Efetivo: FUNDACAO PARA O DESENVOLVIMENT CPF/CNPJ do Pagador Efetivo: 57.394.652/0001-75 Valor Nominal: 70,00 Desc./Abat.: 0,00 Juros: 0,00 Data de Vencimento: 25/04/2019 Data de Pagamento: 15/04/2019 Situação: Efetivado No. Lista de Débito: No. Protocolo: PGTFORNB15042019900137964 Autenticação: 11CBC4E8E56F9F7076B129A Valor a Pagar: 70,00 Central de Atendimento Santander Empresarial Das 8h às 20h, de segunda a sexta-feira, exceto feriados. 4004-2125 (Regiões Metropolitanas) 0800 726 2125 (Demais Localidades) 0800 723 5007 (Pessoas com deficiência auditiva ou de fala) SAC - Atendimento 24h por dia, todos os dias. 0800 762 7777 0800 771 0401 (Pessoas com deficiência auditiva ou de fala) Ouvidoria - Das 9h às 18h, de segunda a sexta-feira, exceto feriado. 0800 726 0322 0800 771 0301 (Pessoas com deficiência auditiva ou de fala) Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 12/32 javascript:window.close(); javascript:onPrint() CONSELHO DE GESTÃO DO PATRIMÔNIO GENÉTICO Certidão Cadastro nº A8B75D1 Declaramos, nos termos do art. 41 do Decreto nº 8.772/2016, que o cadastro de acesso ao patrimônio genético ou conhecimento tradicional associado, abaixo identificado e resumido, no Sistema Nacional de Gest ão do Patrimônio Genético e do Conhecimento Tradicional Associado foi submetido ao procedimento administrativo de verificação e não foi objeto de requerimentos admitidos de verificação de indícios de irregularidades ou, caso tenha sido, o requerimento de verificação não foi acatado pelo CGen. Número do cadastro: Usuário: CPF/CNPJ: Objeto do Acesso: A8B75D1 UNESP 48.031.918/0001-24 Patrimônio Genético SISTEMA NACIONAL DE GESTÃO DO PATRIMÔNIO GENÉTICO E DO CONHECIMENTO TRADICIONAL ASSOCIADO PesquisaFinalidade do Acesso: Ministério do Meio Ambiente Citrus aurantium Espécie Título da Atividade: Extração de flavonoides de albedo da Laranja-da-Terra (Citrus Aurantium) Rubens Monti UNESP Fernando Merz Junior UNESP Juliana Cristina Bassan UNESP Fernando Masarin UNESP Lidiane Patricia de Andrade UNESP Equipe Data do Cadastro: 01/10/2018 15:19:01 Situação do Cadastro: Concluído Conselho de Gestão do Patrimônio Genético Situação cadastral conforme consulta ao SisGen em 10:21 de 03/10/2019. Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 13/32 1/12 PROCESSO DE EXTRAÇÃO DE FLAVANONAS DE LARANJA-DA-TERRA E O REAPROVEITAMENTO DO SUBPRODUTO PARA O PREPARO DE ALIMENTOS A BASE DE DOCES E COMPOTAS CAMPO DA INVENÇÃO [01] A presente invenção se insere nos campos da Farmácia, Química fina e Bioprocessos, mais especificamente em Alimentos, uma vez que se refere ao processo de extração de flavanonas do albedo da Laranja-da-Terra bem como o uso do referido extrato na produção e purificação de bioprodutos de interesse comercial (biofármacos e nutracêuticos) e o reaproveitamento do subproduto oriundo da extração do albedo para a fabricação de doces e compostas. FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO [02] A citricultura apresenta grande relevância na economia mundial, está presente em mais de 80 países com uma produção atual de mais de 60 milhões de toneladas. Nesse cenário, o Brasil é o maior exportador mundial de frutas cítricas processadas, com ênfase no suco concentrado de laranja congelado (Frozen Concentrated Orange Juice – FCOJ). Apesar da produção expressiva, a citricultura brasileira não apresenta uma ampla variedade de laranjas (Hamlin, Natal, Pêra e Valência), desta forma, concentrando a produção em determinadas épocas do ano, além de aumentar o risco de perdas por ataque de pragas e variações de preços em sua comercialização. Entretanto, existe outros cultivares de laranja que apresentam boa qualidade tecnológica e são subutilizadas. Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 14/32 2/12 [03] Está presente invenção poderá ser aplicada aos mais diversos tipos de frutas cítricas visando a extração dos flavonoides. [04] As flavononas representam interesse mundial devido as possíveis aplicações nos setores produtivos de nutracêuticos, fármacos, além da área de alimentos para humanos e rações animais. Com aplicações abrangentes destes compostos o Brasil tem condições de realizar a extração a partir de Laranjas-da Terra, Cidra e Lima, uma vez que o país domina a cultura das mesmas. [05] Caracterizada por ser um fruto cítrico, a laranja é composta por epicarpo, mesocarpo, endocarpo, columela e sementes. O epicarpo, também conhecido por flavedo, é a porção externa com coloração. Já o mesocarpo, ou albedo, é caracterizado por ser a parte interna de coloração branca e textura esponjosa. Logo abaixo do mesocarpo, se encontra o endocarpo – parte comestível – constituído pelos gomos, vesículas e membranas. [06] O Brasil detém atualmente mais da metade da produção mundial de suco de laranja (53%), exporta 98% da sua produção e o cultivo de laranja está presente em todos os estados brasileiros. A laranja é a fruta mais plantada do país, ultrapassando a faixa dos 800 mil hectares, chegando a ocupar uma área 20 vezes maior do que os pomares de maçã e quase o dobro das terras dedicadas ao cultivo de banana. [07] Os destinos da produção mundial, em geral, se compõem Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 15/32 3/12 entre o processamento industrial (produção de suco), consumo doméstico e exportação de fruta “in natura”. Já o Brasil destina 70% de sua produção para processamento industrial, sendo que a fração de 86 % das produções de São Paulo e do Triângulo Mineiro destinadas a esse mercado. [08] O subproduto oriundo do processamento industrial do suco de laranja representa cerca de 50% do peso total do fruto, sendo apontado como um material com potencial de extração de compostos, porém pouco explorado. Essa elevada quantidade de subproduto, em sua maioria, é utilizada como matéria prima complementar para a alimentação animal ou queimada para cogeração de energia. Visando a melhoria do gerenciamento desses subprodutos estudos vêm sendo desenvolvidos para a implementação de novos processos de recuperação, possibilitando a produção de compostos secundários (pectina, óleo essencial, etanol, dentre outros) e até obtenção de enzimas e extração de compostos bioativos de alto valor agregado. [09] Os compostos fenólicos apresentam uma variedade de propriedades biológicas (antiarteriogênica, antialergênica, anti-inflamatória, antimicrobiana, antitrombótica, cardioprotetora e vasodilatadora), no entanto o destaque tem sido atribuído à sua ação antioxidante. [010] Os flavonoides apresentam atividade antioxidante efetiva devido à suas propriedades de oxido-redução de radicais livres. Esse processo ocorre por meio da ação Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 16/32 4/12 quelante do oxigênio triplete e singlete e também por meio da decomposição dos peróxidos. Essa propriedade é direcionada a ação sobre o radical hidroxil e o ânion superóxido, já que estão envolvidas na inicialização da peroxidação lipídica e são altamente reativos. [011] Esses compostos possuem a capacidade de proteger as células contra o “stress” oxidativo que, por sua vez, pode causar envelhecimento celular e doenças degenerativas (câncer, diabetes, doenças cardiovasculares, etc.). [012] Existem diferentes métodos para realização da extração dos compostos antioxidantes em vegetais (substâncias bioativas). Dentre eles, é possível destacar os tradicionais como: métodos de extração utilizando solvente inorgânico universal (água), solventes orgânicos (como etanol, metanol e éter) e a extração supercrítica (utilização de fluidos supercríticos como o solvente extratante). Entretanto, não é possível eleger uma metodologia mais eficiente para a extração desses determinados compostos, já que os mesmos sofrem influência de diferentes fatores (natureza do vegetal, solvente empregado, tamanho da partícula, tempo e temperatura de extração). [013] Dentro do âmbito do conceito apresentado, a presente invenção propôs avaliar à extração de flavanonas do albedo da Laranja-da-Terra (Citros aurantium) utilizando-se uma metodologia simples e considerada “eco- Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 17/32 5/12 friendly” (ambientalmente correta), de maneira reprodutível, possibilitando ainda a reutilização do subproduto da extração para fabricação de doces e compotas com a grande vantagem da redução da quantidade de água necessária para a remoção do amargor. ESTADO DA TÉCNICA [014] O documento PI0704708-8 A2 descreve um método de obtenção de bioflavonoides cítricos, notoriamente hesperidina, a partir da Polpa Cítrica Peletizada (PCP), notoriamente casca de laranja, e resíduos de frutas cítricas além do preparo de ração animal a partir do resíduo recomposto. O documento BR 102017010470-2 A2 descreve um processo inédito para obtenção de bioflavonoides cítricos e hesperidina a partir de resíduos cítricos, Polpa Cítrica Peletizada (PCP) e outros resíduos de frutas cítricas, notadamente cascas de laranja, além da extração e purificação de açúcares, produção de álcool de cereal, tratamento e recomposição da matéria prima utilizada (PCP) e preparo de ração animal a partir do resíduo recomposto. O documento PI 0110216-8 A descreve um processo para proporcionar agente de turvamento suavizado completamente natural, separando uma fonte de suco cítrico em um líquido permeado e um retido, que contém virtualmente toda a polpa presente na fonte de suco cítrico. Este retido da polpa é filtrado reduzindo os níveis de amargor dentro do material em polpa. O documento PI 0107486-5 A2 descreve Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 18/32 6/12 um método de extração de uma aglicona flavonoide a partir de material inicial contendo um glicosídeo flavonoide e/ou conjugado dela proveniente, produzindo um extrato enriquecido de aglicona compreendendo as etapas de: (i) converter enzimaticamente o glicosídeo flavonoide ou seu conjugado na forma da aglicona flavonoide; (ii) ajustar o pH para tornar a aglicona flavonoide solúvel e remover a fração insolúvel; e (iii) ajustar o pH para tornar a aglicona flavonoide relativamente insolúvel e formar um extrato contendo a mesma. O documento BR 112019001491-8 A2 descreve métodos e sistemas para processar polpa especialmente polpa contendo celulose, em um aparelho para lavar e remover água de polpa, especialmente polpa contendo celulose, compreendendo dois rolos de prensagem rotativos tendo uma superfície externa permeável e uma cuba na qual os rolos de prensagem são instalados, os rolos de prensagem definindo um espaço estreito de prensagem entre eles, espaço estreito de prensagem este em que a polpa é prensada e o aparelho está disposto para alimentar a polpa no sentido de rotação dos rolos de prensagem através do espaço estreito de prensagem, pelo menos um dos rolos de prensagem sendo móvel em relação ao outro rolo de prensagem por meio do que o espaço estreito de prensagem pode ser variado. [015] A presente invenção prevê o uso do albedo de Laranja-da-Terra para extração de flavanonas, caracterizadas pelo amargor, através da prensagem e a Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 19/32 7/12 recuperação do albedo para utilização pela indústria de alimentos na área de doces e compotas. [016] A presente invenção prevê o processamento de albedo de Laranja-da-Terra através do uso de prensa para extração de flavanonas utilizando água como solvente. O processo descrito promove a redução do consumo de água e tempo para remoção do amargor do albedo da Laranja-da- Terra, além de gerar um extrato rico de flavanonas (fração líquida). Por utilizar água de forma controlada e Laranja- da-terra como matérias primas, o processo é considerado ambientalmente correto (“eco-friendly”). [017] O processo, além da extração das flavanonas, possibilita a aplicação deste bioproduto nos seguintes setores produtivos: Alimentício, Química fina, Farmacêutico, Nutracêutico, dentre outros; [018] A principal inovação do invento constitui em extrair flavanonas através da prensagem do albedo da Laranja-da-Terra com a possibilidade do aproveitamento do subproduto no setor produtivo de alimentos. [019] A presente invenção promove um melhor aproveitamento das flavanonas (que não são aproveitadas atualmente) durante lavagens para remoção do amargor de frutas cítricas e possibilita a reutilização do albedo gerado para fabricação de alimentos doces e compostas em geral. [020] A extração utiliza água como solvente, oferecendo Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 20/32 8/12 segurança e facilitando o procedimento de recuperação desses flavonoides. Porém, se necessário, pode ser aplicado outros solventes, uma vez que não há impedimentos relacionados à natureza do solvente. [021] As tecnologias existentes e relatadas anteriormente trata-se de tecnologias diferentes e não prejudicam os quesitos de invenção e atividade inventiva da presente invenção. OBJETIVOS E VANTAGENS DA INVENÇÃO [022] A presente invenção tem por objetivo a obtenção, através da extração por prensagem, de flavanonas do albedo da Laranja-da-Terra possibilitando o seu reaproveitamento na produção de doces e compotas. [023] Além do citado, esta invenção não gerará qualquer resíduo que necessite ser desprezado ao meio ambiente; o albedo prensado poderá ser utilizado pelo setor produtivo de alimentos na área de doces e o extrato rico em flavanonas poderá ser utilizado nos seguintes setores produtivos: Farmacêutico, Nutracêutico, Química Fina e Alimentício. BREVE DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO [024] A presente invenção refere–se ao processo de extração de flavanonas do albedo da Laranja-da-Terra, caracterizados pelo sabor amargo, e o reaproveitamento do extrato rico em flavonoides para aplicação nos seguintes setores produtivos: Farmacêutico, Nutracêutico, Química Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 21/32 9/12 Fina e Alimentício. O albedo resultante do processo de extração poderá ser usado para fabricação de doces e compotas. O processo contribui para a redução de água e no tempo do processo de remoção do amargor. BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS [025] A Figura 1 ilustra o processo de preparação do albedo da Laranja-da-Terra para a extração de flavanonas; [026] A Figura 2 apresenta a prensa artesanal utilizada para a realização ensaios de viabilidade técnica do processo de extração dos flavonoides e consequente remoção do amargor; [027] A Figura 3 ilustra os bioprodutos obtidos a partir da prensagem do albedo da Laranja-da-terra: (A) Extrato rico em flavonoides; (B) Albedo prensado rico em fibras (matéria prima para fabricação de doces e compotas); [028] A Figura 4 ilustra o fluxograma geral do processamento de extração de flavanonas do albedo da Laranja-da-terra e obtenção do albedo prensado rico em fibras; [029] A Figura 5 apresenta o cromatograma e espectro na região do ultravioleta típicos do extrato rico em flavanonas do albedo da Laranja-da-Terra através do método de prensagem; [030] A Figura 6 ilustra a existência da comercialização do albedo da Laranja-da-terra embalados e imersos em conserva. Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 22/32 10/12 DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO [031] A presente invenção descreve o processo de extração do albedo da Laranja-da-terra para obtenção de flavanonas. O processo de extração é realizado por prensagem utilizando-se água com solvente. [032] Compreende duas etapas: A – Preparação do albedo. B – Extração do albedo; separação da fração líquida (extrato de flavanonas) e separação da fração sólida (rica em fibras). [033] Etapa A - Todos os frutos passaram pelo processo de inspeção, higienização e sanitização (solução de hipoclorito de sódio) e de remoção parcial do epicarpo (flavedo), por meio de um processo de raspagem, para a retirada de grande parte do flavedo e outras substâncias interferentes (clorofila, óleos essenciais, sujidades, etc.). Após o tratamento primário, os albedos foram cortados e homogeneizados. As partes restantes do fruto foram descartadas, e os albedos foram armazenados em sacos plásticos e mantidos congelados até o momento das análises (Figura 1). [034] Etapa B - Foi realizada a extração de flavanonas seguindo a proporção média de 30-120 g de albedo para 300- 1200 mL de água ultrapura. O albedo foi imerso em água ultrapura por 8-24h sob refrigeração (3-8ºC). Após o Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 23/32 11/12 período de imersão, a mistura foi prensada com o auxílio de uma prensa manual (Figura 2). Após a prensagem, a fração líquida (extrato rico em flavanonas) e a fração sólida (rica em fibras) foram separadas por filtração sob vácuo e as amostras armazenadas até o momento das análises. Esse método foi adaptado de El-nawaki. [035] As extrações foram realizadas em triplicata, sendo que na fração líquida foram determinados os teores de açúcares redutores, flavanonas totais, fenólicos totais (métodos espectrofotométricos) e os teores de naringina e prunina através da técnica analítica de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE-DAD). [036] Os exemplos demonstrados a seguir possuem o intuito único de exemplificar uma das diversas maneiras de realizar a invenção, no entanto, sem limitar o escopo da mesma. [037] As concentrações de açúcares redutores, flavanonas totais e fenólicos totais encontrados nos extratos foram de 3,6 ± 0,1, 1,1 ± 0,1 e 0,7 ± 0,0 (mg.mL - 1 ) respectivamente. [038] Para quantificação dos compostos naringina e prunina presentes nos extratos foi escolhida à técnica de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE-DAD). A quantificação foi realizada através de curvas analíticas externas construídas a partir das áreas dos picos cromatográficos dos padrões analíticos dos compostos em Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 24/32 12/12 estudo. As concentrações de Naringina e Prunina encontradas no extrato foram de 0,8 ± 0,0 e 0,4 ± 0,0 (mg.mL -1 ), respectivamente. Os cromatogramas e espectros referentes aos compostos quantificados nas amostras são representados na Figura 5. [039] Portanto, fica evidenciada a eficiência de extração das flavanonas avaliada através da prensagem de albedo utilizando-se água como solvente. O albedo uma vez livre do excesso de flavanonas extraídas durante o processo de prensagem apresentarão menor amargor. Portanto, o albedo resultante do processo de extração poderá ser utilizado para fabricação de doces e compotas. Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 25/32 1/2 REINVIDICAÇÕES 1. Processo de obtenção de flavanonas e fibras, caracterizado por compreender as etapas de: a) Extração com água de albedo de Laranja-da-Terra por prensagem; e b) Separação da fração líquida (rica em flavanonas) e a fração sólida (rica em fibras). 2. Processo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de, na etapa “a”, porções de 30-120 g de albedo de Laranja-da-Terra para 300- 1200 mL de água serem imersas em água por 8-24h sob refrigeração (3-8ºC), e após o período de imersão, ter a mistura prensada com o auxílio de uma prensa manual, conforme apresentado na Figura 2. 3. Processo, de acordo com as reivindicações 1 e 2, caracterizado pelo fato de, na etapa “b”, a fração líquida ser separada por filtração sob vácuo a fim de gerar o extrato rico em flavanonas. 4. Processo, de acordo com as reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de, na etapa “b”, a fração sólida ser separada por filtração a fim de gerar um subproduto rico em fibras. 5. Uso do extrato rico em flavanonas obtido, de acordo com as reinvindicações 1 a 4, como matéria prima para preparo de bioprodutos nos seguintes setores produtivos: Farmacêutico, Nutracêutico, Química Fina, Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 26/32 2/2 Alimentício, dentre outros similares. 6. Uso do extrato rico em flavanonas obtido, de acordo com as reinvindicações 1 a 4, como matéria prima para fabricação de doces e compotas, dentre outros similares. Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 27/32 1/4 Figura 1. Ilustração do processo de preparação do albedo da Laranja-da-Terra para a extração. Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 28/32 2/4 Figura 2. Prensa artesanal construída e utilizada para a realização da extração por prensagem. Figura 3. Ilustração dos produtos obtidos a partir da prensagem do albedo: (A) Extrato rico em flavonoides; (B) Albedo prensado (matéria prima para fabricação de doces e compotas). B A Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 29/32 3/4 Laranja-da-Terra Lavagem e sanitização Retirada do epicarpo Fracionamento Despolpamento Obtenção do albedo Imersão em solvente Extrato rico em flavanonas Subproduto rico em fibras Indústrias: - Farmacêutica - Alimentícia - Química Fina Indústrias: - Alimentícia - Agropecuária ETAPA A ETAPA B Prensagem Processo Matéria-prima inicial Frações obtidas Aplicações Figura 4. Fluxograma geral do processo de extração de flavanonas do albedo da Laranja-da-terra e obtenção do albedo prensado rico em fibras. Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 30/32 4/4 Figura 5. Cromatograma e espectro DAD típico da extração por prensagem do albedo da Laranja-da-Terra. Figura 6. Exemplo de albedo atualmente comercializado para a fabricação de doces e compotas. Naringina Prunina Naringina Prunina Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 31/32 1/1 RESUMO PROCESSO DE EXTRAÇÃO DE FLAVANONAS DE LARANJA-DA-TERRA E O REAPROVEITAMENTO DO SUBPRODUTO PARA O PREPARO DE ALIMENTOS A BASE DE DOCES E COMPOTAS “PROCESSO DE EXTRAÇÃO DE FLAVANONAS DE LARANJA-DA-TERRA E O REAPROVEITAMENTO DO SUBPRODUTO PARA O PREPARO DE ALIMENTOS A BASE DE DOCES E COMPOTAS”. A invenção apresentada refere- se ao processo de extração de flavanonas do albedo da Laranja-da-Terra, para obtenção de extrato rico em flavonoides (fração solúvel), e um subproduto rico em fibras (fração insolúvel). O extrato rico em flavonoides será aplicado na produção e purificação de bioprodutos de interesse comercial (contendo alto valor agregado), enquanto o subproduto rico em fibras da extração por prensagem será reaproveitamento para a fabricação de doces e compostas. Petição 870190124082, de 27/11/2019, pág. 32/32 Peticionamento Eletrônico Formulário Procuração Comprovante de pagamento de GRU 200 SISGEN Relatório Descritivo Reivindicação Desenho Resumo 2019-11-27T15:22:10-0300 Brasil Documento Assinado - INPI