Dissertações - Pesquisa e Desenvolvimento (Biotecnologia Médica) - FMB

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  • ItemDissertação de mestrado
    Análise de impacto orçamentário para implantação de novo método de avaliação de fibrose hepática: FIBMaster em pacientes com hepatite C na rede SUS
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-02-27) Serrano-Silva, Tamires Gomes; Ferreira, Ana Silvia Sartori Barraviera Seabra [UNESP]; Golim, Marjorie de Assis; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Introdução: A hepatite C é uma doença viral silenciosa que induz um quadro de lesão hepática que se torna crônico em 80% dos pacientes, podendo evoluir para danos severos, como cirrose e carcinoma hepatocelular. A avaliação de fibrose hepática se faz necessária nesses pacientes e a biópsia é o método padrão-ouro, porém trata-se de um exame invasivo, que envolve riscos. Atualmente, métodos não invasivos têm sido estimulados nos protocolos de monitoramento de doenças hepáticas. Deste modo, FibMaster foi recentemente desenvolvido, visando avaliar a fibrose hepática em pacientes com hepatite C crônica por meio de biomarcadores sanguíneos. Objetivos: A proposta deste estudo foi realizar análise de impacto orçamentário deste novo método para implantação no Sistema Único de Saúde – SUS do Brasil. Métodos: Para tanto, a metodologia utilizada foi Análise de Impacto Orçamentário (AIO), que considera: modelo analítico; perspectiva; cenário de referência; cenário alternativo; horizonte temporal; população-alvo; custos diretos; comportamento de mercado; análise de sensibilidade; dados de entrada e dados de saída. Sendo assim, foi realizado levantamento da população-alvo a ser beneficiada pelo novo método e a comparação dos cenários de referência com os cenários alternativos no horizonte temporal de 4 anos a partir de dados disponíveis no Sistema de Gerenciamento da Tabela de Procedimentos, Medicamentos e Órteses, Próteses e Materiais Especiais do SUS (SIGTAP) e contratos administrativos. Resultados e Discussão: Foi possível identificar que o novo método, entre os anos de 2023 e 2026, apresenta uma estimativa de economia de R$ 3.657.917,00 se utilizado no processo diagnóstico para estadiamento da fibrose hepática em comparação à biópsia hepática, e um investimento de R$ 213.097.022,00 se implantado no processo de acompanhamento dos pacientes com hepatite C, em associação ao método FIB4 utilizado atualmente. Conclusão: O novo método proporcionará uma alternativa diagnóstica não invasiva de maior precisão diagnóstica para os estágios ≥F2, de grande abrangência nacional a partir da utilização da Rede Pública Nacional de Contagem de Linfócitos T CD4+/CD8 destinada ao monitoramentos de pessoas vivendo com o HIV/Aids, para os estágios de fibrose ≥F2 (fibrose significativa), proporcionando flexibilização quanto aos métodos no processo diagnóstico e monitoramento da fibrose hepática, contribuindo com as equipes de trabalho e possibilitando maior qualidade de vida a esses pacientes, impactando diretamente 317.904 pessoas infectadas com hepatite C e indiretamente 718.651 pessoas acometidas com hepatites virais previstas até 2026. Além disso, também foi desenvolvido um manual de orientação para a aplicação da metodologia de AIO destinada a profissionais que necessitem realizar avaliação econômica em saúde.
  • ItemDissertação de mestrado
    Desenvolvimento de rede neural convolucional utilizando classificadores para predição da agressividade biológica de subtipos de câncer de mama a partir de imagens de ressonância magnética de pacientes de hospital de referência do interior do estado de São Paulo
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-02-24) Esposto, Fábio Augusto da Silva; Ferreira, Ana Silvia Sartori Barraviera Seabra [UNESP]; Pessoa, Eduardo Carvalho [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Introdução: O Câncer de Mama é uma doença complexa e heterogênea, atualmente classificada em subtipos específicos que estão associados a diferentes prognósticos. A biópsia continua sendo o padrão-ouro para identificação dos biomarcadores, mas tem importantes limitações. A utilização de Aprendizagem de Máquina (AM) não é uma novidade na pesquisa do câncer. Redes neurais artificiais (RNAs) têm sido usadas na detecção e diagnóstico de câncer há aproximadamente 20 anos. Objetivos: Assim, essa pesquisa tem como objetivo desenvolver uma rede neural convolucional (RNC) que possa prever o subtipo específicos de um câncer de mama, classificados pela imuno-histoquímica, com base em imagens obtidas por ressonância magnética. Métodos: O estudo foi realizado no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu em exames de ressonância magnética de 76 pacientes de gênero feminino. Os cortes das imagens de ressonância magnética foram usados para segmentação dos subtipos tumorais. Uma arquitetura de RNC foi projetada com uma máquina de Boltzmann convolucional personalizada utilizando exame de ressonância magnética de 76 pacientes, contendo 10 imagens cada, que foram utilizadas para treinamento e validação da RNC. As imagens foram ajustadas para validação. Um conjunto balanceado de 40 imagens (exame de 4 pacientes) foram utilizadas para definição de testes, sendo imagens de uma paciente para cada subtipo tumoral (Luminal A, Luminal B, HER2+ e Triplo Negativo). O código do software foi escrito em Python em uma estação de trabalho pessoal. Resultados e discussão: Dez imagens de cada subtipo tumoral foram avaliados (Luminal A, Luminal B, HER2+ e triplo negativo). Foram analisados o desempenho de cinco métodos classificadores utilizados em Machine Learning: K-Nearest Neighbor (KNN), Support Vector Machine (SVM), Gaussian Naïve Bayes (GNB), SOFTMAX e Random Forest (RF). Esses algoritmos possuem variáveis definidas antes do treinamento, chamadas de hiperparâmetros. As métricas do conjunto de teste foram avaliadas de acordo com: precisão, revocação (recall), resultado f1 (f1 score) e acurácia. O algoritmo classificador SoftMax apresentou um resultado de melhor comparação em relação aos demais classificadores, em todas as métricas analisadas, apresentando a matriz de confusão com melhor acurácia, com média aproximada de 35% de precisão. Deste modo, optou-se por realizar testes com uma classificação binária (hormonal e não hormonal) com o algoritmo classificador de melhor resultado no estudo, o SoftMax. Assim, atingiu-se uma porcentagem de acurácia de 65%, apresentando-se como um classificador mais promissor na classificação binária (hormonal e não hormonal) de câncer de mama. Considerações finais: A análise de ressonância magnética de câncer de mama com a utilização de uma nova Rede Neural Convolucional pode realizar uma classificação binária de câncer de mama com uma precisão de 65%. Evidências mostram que conjuntos de dados maiores levam a um maior desempenho do modelo proposto. Assim, como continuidade desta pesquisa, serão utilizados maiores números de conjuntos de dados e outros classificadores em novos testes, com intuito de obter resultados mais promissores.
  • ItemDissertação de mestrado
    Desenvolvimento de um software online de gerenciamento de controle de estoque interno para laboratórios
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-02-27) Arruda, Clara Fumes; Ferreira, Ana Silvia Sartori Barraviera Seabra [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Introdução: Ao observar a rotina de um laboratório pode-se verificar a rotatividade e o fluxo de processos e procedimentos que surgem ao longo da jornada de trabalho, sendo inevitável imaginar que, para isso, seja necessário um bom estoque de produtos e insumos. Os estoques são fundamentais e imprescindíveis para o bom êxito e funcionamento de um laboratório, tendo em vista que sem o mesmo a produção e a pesquisa tornam-se inviáveis pela falta ou excesso de produtos/insumos em suas realizações. Assim, foi possível verificar que a eficácia de um estoque interfere diretamente em seu funcionamento e que as tecnologias da informação voltadas para a gestão de estoque permitem que o usuário tenha acesso às informações de forma mais precisa e ágil, ocasionando assim na eficiência de seus serviços. Objetivo: Deste modo, este trabalho teve como objetivo desenvolver um sistema de gerenciamento de estoques internos online capaz de suprir as necessidades de um laboratório com base em seu funcionamento e rotina, sendo adequado e customizável para diferentes laboratórios. Métodos: Iniciou-se com a coleta de dados sobre a rotina e as necessidades de um estoque de laboratório por meio de uma pesquisa exploratória e quantitativa com os profissionais da saúde do laboratório de Biotecnologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu. Após esta etapa, iniciou-se a construção de plano estratégico para o desenvolvimento do software baseado em um fluxograma, com a descrição de cada página necessária no software, o desenvolvimento da interface e banco de dados com base na metodologia User Experience (UX) e User Interface (UI). Resultados: O software, intitulado "Labs action" foi construído utilizando as linguagens de programação HTML, JavaScript, ReactJS e Express.js, integradas ao banco de dados MySQL2, a fim de possibilitar ao usuário e ao laboratório: segurança no armazenamento de informações, otimização e organização do estoque, controle do fluxo de entrada e saída dos produtos/insumos, catalogação de produtos/insumos, registros e relatórios de movimentações, rastreios e atividades dos usuários em tempo real, política de estoque mínimo, controle de pedidos de compras e abastecimento de produtos/insumos, diminuição do tempo de resposta na busca de produtos/insumos, na compra e reposição de materiais. Conclusão: Espera-se, a partir dos resultados obtidos com esta pesquisa, que outros laboratórios do país possam utilizar a mesma ferramenta para controle de estoque interno e trocas de produtos e insumos.
  • ItemDissertação de mestrado
    Obtenção de nanopartículas TiO2/WO3-Ag como alternativa à contaminação de ambientes hospitalares
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-12-19) Artioli Neto, Bruno; Riccardi, Carla dos Santos [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Atualmente, os materiais nanoestruturados têm sido cada vez mais utilizados nas indústrias no Brasil. Dentre eles, as tintas com ação antimicrobiana estão em alta no mercado, necessitando, com a incidência de novos microrganismos, de alternativas de produtos para se ter excelência visando custo-benefício e a ação resolutiva para à não proliferação dos microrganismos em ambientes com elevada circulação de pessoas. Hoje em ambientes hospitalares temos como agente bactericida o Quartenário de Amônia, um produto lixiviavel e, segundo estudos ineficaz para o vírus da Salmonella. O estudo apresenta a síntese e caracterização de um nanomaterial a base de dióxido de titânio (TiO2) e trióxido de tungstênio (WO3) dopado com prata (Ag). Visando a viabilidade e ação antimicrobiana um microbioma variado, resistência a ação fotocatalítica e intempéries naturais e a não lixiviação do composto. Obtendo o nanocompósito, através da sintese hidrotermica microondas, pouco consolidada ainda pela literatura especializada pode ser considerada uma metodologia alternativa viável, pois reduz o tempo de síntese química sem uso de sulfactantes tóxicos. Havendo assim uma melhoria de etapas do processo, facilitando assim futuros estudos. As nanopartículas obtidas apresentaram formato esférico, com tamanhos médios de 30 a 50 nm. Os nanocompósitos de TiO2/WO3-Ag incorporados em tinta convencional acrílica a base de água obtiveram eficiência antimicrobiana tanto para as bactérias Gram-positivas como para Gram-negativas, segundo a norma JIS Z 2801/ISO 22196. Demonstrando que essa formulação poderá ser inserida em ambientes hospitalares prevenindo infecções hospitalares e inovando a indústria de tintas.
  • ItemDissertação de mestrado
    Avaliação da carga viral do SARS-CoV-2 em swab nasofaríngeo conservado em etanol 70%
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-06-01) Umezawa, Lia Ayumi; Grotto, Rejane Maria Tommasini [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O SARS-CoV-2 (Síndrome Respiratória Aguda Severa Coronavírus 2), agente etiológico da COVID-19 (Doença Coronavírus 2019), é um vírus de grande relevância em saúde pública devido aos impactos ocasionados no mundo durante a pandemia, com danos sanitários, sociais e econômicos. A detecção de seu RNA por RT-qPCR em amostras de swab nasofaríngeo conservadas em solução fisiológica é considerada o padrão ouro para o diagnóstico da doença e, se tornou de grande importância no manejo da pandemia e no controle da disseminação do vírus. Durante a pandemia um dos grandes problemas enfrentados por muitos serviços de saúde foi o armazenamento das amostras, as quais precisavam ser mantidas de 2 a 8oC até o processamento das mesmas, o que deveria ocorrer em no máximo 72 horas devido à degradação do RNA. Se o material não fosse processado nesse período o mesmo deveria ser armazenado a -80oC para preservação do RNA, o que cria um outro problema de gestão pois a maioria dos serviços não dispõe de tal equipamento. Opções conhecidas para conservar o material viral são o etanol 70%, o TRIzol™ e o Beta-mercaptoetanol adicionados à solução fisiológica na qual o material biológico é coletado. Neste cenário, a finalidade do presente estudo foi avaliar comparativamente a carga viral do SARS-CoV-2 em Swab nasofaringeo conservado em etanol 70% e em solução fisiológica em diferentes temperaturas de armazenamento e intervalos de tempo a fim de fornecer subsídios aos gestores de sistemas de saúde para tomada de decisões estratégicas no contexto de transporte e armazenamento de amostras. Secreção naso e orofaríngeas foram submetidas à diferentes condições de temperatura e, diferentes soluções preservantes de RNA. Seguiu-se a extração de RNA viral automatizada utilizando metodologia baseada em beads magnéticas. A Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (RT-qPCR) foi realizada utilizando o kit Gene Finder™ 2019-nCoV Assay. Os resultados mostraram que o armazenamento das amostras ao longo de 12 dias em solução fisiológica à temperatura ambiente não causou nenhum impacto na quantificação viral, mas prejudicou a eficiência na amplificação do controle interno. Isso não foi observado quando o armazenamento foi realizado em 2 a 8oC ou pela adição de etanol 70% na amostra. Os resultados mostraram também que o TRIzol™ e o Beta-mercaptoetanol atuaram de forma a proteger as partículas virais em decorrência de congelamento e descongelamento sucessivos. Sabendo que o transporte e o armazenamento das amostras podem influenciar na detecção do SARS-CoV-2, podemos concluir que os resultados encontrados poderão contribuir na otimização desta logística em locais onde estes aspectos são comprometidos por diversos motivos.
  • ItemDissertação de mestrado
    Expressão de citocinas e perfil de imunoglobulinas na COVID-19: avaliação em doadores de plasma convalescente versus vacinados
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-06-01) Chimeno, Luis Guilherme; Golim, Marjorie de Assis [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    No final de 2019 a cidade de Wuhan, na província chinesa de Hubei, anunciou oficialmente a primeira epidemia pelo coronavírus 2 (SARS-CoV-2), que culminou na pandemia de COVID-19 (doença do coronavírus 2019), acometendo até o momento cerca de 508 milhões de pessoas. Múltiplos fatores influenciam a evolução da COVID-19, havendo dinâmicas alterações na imunidade celular, humoral e perfis de citocinas/quimiocinas, podendo progredir para hiperinflamação sistêmica. A fim de mitigar a ação deste fenômeno inflamatório e a evolução a infecção viral, a terapia com plasma convalescente é uma alternativa a ser considerada. O plasma oriundo de pessoas que se recuperaram da doença e desenvolveram imunidade pode fornecer imunização passiva a indivíduos infectados, visando neutralizar o patógeno e amenizar efeitos da resposta inflamatória grave. Este estudo teve por objetivo avaliar o perfil de expressão de citocinas/quimiocinas e imunoglobulinas específicas ao SARS-CoV-2 em candidatos elegíveis a doação de plasma convalescente para COVID-19. Os participantes foram distribuídos em grupos: G0 – n= 15 (controle - naive para SARS-CoV-2 e não vacinados), G1 – n= 14 (naive para SARS-CoV-2 e vacinados), G2 – n = 6 (convalescentes; não vacinados) e G3 – n = 15 (convalescentes; vacinados), totalizando 50 indivíduos. Foram avaliadas IL-8, RANTES, MIG, MPC-1 e IP-10, as concentrações dos anticorpos de classe IgG dirigidos contra SARS-CoV-2 (anti-nucleocapsídeo, anti-spike-S1 e anti-RBD) e a capacidade de inibição dos anticorpos neutralizantes (Nabs). Foi possível observar maiores níveis de anti-spike S1 e anti-RBD (mediana = 100.153 pg/mL e 41.253 pg/mL, respectivamente), bem como maior taxa de neutralização (mediana = 98%) em G3 quando comparado com os demais grupos. Quanto às quimiocinas, os grupos G1 e G3 apresentaram menores níveis, e estes são inversamente correlacionados aos níveis de NAbs em G3. Ao passo que G2 apresentou níveis plasmáticos mais elevados de IP-10, IL-8 e anti-nucleocapsídeos, características que podem ser deletérias ao receptor. Os resultados apontam para o potencial do plasma de indivíduos vacinados, independente de terem tido COVID-19, dado o conjunto de características que podem favorecer imunidade passiva, mediante as concentrações de imunoglobulinas específicas ao SARS-CoV-2 (anti-S1 e RBD) e maior capacidade de inibição viral. Desta forma, o plasma dos grupos G3 e G1, respectivamente, parecem agregar as características mais seguras e eficazes para TPC, de modo mais eficiente do que o plasma oriundo de indivíduos não vacinados e recuperados da COVID-19.
  • ItemDissertação de mestrado
    Perfil transcricional do câncer de mama em cadelas por sequenciamento de nova geração
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-05-27) Santos, Driéle Bretones dos; Ferrasi, Adriana Camargo [UNESP]; Garcia, Geysson Javier Fernandez; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    As neoplasias mamárias são frequentes em cadelas não castradas, representando até 46% dos casos de câncer nesses animais no Brasil. Cães podem ser um ótimo modelo de estudos sobre cânceres de mama já que estes animais e humanos compartilham características fisiológicas, histológicas e genômicas, além de apresentarem semelhanças quanto ao desenvolvimento, comportamento clínico e vias moleculares da doença. Análises comparativas do transcriptoma de tecidos tumorais e normais podem identificar genes e vias moleculares desreguladas, permitindo, a médio prazo, o desenvolvimento de ensaios laboratoriais para uso no diagnóstico, ou, a longo prazo, indicar potenciais alvos terapêuticos para medicina humana e canina. Nesse contexto, o objetivo principal do presente estudo foi, a partir do sequenciamento de nova geração (NGS), determinar o perfil transcricional de amostras de carcinomas ductais mamários em cadelas, buscando esclarecer a relevância dos transcritos desregulados nas vias moleculares envolvidas na doença. Para tanto, utilizou-se amostras de carcinoma ductal mamário e do tecido mamário não tumoral adjacente, provenientes da mastectomia radical de seis (6) cadelas, de diferentes raças e idades, atendidas pelo serviço de Cirurgia de Pequenos Animais do Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP em Botucatu. O RNA total de cada amostra foi extraído, quantificado e submetido a análise de qualidade. Posteriormente, essas amostras foram reunidas em pools correspondendo a quatro grupos (dois tumorais e dois normais). Utilizou-se cada pool para a construção de uma biblioteca de cDNA, que, então foi sequenciada na plataforma NextSeq 500 System (Illumina, EUA). O resultado do sequenciamento foi encaminhado para análises de qualidade, limpeza e alinhamento ao genoma de referência, assim, identificando-se os transcritos diferencialmente expressos. Foram encontrados 11.278 genes dentre os, aproximadamente, 36.930 genes do genoma de referência de cachorro. Ao serem comparadas as amostras tumorais e o tecido normal adjacente, foram encontrados 1.206 genes diferencialmente expressos, sendo 633 regulados negativamente (downregulados) e 573 regulados positivamente (upregulados), os quais foram capazes de diferenciar os grupos pela PCA (Principal Component Analysis). A partir da análise de ontologia genética foram identificadas vias inflamatórias, de diferenciação e adesão celular e manutenção da matriz como as principalmente desreguladas nessa casuística. A maioria dos genes upregulados mais destacados estão envolvidos na organização da matriz extracelular, através da deposição de colágeno, vasculogênese mimética e da capacidade de invasão das células por meio da transição epitélio-mesenquimal. Ainda, os principais genes diferencialmente expressos observados no presente estudo, indicam maior agressividade da doença e pior prognóstico, destacando-se os dez genes mais upregulados. Finalmente, o estudo do transcriptoma canino parece indicar ser este um ótimo modelo para gerar informações relevantes à oncologia nas duas espécies.
  • ItemDissertação de mestrado
    Obtenção de anticorpos monoclonais murinos dirigidos contra antígenos i expressos em hemácias fetais humanas
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-05-31) Azanha, Juliana Maziero; Moroz, Andrei [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Não disponível
  • ItemDissertação de mestrado
    Identificação de biomarcadores da paracoccidioidomicose humana por técnicas de espectrometria de massas
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-05-31) Mastromoro, Izabella Cristina; Lima, Estela de Oliveira [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A paracoccidioidomicose é uma importante micose sistêmica que pode ser frequentemente diagnosticada erroneamente, uma vez que os principais métodos diagnósticos são a microscopia direta e as técnicas sorológicas, cuja precisão deixa a desejar. Portanto, há uma urgência por métodos diagnósticos mais precisos. Amostras de soro humano de pacientes com paracoccidioidomicose (grupo PB) e voluntários saudáveis foram submetidas à preparação e análise por espectrometria de massa de alta resolução. Esses dados foram avaliados estatisticamente com análise multivariada dos escores PLS-DA e VIP. Para cada biomarcador eleito foram propostos metabólitos correspondentes utilizando a base de dados METLIN e revisão de literatura. Um mapa de calor também foi projetado para observar a distribuição de cada biomarcador de acordo com a condição do sujeito. Além disso, uma curva ROC e sua matriz de confusão foram construídas com os biomarcadores mais importantes. A partir da análise, foram eleitos 9 biomarcadores séricos para o grupo PB, representados pelas relações massa/carga de: 909,7, 565,6, 623,3, 567,1, 910,7, 663,6, 959,7, 666,5, 621,3. As curvas ROC apresentaram acurácias de 98,1% e 96,2% quando testadas com esses 9 biomarcadores e os 5 mais importantes, respectivamente, apresentando sensibilidade acima de 85% e especificidade acima de 94%. Considerando a necessidade de métodos diagnósticos mais assertivos na paracoccidioidomicose, apresentamos novos biomarcadores séricos altamente precisos na discriminação de indivíduos infectados, que representam potenciais marcadores séricos de diagnóstico para paracoccidioidomicose.
  • ItemDissertação de mestrado
    Do colírio de soro autólogo à experiência de negócio
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-02-24) Rocha, Ananda Lini Vieira da; Deffune, Elenice [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A Síndrome do Olho Seco (SOS) é uma doença multifatorial das lágrimas e da superfície ocular que resulta em desconforto, distúrbios visuais e instabilidade do filme lacrimal e afeta principalmente adultos com mais de 50 anos e mulheres. É uma doença que pode ter grande impacto negativo na qualidade de vida dos pacientes. A abordagem terapêutica com soro autólogo tem sido preconizada deste 1986 com prós e contras na literatura. Este trabalho tem como objetivo realizar estudo de logística de implantação de negócio e viabilização de produto para a produção de alta qualidade de CoSA em startup já estabelecida. Este projeto foi aprovado pelo comitê de Ética e Pesquisa via Plataforma Brasil CAAE 518.559.21.7.0000.5411 com anuência de todas as partes envolvidas. As etapas de validação de mercado do CoSA foram realizadas em parceria com a Crop® Biotecnologia uma startup brasileira, que atua em projetos com o Laboratório de Biotecnologia Aplicada/Biologia Molecular e Biologia Celular, sediada em Botucatu-SP. A Crop® contribuiu no mapeamento mercadológico para implantação de Mínimo Produto Viável (MVP) já validado por pesquisa científica, produtos com atividade biológica para a saúde humana. Resultados - Foram identificados 177 serviços/clínicas/consultórios de oftalmologia na região de Botucatu. Deste total de clínicas, em 83 (47%) delas foram realizadas visitas online, para outras 7 (4%) as visitas foram presenciais. 9 (5%) visitas estão programadas para serem realizadas e outras 38 (21,5%) são consideradas em prospecção. Para treze serviços, o contato foi descontinuado por falta de resposta (7,3%). Das 90 clínicas/profissionais que foram entrevistados, 27 estabeleceram contrato para futura prestação de serviços, correspondendo a 30% dos visitados e 15,2% do total de clínicas. Foram incluídos 10 pacientes, sendo 5 deles do sistema público e outros 5, arcados pela empresa, como futuros clientes. Para a execução plena da proposta futura, foi realizado credenciamento de Laboratório para Coleta das amostras. O protocolo de produção do CoSA em execução desde 2007, sendo produzidos 120 frascos de 10mL de CoSA/mês para os 10 pacientes. Todos os lotes foram aprovados no Controle de Qualidade. Foram registradas apenas duas observações/queixa, uma não foi justificada e o tratamento foi mantido e outra, na qual houve suspensão do tratamento.
  • ItemDissertação de mestrado
    Biocelulose Bacteriana Nexfill para o tratamento de feridas arteriais limpas: estudo clínico fase II
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-11-18) Moraes, Carolina Magro Barreiros de; Bertanha, Matheus [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Introdução: A doença arterial periférica (DAP) é uma manifestação da doença aterosclerótica que afeta a circulação arterial periférica, principalmente dos membros inferiores, com frequência estimada em estudos internacionais de 10% a 12% na população adulta e 20% da população acima dos 75 anos, com predominância para o sexo masculino. Considera-se que o melhor tratamento para a doença seja a realização da revascularização arterial do membro acometido, entretanto, mesmo com as melhores técnicas de revascularização, muitos pacientes ainda permanecem com úlceras de difícil cicatrização, o que pode requerer cuidados secundários com curativos por longo período com elevado custo pessoal e ao sistema de saúde. Todos os esforços para aumentar a qualidade de vida e melhorar as chances de cicatrização das feridas são válidos, de maneira que o desenvolvimento de novas substâncias para uso em curativos pode ser uma ferramenta adicional para o controle dessa enfermidade. Objetivos: Avaliar o uso do hidrogel de biocelulose (Nexfill) como cobertura de úlceras em pacientes portadores de DAP (doença arterial periférica) como promotor do processo de cicatrização, avaliando a cicatrização parcial e total em 60 dias. Métodos: Através desse estudo clínico, foram incluídos 17 participantes portadores de DAP com úlceras arteriais com fundo limpo. Os pacientes foram seguidos em um grupo único por 60 dias, recebendo instruções para realização dos curativos com hidrogel de biocelulose (HB - Nexfill) em nível ambulatorial e foram realizadas avaliações clínicas periódicas, além do registro fotográfico. O principal desfecho de eficácia foi a cicatrização parcial ou total da ferida. Desfechos de segurança foram relacionados a óbito, infecções, gangrenas e amputações. Os resultados de cicatrização das úlceras foram aferidos pela medida de área da úlcera com o software ImageJ™. Resultados: Foram incluídos 17 participantes com úlcera arterial limpa neste estudo, que foram acompanhados durante 60 dias. Uma paciente foi excluída por rápida piora clínica devido aos maus cuidados com a úlcera. Seis pacientes (37,5%) tiveram a cicatrização total da ferida em 60 dias e todos apresentaram melhora significativa das úlceras em 60 dias. Os dados clínicos obtidos pela análise dos questionários Medical Outcomes Study 36 - Item Short - Form Health Survey (SF-36), escala visual analógica de dor (EVA) e EuroQol Group (EQ-5D) demonstraram melhora estatisticamente significativa com o tratamento. Conclusão: O hidrogel a base de HB (Nexfill) foi seguro e eficaz na promoção da cicatrização parcial e total de úlceras arteriais após um acompanhamento de 60 dias. Isso pode ser verificado pela taxa de cicatrização de feridas, melhora da dor provocada pela ferida e melhora no estado geral de saúde com a aplicação dos questionários SF36 e EQ-5D. Estes resultados sustentam a necessidade da continuidade desse estudo com maior número de participantes.
  • ItemDissertação de mestrado
    Avaliação da resposta ao tratamento radioterápico no seguimento de 5 anos após recidiva bioquímica em pacientes com câncer de próstata
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-11-26) Romano, Guilherme Gomes; Oliveira Junior, Batista de [UNESP]; Martinelli, Bruno; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    As neoplasias são a segunda causa de morte no Brasil, e as malignas dos órgãos genitais masculinos estão inseridas no quarto grupo que mais leva ao óbito. A neoplasia maligna da próstata é a mais frequente e responsável por aproximadamente 95% desses óbitos. O desencadeamento do câncer de próstata ocorre devido a algumas alterações genômicas que dão início à progressão da doença. O exame de antígenos prostático específico (PSA) auxilia no diagnóstico, permitir acompanhar a evolução e indica o tratamento mais adequado, que pode ser por meio de vigilância ativa, prostatectomia radial ou radioterapia. Mesmo com o tratamento, o câncer pode recidivar e a constatação pode ser identificada pela alteração de biomarcadores, recidiva bioquímica, esta situação deve ser constatada por meio da monitoração bioquímica a fim de propor estratégia terapêutica adequada e precisa. Objetivo: Avaliar a resposta ao tratamento radioterápico no seguimento de 5 anos após recidiva bioquímica em pacientes com câncer de próstata que realizaram prostatectomia. Métodos: Esta pesquisa documental foi conduzida de maneira retrospectiva por meio de prontuários dos últimos cinco anos de pacientes submetidos à recidiva bioquímica no Hospital Amaral Carvalho (HAC) na cidade de Jaú/SP. Foram coletados dados sociodemográficos, antropométricos, valores de PSA pré e pós-cirurgia e de 1 a 5 anos pós-radioterapia e a ocorrência de óbito. As variáveis contínuas foram apresentadas em média e desvio padrão, ou mediana e percentil 25-75, de acordo com a distribuição de normalidade dos dados. As variáveis categóricas foram apresentadas como frequência absoluta e relativa. Para comparação entre os momentos foi aplicado o Teste de Friedman (p<0,05). Resultados: Foram coletados dados de 38 homens com média de idade de 70,18 ± 6,60 anos, peso de 79,77 ± 18,01 Kg, altura de 1,70 ± 0,06 m, e índice de massa corporal de 27,78 ± 5,48 kg/m2. Os valores de PSA diminuíram significativamente após a cirurgia de prostatectomia. No primeiro ano após a recidiva bioquímica e realização da radioterapia, os valores de PSA foram menores se comparado ao pós-cirúrgico. Houve diferença entre PSA pré-cirúrgico [169,5 (43,7 – 1308,3)] e PSA 1ano [0,13 (0,004 – 23,330)], com p = 0,012, e entre PSA pré-cirúrgico [169,5 (43,7 –1308,3)] e PSA 2anos [0,095 (0,012 – 341,10)] com p = 0,039. Conclusão: Não há modificação do PSA após 5 anos de recidiva bioquímica devido prostatectomia, sendo o o tratamento radioterápico considerado eficaz.
  • ItemDissertação de mestrado
    Avaliação da elastografia de quantificação de ponto na predição de fibrose hepática em pacientes com hepatite C
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-05-31) Puatto, Mariana Janas; Silva, Giovanni Faria [UNESP]; Golim, Márjorie de Assis [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A hepatite C é uma doença hepática infecciosa causada pelo vírus da hepatite C (VHC). Estima-se que cerca de 130-150 milhões de pessoas no mundo estejam infectadas, totalizando cerca de 400 mil óbitos por ano. A progressão natural da doença causa fibrose hepática e seu estadiamento é essencial na decisão do tratamento e acompanhamento dos pacientes. O escore mais utilizado para estadiamento de fibrose é a escala METAVIR (F1, F2, F3, F4). A biópsia hepática é a metodologia padrão-ouro, porém, é um procedimento invasivo sujeito a complicações, dor intensa e sangramento. Métodos não invasivos têm sido propostos, sendo a elastografia de quantificação de ponto uma das alternativas, no entanto, na literatura não há intervalos de referência padronizados para classificação dos resultados de elastografia na escala METAVIR. O presente trabalho trata-se de um estudo retrospectivo com o objetivo de avaliar o desempenho da elastografia hepática, utilizando a técnica ElastPQ (aparelho Affiniti 70® da Philips), comparada à biópsia em pacientes VHC+, com o intuito de estabelecer intervalos de referência correspondentes à classificação do grau de fibrose. Foram incluídos 217 pacientes pelos critérios de inclusão: pacientes VHC+ crônicos, submetidos à biópsia e elastografia hepática pré-tratamento, com intervalo máximo de dois anos entre os exames. Critérios de exclusão: coinfecções VHB e/ou HIV, uso de álcool, paciente renal crônico, com CHC ou doenças relacionadas ao fígado, tratamento realizado entre Bx e ELH e falta de dados. O grau de fibrose obtido nas biópsias foi utilizado como padrão, comparando-se aos valores de rigidez hepática (kPa) obtidos na elastografia. A predição dos intervalos de referência foi feita utilizando o algoritmo J48 em uma abordagem de aprendizado de máquina supervisionado. Foi possível estabelecer intervalos de referência para a classificação do grau de fibrose, onde para F0/F1 (≤4,96kPa); F2 (>4,96 a ≤9,2kPa); F3 (>9,2 a ≤12,13kPa); F4 (>12,13kPa). Ao score desenvolvido atribuiu-se o nome ElastScore. Este estudo demonstrou que ElastPQ é método válido e eficiente na medição de fibrose hepática comparado à biópsia, demonstrando adequado desempenho na distinção dos graus de fibrose. Ademais, o ElastScore apresentou desempenho superior quando comparado à performance dos modelos já existentes e em uso para predição não invasiva da fibrose hepática.
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    Desenvolvimento de dispositivo portátil para treinamento funcional: desenvolvimento de dispositivo portátil para treinamento funcional
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-05-28) Celestrin, Sheila Fumes; Pardini, Maria Inês de Moura Campos [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O resumo não está disponível por se tratar de uma patente ainda em andamento seu conteúdo é sigiloso.
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    Avaliação dos polimorfismos HPA em plaquetas expostas in vitro ao ZIKV
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-05-27) Belo, Lucas Guerchi; Grotto, Rejane Maria Tommasini [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O ZIKA vírus é um arbovírus da família Flaviviridae e gênero flavivirus, possuindo grandes semelhanças genéticas e estruturais a outros arbovírus relevantes na área da saúde. A infecção por este patógeno está associada a complicações neurológicas graves, como microcefalia em neonatos e a síndrome de Guillain-Barre. Sua principal forma de transmissão é vetorial, sendo o mosquito fêmea do gênero Aedes o principal vetor. Contudo, outras vias de transmissão também foram documentadas, como a transmissão por transfusão de hemocomponentes, entre eles, a transfusão de concentrado de plaquetas. As plaquetas são fragmentos de megacariócitos que expressam diversas moléculas de superfície, as quais já foram associadas como receptores virais. Os Antígenos Plaquetários Humanos (HPA), por exemplo, são glicoproteínas de membrana presentes na superfície das plaquetas e estão associados a interações virais. Tais antígenos são suscetíveis a ocorrência de polimorfismos, e a presença desses polimorfismos estão associadas a infecções de flavivirus, tais como a dengue e Hepatite C. No entanto, ainda não existem estudos avaliando essa relação com ZIKV. Desse modo, o objetivo deste trabalho foi avaliar a possível associação entre os polimorfismos dos sistemas HPA -1, -3 e -5 com a capacidade do ZIKA vírus de interagir com plaquetas. As plaquetas foram obtidas de doadores, elas foram incubadas in vitro com ZIKV e em seguida lavadas. A presença do ZIKV nas plaquetas foi detectada por RT-qPCR e a genotipagem do HPA-1 e HPA-3 foram feitas por PCR-SSP, e do HPA-5 por PCR-RFLP. As amostras apresentaram carga viral detectadas nas plaquetas. Na análise estatística foi identificada significância entre a genotipagem do sistema HPA-1 e a capacidade do ZIKV de interagir com as plaquetas. Nossos dados sugerem um mecanismo de interação entre ZIKV e plaquetas, e uma associação entre o perfil HPA-1 e a afinidade do ZIKV interagir com as plaquetas.
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    Depoimento especial infantil: possibilidades e perspectivas nos cuidados e proteção sob o olhar da psicologia jurídica
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-05-31) Garcia, Márcia Aparecida Thomé; Riccardi, Carla dos Santos [UNESP]; Padovani, Flávia Helena Pereira [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A violência infantil é um fenômeno de abrangência mundial e os efeitos da exposição à violência na infância, causam danos comprometedores à saúde e ao desenvolvimento pleno, com impactos devastadores até a vida adulta. A discussão mundial sobre a incidência do abuso sexual, principalmente com o isolamento na pandemia do COVID-19 é pontual. O avanço paralelo entre a tecnologia e a efetivação das Leis específicas a nível nacional e internacional visando a proteção integral e a garantia dos direitos infantis em pleno século XXI, parece não conter o aumento desses casos. Apesar da Lei do Depoimento Especial figurar como um sistema estabelecido e recente na realidade dos profissionais do Poder Judiciário do interior paulista, o binômio responsabilidade e competência na atribuição do papel de entrevistador, reflete um sinônimo de incertezas, queixas e controvérsias nos bastidores dos Fóruns e que se fazem presentes até os dias de hoje. A interpretação ambígua ou equivocada de Leis e Resoluções, a ausência de orientação consistente e capacitação adequada de modo mais contínuo, vem favorecendo alguns contrapontos. Formas distintas no “modus operandi” diante do fluxo do atendimento de cada equipe, quer pela ausência de um parâmetro único na condução do atendimento, quer pela delonga no aguardo de capacitação do Protocolo Brasileiro de Entrevista Forense lançado em 2020, dificuldades na tomada do depoimento com criança de idade precoce, bem como na produção e emissão da escrita, propiciaram a sugestão de alternativas nesta temática. O objetivo deste trabalho foi a elaboração de um protocolo de atendimento uniformizado a ser utilizado pela Psicologia Jurídica do Fórum da Comarca de Botucatu -SP, durante a fase da tomada do depoimento especial e adaptado à realidade local, por meio da leitura e análise crítica da literatura nacional e internacional sobre a temática do Depoimento Especial e dos Protocolos de entrevista forense com crianças de faixa etária de quatro a seis anos de idade, vítimas de violência sexual, aliado à experiência profissional. Humanizar o modo de condução do atendimento e que inclui o depoimento especial através de algumas mudanças, como a reestruturação do espaço físico utilizado na aplicação da técnica no Fórum de Botucatu, uso de cartilhas explicativas e de recursos lúdicos com crianças desta faixa etária, a apresentação virtual do Juiz para a criança, através da câmera, assegurando-lhe a responsabilidade única do magistrado pela criminalização do acusado e não o seu depoimento em si, visa reduzir o sentimento de culpa e de deslealdade que porventura ela carregue. Como perspectiva futura, sob o olhar da Robótica Social, a sugestão de utilizar um sistema robótico como instrumento lúdico e facilitador do psicólogo judiciário durante o atendimento da criança vítima de violência sexual e idealizado por essa pesquisadora em outro Projeto colaborativo interprofissional, pode representar poderosa ferramenta da Psicologia em qualquer área. No mundo globalizado, considerando todas as discussões em torno do depoimento especial apontadas neste trabalho, a Justiça necessita de qualidade técnica e humana para garantir os direitos dos infantes, de modo que não sejam afligidos por nenhuma violência, principalmente a institucional.
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    Avaliação da carga viral do vírus da imunodeficiência humana (HIV) em plasma pobre e rico em plaquetas
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-05-28) Schnoor, Suzana Kague; Grotto, Rejane Maria Tommasini [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A Aids é consequência da infecção causada pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV). Os principais alvos do vírus são linfócitos T CD4+ e os macrófagos, porém já foi demonstrado que as plaquetas interagem com o vírus mesmo não expressando a molécula CD4 em sua superfície celular. Estudos recentes demonstraram que as plaquetas não só interagem com o HIV como são reservatórios de vírus infectantes, capazes de transmiti-lo a outras células suscetíveis. A determinação da carga viral do HIV é considerada padrão-ouro para avaliação da eficácia do tratamento antirretroviral e detecção precoce de problemas de adesão em pessoas vivendo com HIV, sendo realizada utilizando a técnica de transcrição reversa seguida da Reação em Cadeia da Polimerase em tempo real (RT-qPCR) em amostras de plasma pobre em plaquetas, de acordo com o protocolo estabelecido pelo Ministério da Saúde. O objetivo do presente trabalho foi avaliar comparativamente a carga viral do HIV no plasma pobre e rico em plaquetas em amostras de sangue de trinta pacientes, sem tratamento antirretroviral, portadores do vírus e que foram atendidos pelo Laboratório de Biologia Molecular do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu. Foram utilizados dois protocolos de centrifugação para obtenção do plasma pobre e rico em plaquetas, seguidos de quantificação da carga viral através da metodologia Abbott RealTime HIV-1 (Abbott Molecular, Illinois, USA). Os resultados demonstraram não haver diferença estatística significativa entre os dois grupos avaliados (plasma rico e pobre em plaquetas). Esperava-se que o plasma rico em plaquetas apresentasse uma carga viral maior do que o plasma pobre, uma vez que as mesmas abrigam o vírus, porém essa diferença não foi observada. No entanto, a metodologia pode explicar estes resultados. Os resultados sugerem testar novos protocolos, como utilização de colunas de sílica para extração do RNA viral, uma vez que o protocolo atual utiliza partículas magnéticas que não são especificas para ácidos nucleicos e podem sofrer interferências de outras moléculas presentes na amostra, e outros protocolos de centrifugação para obtenção de plasma rico em plaquetas como descritos em outros estudos.
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    Hemovigilância do doador de sangue e células progenitoras hematopoiéticas: atuação da enfermagem na identificação e condução das reações adversas
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-05-27) Albano, Alba Cristina; Deffune, Elenice [UNESP]; Garcia, Patricia Carvalho [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A Hemovigilância envolve um conjunto de procedimentos de vigilância cobrindo toda a cadeia transfusional. Destina-se a coletar e avaliar informações sobre efeitos inesperados ou indesejáveis resultantes do uso terapêutico de produtos sanguíneos com intuito de prevenir sua ocorrência ou recorrência. Mas até recentemente, em especial no Brasil, os cuidados eram voltados exclusivamente para os efeitos adversos às transfusões de sangue, ou seja, o foco era no paciente. Em 2015 foi publicado o Marco Conceitual e Operacional em Hemovigilância onde se encontram os capítulos específicos ao doador de sangue com a classificação das reações quanto ao tempo de ocorrência, quanto à gravidade, quanto à correlação com a doação e quanto ao tipo de doação. Este projeto foi delineado diante da necessidade de diagnosticar os registros de reações adversas à doação de sangue no Hemocentro de Botucatu nos últimos cinco anos, também desenvolver e implantar manual para atendimento ao doador de sangue, efetuar treinamento específico de equipe, desenvolver e implantar registro de reações adversas à doação de sangue tardias, utilizando a home page do Hospital das Clínicas/Hemocentro e analisar prospectivamente o registro das reações adversas à doação de sangue. No período analisado foram coletadas 71.118 bolsas de sangue, das quais, 69.287 foram por meio de doação standard e outras 2.388 pelo método de aférese (4%). Durante o período observa-se uma discreta tendência a aumento do número de doações de sangue. Em 2014 foram 13.873 doações e, em 2018, 14.205, portanto um aumento de 2,40%. Nos anos 2014 e 2016 a classificação remete o Hemocentro de Botucatu para uma posição inferior dentre o range de 5 a 9,9 doadores/1000 habitantes. Já para os anos 2015, 2017 e 2018 este número é ligeiramente maior que 10, como a média brasileira indicada. De 2014 a 2018 foram registradas 1.063 reações adversas ainda na sala de coleta, ou seja, reações imediatas e não foram identificados registros ou queixas de reações tardias. No treinamento, a análise de desempenho dos participantes em ambos os testes foi a média de acertos no pós-teste de 13,43 contra 9,37 e a mediana de 15,5 versus 8,5 onde p<0,0001 evidenciando que o rendimento dos participantes foi estatisticamente significante no pós-teste. De 22 de julho de 2020 até 30 de novembro de 2020 foram registrados 80 acessos na home page. Destes acessos, 20 preencheram o formulário de reação adversa tardia dos quais, 15 estão documentados com fotos e outros cinco sem fotos. A análise retrospectiva das doações de sangue realizadas de 2014 a 2018 aponta oportunidade de melhoria no serviço de Hemovigilância no que se refere à assistência de enfermagem e aos registros de reações adversas no Hemocentro de Botucatu. A análise prospectiva do registro das reações adversas à doação de sangue de dezembro de 2019 a 30 de novembro de 2020, após treinamento, identificou aumento do número de registros apontando para subnotificação em período retrospectivo. A taxa de RADS imediatas no Hemocentro de Botucatu era de 20,13/1000 doadores e foi para 21,68/1000 doadores após o treinamento. Foram registrados 84,96% das RADS imediatas no ambiente da coleta interna. A intensidade da RADS classificada em leve, moderada e grave distribuiu-se em 83,15%, 16,55% e 0,30%, respectivamente.
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    Validação de anticorpo monoclonal para detecção de vesículas extracelulares de plaquetas humanas
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-05-28) Oliveira, Fernando Aparecido de; Deffune, Elenice [UNESP]; Moroz, Andrei [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A terapia transfusional, com o uso de sangue e componentes, é uma tecnologia de grande relevância na atualidade, colaborando para a melhoria e salvando vida de pacientes. No entanto, assim como outras intervenções terapêuticas, pode acarretar em complicações aguda ou tardias ao receptor. Dentre as indicações médicas de transfusão de hemocomponentes, destaca-se o Concentrado de Plaquetas (CP), obtido através de separação, por centrifugação de uma unidade de sangue total - (ST) ou por aférese. Esses hemocomponentes tem volume e quantidade de plaquetas diferentes dependendo da forma de preparo. Quanto ao armazenamento, devem ser mantidos em ambiente com temperatura de 20ºC a 24ºC, sob agitação constante e tem validade de 5 dias. A transfusão de concentrado de plaquetas ocorre diante da recorrência de plaquetopenia seja por falência medular e alto gasto de plaquetas ou por consumo ou destruição periférica. Este hemocomponentes precisam de rigoroso controle de qualidade. Este tipo de CQ tem alto valor agregado. Este trabalho validou anticorpo produzido com a finalidade de contribuir com tecnologia de ponta, baixo custo, no controle de qualidades destes hemocomponentes aumentando a segurança transfusional. Objetivo: Estabelecer novo método de controle de qualidade de plaquetas com finalidade transfusional compreendendo: 1) Caracterização e validação de anticorpos monoclonais dirigidos contra antígenos plaquetários humanos. 2) Estabelecer padrões de conformidade e não conformidade para a liberação de CP utilizando a tecnologia de monitoramento de VEs por Citometria de Fluxo e 3) Propor depósito de patente para o anticorpo monoclonal caracterizado. Resultados: Foram obtidos dos anticorpos monoclonais murinos (AcMm), após a fusão cellular, 3.125 híbridos, após a clonagem celular pela técnica de diluição limitante foram selecionados 2 clones. Um destes clones, o PAT1-10 A1 foi o selecionado para os testes de caracterização e eletroforese em gel de poliacrilamida e Western Blotting foram realizados. Para a corrida eletroforética foram usadas as proteínas extraídas da membrana plaquetária de 5 diferentes doadores. Da eletroforese 1D, em Gel de Poliacrilamida a 6% coradas com Azul de Coomassie, foi possível identificar o reconhecimento de proteína de alto peso molecular e subsequente as análises de proteômica, seguidas por citometria de fluxo com anticorpos monoclonais de especificidade anti-plaquetária, marcados com fluorocromo: anti-CD41-PE; ANTI-CD61-FITC e anti-CD62P – APC. Conclusão: Estabeleceu-se novo método de controle de qualidade de plaquetas com finalidade transfusional, baseado em citometria de fluxo com anticorpo monoclonal com a especificidade anti-fibrinogênio produzido home made e um imunossensor deverá ser construído e testado. Foi caracterizado o anticorpo monoclonal PAT1-10 A5, com especificidade anti fibrinogênio humano, molécula total.
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    Monitoramento da qualidade do processamento laboratorial no transplante autólogo de células progenitoras hematopoéticas
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-05-26) Lopes, Lia Beatriz Mantovani; Golim, Marjorie de Assis [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O Transplante de Células Tronco Hematopoética Autólogo (TCTH-auto) é terapia consolidada para tratamento de patologias onco-hematológicas e consiste em reestabelecer a função medular através da infusão intravenosa de células progenitoras hematopoéticas (CPH) do próprio paciente. Este estudo teve como objetivo caracterizar indicadores de qualidade na etapa de processamento laboratorial do TCTH-auto, através de análise retro-prospectiva de dados de pacientes submetidos ao Transplante de Medula Óssea do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu (HCFMB). Neste contexto, a implementação de indicadores que permitam checar etapas do processo, são muito relevantes para sanar questões que encontramos durante e ao final deste. Os dados coletados compreendem o período de agosto de 2016 a dezembro de 2020, totalizando 107 pacientes, dos quais foram coletadas variáveis envolvidas no processo de TCTH-auto, e posteriormente submetidas à analises estatísticas convencionais e análises de dados avançadas, como técnicas de Machine Learning, árvore de decisão, Análise de Componentes Principais (PCA) e Análise de Discriminante Linear (LDA). As análises de Machine Learning nos permitiram identificar a partir do conjunto total de dados, um preditor da eficiência do processo de TCTH-auto, o CD34+ pré. Embora este também seja principal preditor do momento ideal da coleta por aférese,e isto já esteja bem consolidado na literatura e na prática clínica, os resultados do presente estudo validam o desempenho do serviço de transplantes. Diferencial foi estabelecido aplicando-se o algoritmo J48, culminando na obtenção de árvore de decisão preditiva que estabelece valores de corte. Quando a contagem de CPH no sangue periférico for >23 CD34/µL indica alta probabilidade da coleta ser eficiente, já valores de CD34 ≤23/µL indicam menor probabilidade de eficiência. A análise de Componentes Principais (PCA), indicou que as duas variáveis que apresentam maior correspondência com a eficiência da aférese são CD34+ pré e hematócrito (Ht). Utilizando-se a Análise de Discriminante Linear (LDA) elaborou-se a equação (score) para predição da eficiência, combinando valores absolutos de CD34+ pré e Ht, a qual pode ser aplicada especialmente quando os valores de CD34+ estiverem menores que 23 µL. Se o resultado da equação for ≤ -0,14 a probabilidade de eficiência na coleta é maior, no entanto se >-0,14 a probabilidade de eficiência é baixa. Este indicador possibilita a realização da coleta em pacientes com CD34+ <23µL. Outro indicador que pode ser adotado é o coeficiente de eficiência (CE) que possibilita avaliar a eficiência da leucaférese. Aplicando este indicador, observamos que temos obtido eficiências superiores às estimadas, de modo que podem ser estabelecidos maiores índices de estimativa de aférese. Diante do exposto, a identificação de potenciais indicadores de qualidade nas etapas desse processo que venham assegurar a qualidade do transplante de medula realizado no HCFMB, buscando a excelência e, tendo em vista o aumento de demanda neste serviço de abrangência regional, são de suma importância, entendendo-se que os resultados gerados por este estudo terão aplicabilidade imediata e poderão trazer melhorias na gestão da qualidade deste serviço de alta complexidade no âmbito do SUS.