Araraquara - FOAR - Faculdade de Odontologia

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Propriedades físico-química, resistência de união e atividade antibiofilme de novos cimentos obturadores à base de silicato de tricálcio
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-25) Pradelli, Jéssica Arielli; Tanomaru, Juliane Maria Guerreiro [UNESP]
Tempo de presa (n=6), escoamento (n=6), pH (n=10), solubilidade (n=6) e radiopacidade (n=4) de cimentos endodônticos biocerâmicos foram avaliados de acordo com a norma ISO 6876. Resistência de união (foi avaliada pelo teste de Push-Out) e atividade antibiofilme contra E. faecalis associado ou não a C. albicans pelo teste de contato direto modificado com eluído do cimento fresco e cimento após 24 horas de presa do cimento. Os dados obtidos foram analisados pelos testes ANOVA e Tukey (α=0,05). Publicação 1 – Sealer Plus BC (SPBC) foi comparado ao Bio-C Sealer (BCS) e ao AH Plus Jet (AHP). SPBC apresentou maior tempo de presa que BCS e menor que AHP, menor escoamento que BCS e maior que AHP (p<0,05). SPBC apresenta a menor radiopacidade (p<0,05), e maior resistência de união em relação ao BCS e ao AHP (p<0,05). SPBC e BCS demonstraram pH alcalino e atividade antibiofilme contra E. faecalis associado ou não a C. albicans no eluído e corpo de prova (p<0,05). No entanto, SPBC e BCS mostraram solubilidade maior que 3%. SPBC apresenta adequados tempo de presa, escoamento e radiopacidade, maior resistência de união, pH alcalino, atividade antibiofilme, mas solubilidade acima do recomendado pela ISO. Publicação 2 – AH Plus Biocerâmico (AHPB) em comparação aos cimentos Bio-C Sealer (BCS) e AH Plus Jet (AHP). AHPB apresentou menor tempo de presa e resistência de união que BCS e AHP (p<0,05). Radiopacidade foi menor que AHP e maior que BCS (p<0,05). AHPB apresentou escoamento maior que AHP e menor que BCS (p<0,05). AHPB e BCS demonstraram pH alcalino e atividade antibiofilme contra E. faecalis associado ou não a C. albicans no eluído (p<0,05). Conclui-se que AHPB apresenta tempo de presa, escoamento e radiopacidade de acordo com as normas ISO 6876, a menor resistência de união, pH alcalino e atividade antibiofilme com eluído do cimento. No entanto AHPBC e BCS, excedem 3% de solubilidade. Publicação 3 – Comparação entre NeoSealer Flo (NSF) e NeoMTA2 (NMTA2) com o Bio-C Sealer (BCS) e AH Plus Jet (AHP). AHP apresentou o maior tempo de presa, seguido por NMTA2 e NSF (p<0,05). NSF e BCS excederam a solubilidade recomendada, enquanto NMTA2 e AHP atenderam aos padrões (p<0,05). NSF e NMTA2 apresentaram os menores valores de radiopacidade (p<0,05). NMTA2 teve o menor escoamento, inferior ao recomendado pela ISO (p<0,05). NSF obteve a maior resistência de união, seguido pelos demais cimentos (p<0,05). Os biocerâmicos promoveram pH alcalino (p<0,05). Todos os cimentos exibiram maior atividade antibiofilme com eluído. Conclui-se que NSF e NMTA2 apresentam propriedades físico-químicas e mecânicas adequadas, pH alcalino e atividade antibiofilme contra Enterococcus faecalis. No entanto, NSF mostrou maior solubilidade e NMTA2 menor escoamento do que o recomendado pelas normas ISO.
Terapia fotodinâmica antimicrobiana com utilização da clorina-e6 e LL-37 em nanoemulsão no tratamento da doença periodontal: estudo in vitro e in vivo
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-27) Carvalho, Gabriel Garcia de; Zandim-Barcelos, Daniela Leal [UNESP]; Faculdade de Odontologia de Araraquara
A Raspagem e Alisamento Radicular (RAR) é considerada a terapia não-cirúrgica de escolha para tratamento da doença periodontal (DP). No entanto, esta terapia pode apresentar limitações e insucessos quando utilizada isoladamente em determinados casos clínicos. Assim, terapias alternativas têm sido investigadas para suprir deficiências da RAR que podem estar relacionadas ao limitado acesso à superfície radicular durante o tratamento, a presença persistente de periodontopatógenos nas bolsas mais profundas e defesa imunológica deficiente. Dentre estas terapias, destaca-se a terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) e o uso de peptídeos antimicrobianos (PAM). O objetivo geral deste estudo foi investigar a otimização de clorina-e6 (Ce6) na terapia fotodinâmica e seu efeito como terapia coadjuvante no tratamento não cirúrgico da DP. Os objetivos específicos foram: (1) testar o efeito antimicrobiano da Ce6 irradiada por luz azul ou vermelha sobre biofilme multiespécie de periodontopatógenos; (2) otimizar o Ce6 em nanoemulsão e testar o efeito sinérgico do LL-37 com aPDT sobre biofilme multiespécie de periodontopatógenos; (3) testar o efeito de aplicações múltiplas da aPDT utilizando nanoemulsão carregada com Ce6 e LL-37 no tratamento de ratos com DP induzida. Biofilme multiespécie com bactérias periodontopatogênicas foi desenvolvido em condições ideais para avaliação antimicrobiana nos estudos 1 e 2, e a mesma foi avaliada por meio de ensaio qPCR. No estudo 1, a maior eliminação bacteriana foi observada nos grupos onde a luz azul foi aplicada. No estudo 2, após otimização e caracterização da Ce6 em nanoemulsão, foi observado que a combinação Ce6 e LL-37 em nanoemulsão foi efetiva na eliminação de todas as bactérias testadas. No estudo in vivo, sessões únicas ou múltiplas de terapia fotodinâmica com clorina-e6 conjugada com peptídeo antimicrobiano LL-37 em nanoemulsão como adjuvante da RAR no tratamento da DP não proporcionaram benefícios em comparação à terapia convencional isoladamente.
Características físico-químicas do clínquer com diferentes tamanhos de partículas e de cimentos reparadores e obturadores à base de silicato de cálcio
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-25) Tavares, Karina Ines Medina Carita; Tanomaru Filho, Mário [UNESP]
Novas formulações de cimentos à base de silicato de cálcio são desenvolvidas. Avaliação de propriedades físico-químicas do clínquer (CL) Angelus (Londrina, PR, Brasil) e de cimentos reparadores e obturadores biocerâmicos empregando diferentes metodologias foram realizadas. Este estudo foi dividido em três publicações: Publicação 1: Avaliou o efeito do tamanho de partícula (2 a 30 µm e <2 µm) associado ao tungstato de cálcio (CaWO4) e manipulado com água destilada (AD) ou líquido com aditivos (LA) nas propriedades físicas do CL, em comparação ao MTA Branco e MTA Repair HP. CL 2 a 30 µm apresentou menor tempo de presa (TP) inicial e maior TP final quando manipulado com LA (p<0,05). A adição de CaWO4 aumentou a radiopacidade do CL para ambas partículas (p<0,05), porém não afetou TP, solubilidade e pH (p>0,05). Todos os materiais apresentaram pH alcalino (p>0,05), principalmente nas 24 horas e 7 dias. Quanto à solubilidade, todos os grupos apresentaram ganho de massa, exceto MTA em AD (p<0,05). CL 2 a 30 µm + CaWO4 apresentaram maior ganho de massa e maior radiopacidade quando manipulados com LA que com AD (p<0,05). CL<2 µm manipulado com LA proporciona menor TP final. Ambos tamanhos de partícula influenciam positivamente na capacidade de alcalinização do CL, principalmente nos períodos iniciais. Publicação 2: Investigou o efeito da imersão em ácido butírico (AB, pH 4,1) ou PBS (pH 7,0) nas propriedades do CL com tamanho de partícula de 2 a 30 µm ou ˂ 2 µm associado ao óxido de zircônio e manipulado com AD ou LA em comparação com Bio-C Repair (BCR) e Biodentine (BIO).Todos os materiais apresentaram alterações volumétricas semelhantes ao BCR e BIO (p>0,05). AB mostrou maior aumento da porosidade (aproximadamente 8%) do que PBS (aproximadamente 2%), exceto para CL2 a 30 µm com LA (p<0,05). A imersão em AB por 28 dias aumentou a porosidade e falhas na interface quando comparado ao baseline (p<0,05). CL 2 a 30 µm com AD apresentou maior porosidade e falhas na interface que os demais grupos (p<0,05). Análise MEV revelou formação de hidroxiapatita na superfície do material em PBS e perda estrutural em AB. pH ácido prejudica a interface material/dentina, porosidade e promove alterações dimensionais dos materiais biocerâmicos. AD sem aditivos aumenta a porosidade, falhas de interface e perda de volume do CL. Publicação 3: Avaliou o efeito da imersão em ambiente ácido ou neutro no comportamento físico do Bio-C Sealer (BCS) ou AH Plus Jet (AHPJ) após obturação de canais ovais empregando diferentes espessuras de cimento. Alterações volumétricas e porcentagem de vazios e falhas na interface de BCS e AHPJ foram observadas em ambiente ácido após 30 dias (p<0,05). Ambos materiais apresentaram alto percentual de vazios e perda volumétrica na maior espessura do cimento (p< 0,05). Baseline apresentou menor percentual de vazios e falhas na interface quando comparado aos períodos experimentais (p<0,05). Meio ácido prejudica as propriedades dos cimentos após 30 dias. A maior espessura do cimento afeta negativamente a alteração volumétrica e presença de vazios nos canais ovais.
Potencial da terapia fotodinâmica na modulação da resposta inflamatória e nos fatores de virulência microbianos: avaliação em modelo de co-culturas tridimensionais de fibroblastos gengivais, Candida albicans e Staphylococcus aureus
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-13) Oliveira, Analú Barros de; Brighenti, Fernanda Lourenção [UNESP]; Fontana, Carla Raquel [UNESP]
Este trabalho está dividido em três publicações cujos objetivos foram: a) realizar uma revisão sistemática e metanálise em ensaios clínicos para avaliar a eficácia da terapia fotodinâmica em lesões de mucosite oral (Publicação 1); b) avaliar o potencial in vitro de quatro diferentes fotossensibilizadores, sendo dois de origem sintética (Azul de Metileno e Fotoditazina) e dois de origem natural (Curcumina e extrato bruto de Senna alata), para terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) contra Candida albicans e Staphylococcus aureus cultivadas em suspensão e biofilme e c) avaliar a efetividade da TFDa mediada pelo extrato bruto de S. alata em modelo de cocultura celular tridimensional (3D) contendo fibroblastos gengivais, queratinócitos orais e colágeno tipo I. Publicação 1: A questão de pesquisa e as palavras-chave foram definidas seguindo a estratégia do PICO. A pesquisa do artigo foi realizada em diversas bases de dados, incluindo Embase, Scielo, Scopus, Cochrane Library, Web of Science, Science Direct e Pubmed. Foram selecionados ensaios clínicos randomizados para a revisão. O estudo foi conduzido conforme as normativas do PRISMA para revisão sistemática. Publicação 2: Foram utilizadas as seguintes cepas de referência em suspensão e biofilme: S. aureus ATCC 25923 e C. albicans ATCC 90028. Foram testados quatro agentes fotossensibilizadores (FS) em duas concentrações diferentes (Photodithazine (PDZ): 0.175 e 0.2 mg/mL; azul de metileno (AM): 0,2 e 2 mg/mL; Curcumina (CUR): 0.014 e 0.029 mg/mL; Extrato vegetal de S. alata: 0.05 mg/mL e 0.5 mg/mL. Dois protocolos de TFDa foram utilizados sobre biofilmes cultivados por 24 h e 48 hs: a) em único tratamento e b) em três aplicações sucessivas. As células microbianas em fase planctônica receberam apenas um único tratamento. A eficácia da terapia foi avaliada através da contagem de células viáveis após o tratamento (UFC/mL) e ensaio Live/Dead. O ensaio MTT foi utilizado para avaliar a citotoxicidade. O metabolismo de cada biofilme foi avaliado pelo ensaio XTT. Publicação 3: O modelo de cocultura 3D foi preparado e posteriormente infectado com S. aureus ATCC 25923 e C. albicans ATCC 90028 por 16 h, seguido pela aplicação da TFDa mediada pelo extrato bruto de S. alata nas concentrações de 0,05 e 0,5 mg/mL. Após 24 h do tratamento, foi avaliada a viabilidade microbiana (UFC/mL) e o dano celular pelo ensaio da lactato desidrogenase (LDH). AM nas concentrações de 0,2 e 2 mg/mL foram utilizados para fins de comparação. Os dados das publicações 2 e 3 foram analisados no programa IBM SPSS versão 20.0, com nível de significância de 5%. Dos 727 artigos analisados na publicação 1, foram selecionados 5 artigos para análise qualitativa e 2 para a meta-análise. Os resultados da meta-análise, incluindo nível de evidência e avaliação de risco de viés, demonstraram a eficácia da TFD na redução do tempo de cicatrização em combinação com a terapia a laser de baixa intensidade (TLBI), em comparação com a aplicação isolada da TLBI (p = 0,0005/I2 = 0%).Reduções totais na viabilidade microbiana foram encontradas na publicação 2 para TFDa mediada por curcumina (0.014 e 0.029 mg/mL), TFDa mediada por PDZ (0.175 e 0.2 mg/mL) e a TFDa mediada por S. alata (0.05 e 0.5 mg/mL) para ambos os micro-organismos cultivados em suspensão. Biofilmes de C. albicans cultivados por 24 horas mostraram redução total na viabilidade microbiana (UFC/mL), para TFDa mediada por AM (0,2 e 2,0 mg/mL) e TFDa mediada por S. alata (0.5 mg/mL) em ambos os protocolos utilizados (aplicação única e aplicações sucessivas). Biofilmes de C. albicans cultivados por 48 h apresentaram redução total na viabilidade microbiana para TFDa mediada por AM (2,0 mg/mL). Para S. aureus, houve redução significativa na viabilidade microbiana apenas para três aplicações de TFDa (S. alata: 0.05 e 0.5 mg/mL; AM: 0,2 e 2,0 mg/mL) em biofilmes cultivados por 24 h e em biofilmes cultivado por 48 h (S. alata: 5,0 mg/mL; MB: 0,2 e 2,0 mg/mL). As imagens CLSM para ensaio Live/Dead confirmaram os resultados encontrados para viabilidade microbiana. Todos os fotossensibilizadores apresentaram valores significativamente diminuídos para a atividade metabólica do biofilme de C. albicans e S. aureus cultivados por 24 horas tratados com uma única aplicação de TFDa. Além disso, as concentrações dos fotossensibilizadores e os parâmetros de irradiação utilizados no presente estudo apresentaram valores aceitáveis (≤70%) de citotoxicidade para ambas as linhagens celulares. Os resultados da publicação 1 destacam que a TFD é eficaz no tratamento da mucosite oral, contribuindo para a cicatrização de feridas, principalmente no tempo necessário para o reparo. Já os resultados da publicação 2 mostraram que a terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) mediada por diferentes FSs revelou-se seguro e eficiente para o controle de C. albicans e S. aureus. Adicionalmente, para a publicação 3, os melhores reduções de S. aureus e C. albicans foram encontradas para 0,5 mg/mL de S. alata e 2 mg/mL de AM, sendo que a TFDa mediada pelo extrato bruto de S. alata causam menos danos celulares em comparação com AM (p>0,05) e clorexidina 0,12%. Os resultados da publicação 1 destacam que a TFD apresenta resultados promissores para o tratamento da mucosite oral e pode ser uma opção terapêutica eficaz, contribuindo para a cicatrização dos tecidos lesionados principalmente no tempo necessário para o reparo. Já os resultados das publicações 2 e 3 mostraram que a terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) mediada pelo extrato bruto de S. alata revelou-se seguro e eficiente para o controle de C. albicans e S. aureus.
Uso do gel de sinvastatina na terapia regenerativa da peri-implantite: estudo clínico controlado e randomizado
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-04-23) Vivanco Purisaca, Javier Eduardo; Vaz, Luís Geraldo [UNESP]
Defeitos ósseos periimplantares (DPI) são um risco para a perda de implantes dentários e a progressão da peri-implantite (PI). Diversos biomateriais têm sido avaliados na busca de regenerar o tecido ósseo perdido pela PI. O gel de metilcelulose (GEL) carrgeado com sinvastatina (SIM) tem mostrado resultados significantes, obtendo ganho de inserção clínica e ganho ósseo radiográfico em defeitos ósseos causados pela periodontite. Atualmente não existe evidência científica sobre o uso de sinvastatina em DPI. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a eficacia do preenchimento ósseo radiográfico do GEL carregado com SIM (GEL/SIM) em DPI. Foram selecionados 24 participantes portadores de DPI associados a PI, com defeito ósseo vertical ≥3mm de profundidade ao exame radiográfico, associado a uma profundidade de sondagem (PS) ≥6mm. Foram tratados segundo os grupos: 1) TRATAMENTO (n=12), pacientes com PI que receberam instrumentação com acesso cirúrgico, implantoplastia, colocação de enxerto de tecido conjuntivo e aplicação do GEL/SIM no defeito; 2 ) PLACEBO (n=12), pacientes com PI que receberam instrumentação com acesso cirúrgico, implantoplastia, colocação de enxerto de tecido conjuntivo e aplicação do GEL. Avaliações clínicas e radiográficas foram realizadas no inicio do tratamento e 6 meses após tratamento. Para comparação dos parâmetros avaliados Foram utilizados o teste t de student (α=5%). Após 6 meses de tratamento uma diferença estatisticamente significativa se observou em ambos grupos em comparação com o inicio do tratamento nos parâmetros clínicos como Profundidade de Sondagem (PS), com uma redução de ate 2,56mm em média para o grupo placebo e 2,84mm em média para o grupo tratamento; Nível de Inserção Clínica (NIC), com um ganho de 2,51mm para o grupo placebo e 2,78mm para o grupo tratamento; Índice de placa (IP) e sangramento à sondagem (SS) com uma redução significativa em ambos grupos. Após de 6 de meses de acompanhamento, o Índice Gengival (IG) apresentou diferenças significativas no grupo tratamento. Variáveis como Tecido Queratinizado (TQ); espessura de tecido da mucosa periimplantar (TT) e reccessão da margem da mucosa periimplantar (REC) não apresentaram diferenças significativas. Nenhuma diferença significativa foi observada nos parâmetros clínicos entre os grupos quando estes foram comparados. O preenchimento ósseo radiogafico após 6 meses de acompanhamento teve um incremento médio de 1,01mm, para o grupo placebo e 2,26mm para o grupo tratamento. Quando os grupos foram comparados uma diferença significativa foi observada a favor do grupo tratamento. Após 6 meses de acompanhamento ambos grupos relataram por meio do questionário OHIP-14 uma melhor qualidade de vida. Não foi encontrado diferenças significativas entre os grupos dentro dos parâmetros que avaliaram a qualidade de vida do paciente ou a percepção do paciente em relação ao procedimento cirúrgico. O GEL/SIM parece ser eficaz para o tratamento de DPI associados a PI. Porém, estudos com uma quantidade maiores de amostras e tempo de acompanhamento são necessários para obter uma melhor compreensão do assunto.
Avaliação do efeito da terapia fotodinâmica antimicrobiana associada a DNase no tratamento de candidose oral em camundongos infectados com Candida albicans
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-15) Jordão, Cláudia Carolina; Pavarina, Ana Cláudia [UNESP]; Faculdade de Odontologia de Araraquara-FOAR
O objetivo do estudo foi avaliar a eficácia da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) associada a enzima DNase I no tratamento de candidose oral induzida em camundongos infectados com cepas de Candida albicans susceptível (CaS-ATCC 90028) e resistente ao fluconazol (CaR-ATCC 96901). Camundongos fêmeas (Swiss) com aproximadamente 5 semanas de vida foram imunossuprimidos e inoculados com CaS ou CaR (107 UFC/mL). Após o estabelecimento da infecção, os animais foram submetidos aos tratamentos durante 5 dias consecutivos. Os animais pertencentes ao grupo aPDT (P+L+) foram tratados utilizando Photodithazine (PDZ) 200 mg/L associado à luz LED (50 J/cm2); no grupo P+L- foi utilizado apenas o PDZ; no grupo P-L+ os animais foram tratados apenas com LED. Nos animais do grupo DNase a enzima foi aplicada por 5 minutos. Também foi avaliada a combinação das terapias (DNAse+P+L+). Um grupo foi apenas inoculado com C. albicans (grupo P-L-) e outro foi constituído de animais saudáveis, imunossuprimidos ou não (grupo CNI+/CNI). Imediatamente e 7 dias após o término dos tratamentos, foram realizadas as recuperações de C. albicans por meio da fricção de swabs estéreis. Então, diluições seriadas foram realizadas e plaqueadas em placas de Petri com Ágar Sabouraud Dextrose (SDA). Após 48 horas de incubação a 37 oC, as colônias foram quantificadas e o número de CFU/mL foi determinado. Além disso, as colônias foram armazenadas para avaliação da expressão gênica (EFG1, HWP1, BGL2, PHR1 e SOD1). Também foram realizadas análises macroscópicas das lesões durante os tratamentos. Os camundongos foram eutanasiados 24 horas e 7 dias após os tratamentos. As línguas removidas foram utilizadas para análise histológica das lesões, marcações da estrutura 3D do tecido da língua e da matriz extracelular (MEC) de C. albicans e para avaliação das citocinas inflamatórias por meio de citometria de fluxo (IL-6, MCP-1, IFN-γ, TNF-α, proteína IL-12p-70 e IL-10). Os resultados demonstraram que a associação da DNAse com a aPDT resultou em uma redução de 4,96 (imediatamente) e 1,87 log10 (7 dias) para os animais inoculados com CaS e de 2,89 (imediatamente) e 1,97 log10 (7 dias), para os animais inoculados com CaR. A análise macroscópica revelou redução das lesões orais do grupo DNase+P+L+, equivalentes a 98,92 e 96,07% para os animais inoculados com CaS e CaR nos grupos coletados 24h após os tratamentos, respectivamente. Após 7 dias do término dos tratamentos, foram observadas reduções de 83,31 e 75,24% nos aspectos das lesões no grupo DNase+P+L+ dos animais inoculados com CaS e CaR, respectivamente. A análise histológica do grupo DNase+P+L+ demonstrou expressiva redução da reação inflamatória no tecido que apresentou características histológicas de normalidade. Microscopia de fluorescência demonstrou que os polissacarídeos produzidos por C. albicans e as células fúngicas não foram marcados no grupo de animais tratados com DNase seguida de aPDT 24 horas após o término dos tratamentos, aspecto semelhante ao observado para o grupo de animais saudáveis. Após 7 dias do término dos tratamentos, o grupo de animais tratados com a DNase associada à aPDT manteve uma marcação reduzida quando comparados ao controle (animais infectados e não tratados). Os resultados demonstraram redução na expressão de genes relacionados com adesão ao substrato do hospedeiro (EFG1 e HWP1), matriz extracelular (BGL2 e PHR1) e estresse oxidativo (SOD1) de CaS e CaR após os tratamentos com DNase+P+L+. A resposta imune do hospedeiro demonstrou que os grupos de animais inoculados com CaS ou CaR e tratados com P+L+ e DNase+P+L+ apresentaram produção aumentada de IL-6, MCP-1 e TNF-α. Assim, a DNase associada com a aPDT é uma alternativa promissora de tratamento para inativação de fungos, incluindo microrganismos resistentes, e motiva futuras aplicações clínicas do tratamento nas áreas odontológicas e médicas.
Influência da inibição de JAK na progressão da periodontite
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-15) Godoi, Mariely Araújo de; Stabili, Morgana Rodrigues Guimarães [UNESP]
A periodontite, semelhante a outras doenças crônicas, envolve a ativação de citocinas que são moduladas por vias de sinalização intracelular, incluindo a via Janus kinase/Signal Transducers and Activators of Transcription (JAK/STAT). Considerando o papel desta via de sinalização no processo inflamatório, diversos inibidores farmacológicos de JAK foram aprovados pela Food and Drug Administration (FDA) para o tratamento de doenças inflamatórias, e têm sido associados a redução dos sinais e sintomas destas doenças, além de apresentarem um perfil farmacológico seguro e eficaz. Na periodontite, poucos estudos avaliaram o papel de JAK no processo de patogênese da doença, e os resultados são divergentes. O presente estudo tem como objetivo avaliar o efeito da administração sistêmica de inibidores de JAK1-3 e JAK3, sobre a progressão da periodontite em ratos, e investigar seu papel modulatório em células do microambiente periodontal. No estudo in vivo, os animais foram submetidos a colocação de ligaduras nos primeiros molares inferiores para indução da periodontite, e receberam, concomitantemente à progressão da doença, água destilada ou inibidores de JAK1-3 ou JAK3, via oral (gavagem intragástrica) por 7 dias. Animais do grupo controle negativo, sem ligaduras, receberam administração de água pelo mesmo período. Ao fim do período experimental os animais foram eutanasiados, e as mandíbulas contendo tecido gengival ao redor do primeiro molar, removidas para avaliação dos seguintes desfechos: reabsorção óssea alveolar; quantificação do número de osteoclastos; expressão gênica de Il-6, Tnf-alfa e Rankl, e proteica de TNF-alfa; expressão e localização de células inflamatórias (CD45 e CD3); e quantificação de elementos celulares (infiltrado celular, vasos sanguíneos e matriz extracelular). Os resultados demonstraram que ambos os inibidores preveniram a perda óssea induzida pela periodontite (p<0.05), e reduziram a quantidade de osteoclastos em quase 30%. Redução significativa do infiltrado celular, bem como um aumento da matriz colágena e de vasos sanguíneos foram encontrados nos animais tratados com os inibidores (p<0.05). Corroborando os dados da análise estereométrica, os inibidores de JAK também reduziram a quantidade de células CD45+ (marcador de leucócitos) no tecido gengival. Redução significativa na expressão dos marcadores inflamatórios (em nível gênico e proteico) também foi encontrada no tecido gengival dos animais tratados com os inibidores farmacológicos. Adicionalmente, experimentos in vitro investigaram o efeito dos inibidores de JAK sobre a diferenciação de osteoclastos (RAW 264.7) induzidos por RANKL, produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), bem como sobre a formação de nódulos de mineralização e proliferação de células pré-osteoblásticas (MC3T3-E1). Através da microscopia de fluorescência, observamos que ambos os inibidores demonstraram redução significativa na formação de osteoclastos. Os dados também indicaram que a inibição de JAK inibiu a produção de ROS após estímulo com LPS. Em relação à osteogênese, foi observado que a inibição de JAK estimulou a proliferação celular e a formação de nódulos de mineralização. Os resultados demonstram que a inibição das isoformas de JAK apresentaram um impacto significativo na redução das alterações inflamatórias em animais com periodontite, indicando o protagonismo da via na patogênese e progressão da doença, além do papel relevante sobre células do metabolismo ósseo.
Reação tecidual e potencial bioativo de cimentos biocerâmicos reparadores e endodônticos em associação ou não a substâncias antimicrobianas
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 0024-03-27) Silva, Evelin Carine Alves; Tanomaru, Juliane Maria Guerreiro [UNESP]; Cerri, Paulo Sérgio [UNESP]
Materiais biocerâmicos são desenvolvidos em função do potencial biológico e bioativo. O controle da infecção endodôntica nos canais radiculares é essencial para o êxito do tratamento endodôntico. A associação de cimentos endodônticos com agentes antimicrobianos e óleos essenciais pode potencializar a ação antimicrobiana. Artigo 1: Análise da reação inflamatória e potencial bioativo do novo cimento endodôntico biocerâmico NeoSealer Flo em comparação ao Bio-C Sealer e AH Plus. Artigo 2: Avaliação da reação tecidual de biocerâmico reparador recentemente desenvolvido (Neoputty) em comparação ao Bio-C Repair e MTA Repair HP. Artigo 3: Análise da biocompatibilidade e potencial bioativo dos biocerâmicos endodônticos (NeoSealer Flo) e BioRoot ™ RCS com ou sem adição de cetramida a 1%. Artigo 4: Avaliação da reação tecidual e potencial bioativo provocada pelos materiais: MTA HP Repair e Bio-C Repair com ou sem adição do Thime Essential Oil (TEO). A reação tecidual foi avaliada após implantação de tubos de polietilenos preenchidos com os respectivos materiais no subcutâneo de ratos. A análise incluiu contagem de células inflamatória e de fibroblastos, estimativa do conteúdo de colágeno e imunoexpressão de osteocalcina após 7, 15, 30 e 60 dias. O método de von Kossa e luz polarizada foram realizados. Os dados foram avaliados por ANOVA two-way seguido do teste de Tukey, com nível de significância de 5%. Os dados da OCN foram submetidos ao teste de Kruskal-Wallis e ao teste post hoc de Dunn e Friedman e Nemenyi. Artigo 1: NeoFlo mostrou menor biocompatibilidade do que Bio-C Sealer e maior recrutamento de células inflamatórias quando comparado ao AH Plus. Além disso, tanto o NeoFlo quanto o BC foram capazes de estimular a imunoexpressão de OCN nas cápsulas, bem como permitir a deposição de calcita amorfa, sugerindo um potencial bioativo. Artigo 2: NeoPutty é biocompatível, embora o potencial irritante deste material biocerâmico no tecido conjuntivo seja maior do que o do Bio C Repair e do MTA HP. Além disso, a imunoexpressão da osteocalcina pelas células do tecido conjuntivo, assim como as estruturas positivas para von Kossa e os depósitos birefringentes, são parâmetros sugestivos de que o NeoPutty apresenta potencial bioativo. Artigo 3: A adição de cetrimida aos cimentos biocerâmicos NeoSealer e BioRoot RCS induziu um maior recrutamento de células inflamatórias. No entanto, a redução na reação inflamatória foi acompanhada por um aumento gradual nos fibroblastos e no teor de colágeno ao longo do tempo, indicando, portanto, que esses materiais são biocompatíveis. Estruturas birrefringentes e imunoexpressão de OCN sugerem o potencial bioativo do NeoFlo puro e do BROOT, bem como desses cimentos com adição de 1% de cetrimida. Artigo 4: A adição de Thime Essential Oil ao cimento Bio-C reduziu o recrutamento de células inflamatórias, indicando que este óleo atenuou a reação inflamatória causada pelo Bio-C Repair. A significativa redução na reação inflamatória, associada ao aumento evidente no número de fibroblastos e no teor de colágeno nas cápsulas ao redor dos materiais apoia a ideia de que esses materiais são biocompatíveis. Além da biocompatibilidade, os resultados também sugeriram que os materiais biocerâmicos experimentais apresentam potencial bioativo. Em conclusão, NeoFlo e NeoPutty inicialmente mostraram potencial inflamatório superior, porém essa resposta diminuiu com o tempo, revelando também potencial bioativo. A inclusão de cetramida levou a um maior recrutamento de células inflamatórias, enquanto a adição de Thime Essential Oil em cimentos reparadores teve o efeito oposto, reduzindo a resposta inflamatória.
Potencial antimicrobiano do Pelargonium sidoides, associado ou não a luz, contra Streptococcus mutans e Candida albicans
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-02-06) Reina, Bárbara Donadon; Dovigo, Lívia Nordi [UNESP]
Estima-se que mais de 60% das infecções humanas são originadas pela presença de biofilmes. Dessa forma, o desenvolvimento de tratamentos antimicrobianos eficazes para doenças causadas por Candida spp e Streptococcus mutans, é muito relevante, por serem patógenos que se destacam em doenças bucais. O EPs® 7630 é um extrato comercial obtido a partir das raízes de Pelargonium sidoides (PS), o qual vem mostrando potencial de utilização no combate a bactérias, fungos e vírus de interesse humano. Evidências preliminares obtidas em nosso grupo de pesquisa indicam que o P. sidoides também possui grande potencial como fotossensibilizador na inativação fotodinâmica (IF) de Candida albicans. Considerando-se a escassez de estudos comparando o potencial de aplicação do extrato de PS na inibição da formação e inativação de biofilmes, este projeto realizou ampla avaliação do potencial antimicrobiano e fotodinâmico do PS, testando essas abordagens usando culturas planctônicas e sua ação na adesão, formação e erradicação de biofilmes de espécies únicas de S. mutans e C. albicans. Ainda, avaliou-se os parâmetros de citotoxicidade do uso do PS na inativação fotodinâmica e a capacidade desta terapia de influenciar na migração celular e na adesão de C. albicans a células epiteliais. Após análise descritiva dos dados e checagem de pressupostos, foram utilizados modelos de análise de variância (dependendo do delineamento de cada etapa), seguido de pós-teste quando necessário para comparações múltiplas. O nível de significância utilizado foi de 0,05. Foi possível observar que o extrato de PS utilizado possui capacidade de diminuir o crescimento das cepas de C. albicans e S. mutans avaliadas, em comportamento concentração-dependente. Porém, quando combinado com a exposição à luz, foi observada uma completa ausência de colônias, para ambos os microrganismos, em concentrações a partir de 103 mg/mL para S. mutans e 206 mg/mL para C. albicans. Além disso, o extrato comercial de PS, associado ou não à luz, promove a perda completa de viabilidade pelas células epiteliais ao longo das 24 primeiras horas e demonstrou alterar o metabolismo celular de forma concentração dependente. Ainda, esse estudo demonstrou, de forma inédita, que a associação do PS em concentrações subletais com a luz é capaz de reduzir a capacidade adesiva das células fúngicas ao epitélio, sendo esse um efeito importante na prevenção de infecções superficiais causadas por C. albicans. Assim, os resultados obtidos indicam potencial do extrato de PS como agente promissor no combate a infecções microbianas da cavidade bucal. Este estudo contribui significativamente para o campo ao lançar luz sobre as interações entre o extrato de PS e luz, com efeitos no crescimento microbiano, viabilidade celular e propriedades de adesão.
Interrelação de cimentos a base de silicato de cálcio com os procedimentos em dentística restauradora
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-02-29) Jorge Júnior, Adirson; Kuga, Milton Carlos [UNESP]; Faculdade de Odontologia de Araraquara
Objetivo: Avaliar os efeitos da aplicação do adesivo universal com escova manual (MB) ou escova rotatória (RB) em dentina impregnada com o cimento biocerâmico, e avaliar o pH e a liberação de íons de cálcio de cimentos a base de silicato de cálcio. Materiais e Métodos: 88 coroas de incisivos bovinos foram selecionadas e metade foi impregnada com cimento biocerâmico, enquanto a outra, não. Foram divididas em quatro grupos (n=22): WB-MB, WB-RB, NB-MB, NB-RB. Em seguida, os espécimes foram restaurados. Quarenta espécimes foram submetidos à avaliação da espessura adesivo em microscópio confocal, 24 espécimes destinados a avaliação em 24h e outros 24, a avaliação de 1 ano de resistência de união avaliada por microtração, enquanto o padrão de falha em estereomicroscópio. Os dados foram analisados pelos testes de ANOVA one-way e Tukey (α=0,05). 50 dentes acrílicos com retrocavidades preenchidas com os materiais avaliados (n=10) foram imersos em água ultrapura para medir o pH e liberação de íons cálcio, após 7 e 30 dias. No teste de solubilidade, os espécimes foram escaneados por Micro-CT. O MTA cinza e branco e o MTA Fillapex foram manipulados e inseridos em tubos de polietileno e imersos em água destilada. Os resultados obtidos foram submetidos à análise de variância, com nível de significância de 5%. Resultados: NB-MB apresentou menores valores de resistência de união em 24h e 1 ano. Após 1 ano, todos os grupos apresentaram redução da resistência de união. BD e BA apresentaram os maiores valores alcalinos na avaliação após 7 dias. Já aos 30 dias, MTAF 10-CH apresentou valores alcalinos. MTA apresentou a maior liberação de íons de cálcio nos dois períodos avaliados. BA e MTA apresentaram valores de solubilidade mais baixos. em 24 h os materiais apresentaram comportamentos semelhantes entre si. Conclusão: A presença de resíduos de biocerâmicos pode aumentar a resistência de união quando utiliza adesivos universais na estratégia autocondicionante. O MTA Fillapex com 10% e 20% de hidróxido de cálcio apresentou alta solubilidade, baixa resistência de união e menor liberação do íon cálcio.
Avaliação de diferentes protocolos e materiais para anatomização de pinos de fibra de vidro na interface adesiva
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-02-02) Lima, Reinaldo Oliveira; Campos, Edson Alves de [UNESP]; Faculdade de Odontologia de Araraquara - FOAr
Objetivo: Avaliar o efeito da anatomização de pinos de fibra sobre a resistência de união e penetrabilidade dentinária utilizando diferentes protocolos de cimentação resinosos, resinas compostas e aparelhos de fotopolimerização. Materiais e Métodos: 60 raízes de incisivos bovinos foram preparadas para cimentação do pino. As raízes foram divididas em 6 grupos, de acordo com os protocolos de cimentação (AS-RA, R2, SB-RU) e o tipo de pino de fibra (não customizados, NC ou customizados, C). A customização dos pinos de fibra foi realizada com resina composta (Z350 XT). Após 6 meses, espécimes dos terços cervical, médio e apical do espaço para pino foram submetidos a avaliação da resistência de união, em máquina de ensaio eletromecânica. O padrão de falha adesiva foi classificado em adesiva 1 e 2, coesiva ou mista. Cento e sessenta raízes foram preparadas e divididas em 4 grupos (n=20): ZV (resina Z350 e LED Valo), ZR (resina Z350 e LED Radii-Cal), OV (resina Opallis e LED Valo), OR (resina Opallis e LED Radii-Cal). Após o preparo do espaço para pino, o pino de fibra foi anatomizado, cimentado com cimento autoadesivo ou convencional, e fotopolimerizado com equipamento de LED V ou R. Os espécimes foram submetidos ao teste de push out para avaliar a resistência de união e classificação dos padrões de falha. Os dados obtidos foram analisados pelos testes de ANOVA e Tukey (α=0,05). Resultados: Os protocolos de cimentação com pinos de fibra customizados demonstraram os maiores valores de resistência de união (p<0,05), independentemente do terço avaliado. ZV e ZR apresentaram valores de resistência adesiva superiores aos demais grupos aos 6 meses de avaliação (p<0,05). Conclusão: A customização dos pinos de fibra favorece a resistência de união dos cimentos resinosos, independentemente do protocolo de cimentação utilizado e do aparelho de fotopolimerização.

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