Análise do perfil glicoproteômico do veneno da vespa social Polybia paulista
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Data
2018-11-29
Autores
Souza, Caroline Lacerra de [UNESP]
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Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Resumo
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Polybia paulista é uma vespa social muito agressiva, e clinicamente relevante por causar muitos acidentes por ferroadas todos os anos no sul e sudeste brasileiro. O seu veneno é composto por uma mistura complexa de moléculas bioativas - compostos de baixas massas moleculares, peptídeos e proteínas alergênicas como fosfolipases A1 e A2, hialuronidase, fosfatase ácida e antígeno 5. Em nosso laboratório, esse veneno tem sido investigado por abordagens proteômicas e peptidômicas, além de análises de estudos de alérgenos, o que significativamente tem contribuído para a identificação dos compostos do veneno e uma melhor compreensão do processo de envenenamento. No entanto, muitas proteínas não foram identificadas ainda. Os resultados obtidos com a análise proteômica bottom-up, realizada anteriormente em nosso laboratório, demonstraram que somente as proteínas mais abundantes foram identificadas, e algumas dessas proteínas motraram-se imunoreativas e glicosiladas. Nesse estudo foi utilizado o kit Pro-Q Emerald 300 glycoprotein gel (GE Healthcare) para detecção de carboidratos totais presentes nos spots proteicos diretamente no gel, no entanto as proteínas menos abundantes, e com menores valores de massas deixaram de ser detectadas. Possivelmente isso se deve não só a complexidade da composição bioquímica do veneno, mas também devido às limitações técnicas da abordagem utilizada, durante o período em que o estudo foi realizado. Sendo assim, decidimos por analisar o proteoma do veneno da P. paulista através da abordagem proteômica do tipo shotgun. Com essa estratégia foi possível aumentarmos o número de identificações de proteínas presentes no veneno, além da possibilidade de utilizarmos métodos de enriquecimento das proteínas N-glicosiladas, utilizando o kit Glycoprotein Isolation, ConA (Thermo Scientific™), permitindo a análise e identificação das moléculas que apresentam esse tipo de modificação...
Polybia paulista é uma vespa social muito agressiva, e clinicamente relevante por causar muitos acidentes por ferroadas todos os anos no sul e sudeste brasileiro. O seu veneno é composto por uma mistura complexa de moléculas bioativas - compostos de baixas massas moleculares, peptídeos e proteínas alergênicas como fosfolipases A1 e A2, hialuronidase, fosfatase ácida e antígeno 5. Em nosso laboratório, esse veneno tem sido investigado por abordagens proteômicas e peptidômicas, além de análises de estudos de alérgenos, o que significativamente tem contribuído para a identificação dos compostos do veneno e uma melhor compreensão do processo de envenenamento. No entanto, muitas proteínas não foram identificadas ainda. Os resultados obtidos com a análise proteômica bottom-up, realizada anteriormente em nosso laboratório, demonstraram que somente as proteínas mais abundantes foram identificadas, e algumas dessas proteínas motraram-se imunoreativas e glicosiladas. Nesse estudo foi utilizado o kit Pro-Q Emerald 300 glycoprotein gel (GE Healthcare) para detecção de carboidratos totais presentes nos spots proteicos diretamente no gel, no entanto as proteínas menos abundantes, e com menores valores de massas deixaram de ser detectadas. Possivelmente isso se deve não só a complexidade da composição bioquímica do veneno, mas também devido às limitações técnicas da abordagem utilizada, durante o período em que o estudo foi realizado. Sendo assim, decidimos por analisar o proteoma do veneno da P. paulista através da abordagem proteômica do tipo shotgun. Com essa estratégia foi possível aumentarmos o número de identificações de proteínas presentes no veneno, além da possibilidade de utilizarmos métodos de enriquecimento das proteínas N-glicosiladas, utilizando o kit Glycoprotein Isolation, ConA (Thermo Scientific™), permitindo a análise e identificação das moléculas que apresentam esse tipo de modificação...
Descrição
Palavras-chave
Veneno, Vespa, Proteômica, Espectrometria de massa, Proteínas, Himenoptero
Como citar
SOUZA, Caroline Lacerra de. Análise do perfil glicoproteômico do veneno da vespa social Polybia paulista. 2018. 103 f. Trabalho de conclusão de curso (bacharelado - Ciências Biológicas) - Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho, Instituto de Biociências (Campus de Rio Claro), 2018.