Dissertações - Doenças Tropicais - FMB

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    Avaliação pré-clínica do antiveneno botrópico brasileiro: novos insights sobre a eficácia terapêutica para o envenenamento por bothrops sp.
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-02-28) Brito, Ingrid Mayara da Cunha; Santos, Lucilene Delazari dos; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Na última década o número de acidentes por serpentes no Brasil variou de 26.000 a 30.000 por ano (Sistema de Informação de Agravos e Notificações – SINAN, 2018). Segundo o (SINAN) cerca de 89% a 98% dos casos de acidentes por serpentes no país é representado pelo o gênero Bothrops. A soroterapia ainda é o método mais eficiente utilizado para o tratamento de pacientes picados por serpentes. Entretanto, esse método de tratamento exige especificidade, onde ao qual, cada gênero de serpentes tem um antiveneno específico. Além disso, o tratamento pode acarretar algumas reações que podem agravar o quadro clínico do paciente, como choque anafilático, doenças do soro ou até mesmo a não neutralização do veneno. Isso pode estar relacionado a alguns fatores como: quantidade de antiveneno administrado, a velocidade de infusão, sensibilidade do paciente ou até mesmo a exatidão do antiveneno utilizado. Pois sabe-se que nem todos os venenos de espécimes estão inseridos na composição do pool desses antivenenos, o que pode estar relacionado com a possível falha terapêutica em alguns casos de envenenamento. Tendo em vista os adventos e as possíveis complicações causadas pelos os antivenenos utilizados no Brasil, faz-se necessário ensaios experimentais para o entendimento da falha terapêutica e o possível aprimoramento destes antivenenos utilizados. Assim, o presente estudo teve por objetivo investigar a patogênese local antes e após a utilização da soroterapia modulada pelo veneno de B. erythromelas e B. jararaca, a partir de análises histológicas, hematológicas, bioquímicas. Para isso, utilizou-se o modelo experimental em murinos (camundongos swiss) fêmeas. Onde realizou-se a injeção de 25ug de veneno intradermicamente no dorso de camundongos, para tratamento após 5 minutos de realizar a lesão hemorrágica, utilizou-se 40 uL de antiveneno Botrópico intravenenoso caudal. Após 2 horas foi verificada a resposta hemorrágica antes e após o tratamento. Para obtenção do material biológico a ser analisado, foi realizada pulsão cardíaca para obtenção do sangue, plasma e soro destes animais, aos quais, foram submentidos a análises hematológicas e bioquímicas (colesterol, triglicerídeos, LDL, HDL E VLDL), os tecidos lesionados foram dissecados e submetidos à análise histopatológica. Ambos os venenos induziram um quadro hemorrágico, que foi percebida na hipoderme, causando alterações na pele dos camundongos, o efeito edematogênico comprometeu a junção dermo-epidérmica e degradação de colágeno no tecido lesionado. Além de causar alterações plaquetárias, bioquímicas como os mediadores lipídicos que podem estimularem a resposta imune. O antiveneno botrópico inibiu parcialmente essas alterações, as quais se demostraram irreversíveis após o tratamento.
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    Custo-efetividade da terapia preemptiva versus terapia empírica para manejo de infecções fúngicas invasivas em pacientes com neutropenia febril no Sistema Único de Saúde
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-02-27) Cardoso, Luiza Ikeda Seixas; Cavalcante, Ricardo de Souza [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Introdução. As infecções fúngicas invasivas (IFI) são uma importante complicação em pacientes com neutropenia febril (NF). Com o uso de antifúngicos profiláticos, a aspergilose invasiva tornou-se uma das principais IFI neste cenário clínico. Há duas formas de manejo destes pacientes. Um deles é a terapia empírica, em que se introduz antifúngicos nos pacientes com NF com duração maior ou igual a quatro dias em uso de antibióticos de amplo espectro. Outra estratégia é a preemptiva, na qual se utiliza de biomarcadores para um diagnóstico precoce e dirigido e uso mais restrito de antifúngicos. Objetivo. Este estudo teve como objetivo avaliar a custo-efetividade da estratégia preemptiva comparada a empírica no manejo de IFI em pacientes com NF, na perspectiva do Sistema Único de Saúde (SUS) do Brasil. Métodos. Foi utilizado um modelo analítico de árvore de decisão, com um horizonte temporal de um ano, que teve como população alvo os pacientes com idade acima de 18 anos, com neoplasias hematológicas, transplantados ou não de células hematopóiéticas, que desenvolvem NF. Para a estratégia preemptiva, foi considerado o monitoramento combinado com dosagem sérica de galactomanana (GMN) e pesquisa de Aspergillus spp por reação em cadeia da polimerase (PCR) realizada no sangue. Os dados de desfechos e parâmetros clínicos para cada uma das estratégias avaliadas foram obtidos de estudos prévios publicados para a construção do modelo analítico. A medida de efetividade foi morte evitada. Os custos foram coletados em reais, obtidos da tabela de custos do SUS (SIGTAP) e da média ponderada das compras realizadas nos últimos 18 meses pelas instituições públicas do Brasil e não foram aplicados ajustes pela inflação. Uma análise de sensibilidade determinística de uma via e uma probabilística, pela simulação de Monte Carlo de segunda ordem, foi realizada para avaliar as variações do modelo. Resultados. O modelo analítico estimou uma sobrevida de 91,2% nos pacientes manejados de forma preemptiva comparados a 89,5% na empírica. A estratégia preemptiva (R$ 14.908,80) gerou um custo final por paciente menor que a empírica (R$ 15.417,10). A razão de custo-efetividade incremental (RCEI) foi – 28.993,56 R$/morte evitada. A análise de sensibilidade determinística mostrou que todas as variações encontravam-se abaixo da disposição a pagar. Na análise probabilística, 91,23% das 10.000 simulações ficaram abaixo da disposição a pagar. Conclusão. Este estudo demonstra que a estratégia preemptiva foi mais custo-efetiva que a empírica, o que permite sua incoporação no sistema de saúde pública do Brasil.
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    Efetividade da simplificação da terapia antirretroviral para duas medicações comparada à manutenção de três fármacos no tratamento da infecção pelo HIV
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-02-27) Rodrigues, Juliana Olsen; Souza, Lenice do Rosário de [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Atualmente, pessoas vivendo com HIV (PVHIV) iniciam a terapia antirretroviral (TARV) precocemente e devem manter o tratamento por toda a vida. Os inibidores de transcriptase reversa nucleosídeos/nucleotídeos (ITRNs), particularmente o tenofovir (TDF), podem levar a efeitos colaterais em longo prazo, como a diminuição da densidade mineral óssea (DMO) e da taxa de filtração glomerular (TFG). Uma estratégia para mitigar esses efeitos é a simplificação da TARV, que consiste na retirada de um dos ITRNs do esquema terapêutico. Essa estratégia mostrou-se segura e eficaz em ensaios clínicos randomizados (ECRs) e estudos de vida real. No presente estudo, foram comparadas duas coortes retrospectivas, de 152 pacientes que tiveram a TARV simplificada devido principalmente à osteopenia, osteoporose ou diminuição da TFG e 306 pacientes que não tiveram seu esquema antirretroviral simplificado no período de abril de 2013 a setembro de 2022. O objetivo foi demonstrar a não inferioridade da TARV simplificada com lamivudina (3TC) e dolutegravir (DTG) ou 3TC e darunavir com booster de ritonavir (DRV/r) na manutenção da carga viral (CV) indetectável em comparação com a terapia tripla e observar se a simplificação do esquema melhora a TFG e a DMO. Verificou-se que a TARV simplificada não foi inferior à terapia tripla em relação à manutenção da CV do HIV indetectável em 95,4% e 97,4% dos pacientes respectivamente. Sete pacientes simplificados e oito não simplificados tiveram a carga viral acima do limite de detecção ao final do seguimento, devido a abandono ou má adesão. Não houve falha virológica em nenhum dos grupos. Foi observada também a diminuição significativa da função renal nos pacientes que mantiveram o TDF no esquema terapêutico, com TFG estimada variando de 101,2 a 94,8 mL/min/1,73m2, enquanto naqueles que tiveram o esquema simplificado, houve variação positiva da TFG (TFG final maior que a inicial). Houve melhora da DMO em um pequeno número de pacientes simplificados (23,3%) e a manutenção da DMO na maioria deles (76,7%), durante o período analisado, em média, de dois anos e meio após a simplificação. Estes achados suportam que a terapia simplificada é tão eficaz quanto a terapia tripla, e apresenta como benefício adicional, a redução dos eventos adversos relacionados ao tenofovir.
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    Análise espacial e pesquisa molecular do complexo Mycobacterium tuberculosis em amostras de leite bovino de tanques de resfriamento de pequenas propriedades de agricultura familiar
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-02-24) Alexandrino, Marcela; Lucheis, Simone Baldini; Medeiros, Maria Izabel Merino de; Santos, Rodrigo Mattos dos [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A tuberculose (TB) é uma doença infectocontagiosa que corresponde um importante problema de saúde publica global, causada por um agente do complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT). A TB zoonótica ou bovina tem Mycobacterium bovis como agente e tem dentre seus hospedeiros animais silvestres, humanos e animais de produção, como bovinos. Esse patógeno infecta os seres humanos, principalmente pelo consumo de leite cru e seus derivados. Diante do exposto, o objetivo deste estudo foi pesquisar bactérias do CMT, especificamente Mycobacterium bovis e Mycobacterium tuberculosis, patógenos de maior importância em saúde pública, empregando-se as técnicas de biologia molecular, PCR convencional e PCR em tempo real, com o uso de primers específicos para o CMT e para os patógenos de interesse do estudo, em 102 amostras de leite cru bovino, coletados a partir de tanques de expansão individuais, em pequenas propriedades rurais da região Centro-Oeste Paulista. Como resultado das análises, todas as amostras de leite testadas foram negativas para o CMT, Mycobacterium tuberculosis e para Mycobacterium bovis. Não obstante, há uma grande importância na constante vigilância epidemiológica destes patógenos pelo fato do leite cru ainda ser muito consumido e ter um forte potencial infeccioso, bem como a sua utilização na fabricação de sub-produtos, como queijo e manteiga, fontes de renda para o pequeno produtor, constituindo-se em risco para a saúde pública.
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    Prevalência de comorbidades não relacionadas à aids e típicas do envelhecimento de pacientes com infecção pelo HIV/aids diagnosticados há 20 anos ou mais e em uso prolongado de antirretrovirais
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-02-23) Vicioli, Laura Beatriz de Camargo; Souza, Lenice do Rosário de [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    As pessoas que vivem com HIV diagnosticadas e tratadas em longo prazo podem apresentar uma série de complicações associadas ao seu envelhecimento precoce, incluindo alterações metabólicas, osteoarticulares, cardiovasculares ou neoplásicas. O principal objetivo do estudo foi avaliar a ocorrência de comorbidades não relacionadas à aids e típicas do envelhecimento de pessoas que vivem com HIV diagnosticadas há 20 anos ou mais e em uso prolongado de antirretrovirais. Os objetivos específicos foram comparar pessoas com diagnóstico há 20 anos ou mais e em uso prolongado de antirretrovirais e com diagnóstico mais recente e tempo de TARV mais curto, e com a mesma faixa em relação ao risco das comorbidades e estudar a prevalência de doenças cardiovasculares, metabólicas, renais, ósseas e neoplásicas. Tratou-se de estudo de coorte retrospectiva, em que foram estudadas 160 pessoas que vivem com HIV, divididas em dois grupos, G1, com 63 pessoas com diagnóstico da infecção pelo HIV há mais de 20 anos e G2, composto por 97 pessoas com diagnóstico da infecção entre dois e cinco anos, atendidos no Serviço de Ambulatórios Especializados de Infectologia Domingos Alves Meira, do complexo Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu. Com base nos resultados encontrados, foi possível observar predomínio de risco cardiovascular, dislipidemia e alterações ósseas no G1, quando comparado às variáveis grupos e tempo de tratamento (p<0,05). Nas associações entre mesma faixa etária no G1 e G2 em relação ao risco das comorbidades estudadas, houve predomínio de alterações metabólicas, nas faixas etárias 50 a 60 anos e 60 anos ou mais (p<0,003). Concluiu-se risco mais elevado de comorbidades associadas a pessoas que vivem com HIV/aids há mais de 20 anos, porém o tempo de tratamento não necessariamente influenciou no risco de desenvolvimento das mesmas. Palavras chave: HIV/Aids, células TCD4+, comorbidades, envelhecimento precoce.
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    Variação das isoformas de melitina no veneno de Apis mellifera Africanizada
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-11-25) Murback, Letícia; Pimenta, Daniel Carvalho [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A melitina, principal componente do veneno das abelhas melíferas, é responsável pela atividade hemolítica e quadro de reação alérgica. Estudos identificaram variações de nucleotídeos em melitina derivada entre A. mellifera e A. cerana, porém a única descrita bioquimicamente até o momento é a melitina-S. Nosso estudo constatou a presença de inúmeras isoformas de melitina em apitoxinas de dois apiários da cidade de Botucatu (Edgárdia e Lageado), através da análise proteômica “shotgun” da fração melitina. Para comprovar a existência destas isoformas, as seguintes análises foram utilizadas: HPLC detecção UV, com 27 isoformas identificadas, LC-MS, 56 isoformas, sequenciamento ‘de novo’, 33 sequências, e proteômica, 72 sequências de isoformas. A análise com o Peaks, apresentou os novos N-terminais e C-terminais observados nos espectros de massas do “shotgun”, apontando a correlação entre esses dois métodos. A proposta para o padrão de substituição de aminoácidos para a melitina, resultantes dos alinhamentos das 72 sequências peptídicas obtidas do Peaks, também corroboram com as variações indicadas no “shotgun”. É crucial estar ciente da existência das variações dos componentes menores, principalmente na produção de um soro antiveneno, pois em um ataque de 500-1000 picadas, cerca de 0,5 g de veneno pode ser injetado e nesta fase as isoformas começam a desempenhar funções importantes.
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    Prospecção de peptídeos antimicrobianos na peçonha do escorpião Tityus obscurus
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-12-01) Vilela, Daniela Araújo; Pimenta, Daniel Carvalho [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Os venenos escorpiônicos são misturas complexas de componentes, como, nucleotídeos, mucopolissacarídeos, oligopeptídeos, moléculas de baixa massa molecular, proteínas e peptídeos. Além disso, os peptídeos podem ser divididos em duas categorias, os peptídeos de ponte dissulfeto (DBPs) e peptídeos sem ponte dissulfeto (NDBPs). Este estudo tem como objetivo caracterizar bioquimicamente os peptídeos no veneno do escorpião preto amazônico Tityus obscurus, após fracionamento cromatográfico, a fim de avaliar a presença de atividade antimicrobiana. A amostra do veneno foi separada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência – Fase Reversa (CLAE ou em inglês “HPLC - RP”), equipado com uma coluna analítica C18 para obtenção de seis frações, que foram testadas sobre os microrganismos Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans e C. tropicalis. O percentual de inibição de crescimento microbiano efetivo das frações ocorreu em C. albicans (F5 – 18,36% e F6 – 38,95%) e S. aureus (F5 – 16,52%). No entanto, na maioria dos casos houve leve aumento da proliferação microbiana. As análises por espectrometria de massas da fração com maior índice de inibição de crescimento microbiano indicaram a presença de três moléculas: uma fosfolipase, uma metalopeptidase e uma neurotoxina. Atividades antibióticas derivadas de hidrolases já são conhecidas, inclusive para Tityus sp., restando investigar o possível papel desta neurotoxina na atividade antibiótica aqui reportada para T. obscurus. O uso de peptídeos antimicrobianos advindos de fontes alternativas, como visto em venenos escorpiônicos, geraram interesse e notoriedade devido a sua vasta atividade biológica. Este conhecimento pode auxiliar tratamentos adjuntos e/ou alternativos para as infecções resistentes aos antibióticos convencionais.
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    Uso do SARS-CoV-2 inativado para estudos pré-clínicos de inflamação pulmonar e de efeito na encefalomielite autoimune experimental
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-10-31) Souza, William Danilo Fernandes de; Sartori, Alexandrina [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A COVID-19 é uma doença infecciosa causada pelo coronavírus SARS-CoV-2 que se disseminou para a maioria dos países constituindo uma pandemia. O principal órgão-alvo dessa doença costuma ser o pulmão cujo comprometimento varia de leve a grave. Parte significativa do envolvimento pulmonar tem sido atribuída a um processo inflamatório exacerbado envolvendo tanto a imunidade inata quanto a específica. Na primeira fase desta investigação caracterizamos um modelo de inflamação pulmonar desencadeado pela inoculação intranasal do SARS-CoV-2 inativado em camundongos e avaliamos a capacidade da vitamina D de controlar ou modificar este processo. A instilação nasal de SARS-CoV2 desencadeou um processo inflamatório associado com diferentes tipos celulares e mediadores o qual foi controlado pela administração nasal de vitD. Na segunda fase desta investigação utilizamos o SARS-CoV-2 inativado como uma preparação vacinal para analisar seu efeito na evolução clínica e imunológica da encefalomielite autoimune experimental (EAE) que é o modelo mais utilizado para estudos de esclerose múltipla. Para isto, camundongos C57BL/6 foram, inicialmente, imunizados com o vírus inativado associado ao alúmen e avaliados quanto à indução da resposta imune humoral e celular específicas. Posteriormente, animais assim imunizados foram submetidos à indução da EAE por imunização com MOG na presença de Adjuvante Completo de Freund e toxina pertussis. Até o momento foram avaliados variação de peso corporal e escores clínicos. A imunização com o vírus inativado não agravou o desenvolvimento da EAE.
  • ItemDissertação de mestrado
    Caracterização da expressão gênica do sistema renina-angiotensina em pacientes com SARS-CoV-2 tratados ou não com drogas anti-hipertensivas na presença e ausência de comorbidades associadas
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-09-08) Pereira, Larissa Rodrigues Santi; Pereira, Virginia Bodelão Richini [UNESP]; Santos, Carlos Ferreira dos; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    No início de 2020 a população mundial enfrentou um momento crítico, devido à Coronavírus Disease 2019 (COVID-19), doença que tem como agente causal o Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) que proporcionou vários desafios, afetando a saúde pública e também sistemas econômicos e padrões socioculturais. A Enzima Conversora de Angiotensina (ECA 2), um importante componente do Sistema Renina-Angiotensina (SRA), está relacionada ao processo de infecção do vírus às células do hospedeiro e diferenças em seus níveis de expressão nos diferentes tecidos podem contribuir com a capacidade de infecção do SARS-CoV-2. O objetivo do presente projeto foi caracterizar a expressão gênica, por RT-PCR em tempo real, dos componentes do SRA em pacientes: G1A: Positivos que fazem uso de fármacos anti-hipertensivos atuantes no SRA (tais como antagonistas dos receptores AT1, inibidores da ECA e da Renina) (n=47); G1B: Positivos que não fazem uso (n=49); G2A: Negativos que fazem uso (n=50); G2B: Negativos que não fazem uso (n=50), no momento do diagnóstico laboratorial e relacionar às informações dos registros clínicos como idade, sexo, desenvolvimento do quadro clínico para cura ou óbito, comorbidades associadas, em amostras que foram coletadas no Hospital Estadual de Bauru (HE). Os resultados mostraram um aumento da expressão do receptor MAS e da protease TMPRSS2 em pacientes positivos para COVID-19 que não utilizavam fármacos anti-hipertensivos e para FURIN a expressão foi aumentada nos pacientes sob tratamento anti-hipertensivo, não havendo diferença entre os pacientes positivos ou negativos. Em relação aos parâmetros analisados, foi possível identificar que as comorbidades, com destaque para a hipertensão arterial sistêmica, contribuem para um maior risco no agravamento do quadro clínico da infecção por COVID-19. Porém, o uso de terapia anti-hipertensiva com inibidores da ECA (iECAs) e antagonistas dos receptores (ARBs) não influenciou na expressão gênica dos componentes do SRA e desta forma foi possível uma melhor compreensão dos eventos moleculares relacionados à infecção e desenvolvimento da COVID-19.
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    Ocorrência de vírus influenza, vírus sincicial respiratório e SARS-CoV-2 no período pandêmico da covid-19, em pessoas que vivem com HIV/aids
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-07-29) Bezerra, Neilton Paulo; Souza, Lenice do Rosário de [UNESP]; Grotto, Rejane Maria Tommasini [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Infecções respiratórias de vias aéreas inferiores têm sido classificadas como uma das principais causas de morte no mundo. Pessoas que vivem com HIV/aids (PVHA) apresentam maior risco de infecção por agentes causadores de síndromes gripais devido à sua condição de imunossupressão. Diante disso, o objetivo desta pesquisa, foi avaliar a ocorrência de infecções respiratórias causadas pelos vírus: influenza, vírus sincicial respiratório (VSR) e SARS-CoV-2 em PVHA, no período de 2020 a 2022. Além disso, avaliar a ocorrência e mortalidade de infecções causadas pelos vírus respiratórios citados acima e identificar os fatores sociodemográficos e clínicos das PVHA. A partir, de secreções de nasoorofaringe de 57 PVHA, e que apresentaram quadro gripal, foi extraído o material genético utilizando o kit BIOPUR Mini Spin Vírus DNA/RNA 2.0, seguido por transcrição reversa e Reação em Cadeia da Polimerase (RT-PCR) no aparelho Hybrispot 12 PCR Auto, utilizando o kit de detecção XGEN Multi PR24 Flow Chip. Após a amplificação, ocorreu hibridização reversa em um chip que é composto por uma membrana de nylon (tecnologia Flow Chip) que permite a detecção de até 24 patógenos, posteriormente os resultados dos ensaios foram validados. Das 57 PVHA, 32 (56,2%) eram do sexo masculino, com mediana de 42 anos [21 - 68] de idade. Em 36 (63,2%) pacientes houve detecção de algum vírus do painel de patógenos. Do total da casuística, 27 (47,5%) correspondiam aos três vírus estudados, sendo 18 (31,5%) do SARS-CoV-2, oito (14,0%) do VSR e um (2,0%) da influenza. Em 21 (36,8%) pacientes não foram identificados quaisquer dos vírus. Três pacientes evoluíram a óbito durante o estudo, apresentando quadro respiratório com piora progressiva e necessidade de suporte ventilatório. Nestes três casos, não houve detecção dos vírus aqui estudados, e ressalta-se, que não foi possível realização de necropsia destes pacientes. Nas 57 PVHA estudadas, houve maior ocorrência do SARS-CoV-2 (31,5%), seguido do VSR (14,0%) e influenza foi encontrado em apenas um paciente, sendo este o subtipo H3N2. O teste de Fisher para a associação entre ocorrência de detectados e não detectados entre SARS-CoV-2 e VSR mostrou que não houve associação entre a ocorrência desses dois vírus (p = 0,085), bem como, não houve associação entre os sintomas presentes em pacientes detectados para SARS-CoV-2 e VSR (p = 0,8851). Pelo menos uma comorbidade esteve presente no grupo com detecção de SARS-CoV-2. Por outro lado, apenas um caso (14,3%) de infecção pelo VSR apresentou obesidade. Está claro que a covid-19 associa-se a uma gama maior de comorbidades que aumentam o risco de doença mais grave ou morte. Foi possível determinar a alta ocorrência de infecções pelo SARS-CoV-2 e VSR em pessoas que vivem com HIV/aids, aqui estudadas, não havendo diferença nos sintomas referentes a cada uma das infecções. Não houve diferença entre as cargas virais e as contagens de células T CD4+ para os três vírus. Foi possível determinar a alta ocorrência de infecções pelo SARS-CoV-2 e VSR em pessoas que vivem com HIV/aids, aqui estudadas, não havendo diferença nos sintomas referentes a cada uma das infecções.
  • ItemDissertação de mestrado
    Efeito da estocagem de diferentes amostras clinicas de pacientes com paracoccidioidomicose na reprodutibilidade de testes diagnósticos
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-07-21) Tomazini, Karina Andressa; Mendes, Rinaldo Poncio [UNESP]; Sylvestre, Tatiane Fernanda; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Introdução. O teste de imunodifusão dupla em gel de ágar (IDD) é utilizado no diagnóstico sorológico, na avaliação de gravidade e no seguimento de pacientes com paracoccidioidomicose (PCM). Um banco de amostras biológicas, associado ao registro de dados clínicos, permite o desenvolvimento de pesquisas em menor tempo, principalmente de doenças com baixa incidência anual. Este estudo teve dois objetivos: 1) comparar os títulos de anticorpos séricos determinados por ocasião de sua coleta (teste) e após descongelamento (reteste), avaliando a influência da estocagem a -80oC por diferentes períodos; 2) comparar os títulos obtidos em soro e plasma e avaliar a influência da estocagem por até 6 meses em freezer a -20oC . Métodos. O estudo foi realizado em pacientes com PCM confirmada, utilizando-se a IDD realizada com antígeno filtrado de cultura do P. brasiliensis B339. No primeiro experimento, os níveis de anticorpos foram determinados em 160 amostras de soro de pacientes com a forma crônica (FC) e 20 com a forma aguda/subaguda (FA), estocadas há mais de seis meses; no reteste, o executor não foi o mesmo e o antígeno foi preparado com a mesma cepa, mas não provinha do mesmo lote utilizado no teste. No segundo experimento, foram avaliadas 81 amostras de soro e plasma com EDTA ou com heparina de 27 pacientes, para comparação das diferentes matrizes sanguíneas e avaliação do efeito da estocagem por 6 meses; neste estudo, o executor e lote do antígeno foram os mesmos. Foram consideradas discordantes as diferenças de títulos maiores que uma diluição. Utilizaram-se os testes de Kruskal-Wallis, Friedman, Marascuilo, qui-quadrado e de Goodman e o coeficiente de correlação de Spearman, admitindo-se p≤0,05 para indicar diferença significante. Resultados. No primeiro experimento, a comparação dos títulos iniciais com os obtidos após descongelamento revelou medianas com diferença de uma diluição. Na discordância de títulos observou-se: a) presente em 30% das amostras da FA e 18% da FC (p=0,13); b) ausente em soros estocados por até 3 anos e presente em frequência crescente com o tempo de estocagem – 3 a 6 anos e ≥7 anos (p=0,003). No segundo experimento, os títulos observados em soro, plasma-EDTA e plasma-heparina não diferiram entre si e apresentavam correlação positiva. Além disso, a estocagem por até 6 meses não interferiu nas titulações em nenhuma das três matrizes sanguíneas avaliadas. Conclusões. A estocagem a -80oC por até seis anos pouco influiu na dosagem de anticorpos séricos por IDD, permitindo sua utilização segura em estudos que dependam de sua avaliação. A concordância entre titulações realizadas em soro e plasma sugere que se mantenha o biorrepositório em amostras de soro, matriz que vem sendo utilizada há muitos anos. Porém, estudos sobre estocagem por pelo menos sete anos em matrizes sanguíneas de plasma são necessárias para avaliar se os títulos são mais preservados do que se observou no soro.
  • ItemDissertação de mestrado
    Avaliação de diferentes métodos utili-zados para diagnóstico de infecção por Toxoplasma gondii em gestantes.
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-07-14) Rodrigues, Nássarah Jabur Lot; Langoni, Helio; Abbade, Joelcio Francisco; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A toxoplasmose é uma zoonose de distribuição mundial que pode infectar uma grande variedade de espécies animais e humanos. É causada pelo pro-tozoário Toxoplasma gondii (T. gondii), que causa doença de curso silencio-so. Os neonatos com toxoplasmose congênita podem exibir manifestações neurológicas, lesões oftálmicas, comprometimento auditivo e até a morte após o nascimento. Desta forma, durante o período gestacional é de grande importância o acompanhamento periódico por meio de diagnósticos labora-toriais para o bem estar do feto. A toxoplasmose associada à gestação apre-senta grande importância para a saúde pública devido à sua prevalência, e gravidade dos casos congênitos. O presente estudo teve como objetivo de-tectar anticorpos das classes IgM e IgG T. gondii em gestantes atendidas no Hospital das Clínicas da FMB Unesp, câmpus de Botucatu. Foram avaliados os resultados das sorologias pela técnica de Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), Teste de Avidez, Imunoensaio de Micropartículas com Quimi-luminescência (QL) e Aglutinação Direta Modificada (MAD). Os resultados fo-ram avaliados, de acordo com as variáveis pesquisadas, como idade, cor, raça, entre outras e os resultados obtidos nos exames realizados. Resulta-dos obtidos no teste de Imunoensaio de Micropartículas com Quimiolumines-cência com os obtidos nas demais provas, estabelecendo-se como padrão ouro a QL. Os resultados encontrados mostram correlação moderada nas técnicas QL e RIFI para imunoglobulina IgG e foi razoável para a imunoglo-bulina IgM. Os títulos mais frequentes foram 16, 64, 256 e 1024. Concluiu-se pela importância do diagnóstico realizado no início da infecção para preven-ção, e cuidados indicados para a gestante e o feto. Ressalta-se, que com o diagnóstico precoce no pré-natal pode se evitar de fato a transmissão ao ne-onato além de reduzir as complicações na transmissão congênita.
  • ItemDissertação de mestrado
    Estudo genético e soroepidemiológico da infecção por SARS-COV-2 no município de Bauru-SP
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-05-31) Menezes, Daiane Cabrera; Latini, Ana Carla Pereira; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O SARS-CoV-2 (Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2) é o vírus causador da COVID-19 (Coronavirus Disease 2019). O alcance e o impacto negativo do SARS-CoV-2 em todo o mundo, colocam a pandemia causada por ele entre as mais notórias que já foram registradas na história da humanidade. Esse estudo teve por objetivo constituir um biorrepositório e um banco de dados em COVID-19 que possam ser compartilhados para o avanço no entendimento da doença e da sua epidemiologia na cidade de Bauru-SP; além de realizar estudos soroepidemiológico e genético em pacientes com COVID-19 residentes em Bauru-SP e seus contatos. Participaram do estudo 974 indivíduos, sendo 233 casos índices e 741 contatos familiares, no período de julho a novembro de 2020. Os contatos foram avaliados por meio do teste rápido COVID-19 Ag ECO Test e/ou RT-PCR logo após o diagnóstico do paciente índice. O uso do teste rápido baseado na detecção de proteínas do SARS-CoV-2 foi validado em 121 indivíduos usando RT-PCR como padrão-ouro. Além disso, 30 dias após, os casos e contatos foram avaliados quanto à presença de anticorpos dos tipos IgM e IgG contra o coronavírus. A sensibilidade, especificidade e os valores preditivos positivo e negativo do teste rápido foram de 70,2%, 95,3%, 93,0% e 78,2%, respectivamente, com uma precisão diagnóstica de 83,3%. Foram encontrados 333 casos de COVID-19 entre os contatos familiares (44,9%). Houve uma correlação positiva (1.06; IC: 1.01-1.16) entre o tempo decorrido desde o início dos sintomas até o teste de COVID-19 dos pacientes índice e o número de contatos familiares infectados por SARS-CoV-2. Nossos resultados salientam a importância da celeridade no diagnóstico da COVID-19 para contenção da transmissão e demonstram a relevância do contágio intrafamiliar.
  • ItemDissertação de mestrado
    Análise espacial e pesquisa molecular de Toxoplasma gondii em amostras de leite bovino de tanque de expansão procedentes de pequenas propriedades de agricultura familiar
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-05-27) Manzini, Suzane; Lucheis, Simone Baldini [UNESP]; Pereira, Virginia Bodelão Richini; Medeiros, Maria Izabel Merino de; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A toxoplasmose é uma zoonose causada pelo protozoário Toxoplasma gondii (T. gondii). Apresenta relevância na saúde animal e humana devido os felídeos serem os únicos hospedeiros definitivos, e os humanos e outras espécies animais serem hospedeiros intermediários. No humano, a infecção é comum e a manifestação clínica tem maior importância em pessoas imunossuprimidas e na transmissão transplacentária. O consumo do leite cru ou não pasteurizado é considerado um fator de risco e possível via de transmissão de taquizoítos, como pode ser verificado em alguns estudos no leite caprino; entretanto, no leite bovino, há poucos estudos acerca da presença de T. gondii no leite dessa espécie. Desta forma, este estudo teve como objetivo pesquisar pela técnica molecular de Reação em Cadeia da Polimerase convencional (cPCR) e Nested PCR a presença de T. gondii em amostras de leite bovino de 102 tanques de expansão, coletadas de pequenas propriedades de agricultura familiar em oito municípios da região Centro-Oeste Paulista. A cPCR foi realizada com os primers TOX4/TOX5 e a Nested PCR foram realizadas com os primers TgNP1/TgNP2 e Tg18s48F/Tg18s359R. Como resultado, foi possível detectar DNA de T. gondii em 19 amostras (18,63%). Para os primers TOX4 e TOX5, cinco amostras foram positivas (4,90%) e para os primers TgNP1/TgNP2, treze (12,74%) amostras foram positivas. Para o Filo Apicomplexa, com os primers Tg18s48F/Tg18s359R, uma (01) amostra foi positiva (0,98%), confirmando-se tratar-se de T. gondii, com 100% de similaridade. Tais resultados indicam um alerta para a importância do leite cru bovino como fonte de infecção para T. gondii, tendo em vista o hábito ainda muito comum do consumo e utilização do leite cru para a produção de queijo e manteiga em pequenas propriedades de agricultura familiar, cujo leite e derivados constitui-se como fonte de renda ao produtor.
  • ItemDissertação de mestrado
    Infecção pelo Toxoplasma gondii em pacientes vivendo com HIV/Aids: sororreatividade e perfil clínico
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-03-30) Gava, Mariana Zanchetta; Langoni, Helio [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A toxoplasmose é uma das principais infecções oportunistas que afetam as pessoas vivendo com HIV/Aids (PVHA), levando a alta taxa de morbidade e mortalidade. Diante da importância da toxoplasmose, tornou-se imprescindível o levantamento de dados epidemiológicos referentes à infecção pelo T. gondii, principalmente, em relação ao impacto para saúde pública. O presente estudo objetivou avaliar a prevalência de exposição e a presença de doença ativa por T. gondii em PVHA, atendidos no Serviço de Infectologia do Hospital das Clínicas (HC-FMBUnesp) e Serviço de Ambulatórios Especializados de Infectologia “Domingos Alves Meira” (SAEI-DAM), unidade do complexo médico-hospitalar da Faculdade de Medicina de Botucatu, no período março de 2020 a janeiro de 2022. Foi realizado um estudo de coorte prospectivo, no qual uma amostragem de conveniência foi estudada, baseando-se no fluxo histórico do Serviço de Infectologia do Hospital das Clínicas, onde os critérios históricos de inclusão foram categorizados por dois grupos, sendo eles: Grupo 01 sintomático para neurotoxoplasmose (NTX) e Grupo 02 Controle e sem sintomatologia para NTX. Foram coletadas amostras de soro, que posteriormente foram encaminhas ao Laboratório de Diagnóstico de Zoonoses (FMVZ-UNESP), para realização do exame de Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). A Quimioluminescência foi realizada no Laboratório de Sorologia e Endocrinologia do Hospital das Clínicas (HC-FMB-Unesp). A Reação em Cadeia da Polimerase Convencional foi realizada no Laboratório de Biologia Molecular Aplicada a Zoonoses (FMVZ-UNESP). Dos 10 pacientes, três (30%) não foram sororreagentes para pesquisa de anticorpos anti-T. gondii, tanto na RIFI quanto na quimiluminescência. Adicionalmente, 7 (70%) pacientes dos dois grupos (1 e 2), apresentaram anticorpos IgG e IgM anti-T. gondii na primeira coleta em ambas as técnicas sorológicas, e seis (60%) foram sororreagentes nas duas técnicas no momento da segunda coleta. No momento da terceira coleta, 3 (30%) reagiram para os dois exames, e mantiveram-se sororreagentes para os dois exames sorológicos na quarta coleta. Na pesquisa de anticorpos IgG anti-T.gondii pela RIFI, o título prevalente foi 4096 (50%), seguido por 1024 (30%), e 64 (20%), enquanto que para os anticorpos IgM anti-T.gondii foi 1024 (50%),seguido por 4096 (20%), 64 (10%) e 256 (10%). E na pesquisa de anticorpos IgG anti-T.gondii pela quimiluminescência, o título prevalente foi ≥ 3,0 (40%), seguido por 2,90 (30%), 1,60 (10%), 1,50 (10%) e 1 (10%). E para os anticorpos IgM anti-T.gondii foi 0,60 (20%),seguido por 70 (10%), 80 (10%) e 90 (10%).Das 10 amostras de sangue analisadas pela Reação em Cadeia da Polimerase convencional, todas mostraram-se negativas. A realização deste estudo permitiu a determinação do perfil clínico da neurotoxoplasmose em PVHA, podendo contribuir na implementação de estratégias em saúde pública, com a finalidade de prevenir a morbidade e mortalidade associada a essa enfermidade.
  • ItemDissertação de mestrado
    Análise da virulência e resistência a antimicrobianos em linhagens de Staphylococcus spp. através de técnicas de genômica e proteômica
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-02-24) Silva, Nayara de Oliveira Gonçalves da; Cunha, Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O avanço das técnicas moleculares nas últimas décadas nos mostra que o genoma procarioto está em constante evolução. Tais mudanças podem resultar em alterações significativas no comportamento epidemiológico de diversas espécies de micro-organismos patogênicos. Staphylococcus aureus, principal representante do grupo dos coagulase-positivo, e Staphylococcus epidermidis, principal espécie no grupo dos estafilococos coagulase-negativos (ECN) persistem entre os principais patógenos causadores de infecções adquiridas em hospitais e na comunidade. Diante deste cenário, a virulência estafilocócica e a disseminação de linhagens multidroga resistentes (MDR) representam um sério problema de saúde pública. Neste contexto, alguns métodos são de extrema importância, como por exemplo a identificação e investigação molecular de genes e proteínas relacionados a patogenicidade. Além disso, o número crescente de sequências genômicas e proteômicas depositadas nos bancos de dados tem nos permitido um melhor entendimento acerca da variabilidade do perfil patogênico destes micro-organismos, permitindo assim elucidar os mecanismos relacionados a virulência, resistência e disseminação. Estudos envolvendo linhagens clínicas de ECN têm revelado a presença de genes relacionados a virulência e resistência em linhagens de S. epidermidis, evidenciando seu potencial patogênico, além da sua importância como um reservatório de genes, que podem ser transferidos para outras bactérias presentes em um mesmo nicho ecológico. O genoma e proteoma de S. aureus vêm sendo amplamente descritos, porém ainda mal caracterizados em linhagens de ECN. Tendo em vista a rápida evolução da virulência e resistência destes micro-organismos e seus altos índices de infecção e mortalidade, são necessários estudos que envolvam o sequenciamento do genoma e proteoma de linhagens de Staphylococcus spp., sobretudo de S. epidermidis, que vem se destacando como um importante patógeno emergente dentre os ECNs. Diante disso, investigamos linhagens de S. epidermidis isoladas de hemoculturas provenientes de recém-nascidos internados em uma Unidade de Terapia Intensiva Neonatal (UTIN). Foi realizado o sequenciamento do genoma e proteoma destas linhagens clínicas de S. epidermidis com o intuito de caracterizar a presença de genes e proteínas relacionados a patogenicidade destes isolados clínicos. Além disso, as amostras foram analisadas quanto ao perfil fenotípico de susceptibilidade a antimicrobianos. O resultado do sequenciamento do genoma total das duas linhagens clínicas revelou genes relacionados a resistência a tetraciclina, gentamicina, cefoxitina/oxacilina, penicilina, trimetoprim, ácido fusídico, ciprofloxacina e outras quinolonas, bem como genes codificadores de fatores de virulência para produção de enzimas e toxinas relacionados a mecanismos de aderência, evasão imune e sistemas de secreção. A análise proteômica mostrou a produção de proteínas relacionadas a patogênese, como por exemplo as enzimas SspA (serina V8 protease) e SspB (cisteína protease), além da autolisina Atl, validando os resultados obtidos a partir do sequenciamento. Os resultados deste estudo revelaram uma série de fatores de virulência que provavelmente contribuem para a patogenicidade de S. epidermidis, principalmente no que diz respeito a formação de biofilme, além de um repertório de genes de resistência aos antimicrobianos, alertando para a importância de S. epidermidis como patógenos emergentes no contexto das infecções nosocomiais. Tendo em vista que as populações de S. aureus e S. epidermidis podem ocupar nichos ecológicos sobrepostos, o fluxo gênico pode ocorrer entre essas espécies, o que destaca a importância da vigilância contínua para detectar novas linhagens recombinantes que promovem a emergência de micro-organismos multirresistentes e virulentos.
  • ItemDissertação de mestrado
    Dano tecidual local causado por venenos de Bothrops: perspectivas tromboinflamatórias usando proteômica e biologia de sistemas
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-02-21) Cavalcante, Joeliton dos Santos; Santos, Lucilene Delazari dos [UNESP]; Jorge, Roberta Jeane Bezerra; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Com 5,4 milhões de picadas de serpentes em todo o mundo por ano, o envenenamento por serpentes é um sério problema de saúde que afeta 1,8-2,7 milhões de pessoas, causando 81.000-138.000 mortes e provocando mais de 400.000 casos de deficiências crônicas, como por exemplo, amputações. Proteínas, peptídeos e aminoácidos e compostos de baixa massa representam a principal composição dos venenos de serpentes, que podem causar necrose celular, hemólise, edema, inflamação, hemorragia, coagulopatia e, eventualmente, morte. A diversidade de serpentes e venenos, bem como sua variabilidade foi muito bem estudada para muitas espécies. No entanto, o mecanismo detalhado de ação do envenenamento por serpentes ainda é cheio de lacunas. Dessa forma, o objetivo desta pesquisa foi identificar proteínas do plasma sanguíneo de camundongos envenenados pelas serpentes Bothrops atrox, B. erythromelas e B. leucurus, as quais apresentassem abundâncias diferenciais quantitativamente quando comparadas com o plasma sanguíneo de camundongos não envenenados. Adicionalmente, este estudo também objetivou avaliar a presença de moléculas em potenciais no plasma sanguíneo de camundongos i) que possam responder pelo grau do efeito edematogênico dos venenos apontados e/ou ii) que possam servir de base para estudos futuros relacionados na distinção do agente causador do envenenamento botrópico. Assim, a estratégia investigativa adotada neste trabalho foi induzir edema na pata de camundongos Swiss com diferentes doses (1.25, 2.5 e 5 µg) dos venenos de B. atrox, B. erythromelas e B. leucurus e a partir do plasma sanguíneo destes animais, identificar e quantificar as proteínas utilizando a estratégia proteômica do tipo Shotgun, a qual é baseada na hidrólise em solução de todas as proteínas presentes nas amostras biológicas, sequenciamento dos fragmentos peptídicos por meio de um equipamento de espectrometria de massas Q-Exactive e análise dos dados por ferramentas de bioinformática. Os espectros de massas foram deconvoluídos e analisados por softwares de biologia de sistemas. Identificamos proteínas com diferenças na abundância (DAPs) responsáveis por descrever o grau de edema causado por esses venenos. Hemoglobina e suas subunidades (Hba, Hbb-b1/b2), peroxiredoxina 2 (Prdx2), fator IX (F9), fator de crescimento semelhante à insulina 1 (Igf1), fator de crescimento epidérmico contendo proteína de matriz extracelular tipo fibulina 1 (Efemp1) e fibulina (Fbln1) foram as principais responsáveis pela discriminação do grau do edema causado pelo veneno de B. atrox. As proteínas que podem servir para evidenciar o grau de edema causado pelo veneno de B. erythromelas foram: apolipoproteina A1 (Apoa), proteína amilóide sérica A-4 (Saa4), adiponectina (Adipoq), Fbln1, fator XII (F12) e a proteína Z dependente de vitamina K (Proz). Serpinas, apolipoproteinas, fatores de complemento e suas subunidades, catepsinas, quinases, oxidoredutases, inibidores de proteases, proteases, colageno, fatores de crescimento explicaram os efeitos causados pelo envenenamento causado por B. leucurus. Assim, nota-se que as DAPs presentes nas três propostas de envenenamento experimental estão envolvidas em diversos processos e vias de sinalização tais como ativação do sistema complemento, cascata de coagulação, sistema lipídico, degranulação de plaquetas e neutrófilos e morte celular, contribuindo assim, com desfechos tromboinflamatórios. Em conclusão, os venenos das serpentes estudadas induzem alterações no padrão proteico do plasma dos camundongos envenenados. Estas alterações podem estar associadas com a variabilidade interespecífica dos venenos botrópicos e podem auxiliar a melhor compreender as manifestações fisiopatológicas do envenenamento experimental por serpentes.
  • ItemDissertação de mestrado
    Bioprospecção de compostos bioativos: descoberta de peptídeos inovadores presentes na fauna acompanhante
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-02-21) Galendi, Vicky Balesteros da Silva Blumen; Ferreira Junior, Rui Seabra [UNESP]; Pimenta, Daniel Carvalho; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A fauna acompanhante está presente nas atividades pesqueiras realizadas por meio da rede de arrasto e na maioria dos casos, somam cerca de 50% da captura. Por não representar valor econômico, esta é comumente descartada de volta ao mar morta ou moribunda, causando ainda um grande desequilíbrio no ecossistema marinho local. Devido ao declínio mundial das populações de peixes, ao aumento da poluição e ao reconhecimento da limitação dos recursos biológicos, a necessidade de utilizar o bycatch de forma consciente torna-se indispensável. Atualmente, este material tem fomentado o interesse biotecnológico por meio de sua utilização para a identificação de compostos bioativos com atividades analgésicas, antioxidantes, antimicrobianas, imunorreguladoras, entre outras. As amostras presentes neste estudo foram coletadas em Ubatuba, São Paulo, Brasil, e revelaram que, naquela área, o Paralonchurus brasiliensis, o Micropogonias furnieri e o Hepatus pudibundus são as espécies mais abundantes no bycatch proveniente da pesca de camarão sete-barbas. Após a hidrólise das amostras, estas apresentaram uma alta capacidade antioxidante e potencial para ser uma ferramenta biotecnológica no combate ao estresse oxidativo. Portanto, o presente estudo teve como objetivo caracterizar compostos expressos em animais presentes na fauna acompanhante, a fim de identificar compostos bioativos, investigar atividades biológicas e possíveis meios de utilização dessa fauna descartada, visando potenciais farmacológicos e nutracêuticos. Para isso, foram realizadas diversas análises proteômicas. Dessa maneira a efetividade da digestão pelas hidrólises com Alcalase e Protamex foi comprovada, bem como sua eficácia na obtenção de peptídeos complexos. A maioria dos peptídeos são polares com potencial nutracêutico, já que são facilmente diluídos. Vale ressaltar que esses peptídeos possuem também um potencial de utilização como modelos para a produção de peptídeos sintéticos devido às suas ações biológicas, sendo estes peptídeos análogos – que possuem maior permeabilidade de membrana e maior sobrevida. Com o resultado obtido pelo banco de dados BioPep foi possível prever diversas atividades bioativas, como atividade antioxidante, inibidora de alfa-glicosidase, inibidora de enzima conversora de angiotensina, antiamnésica, antitrombótica, hipertensora, neuropeptídica, entre outras, ressaltando seu potencial visando questões de saúde pública. O bycatch pode, portanto, representar uma fonte de peptídeos únicos com inúmeras utilizações como bioprodutos comerciais, sendo assim, há uma ampla gama de possibilidades para trabalhar com essa fauna inexplorada.
  • ItemDissertação de mestrado
    Pesquisa da contaminação e avaliação da infectividade por Trypanosoma cruzi em polpas de açaí comercializadas em municípios do Estado de São Paulo
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-08-27) Zapparoli, Diana; Lucheis, Simone Baldini; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A doença de Chagas tem como agente etiológico o protozoário Trypanosoma cruzi (T.cruzi). Segundo a Organização Mundial da Saúde, de sete a oito milhões de pessoas encontram-se infectadas com T.cruzi, tendo-se como principais vias de transmissão a vetorial e a oral, a qual tem assumido uma grande importância epidemiológica, tendo em vista a não obrigatoriedade da pasteurização da polpa de açaí. O presente trabalho visou pesquisar T. cruzi em 35 amostras de sorvete de açaí comercializados em 11 diferentes pontos de venda da região de Botucatu-SP, bem como realizar a inoculação via gavagem de amostras de açaí em modelo murino. Para estes objetivos, as alíquotas de polpas de açaí foram submetidas ao método de tamisação direta e visualização sob microscopia óptica, sendo analisadas sob diferentes temperaturas de armazenamento e em diferentes períodos. Análises moleculares pela técnica de Reação em Cadeia da Polimerase convencional (cPCR) com os primers 121/122 e V7/V8 para T.cruzi, foram realizadas a partir das 35 amostras de açaí. Pela tamisação direta verificou-se uma (01) amostra positiva (2,86%), pela leitura das seis horas em temperatura ambiente, porém sem motilidade, a qual não se confirmou pela técnica molecular de PCR utilizando-se os primers 121/122 e V7/V8, para T. cruzi. No entanto, duas amostras de açaí (5,71%) e negativas à tamisação foram positivas à técnica de PCR com o uso do primer 121/122. Realizou-se a inoculação das amostras de açaí positivas à tamisação e à PCR, por via oral (gavagem) em camundongos Balb-C, a fim de se verificar a infectividade das amostras, tendo-se observado que, após período de incubação de 7 dias, a partir de microscopia direta em sangue e tecidos, verificou-se a presença de formas amastigotas em língua e formas tripomastigotas em esfregaço sanguíneo nos grupos de camundongos que receberam as amostras de açaí positivas à tamisação ou à PCR, o que indica a sua capacidade de produzir a infecção in vivo nos camundongos. Desta forma, reforça-se a importância da pasteurização do açaí, já que, até o momento, não há legislação que obrigue a pasteurização deste fruto comercializado como sorvete, necessitando-se de um controle de qualidade e boas práticas de manufatura do mesmo, para o consumo seguro de produtos derivados do açaí.
  • ItemDissertação de mestrado
    Parâmetros epidemiológicos, espaciais e qualitativos do perfil da Hanseníase em munícipio endêmico do Alto Pantanal - MT
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2020-10-26) Oliveira, Nathan Guilherme; Baptista, Ida Maria Foschiani Dias [UNESP]; Cortela, Denise da Costa Boamorte; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A Hanseníase é um problema de saúde pública no Brasil, em especial no estado de Mato Grosso onde são diagnosticados grande parte do número de casos novos do país. Nesse cenário, surgem os estudos epidemiológicos que buscam compreender de forma quantitativa os fatores que predispõem a manutenção da transmissão nessas localidades, assim como os estudos qualitativos que contribuem para o entendimento das percepções dos usuários e prestadores de serviço de saúde sobre a doença. Assim, realizamos um estudo de coorte retrospectiva e análises espaciais dos casos notificados com hanseníase no período de 2008 a 2018 e uma análise de conhecimento sobre a hanseníase juntos aos profissionais de saúde, os casos notificados, contatos intrafamiliares e membros da comunidade, com a finalidade de analisar as fragilidades operacionais e de educação em saúde na hanseníase nos serviços públicos de saúde do município de Cáceres/MT. Neste estudo, foi observado uma maior proporção de homens, um predomínio de pacientes da cor preta e com idade economicamente ativa. Um importante aumento de casos com incapacidades físicas no momento do diagnóstico e no final do tratamento também foi verificado, com forte associação com idade e classificação operacional MB. Esse dado é fundamentado pela detecção passiva de casos da doença no município e pela centralização dos serviços no Centro Referencial de Saúde verificado pelas nas análises geoespaciais. Na análise de conhecimento, foi observado que as percepções sobre hanseníase no município não se diferem entre grupos de indivíduos entrevistados e sob certos aspectos, até mesmo entre profissionais de saúde, conceitos antigos da doença são mantidos. Como exemplos destacamos: a necessidade de isolamento, transmissão pelo uso ou compartilhamento de objetos pessoais com os doentes, além da dificuldade em aceitar que existe cura para a hanseníase. Identificamos também casos de pacientes que afirmaram ocultar que tinham ou tiveram a doença por medo do preconceito e de todo estigma gerado em torno da mesma. Concluímos que o município de Cáceres/MT apresenta problemas na descentralização dos serviços de saúde, acarretando dificuldades na suspeição diagnóstica e na busca ativa de casos e por conseguintes dificuldades em promover ações educativas que eliminem o estigma e interrompa a cadeia de transmissão da hanseníase.