Construção de um circuito de regulação autônomo e temporal da expressão gênicaPiage
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Data
2022-12-15
Autores
Piage Neto, Celso Delle
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Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Resumo
A complexa rede de interações que permeia os processos de regulação da
expressão gênica vem sendo, há muito tempo, alvo de pesquisas, uma vez que o
alcance da compreensão plena acerca desses fenômenos pode levar ao
desenvolvimento de circuitos genéticos sintéticos com diversas finalidades, desde
aplicações em diagnósticos até o aprimoramento de sistemas de armazenamento de
dados não-dependentes de silício. Tais circuitos podem ser desenvolvidos e
regulados a partir do conceito de portas lógicas, onde moléculas diversas, como
açúcares, são utilizadas como inputs, desencadeando a expressão de genes e
iniciando a interação entre os módulos genéticos. Baseando-se na versatilidade de
uso desses circuitos, o presente projeto desenvolveu um circuito genético para
controle temporal autônomo da expressão gênica em Escherichia coli, através do
controle transcricional dos RNAs broccoli e corn pelo sistema CRIPSRa e CRISPRi
Foram realizadas simulações do circuito no software iBioSim 3.0 e os resultados
mostram que o sistema tem potencial de funcionar. Ainda, foram construídas três
linhagens contendo o sistema de controle transcricional dos RNAs. Os cultivos in
vivo mostraram que não há interferência na emissão do sinal entre os fluoróforos,
porém a baixa emissão de fluorescência e o crescimento lento das linhagens mostra
que os parâmetros de cultivo e o circuito genético precisam de ajustes.
Descrição
Palavras-chave
CRISPR-Cas, Expressão gênica;, RNA fluorescente, Circuito genético, Controle transcricional