Parâmetros imunológicos em macrófagos derivados de células thp-1 tratados com geoprópolis em condições inflamatórias e análise proteômica em monócitos humanos

Abstract

A resposta inflamatória pode ser desencadeada por diversos estímulos, como patógenos, alérgenos, compostos tóxicos ou lesões teciduais, podendo ser aguda ou crônica. Diferentes intervenções terapêuticas têm sido avaliadas para o tratamento da inflamação. A geoprópolis (GEO), produzida por abelhas sem ferrão, apresenta propriedades biológicas promissoras, embora seja menos estudada em comparação à própolis produzida por abelhas africanizadas. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos anti-inflamatórios da GEO, isoladamente ou em combinação com concentrações reduzidas de dexametasona (DEXA), em macrófagos derivados da linhagem THP-1 estimulados com lipopolissacarídeo (LPS). A viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio de MTT. Os marcadores de superfície (TLR2, TLR4, CD80 e CD62L) foram analisados por citometria de fluxo, a produção de citocinas (fator de necrose tumoral (TNF), interleucina (IL)-1β, IL-6, IL-8, IL-18, IL-33 e IL-10) e de eicosanoides (prostaglandina E2 e leucotrieno B4) foi quantificada por ELISA. A atividade bactericida foi avaliada após o tratamento dos macrófagos, desafio com Staphylococcus aureus e contagem de unidades formadoras de colônia. A produção de peróxido de hidrogênio (H₂O₂) foi analisada por ensaio colorimétrico. Foi realizada também a análise proteômica após tratamento de monócitos humanos com a GEO. Isoladamente ou em combinação com DEXA, a GEO reduziu significativamente a expressão de marcadores de superfície (TLR2 e CD62L), e a produção de citocinas pró-inflamatórias e eicosanoides, sem afetar a viabilidade celular. Os efeitos dos tratamentos sobre a atividade bactericida e a produção de H₂O₂ foram inconclusivos. A análise proteômica revelou a modulação de proteínas envolvidas na ativação, amplificação e resolução da inflamação, bem como no controle do estresse oxidativo, reforçando o perfil imunomodulador da GEO. Em conjunto, esses achados contribuem para a compreensão dos efeitos da GEO sobre células do sistema imune inato e apontam seu potencial uso isolado ou como adjuvante terapêutico no tratamento de doenças inflamatórias.

The inflammatory response can be triggered by several stimuli, such as pathogens, allergens, toxic compounds, or tissue injury, and may be acute or chronic. Different therapeutic interventions have been evaluated for the treatment of inflammation. Geopropolis (GEO), produced by stingless bees, presents promising biological properties, although it is less studied compared to propolis produced by Africanized bees. The aim of this study was to evaluate the anti-inflammatory effects of GEO, alone or in combination with reduced concentrations of dexamethasone (DEXA), in macrophages derived from the THP-1 cell line stimulated with lipopolysaccharide (LPS). Cell viability was assessed by the MTT assay. Surface markers (TLR2, TLR4, CD80, and CD62L) were analyzed by flow cytometry, and the production of cytokines (TNF, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-18, IL-33, and IL-10) and eicosanoids (prostaglandin E2 and leukotriene B4) was quantified by ELISA. Bactericidal activity was evaluated after macrophage treatment, challenge with Staphylococcus aureus, and colony-forming unit counting. Hydrogen peroxide (H₂O₂) production was analyzed by a colorimetric assay. Proteomic analysis was also performed after treating human monocytes with GEO. Alone or in combination with DEXA, GEO significantly reduced the expression of surface markers (TLR2 and CD62L) and the production of proinflammatory cytokines and eicosanoids, without affecting cell viability. The effects of the treatments on bactericidal activity and H₂O₂ production were inconclusive. Proteomic analysis revealed the modulation of proteins involved in the activation, amplification, and resolution of inflammation, as well as in the control of oxidative stress, reinforcing the immunomodulatory profile of GEO. Taken together, these findings contribute to the understanding of the effects of GEO on innate immune system cells and indicate its potential use alone or as an adjuvant therapy in the treatment of inflammatory diseases.