Caracterização funcional de genes da bactéria fitopatogênica Xanthomonas citri subsp. citri, agente causal do cancro cítrico

Abstract

A bactéria Xanthomonas citri subsp. citri (Xac) constitui um dos principais patógenos da citricultura mundial. Essa espécie bacteriana causa cancro em folhas, ramos e frutos de citros em geral, ocasionando grandes perda econômicas anuais. A fim de estudar a interação dessa bactéria com seu hospedeiro empregou-se a análise de mutantes para genes hipotéticos, ou seja, para os quais ainda não foram atribuídas nenhuma função. Dessa forma o objetivo do trabalho foi avaliar, por meio da mutação sítio-dirigida, se os genes XAC3277 e XACa0007 estão relacionadas com a virulência e/ou patogenicidade da Xanthomonas citri subsp. citri isolado 306 (Xac306) e com o desenvolvimento do cancro cítrico. Apenas o mutante para o gene XAC3277 (ΔXAC3277) foi obtido. Para o teste de virulência do mutante utilizou-se como hospedeiro a laranja doce ‘Pêra Rio’ (Citrus sinensis). A inoculação do mutante ΔXAC3277 e da Xac306 selvagem (wild-type) foram realizadas por infiltração da suspensão de bactérias com auxílio de seringa hipodérmica sem agulha na porção abaxial do limbo foliar. A inoculação com apenas água foi utilizada como controle do dano físico na folha. A evolução dos sintomas da doença foi registrada aos três e seis dias após a inoculação. O teste de patogenicidade não demonstrou diferenças entre a virulência do mutante ΔXAC3277 em relação à Xac306 selvagem, mostrando que esse gene não tem relação direta com os sintomas da doença em plantas de citros.

The bacterium Xanthomonas citri subsp. citri (Xac) is one of the main pathogens of citrus cultivation worldwide. This bacterial species causes canker on citrus leaves, branches, and fruit in general, causing significant annual economic losses. To study the interaction of this bacterium with its host, we used mutant analysis for hypothetical genes—genes for which no function has yet been attributed. Thus, the objective of this study was to evaluate, through site-directed mutation, whether the XAC3277 and XACa0007 genes are related to the virulence and/or pathogenicity of Xanthomonas citri subsp. citri isolate 306 (Xac306) and the development of citrus canker. Only the mutant for the XAC3277 gene (ΔXAC3277) was obtained. The sweet orange 'Pêra Rio' (Citrus) was used as the host for the virulence and/or pathogenicity testing of the mutant. sinensis). Inoculation of the ΔXAC3277 mutant and wild-type Xac306 was performed by infiltrating the bacterial suspension using a needleless hypodermic syringe into the abaxial portion of the leaf blade. Inoculation with water alone was used to control physical leaf damage. The progression of disease symptoms was recorded three and six days after inoculation. The pathogenicity test revealed no differences in the virulence of the ΔXAC3277 mutant compared to wild-type Xac306, demonstrating that this gene is not directly related to disease symptoms in citrus plants.