Avaliação do comportamento da estirpe de Salmonella Gallinarum 287/91 contendo deleção dos genes cobs e cbia durante a infecção de macrófagos primários de aves

A tifoide aviária é uma importante doença sistêmica que afeta aves de todas as idades, causada pela Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Gallinarum biovar Gallinarum (Salmonella Gallinarum). Estudos anteriores com poedeiras de ovos marrons demonstraram que a cepa 287/91 de Salmonella Gallinarum, portadora de defeitos nos genes cobS e cbiA (SGΔcobScbiA), é uma candidata a vacina em potencial. Durante a patogênese da Salmonella, o sistema imune inato do hospedeiro desempenha um papel fundamental, com destaque para os macrófagos. O presente trabalho comparou a internalização e a sobrevivência — avaliadas 2, 4 e 20 horas após a infecção (hpi) — da cepa duplo-mutante SGΔcobScbiA e da cepa selvagem, utilizando a linhagem celular HD-11 (semelhante a macrófagos de galinha) e macrófagos primários de galinha. Nos ensaios, os macrófagos primários simularam com maior fidelidade as condições de infecção in vivo — apresentando diferenças significativas nos tempos de 2, 4 e 20 hpi — em comparação com a linhagem celular HD-11, que não exibiu diferenças em nenhum dos momentos analisados. Além disso, às 2 hpi, a cepa SGΔcobScbiA apresentou um maior aumento relativo em relação à fase de internalização e uma taxa de sobrevivência superior à da cepa selvagem. Em suma, os macrófagos primários de galinha mostraram-se uma alternativa eficiente aos experimentos com modelos in vivo.

Resumo (inglês)

Fowl typhoid is an important systemic disease in poultry of all ages caused by Salmonella enterica subsp. enterica serovar Gallinarum biovar Gallinarum (Salmonella Gallinarum). Previous studies in brown laying hens showed that the Salmonella Gallinarum 287/91 strain with defective cobS and cbiA genes (SGΔcobScbiA) is a potential vaccine candidate. During Salmonella pathogenesis, the host's innate immune system plays an important role, especially the macrophages. The present work compared the uptake and survival after 2-, 4-, and 20-hours post-infection (hpi) of the double mutant strain SGΔcobScbiA with the wild-type strain during HD-11 chicken macrophage-like cell line and primary chicken macrophage infection. In the assays, primary macrophages more accurately mimicked in vivo infection conditions, with the 2-, 4-, and 20-hpi significant difference, than the HD-11 cell line, which presented no difference at any time. Furthermore, at 2-hpi, SGΔcobScbiA exhibited a higher fold increase from the uptake phase and a higher survival rate than the wild-type strain. In sum, primary chicken macrophages demonstrated an efficient alternative to in vivo model experiments.

Palavras-chave

Cell culture Cell line Salmonellosis Poultry Macrofagos

Idioma

Inglês

Citação

BENEVIDES, V. P. - Avaliação do comportamento da estirpe de Salmonella Gallinarum 287/91 contendo deleção dos genes cobs e cbia durante a infecção de macrófagos primários de aves - 2026, 20f - Relatório Pós Doutorado - Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho", Jaboticabal, 2026.