Efeito antimicrobiano e anti-inflamatório de um sistema multiparticulado contendo morina em um modelo de cocultura tridimensional da mucosa oral

Abstract

A periodontite é uma doença inflamatória e infecciosa caracterizada por uma resposta inflamatória excessiva do hospedeiro e por causar destruição dos tecidos de suporte dentário. Ainda hoje é considerada umas das doenças mais prevalentes do mundo. A substância natural morina, tanto em sua forma livre ou encapsulada em sistemas de liberação controlada, apresenta potencial para o uso no tratamento da periodontite devido seus efeitos anti-inflamatório e antimicrobiano. Esse projeto de pesquisa tem como objetivo desenvolver um modelo de cocultura celular tridimensional (3D) para avaliar o efeito anti-inflamatório e antimicrobiano, contra F. nucleatum, da morina livre e do sistema de liberação controlada contendo morina. O modelo de cocultura 3D será desenvolvido com três linhagens celulares diferentes, fibroblastos, queratinócitos e monócitos e será infectado com F. nucleatum vivo ou morto por calor. A validação do modelo infectado ou não será baseado em marcadores fluorescentes e microscopia confocal a laser. A biocompatibilidade da morina livre e dos sistemas contendo morina será avaliada por meio da atividade metabólica celular por CellTitre-Glo (Promega) após 24 horas de exposição do modelo de cocultura 3D aos tratamentos e confirmado por meio da microscopia confocal a laser. Para avaliação da atividade anti-inflamatória da morina livre e do sistema contendo morina, a cocultura 3D será desafiada com a morina livre e sistema contendo morina por 8 horas e infectada por 24 horas com F. nucleatum. O efeito anti-inflamatório será determinado por meio da expressão das citocinas IL-8, GM-CSF, TNF-α e IL1B, utilizando o ensaio imunoenzimático (ELISA). A ação da morina livre e do sistema contendo morina em F. nucleatum será avaliado por meio da unidade formadoras de colônias (UFC/mL) e coloração LIVE/DEAD.