Análise da expressão de miRNAs em lentes de cães portadores de catarata imatura e madura

Abstract

A catarata se caracteriza como principal causa de perda de visão em cães, afetando animais mestiços ou de raças puras, podendo ser classificada segundo o estágio de desenvolvimento, a área da lente acometida, a idade do paciente, fatores genéticos e quanto à consistência da lente. O presente estudo objetivou realizar a análise da expressão global de miRNAs de cães portadores de catarata, bem como inferir possíveis vias biológicas de atuação de miRNAs no desempenho da regulação desta condição patológica. Para tanto, fragmentos de 4-5mm oriundos das cápsulas anteriores obtidas da capsulorrexe da cirurgia de facoemulsificação, foram colhidos de 15 animais com catarata imatura e 15 animais com madura, além de fragmentos de igual tamanho, de 15 animais sadios e com lentes transparentes, que constituíram o grupo controle. As amostras obtidas foram submetidas ao processo de extração de RNA e posteriormente quantificadas quanto a sua concentração. A análise da expressão global de miRNAs utilizou os strips GeneChipTM mirna 4.1 Array Strip (Affymetrix®). Dois miRNAs menos expressos foram identificados nas cataratas imaturas de cães em comparação às lentes transparentes. Os miRNAs expressos foram o cfa-miR-1307 e cfa-miR-450b que, provavelmente, participam do processo de apoptose das células epiteliais da lente e inibição da proliferação celular. Presume-se, ainda, que o cfa-miR-450b, também atue nas vias do TGF-beta, correlacionado a indução das células epiteliais da lente a sofrerem alterações morfológicas, com transformação das mesmas em células fusiformes, justificando, por vezes, a ocorrência de irregularidade na superfície capsular e deposição de matriz extracelular. Enfatiza-se, que se trata da primeira descrição sobre a expressão de miRNAs em lentes caninas.

Cataract is the main cause of vision loss in dogs, affecting crossbred or purebred animals, depending on the stage of development, the affected lens area, the patient’s age, genetic factors and lens consistency. This aim of this study was to evaluate the global expression of miRNAs from dogs with cataracts as well as to verify molecular evidence of the role of these miRNAs in the regulation of this pathological condition. Then, 4-5mm fragments from the anterior capsulorhexis capsules obtained in the phacoemulsification surgery were collected from 15 animals with immature and 15 animals with mature cataract, in addition to fragments of equal size, from 15 healthy animals with transparent lenses, which constituted the control group. The sample were subjected to RNA extraction and had their concentration quantified. An analysis of the global expression of miRNAs uses GeneChipTM mirna 4.1 Array Strip (Affymetrix®) strips. Two miRNAs down-regulated were identified in immature cataracts in dogs compared to the control group. The expressed miRNAs were cfa-miR-1307 and cfa-miR-450b, which probably participate in the process of apoptosis of lens epithelial cells and inhibition of cell proliferation. It is also assumed that cfa-miR-450b acts on TGF-beta pathways, correlated with the induction of lens epithelial cells to undergo morphological changes, with transformation of them in spindle cells, sometimes justifying the occurrence of irregularity on the capsular surface and extracellular matrix deposition. It should be emphasized that this is the first description of the miRNAs expression in canine lenses.