Dosagem de hormônios esteroides sexuais em camada de gordura subcutânea de toninha, Pontoporia blainvillei (Cetartiodactyla; Pontoporiidae), do litoral de São Paulo, Brasil.
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Data
2019-03-13
Autores
Ribeiro, Vanessa Lanes
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Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Resumo
The Franciscana dolphin (Pontoporia blanvillei) is a small odontocete impacted by anthropic activities (bycatch, habitat degradation). The hormonal measurement in biological matrices (feces, urine, blubber, milk, saliva, blow) has been increasingly used in aquatic mammals for certain reproductive parameters. The present study validated the method of extraction and measurement of testosterone and progesterone in blubber kept in two different temperatures (-20°C and -196°C), besides correlating the hormone concentration with gender, sexual maturity, age, stage of development, body length and occurrence of pregnancy. The carcasses were collected from stranded and bycatch dolphins of the coast of São Paulo. Blubber samples were collected and frozen at -20°C (n=101) and -196°C (liquid nitrogen) (n=28). The extraction was performed with a method described in literature and the hormonal analyses were done by enzyme immunoassay for the two hormones. An analysis was performed on two units of hormone concentration (ng/g and ng/mg). The inter-assay coefficient of variation was 6.89% for progesterone and 1.67% for testosterone, the intra-assay coefficient of variation was 7.82% for progesterone and 3.29% for testosterone. The progesterone assay presented parallelism F1.5= 0.87, p= 0.45 and testosterone presented F1.5= 3.79, p= 0.11. The mean extraction efficiency was 66% for progesterone and 70% for testosterone. The method of extraction and hormonal analysis was feasible for Pontoporia blainvillei. No difference was found between the progesterone and testosterone levels of samples kept at the two storage temperatures in both measurement units. The levels of hormones found were in agreement with the expectation that progesterone levels higher than males, mature and adults were higher than immature, juvenile and calf, were not abandoned with age and the same conclusions were obtained for males in relation to a testosterone. As pregnant also the levels of progesterone are higher than the rest of the specimens. High calf and fetuses hormones, which may be a reflection of the maternal hormonal circulation, besides the rate of incorporation of hormones or the more effective extraction.
A toninha (Pontoporia blanvillei) é um pequeno odontoceto impactado pelas atividades antrópicas (capturas acidentais, degradação de habitat). A dosagem hormonal em diferentes matrizes (fezes, urina, tecido adiposo, leite, saliva, borrifo) tem sido cada vez mais utilizada em mamíferos aquáticos para determinar parâmetros reprodutivos. O objetivo deste estudo foi validar o método de extração e mensuração de testosterona e progesterona em camada de gordura subcutânea de carcaças de toninha armazenadas em duas temperaturas (-20°C e -196ºC), além de correlacionar as dosagens com parâmetros de sexo, maturidade gonadal, idade, estágio de desenvolvimento, comprimento total e ocorrência de prenhez. As amostras foram colhidas de carcaças provenientes de encalhe e captura acidental do litoral de São Paulo. Foram colhidos fragmentos de gordura, armazenados em freezer a -20°C (n=101) e em nitrogênio líquido (-196ºC) (n=28). A extração hormonal foi realizada com modificações a partir do método descrito em literatura e a dosagem foi feita por enzimaimunoensaio para os dois hormônios. Os resultados das análises estatísticas foram expressos em duas unidades de concentração de hormônio (ng/g e ng/mg). O coeficiente de variação inter-ensaio foi de 6,89% para progesterona e 1,67% para testosterona, o coeficiente de variação intra-ensaio foi de 7,82% para progesterona e 3,29% para testosterona. Os resultados do paralelismo para o ensaio de progesterona foi F1,5 =0,87 e p=0,45 e para testosterona F1,5=3,79 e p=0,11. A eficiência média de extração foi de 66% para progesterona e 70% para testosterona. O método de extração e análise hormonal apresentou-se viável para Pontoporia blainvillei, não foram observadas diferenças significativas entre as concentrações dos hormônios nas duas temperaturas e nas duas unidades. Os níveis de hormônios encontrados foram de acordo com o esperado, onde fêmeas apresentaram níveis de progesterona mais elevados que machos, maduras e adultas tiveram níveis mais altos que imaturas, juvenis e filhotes, não houve correlação com a idade e as mesmas conclusões foram obtidas para machos em relação a testosterona. As prenhes também apresentaram níveis de progesterona mais elevados que o restante dos espécimes. Os filhotes e fetos apresentaram níveis hormonais elevados, que pode ser um reflexo da circulação hormonal materna, além da alta taxa de incorporação de hormônios na gordura ou extração mais efetiva.
A toninha (Pontoporia blanvillei) é um pequeno odontoceto impactado pelas atividades antrópicas (capturas acidentais, degradação de habitat). A dosagem hormonal em diferentes matrizes (fezes, urina, tecido adiposo, leite, saliva, borrifo) tem sido cada vez mais utilizada em mamíferos aquáticos para determinar parâmetros reprodutivos. O objetivo deste estudo foi validar o método de extração e mensuração de testosterona e progesterona em camada de gordura subcutânea de carcaças de toninha armazenadas em duas temperaturas (-20°C e -196ºC), além de correlacionar as dosagens com parâmetros de sexo, maturidade gonadal, idade, estágio de desenvolvimento, comprimento total e ocorrência de prenhez. As amostras foram colhidas de carcaças provenientes de encalhe e captura acidental do litoral de São Paulo. Foram colhidos fragmentos de gordura, armazenados em freezer a -20°C (n=101) e em nitrogênio líquido (-196ºC) (n=28). A extração hormonal foi realizada com modificações a partir do método descrito em literatura e a dosagem foi feita por enzimaimunoensaio para os dois hormônios. Os resultados das análises estatísticas foram expressos em duas unidades de concentração de hormônio (ng/g e ng/mg). O coeficiente de variação inter-ensaio foi de 6,89% para progesterona e 1,67% para testosterona, o coeficiente de variação intra-ensaio foi de 7,82% para progesterona e 3,29% para testosterona. Os resultados do paralelismo para o ensaio de progesterona foi F1,5 =0,87 e p=0,45 e para testosterona F1,5=3,79 e p=0,11. A eficiência média de extração foi de 66% para progesterona e 70% para testosterona. O método de extração e análise hormonal apresentou-se viável para Pontoporia blainvillei, não foram observadas diferenças significativas entre as concentrações dos hormônios nas duas temperaturas e nas duas unidades. Os níveis de hormônios encontrados foram de acordo com o esperado, onde fêmeas apresentaram níveis de progesterona mais elevados que machos, maduras e adultas tiveram níveis mais altos que imaturas, juvenis e filhotes, não houve correlação com a idade e as mesmas conclusões foram obtidas para machos em relação a testosterona. As prenhes também apresentaram níveis de progesterona mais elevados que o restante dos espécimes. Os filhotes e fetos apresentaram níveis hormonais elevados, que pode ser um reflexo da circulação hormonal materna, além da alta taxa de incorporação de hormônios na gordura ou extração mais efetiva.
Descrição
Palavras-chave
Cetacea, Odontoceti, Esteroides sexuais, Tecido adiposo, Extração, Análise hormonal, Enzimaimunoensaio, Litoral de São Paulo, Cetaceans, Blubber, Extraction, Hormonal analysis, Enzyme immunoassay, São Paulo coast, Odontoceti, Sexual Steroids