Investigação do potencial de utilização em terapia celular de células tronco mesenquimais cultivadas em matrizes de quitosana-colágeno-genipina, em petakas e após criopreservação

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dc.contributor.advisorCornélio, Marinônio Lopes [UNESP]
dc.contributor.advisorFett-Conte, Agnes Cristina
dc.contributor.authorZotarelli Filho, Idiberto José
dc.contributor.institutionUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.date.accessioned2018-12-20T17:41:47Z
dc.date.available2018-12-20T17:41:47Z
dc.date.issued2018-12-07
dc.description.abstractIntrodução: A terapia de tecidos e órgãos artificiais tem resultado no aumento da expectativa de vida de milhares de pessoas, sendo que uma a cada cinco com mais de 65 anos já foi beneficiada com tecidos e órgãos gerados in vitro. Assim, torna-se imperativo o desenvolvimento de novas estratégias de desenvolvimento e optimização de biomatrizes e de células tronco, para atender a demanda, que sejam capazes de promover regeneração de tecidos e órgãos, amortização dos custos e uso seguro em nível celular. Neste contexto, as células tronco mesenquimais adiposas (CTMA) tem despertado grande interesse científico. Objetivo: Foi analisado a biocompatibilidade em nível celular e cromossômica/cromatídica da biomatriz de quitosana-colágeno-genipina com CTMA humanas. Métodos: Foram testadas diferentes concentrações de genipina para estabelecimento da matriz, por análise de intumecimento, degradação e grau de reticulação, por espectrofotometria. As CTMA foram obtidas por processamento enzimático do lipoaspirado humano e cultivadas em Petakas (controle) e na biomatriz selecionada após caracterização físico-química, com e sem criopreservação. As CTMA foram caracterizadas quanto a adesão e proliferação por microscopia óptica convencional, contraste de fase e eletrônica de varredura, imunofenotipagem, viabilidade celular com teste de azul de Trypan, estabilidade cromossômica, por técnicas citogenéticas convencionais, potencial neoplásico por teste de Papanicolau e quanto a capacidade de diferenciação celular em três tipos de tecidos, com abordagen estatística. Resultados: A biomatriz intercruzada com 0,75% v/v de genipina foi a melhor para os estudos celulares. Os testes de adesão, proliferação e capacidade de diferenciação mostraram que as CTMA em contato com a biomatriz mantiveram suas características naturais. Os testes citogenéticos, e do papanicolau das CTMA após diferentes condições de cultivo na biomatriz não revelaram frequências estatisticamente diferentes das células controles (cultivadas sem a biomatriz). Conclusão: Os resultados sugerem que a biomatriz de quitosana-colágeno-genipina com 0,75% v/v de genipina é biocompativel em nível celular e cromossômico, com células tronco mesenquimais adiposas.pt
dc.description.abstractIntroduction: Therapy of artificial tissues and organs has resulted in an increase in the life expectancy of thousands of people, and one in five over 65 years has already benefited from tissues and organs generated in vitro. Thus, it is imperative to develop new strategies for the development and optimization of biomatrices and stem cells to meet demand, which is capable of promoting tissue and organ regeneration, cost amortization and safe use at the cellular level. In this context, adipose mesenchymal stem cells (AMSC) have aroused great scientific interest. Objective: The biocompatibility at the cellular and chromosomal/chromatidic level of chitosan-collagen-genipin biomatrix with human AMSC was analyzed. Methods: Different concentrations of genipin for matrix establishment were tested by the analysis of the number of cells, the degradation, and degree of crosslinking by spectrophotometry. AMSC were obtained by enzymatic processing of human lipoaspirate and cultured in Petakas (control) and in the selected biomatrix after physicochemical characterization, with and without cryopreservation. The AMSC were characterized for adhesion and proliferation by conventional optical microscopy, phase contrast and scanning electron microscopy, immunophenotyping, cell viability with Trypan blue test, chromosomal stability, by conventional cytogenetic techniques, neoplastic potential by Papanicolaou test and for the capacity of cell differentiation in three types of tissues, with a statistical approach. Results: The crosslinked biomatrix with 0.75% v/v genipin was the best for the cell studies. The tests of adhesion, proliferation and differentiation capacity showed that the AMSC in contact with the biomatrix maintained their natural characteristics. The cytogenetic and Papanicolaou tests after different culture conditions in the biomatrix did not reveal statistically different frequencies of the control cells (cultured without the biomatrix). Conclusion: The results suggest that the chitosan-collagen-genipin biomatrices with 0.75% v/v genipin are biocompatible at the cellular and chromatidic/chromosomal level, with adipose mesenchymal stem cells.en
dc.description.sponsorshipConselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
dc.description.sponsorshipId140871/2015-2
dc.identifier.aleph000911124
dc.identifier.capes33004153068P9
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11449/180311
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.rights.accessRightsAcesso aberto
dc.subjectCélulas tronco mesenquimais adiposaspt
dc.subjectBiomatrizes poliméricaspt
dc.subjectEngenharia de tecidospt
dc.subjectEstabilidade cromossômicapt
dc.subjectEstabilidade cromatídicapt
dc.subjectAdipose mesenchymal stem cellsen
dc.subjectPolymeric biomatricesen
dc.subjectTissue engineeringen
dc.subjectChromosomal stabilityen
dc.subjectChromatidic stabilityen
dc.titleInvestigação do potencial de utilização em terapia celular de células tronco mesenquimais cultivadas em matrizes de quitosana-colágeno-genipina, em petakas e após criopreservaçãopt
dc.title.alternativeInvestigation of potential use in cell therapy of mesenchymal stem cells cultured in chitosan-collagen-genipin matrices, in petakas and after cryopreservationen
dc.typeTese de doutorado
unesp.campusUniversidade Estadual Paulista (Unesp), Instituto de Biociências Letras e Ciências Exatas, São José do Rio Pretopt
unesp.embargoOnlinept
unesp.graduateProgramBiofísica Molecular - IBILCEpt
unesp.knowledgeAreaBiofísica molecularpt
unesp.researchAreaBiomateriais, engenharia de tecidos humanos e medicina regenerativapt

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