Análise da expressão de miRNAs em células humanas de próstata infectadas com o Zika vírus

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dc.contributor.advisorSaiki, Marília de Freitas Calmon
dc.contributor.advisorRahal, Paula [UNESP]
dc.contributor.advisorOliva, Cíntia Bittar [UNESP]
dc.contributor.authorMachado, Francielly Cristina
dc.contributor.institutionUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.date.accessioned2019-03-20T14:24:44Z
dc.date.available2019-03-20T14:24:44Z
dc.date.issued2019-02-28
dc.description.abstractO vírus Zika (ZIKV) é um vírus do gênero Flavivirus. Em humanos, o modo de transmissão mais comum é através da picada do mosquito Aedes aegypti. Entretanto, evidências recentes têm sugerido a transmissão sexual do ZIKV. Embora alguns estudos preconizem o testículo e a próstata como os principais órgãos que colaboram nessa forma de transmissão, pouco se sabe sobre quais tipos celulares destes tecidos são mais suscetíveis a esse vírus. Além disso, a infecção com linhagens distintas do ZIKV em modelos in vitro e in vivo tem demonstrado que a resposta do hospedeiro à infecção é cepa-dependente. Descobertas recentes indicam que esse vírus desregula o perfil de miRNAs celulares e que esse é um importante evento ao longo da infecção. Nesse estudo, avaliamos a suscetibilidade, a permissividade e o perfil de miRNAs celulares de células humanas epiteliais prostáticas (PNT1A) à infecção por duas diferentes cepas do ZIKV, uma cepa africana clássica, MR766 (ZIKVMR766) e uma circulante no Brasil, ZIKVBR. Para isso, células PNT1A foram infectadas com as cepas do ZIKV e submetidas ao ensaio de imunofluorescência indireta para a proteína do envelope viral; foram monitoradas quanto à produção de partículas virais infecciosas e cópias de RNA viral por ensaio de formação de placas e qPCR, respectivamente e analisou-se o perfil de miRNAs celulares por PCR array. Os resultados mostraram que células prostáticas humanas foram suscetíveis e permissivas à infecção pelo ZIKV e não apresentaram nenhuma imposição quanto a infecção por linhagens distintas desse vírus. As cepas testadas não diferiram quanto à cinética de replicação em células de próstata, mas diferiram quanto á modulação da expressão de miRNAs celulares. Após a infecção, 16 miRNAs celulares foram modulados em células de próstata, um pequeno grupo de 6 miRNAs foram modulados por ambas as cepas, enquanto um grupo de 10 miRNAs foram modulados exclusivamente pelo ZIKVBR. Análises in silico identificaram que o grupo exclusivo de miRNAs regulados na infecção pela cepa brasileira do ZIKV pode regular genes e vias associadas a inflamação, imunidade, sobrevivência celular e proliferação celular. Nossos resultados indicam que a próstata pode ter um importante papel na transmissão sexual do ZIKV e destaca que cepas diferentes do vírus Zika podem induzir uma expressão diferencial de miRNAs celulares, a qual pode influenciar nas diferenças fisiopatológicas após infecção por diferentes cepas.pt
dc.description.abstractZika virus (ZIKV) is a virus from the Flavivirus genus. In humans this virus is transmitted mainly by Aedes aegypti mosquitoes. However, recent evidences indicate the occurrence of sexual transmission. Although some studies have indicated testes and prostate as the main organs that collaborate in this transmission, little is known about which cell types in these tissues are more susceptible to this virus. In addition, infection with distinct ZIKV strains in some models in vitro and in vivo has demonstrated that the host's response to infection is strain-dependent. Recent findings suggest that this virus deregulates host miRNA profile and that this is an important event throughout the course of the infection. Herein, we evaluated the susceptibility, the permissiveness and the cellular miRNA profile of human prostatic epithelial cells (PNT1A) to two different strains of ZIKV, a classical African strain, MR766 (ZIKVMR766) and a Brazilian strain, ZIKVBR . So, we infected PNT1A cells with ZIKV strains and performed an indirect immunofluorescence assay for protein envelope; monitored infectious viral particles production and RNA viral copies by plate assay and qPCR, respectively, and analyzed the miRNA cellular profile by PCR array. Our results demonstrated that human prostate cells are susceptible and permissive to ZIKV infection and did not present any imposition regarding infection by distinct strains of this virus. The strains did not differ in the kinetics of replication in prostate cells, but presented differences in miRNA’s cell expression modulation. After infection, 16 miRNAs were modulated in prostate cells, a small group of 6 miRNAs were modulated by both strains while a set of 10 miRNAs showed to be modulated exclusively by ZIKVBR . In silico analyses predicted that the miRNA upregulated exclusively by the infection by the Brazilian strain may regulate genes and pathways associated to inflammation, immunity, cell survival and cell proliferation. Taken together, our results indicate that prostate may be an important role in the sexual transmission of ZIKV and highlights that different strains of ZIKV may induce a differential host miRNA expression which may influence the differences in the physiopathology presented after the infection by different strains.en
dc.description.sponsorshipConselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
dc.description.sponsorshipFundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
dc.description.sponsorshipIdFAPESP: 2017/09197-2
dc.identifier.aleph000913943
dc.identifier.capes33004153023P5
dc.identifier.lattes7991082362671212
dc.identifier.orcid0000-0001-5693-6148
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11449/181111
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.rights.accessRightsAcesso aberto
dc.subjectTransmissão sexualpt
dc.subjectmiRNAspt
dc.subjectCepa Brasileira do Zika víruspt
dc.subjectCepa MR766pt
dc.subjectZika víruspt
dc.subjectPróstatapt
dc.subjectProstateen
dc.subjectSexual transmissionen
dc.subjectZika virus Brazilian strainen
dc.subjectMR766 strainen
dc.subjectZika virusen
dc.titleAnálise da expressão de miRNAs em células humanas de próstata infectadas com o Zika víruspt
dc.title.alternativeAnalysis of miRNA expression in human prostate cells infected by the Zika virusen
dc.typeDissertação de mestrado
unesp.advisor.lattes7991082362671212[2]
unesp.advisor.orcid0000-0001-5693-6148[2]
unesp.campusUniversidade Estadual Paulista (Unesp), Instituto de Biociências Letras e Ciências Exatas, São José do Rio Pretopt
unesp.embargo24 meses após a data da defesapt
unesp.graduateProgramBiociências - IBILCEpt
unesp.knowledgeAreaGenética e biologia evolutivapt
unesp.researchAreaGenética Humana e Molecularpt

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