São José do Rio Preto - IBILCE - Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas

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  • ItemTese de doutorado
    Desenvolvimento e caracterização de matrizes de sensores para a detecção de metais pesados em água e de compostos voláteis orgânicos
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-05-03) Cantuária, José Bruno ; Fugikawa-Santos, Lucas ; Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas - Câmpus de São José do Rio Preto
    Os efeitos adversos e nocivos causados à saúde dos seres humanos por compostos poluentes, seja em meio líquido como em ar ambiente, incentivou a elaboração desse trabalho a partir do desenvolvimento de sistemas de detecção de íons de metais pesados (HMI) em meio aquoso e de compostos orgânicos voláteis (VOCs) a partir de matrizes de sensores, compostas por 4 pares de eletrodos interdigitados, com filmes finos depositados por drop-casting sobre eles, por soluções de materiais poliméricos condutores de P3HT, PVK:PBD e POMA para o sistema de detecção de HMI, nos quais nesse trabalho foram estudados os íons de Fe2+, Mn2+ e Co2+ e filmes finos a partir de suspensão de MWCNT (nanotubo de carbono de múltiplas paredes), por soluções de PEDOT:PSS, PANI e película de gel iônico [EMI][TFSA] para o sistema de detecção de VOCs, para avaliação de compostos como hidróxido de amônio (base), ácido acético (ácido) e os álcoois isopropanol e etanol. Para o sistema de detecção de HMI, ainda se fez uso de hidrogéis condutores de PEGDa/PEG foto catalisados por luz UV-vis, para absorção dos elementos em solução e para o sistema de detecção de VOCs, os experimentos foram realizados em uma câmara metálica vedada para a promoção de uma atmosfera interna estática dos voláteis. A partir dos dados coletados pelas medidas elétricas de impedância real em função da frequência (para os HMI) e do tempo (para os VOCs), por espectroscopia de impedância para os dois tipos de compostos estudados em diferentes concentrações (10 ppm, 50 ppm e 100 ppm para as soluções de HMI e 5 ppm, 10 ppm, 20 ppm e 50 ppm para os VOCs), foi possível realizar análises estatísticas multivariadas por meio da Análise por Componentes Principais (PCA), no qual pode-se observar que os sistemas puderam selecionar e diferenciar quase todos os compostos estudados em diferentes concentrações, mostrando que o sistema matricial de sensores desenvolvidos neste trabalho, são sistemas em potencial para serem aplicados na detecção de compostos poluentes em meio líquido e em ar, quando deseja-se identificar de maneira rápida e fácil, a presença de tais elementos, sem a necessidade de aparatos sofisticados, que demandam custos elevados de execução e análise das amostras bem como elevado potencial de expansão para análises de outros compostos.
  • ItemTese de doutorado
    Isotermas de sorção, cinética de secagem e propriedades termodinâmicas de plantas alimentícias não convencionais
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-05-23) Borges-Machado, André Luiz ; Telis-Romero, Javier ; Santos, Priscila Alonso dos ; Luna-Solano, Guadalupe
    O problema da insegurança alimentar mundial já não estava indo ao encontro de uma solução até 2030 conforme prevê o programa da FAO para zerar a fome até o citado ano. A pandemia de COVID-19 agravou ainda mais o problema. No Brasil, a insegurança alimentar é realidade para aproximadamente 9 milhões de brasileiros. Neste contexto, muitas plantas consideradas invasoras, pragas ou inços, na verdade, possuem grande potencial alimentício e podem contribuir para a redução da insegurança. A fim de se fornecer informações sobre o comportamento higroscópico em temperaturas de armazenamento (5-40 ºC) e de secagem (40-80 ºC), foram determinadas as isotermas de sorção das folhas de ora-pro-nóbis (Pereskia aculeata Miller), folhas, pecíolo e rizoma de taioba (Xanthosoma taioba E.C.Gonç.) e de sementes de pimenta Jalapeño (Capsicum annuum) via método gravimétrico utilizando soluções saturadas de diferentes sais. Dentre os cincos modelos ajustados aos dados experimentais via regressão não linear, o modelo de GAB foi escolhido para descrever as isotermas das plantas estudadas, bem como apresentaram formato sigmoide sendo classificadas como BET Tipo II. O teor de água de equilíbrio aumentou com o incremento da umidade relativa e redução da temperatura para as plantas analisadas. O calor isostérico líquido de sorção das folhas de ora-pro-nóbis, folhas, pecíolo e rizoma de taioba e das sementes de pimenta Jalapeño diminuiu com o aumento do teor de água de equilíbrio. A teoria da compensação entalpia-entropia foi comprovada nas condições de armazenamento e secagem. Os mecanismos de dessorção de todas as plantas estudadas não são espontâneos. Com relação à cinética de secagem, o modelo de Weibull foi o que melhor descreveu a razão de teor de água em função do tempo para as folhas de ora-pro-nóbis, rizoma de taioba e sementes de pimenta Jalapeño. Já o modelo Logarítmico melhor se ajustou aos dados de folhas e pecíolos de taioba. O coeficiente de difusão aumentou com o incremento da temperatura de secagem para as diferentes partes de planta. A energia de ativação das folhas de ora-pro-nóbis, folhas, pecíolo e rizoma de taioba e das sementes de pimenta Jalapeño foi estimada, em kJ∙mol-1, em 65,81; 68,47; 34,80; 29,68 e 30,30; respectivamente.
  • ItemTese de doutorado
    Nanopartículas multifuncionais para liberação de siRNA no tratamento de doenças dérmicas: estudos em modelos in vitro e in vivo de psoríase induzida
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-05-21) Martinez Junior, André Miguel ; Tiera, Marcio José
    Ao longo da última década, os avanços na engenharia do RNA possibilitaram a geração de pequenos RNAs de interferência (siRNA) com atividade farmacológica melhorada, o que tem impulsionado um crescente número de estudos que visam utilizá-las para o desenvolvimento de plataformas terapêuticas para variadas doenças, como a psoríase. Contudo, a eficácia do tratamento terapêutico ainda está condicionada à utilização de nanocarreadores capazes de entregar de forma eficiente o siRNA no citosol das células-alvo, mediante a superação dos vários obstáculos que se iniciam no momento de sua aplicação nos sistemas biológicos. Neste estudo, foram sintetizados policátions multifuncionais baseados em quitosana para serem aplicados no desenvolvimento de duas séries de nanocarreadores de siRNAs. Na Série I, a quitosana foi substituída com grupos diisopropiletilamina (DIPEA) e tiol (-SH) e foram utilizadas para revestir nanopartículas de ouro (AuNPs), as quais foram aplicadas no transporte do siRNA. Já na Série II, as DIPEA-quitosanas foram enxertadas com polietilenoglicol tiolado (PEG-SH) para geração dos nanocarreadores de siRNA através da simples complexação dos ácidos nucleicos. A composição dos policátions foi determinada por diferentes técnicas espectrométricas (RMN 1H, FTIR e UV-Vis) e confirmadas via análise elementar (CHNS). Os derivados de quitosana apresentaram conteúdo de DIPEA variados (14-59%), tiolação entre 1-2% (Série I) e PEGuilação próxima a 1% (Série II). Em ambas as séries, os nanocarreadores de siRNA apresentaram tamanhos entre 100-200 nm e carga superficial positiva (8 a 12 mV), as quais puderam ser precisamente controladas por meio de ajustes na composição dos derivados de quitosana e pelo pH das formulações. As nanoplataformas complexaram eficientemente o siRNA, minimizando a degradação dos ácidos nucleicos pela ação dos radicais hidroxila e pelo ataque da RNAse, além de apresentarem elevada estabilidade estrutural e coloidal na presença de proteínas séricas. Adicionalmente, observou-se que os policátions liberaram o PEG-SH em ambiente redutor e apresentaram biodegradabilidade similar à da quitosana frente ao ataque da lisozima, o que embasou uma possível via de liberação intracelular do siRNA. Os vetores apresentaram baixa citotoxicidade em diferentes linhagens celulares e mediaram níveis de silenciamento de proteína verde fluorescente (GFP) em células HeLa (≤ 50%) e do fator de necrose tumoral alfa (TNFα) em macrófagos RAW (≤ 60%) similares aos alcançados pela Lipofectamina™. Formulações para uso tópico contendo os vetores da Série II aumentaram em até 4 vezes a retenção do siRNA em modelos de pele artificial (Strat-M®) e de origem animal (orelha de porco). Esses resultados foram corroborados pelos estudos in vivo em gerbilos da Mongólia (Meriones unguiculatus), que revelaram a presença de nanopartículas em diferentes camadas da epiderme/derme e indicaram que os folículos capilares são uma importante via para penetração dos nanocarreadores na pele. O uso tópico destas formulações carregadas com siRNA anti-TNFα melhoraram o aspecto geral da pele de modelos animais com psoríase induzida via Imiquimod, diminuindo a infiltração de células, a densidade de vasos sanguíneos e a concentração de TNFα no local da inflamação. Os resultados obtidos destacam o potencial dos vetores no desenvolvimento de formulações de uso tópico, em especial, aquelas voltadas para o tratamento da psoríase.
  • ItemTese de doutorado
    Solventes Eutéticos Profundos Naturais (NADES): preparo, caracterização e aplicação na determinação de contaminantes inorgânicos em amostras ambientais
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-06-07) Ferreira, Sabrina dos Santos ; Gonzalez, Mario Henrique ; Gomes, Paulo Clairmont Feitosa de Lima
    O desenvolvimento de solventes verdes é um exemplo dos esforços para a produção de novos materiais sustentáveis com base nos princípios da Química Analítica Verde (GAC). Os solventes eutéticos profundos naturais (NADES) e os solventes eutéticos profundos à base de aminoácidos (AADES) são uma nova possibilidade de misturas, caracterizados pela baixa toxicidade, biodegradabilidade e simplicidade de preparação que tem apresentado uma diversidade de aplicações na Química e especialmente no preparo de amostras. Neste trabalho foi realizado o desenvolvimento de dois novos métodos de preparo de NADES e AADES: por agitação e por rotaevaporação. Foram preparados NADES à base de ácido cítrico/xilitol/água e ácido cítrico/ácido málico/água na proporção em massa de 42:13:45 (% m m-1) e AADES à base de ácido cítrico/β-alanina/água na proporção em massa de 43,75:12,5:43,75 (% m m-1). A presença de ligações de hidrogênio, que caracterizam a formação do solvente, foi evidenciada por análises de espectroscopia de infravermelho (IV). Algumas propriedades físico-químicas foram avaliadas como, densidade, viscosidade, ponto de fusão e polaridade e observou-se que os métodos de preparo empregados foram capazes de modular a viscosidade desses NADES e AADES em decorrência da perda de água durante o processo. Esta composição de solventes NADES e AADES também foi utilizada no preparo de amostra de solo, lodo e sedimento. O método de extração assistida por micro-ondas (MAE) com detecção por espectrometria de massa com plasma acoplado indutivamente (ICP-MS) foi otimizado por um planejamento fatorial Doehlert que indicou uma condição ótima de extração de 140ºC por 50 min com a razão m/V de 60:1 utilizando os solventes à base de xilitol e de β-alanina para extração de As e Cd . Neste trabalho também foi apresentada a comparação entre cinco diferentes métricas (NEMI, GAPI, Analytical Eco Scale, AGREE e WAC) de avaliação das características ambientalmente amigáveis de três métodos de preparo de amostras de material vegetal (MAE, UAE e MW-AD) empregando NADES e ácido nítrico como solventes extratores de analitos inorgânicos. Com exceção do NEMI, todas as ferramentas utilizadas, com diferentes níveis de complexidade, mostraram-se úteis para avaliar e comparar o verde dos métodos de preparo das amostras de acordo com os objetivos do avaliador, e foram capazes de incluir os principais princípios da GAC.
  • ItemTese de doutorado
    Redução de sódio em produtos cárneos com atividade de água intermediária e sorção de água: caso da copa
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-05-03) Ignácio, Eduardo Oliveira ; Barretto, Andrea Carla da Silva ; Romero, Javier Telis
    Esta tese investigou algumas estratégias no desafio de produzir carne curada com redução de sódio, diante da crescente demanda por alimentos mais saudáveis e da preocupação com os impactos do consumo excessivo de sódio na saúde, especialmente relacionados a doenças cardiovasculares e hipertensão. A estrutura foi dividida em capítulos para propiciar uma organização lógica e coerente do conteúdo, otimizando a compreensão e facilitando o processo de revisão e correção, além de possibilitar a publicação de partes da pesquisa como artigos científicos independentes, amplificando a visibilidade do trabalho no âmbito acadêmico. O estudo iniciou com uma revisão de literatura sobre as estratégias e os desafios de se reduzir o teor de sódio em produtos cárneos com atividade de água intermediária. Na sequência, avaliou se o efeito da substituição parcial de NaCl por KCl e CaCl2 em copa seca e curada nas propriedades físico-químicas e aceitação sensorial. Foram realizados cinco tratamentos: Controle (CON) com 100% de NaCl; “25K” com redução de 25% de NaCl e adição de 25% de KCl; “25KCa” com redução de 25% de NaCl, adição de 15% de KCl e 10% de CaCl2; “50K” com redução de 50% de NaCl e adição de 50% de KCl; e “50KCa” com redução de 50% de NaCl e adição de 25% de KCl e 25% de CaCl2. Observou-se que a redução de até 50% não afetou a aceitabilidade global, sendo a substituição parcial do NaCl uma alternativa viável. Por fim, a pesquisa examinou a composição química e as isotermas de sorção de oito copas comerciais em diferentes temperaturas (5, 10, 20, 30 e 40°C). As informações sobre o comportamento das copas comerciais em relação à umidade podem auxiliar na tomada de decisões relacionadas ao armazenamento, embalagem e controle de qualidade. Foram observadas diferenças na composição química, e as isotermas de sorção foram classificadas como tipo II, exibindo um comportamento sigmoidal. O modelo matemático GAB apresentou o melhor ajuste aos dados experimentais (R²adj ≥ 0,99, χ² ≤ 3,84.10⁻⁴ e REQM ≤ 0,02). O teor de umidade da monocamada (Xm) diminuiu com o aumento da temperatura. Os resultados obtidos, em geral, apresentaram contribuições para a indústria de alimentos, sugerindo métodos para desenvolver carnes curadas mais saudáveis, que alinham a produção às preocupações contemporâneas de saúde pública, sem comprometer as características desejadas pelos consumidores.
  • ItemTese de doutorado
    "Crônicas da vida operária": forma e sentido no processo de construção da personagem-narrativa
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 0024-02-22) Tavares, Danieli ; Alves, Maria Cláudia Rodrigues
    A proposta deste trabalho incide na interpretação da personagem-narrativa em Crônicas da vida operária, de Roniwalter Jatobá (1978). A obra surge em contexto com uma preocupação enunciativa do autor, a de escrever para e sobre os operários. Sob esse valor, o autor acaba experimentando muitos procedimentos de composição da narrativa na literatura brasileira da década de 1970. Entender os modos de narrar os contos e sua operatividade, em contexto com o processo de construção da personagem-narrativa, faz-se nosso objetivo principal. No jogo de escolhas de leitores, de missão, de sentidos e de materialidades linguísticas, consideramos a personagem-narrativa a motivação fecunda para o projeto da obra, e mais especificamente, para que o leitor mobilize suas próprias experiências. A realização do percurso interpretativo efetivase com os estudos sobre a construção da narrativa e da personagem; com os procedimentos de análise literária e com uma abordagem interpretativa que enfatiza, na relação entre personagem e narrativa, o lirismo na crueldade e o circuito da esperança e da desesperança. Entendemos que o aspecto verbal do texto, em uma perspectiva transdisciplinar, é ao mesmo tempo estrutura verbal, à medida que dá forma ao texto, e estrutura afetiva, pelo modo como chega ao leitor. Nesse sentido, nossos pressupostos teóricos abrangem o caráter humanizador da literatura de Roniwalter Jatobá, o aspecto ficcional como ato intencional de reconstrução de um imaginário e as evidências dos efeitos estéticos como um complexo princípio metodológico
  • ItemTese de doutorado
    Propriedades físico-químicas, morfológicas e funcionais de farinhas de feijão azuki e fava e seu desempenho na microencapsulacão de óleo de buriti
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-05-09) Fuzetti, Caroline Gregoli ; Nicoletti, Vânia Regina
    A microencapsulação tem sido amplamente utilizada pela indústria alimentícia e farmacêutica para proteger compostos sensíveis à degradação, como o β-caroteno encontrado no óleo de buriti (Mauritia flexuosa L.). Essa técnica envolve o encapsulamento dessas substâncias em matrizes, frequentemente combinadas por proteínas e polissacarídeos, para garantir sua estabilidade e prolongar sua vida útil. Com a contínua expansão da população mundial, um desafio nos dias de hoje é o consumo de proteínas de baixo custo e que sejam obtidas de fontes sustentáveis. As fontes de proteínas vegetais, como os cereais, leguminosas e oleaginosas, oferecem grande variedade e qualidade nutricional equilibrada com alto teor proteico. Nos últimos anos, o interesse por ingredientes alimentícios derivados de leguminosas tem aumentado devido ao seu potencial nutricional. Amplamente cultivadas em todo o mundo, as leguminosas são utilizadas como fonte proteica, principalmente por pessoas com hábitos alimentares vegetarianos. Dentre as leguminosas, as farinhas de feijão têm recebido destaque devido à sua riqueza em proteínas, fibras e nutrientes essenciais. O feijão azuki (Vigna angularis L.) e feijão fava (Phaseolus lunatus L.) são materiais promissores para a produção de matrizes encapsulantes, devido às suas propriedades funcionais e nutricionais. O processamento adequado dessas farinhas é fundamental para otimizar suas propriedades e aplicações. Neste contexto, este estudo investigou o impacto de diferentes pré-tratamentos físicos como imersão, calor úmido (fervura) e calor seco (tostagem), nas propriedades físicas dos grãos de feijão azuki e fava, bem como seus efeitos nas propriedades físico-químicas, morfológicas e tecnofuncionais das farinhas obtidas desses *grãos. Os tratamentos térmicos modificaram estruturalmente os grãos, afetando as dimensões físicas e as propriedades gravimétricas, reduzindo as propriedades de pasta, emulsificação, formação de espuma e gelificação das farinhas. As farinhas obtidas dos grãos crus e tratados por imersão apresentaram melhores propriedades tecnofuncionais. Os estudos de sorção de umidade revelaram diferenças entre os feijões, com a farinha de feijão fava apresentando maior capacidade de adsorção de água. Para ambas as farinhas, a capacidade de sorção diminuiu significativamente com o aumento da temperatura, o modelo GAB ajustou-se aos dados experimentais e foi escolhido para descrever as isotermas, que corresponderam às características de isotermas tipo II, conforme classificação de Brunauer. O calor isostérico líquido de sorção diminuiu com o aumento do teor de umidade de equilíbrio. Microcápsulas de óleo de buriti foram produzidas utilizando misturas biárias de maltodextrina com farinhas de feijão azuki e fava, apresentando bons resultados em termos de retenção de carotenoides, eficiência de encapsulação, rendimento do processo, solubilidade e higroscopicidade. O processo de microencapsulação proporcionou boa estabilidade ao óleo durante o armazenamento. Estes resultados apontam para potenciais aplicações das farinhas de feijão pré-tratadas e das microcápsulas de óleo de buriti como pigmento ou ingrediente na indústria alimentícia e farmacêutica.
  • ItemTese de doutorado
    Valorização do bagaço de malte usando ultrassom e peróxido de hidrogênio: um estudo visando sua estabilização, processamento e conversão em produtos de valor agregado
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-05-02) Sanches, Marcio Augusto Ribeiro ; Telis-Romero, Javier ; Polachini, Tiago Carregari ; Augusto, Pedro Esteves Duarte
    O bagaço de malte (BSG) é um coproduto que representa a maior parte dos resíduos gerados pela indústria cervejeira, totalizando cerca de 85%. A fim de maximizar o aproveitamento dessa biomassa e promover a economia circular, é fundamental abordar os desafios que permeiam desde sua estabilização inicial até o uso final desse recurso. Entre esses desafios, destaca-se a necessidade de aprimorar as etapas de pré-tratamento para viabilizar a conversão do BSG em produtos de valor agregado. Nesse contexto, a presente tese de doutorado tem como objetivo geral avaliar os diversos processos envolvidos desde a estabilização até os pré-tratamentos utilizando peróxido de hidrogênio alcalino (AHP) e/ou ultrassom de alta intensidade (US), visando melhorar a extração de proteínas e aumentar a acessibilidade do BSG pré-tratado para facilitar sua sacarificação subsequente. Inicialmente, foram investigadas as propriedades de sorção de água do BSG, com o intuito de preparar e estabilizar a biomassa para as etapas seguintes. Em seguida, analisou-se o efeito do processamento com diferentes concentrações de AHP (1–8%) e BSG (2–8%), submetidos a diferentes tempos de processamento (0–12 h), na composição química, morfologia, cristalinidade, modificações de grupos funcionais e comportamento reológico das suspensões de BSG ao longo do processamento. Posteriormente, avaliou-se a extração de proteínas do BSG utilizando ultrassom (1200 W) e peróxido de hidrogênio alcalino (3%), bem como seu impacto no rendimento da extração, propriedades estruturais (morfologia por SEM; estruturas secundárias por FTIR e tamanho dos cristais por DRX do concentrado proteico) e tecno-funcionais (capacidade de retenção de água e de óleo, capacidade de formação e estabilidade da emulsão e de espuma e cor instrumental). Em relação as propriedades de adsorção de água do BSG obtido do processo cervejeiro à base de malte de cevada (“Lager” – BSGL) e de trigo (“Weiss” – BSGW), o aumento da umidade relativa e a redução da temperatura levaram a um aumento na umidade de equilíbrio dos BSGs. As propriedades de ligação à água foram ligeiramente prejudicadas pelos maiores teores de proteína observados em BSGW. O modelo GAB foi eficaz na descrição das isotermas de adsorção, fornecendo informações sobre a umidade da monocamada em uma ampla faixa de temperatura. As análises termodinâmicas evidenciaram que os processos de adsorção foram impulsionados pela entalpia e não ocorreram espontaneamente. Uma umidade relativa de 40% foi identificada como ideal para o armazenamento dos BSGs. No que diz respeito ao processamento com AHP, observou-se que o aumento da concentração de AHP e o tempo de processamento melhoraram a remoção de proteínas, lignina e extrativos do BSG, resultando em mudanças morfológicas que indicam um aumento da acessibilidade do material. Além disso, as suspensões de BSG apresentaram comportamento não newtoniano, com aumento da resistência ao fluxo devido ao incremento da concentração de AHP, BSG e, principalmente, tempo de processamento, o que estão relacionadas com as mudanças estruturais das partículas. Por sua vez, as diferentes estratégias envolvendo ultrassom e AHP demonstraram melhorias no rendimento de extração e impactaram positivamente as propriedades estruturais e tecno-funcionais dos concentrados proteicos. A utilização dessas abordagens promissoras mostra-se como uma maneira eficaz de intensificar a extração de proteínas e aumentar a acessibilidade do BSG pré-tratado, podendo facilitar sua subsequente sacarificação. Em conclusão, o uso de AHP e/ou US apresenta-se como uma abordagem promissora para melhorar a extração de proteínas e aumentar a acessibilidade do BSG pré-tratado, contribuindo para sua utilização eficiente e agregando valor a esse coproduto da indústria cervejeira.
  • ItemTese de doutorado
    Determinantes estruturais da atividade necrótica e epidermolítica de toxinas esfoliativas produzidas por bactérias dos gêneros Mammaliicoccus e Staphylococcus
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-04-29) Gismene, Carolina ; Arni, Raghuvir Krishnaswamy ; Mariutti, Ricardo Barros ; Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas
    Mammaliicoccus sciuri é uma bactéria comensal e patogênica de relevância clínica e veterinária. Recentemente uma cepa de M. sciuri foi descrita como agente etiológico da epidermite exsudativa (EE) em suínos e o principal fator de virulência envolvido nesta manifestação clínica foi a toxina esfoliativa C (ExhC). Essa enzima pertence ao grupo de toxinas esfoliativas (ETs), comumente descritas como glutamil endopeptidases semelhantes à quimotripsinas. No entanto, ao contrário da maioria dos membros desta família, as ETs são inativas contra uma ampla gama de substratos, apresentando alta especificidade à desmogleína1 (Dsg-1), uma proteína de adesão que é crucial para manter a integridade da pele. A clivagem da Dsg-1 causa esfoliação da epiderme de mamíferos e aumenta a eficiência da invasão e infecção do hospedeiro por bactérias patogênicas. Esta especificidade ao substrato sugere que, além da tríade catalítica H57-D102-S195, outras regiões desconhecidas da superfície das ETs e Dsgs-1 podem ser essenciais para desencadeamento da atividade epidermolítica. A ExhC tem importância adicional pois, além de causar EE em suínos e esfoliação de pele em camundongos, é capaz de induzir necrose em múltiplas linhagens celulares de mamíferos e de inibir a atividade fagocítica de macrófagos, propriedades não observadas para outras ETs. Experimentos anteriores indicaram que interações específicas com o fragmento ExhC44-92 são responsáveis pela atividade necrótica observada. A partir dessa observação, estudou-se a mutagênese sítiodirigida de resíduos específicos não conservados dentro deste domínio, possibilitando a construção de uma variante de ExhC com mutação em quatro resíduos (ExhCmut4) sem potencial necrótico, mas mantendo níveis de atividade enzimática similares da ExhC selvagem (ExhCwt). Ademais, a determinação das estruturas cristalinas de ExhCwt e ExhCmut4 garantiu a identificação da região associado à necrose. Apesar dos avanços na compreensão de como essa toxina atua, ainda não havia a descrição de inibidores para as múltiplas funções exercidas pela ExhC, assim como seus potenciais alvos moleculares durante os processos de necrose celular e inibição da atividade fagocítica de macrófagos. Para responder a essas questões, utilizamos a técnica de phage display e identificamos a Prenylcysteine oxidase-1-like protein de M. musculus como um potencial alvo da ExhC. A mesma técnica possibilitou a descoberta de peptídeos que atuam como inibidores e ativadores que modulam a atividade enzimática desta toxina. Os resultados obtidos tendo como alvo a ExhC, forneceram insights para investigações com à toxina esfoliativa E (ETE), a qual forma dímeros em solução. Essa informação, em conjunto com o fato de a ExhC ser encontrada como dímero na natureza, tornaram-se indicativos de que a homodimerização pode ser uma propriedade generalista entre as ETs, desempenhando papel funcional. No geral, os resultados aqui descritos representam avanços a respeito dos mecanismos de ação exercidos pela ExhC, contribuindo para uma compreensão mais profunda das ETs em um contexto amplo.
  • ItemTese de doutorado
    A polêmica, no campo político, sobre a legalização da maconha medicinal no Brasil: uma abordagem discursiva
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-09-06) Felipe, Mariana Alves Machado Pelegrini ; Brunelli, Anna Flora
    Este trabalho de investigação verifica em que medida se dá a relação entre os discursos que circulam atualmente em nossa sociedade a respeito de uma possível legalização da maconha no país. Para tanto, mobilizando conceitos concernentes à Análise do Discurso Francesa, mais especificamente os pressupostos teóricos de Dominique Maingueneau (2008 [1984]), partimos da premissa de que, se o interdiscurso precede o discurso, como entende o autor, os discursos que circulam em torno do tema da legalização da maconha no Brasil emergem a partir de uma relação polêmica. Em nosso trabalho de análise, identificamos o campo político como fronteira na qual o embate parece ser frutífero, em um espaço discursivo onde dois posicionamentos lutam pela legitimidade enunciativa a respeito de uma possível liberação da maconha no país – posicionamentos a que chamamos conservador e progressista. O que se percebe, na circulação desses discursos, é que, por parte de quem é contra a legalização – os conservadores –, a aprovação do PL 399/2015 pressupõe promover a liberação de drogas no país; o discurso de quem é a favor – os progressistas –, por sua vez, defende que a aprovação do projeto promoverá acesso a medicamento para a população que precisa. Esse desentendimento recíproco, que aparece como elemento fundador da relação polêmica, está vinculado à grade semântica de cada um desses discursos. Sendo assim, tais posicionamentos só podem relacionar-se por meio de uma interincompreensão generalizada, já que lutam pela validade enunciativa em um espaço discursivo. Não parece possível, pois, que esses discursos coexistam de qualquer outro modo que não seja por meio de uma relação polêmica (Maingueneau, 2008 [1984]), na qual o Outro é sempre entendido nos termos de um simulacro.
  • ItemTese de doutorado
    Método de obtenção de membrana de colágeno para enxertia tecidual: novo tratamento de descelularização do pericárdio bovino
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-04-15) Giorgi Filho, Rui Carlos ; Nery, José Geraldo
    A obtenção de colágeno a partir de fontes animais tem demonstrado ser um processo economicamente viável e lucrativo. O pericárdio bovino é uma biomassa abundante e com aplicabilidade na Engenharia de Tecidos, e a descelularização é uma condição fundamental para que este material seja biocompatível e se ajuste a aplicações médicas. Este estudo teve como objetivo otimizar a descelularização do PB, integrando parâmetros físicos e químicos e avaliando seus efeitos na eliminação do DNA nativo, na preservação da matriz extracelular e na biocompatibilidade. Neste trabalho, exploramos a combinação do congelamento-descongelamento do PB seguido de tratamento em solução de Desoxicolato de Sódio para desenvolver um protocolo de descelularização e produção de membranas tipo scaffolds para aplicação em regeneração tecidual guiada. O uso de Desoxicolato de Sódio no processo de descelularização, para remoção de componentes celulares do pericárdio bovino, trouxe vantagens em relação a outros métodos de descelularização de membranas biológicas já publicados ou patenteados. Neste trabalho, fornecemos informações úteis sobre o impacto de concentrações mais baixas de Desoxicolato de Sódio na eficiência da eliminação de DNA nativo e em relação à preservação da matriz extracelular. Avaliamos o comportamento biomecânico dos tecidos preparados em comparação com sua forma nativa e, enfim, se houve resposta citotóxica das membranas in vitro. A microscopia da superfície revelou a preservação dos feixes de fibras e sua natureza anisotrópica, enquanto as lâminas histológicas evidenciaram ausência de núcleos visíveis com aparente retenção de glicoproteínas. O protocolo SD010, compreendendo congelamento-descongelamento, agitação em solução de Desoxicolato de Sódio de baixa concentração (0,10% m/v) e limpeza salina completa, destacou-se como um método promissor para descelularização do PB. A análise histológica revelou eliminação bem-sucedida de componentes celulares, com SD010 exibindo descelularização completa. A quantificação do DNA nas amostras tratadas com o protocolo SD010 indicou uma redução significativa do conteúdo de DNA (cerca de 85,7%). A eletroforese reforçou esta análise, permitindo identificar que as moléculas de DNA em todas as amostras mantiveram seu comprimento nativo. A microscopia eletrônica de varredura confirmou a preservação da arquitetura da matriz extracelular após o tratamento. Os testes biomecânicos demonstraram mínimo impacto nas propriedades mecânicas dos tecidos tratados. O potencial do protocolo SD010 para aplicações do pericárdio bovino descelularizado como enxerto heterólogo foi apoiado por testes de biocompatibilidade, conforme evidenciado pela proliferação de fibroblastos in vitro. Os resultados indicaram um método eficiente para a descelularização do pericárdio bovino, destacando sua utilidade para o reaproveitamento de resíduos de biomassa produzidos pela indústria alimentícia e de saúde.
  • ItemTese de doutorado
    Cultivo do fungo Lentinula edodes com reaproveitamento do substrato cultivado para alimentação de bovinos
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-07) Garcia, Renata Laurito ; Thoméo, João Cláudio ; Reis, Ricardo Andrade
    A alimentação bovina é uma atividade que sofre influência de diversos fatores, sendo a principal a disponibilidade sazonal de pastagens e forragens, o que impulsiona a busca por novas fontes de alimento. Resíduos sólidos agroindustriais podem ser aplicados na alimentação de ruminantes, mas seu aproveitamento pelos animais é reduzido pela presença de grande quantidade de lignina nestes materiais. O cultivo de cogumelos comestíveis emprega resíduos agroindustriais como substrato para o seu cultivo. Os resíduos sofrem alterações em sua estrutura devido à ação enzimática, liberando cadeias de celulose e hemicelulose que podem ser consumidas por ruminantes. Dessa forma, este trabalho teórico propõe a integração entre as atividades de cultivo de cogumelos comestíveis e alimentação de bovinos, a partir da aplicação do composto cultivado pelo cogumelo, na alimentação bovina. A partir de dados disponíveis na literatura, foram selecionados os meios de cultivo resíduo de cervejaria (RC), palha de arroz (PA), casca de café (CC), casca de soja (CS) e caroço de algodão (CA), os quais atenderiam simultaneamente os requisitos nutricionais dos cogumelos e dos animais, sendo o fungo Lentinula edodes (Shiitake) selecionado para este estudo. Estes meios foram avaliados quanto a sua composição antes e após o cultivo, sendo que a composição após o cultivo foi considerada em relação a sua adequação para alimentação de bovinos, calculando-se sua digestibilidade e quantidade de nutrientes disponíveis aos animais. O substrato que melhor se adequou às exigências nutricionais bovinas foi composto por RC:PA:CA na proporção 2:2:1 (b.s.). Este meio apresentou redução de quase 30% no teor de lignina após o cultivo por Shiitake. Para o estudo de integração, foram considerados bovinos de peso inicial 400 e peso final 600 kg, sendo necessários 11,85 kg/dia de substrato cultivado para satisfazer todas as exigências de consumo de matéria seca, teor proteico e energia metabolizável do animal, estimando-se a digestibilidade deste substrato em 68,70%, com ganho de peso de 1,5 kg/dia. Tendo como base de cálculo 100 animais, foi projetada uma biofábrica de produção de Shiitake para operar em ciclos semanais que resultariam na produção de 8,3 t de material cultivado por semana. Para que o fornecimento semanal de composto seja possível, foi necessário adaptar o processo tradicional de cultivo, separando-se as fases de miceliação e frutificação em salas independentes. A avaliação econômica estimou valores de R$ 3.427.851,50 e R$ 690.940,50 para as despesas de capital (CAPEX) e despesas operacionais (OPEX) e os indicadores econômicos obtidos foram compatíveis com empreendimentos de biotecnologia. O preço de venda do composto cultivado ao criador de ruminantes foi estimado em R$ 3,77 próximo àqueles encontrados no mercado de alimentação de bovinos, enquanto o cogumelo deverá ser vendido a, no mínimo, R$ 11,40/kg. Por satisfazer todas as exigências nutricionais bovinas sem a necessidade de suplementação ou combinação com outras fontes de alimento, o composto proposto neste projeto apresenta vantagem em relação às rações de menor preço encontradas no mercado, além de contribuir com a sustentabilidade ambiental.
  • ItemTese de doutorado
    Síntese, atividades antibacteriana, antimicobacteriana e toxicidade de bavachalcona e análogos
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-02-21) Costa, Maria Beatriz Silva ; Regasini, Luis Octávio
    As enfermidades causadas por bactérias apresentam um desafio para a saúde mundial, afetando milhões de indivíduos em escala global. No contexto brasileiro, uma das doenças bacterianas mais comuns e capaz de ocasionar complicações graves é a tuberculose, sendo uma das dez principais causas de mortalidade. Assim, os fármacos antibacterianos, incluindo os tuberculostáticos, são cruciais à manutenção da expectativa de vida. Inúmeras razões justificam a necessidade por novos agentes antibacterianos, destacando-se a elevada taxa de morbimortalidade e o surgimento de cepas resistentes a antibióticos. Diante disso, a presente tese teve como objetivo a síntese e avaliação antibacteriana e antimicobacteriana de bavachalcona (BVC), uma chalcona tri-hidroxilada e C-isoprenilada. Considerando as evidências das propriedades farmacológicas de BVC, foi planejada e sintetizada uma série de 16 análogos chalcônicos de BVC com modificações no anel B. Dentre esses, onze análogos são chalconas conhecidas e oito são substâncias inéditas. As substâncias foram sintetizadas em cinco etapas, incluindo iodação regiosseletiva, condensação de Claisen-Schmidt, proteção/desproteção com o grupo metoximetila e acoplamento de Suzuki-Miyuara, obtendo rendimentos globais de 1 a 22%. A atividade antibacteriana da BVC e análogos foi avaliada in vitro contra espécies Gram-positivas, Gram-negativas e micobactérias. BVC e seus análogos tiveram ação antibacteriana contra Streptococcus sanguinis (CIM = 6,25 - 12,5 μg/mL), Streptococcus sobrinus (CIM = 3,12‒25 μg/mL), e Streptococcus mutans (CIM = 3,12 – 25 μg/mL). A atividade antimicobacteriana de BVC e análogos foi avaliada contra M. tuberculosis H37Rv e mostraram efeitos contra M. tuberculosis (CIM90= 2,56 -18,64 μg/mL). Os análogos BVC 12, BVC 14 e BVC 16 foram os mais promissores, uma vez que apresentaram os menores valores de CIM contra M. tuberculosis H37Rv e baixa toxicidade contra fibroblastos de pulmão humano e larvas de Galleria mellonella. Esses resultados corroboraram BVC e análogos como hits para a descoberta de novos agentes capazes de combater bactérias patogênicas humanas.
  • ItemTese de doutorado
    Anel de inteiros algébricos e discriminante de uma família de corpos de números cujo grau é uma potência de 2
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-07) Esteves, Livea Cichito ; Andrade, Antonio Aparecido de
    O objetivo deste trabalho é apresentar a estrutura do anel de inteiros algébricos e o discriminante do anel de inteiros algébricos de corpos de números do tipo L=Q (θ), onde θ=\sqrt[2^k]{d} e d ≠1 é um inteiro livre de quadrados. Inicialmente, apresentamos a estrutura dos anéis de inteiros algébricos dos corpos L=Q(\sqrt[2^k]{d}) com d ≡ 2,3(mod 4) onde, nesse caso, L é monogênico. Na sequência, apresentamos bases integrais e os respectivos discriminantes para alguns corpos da forma Q(\sqrt[2^k]{d}), para k=2,3,4, 5, onde exploramos as estruturas dos anéis de inteiros algébricos de acordo com os valores de d. Posteriormente, como resultados principais desta tese, generalizamos essas bases e, com isso, também determinamos uma fórmula para o discriminante do anel de inteiros algébricos desses corpos L. Nessa linha, apresentamos essas generalizações da seguinte forma: quando d ≡ 5 (mod 8), quando d ≡ 9 (mod 16) e, por fim, englobando todos os casos, apresentamos uma base integral e o discriminante do anel de inteiros algébricos dos corpos puros Q(\sqrt[2^k]{d}) para d ≡ 2^l+1 (mod 2^{l+1} ), onde 2 ≤ l ≤ k-1 e para d ≡ 1(mod 2^{k+1}).
  • ItemTese de doutorado
    Deu a louca na princesa: do conto de fadas tradicional à Hollywood do século XXI
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-07) Amorim, Inessa Rosa de ; Pereira, Nilce Maria
    Esta tese consiste na análise da representação da figura da princesa em contos de fadas clássicos e em adaptações cinematográficas contemporâneas, tendo-se elegido para o estudo os seguintes filmes de animação, que situam a princesa fora de seu contexto tradicional: Shrek [Shrek] (2001), Shrek 2 [Shrek 2] (2004), Shrek, the Third [Shrek Terceiro] (2007), Shrek Forever After [Shrekpara Sempre] (2010) Happily N'Ever After [Deu a Louca na Cinderela] (2006), Brave [Valente] (2012), Wreck-It Ralph [Detona Ralph] (2012) e Ralph Breaks the Internet [Wi-Fi Ralph: Quebrando a Internet] (2018). Primeiramente, buscou-se realizar uma investigação das características da princesa clássica, em particular, nos contos de Charles Perrault, Irmãos Jacob Grimm e Wilhelm Grimm e Hans Christian Andersen, com o propósito de verificar a sua constituição formal na narrativa desse gênero literário: os conflitos entre bem e mal, os elementos maravilhosos, o papel do príncipe, que salva a princesa e restaura a harmonia nos finais das histórias, entre outras características. Com base nesses fundamentos, propôs-se, em seguida, examinar as representações da princesa em versões fílmicas, concentrando-se primeiro nas adaptações realizadas pelos estúdios de Walt Disney no decorrer do século XX e, na sequência, nas produções elegidas como corpus de estudo, a partir dos anos 2000. Observou-se que, principalmente nas versões contemporâneas, a princesa clássica passa por um processo de remodelagem, com mudanças significativas de postura e atitudes. Numa análise para estabelecer os principais aspectos de sua transformação e a maneira como ocorrem, sugerimos como hipótese de trabalho que, embora graduais e enfocando diferentes traços da personagem a cada vez, a princesa é reconfigurada de um modo muito rápido para o período de menos de vinte anos, contemplado no estudo (se comparado à mudança de mentalidade em gerações anteriores), o que também delineia a influência dos (novos) padrões comportamentais e da visão da mulher na literatura e na arte da contemporaneidade. Os estudiosos Nelly Novaes Coelho (2010), Jack Zipes (2006), Katia Canton (1994), entre outros são algumas referências para embasar a trajetória histórica dos contos de fadas, para a visualização de cuja estrutura são ainda empregadas as teorias de Vladimir Propp (1984; 2002). Robert Stam (2008) e Linda Hutcheon (2013), por sua vez, são utilizados para auxiliar nas teorias sobre adaptações fílmicas. Finalmente, teóricos que abordam a mulher, questões femininas e a contemporaneidade incluem, em particular, Naomi Wolf (2018), Karen Rowe (1986) e Simone Beauvoir (1970).
  • ItemTese de doutorado
    Uva BRS Vitória e Batata Doce Roxa JNRX12: valorização como matéria-prima no desenvolvimento de barra de vegetais
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-08-02) Garcia-Santos, Mariana de Souza Leite ; Vanzela, Ellen Silva Lago ; Janzantti, Natália Soares ; Silva, Roberto da
    A uva BRS Vitória (CNPUV 681-29 [Arkansas 1976 x CNPUV 147-3 (‘Niágara Branca’ x ‘Vênus’)] x ‘BRS Linda) e a batata doce roxa da cultivar JNRX12 (BDR, Ipomeas batatas (L.) LAM.) são vegetais com elevada concentração de compostos fenólicos (CF). A aplicabilidade destes dois vegetais como matéria-prima para o desenvolvimento de barras de vegetais (BVs) com apelo para a saudabilidade foi investigada. Para tanto, esta pesquisa constituiu-se de quatro objetivos principais: a) a determinação da composição qualitativa e quantitativa das principais antocianinas presentes na uva BRS Vitória, por meio de cromatografia líquida de alta eficiência com detectores de arranjo de diodos acoplada à espectrometria de massas por sistema de ionização por eletronebulização (HPLC–DAD–ESI-MS/MS); b) a caracterização morfológica e físico-química de três ciclos produtivos (CPs) da uva e de um CP da BDR; c) a composição qualitativa e quantitativa de minerais presentes nos CPs da uva e no CP da raiz de BDR (no formato marjoritário), por meio de espectrometria de massa por plasma indutivamente acoplado (ICP-MS); d) e por fim, o desenvolvimento de BVs desidratadas a 60 ºC, composta por purê de maçã, polpa de uva e purê de BDR, e subsquente realização da caracterização físico-química dos produtos obtidos. Diante dos resultados, verificou-se que a uva BRS Vitória apresentou um complexo perfil de antocianina, com predominância das derivadas da malvidina (mv), bem como concentrações importantes de antocianinas totais (139,09 mg mv-3,5-diglc•kg-1) e minerais, especialmente de potássio (K, 345,16 mg•100 g-1) e ferro (Fe, 0,54 mg•100 g-1). Após avaliar as características morfológicas e físico-químicas dos três CPs da uva, verificou-se que não houve variação em relação à maioria das características avaliadas entre os CPs, e que suas características atendem as principais exigências de mercado tanto para o comércio in natura quanto para o processamento. Vale ressaltar que o CP3 avaliado apresentou os maiores valores de massa de cacho e, comprimento e diâmetro de bagas, bem como de concentração de macrominerais; assim como para o CP4 (colheita principal) apresentou maior índice de maturação (38,68) e importante concentração de compostos fenólicos totais (CFT, 412,92 mg EAG•100 g•kg uva-1). Com relação ao CP da BDR, pode-se destacar que foram identificados nove formatos das raízes, com a redonda elíptica como predominante (34,87%). Houve diferença significativa entre os formatos para os parâmetros de largura, diâmetro e massa, entretanto, todos os valores apresentados são recomendados para a comercialização da raiz no mercado brasileiro. O CFT e antocianinas monoméricas totais (AMT) nos diferentes formatos das raízes variaram entre 204,52 a 258,16 mg EAG•100 g BDR-1, e 36,01 a 61,28 mg mv-3,5-diglc•100 g de BDR-1, respectivamente. O formato majoritário da raiz redonda elíptica apresentou valores significativos para K (511,08 mg•100g-1) e P (96,40 mg•100g-1). Portanto, ambas as matérias-primas estudadas apresentaram concentrações de CF consideráveis, bem como de minerais, encorajando os estudos na utilização como ingredientes saudáveis para a elaboração das BVs. As BVs foram elaboradas com uma proporção de purê de maçã: polpa de uva: purê de BDR nas proporções de 50:40:10 (m/m/m), após diferentes testes preliminares para padronização das etapas. Os produtos desenvolvidos apresentaram boa estruturação e formato de folhas finas e flexíveis, de fácil moldagem em diferentes formatos. Além disso, os resultados da caracterização físico-química demonstraram que as BVs apresentam baixo percentual de umidade e pH, que favorecem sua estabilidade microbiológica. Assim como resultaram em produtos com concentração de CFT e de AMT de 161,86 mg EAG•100 g-1, e 37,25 mv-3,5-diglc•100 g-1, respectivamente. O conteúdo de hidroximetilfurfural foi relativamente baixo para ambos os ensaios, demonstrando que o processo padronizado para obtenção das BVs não acarretou na formação de grande concentração de compostos que podem ser maléficos para a saúde. Diante dos resultados, pode-se concluir que a combinação das matérias-primas brasileiras foi possível elaborar BVs contendo importante valor nutricional e funcional e de grande praticidade de consumo, o que amplia as possibilidades de lanches rápidos e práticos para indivíduos de qualquer faixa etária.
  • ItemTese de doutorado
    Abordagem dual na investigação da proteína GRB2: exploração da interação específica e análise dinâmica do enovelamento
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-04-03) Pedro, Renan Pereira ; Melo, Fernando Alves de ; Caruso, Ícaro Putinhon ; Dias, Raphael Vinícius Rodrigues
    As células estão sujeitas a processos de regulação associados à sobrevivência, crescimento, diferenciação e apoptose. Durante o ciclo de proliferação celular, eventuais falhas podem resultar em um crescimento celular descontrolado, levando ao desenvolvimento de tumores. A via de sinalização MAPK é uma das vias impactadas por essas alterações, com a proteína adaptadora GRB2 desempenhando um papel significativo nesse contexto. A GRB2 é composta por três domínios, sendo um domínio SH2 flanqueado por dois domínios SH3 (N- e C-terminal). Embora as funções citoplasmáticas da GRB2 sejam bem conhecidas, uma nova função foi recentemente observada em vias de reparo de DNA. O reparo de quebras na fita dupla do DNA é iniciado pela proteína MRE11, direcionando a recombinação por homologia. Nesse processo, a proteína GRB2 atua como intermediária na interação entre o DNA e a MRE11, utilizando seu domínio SH2, ou seja, a proteína GRB2, através de se domínio SH2, reconhece a proteína MRE11 e a conduz para a região do DNA danificado e assim, então, iniciar a via de reparo. No entanto, até o momento, não houve investigações moleculares abordando essa interação. Com o objetivo de compreender a interação entre o domínio SH2 e o peptídeo MRE11, assim como possíveis interações com outras proteínas parceiras, foram conduzidos experimentos de 15N-HSQC-NMR. Durante a titulação entre o domínio SH2 e o peptídeo MRE11-pY, foram observadas consideráveis mudanças nos CSP dos resíduos de aminoácidos, especialmente no sítio de interação I, apresentando uma conformação inédita na literatura. Apesar de desafios de solubilidade, as análises de interação entre GRB2-SH2 e MRE11-22 indicaram uma interação significativa, conforme evidenciado por um CSP global. Experimentos de dinâmica molecular revelaram uma similaridade na forma de interação entre os peptídeos MRE11-pY e o MRE11-22. Tentativas de interação com um peptídeo curto não fosforilado, MRE11-07, não obtiveram sucesso. Experimentos adicionais com um peptídeo hipotético, MRE11-7Y, corroboraram os resultados obtidos para os peptídeos derivados de MRE11. Por fim, nas titulações entre GRB2-SH2 e peptídeos derivados da histona H2AX (H2AX-pSpY e H2AX-pS), não foram observadas perturbações químicas, indicando ausência de interação. No entanto, o peptídeo H2AX-pY demonstrou interação, sugerindo que a presença de uma fosfotirosina é crucial para a interação, enquanto a adição de uma fosfoserina impede tal interação. Esses resultados sugerem novas perspectivas para as funções da GRB2 em vias biológicas.
  • ItemTese de doutorado
    Romances-folhetins de “bom tom” para o encanto do “belo sexo”: reflexões sobre as narrativas produzidas por João Manuel Pereira da Silva.
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-08) Porto, Jakeline Longo ; Wimmer, Norma
    Esta tese tem o objetivo de estudar narrativas de ficção publicadas nos periódicos da primeira metade do século XIX pelo escritor, historiador e político João Manuel Pereira da Silva. Após um primeiro contato com o corpus, observamos que ele se dividia em três grandes eixos temáticos: narrativas fantásticas, sociais e históricas. Essa divisão foi considerada para a execução deste trabalho. A partir disso, iniciamos uma investigação de um dos critérios de julgamento para a avaliação da qualidade da prosa da época, a moralidade. Verificamos que as narrativas fazem uso do aparato de leis em vigor na época, o Código de Ordenações Filipino, e também interpõem as regras religiosas da fé em voga, a da Igreja Católica. Estudando o “projeto moralista” de Pereira da Silva, constatamos que as convenções norteadoras da prosa ficcional de Silva, estavam na esteira da ideia, muito utilizada pelos periódicos do século XIX, de instruir e divertir ao mesmo tempo. Nessa época, já se tinha em mente que a literatura tem um poder corruptor e dessa maneira, poderia moldar decisões ou, ainda, emprestar ideias a quem não as tem. Assim, era de bom tom que a disseminação de conceitos fosse referente ao princípio moralista do convívio na sociedade oitocentista.
  • ItemTese de doutorado
    Estudo da ação in vitro de peptídeos sintéticos como antivirais contra o SARS-CoV-2
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-04-02) Carvalho, Tamara de ; Calmon, Marília de Freitas ; Rahal, Paula ; Bittar, Cintia
    O coronavírus da síndrome respiratória aguda grave 2 (SARS-CoV-2) é o agente causador da Covid-19, e os primeiros casos de pacientes diagnosticados com essa doença foram na China, em dezembro de 2019. Em março de 2020, devido ao aumento expressivo no número de infectados por todo o mundo, a Organinzação Mundial da saúde declarou que estávamos vivendo um quadro pandêmico. Apesar de já existir vacina para esse vírus, ainda há necessidade de desenvolvimento de tratamento no caso de pacientes graves ou imunocomprometidos. Diante do grande problema de saúde pública mundial que o vírus SARS-CoV-2 representa, juntamente com o potencial de estudos com peptídeos antivirais, o objetivo do presente trabalho foi identificar e investigar o potencial de peptídeos inibidores de infecção por SARS-CoV-2. Para isso, três questões foram eladoradas em torno do dímero (MR1903): 1) Como a dimerização dos peptídeos está relacionada com a ação anti-SARS-CoV-2? Para responder essa questão, outros três peptídeos foram elaborados com diferentes padrões de dimerização (PE1940, MR2024, EMC2109); 2) A adição de peptídeos com característica de penetração celular pode resultar num aumento da atividade antiviral contra SARS-CoV-2? E a partir disso, outros dois peptídeos foram desenvolvidos (MC1937 e MC1947); 3) A dextrorotação do peptídeo dímerico mantêm sua atividade? E por fim, obteve-se o peptídeo contedo D-amino ácidos (NB2080). Inicialmente, foi realizado um screening com todos os peptídeos em células Vero infectadas com SARS-CoV-2. Os peptídeos MR1903, PE1940, MC1937, MC1947 e NB2080 apresentaram atividade anti-SARS-CoV-2 e foram investigados quanto ao seus mecanismos de ação, e atividade contra duas variantes (Omicron e Delta) desse vírus. Resultados demonstraram que a dimerização está relacionada com a atividade contra esse vírus. O peptídeo tetrâmero (PE1940) apresentou atividade nos estágios de entrada e pós-entrada do ciclo de replicação do SARS-CoV-2, e o dímero (MR1903), demonstrou efeito profilático e em etapas após a entrada. Já os peptídeos MC1937 e MC1947, característicos pela adição de peptídeos de penetração celular, resultaram em inibição de todas as etapas testadas do ciclo replicativo (entrada, pré tratamento, virucida e pós-entrada) do SARS-CoV-2. Por fim, o peptídeo D-amino ácido (NB2080) possui um mecanismo de ação muito semelhante a MR1903 usado nesse trabalho, porém não apresentou efeito contra as variantes testadas desse vírus.
  • ItemTese de doutorado
    Elaboração e validação de questionário de frequência de consumo alimentar e avaliação da microbiota intestinal nos diferentes tipos de dieta
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-15) Salustiano, Letícia Pacífico Queiroz ; Oliveira, Gislane Lelis Vilela ; Penna, Ana Lúcia Barretto
    As práticas alimentares dos grupos sociais distintos são determinadas por fatores diversos que vão desde a acessibilidade aos alimentos até critérios de escolha baseados em crenças religiosas, ideologias e valores culturais. Os aspectos comportamentais (sono, etilismo, medicamentos, tabagismo, prática de atividade física e composição alimentar) têm moldado a microbiota intestinal humana dominando a influência genética. A maneira mais utilizada para a obtenção de informações sobre o consumo alimentar são os inquéritos dietéticos. Considerando que não existe um QFCA no Brasil que avalie o consumo alimentar de adultos saudáveis, ponderando a interação dos nutrientes e o comportamento da microbiota intestinal, o presente estudo se propôs a elaborar e validar um QFCA e avaliar a microbiota intestinal nos diferentes tipos de dieta. O projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa, e foi obtida assinatura dos sujeitos da pesquisa pelo TCLE. Trata-se de um estudo analítico e transversal realizado na cidade de São José do Rio Preto, onde reside a população e amostragem estudada, composta por indivíduos com intervalo etário entre 18 a 60 anos. Foi realizado extração do DNA das amostras das fezes, e realizada PCR em tempo real para caracterização da microbiota intestinal. O questionário trouxe campos indagações acerca de dados demográficos, da primeira infância, mensurações antropométricas e aspectos comportamentais, além do inquérito alimentar. Foi aceito um intervalo de 95% de confiança nos testes estatísticos realizados. O questionário apresentou scores de validade, concordância, confiabilidade e consistência interna aceitáveis. As variáveis que apresentaram associação estatisticamente significante com o tipo de dieta foram: escolaridade, amamentação, exclusividade do aleitamento materno, consumo de fórmulas infantis, peso, IMC, circunferência da cintura, do quadril, religião, consumo de álcool, frequência intestinal, consistência das fezes, consumo de: leite, carnes, gordura animal, ultraprocessados, glúten, adiçante, doces/sobremesas e café (p≤0,05). Representantes dos filos Bacillota, Bacteroidota e Pseudomonadota apresentaram correlação com o tipo de dieta consumida (p≤0,05). As classe Clostridia, Bacteroidia e Betaproteobacteria foram as que diferiram significativamente entre onívoros e vegetarianos (p≤0,05). As famílias Lachnospiraceae, Porphyromonadota, Rikenellaceae e Alcaligenaceae diferiram entre os grupos de dietas diferentes (p≤0,05). Os gêneros fortemente associados com com o tipo de dieta foram: Alistipes, Parabacteroides, Odoribacter, Faecalibacterium, Bifidobacterium, Pseudobutyvibrio, Blautia, Dialister, Coprococcus, Lactobacillus e Dorea (p≤0,05). O QFCA foi validado e pode-se concluir que existem características distintas na composição da microbiota intestinal fortemente associadas ao tipo de dieta consumida.