Araraquara - FOAR - Faculdade de Odontologia

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  • ItemDissertação de mestrado
    Desenvolvimento e caracterização de novas superfícies de titânio modificadas com estrôncio e cálcio
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-05-27) Faria, Luan Viana ; Cirelli, Joni Augusto
    O desenvolvimento de superfícies de implantes com capacidade de modular o turnover ósseo em direção à osteogênese para alcançar rapidamente uma osseointegração rígida e duradoura é necessário para melhorar ainda mais a taxa de sucesso clínico das cirurgias de implantes, prolongar sua vida útil e estender sua aplicabilidade em situações clínicas desafiadoras. Neste contexto, implantes carregados com Cálcio (Ca) e Estrôncio (Sr) podem apresentar potencial osteogênico e trazer resultados promissores. Neste estudo, foram avaliados os efeitos da adição de Sr e a combinação de Sr e Ca em superfície micronanotopográfica de titânio comercialmente puro. Para incorporação destes elementos, os revestimentos foram aplicados em condições hidrotérmicas. Células pré-ostoblásticas da linhagem MC3T3-E1 foram utilizadas para avaliação da biocompatibilidade e do comportamento biológico das superfícies em um modelo in vitro. Foram avaliados adesão, espraiamento e morfologia celular por fluorescência direta e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV); viabilidade celular por Alamar Blue®, atividade da enzima fosfatase alcalina, expressão gênica de marcadores osteogênicos por RT-qPCR e expressão proteica de marcadores osteogênicos por Ensaio de Imunoabsorção Enzimática (ELISA). Ensaios de (MEV), Espectroscopia de raios X de energia dispersiva (EDS); microscopia de força atômica (MFA); molhabilidade; perfil de liberação de Sr e Ca, resistência à corrosão e estabilidade eletroquímica também foram realizados na caracterização das superfícies. O nível de significância adotado nas análises estatísticas foi de 5%. Os resultados demostraram que o tratamento hidrotérmico é efetivo na incorporação dos elementos em uma superfície micronanotopográfica, mantendo uma liberação dos íons controlada por mais de 21 dias. Ensaios eletroquímicos evidenciaram benefício do tratamento hidrotermal com a dopagem dos elementos no aumento da resistência à corrosão. Os resultados biológicos indicaram que implantes com capacidade osteogênica carregados com Ca e Sr podem trazer resultados promissores, melhorando os marcadores ósseos de osteogênese e osseointegração. Os grupos tratados com Sr e Sr/Ca potencializaram os resultados da superfície comercial micronanotopográfica. Não foram observadas grandes diferenças entre os grupos dopados, sugerindo que a incorporação de Sr sozinha é suficiente para impulsionar eventos relacionados à osteogênese e à osseointegração em um modelo in vitro.
  • ItemDissertação de mestrado
    Há um padrão do espargimento sanguíneo em decorrência da arma de fogo e da munição utilizada?
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-27) Roncato, Paulo Aurélio ; Serra, Mônica da Costa
    A Balística Forense analisa os efeitos do impacto produzido no alvo pelo projétil para determinar a arma e a munição usadas em um ato criminoso. A análise dos espargimentos como resultado do impacto da deflagração de projéteis em um alvo é de crucial importância para instruir a Justiça dentro dos processos penais, sendo apresentada como prova para acusação ou defesa de um processo criminal. Com isso, peritos criminais devem saber interpretar o vestígio hemático à luz do rigor científico. Assim, este trabalho teve como objetivo realizar uma revisão sistemática do espargimento sanguíneo produzido por armas de fogo. A pergunta principal da revisão foi “Há um padrão do espargimento sanguíneo em decorrência da arma de fogo e da munição utilizada?”. Foi realizada uma busca nas bases de dados Embase, Scopus, Pubmed e Web of Science. Nas bases de dados, foram identificadas inicialmente 222 publicações até novembro de 2023. Foram excluídos 212 documentos por não comtemplarem os critérios de elegibilidade. Os 10 estudos analisados não dispunham de dados que respondessem a nossa pergunta. Sugerimos a realização de estudos, em especial referentes ao padrão forward spatter, que possam claramente elucidar os questionamentos aventados, contribuindo assim para a análise e solução de casos periciais reais.
  • ItemDissertação de mestrado
    Influência da obesidade nos níveis de beta-defensinas no fluido crevicular gengival de pacientes com periodontite
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-22) Oliveira, Fernando Afonso de ; Zandim-Barcelos, Daniela Leal
    Os peptídeos antimicrobianos, incluindo as defensinas, exercem um importante papel na reposta imune dos tecidos periodontais. Além do efeito antimicrobiano, estes peptídeos podem funcionar como potentes reguladores imunológicos, alterando a expressão gênica, atuando como quimiocinas e/ou induzindo produção quimiocinas, inibindo produção de citocinas pró-inflamatórias, promovendo a reparação das feridas e modulando a resposta de células dendríticas ou células T. A literatura sugere que os peptídeos antimicrobianos podem ser considerados possíveis elo de ligação mecanicista entre a doença periodontal e seus fatores de risco. Assim, o objetivo deste estudo transversal foi avaliar a influência da obesidade sobre os níveis das beta-defensinas (HBDs) 1, 2 e 3 no fluido crevicular gengival (FCG) de pacientes portadores de periodontite. Vinte pacientes com boas condições de saúde geral e vinte pacientes obesos, portadores de periodontite estágio III ou IV, foram incluídos no estudo. Foram avaliados os seguintes parâmetros clínicos: índice de placa visível, índice de sangramento gengival, profundidade de sondagem, sangramento à sondagem e nível clínico de inserção. Após uma semana do exame clínico, foi feita coleta do FCG de 3 sítios não adjacentes apresentando sinais clínicos de periodontite (doente) e de 3 sítios não adjacentes sem doença periodontal (sadio). A quantificação dos peptídeos antimicrobianos no FCG foi feita pela técnica ELISA sanduíche. Os níveis de HBD-2 no FCG foram significativamente menores tanto nos sítios sadios (p<0,0001) quanto nos sítios doentes (p=0,0009) dos pacientes obesos em comparação com os mesmos sítios dos não obesos. Uma redução nos níveis de HBD-1 também foi observada no FCG dos pacientes obesos, porém a diferença não foi significativa. Por outro lado, uma tendência de aumento nos níveis de HBD-3 foi constatada no FCG dos pacientes obesos. Na comparação dos sítios dentro de cada grupo, níveis mais elevados de HBD-2 foram identificados nos sítios sadios em comparação aos sítios doentes de pacientes obesos e não obesos, sendo a diferença significativa apenas nos indivíduos não obesos. Com os resultados observados neste estudo, conclui-se que a redução dos níveis de HBD-2 no FCG pode constituir um mecanismo que contribui para maior susceptibilidade e severidade da doença periodontal nos pacientes obesos.
  • ItemDissertação de mestrado
    Avaliação longitudinal da expressão de TGF-β1 na regulação do Diabetes Mellitus tipo 2 após terapia periodontal
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-28) Martelli, Maurício Gandini Giani ; Caminaga, Raquel Mantuaneli Scarel ; Orrico, Silvana Regina Perez
    Apesar das crescentes evidências da presença concomitante de Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2) e Periodontite (P), a forma como atuam e interagem os diferentes mecanismos e as moléculas efetoras de cada patologia, carecem de mais estudos. Dentre essas moléculas está o Fator Transformador do Crescimento Beta 1 (TGF-β1), que participa da via de sinalização da glicose e de mecanismos que evoluem para comorbidades do DM2. Entretanto, não se conhece como DM2 e P influenciariam os níveis de TGF-β1, nem como seriam modificados pelo tratamento periodontal. O objetivo geral deste estudo clínico não randomizado longitudinal é realizar a avaliação da expressão gênica e proteica de TGF-β1 na regulação do DM2 na presença ou não de P, antes e após a terapia periodontal. Foram investigados 156 indivíduos, distribuídos nos grupos: DM2_descompensado+P; DM2_compensado+P; DM2_sem_P; Periodontite e Controle. Cada participante teve seu perfil glicêmico, lipídico e periodontal examinado antes (tempo zero), e depois (90 e 180 dias) de finalizado o tratamento periodontal. Os pacientes dos grupos Periodontite e DM2+P receberam tratamento periodontal não cirúrgico/cirúrgico, e os indivíduos dos grupos Controle e DM2_sem_P receberam profilaxia e reforço da instrução de higiene oral. De acordo com a indicação cirúrgica, foi coletado um fragmento de tecido gengival e realizada a avaliação da imunolocalização do TGF-β1 (níveis traducionais) por imuno-histoquímica. Foi avaliada a expressão gênica (níveis transcricionais) da molécula a partir de leucócitos, e proteica a partir do fluido sulcular gengival (FSG) dos pacientes. Os resultados revelaram que os parâmetros clínicos periodontais melhoraram nos grupos contendo indivíduos com Periodontite após 90 e 180 dias de finalizado o tratamento periodontal. Quanto à expressão sistêmica do gene TGFB1, após 90 dias, todos os grupos apresentaram maior expressão sistêmica do gene TGFB1, exceto o grupo DM2_descompensado/compensado_sem_P. Esses grupos também apresentaram menor expressão da proteína TGF-β1 no FSG, tanto no início quanto no acompanhamento. Notou-se maior expressão proteica de TGF-β1 no FSG dos indivíduos dos grupos com Periodontite independentemente de manifestarem DM2, comparado aos grupos sem Periodontite em todos os períodos avaliados. Houve maior número de células inflamatórias em biópsias gengivais de pacientes afetados por Periodontite independentemente da associação com DM2. A imunolocalização de TGF-β1 nas biópsias gengivais foi evidente no citoplasma das células inflamatórias e endoteliais, com predominância nos grupos com Periodontite, mas sem diferença significativa entre os grupos. Conclui-se que o tratamento periodontal mostrou melhora dos parâmetros periodontais já no período de 90 dias de acompanhamento, e que parece ter influenciado a maior expressão de sistêmica do TGFB1, bem como dos seus níveis proteicos no FSG. Os resultados do acompanhamento após o tratamento periodontal, que são concordantes entre os níveis de expressão gênica (transcricionais) e proteica (traducionais) de TGF-β1, parecem indicar uma potencial influência do tratamento periodontal em benefício da saúde. Essa maior expressão gênica e proteica do TGF-β1 está de acordo com os aspectos benéficos que este possui em favorecer a produção de componentes da matriz extracelular, aumentando a re-epitelização e diminuindo a expressão de TNF, que favorece a sensibilidade à insulina.
  • ItemDissertação de mestrado
    Avaliação do efeito do óleo de girassol ozonizado em biofilmes periodontopatogênicos: estudo in vitro
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-08) Belotto, Guilherme Vieira Luvisoto ; Zandim-Barcelos, Daniela Leal
    No contexto da periodontia, a ozonioterapia tem sido utilizada como uma abordagem complementar aos métodos convencionais de tratamento. A aplicação de ozônio pode ocorrer de diversas formas, como a insuflação do gás, água ozonizada, ou mesmo o uso de óleos ozonizados. No que diz respeito aos óleos ozonizados, este produto combina as propriedades antimicrobianas do ozônio com os benefícios dos óleos vegetais. Os óleos ozonizados têm sido estudados quanto à sua eficácia contra patógenos periodontais, demonstrando potencial na redução da carga bacteriana. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito antimicrobiano de óleos de girassol ozonizado em diferentes concentrações sobre biofilmes periodontopatogênicos. Biofilmes simples de Porphyromonas gingivalis, Fusobacterium nucleatum e Streptococcus oralis foram cultivados em suas respectivas condições de crescimento e tratados com exposição de 1 minuto ao óleo de girassol ozonizado nas concentrações: O3G100%, O3G50% e O3G25%. Em seguida, foi realizada a quantificação das unidades formadoras de colônias (UFC) dos grupos experimentais e do grupo controle negativo. Os resultados mostraram que a concentração O3G100% foi a mais efetiva, promovendo uma redução significativa de colônias bacterianas para todos os biofilmes testados: P. gingivalis (3,78 Log10 UFC/mL-1), F. nucleatum (3,73 Log10 UFC/mL-1) e S. oralis (3,66 Log10 UFC/mL-1) (p < 0,0001). A concentração O3G50% mostrou redução bacteriana apenas para as cepas de P. gingivalis (3,14 Log10 UFC/mL-1) e S. oralis (3,06 Log10 UFC/mL-1) (p < 0,0001). Enquanto a concentração O3G25% não apresentou efeito antimicrobiano em nenhum biofilme testado (p > 0,05). Concluiu-se, então, que o óleo de girassol ozonizado sem diluição apresentou uma atividade antimicrobiana efetiva em biofilmes simples de bactérias periodontopatogênicas.
  • ItemDissertação de mestrado
    Avaliação das propriedades biológicas do Osteoglass®: estudo in vivo
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-01) Marques, Nathalia Caetano ; Pereira Filho, Valfrido Antonio
    Diante dos desafios da reconstrução de defeito ósseos extensos, o uso de enxertia óssea ou biomateriais é indicado, sendo necessário o estudo de materiais sintéticos que possibilitem a viabilidade dos processos regenerativos e reparadores, a fim de compreender seu mecanismo no processo de reparo ósseo. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos biológicos de um biovidro nacional (Osteoglass OrthoTrauma®) no reparo de defeitos ósseos críticos, criados na calvária de ratos, por meio de análise histológica, histomorfométrica e imunoistoquímica. Para tanto, foram utilizados 54 ratos machos adultos da espécie Rattus norvegicus, variação albinus, Wistar, com idade de 3 a 4 meses, divididos em 3 grupos: OG (grupo Osteoglass OrthoTrauma®), BO (grupo Bio-Oss®) e CO (grupo coágulo). Foi realizado defeitos ósseos críticos, com 8mm de diâmetro interno, e posteriormente preenchidos com coágulo ou com os biomateriais. Os grupos foram subdivididos em 3 grupos contendo 6 animais cada um, de acordo com o período de eutanásia: 7, 15 e 30 dias. Decorridos os períodos experimentais, os animais foram eutanasiados e a calvaria foi removida para realização das análises. Os dados histomorfométricos foram submetidos a análise por ANOVA Two-Way, complementado com pós-teste de Tukey. O nível de significância foi de 5%. A análise histomorfométrica demonstrou potencial de neoformação óssea semelhante para os biomateriais em todos os períodos de tempo avaliados, mas sem diferença estatística significativa (p>0,05). Na análise imunoistoquímica, aos 7 dias: o grupo CO foi o único a apresentar marcação para RUNX2 (fator de transcrição run-related), de forma discreta; a proteína PECAM (molécula de adesão celular endotelial plaquetária) marcou de forma discreta somente para CO e BO; OPN (osteopontina) marcou de forma discreta para CO e BO, e moderada para OG. Aos 15 dias: a proteína PECAM marcou de forma moderada para o CO, discreta para BO e de discreta a moderada para o grupo OG; OPN marcou apresentou marcação discreta nos 3 grupos; por fim, aos 30 dias, OCN (osteocalcina) apresentou marcação somente para BO e OG, de forma moderada; uma vez que a TRAP (fosfatase ácida resistente em tartarato) marcou de forma discreta no grupo OG e BO. Portanto, o Osteoglass® demonstrou comportamento osteocondutor no reparo ósseo de defeitos críticos.
  • ItemDissertação de mestrado
    Cárie dentária em crianças de 5 anos de idade: situação atual na cidade de Araraquara, SP
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-01) Castilho, Giovanna Torqueto ; Pardi, Vanessa ; Tagliaferro, Elaine Pereira da Silva {UNESP]
    A cárie dentária é considerada um problema de saúde pública global, que afeta principalmente crianças. O conhecimento e compreensão sobre a saúde bucal tem grande impacto na prevenção e tratamento da doença cárie e, durante a infância, os pais, principalmente as mães, são quem tomam decisões sobre a saúde da criança. Durante a consulta odontológica o profissional deve conversar com o paciente e seu responsável sobre os principais problemas de saúde bucal e quais tratamentos disponíveis para o caso. Atualmente a Odontologia preza por tratamentos minimamente invasivos e entre eles está o Diamino Fluoreto de Prata (DFP). Esse material é muito bem aceito em crianças pequenas, de fácil aplicação, baixo custo, e não requer remoção da cárie, porém sua desvantagem é a pigmentação da superfície dentária cariada. Com isso os objetivos deste estudo foram: 1.avaliar fatores familiares associados à cárie dentária de pré-escolares de 5 anos e 2.avaliar a aceitação do tratamento com DFP pelos responsáveis por essas crianças. Este estudo foi realizado com crianças pré-escolares matriculadas em escolas da cidade de Araraquara/SP, Brasil. A coleta de dados foi realizada por meio de aplicação de questionário aos responsáveis e dados coletados em exame bucal dos respectivos filhos(as). As questões referiam-se a informações socioeconômicas, demográficas, sobre a rotina da família, sobre saúde bucal do responsável e também sobre a saúde bucal da criança. Utilizou-se o índice ceod e o índice SiC (Significant Caries Index) para avaliação de cárie, de acordo com exame proposto pelo SB Brasil e Organização Mundial da Saúde. Foi realizada análise descritiva, teste do Qui-quadrado e modelos de regressão logística múltipla, através do software SPSS (v.28.0.0.1), considerando um nível de significância de 5%. No Estudo 1, verificou-se um índice ceod de 1,14 (DP=2,24) e índice SiC de 3,46 (2,69). Aquelas crianças pertencentes a famílias de menor renda, que não tinham a visita ao dentista como prioridade, cujos cuidadores tinham a percepção de não apresentarem, eles mesmos e suas crianças, boa saúde oral apresentaram mais chance de ter lesões de cárie, enquanto aquelas crianças cujos responsáveis os ajudavam durante escovação pelo menos 1x/dia todos os dias ou alguns dias na semana tiveram menos chance de apresentar cárie dentária. No Estudo 2, os resultados revelaram que grande parte dos responsáveis (34,7%) aceitaria o tratamento com DFP em qualquer dente decíduo, enquanto 26,1% aceitariam em qualquer dente e 5,1% só aceitariam em dentes "posteriores". Aproximadamente 20,6% dos responsáveis não aceitariam o tratamento. Os responsáveis de menor renda e os que acreditavam que seus filhos necessitavam de tratamento odontológico atualmente tiveram mais chance de aceitar o tratamento com DFP. Os resultados desse estudo mostram que a prevalência de carie dentaria em crianças de 5 anos na cidade de Araraquara é baixa, que características familiares como renda, percepção de saúde bucal, assistência com escovação e importância e cuidado com saúde bucal afetam a presença de cárie em pré-escolares, e que a aceitação do tratamento com DFP é influenciada pela renda mensal e percepção de necessidade de tratamento atual da criança. A atitude dos responsáveis em relação à saúde bucal parece exercer uma influência significativa sobre a saúde dentária de seus filhos.
  • ItemDissertação de mestrado
    Filmes orodispersíveis baseados em ácido hialurônico e morina para aplicação na odontologia
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-04) Piovesan, Lorena Fonseca ; Barud, Hernane da Silva ; Brighenti, Fernanda Lourenção ; Monteiro, Gustavo Claro ; Universidade de Araraquara (Uniara)
    A biodisponibilidade limitada de formas farmacêuticas orais é um dos principais desafios no desenvolvimento de novos carreadores para a liberação de fármacos, especialmente aqueles destinados ao tratamento de doenças periodontais, cárie e pulpites. Os filmes orodispersíveis (FODs) são promissores para tal finalidade, por apresentarem rápida absorção e por serem facilmente administrados, servindo especialmente para pacientes pediátricos, geriátricos e que possuem limitações no processo de deglutição. O ácido hialurônico (HA) é um biopolímero investigado para o desenvolvimento de novos sistemas de liberação de fármacos, por apresentar elevada hidrofilicidade, excelentes propriedades viscoelásticas, biocompatibilidade e atoxicidade. A presente pesquisa teve como objetivo avaliar as propriedades físicoquímicas, o perfil de liberação in vitro e a atividade antimicrobiana e anti-biofilme de FODs à base de HA combinados com flavonóide morina, um composto natural que apresenta altas propriedades anti-biofilme. Os filmes desenvolvidos possuíram uma espessura fina (12-27 µm), flexíveis e homogêneos, atingiram alta resistência mecânica e uma liberação de morina da matriz HA foi evidenciada. Ensaios biológicos forneceram resultados de atoxicidade, bem como a atividade significativa antibiofilme contra S. mutans. O conjunto de dados evidenciam que os FODs baseados em HA e morina desenvolvidos nesse trabalho representam uma potencial plataforma para entrega de fármacos orais.
  • ItemDissertação de mestrado
    Efetividade do corticosteróide em associação com antiviral para o tratamento da gengivoestomatite herpética aguda (GEHA)
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-01) Camargo, Héric de Souza ; Navarro, Cláudia Maria
    A gengivoestomatite herpética aguda (GEHA) é uma das manifestações clínicas da infecção pelo vírus herpes simples (VHS), caracterizada por um extenso processo inflamatório difuso da mucosa oral, impactando funções que afetam a qualidade de vida dos pacientes. O tratamento tradicionalmente estabelecido baseia-se no uso de medicamentos antivirais e cuidados paliativos voltados para o alívio sintomático. O presente estudo teve como objetivo comparar o tratamento da GEHA com antiviral combinado com corticosteroide versus tratamento exclusivo com antiviral. Foram selecionados prontuários de pacientes com GEHA tratados no Serviço de Medicina Bucal da Faculdade de Odontologia de Araraquara - UNESP, incluindo 10 casos tratados com antiviral e corticosteroide e 10 casos tratados apenas com antiviral. Os prontuários clínicos e a documentação fotográfica foram avaliados para comparar a evolução clínica dos pacientes, com foco na sintomatologia e cicatrização das lesões orais. Os prontuários clínicos dos pacientes tratados com antiviral e corticosteroide mostraram cicatrização mais rápida das lesões orais e alívio dos sintomas em comparação com o tratamento apenas com antiviral. A remissão da sintomatologia foi estatisticamente significativa (p = 0,004). Com base nos resultados apresentados e em casos graves com tendência a evoluir para eritema multiforme, recomenda-se a combinação de antiviral e corticosteroide (Aciclovir 200mg, 1 comprimido a cada 4 horas por 5 dias + Prednisona 20mg por 5 dias) como protocolo de tratamento para reduzir a dor e o tempo de cicatrização das lesões em pacientes com GEHA. Além disso, foi possível observar que a associação do antiviral e corticosteroide foi benéfica para o restabelecimento da qualidade de vida dos pacientes. Consideramos que a associação medicamentosa deve ser bem monitorada e mais estudos clínicos são necessários para avaliar a real efetividade.
  • ItemDissertação de mestrado
    Impacto da diacereína sobre citocinas envolvidas na formação e reabsorção óssea na periodontite induzida em molares de rato.
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-15) Oliveira, Gabriella de ; Cerri, Paulo Sérgio ; Cerri, Estela Sasso
    Diversos agentes bioativos como interleucinas (IL), metaloproteinases da matriz e fatores de transcrição que estimulam a osteoclastogênese e inibem diferenciação de osteoblastos. A diacereína é um anti-inflamatório usado no tratamento de osteoartrite, cuja fisiopatologia é similar à periodontite. O objetivo do estudo foi avaliar os efeitos da diacereína sobre as citocinas envolvidas na formação e atividade de osteoclastos do osso alveolar de ratos com periodontite. Além disso, foi investigado se a diacereína interfere na diferenciação de osteoblastos. Foram utilizados 108 ratos Holtzman, distribuídos nos grupos GPD (grupo com periodontite e tratado com 100mg/kg de diacereína), GPS (grupo com periodontite e tratado com solução salina) e GC (Grupo controle, periodonto saudável sem qualquer tratamento). A periodontite foi induzida por ligadura no 1º molar superior direito. Após 7 dias, a ligadura foi removida e o tratamento foi iniciado. Os animais foram eutanasiados após 7, 15 e 30 dias do início do tratamento. Cortes foram corados com tricrômico de Gomori para análise morfológica ou submetidos às reações imuno-histoquímicas/imunofluorescência para detecção da fosfatase alcalina (ALPase), F4/80 (fagócitos mononucleares) e caspase-3, e ao método do TUNEL. As características ultraestruturais dos osteoclastos também foram avaliadas. Amostras de mucosa gengival foram coletadas para análise da expressão gênica de Tnf, Il1b, Tnfsf11 e Tnfrsf11b por RT-qPCR. Os dados foram submetidos ao Two-way ANOVA e pós-teste de Tukey. A análise de expressão gênica foi realizada por meio do método ΔΔCT para quantificação relativa, e submetidos ao One-way ANOVA. O nível de significância considerada foi p<0,05. Espécimes do GPD e GPS mostraram evidente processo inflamatório na mucosa gengival com aumento significante de macrófagos F4/80. Nas amostras gengivais do GPD, a expressão dos genes Tnf, Il1b e Tnfsf11 reduziram significantemente em comparação ao GPS, com exceção da expressão de Tnf aos 7 dias. Houve também uma redução na razão Tnfsf11/Tnfrsf11b (RANKL/OPG) no grupo GPD. Os espécimes do GPD exibiram frequência de osteoclastos TUNEL-positivos significantemente maior em comparação ao GPS (p<0,0001) e GC (p<0,0001), em todos os períodos. Osteoclastos com citoplasma fortemente imunofluorescente à caspase-3 e com núcleos exibindo massas irregulares com conspícua cromatina condensada foram também observados nos espécimes do GPD, confirmando a morte de osteoclastos por apoptose. Em todos os períodos, os espécimes do GPD apresentaram um significante aumento no número de osteoblastos ALPase-positivos em comparação ao GPS. Os nossos resultados sugerem que a diacereína inibe a formação de osteoclastos por meio da redução dos níveis de RNAm de Tnf e Il1b que culminou na redução da razão Tnfsf11/Tnfrsf11b e também induziu apoptose em osteoclastos do processo alveolar de molares com periodontite. Além, o significante aumento de ALPase nos osteoblastos do GPD aponta para um papel da diacereína na diferenciação de osteoblastos.
  • ItemDissertação de mestrado
    Levantamento e análise de decisões judiciais de demandas decorrentes da negativa da realização de procedimentos odontológicos por operadoras de planos privados de assistência à saúde.
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-02-28) Viotto, Joingle Raphaela do Carmo ; Serra, Mônica da Costa
    A judicialização na área da saúde vem se intensificando desde a Constituição Federal Brasileira de 1988. Isso porque no artigo nº 196 da referida norma, está previsto que saúde é um direito de todos e dever do Estado. Assim, além de instituir o SUS, nela está previsto que o Estado deve regulamentar, fiscalizar, e controlar ações de saúde, tanto no setor público quanto privado. Com o advento de normas que tratam de saúde, e da regulamentação dos serviços ofertados pelos planos de assistência privada à saúde, o número de ações judiciais envolvendo a temática cresceu, inclusive na área dos planos em saúde odontológica. O presente estudo levantou e analisou as ações judiciais em meio digital envolvendo a temática de negativa da realização de procedimentos odontológicos por operadoras de planos privados de assistência à saúde, à luz do Código de Processo Civil, em decisões jurisprudenciais do Tribunal de Justiça do Estado de São Paulo. O tamanho da amostra correspondeu ao número de processos encontrados. A pesquisa verificou quais as maiores causas de negativas para concessão de tratamentos ou insumos pelo plano de saúde na via administrativa, bem como qual tem sido o posicionamento majoritário do judiciário paulista frente às novas demandas enfrentadas, concluindo que a judicialização tem sido determinante para a realização de tratamentos, com decisões que vão de encontro às negativas em âmbito administrativo.
  • ItemDissertação de mestrado
    Avaliação da alteração de cor e rugosidade superficial do esmalte dental clareado por diferentes protocolos
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-07) Basile, Gabriela Felli ; Chinelatti, Michelle Alexandra
    O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos de diferentes protocolos clareadores sobre a alteração de cor, a morfologia e a rugosidade superficial do esmalte dental. Incisivos bovinos foram preparados para a obtenção de 40 espécimes de esmalte (5 x 5 mm). Os espécimes foram manchados com solução de café e posteriormente foram distribuídos aleatoriamente em 4 grupos (n=10) de acordo com os respectivos protocolos clareadores: G1- peróxido de hidrogênio a 35%; G2- LED violeta; G3- peróxido de hidrogênio a 35% + LED violeta; G4- sem clareamento (controle). Finalizados os protocolos clareadores, foram realizadas as avaliações de alteração de cor por meio de espectrofotometria digital. As alterações da topografia do esmalte clareado foram verificadas pela avaliação da rugosidade superficial, por meio do teste de perfilometria, e da morfologia superficial, por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV). Os dados de alteração de cor e de rugosidade superficial do esmalte foram avaliados estatisticamente com nível de significância de 5% pela Análise de Variância a um fator e teste de Tukey para comparação múltipla das médias. A análise da morfologia superficial do esmalte foi realizada qualitativamente por meio das micrografias obtidas em MEV, sendo observadas e registradas as áreas mais representativas nos aumentos de 4000x. Os resultados de alteração de cor entre os Grupos avaliados mostraram que o Grupo 1 apresentou os maiores valores de DeltaE, sendo estatisticamente diferente (p<0,001) dos demais grupos. Na sequência, o Grupo 3 exibiu resultados superiores (p<0,001) aos Grupos 2 e 4. Os Grupos 2 e 4 apresentaram os menores valores de DeltaE, não diferindo estatisticamente (p>0,01) entre si. Os resultados obtidos para rugosidade superficial do esmalte nos diferentes protocolos clareadores mostraram que não houve diferença significativa (p>0,01) entre as médias dos grupos avaliados. As análises das micrografias obtidas da MEV não revelaram alterações morfológicas na superfície do esmalte submetido aos diferentes protocolos clareadores. Pode-se concluir que os melhores resultados para o clareamento foram obtidos pelo protocolo de aplicação do gel de peróxido de hidrogênio a 35% sem alterar a rugosidade superficial e a morfologia do esmalte dental.
  • ItemDissertação de mestrado
    Prevalência de maloclusão e uso de chupeta em pré-escolares de 5 anos de idade
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-01) Pessoa, Marília Narducci ; Tagliaferro, Elaine Pereira da Silva
    A maloclusão envolve relações inadequadas entre os dentes e os arcos dentários e destes entre si. Tem etiologia multifatorial e um dos fatores de risco é a presença de hábitos bucais deletérios, destacando-se o uso de chupeta. Os objetivos deste estudo foram: determinar a prevalência de maloclusão e variáveis associadas (n=563) e a frequência e os preditores do uso de chupeta (n=468), em pré-escolares de 5 anos da rede municipal da cidade de Araraquara, SP. A coleta de dados foi realizada por meio de aplicação de questionário pré-testado às mães/responsáveis e de exame bucal do(a) filho(a). As perguntas do questionário referem-se às características socioeconômicas da família, morbidade bucal referida e uso de serviços da mãe/responsável, características da comunidade, características da criança e rotina familiar. O exame clínico foi realizado seguindo a metodologia do SB Brasil 2020, por pesquisadoras calibradas, sob luz natural, utilizando método visual-tátil, com espelho bucal plano, sonda ball point e luz natural, em local bem ventilado e iluminado para coletar dados sobre a condição oclusal (Chave de caninos: classe I, classe II e classe III; Sobressaliência: normal, aumentada, topo a topo e mordida cruzada anterior; Sobremordida: normal, reduzida, aberta e profunda; Mordida Cruzada Posterior: ausente ou presente) e cárie dentária. Os dados foram analisados por meio de análises descritivas e análise de regressão logística múltipla, considerando nível de significância de 5%. O desfecho foi estabelecido pela presença de ao menos uma alteração de normalidade nas condições oclusais avaliadas e pelo uso de chupeta. A prevalência de algum tipo de maloclusão foi de 60,9%. As crianças com hábito de sucção de chupeta (OR=1,59; IC95%: 1,06-2,38), hábito de sucção digital (OR=6,75; IC95%: 1,98-23,02) ou com experiência de cárie (OR=1,73; IC95%:1,11-2,68) tiveram mais chance de apresentar maloclusão (p<0,05). Cerca de 61,1% das crianças usaram/usam chupeta. No modelo de regressão múltiplo, apenas aquelas com hábito de mamadeira (OR=1,83; IC95%: 1,16-2,87) tiveram mais chance de ter hábito de sucção de chupeta (p<0,05). Concluiu-se que a prevalência de algum tipo de maloclusão nas crianças de 5 anos foi alta e esteve associada principalmente à presença de hábitos bucais deletérios e que maioria das crianças de 5 anos usou/usa chupeta, com maior chance de apresentar o hábito entre aquelas que também faziam uso da mamadeira.
  • ItemDissertação de mestrado
    Avaliação de diferentes protocolos de desgaste interproximal (IPR)
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-04) Iplinsky, Nicole Tonin ; Santos-Pinto, Ary ; Matsumoto, Mirian Aiko Nakane ; Universidade de São Paulo (USP)
    Com os desgastes interproximais (IPR) sendo largamente utilizados na atualidade devido a novas formas de tratamento ortodôntico, o objetivo desta pesquisa foi comparar diferentes métodos de IPR com a hipótese nula de que não há diferença entre eles em relação ao tempo, qualidade e eficiência. A amostra foi de 40 incisivos inferiores humanos hígidos, aleatoriamente fixados em 10 manequins com silicone de condensação. Dois manequins com incisivos alinhados serviram, respectivamente, de grupo piloto e controle (grupo 1). Os demais, um com incisivos alinhados e outro com incisivos apinhados foram separados em grupos segundo o método de IPR: grupo 2 - lixa manual, grupo 3 - lixa em peça de mão contra-ângulo de movimento reciprocante linear, grupo 4 - disco diamantado e grupo 5 - insertos ultrassônicos. Na análise do tempo despendido para o procedimento em cada método, na quantidade de 0,2 mm por face, foi aplicado o teste de comparação One - Way ANOVA (Welch’s). O resultado observado foi que o disco levou o menor tempo, em seguida a lixa reciprocante que não foi diferente estatisticamente do inserto ultrassônico. O método que levou maior tempo foi a lixa manual que não foi diferente significativamente do inserto ultrassônico. Não houve diferença estatisticamente significativa entre o tempo de desgaste dos métodos em relação ao grau de apinhamento entre os incisivos. No segundo teste, Qui-quadrado de Pearson, a lixa manual apresentou mais bordas arredondadas, assim como a lixa reciprocante. Já o disco, apresentou mais faces com arestas e ângulos vivos e o método do inserto ultrassônico apresentou 3 faces com arestas e 9 faces com bordas arredondadas. A maior parte apresentou cortes somente atingindo faces proximais, assim como a anatomia da maior parte foi mantida (p<0,05). No terceiro teste, as superfícies desgastadas foram observadas no MEV e então feita uma análise visual descritiva através de avaliação subjetiva. Concluímos que há claramente diferenças entre os métodos de IPR. O método do disco foi o mais eficiente em tempo, porém foi um dos que causou maiores danos e ranhuras ao esmalte dentário. Os métodos que causaram menos danos foram os das lixas manuais e reciprocantes.
  • ItemDissertação de mestrado
    Perfil epidemiológico de um Serviço de Medicina Bucal: estudo retrospectivo de 17 anos
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-07) Nunes, Carolina da Silva ; Massucato, Elaine Maria Sgavioli
    Os estudos de epidemiologia de lesões bucais, são essenciais para que se estabeleça causa, prevalência, incidência e correlações com condições sistêmicas, hábitos e vícios, aspectos demográficos e geográficos em diversas regiões, tanto no Brasil como no mundo. O Serviço de Medicina Bucal (SMB) da Faculdade de Odontologia de Araraquara (FOAr) – Unesp é um centro de referência em atendimento estomatológico de todo Departamento Regional de Saúde III (DRSIII), concentrando uma grande quantidade de diagnósticos de patologias bucais, sendo os dados epidemiológicos levantados neste estudo essenciais para se traçar um perfil epidemiológico. Este estudo tem como objetivo estabelecer um perfil epidemiológico da população atendida em um serviço de medicina bucal, e descrever a frequência de patologias orais diagnosticadas. Este é um estudo observacional transversal retrospectivo onde foram analisados os prontuários com as fichas clínicas dos pacientes atendidos no SMB da FOAr – UNESP no período de 1999 a 2016, perfazendo um total de 8955 prontuários. Os dados foram coletados por meio do Google formulários, e os dados obtidos foram tabulados em planilhas no Google planilhas. Posteriormente, o aplicativo Epi Info 7 e o Microsoft Excel foram utilizados para a análise de dados. Foram coletadas informações referentes às características demográficas dos pacientes, história médica, uso de medicamentos, hábitos/vícios, diagnóstico, localização da patologia e ano de diagnóstico. Dentre os 8.955 prontuários, 114 foram excluídos por não estarem de acordo com os critérios de inclusão, dessa forma, foram coletados dados referentes à 8.841 prontuários, que somaram 14.996 patologias orais, sendo 1,7 patologias por paciente atendido. O grupo com a maior prevalência foi o de patologias epiteliais, seguido pelas doenças infecciosas. E as patologias mais frequentes foram a candidose oral, fibroma traumático/ hiperplasia fibrosa inflamatória e queilite actínica. Esses resultados destacam a importância da vigilância epidemiológica e da compreensão do perfil dos pacientes atendidos no SMB para a implementação de estratégias de prevenção e tratamento adequado das patologias orais, contribuindo assim para a melhoria da saúde bucal da população atendida.
  • ItemDissertação de mestrado
    Influência de diferentes protocolos de acabamento sobre a rugosidade superficial e dureza em blocos CAD/CAM de dissilicato de lítio e silicato de lítio reforçado com zircônia
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-01) Sato, Ana Lídia Pinheiro Silva ; Campos, Edson Alves de
    O constante desenvolvimento das restaurações livres de metal e a tecnologia uniram as cerâmicas e o CAD/CAM há anos. A evolução dos materiais cerâmicos, assim como do sistema digital têm sido crescentes. Uma das etapas da confecção de peças protéticas cerâmicas é a aplicação de glaze, que pode promover maior resistência do material contra os efeitos decorrentes da exposição do mesmo ao ambiente bucal. O objetivo desse estudo foi investigar a influência de diferentes protocolos de acabamento de superfície sobre a microdureza e rugosidade superficial de blocos cerâmicos CAD/CAM após o envelhecimento artificial com diferentes dentifrícios. Para esse estudo in vitro foram obtidos cento e oitenta espécimes com 10,0mm (largura) x 12,0mm (comprimento) x 2,0mm (espessura), a partir de blocos CAD/CAM, noventa espécimes de cada material (dissilicato de lítio e silicato de lítio reforçado por zircônia) divididos em 3 grupos: borracha de polimento (B), queima convencional do glaze (G) e queima estendida do glaze (EG). Os espécimes foram submetidos ao envelhecimento artificial com escovação simulada, utilizando dentifrícios com diferentes abrasividades. A avaliação da microdureza Vickers foi realizada com o microdurômetro e a rugosidade superficial foi mensurada com um perfilômetro de contato. Os resultados obtidos em cada um dos testes foram submetidos a análise estatística descritiva, teste de normalidade, seguido pelo teste de ANOVA Two-Way e pós teste de Tukey. Para os espécimes de silicato de lítio com zircônia, a abrasividade do dentifrício não mostrou influência na dureza do grupo com tratamento de borracha; o glaze e glaze estendido promoveram uma menor dureza; o envelhecimento artificial, independente da abrasividade, não alterou a rugosidade nos diferentes tratamentos. Para os espécimes de dissilicato de lítio, o envelhecimento artificial não produziu redução na dureza, independente da abrasividade do dentifrício e não alterou a rugosidade nos diferentes tratamentos com diferentes dentifrícios. O tratamento com borracha pode não ser recomendado para acabamento de superfície de restaurações de silicato de lítio reforçado por zircônia e o glaze estendido pode ser recomendado para diminuir a rugosidade de restaurações de dissilicato de lítio.
  • ItemDissertação de mestrado
    Efeitos das frações do extrato de Cryptocarya moschata sobre células planctônicas e biofilmes simples e misto de Candida albicans e Streptococcus mutans
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-02-26) Oliveira, Jonatas Silva de ; Jorge, Janaina Habib ; Cavalheiro, Alberto José
    O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana de frações de Cryptocarya moschata sobre células planctônicas e biofilmes de Streptococcus mutans e Candida albicans. Inicialmente, foram produzidos extratos de C. moschata que posteriormente foram fracionados pelo método de extração líquido-líquido. Foram preparadas quatro frações: solução de Hexano a 100% (Hex), Acetato/Hexano 1:1 (AcOEt/Hex), Acetato de Etila a 100% (AcOEt) e Água (H2O). O efeito das frações de C. moschata foi avaliado nas células planctônicas por meio da contagem de unidades formadoras de colônia (UFC/mL). Frações e concentrações efetivas foram utilizadas para ensaios de biofilme. Foram realizados os seguintes testes em biofilme: contagem de unidades formadoras de colônias (n=10), avaliação do metabolismo celular pelo teste AlamarBlue (n=10) e análise qualitativa por microscopia confocal de varredura a laser (n=2). A análise estatística das variáveis foi feita pelo teste estatístico U de Mann-Whitney ao nível de significância de 5%. Os resultados mostraram que as frações apresentaram constituintes lipofílicos, estirilpironas, principalmente a goniotalamina, flavonoides glicosados e alcaloides. A fração AcOEt/Hex nas concentrações de 100% e 50% (p<0,05) e a fração AcOEt a 100% (p<0,05) tiveram efeito redutor das células planctônicas de C. albicans, tendo sido estatisticamente diferentes das outras frações. No entanto, as frações de C. moschata não tiveram efeito nas células planctônicas de S. mutans. Em relação ao biofilme, as frações foram capazes de reduzir o número de UFC/mL tanto para biofilmes simples quanto para o misto. Os resultados também mostraram que houve redução do metabolismo celular do biofilme de C. albicans após tratamento com as frações. Além disso, as frações causaram danos à matriz extracelular dos biofilmes. Concluiu-se que as frações de C. moschata apresentaram efeito antimicrobiano contra biofilme simples de C. albicans e misto de C. albicans e S. mutans.
  • ItemDissertação de mestrado
    Análise dos componentes estruturais da mordida aberta anterior
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-02-28) Bagatini, Ana Thais ; Santos-Pinto, Ary
    Objetivo: avaliar os componentes estruturais, esqueléticos e dentoalveolares, da mordida aberta anterior. Materiais e métodos: foram selecionadas documentações ortodônticas de diagnóstico de 100 participantes de 7 a 12 anos de idade (8,2 ± 1,0 anos) de ambos os gêneros, podendo apresentar má oclusão de Angle classe I ou classe II. Esta amostra foi dividida em: Grupo 1 com mordida aberta (Fem= 33 e Masc= 17) e Grupo 2, controle, com ausência de mordida aberta (Fem= 33 e Masc= 17). As telerradiografias laterais iniciais foram digitalizadas e analisadas no programa Radiocef Studio. Foram avaliadas as dimensões e relação angular da base do crânio; dimensão, posição e angulação maxilar e mandibular; relação maxilo-mandibular; inclinação do plano oclusal superior e inferior; altura dento-alveolar de molares e incisivos superiores e inferiores; inclinação de incisivos superiores e inferiores; dimensões faciais anteriores e posteriores; padrão de crescimento facial e relações dentárias. As medidas obtidas foram transferidas para o programa SPSS (versão16, SPSS, Chicago, Ill) para análise estatística. Resultados: encontramos diferenças significativas nas medidas SNPOclS, SNPmand, SNPOclI, IS-PP, IS.SN, ANB, SNPP, II.PM, II-PM, Wits e overbite. Não encontramos diferenças significativas entre grupos quando analisamos medidas relacionadas a base do crânio e a dimensão das vias aéreas. Conclusão: Os componentes da dimensão e angulação da base do crânio, comprimento e angulação da maxila e mandíbula não contribuíram com o desenvolvimento da mordida aberta, porém, a inclinação dos planos palatino, oclusal superior, mandibular e oclusal inferior contribuíram de forma significativa. A relação esquelética maxilo-mandibular, contribuiu fracamente, enquanto a altura facial anterior ou posterior e de molares inferiores e superiores não influenciaram na determinação do overbite, ao passo que a inclinação e erupção dos incisivos superiores e inferiores contribuíram significativamente. Por fim, as vias aéreas não interferiram com relação ao overbite.
  • ItemDissertação de mestrado
    Desenvolvimento e aplicação de um primer polimérico catalisador contendo TiF4 para clareamento dental de consultório
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-02-29) Peruchi, Victória ; Costa, Carlos Alberto de Souza
    Objetivo: O objetivo deste estudo foi desenvolver um primer polimérico (PPol) contendo tetrafluoreto de titânio (TiF4), e avaliar se o revestimento do esmalte dentário com este produto antes do clareamento de consultório, influencia a citotoxicidade e eficácia clareadora do tratamento, bem como altera a microestrutura de superfície do esmalte. Métodos: Discos de esmalte/dentina padronizados foram manchados e submetidos ao clareamento por 45 minutos (1 sessão) com um gel clareador com 35%H2O2. Nos grupos 2TiF4, 6TiF4 e 10TiF4, o gel foi aplicado sobre o esmalte previamente revestido com o PPol contendo as concentrações de 2 mg/mL, 6 mg/mL e 10 mg/mL, respectivamente. Como controle positivo (CP), o gel clareador com 35%H2O2 foi aplicado diretamente sobre o esmalte, e no controle negativo (CN) nenhum tratamento foi realizado. A eficácia clareadora dos tratamentos foi determinada por espectrofotometria de reflexão-UV (Sistema CIE L*a*b*; ΔE00 e ΔWI, n=8). A microdureza (Knoop, n=8) e morfologia da superfície do esmalte submetido aos tratamentos também foram avaliados (Microscopia Eletrônica de Varredura/MEV e Espectroscopia por Energia Dispersiva/EDS, n=4). Para análise da citotoxicidade trans-amelodentinária, discos de esmalte/dentina (n=8) foram adaptados em câmaras pulpares artificiais. Após concluir os tratamentos, os extratos (meio de cultura + componentes do gel clareador difundidos pelos discos) foram coletados e aplicados sobre células odontoblatóides MDPC-23, as quais foram avaliadas quanto a viabilidade (alamarBlue, n=8; Live/Dead, n=4), estresse oxidativo (n=8) e morfologia (MEV). A quantidade de H2O2 difundido pelos discos de esmalte/dentina foi determinada (Violeta leuco-cristal/peroxidase; n=8). Os dados numéricos obtidos foram submetidos a análise de variância a um critério (One Way ANOVA), seguido do pós-teste de Tukey, com nível de significância de 5%. Resultados: Não houve diferença significativa entre 2TiF4, 6TiF4 e CP em relação a ΔE00 (p>0,05) e nem entre 2TiF4 e CP para ΔWI (p>0,05). O grupo 6TiF4 apresentou ΔWI superior ao CP (p<0,05); porém, o grupo 10TiF4 exibiu os maiores valores para ambas as análises de eficácia clareadora (p<0,05). Em todos os grupos onde foram usados PPol, houve menor perda na dureza do esmalte. Além de limitar as alterações microestruturais do esmalte em comparação com a CP, o grupo 10TiF4 também aumentou significativamente a dureza deste tecido mineralizado. O maior nível de viabilidade celular foi observado em 10TiF4 em comparação ao demais grupos clareados (p<0,05). Significativa redução na difusão de H2O2 ocorreu nos grupos 2TiF4, 6TiF4 e 10TiF4 em comparação ao CP (p<0,05). Conclusão: A estratégia de revestir o esmalte com um PPol contendo TiF4 antes da aplicação do gel clareador com 35%H2O2 pode reduzir a citotoxicidade trans-amelodentinária e aumentar a eficácia clareadora do clareamento dental convencional de consultório, bem como elevar a microdureza do esmalte dentário tratado. De maneira geral, a adição de 10 mg/mL de TiF4 no PPol determinou os melhores resultados deste estudo.
  • ItemDissertação de mestrado
    Bioatividade dos ácidos retinoico e ascórbico e carregamento em hidrogel termossensível sintético para regeneração endodôntica
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 0024-03-01) Fernandes, Lídia de Oliveira ; Hebling, Josimeri
    Este estudo avaliou o potencial do ácido ascórbico (AA) e do ácido retinoico (AR) isolados e associados a hidrogéis de Pluronic F-127 (P) e colágeno (Col) para potencial aplicação para procedimentos de regeneração endodôntica. Células da papila apical humana (hAPCs) foram obtidas de terceiros molares humanos hígidos (N=4) e caracterizadas por citometria de fluxo. No Estudo 1, foi investigado o efeito bioativo dose-reposta do AR e AA sobre hAPCs. Os seguintes grupos experimentais foram estabelecidos: controle negativo – CN (α-MEM), controle veículo – CV (α-MEM + 0,17% DMSO), AR 0,1, 1 e 10 µM e AA 3, 30 e 300 µM (n=8). Foram realizados ensaios de viabilidade (alamarBlue, 1, 3 e 7d), formação de matriz mineralizada (Alizarin Red, 14d), síntese de colágeno total (Sirius Red, 1 e 7d) e expressão de genes relacionados à regeneração endodôntica (RT-qPCR, 1d e 7d). No Estudo 2, hidrogéis de P foram formulados e testados quanto à citocompatibilidade com hAPCs. Hidrogel de colágeno (Col) foi utilizado como controle positivo e testados hidrogéis de P (%m/v) P15%, P17,5%, P20%, P22,5%, P25% e P30% (n=8). As células foram cultivadas sobre ou sob hidrogéis recém-preparados ou armazenados por 4 meses e a viabilidade foi avaliada após 1, 3 e 7d, (alamarBlue e Live/Dead). No Estudo 3, AR 0,1 µM e AA 300 µM foram incorporados, isolados ou associados, ao hidrogel P25% e ao hidrogel de Col. Os grupos experimentais (n=10): Col, Col+AA, Col+AR, Col+AA+AR, P25%, P25%+AA, P25%,+AR, P25%+AA+AR foram avaliados em cocultura de hAPCs com células endoteliais (HUVECs) quanto à viabilidade celular (alamarBlue, 1, 3 e 7d), formação de matriz mineralizada (Alizarin Red, 14d), síntese de colágeno total (Sirius Red, 7 e 14d), migração celular ativa (Transwell, 1d), todos por contato indireto. A expressão de genes relacionados a regeneração endodôntica (RT-qPCR, 1d) foi avaliada inserindo os biomateriais em segmentos radiculares de incisivos bovinos para avaliação da regeneração pulpar in situ (n=6). Os dados foram analisados com testes t, ANOVAs e pós-testes específicos (α=5%). AR 10 µM apresentou citotoxicidade para hAPCs. AA 300 µM aumentou a viabilidade celular, síntese de colágeno total e formação de matriz mineralizada. AR 0,1 µM e AA 300 µM exerceram maior efeito sobre a modulação de genes relacionados à produção de matriz extracelular, angiogênese e quimiotaxia. O cultivo sobre o hidrogel aumentou a viabilidade em 1 e 3d, enquanto o cultivo sob o hidrogel aumentou a viabilidade em 1d e reduziu após 7d para todas as concentrações. A citocompatibilidade das hidrogéis armazenados por 4 meses foi semelhante à dos hidrogéis recém-preparados, exceto para P30%. Col+AA, Col+AR e Col+AA+AR aumentaram a viabilidade celular. P25%+AR aumentou a síntese de colágeno total e P25%+AA+AR aumentou a formação de matriz mineralizada. No modelo in situ, modulação da expressão gênica foi observada para Col+AA, Col+AR, PL25%+AR+AA e P25%+AR. Foi concluído que AR 0,1 µM e AA 300 µM bioestimularam hAPCs e a associação dessas moléculas a hidrogéis de P ou Col resultou em biomateriais com potencial aplicação para procedimentos de regeneração endodôntica.