Avaliação do efeito sinérgico do miR-124-3p mimético associado ao agente quimioterápico Paclitaxel em linhagem celular de câncer de ovário

Abstract

O câncer no ovário é uma doença que afeta mulheres de diferentes faixas etárias, com uma taxa insatisfatória de sobrevida. Nesta neoplasia, alguns microRNAs (miRNAs) encontram-se diferencialmente expressos, tornando-se alvo de estudos que buscam determinar potenciais marcadores biológicos (prognóstico e diagnóstico) e terapêuticos. Os miRNAs constituem uma classe de pequenos RNAs não-codificantes com função no controle da produção de proteínas. A desregulação da expressão de miRNAs têm sido relacionada à ocorrência de eventos patológicos celulares, como o câncer, onde podem atuar como moléculas oncogênicas ou supressoras de tumor, dependendo dos genes codificantes alvo regulados. Embora diversos miRNAs tenham sido identificados no genoma humano, a absoluta maioria de seus papeis biológicos permanece desconhecido ou necessita ser rigorosamente testado. O presente estudo tem como objetivo avaliar o efeito combinado da superexpressão do miR-124-3p associada à terapia com o quimioterápico Paclitaxel na resposta de células tumorais ovarianas (SKOV-3). O miR-124-3p é descrito por ter impacto em mecanismos diversos, incluindo a apoptose, metástase, resistência a drogas, cicatrização, entre outros fatores que caracterizam doenças. A transfecção do mimic miR-124-3p foi eficaz na elevação dos níveis de expressão deste miRNA nas células SKOV-3, e sua combinação com o Paclitaxel resultou na redução da expressão de PTTG1IP, enquanto o fármaco isolado não apresentou efeito significativo sobre esse gene, sugerindo um possível papel de PTTG1IP na resistência ao tratamento. Além disso, o mimético reduziu a expressão de srGAP1, o que pode influenciar a dinâmica do citoesqueleto, embora os ensaios de wound healing tenham demonstrado que essa redução não levou a um aumento significativo da migração celular. A combinação do mimético com o Paclitaxel também promoveu maior apoptose e redução da viabilidade celular. Por fim, a reorganização da actina observada na imunofluorescência sugere um possível efeito do mimético na modulação das vias relevantes para progressão tumoral. Os achados contribuem para entender o potencial papel do miR-124-3p no câncer de ovário, auxiliando a desvendar possíveis mecanismos regulatórios.

Ovarian cancer is a disease that affects women of different age groups, with an unsatisfactory survival rate. In this neoplasia, some miRNAs are differentially expressed, making them targets of studies aimed at identifying potential biological (prognostic and diagnostic) and therapeutic markers. MicroRNAs constitute a class of small non-coding RNAs with a role in regulating protein production in metazoans. Dysregulation of miRNA expression has been linked to pathological cellular events, such as cancer, where they can act as either oncogenic molecules or tumor suppressors, depending on the target coding genes they regulate. Although numerous miRNAs have been identified in the human genome, most of their biological roles remain unknown or require rigorous testing. This study aims to evaluate the combined effect of miR-124-3p overexpression associated with chemotherapy using Paclitaxel on the response of ovarian tumor cells (SKOV-3). miR-124-3p has been reported to impact various mechanisms, including apoptosis, metastasis, drug resistance, wound healing, and other factors that characterize diseases. The transfection of the miR-124-3p mimic effectively increased the expression levels of this miRNA in SKOV-3 cells, and its combination with Paclitaxel resulted in a reduction of PTTG1IP expression, whereas the drug alone had no significant effect on this gene, suggesting a potential role of PTTG1IP in treatment resistance. Furthermore, the mimic reduced srGAP1 expression, which may influence cytoskeletal dynamics, although wound healing assays demonstrated that this reduction did not lead to a significant increase in cell migration. The combination of the mimic with Paclitaxel also promoted higher apoptosis and reduced cell viability. Finally, actin reorganization observed in immunofluorescence suggests a potential effect of the mimic in modulating the pathways relevant to tumor progression. The findings contribute to understanding the potential role of miR-124-3p in ovarian cancer, helping to uncover possible regulatory mechanisms. Keywords: Functional genomics, Non-coding small RNAs, SKOV-3, miRNA mimic, srGAP1, PTTG1IP