Botucatu - IBB - Instituto de Biociências

URI Permanente para esta coleçãohttps://hdl.handle.net/11449/253951

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Influência de fatores de virulência de Staphylococcus aureus nos diferentes escores de gravidade na mastite bovina
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-02-21) Silva, Laura Beatriz Borim da ; Rall, Vera Lúcia Mores ; Dantas, Stéfani Thais Alves ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A mastite é uma inflamação da glândula mamária, causada principalmente por bactérias. Staphylococcus aureus é um dos principais patógenos associados a essa doença, que pode causar infecções subclínica ou clínicas, com escores de leve, moderada ou grave. As principais estratégias para a persistência da bactéria no úbere envolvem a formação de biofilme e invasão das células epiteliais da glândula mamária. Além disso, a produção de superantígenos, modulinas e leucocidinas parecem desempenhar papel relevante no desenvolvimento da doença. O objetivo deste estudo foi investigar a relação da presença de genes que codificam os principais fatores de virulência de S. aureus, como produção de enterotoxinas, hemolisinas, leucocidinas, modulinas e biofilme com o escore de gravidade da mastite bovina. Foram utilizados 103 isolados, obtidos de leite de vacas com mastite subclínica e 101, de origem clínica (71 de gravidade clínica leve, 28 na moderada e duas graves). A pesquisa desses fatores de virulência foi realizada por testes de reação em cadeia da polimerase (PCR). Os isolados de S. aureus apresentaram grande plasticidade genética, sem a identificação de um marcador genético específico associado ao desenvolvimento de mastite clínica. No entanto, a tríade genética seh+selw+selx foi encontrada em 42,7% dos isolados clínicos e esteve ausente nos isolados de mastite subclínica, sugerindo um potencial biomarcador que necessita de mais estudos para validação. A prevalência significativa de genes codificadores de enterotoxinas, leucocidinas, modulinas e hemolisinas reforça seu papel na patogênese da mastite. Além disso, a produção de biofilme por isolados subclínicos, mesmo sem os principais genes conhecidos, indica a participação de outros genes. Diferentes perfis genéticos de biofilme não influenciaram a adesão e invasão dos isolados, sendo as proteínas MSCRAMMs as principais responsáveis por esses processos. O reconhecimento dessas variações genéticas pode contribuir para uma melhor compreensão das manifestações clínicas da mastite bovina e auxiliar no desenvolvimento de estratégias para controle e prevenção da doença, minimizando impactos econômicos na pecuária leiteira.
Estudos taxonômicos e morfométricos de táxons do complexo de Eriosema simplicifolium (DC.) G. Don (Leguminosae, Papilionoideae)
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-01-30) Lira, Beatriz Barcelos Costa ; Perez, Ana Paula Fortuna ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Eriosema (DC.) Desv. é um gênero monofilético da família Leguminosae, pertencente à subtribo Cajaninae da tribo Phaseoleae. Possui distribuição pantropical, com aproximadamente 160 espécies, concentradas principalmente em dois centros de diversidade: um na África (~100 espécies) e outro nas Américas (~60 espécies). Apesar de sua uniformidade morfológica, a delimitação precisa dos táxons dentro do gênero é desafiadora, pois eles são diferenciados principalmente por características foliares, que podem variar conforme o ambiente. Os táxons Eriosema simplicifolium (incluindo a variedade típica e a var. micranthum) e E. unilateralis (= E. heterophyllum) apresentam grande semelhança morfológica, dificultando sua identificação precisa. Estudos recentes apontam que esses táxons formam um complexo de espécies, ressaltando a necessidade de pesquisas detalhadas para compreender melhor suas relações. Este estudo investigou as relações entre os táxons do complexo E. simplicifolium, avaliando se as variações morfológicas observadas são suficientes para mantê-los como entidades separadas. Além disso, foram elaborados mapas de ocorrência e avaliados seus status de conservação, enriquecendo a compreensão sobre essas espécies. A metodologia adotada combinou morfometria clássica e análises multivariadas. Foram realizadas medições com paquímetro e auxílio da lupa em exsicatas depositadas nos herbários nacionais (BOTU, RB, SPF) e estrangeiros (P, S, K, US, NY). Para as análises multivariadas, utilizou-se a Análise de Componentes Principais (PCA) por meio da função “PCA” do pacote FactoMineR no programa R. Além disso, aplicou-se uma abordagem de agrupamento hierárquico em componentes principais (HCPC e UPGMA), que combina métodos hierárquicos de partição nos resultados da PCA. Os resultados revelaram uma divisão clara dos táxons analisados em três espécies distintas, principalmente com base em diferenças foliares, de hábito e de inflorescência. Com base nesses achados, propõe-se a elevação de Eriosema simplicifolium var. micranthum ao nível específico, resultando na nova combinação Eriosema micranthum (Grear) Barcelos & Fort.-Perez. Esse táxon apresenta uma distribuição geográfica mais restrita, abrindo novas possibilidades para estudos sobre sua relação com o ambiente.
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Implicações materno-fetais da exposição aos ftalatos e nanoplásticos durante a gestação de ratas
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-02-26) Magosso, Natália ; Scarano, Wellerson Rodrigo ; Arena, Arielle Cristina ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A placenta é um órgão materno-fetal essencial para o desenvolvimento adequado do feto, formando a interface entre a circulação da mãe e do feto. Continuamente, os seres humanos são expostos a desreguladores endócrinos (DEs), sendo que, na população de gestantes, estes podem interferir no desenvolvimento da prole. Os ftalatos, classificados DEs, são utilizados como plastificantes para garantir maior maleabilidade e flexibilidade aos plásticos. Quando o plástico é descartado no meio ambiente, ele se degrada em microplásticos (MPs) e nanoplásticos (NPs). É alarmante a quantidade de lixo plástico que vem se acumulando nos ecossistemas terrestre e aquático, o que tem se tornado um dos maiores desafios de saúde pública no mundo. A hipótese deste trabalho foi que condições adversas durante a gestação, como a exposição aos ftalatos e micro-nanoplásticos (MNPs), poderiam comprometer a saúde materna e alterar os processos celulares e bioquímicos desempenhados pela placenta trazendo consequências ao desenvolvimento da prole. Assim, o objetivo deste trabalho foi investigar se a exposição gestacional a uma mistura de ftalatos e MNPs interfere na interface materno-fetal, ao alterar a eficiência reprodutiva feminina, a morfologia placentária, o microbioma materno e fetal, e alterar o desenvolvimento fetal. Para isso, ratas prenhes da linhagem Sprague Dawley foram distribuídas em 6 grupos: CTR: (controle; veículo); T1: 20µg/kg/dia da mistura de ftalatos (MF); T2: 200mg/kg/dia MF; T3: 1mg/kg/dia de nanoplásticos 100 nm (NPs); T4: 20µg/kg/dia MF + 1mg/kg/dia NPs 100 nm; T5: 200mg/kg/dia MF + 1mg/kg/dia NPs 100 nm. O tratamento foi feito via oral do dia gestacional 5 (DG5) ao DG20. No DG20, 6-8 ratas de cada grupo foram anestesiadas e submetidas a laparotomia. Os fetos foram isolados, pesados e fixados para as análises viscerais e esqueléticas. Foram coletados os ovários e o útero para o registro de corpos lúteos, e sítios de implantação e reabsorções. As placentas seguiram para análises histológicas (HE), e moleculares (RTq-PCR e Western Blotting) para avaliação da expressão gênica e proteica de alvos relacionados com estresse oxidativo, sinalização celular, fatores de crescimento. Por fim, foram coletadas amostras fecais das mães no DG20 e de ratos pós-desmame no dia pós-natal (DPN) 22, para análise do microbioma intestinal. Os resultados indicaram aumento da perda pré-implantacional nos grupos T3, T4 e T5; redução do peso placentário e aumento de sua eficiência na prole masculina no grupo T3. Também foi observada uma diminuição na distância anogenital na prole feminina (T1) e masculina (T2), e uma redução no número de fetos com peso adequado para a idade de prenhez no T3. Além disso, houve aumento nos níveis de expressão gênica de alvos relacionados à diferenciação de células trofoblásticas e fatores de crescimento relacionados à angiogênese na placenta, principalmente nos grupos T3, T4 e T5. Em relação ao microbioma materno, houve redução da diversidade alfa no grupo T1, e aumento da classe Bacilli e das ordens Bacillales e Lactobacillales, nos grupos T2, T3 e T4. Dessa forma, os resultados encontrados demonstram que os NPs, isolados ou em combinação com os ftalatos, induziram alterações materno-placentários.
Efeito da paisagem urbana sobre o sucesso reprodutivo de Handroanthus impetiginosus (Mart. ex DC.) Mattos (Bignoniaceae)
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-01-29) Leite, Kaio Murilo ; Santos, Elza Maria Guimarães ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A urbanização é um processo complexo que transforma profundamente os ambientes naturais, substituindo áreas verdes por superfícies impermeáveis como asfalto e prédios. Essas alterações da paisagem natural comprometem grupos ecológicos cruciais, especialmente os polinizadores. Dentre estes, as abelhas são responsáveis pela polinização de 87% das angiospermas, desempenhando um papel fundamental na manutenção da biodiversidade e na produção de alimentos. A perda e fragmentação de habitats causadas pela urbanização reduzem significativamente os recursos disponíveis para esses polinizadores, gerando potencial impacto negativos na reprodução de plantas pela diminuição da presença de polinizadores na paisagem urbana. Pensando nisso, utilizamos Handroanthus impetiginosus (Bignoniaceae), como espécie modelo, para compreender como a intensificação urbana e o anúncio floral influenciam a interação plantas-polinizador, analisando o sucesso reprodutivo, a assembleia de abelhas e a frequência de visitas. A metodologia do estudo envolveu a estimativa de Kernel para avaliar a densidade de indivíduos florescendo e o desenvolvimento do Índice de Adequabilidade para Biodiversidade Urbana (IABU), que integra variáveis urbanas como temperatura, densidade populacional e uso do solo. Contrariando nossas expectativas iniciais, não foram observadas diferenças significativas na frutificação ou na frequência de visitas às flores por abelhas entre áreas mais ou menos urbanizadas e entre áreas com maior ou menor densidade de indivíduos florescendo. Isso sugere que as interações planta-polinizador em H. impetiginosus são mantidas de forma homogênea ao longo da paisagem urbana e periurbana. A floração massiva dessa espécie pode ter atuado como um fator de equilíbrio, criando "oásis" de recursos que atraem polinizadores de maneira uniforme, independentemente do nível de urbanização ou da densidade de árvores em floração. O manejo urbano surge como elemento crucial para a conservação das interações planta-polinizador. Estratégias que promovam a diversidade de espécies nativas com períodos complementares de floração podem garantir recursos contínuos, criar corredores ecológicos e sustentar as comunidades de polinizadores ao longo do tempo. Essas práticas são especialmente relevantes em cidades menores, que, embora não tenham se destacado como refúgios em nosso estudo, podem desempenhar um papel importante na manutenção da biodiversidade urbana.
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Métodos de estimação do excesso de mortes durante a pandemia de COVID-19 no Brasil
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-02-18) Andrade, Fernando ; Trinca, Luzia Aparecida ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A análise da mortalidade de eventos significativos, tais como pandemias, é um estudo fundamental para compreender a saúde local e avaliar seu impacto na população. Um estudo do impacto causado é de grande relevância para avaliar os possíveis fatores que poderiam ter sido mitigados e também para o planejamento de respostas a futuros eventos adversos. Neste contexto, uma maneira de executar esse estudo é através da estimação do excesso de mortes ocorrido no período. Para isso, deve-se levar em conta a diferença entre a mortalidade observada e a mortalidade que seria esperada na não ocorrência da pandemia, que é predita por modelos estatísticos. O grande desafio é a escolha de métodos de predição que levam em consideração a incerteza envolvida no processo. Dentro da bibliografia de predições, os modelos de efeitos mistos destacam-se como métodos de complexidade mediana. Este trabalho buscou explorar as vantagens e dificuldades associadas aos Modelos Lineares Generalizados Mistos (MLGM) para predizer as mortes na situação de não ocorrência da pandemia de COVID-19. Os modelos Gaussiano e Binomial Negativa apresentaram resultados semelhantes na estimativa da mortalidade esperada, ambos mostrando-se adequados para o contexto estudado. Além disso, este trabalho utilizou simulações como alternativa aos métodos numéricos mais sofisticados presentes na literatura de MLGM, o que permitiu calcular predições e incertezas associadas de forma eficiente. Tais resultados contribuem para o avanço na modelagem de dados correlacionados e heterogêneos, além de fornecer ferramentas úteis para o planejamento de ações em saúde pública.
Navegando por águas desconhecidas: uma investigação da gametogênese de antozoários do gênero Edwardsiella (Hexacorallia, Actiniaria) e da subclasse Ceriantharia
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-01-20) Teberga, Barbara Mariah Chagas ; Stampar, Sérgio Nascimento ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Estudos sobre a biologia reprodutiva são essenciais para compreender a existência dos organismos, fornecendo informações cruciais sobre ecologia, história evolutiva, taxonomia e sistemática das espécies. A gametogênese, como processo central na reprodução sexual, permite desvendar ciclos reprodutivos e compreender os mecanismos que regulam populações. Anthozoa, um subfilo diverso e de grande relevância ecológica em Cnidaria, engloba mais da metade das espécies descritas nesse filo e é caracterizado pela ampla variedade de estratégias reprodutivas de seus organismos. Apesar de concentrar a maioria dos estudos sobre reprodução em Cnidaria, o conhecimento sobre a reprodução nos grupos de Anthozoa é desigual, com lacunas notáveis em clados como Ceriantharia e Actiniaria. Diante disso, este estudo investiga aspectos da reprodução sexuada e gametogênese em grupos pouco explorados de Anthozoa, com foco no gênero Edwardsiella (Hexacorallia, Actiniaria) e na subclasse Ceriantharia. Além de mapear lacunas na literatura existente, foram analisadas a gametogênese de Edwardsiella loveni (Carlgren, 1892) e de indivíduos pertencentes à seis gêneros de Ceriantharia. Para este último grupo, os dados sobre morfologia reprodutiva foram comparados e empregados em reconstruções filogenéticas, buscando identificar sinais filogenéticos associados a caracteres reprodutivos. Os resultados contribuem para ampliar a base de conhecimento sobre a reprodução sexuada em Anthozoa, avançando na compreensão das estratégias reprodutivas e seus possíveis vínculos filogenéticos.
Avaliação in vitro da atividade do extrato de própolis verde sobre células planctônicas e sésseis de isolados clínicos da levedura Trichosporon asahii
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-02-27) Monari, Gabrielle Pires de Morais ; Menezes, Luciana da Silva Ruiz ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A levedura Trichosporon asahii faz parte da microbiota humana, causando principalmente infecções superficiais. No entanto, na última década tem causado infecções disseminadas em pacientes imunocomprometidos, além de apresentar sensibilidade diminuída a maioria dos antifúngicos utilizados na rotina terapêutica. Considerando os desafios da prática clínica para o enfrentamento de infecções fúngicas e o aumento de resistência aos antifúngicos clínicos, buscam-se alternativas terapêuticas nos produtos naturais. Assim, o presente trabalho teve co-mo objetivos determinar a atividade antifúngica (concentração inibitória mínima - CIM e con-centração fungicida mínima - CFM) in vitro do extrato etanólico de própolis verde e de quatro antifúngicos comerciais sobre células planctônicas de isolados clínicos de T. asahii; avaliar a interação entre os extratos com os melhores resultados de atividade antifúngica in vitro com os antifúngicos anfotericina B e fluconazol; avaliar a capacidade antibiofilme (inibição e remo-ção) do extrato de própolis verde frente aos isolados de T. asahii; avaliar a ultraestrutura de biofilmes de tratados com própolis; avaliar a citotoxicidade de diferentes concentrações do extrato de própolis verde sobre células animais. Foram estudadas dez cepas clínicas de T. asa-hii mantidas em micoteca, extrato de própolis verde alcóolico a 11,05% (m/v) e os antifúngicos anfotericina B, caspofungina, fluconazol e voriconazol. Os ensaios antimicrobianos in vitro foram realizados com base no EUCAST para determinação da CIM e CFM. Para anfotericina, caspofungina e voriconazol, foram testadas concentrações de 0,03-16mg/L, para fluconazol de 0,25-128mg/L e para a própolis de 2,15-1105mg/L. Os valores de CIM variaram entre 0,5mg/L e 4mg/L para anfotericina B, 4mg/L e >16mg/L para caspofungina, 0,5 e 4mg/L para flucona-zol e 0,06 e 0,5mg/L para o voriconazol. A CFM para anfotericina B variou entre 2 e 4 mg/L, >16mg/L para caspofungina, 2 e 8 mg/L para fluconazol e entre 0,5 e 2 mg/L para voriconazol. Para a própolis, os valores de CIM e CFM variaram entre 276,25 e 552,2mg/L. Ao combinar anfotericina B e fluconazol com o extrato de própolis, houve ação antagonista para ambas os compostos. Ensaios de formação de biofilmes mostraram que todas as cepas testadas foram capazes de produzir biofilmes. O tratamento com o extrato de própolis foi realizado nas con-centrações 100%CIM, 75%CIM, 50%CIM, 25%CIM e 20%CIM e foi aplicada para análise de erradicação e inibição da formação de biofilmes. Nos ensaios de erradicação, a redução de biomassa foi observada em todas as concentrações testadas (1,6-99%), mas houve pouca alte-ração na atividade metabólica (0,46-50,77%). Em contraste, nos ensaios de inibição, houve redução de biomassa (5,3-100%) e atividade metabólica (11,9-81,1%) para a maioria das con-centrações testadas. A erradicação de biofilmes analisada por Microscopia Eletrônica de Var-redura mostrou a redução da complexidade dos biofilmes formados após o tratamento. O en-saio de citotoxicidade em fibroblastos animais mostrou que as concentrações de 69,06 mg/L, 138,125 mg/L e 276,25 mg/L são tóxicas, mas a viabilidade celular aumenta nas concentrações mais altas testadas. Os resultados mostraram o efeito inibitório do extrato de própolis verde sobre as cepas clínicas de T. asahii, considerados importantes para apoiar estudos de seu uso como potencial alvo terapêutico ou adjuvante para o tratamento das infecções fúngicas.
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Dosimetria da equipe técnica durante procedimentos hemodinâmicos
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-02-17) Sousa, Rafael Real ; Miranda, Diana Rodrigues de Pina ; Alvarez, Matheus ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Este estudo comparativo investigou a relação entre a dose do paciente e a radiação espalhada em procedimentos hemodinâmicos realizados em dois hospitais: um público em Botucatu e um privado em Bauru. A pesquisa envolveu a busca e análise em banco de dados para avaliar a dose efetiva em pacientes, além de medir a radiação espalhada em diferentes cenários, com e sem a utilização de anteparos protetivos, através de instrumentos específicos e devidamente calibrados e certificados. A análise dos dados revelou que o uso de anteparos reduziu significativamente as taxas de dose espalhada, mantendo as exposições dos profissionais abaixo dos limites de 20 mSv/ano estabelecidos pela CNEN 3.01/2024. Ambos os hospitais mostraram a eficácia das medidas de proteção radiológica adotadas, destacando a importância de EPIs e protocolos otimizados. A não adesão a esses protocolos pode gerar impactos sociais, como a deterioração da saúde dos profissionais, aumentando o risco de catarata e câncer, além de comprometer a qualidade de vida. Ademais, implicações econômicas como afastamentos e custos com a reposição de pessoal podem afetar a sustentabilidade financeira das instituições. Este trabalho reforça a relevância de uma abordagem integrada na proteção radiológica, alinhando segurança ocupacional e otimização dos procedimentos.
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Estratégias espaço-temporal de controle biológico do mosquito Aedes aegypti
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-02-26) Martins, Ana Clara de Pontes ; Ferreira, Claudia Pio ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
As arboviroses representam uma das principais causas de morbidade no mundo. No Brasil, destacam-se as que causam epidemias ou surtos no ambiente urbano, como a Dengue, a Zika, o Chikungunya e a Febre Amarela, as quais circulam juntas desde 2015. Essas doenças são transmitidas pelo mosquito Aedes aegypti, e a única estratégia de controle eficaz é o combate ao vetor. As estratégias clássicas de controle ao vetor, como o mecânico e o químico, são limitadas por seu impacto ambiental e pela necessidade de reaplicações frequentes. Nesse contexto, o controle biológico surge como uma alternativa promissora e sustentável. Este projeto propõe o desenvolvimento de modelos matemáticos discretos (autômatos celulares) para avaliar estratégias de controle biológico do vetor, especificamente a liberação de mosquitos infectados por Wolbachia e de mosquitos machos estéreis. A primeira técnica consiste em substituir ou diminuir a população selvagem por uma população infectada pela bactéria, a qual é pouco apta a transmissão do vírus. Diferentemente da técnica de liberação de mosquitos machos estéreis, essa abordagem é autossustentável. Estudaremos também a influência de fatores espaciais sobre a eficiência dessas duas técnicas.
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Repercussões da exposição materna ao antidepressivo venlafaxina sobre o desenvolvimento mamário e ovariano na prole de fêmeas wistar
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-02-12) Altieri, Marcelo Augusto ; Barbisan, Luís Fernando ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
The chronic use of selective serotonin reuptake inhibitors or serotonin-norepinephrine reuptake inhibitors (SNRIs) may result in human gynecomastia, mamoplasia, galactorrhea, and elevated breast cancer risk. As antidepressants are frequently used for postpartum depression (PPD) treatment, this study investigated the adverse effects of lactational exposure to venlafaxine (VENL, a selective SNRI) on mammary gland development and carcinogenesis in F1 female offspring. Thus, lactating Wistar rats (F0) received VENL by oral gavage at daily doses of 3.85, 7.7, or 15.4 mg/kg (N = 9, each group) from the lactational day (LD 1) until the weaning of the offspring (LD 21). F1 female offspring were euthanized for mammary gland, and ovary histological analyses on the post-natal day (PND) 22 and 30 (1 pup/litter/period, N= 9, each group). At PND 22, other females (2 pups/litter) received a single dose of carcinogen N-methyl-N-nitrosourea (MNU, 50 mg/kg) intraperitoneally (i.p.) for tumor susceptibility assay until PND 250. Tumor incidence and latency were recorded and representative tumor samples were collected for histopathology. The results indicate that lactational exposure to VENL did not alter the development of the mammary gland (epithelial ductal tree or the mean number of terminal end buds), or the ovary (weight and primary, secondary, tertiary, and Graafian follicles) in prepubertal F1 female offspring. In addition, VENL exposure did not influence tumor incidence or tumor latency in adult female offspring who received MNU. Thus, the findings of this animal study indicated that lactational VENL exposure, a period like human PPD, did not exert an adverse effect on the mammary gland development at the prepubertal phase or on chemically induced mammary tumorigenesis in adult F1 female rats.
Avaliação molecular de MICA e MICB em indivíduos saudáveis: quantificação de RNA e moléculas de membrana
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-02-25) Ferraz, Ingrid Miranda ; Castro, Camila Ferreira Bannwart ; Castelli, Erick da Cruz ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Os genes MICA e MICB pertencem ao complexo principal de histocompatibilidade (MHC), considerada a região mais polimórfica do genoma humano. Esses genes codificam proteínas glicosiladas ancoradas à membrana, semelhantes às moléculas de MHC-I, mas que não se ligam à β2-microglobulina nem apresentam antígenos. MICA/B atuam como ligantes para o receptor ativador NKG2D, encontrado em células natural killer (NK) e linfócitos TCD8+. A interação de MICA/B e NKG2D desencadeia uma resposta citotóxica, com liberação de perforinas e granzimas nas células-alvo transformadas ou infectadas. No entanto, MICA/B possui a isoforma solúvel (sMICA/B) originada por clivagem proteica ou polimorfismo, o que impede a citotoxicidade celular de NK e TCD8+. Sendo assim, pelo fato dessas proteínas desempenham papeis importantes em várias condições clínicas como disfunções gestacionais, doenças autoimunes, rejeição de transplantes, neoplasias malignas e infecções intracelulares, o objetivo do presente trabalho foi correlacionar os alelos de MICA e MICB de indivíduos saudáveis com o perfil de expressão de mRNA e proteína na superfície de monócitos. Com base no sequenciamento de um projeto anterior, foram selecionados 20 indivíduos com genótipos de interesse (que codificam diferentes isoformas de MICA/B) para o cultivo de monócitos estimulados com lipopolissacarídeo de Escherichia coli (LPS). As células foram armazenadas com TRIzol para análise de expressão de RNA ou desacopladas com tripsina e marcadas com anticorpos anti-CD14, anti-MICA e anti-MICB para análise por citometria de fluxo. Foram determinados grupos de indivíduos com genótipos semelhantes para as análises. Genótipos semelhantes foram agrupados em indivíduos heterozigotos para o alelo MICA*008 (MICA*008 HET), indivíduos homozigotos para MICA*008 (MICA*008 HOM), cujos alelos codificam proteínas que podem permanecer retidas no citoplasma (MICA*010/017 RET) e aqueles que codificam a proteína completa (MICA*002 MEM). Para MICB, os grupos foram divididos em indivíduos com o alelo MICB*002 (MICB*002 RES), indivíduos portadores dos alelos MICB*004 (MICB*004 SUSC) e outros genótipos (MICB*005 UNK). Monócitos estimulados com LPS não aumentaram significativamente a expressão de mRNA de MICA e MICB, nem a expressão dessas moléculas na superfície celular em indivíduos saudáveis. Já quando comparamos os grupos, foi notável a alta porcentagem de positividade de monócitos para MICA no grupo MICA*008 HOM, o que pode ser explicado pela ancoragem da proteína truncada à membrana por meio do GPI. E uma baixa porcentagem de monócitos expressando MICA na superfície no grupo MICA*002 MEM, que pode ser explicada pela clivagem da molécula por metaloproteinases .E, por fim, um perfil de positividade de MICB na superfície dos monócitos foi compatível com a literatura, onde indivíduos que carregam o alelo MICB*004 (grupo MICB*004 SUSC) apresentou uma redução significativa da porcentagem de expressão na superfície celular. Uma vez que as moléculas de MICA e MICB são importantes mecanismos de ativação imune ou de escape em algumas doenças virais e cânceres, entender seu perfil molecular em pessoas saudáveis, especialmente em população miscigenada como a brasileira, poderá aprimorar diagnósticos e critérios de severidades de doenças, além de impulsionar avanços em imunoterapias futuras.
Efeito da geoprópolis e do ácido anacárdico em Staphylococcus epidermidis multirresistentes e modulação da atividade de macrófagos suprimidos
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-02-10) Lopes, Emilly Camargo ; Sforcin, José Maurício ; Ripari, Nicolas ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A geoprópolis (GEO) é produzida por abelhas sem ferrão e possui compostos bioativos, como o ácido anacárdico (AA), o qual apresenta diferentes atividades biológicas, dentre elas a antimicrobiana. Staphylococcus epidermidis é uma bactéria comensal que tem se tornado um problema de saúde pública devido à sua resistência aos antimicrobianos, ocasionando falha terapêutica. Essas bactérias podem causar infecções nosocomiais, que podem ser agravadas em pacientes imunossuprimidos. Neste estudo, foi avaliada a possível ação antibacteriana da GEO produzida por Melipona fasciculada Smith e de seu componente isolado, AA, bem como a ação dos tratamentos em associação com antibióticos, tendo como objetivo investigar a ação antibacteriana e imunomoduladora em macrófagos tratados ou não com dexametasona (DEX). Foi avaliada a concentração inibitória mínima (MIC) e bactericida (MBC) da GEO, do AA e dos antimicrobianos (ceftarolina e gentamicina) isoladamente ou em combinação, para observar uma possível ação sinérgica. O efeito dos tratamentos foi avaliado também na capacidade da bactéria em produzir biofilme. A ação imunomoduladora dos tratamentos foi analisada em células THP-1 diferenciadas em macrófagos suprimidos ou não, avaliando a viabilidade celular, a expressão de TLR-2, de eicosanoides (PGE2 e LTBG4), de citocinas (TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-8 e IL-10) e a atividade bactericida contra S. epidermidis. A GEO não apresentou atividade antimicrobiana no modelo analisado. Em comparação com o AA, os antimicrobianos convencionais apresentaram concentração inibitória e bactericida mínima substancialmente mais elevadas. O AA também demonstrou eficácia na inibição de biofilmes bacterianos. O ensaio de checkerboard revelou ausência de interação entre AA ceftarolina e antagonismo com gentamicina. O AA não afetou a expressão de TLR-2, mas aumentou a capacidade bactericida dos macrófagos suprimidos ou não com dexametasona e inibiu a produção de IL-10. Pode-se concluir que o AA apresenta ação antibacteriana e imunomoduladora, podendo ser um adjuvante eficaz no tratamento de infecções por S. epidermidis.
Triagem computacional de potenciais ligantes para os sítios de ligação do substrato e do cofator catalítico do domínio metiltransferase da RNA polimerase do Vírus Sincicial Respiratório humano
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-11-29) Santos, Gledson Vinicius Miranda dos ; Caruso, Ícaro Putinhon ; Souza, Fátima Pereira de ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
O Vírus Sincicial Respiratório Humano (HRSV) é um patógeno de grande relevância clínica, sendo uma das principais causas de morbidade respiratória em crianças, idosos e indivíduos imunocomprometidos. Apesar de sua importância, as opções terapêuticas disponíveis permanecem limitadas, destacando a urgência de identificar novas estratégias antivirais. Neste contexto, este estudo teve como objetivo a triagem computacional de potenciais ligantes dirigidos aos sítios de interação do substrato (GTP) e do cofator catalítico (SAM) no domínio metiltransferase (MTase) da RNA polimerase (proteína L) do HRSV. Modelos estruturais do domínio MTase foram construídos utilizando os servidores Swiss-Model, Alphafold, RosettaFOLD, RosettaTR e I-TASSER, tendo como base a estrutura cristalográfica 4UCI do vírus ortólogo Metapneumovírus humano (HMPV). A seleção dos modelos estruturais mais robustos foi baseada em métricas de RMSD e análises conformacionais a partir dos gráficos de Ramachandran. A estabilidade conformacional dos modelos foi avaliada por simulações de dinâmica molecular conduzidas no software GROMACS, garantindo a consistência estrutural para as etapas subsequentes. A triagem virtual de compostos, realizada nos bancos de dados ZINC15 e PubChem, possibilitou a identificação de moléculas com alta similaridade aos ligantes naturais do domínio MTase. Os compostos selecionados foram submetidos a análises físico-químicas utilizando as plataformas SwissADME e pkCMS, que forneceram insights detalhados sobre sua viabilidade como candidatos antivirais. Estudos de docking molecular realizados com os programas AutoDock e Vina, determinaram o padrão de interação entre os ligantes e os sítios de interesse. Por fim, novas simulações de dinâmica molecular e cálculos de energia livre de ligação, conduzidos pelo método MM-PBSA, confirmaram a estabilidade das interações nos complexos e permitiram comparar o desempenho dos compostos como potenciais candidatos antivirais contra o HRSV. Os resultados deste trabalho destacam a identificação de compostos promissores como potenciais agentes antivirais dirigidos ao HRSV. Este estudo reforça a relevância de abordagens computacionais integradas como ferramentas de extrema valia na busca por terapias antivirais inovadoras, além de fornecer uma base sólida para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas direcionadas especificamente ao domínio MTase.
Variabilidade dos genes HLA-DOA e HLA-DOB: polimorfismos, haplótipos e aspectos evolutivos
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-11-27) Silva, Isabelle Mira da ; Castelli, Erick da Cruz ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Os genes HLA-DOA e HLA-DOB codificam as duas subunidades que compõem a molécula HLA-DO, responsáveis por mediar o processamento e carregamento de antígenos em moléculas HLA de classe II. Estes genes exibem menor polimorfismo em comparação com outros genes HLA. No entanto, estes polimorfismos podem influenciar significativamente a suscetibilidade à infecções por patógenos e ao desenvolvimento de doenças autoimunes. Em nosso estudo, avaliamos 5.349 amostras de diferentes populações ao redor do mundo, incluindo o Brasil. Utilizamos um pipeline de bioinformática direcionado para a avaliação de genes HLA, o que nos permitiu caracterizar a diversidade genética observada nos genes HLA-DOA e HLA-DOB e encontrar variantes até então desconhecidas. Apesar de levantados, os alelos relacionados aos genes foram pouco frequentes e restritos a determinadas regiões biogeográficas, como por exemplo o DOA*01:01:11 e DOB*01:03:01 presente no continente africado, europeu e americano (sul e norte). Adicionalmente, avaliamos os perfis de frequência alélica para cada região biogeográfica. Além disso, mesmo incluindo dados de população brasileira (miscigenadas), esses genes apresentaram-se bastante conservados, principalmente à nível de isoformas proteicas, sendo para ambos a presença majoritária de DOA*01:01 e DOB*01:01. Mas além disso, em termos de sequência (de DNA e da proteína codificada) quando comparados aos genes vizinhos, possivelmente devido a forças evolutivas mantendo a estrutura da molécula HLA-DO devido à sua importante função.
Explorando a diversidade, taxonomia e dinâmica de microcrustáceos na Bacia do Rio Congo com uma análise comparativa intercontinental
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-12-20) Silva, Camila Moreira ; Neves, Gilmar Perbiche ; Sousa, Francisco Diogo Rocha ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Este estudo teve como objetivo analisar a diversidade, distribuição e biogeografia de microcrustáceos, com foco em Cladocera e Copepoda em diferentes escalas. Foram apresentados três capítulos: 1. Novos dados sobre a morfologia de Kurzia longirostris (Daday, 1898) (Crustacea, Branchiopoda) com base em populações da Bacia do Rio Congo; 2. Diversidade e dinâmica de microcrustáceos na Bacia do Rio Congo; 3. Distribuição, diversidade e biogeografia de Cladocera e Copepoda em escala intercontinental. Foi possível observar variações morfológicas nas populações africanas da espécie Kurzia longirostris, visualizadas detalhadamente por meio de ilustrações e imagens, sugerindo um possível complexo de espécies. Em relação ao estudo abrangente sobre os microcrustáceos (Cladocera e Copepoda) na Bacia do Rio Congo, foi possível registrar 66 espécies, das quais 24 eram registros inéditos para a Bacia. O estudo destacou variações espaciais e sazonais na distribuição dessas espécies, com destaque para a importância das tributárias no ecossistema. Por fim, o último capítulo, que ampliou para uma análise em escala continental, comparando a distribuição de microcrustáceos na África, América do Sul e América do Norte, revelou que que as Américas apresentam maior similaridade taxonômica entre si, enquanto as regiões tropicais (como a África e a América do Sul) possuem maior diversidade. O estudo também destacou como fatores biogeográficos, como barreiras geográficas, dispersão e gradientes latitudinais, podem influenciar a distribuição das espécies.
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Variações na composição de guildas tróficas de peixes: estudo de caso no reservatório de Batalha (alto Paraná) e no Complexo Hidrelétrico Anta/Simplício (Paraíba do Sul)
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-11-29) Ramos, Julia Kaori Kuriyama ; Ramos, Igor Paiva ; Silveira, Alexandre Ninhaus ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A formação de reservatórios de usinas hidrelétricas causa diversos impactos negativos no ambiente, afetando todos os tipos de ecossistemas. Ainda, os impactos podem ser diferentes, dependendo do tipo da configuração dos sistemas hidrelétricos. Os estudos sobre alterações na estrutura das guildas tróficas, especialmente das assembleias de peixes, têm sido utilizados como ferramenta para avaliar os impactos ambientais de sistemas hidrelétricos. Assim, o objetivo desta pesquisa foi analisar se houve alterações na estrutura das guildas tróficas das assembleias de peixes do complexo hidrelétrico de Anta/Simplício e do reservatório de Batalha, em escala temporal e espaço-temporal, antes e após o funcionamento dos sistemas. Esperava-se observar, em ambos as áreas, aumento na abundância das guildas piscívoras, carnívoras (insetívoras, invertívora) e onívoras, devido à alta surgência de nutrientes causada pela formação do reservatório, e pelas condições de ambientes lênticos a montante das barragens, e a diminuição de guildas detritívoras pela queda na disponibilidade e qualidade dos nutrientes associados aos sedimentos, principalmente a jusante das barragens. Foram utilizados dados dos monitoramentos ictiofaunísticos realizados pela Eletrobras, em quatro pontos de coleta para Anta/Simplício: montante, jusante e Trecho de Vazão Reduzida-TVR (2 pontos) e quatro pontos para Batalha: montante (3 pontos) e jusante, em períodos pré (2009-2011 (Anta/Simplício), 2010-2012 (Batalha)) e pós (2016-2022 (Anta/Simplício), 2014-2022 (Batalha)) enchimento dos reservatórios. Cada espécie de peixe amostrada foi categorizada em uma guilda trófica de acordo com literatura especializada. Para as espécies do complexo Anta/Simplício classificou-se em quatro guildas tróficas (herbívora, carnívora, onívora e detritívora), enquanto para as espécies do reservatório de Batalha classificou-se em cinco guildas tróficas (herbívora, piscívora, onívora, detritívora e invertívora). Para cada guilda utilizou-se a análise GLMM para verificar variações da abundância entre os períodos e entre pontos de coleta. Para verificar possíveis alterações na composição das guildas tróficas entre as fases realizou-se a PERMANOVA. Para explorar e ordenar a distribuição da composição da estrutura trófica entre os períodos foi realizado uma nMDS. No complexo Anta/Simplício verificou-se variação temporal na abundância da guilda herbívora, e variação espaço-temporal nas abundâncias das guildas herbívora e carnívora. Mas não se observou variação temporal na composição das guildas tróficas. Pela nMDS observou-se menor relação da guilda herbívora com as demais guildas, com maior relação dessa guilda com o ponto montante. Já no reservatório de Batalha verificou-se variação temporal para a guilda onívora, e variação espaço-temporal para as guildas detritívora, piscívora, onívora e invertívora. Além disso, houve variação na composição das guildas tróficas após o enchimento e essa alteração está relacionada às diferentes guildas tróficas que compõem cada período. Pela nMDS observou-se maior relação da guilda piscívora com os pontos a montante após o enchimento. Ambas as áreas de estudos demonstraram alteração na estrutura das guildas tróficas após o enchimento, mas com distintas respostas. As alterações podem estar relacionadas à disponibilidade de recursos, que é influenciada pelas condições ambientais formadas após o enchimento. A análise das guildas tróficas forneceu uma abordagem eficiente para avaliar os impactos ambientais, destacando a importância dessa ferramenta para a gestão e conservação de ambientes aquáticos.
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Avaliação da biodiversidade da ictiofauna em ecossistemas estuarinos do litoral de São Paulo utilizando DNA ambiental e RNA ambiental metabarcoding como biomarcadores
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-11-29) Nitzsche, Natascha Mozaner ; Pinhal, Danillo ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A avaliação da distribuição e abundância das espécies é imprescindível para estudos sobre a biodiversidade e para o desenvolvimento de políticas voltadas para sua conservação, especialmente em ambientes vulneráveis como os estuários. Nesse contexto, o DNA ambiental (eDNA) e o RNA ambiental (eRNA) metabarcoding surgem como técnicas não-invasivas para o levantamento de espécies, a partir de ácidos nucleicos isolados de amostras ambientais. O presente trabalho se propõe a avaliar a aplicabilidade de eDNA e eRNA em estudos metabarcoding para o levantamento de espécies de peixes em duas regiões de estuário do litoral norte paulista, do rio Escuro (Ubatuba) e do rio Juqueriquerê (Caraguatatuba). Coletamos amostras de água a partir de um gradiente de salinidade em três porções de cada estuário nos meses de agosto de 2023 (inverno) e fevereiro de 2024 (verão), filtrando parte do conteúdo para eRNA e parte para eDNA. Para obtenção dos ácidos nucleicos, DNA e RNA, todo o material passou por etapas de extração de material genético, purificação, amplificação do gene de rRNA 12S e posteriormente encaminhados para sequenciamento Illumina. Obtivemos sucesso de sequenciamento de 18 amostras, sendo 10 do rio Juqueriquerê (eDNA) e 8 do rio Escuro (eDNA e eRNA), com a identificação total de 93 espécies considerando ambos os rios, incluindo peixes, mamíferos, anfíbios e aves. A partir dos principais parâmetros de diversidade avaliados, o rio Escuro apresentou uma maior abundância de espécies quando comparado ao rio Juqueriquerê, com informações principalmente fornecidas pelos dados de eDNA. No rio Juqueriquerê também houve a identificação de espécies invasoras como a tilápia-do-nilo e o bagre-africano. A partir de nossas análises, constatamos que o eRNA e o eDNA tem potencial de serem amplamente utilizados como ferramentas para o monitoramento de fauna, e o uso combinado de métodos, incluindo os tradicionais, diminui as limitações de cada técnica e representam de forma acurada a composição de espécies, principalmente com eRNA e sua detecção de organismos ativos, representando um retrato fiel da fauna viva em determinado espaço-tempo.
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Desenvolvimento de fibra prebiótica derivada do subproduto da cadeia agrícola brasileira: polpa do coffea arabica (café)
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-01-15) Petry, Julia da Costa Aguiar ; Di Stasi, Luiz Claudio ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
O Brasil ocupa hoje a posição de maior produtor mundial de café. Nesse sentido, tudo o que é produzido para o consumo do grão, é também desperdiçado no que diz respeito ao restante da planta. A polpa do café é um resíduo alimentar e com amplo potencial de ser utilizado como alimento funcional, por sua ação prebiótica. O consumo de alimentos prebióticos está principalmente associado à fermentação da microbiota intestinal e, portanto, à produção de ácidos graxos de cadeia curta (AGCCs). Os estudos realizados até o momento por nosso grupo de pesquisa mostram que o resíduo de café arábica possui grande quantidade de fibras em sua constituição, substrato principal para a fermentação pela microbiota. Desta forma, o projeto analisou o comportamento de doze bactérias da microbiota intestinal, assim como a produção de acetato, propionato e butirato após a administração do resíduo de café arábica. Foram realizados estudos in vitro, através da fermentação de diferentes concentrações do produto, e estudos in vivo, por meio da administração de resíduo de café em camundongos C57/Bl6. Nos estudos in vitro, a utilização do resíduo do café na concentração 100 mg/ml promoveu resultados promissores sobre a produção dos três AGCCs analisados, alcançando níveis iguais ou superiores aos de inulina, padrão ouro de prebióticos no mercado. Para os estudos in vivo, não houve modulação na produção de AGCCs, no entanto, principalmente o gênero Bifidobacterium foi modulado de maneira significativa. Os resultados que demonstram a ação prebiótica do resíduo do café, sugerem maiores investigações sobre sua ação em modelos experimentais de doenças associadas à microbiota intestinal.
Competição interespecífica entre o siri nativo Callinectes danae e o siri invasor Charybdis hellerii em um cenário de aumento de temperatura
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-12-06) Cirillo, Leonardo ; Costa, Tânia Marcia ; Miayi, Caio Akira ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Climate change and biological invasions are two major drivers contributing to biodiversity loss. Once established, invasive species overlap ecological niches with native species, frequently monopolizing resources due to their aggressiveness during direct competition. Temperature plays a critical role in the physiology and behaviors of marine ectothermic species, with invasive species exhibiting greater resistance to abiotic stressors compared to native species, potentially intensifying competitive exclusion under future climate change scenarios. This study evaluates whether temperature affects agonistic interaction and resource acquisition between native and invasive swimming crab’s species during food resource competition. Similar-sized individuals of the native blue crab Callinectes danae were exposed to the similar niche invasive swimming crab Charybdis hellerii in a competition situation for a single food item (Perna perna mussel) under control (27.1°C) and climate scenario RCP 8.5 (+4,3°C; 31.4°C). Our results suggest that future climate change scenario temperatures may not significantly alter interactions with the invasive species. However, higher temperatures decreased non-contact aggressions, indicating a quicker escalation of fights regardless of the competitor’s present. Physical aggressions were significantly more intense with conspecifics competitor than with invasive competitors. The lower intensity of fights with invasive species may be attributed to the threat posed by the invasive's larger weapon size (cheliped) relative to the native species. Food acquisitions were also not affected by temperature or by the invasive species presence, despite the conspecific competitor led to a reduction in the native species food monopolization time. While the invasive species exhibited slower feeding initiation than the native species, it maintained similar food holding time. These findings suggest that projected climate change scenarios are unlikely to substantially alter the competitive dynamics between C. danae and C. hellerii.
Modulação da expressão gênica de marcadores de disfunções da pele e de doenças neurodegenerativas a partir da dienta enriquecida com o subproduto do café (Coffea arabica)
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-12-05) Garozzo, Mariana Nakabara ; Di Stasi, Luiz Claudio ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
O café é uma planta de alto valor econômico e cultural devido a bebida que se prepara a partir de sua semente. Do plantio à bebida, partes do seu fruto como casca e polpa, tornam-se descarte e muitos compostos bioativos são desperdiçados. Na busca de diminuir este desperdício e o impacto ambiental gerado pelo descarte, a indústria farmacêutica é vista como grande potencial na pesquisa para a transformação desse resíduo em um subproduto de valor agregado na área da saúde. Neste contexto, o subproduto do café torna-se material de estudos a partir da sua implementação na dieta, e a sua digestão é avaliada em dois eixos do organismo que estão diretamente ligados ao intestino: eixo Intestino-Pele e eixo Intestino-Cérebro. Para que os estudos sobre a interferência do subproduto do café, por meio da digestão, interagissem nos eixos citados, foram utilizadas amostras de intestino, pele e cérebro de camundongos e análises de expressão gênica de genes previamente selecionados com atividades conhecidas em processos inflamatórios e disfuncionais da pele e em processos neurodegenerativos no cérebro. Dos 368 genes avaliados, 16 apresentaram resultados estatísticos significativos, sendo 8 no intestino, Cldn4, Pax3, Psen2, Jun, Prss8, Sirt1, Tgm1 e Tyr; 4 na pele: Hsp90aa1, Panx3, Cdk11 e Muc1; e 4 no cérebro, Acss2, IL-6, Tgm1 e Tgm5. Destes resultados, o subproduto do café demonstrou uma atividade mais benéfica em relação ao cérebro e a marcadores de doenças neurodegenerativas do que nos marcadores dermatológicos e intestinais.

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