Efeito da terapia fotodinâmica antimicrobiana associada ao blue m® para prevenção da cárie dental

Abstract

A cárie dentária é uma doença de etiologia multifatorial que afeta a população mundial. Essa patologia é causada pela presença de biofilme cariogênico composto principalmente por bactérias do gênero Streptococcus. Essas bactérias fermentam carboidratos presentes em dieta com alto teor de açúcares o que culmina na queda do pH bucal e na consequente produção de ácido, causando a desmineralização e dissolução mineral do esmalte dentário, iniciando, assim, a formação da lesão cariosa. A terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDA) tem se mostrado um importante recurso antimicrobiano que pode ser usado tanto na prevenção como no tratamento da doença cárie. A TFDA basicamente corresponde à associação de uma fonte de luz visível e um fotossensibilizador que na presença do oxigênio local gera espécies reativas que são tóxicas às bactérias. Portanto, o objetivo desse estudo foi investigar o efeito antibacteriano da TFDA em biofilme duo espécie de Streptococcus mutans e Streptococcus sobrinus, utilizando-se curcumina associada ou não ao Blue m® a 1%. O biofilme cariogênico duo-espécie (Streptococcus mutans e Streptococcus sobrinus) foi submetido à TFDA a 10, 30 ou 60J/cm² utilizando-se curcumina em concentrações de 25µM,50µM ou 100µM associada ou não ao enxaguante bucal Blue m® a 1%. Grupos na ausência de luz também foram realizados. Após tratamento, avaliação do metabolismo pelo teste do XTT e determinação da biomassa total pelo método do cristal violeta foram realizados. Os experimentos foram feitos em triplicata em três ocasiões diferentes. Os dados obtidos neste trabalho foram submetidos à análise estatística não paramétrica pelo teste de Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn para comparações aos pares ao nível de 5% de significância. A curcumina na concentração a 100µm irradiada por doses de luz de 30 e 60J/cm² e associados ao Blue m® a 1% demonstraram atividade antimicrobiana, sendo similar inclusive ao grupo controle positivo (clorexidina) (p>0.05). O presente estudo demonstrou que a TFDA associada ao fotossensibilizador curcumina e ao enxaguatório Blue m® a 1% produziu efeito antimicrobiano sobre o biofilme duo-espécie. Diante disso, a TFDA nos parâmetros utilizados neste estudo, pode ser uma alternativa ao uso da clorexidina, evitando-se o risco de seus efeitos colaterais principalmente quando utilizada a longo prazo. Estudos adicionais são necessários e que avaliem a viabilidade clínica desse tipo de terapia para que se torne um método adjuvante e alternativo auxiliando na prevenção da cárie dentária.

Dental caries is a disease with multifactorial etiology that affects the world population. This pathology is caused by the presence of a cariogenic biofilm mainly Streptococcus bacteria. These bacteria ferment carbohydrates present in a diet with high sugar content, which culminates in a drop in oral pH and the consequent production of acid, causing demineralization and mineral dissolution of dental enamel, thus initiating the formation of carious lesions. Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) has been shown to be an important antimicrobial tool that can be used in both, prevention and treatment of caries disease. aPDT basically corresponds to the association of a visible light source and a photosensitizer in the presence of local oxygen, that generates reactive species that are toxic to bacteria. Therefore, the objective of this study was to investigate the antibacterial effect of aPDT on dual species biofilms of Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus, using curcumin associated or not with 1% Blue m®. The duo-species cariogenic biofilm (Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus) was subjected to aPDT at 10, 30 or 60J/cm² using curcumin associated or not with Blue m® mouthwash under 1%. Groups in the absence of light were also carried out. After treatment, evaluation of metabolism using the XTT test and determination of total biomass using the crystal violet method were carried out. The experiments were performed in triplicate at three different occasions. The data obtained in this study were subjected to non-parametric statistical analysis using the Kruskal-Wallis test and Dunn's post-test for pairwise comparisons at a 5% significance level. Curcumin at a concentration of 100µm irradiated by light doses of 30 and 60J/cm² and associated with 1% Blue m® demonstrated antimicrobial activity, which were similar even to the positive control group (chlorhexidine) (p>0.05). The present study demonstrated that aPDT associated with curcumin and Blue m® under 1% produced an antimicrobial effect over the duo-species biofilm. Therefore, aPDT under the parameters used in this study can be an alternative to the use of chlorhexidine, avoiding the risk of its side effects, especially for a long-term use. Additional studies are needed to evaluate the clinical feasibility of this type of therapy, to become an adjuvant and alternative method to help prevent tooth decay.