Ação antibacteriana, imunomoduladora e cicatrizante do extrato padronizado de própolis vermelha e da fração rica em benzofenonas: predições computacionais e desenvolvimento de produto tópico para tratamento de infecções cutâneas

Abstract

Feridas de difícil cicatrização representam um sério problema de saúde pública por recorrentes infecções bacterianas em ambiente hospitalar . Dentre os principais patógenos multi-droga resistentes destas infecções , está o Staphylococcus aureus resistente à meticilina ( MRSA ). Indivíduos portadores de diabetes , obesidade e acamados que sofrem com úlcera por pressão , acabam desenvolvendo infecções cutâneas por MRSA que podem tornar-se invasivas e levar a sérios problemas, como sepse . O presente relatório apresenta os resultados do primeiro ano de pós-doutorado (processo FAPESP 2023/01436-9) do participante junto ao setor de microbiologia e imunologia do departamento de ciências químicas e biológicas do Instituto de Biociências de Botucatu, UNESP. Foram realizados experimentos com isolados clínicos de MRSA provenientes de infecções cutâneas. Testes de microdiluição em caldo para determinar concentração inibitória e bactericida mínima (MIC e MBC) de extratos de própolis vermelha e seus componentes isolados, teste de sinergismo entre Gutiferona E, Oblongifolina A e antimicrobianos foram realizados a fim de propor possíveis formulações. Avaliação de viabilidade de monócitos THP-1 diferenciados em macrófagos resultou na triagem do composto Gutiferona E e duas formulações utilizando Gutiferona e antimicrobianos . Testes antibiofilme com cepas de MRSA ATCC 33591 e USA300, foram realizados com estas fórmulas além de avaliação de atividade bactericida de macrófagos contra a cepa MRSA isolada de ferida , USA300. Gutiferona E e duas das fórmulas obtidas impediram a formação de biofilme das cepas e aumentaram de forma significante, a capacidade de killing bacteriano por macrófagos THP-1 previamente imunossuprimidos e desafiados com a USA300. As MICs e MBCs de Gutiferona E foram baixas indicando alto potencial antibacteriano / bactericida desta benzofenona. Além do mais, um possível mecanismo de ação da Gutiferona E foi analizado por molecular docking sobre a principal enzima de resistencia do MRSA , a PBP2a mostrando alta afinidade com o sitio ativo e alostérico desta enzima . Isto indica que o mecanismo de ação antibacteriano do composto seja bloqueando a ação desta enzima na construção da parede bacteriana, matando a bactéria por lise osmótica. Atualmente, estão sendo realizados testes de migração celular com estas formulações sobre culturas 2D e 3D de queratinócitos e fibroblastos . Perspectivas para o segundo ano de projeto são confeccionar hidrogel com a fórmula que obtiver resultados satisfatórios e testar sua permeação cutânea em projeto de bolsa de pesquisa no exterior (BEPE), já submetido. Artigo científico com os resultados presentes neste relatório já está em vias de submissão.