Extensores à base de gema de ovo e lipossomas na criopreservação de semen colhido por massagem retal associado ou não ao uso de eletroejaculador em bufalos
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Data
Autores
Orientador
Oba, Eunice 
Coorientador
Pós-graduação
Biotecnologia Animal - FMVZ
Curso de graduação
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Dissertação de mestrado
Direito de acesso
Acesso restrito
Resumo
Resumo (português)
Este estudo avaliou o uso de diferentes diluentes e métodos de colheita de sêmen sobre a qualidade espermática pós-descongelamento em búfalos da raça Murrah. Foram obtidos 22 ejaculados de dez animais em 98 tentativas, sendo selecionados para criopreservação apenas os com motilidade total ≥75%, vigor ≥3 e concentração ≥30x10⁶ espermatozoides/mL. Os ejaculados foram divididos entre dois diluentes: gema de ovo (BotuBov®) e lipossoma (OptiXcell®). Após congelamento e descongelamento (37 °C por 30 segundos), avaliou-se a cinética espermática e a integridade celular por citometria de fluxo. O grupo diluído com lipossoma apresentou maior velocidade curvilínea (VCL: 138,5 ± 62,8 mm/s vs. 109 ± 24,9 mm/s; P=0,02) e maior proporção de espermatozoides com movimento lento (SLOW: 7,7 ± 6,7% vs. 5,6 ± 6,1%; P=0,03). Por outro lado, o grupo com gema de ovo apresentou valores superiores para frequência de batimento de cauda (BCF: 30,9 ± 5,5 Hz vs. 24,8 ± 9,6 Hz; P=0,002), retilinearidade (STR: 87,1 ± 7% vs. 73,8 ± 18,5%; P=0,0002) e linearidade (LIN: 57,8 ± 10,3% vs. 46,1 ± 13,3%; P=0,0006). Após 3 horas de incubação a 37 °C, a linearidade permaneceu maior no grupo com gema de ovo (LIN: 40,7 ± 29,6% vs. 27,5 ± 23,9%; P=0,03). Dos 22 ejaculados, 17 foram obtidos por massagem retal (TRM) e 5 por TRM com eletroejaculador (TRM+EL). O método TRM+EL com diluente lipossomal resultou em maior VCL (169,5 ± 53,6 mm/s) e amplitude de deslocamento lateral da cabeça (ALH: 6,7 ± 1,4 mm) comparado ao TRM com diluente de gema de ovo (VCL: 117,6 ± 25,7 mm/s; P=0,01; ALH: 4,9 ± 0,8 mm; P=0,01). Já o TRM+EL com gema de ovo apresentou maior STR (93 ± 3% vs. 47,1 ± 37,6%; P=0,0001) e LIN (66 ± 6,6% vs. 43 ± 5,6%; P<0,0001). A citometria revelou maior preservação da integridade espermática com gema de ovo (MPAI: 29,75 ± 13,1%; MPAL: 8,8 ± 7,3% vs. 22,62 ± 16,7%). Conclui-se que o diluente à base de gema de ovo foi mais eficaz na manutenção da cinética e integridade espermática, e que a massagem retal é um método viável para colheita em búfalos.
Resumo (inglês)
This study evaluated the use of different diluents and semen collection methods on post-thawing sperm quality in Murrah buffaloes. Twenty-two ejaculates were obtained from ten animals in 98 attempts, and only those with total motility ≥75%, vigor ≥3 and concentration ≥30x10⁶ sperm/mL were selected for cryopreservation. The ejaculates were divided between two diluents: egg yolk (BotuBov®) and liposome (OptiXcell®). After freezing and thawing (37°C for 30 seconds), sperm kinetics and cell integrity were evaluated by flow cytometry. The liposome-diluted group showed higher curvilinear velocity (VCL: 138.5 ± 62.8 mm/s vs. 109 ± 24.9 mm/s; P=0.02) and higher proportion of slow-moving sperm (SLOW: 7.7 ± 6.7% vs. 5.6 ± 6.1%; P=0.03). On the other hand, the egg yolk group showed higher values for tail beat frequency (BCF: 30.9 ± 5.5 Hz vs. 24.8 ± 9.6 Hz; P=0.002), rectilinearity (STR: 87.1 ± 7% vs. 73.8 ± 18.5%; P=0.0002) and linearity (LIN: 57.8 ± 10.3% vs. 46.1 ± 13.3%; P=0.0006). After 3 hours of incubation at 37°C, linearity remained higher in the egg yolk group (LIN: 40.7 ± 29.6%
vs. 27.5 ± 23.9%; P=0.03). Of the 22 ejaculates, 17 were obtained by rectal massage (RMT) and 5 by RMT with electroejaculator (RMT+EL). The RMT+EL method with liposomal diluent resulted in greater VCL (169.5 ± 53.6 mm/s) and amplitude of lateral displacement of the head (ALH: 6.7 ± 1.4 mm) compared to RMT with egg yolk diluent (VCL: 117.6 ± 25.7 mm/s; P=0.01; ALH: 4.9 ± 0.8 mm; P=0.01). On the other hand, RMT+EL with egg yolk presented greater STR (93 ± 3% vs. 47.1 ± 37.6%; P=0.0001) and LIN (66 ± 6.6% vs. 43 ± 5.6%; P<0.0001). Cytometry revealed greater preservation of sperm integrity with egg yolk (MPAI: 29.75 ± 13.1%; MPAL: 8.8 ± 7.3% vs. 22.62 ± 16.7%). It is concluded that the egg yolk-based extender was more effective in maintaining sperm kinetics and integrity, and that rectal massage is a viable method for collection in buffaloes.
Keywords: Bubalus bubalis, semen collection, rectal massage, eletroejaculator
Descrição
Palavras-chave
Bubalus bubalis, Colheita seminal, Massagem retal, Eletroejaculador
Idioma
Português
Citação
ALMEIDA FILHO, Rogério Araújo. Extensores à base de gema de ovo e lipossomas na criopreservação de semen colhido por massagem retal associado ou não ao uso de eletroejaculador em bufalos. 2025. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia Animal) - Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Botucatu, 2025.
