Prevalência e caracterização molecular de Leptospira em animais silvestres de vida livre

Abstract

A leptospirose é uma zoonose de importância mundial causada por bactérias do gênero Leptospira. Diversas espécies de mamíferos podem atuar como reservatórios, liberando a bactéria de forma intermitente na urina, bem como apresentar quadros clínicos de gravidade variada. O objetivo do presente estudo é identificar o papel dos animais silvestres como carreadores de Leptospira spp. Foram coletadas amostras de sangue para a realização do diagnóstico sorológico (Soroaglutinação Microscópica - SAM) e de urina e rim para diagnóstico molecular (Reação em Cadeia pela Polimerase em Tempo Real – qPCR). Dentre as amostras positivas, sete foram submetidas ao sequenciamento Sanger. Foram obtidas amostras de 227 animais distribuídos em 30 espécies (98 de urina, 140 de rim e 60 de soro). Na qPCR das amostras de urina e rim, foram obtidas 10 positivas (4,7%) das espécies: Cachorro-do-mato (n=1), Irara (n=1), Lobo-guará (n=1), Lontra (n=1), Macaco-prego (n=1), Onça-parda (n=1), Ouriço-cacheiro (n=2), Tamanduá-mirim (n=1) e Tatu-galinha (n=1). Obteve-se sucesso em cinco das sete amostras sequenciadas, com identificação de quatro espécies de Leptospira: L. borgpetersenii em Macaco-prego, L. santarosai em Onça-parda, L. noguchii em Irara e L. interrogans em Lobo-guará e Lontra. A SAM evidenciou um resultado positivo em uma Raposa-do-campo para o sorovar Copenhageni, com título 1:1.600. Os dados reforçam a relevância da realização do diagnóstico molecular deste patógeno em animais silvestres e a importância do uso de equipamentos de proteção individual pelos profissionais que trabalham com animais silvestres.

Leptospirosis is a zoonosis of worldwide importance caused by bacteria of the genus Leptospira. Several mammal species can act as reservoirs, intermittently shedding the bacteria in their urine, as well as presenting clinical conditions of varying severity. The objective of the present study is to identify the role of wild animals as carriers of Leptospira spp. Blood samples were collected for serological diagnosis (Microscopic Agglutination Test - MAT), and urine and kidney samples were collected for molecular diagnosis (Real-Time Polymerase Chain Reaction - qPCR). Among the positive samples, seven were subjected to Sanger sequencing. Samples were obtained from 227 animals distributed across 30 species (98 urine, 140 kidney, and 60 serum). In the qPCR of urine and kidney samples, 10 positive results (4.7%) were obtained from the following species: Crab-eating fox (n=1), Tayra (n=1), Maned wolf (n=1), Neotropical otter (n=1), Capuchin monkey (n=1), Puma (n=1), Brazilian porcupine (n=2), Southern tamandua (n=1), and Nine-banded armadillo (n=1). Success was achieved in five of the seven sequenced samples, with the identification of four Leptospira species: L. borgpetersenii in a Capuchin monkey, L. santarosai in a Puma, L. noguchii in a Tayra, and L. interrogans in a Maned wolf and a Neotropical otter. MAT showed a positive result in a Hoary fox for the serovar Copenhageni, with a titer of 1:1,600. The data reinforce the relevance of performing the molecular diagnosis of this pathogen in wild animals and the importance of using personal protective equipment by professionals working with wild animals.