AVALIAÇÃO DA PROVA DE IMUNOPEROXIDASE COMO RECURSO DIAGNÓSTICO NA LEPTOSPIROSE ANIMAL

Abstract

The indirect immunoperoxidase technique was evaluated comparatively to the silver impregnation technique (Warthin Starry) and bacterial isolation in hamster aiming at their use on tissues of leptospirosis-suspected animals. Sixty adult hamsters were divided in group A corresponding to animals inoculated with Leptospira pomona and group B to 20 non-infected animals. Kidneys of all animals were submitted to bacterial isolation, immunohistochemistry in paraffin embedded kidney section and glass slide imprints, and Warthin Starry and Hematoxilineosin staining. The immunohistochemistry techniques demonstrated high sensivity (100%) and specificity (100%). Compared to slide imprints, in tissue sections the preservation of the cellular architecture was maintained as well as the structural integrity of the antigen. High sensivity and specificity were also observed in the Whartin Starry technique although it is not considered to be a serovar specific technique. Positive culture results were obtained in 77.5% of the samples demonstrating lower sensivity compared to the other techniques.

O presente trabalho teve por objetivo avaliar as técnicas de imunoperoxidase indireta comparativamente à impregnação pela prata (Warthin Starry), e isolamento bacteriano em hamsters, visando sua utilização em tecidos provenientes de animais suspeitos de leptospirose. Foram utilizados 60 hamsters adultos distribuídos em grupo A constituído por 40 hamsters inoculados com a Leptospira pomona e grupo B composto por 20 animais não inoculados. Os animais de ambos grupos foram submetidos ao isolamento bacteriano, imunohistoquímica em cortes e impressões em lâminas, coloração através da técnica de Warthin Starry e através da coloração pela Hematoxilina-Eosina. As técnicas imunohistoquímicas apresentaram elevada sensibilidade (100%) e especificidade (100%) em detectar o agente nos tecidos renais dos hamsters infectados, entretanto em cortes histológicos a preservação da arquitetura celular favoreceu a integridade estrutural do antígeno quando comparados as impressões em lâminas. A técnica de Warthin Starry também apresentou elevada sensibilidade, embora não seja considerada técnica sorovar específica. Com cerca de 77,5% de amostras positivas, resultados de cultivo apresentaram-se inferiores às técnicas descritas acima quanto à sensibilidade em detectar leptospiras provenientes de tecidos renais.