Efeitos do FSH, AMPc, hCG e combinações, no meio de maturação e influência na produção in vitro de embriões bovinos
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Data
Autores
Orientador
Garcia, Joaquim Mansano 
Coorientador
Lima, Marina Ragagnin de
Pós-graduação
Ciências Veterinárias - FCAV
Curso de graduação
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Dissertação de mestrado
Direito de acesso
Acesso aberto
Resumo
Resumo (português)
A maturação oocitária é um complexo bem orquestrado que culmina na liberação de um oócito capaz de ser fertilizado, permitindo assim, o desenvolvimento embrionário. A maturação in vitro (MIV) é uma das etapas determinantes para o sucesso da produção in vitro de embriões (PIVE) e a não competência oocitária nesta fase altera drasticamente a taxa de produção embrionária. Apesar de todos os esforços para a melhoria da PIVE, apenas uma parcela de 35 a 40% dos oócitos bovinos maturados in vitro, desenvolvem-se até o estádio de blastocisto. Acredita-se que a falta de sincronia existente entre a maturação nuclear e a maturação citoplasmática oocitária seja um fator limitante na qualidade da PIVE. Dessa forma, o uso de reguladores durante a MIV, tem se destacado e melhorado a sincronia da maturação nuclear e citoplasmática dos oócitos, e consequentemente, a taxa de produção embrionária. Nesse contexto, o presente estudo teve como finalidade avaliar a influência dos reguladores de maturação - hormônio folículo estimulante (FSH), monofosfato cíclico de adenosina (AMPc) e gonadotrofina coriônica humana (hCG), e suas combinações - na presença de albumina sérica bovina (BSA) como fonte protéica, sobre a MIV de oócitos bovinos, comparados ao grupo controle, com soro fetal bovino (SFB) sem adição dos reguladores. Foram formados dez grupos experimentais (T1: SFB, T2: FSH, T3: AMPc, T4: hCG, T5: FSH+AMPc, T6: FSH+hCG, T7: AMPc+hCG, T8: FSH+AMPc+hCG e T9: (FSH+AMPC) por 12 horas + hCG nas outras 12 horas, T10: BSA). Foram avaliadas as taxas de maturação nuclear e citoplasmática, de acordo com a presença de metáfase II (MII), migração dos grânulos corticais e mitocôndrias, capacidade em produzir embriões e acúmulo lipídico embrionário. Os resultados demonstraram que o uso do BSA durante a MIV provocou atraso na retomada da meiose em todos os grupos experimentais analisados, comparados à maturação com SFB (p < 0,05). Porém, a distribuição de grânulos corticais e de mitocôndrias no ooplasma, bem como a taxa de produção embrionária, apresentaram melhores resultados quando o SFB foi utilizado (p < 0,05). Além disso, a substituição do SFB pelo BSA na MIV não reduz os níveis lipídicos dos embriões produzidos in vitro (PIV) (p > 0,05). Conclui-se que, o uso do BSA durante a MIV de oócitos bovinos, permite o atraso da reativação da meiose, contudo, a presença do SFB nessa etapa é de suma importância para a maturação das organelas citoplasmáticas e na produção in vitro de embriões bovinos.
Resumo (inglês)
Oocyte maturation is a well-orchestrated process that culminates in the release of an oocyte capable of being fertilized, thereby allowing embryonic development. In vitro maturation (IVM) is one of the critical steps for the success of in vitro embryo production (IVP), and oocyte incompetence at this stage significantly reduces embryo production rates. Despite continuous efforts to improve IVP efficiency, only about 35–40% of bovine oocytes matured in vitro develop to the blastocyst stage. It is believed that the asynchrony between nuclear and cytoplasmic maturation of the oocyte is a limiting factor for IVP quality. Therefore, the use of regulatory agents during IVM has gained attention, improving the synchrony between nuclear and cytoplasmic maturation and, consequently, enhancing embryo production rates. In this context, the present study aimed to evaluate the influence of maturation regulators—follicle-stimulating hormone (FSH), cyclic adenosine monophosphate (cAMP), and human chorionic gonadotropin (hCG), and their combinations—using bovine serum albumin (BSA) as a protein source, on the IVM of bovine oocytes, compared to a control group containing fetal bovine serum (FBS) without the addition of regulators. Ten experimental groups were established (T1: FBS; T2: FSH; T3: cAMP; T4: hCG; T5: FSH + cAMP; T6: FSH + hCG; T7: cAMP + hCG; T8: FSH + cAMP + hCG; T9: FSH + cAMP for 12 hours followed by hCG for the next 12 hours; T10: BSA). Nuclear and cytoplasmic maturation were assessed based on the presence of metaphase II (MII), migration of cortical granules and mitochondria, embryo development competence, and embryonic lipid accumulation. The results demonstrated that the use of BSA during IVM caused a delay in meiotic resumption in all experimental groups compared to maturation with FBS (p < 0.05). However, cortical granule and mitochondrial distribution in the ooplasm, as well as embryo production rates, were superior when FBS was used (p < 0.05). Furthermore, replacing FBS with BSA during IVM did not reduce lipid levels in in vitro-produced (IVP) embryos (p > 0.05). It can be concluded that the use of BSA during bovine oocyte IVM allows for the delay in meiotic resumption; however, the presence of FBS at this stage is crucial for cytoplasmic organelle maturation and in vitro production of bovine embryos.
Descrição
Palavras-chave
Produção in vitro, Mitocôndria, Embriões, Reprodução
Idioma
Português
Citação
RIBEIRO, T.I.S. - Efeitos do FSH, AMPc, hCG e combinações, no meio de maturação e influência na produção in vitro de embriões bovinos - 2025, 44f - Dissertação (Mestrado em Ciências Veterinárias) - Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho", Jaboticabal, 2020
