Avaliação do efeito antiviral de trans-chalcona e equinatina em cultura de células A549 contra o hRSV

Abstract

O Vírus Sincicial Respiratório Humano (hRSV) é a principal causa de infecções respiratórias agudas e hospitalizações em crianças menores de cinco anos, idosos e indivíduos com comorbidades. Atualmente, a ribavirina é a única farmacoterapia antiviral aprovada para o tratamento das infecções pelo hRSV; entretanto, seu uso é limitado devido ao alto custo, toxicidade e ação inespecífica. As estratégias profiláticas incluem a administração de anticorpos monoclonais, como palivizumabe e nirsevimabe, indicados para grupos de alto risco. Diante desse cenário, a busca por novas alternativas terapêuticas seguras e acessíveis torna-se essencial. Nesse contexto, as chalconas têm despertado interesse devido às suas propriedades farmacológicas, incluindo atividades antiviral, anti-inflamatória e imunomoduladora. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito antiviral da trans-chalcona e da equinatina contra o hRSV em células pulmonares A549. As substâncias foram inicialmente avaliadas quanto à sua citotoxicidade, sendo selecionadas concentrações com viabilidade celular ≥80%. A atividade antiviral foi analisada por ensaios baseados em fluorescência e luminescência, utilizando os vírus recombinantes rgRSV e rA2-Rluc. A equinatina apresentou atividade antiviral significativa, em 24 horas pós-infecção (hpi), a substância promoveu até 68% de inibição viral na concentração de 50 µM, efeito que foi mantido em 48 hpi, alcançando 67% de inibição viral. Em contraste, a trans-chalcona apresentou efeito antiviral limitado, atingindo 34,2% de inibição em 24 hpi na maior concentração testada, com redução para 20% em 48 hpi. A análise das curvas concentração–resposta revelou que a equinatina apresentou IC₅₀ de 23,6 µM em 24 hpi e 21,8 µM em 48 hpi, associados a índices de seletividade (IS) de 7,8 e 6,2, respectivamente. Por outro lado, a trans-chalcona apresentou IC₅₀ superiores a 83 µM em ambos os tempos, com IS de 3,5. Em conjunto, esses resultados indicam que a equinatina possui um perfil antiviral mais favorável, possivelmente associado à interferência em etapas intracelulares do ciclo replicativo do hRSV, destacando seu potencial como candidata para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas.

Human Respiratory Syncytial Virus (hRSV) is the leading cause of acute respiratory infections and hospitalizations in children under five years of age, as well as in elderly individuals and patients with comorbidities. Currently, ribavirin is the only antiviral pharmacotherapy approved for the treatment of hRSV infections; however, its use is limited due to high cost, toxicity, and nonspecific activity. Prophylactic strategies include the administration of monoclonal antibodies, such as palivizumab and nirsevimab, which are indicated for high-risk populations and administered prior to periods of increased viral circulation. In this context, the search for new, safe, and accessible therapeutic alternatives is of great importance. Chalcones have attracted attention due to their pharmacological properties, including antiviral, anti-inflammatory, and immunomodulatory activities. The present study aimed to evaluate the antiviral effects of trans-chalcone and echinatin against hRSV in pulmonary A549 cells. Initially, the compounds were assessed for their cytotoxicity, and concentrations yielding ≥80% cell viability were selected. Antiviral activity was evaluated using fluorescence- and luminescence-based assays with recombinant viruses rgRSV and rA2-Rluc. Echinatin exhibited significant antiviral activity, at 24 hours post-infection (hpi), the compound achieved up to 68% viral inhibition at 50 µM, an effect that was maintained at 48 hpi, reaching 67% viral inhibition. In contrast, trans-chalcone showed limited antiviral activity, reaching 34.2% inhibition at 24 hpi at the highest concentration tested, with a reduction to 20% at 48 hpi. Concentration–response curve analysis revealed that echinatin presented IC₅₀ values of 23.6 µM at 24 hpi and 21.8 µM at 48 hpi, associated with selectivity indexes (SI) of 7.8 and 6.2, respectively. On the other hand, trans-chalcone exhibited IC₅₀ values above 83 µM at both time points, with SI values 3.5. Collectively, these results indicated that echinatin displayed a more favorable antiviral profile, possibly associated with interference in intracellular stages of the hRSV replicative cycle, highlighting its potential as a candidate for the development of new therapeutic strategies against hRSV.