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Produção de vanilina por bactérias cultivadas em hidrolisados de bagaço de cana-de-açúcar pré tratados com ozonólise.

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Pós-graduação

Microbiologia - IBILCE

Curso de graduação

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Universidade Estadual Paulista (Unesp)

Tipo

Dissertação de mestrado

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Acesso abertoAcesso Aberto

Resumo

Resumo (português)

A cultura de cana-de-açúcar para produção de açúcar e álcool é a maior geradora de resíduos agrícolas do Brasil. A principal dificuldade no uso dos resíduos lignocelulósicos em biotecnologia é a complexidade de suas estruturas havendo necessidade de tratamentos específicos para a desconstrução dessa organização estrutural, sendo a lignina o composto responsável pela maior parte da resistência à degradação química e biológica da fibra do bagaço. Os tratamentos químicos, como a hidrólise ácida ou alcalina, são os mais utilizados pela indústria, porém, a de pré-tratamentos aumentam a eficiência da hidrólise. Entre os agentes oxidantes químicos, o ozônio é o que possui maior reatividade sobre as substâncias com grupos funcionais com alta densidade eletrônica, incluindo aqui as ligações de alcenos, tais como aquelas amplamente presentes em lignina, tendo como vantagens a bioconversão efetiva da lignina em seus compostos derivados; não produção de resíduos tóxicos e o fato de que as reações podem ser realizadas à temperatura e pressão ambiente. O presente trabalho visou testar a ozonólise como mecanismo de pré-tratamento do material lignocelulósico de modo a empregá-lo, por meio da biotransformação mediada por microrganismos, na produção de vanilina, substância de grande interesse comercial com aplicação nas industrias alimentícia, farmacológica e química. Verificamos que o tratamento foi eficiente e que seus compostos derivados conseguiram ser convertidos em vanilina através do metabolismo bacteriano. A produção por Micrococcus luteus chegou a 145 mg/L às 10 horas de cultivo com compostos derivados do tratamento hidrotérmico, demonstrando um grande potencial de se obter compostos de importância econômica, como vanilina e acetovanilona, a partir de bagaço de cana hidrolisado usando cultivo microbiano. Além disso, outras substâncias foram geradas a partir do pré tratamento de ozônio, como o ácido ferúlico (52 mg/L) e ácido cumárico (149 mg/L), que podem ser utilizadas tanto como produtos finais, quanto como precursoras na produção de outros compostos na indústria.

Resumo (inglês)

The cultivation of sugarcane for the production of sugar and alcohol is the largest generator of agricultural waste in Brazil. The main difficulty in the use of lignocellulosic residues in biotechnology is the complexity of their structures, requiring specific treatments to deconstruct this structural organization, with lignin being the compound responsible for most of the resistance to chemical and biological degradation of bagasse fiber. Chemical treatments, such as acid or alkaline hydrolysis, are the most used by the industry, however, pre-treatments increase the hydrolysis efficiency. Among the chemical oxidizing agents, ozone is the one with the highest reactivity on substances with functional groups with high electron density, including here the alkene bonds, such as those widely present in lignin, with the advantages of effective bioconversion of lignin into its compounds. derivative compounds; no production of toxic residues and the fact that the reactions can be carried out at ambient temperature and pressure. The present work aimed to test ozonolysis as a pre-treatment mechanism of lignocellulosic material in order to use it, through biotransformation mediated by microorganisms, in the production of vanillin, a substance of great commercial interest with application in the food, pharmacological and chemical industries. We verified that the treatment was efficient and that its derivative compounds were able to be converted into vanillin through bacterial metabolism. The production by Micrococcus luteus reached 145 mg/L at 10 hours of cultivation with compounds derived from the hydrothermal treatment, demonstrating a great potential to obtain compounds of economic importance, such as vanillin and acetovanilone, from hydrolyzed sugarcane bagasse using microbial culture. In addition, other substances were generated from the ozone pretreatment, such as ferulic acid (52 mg/L) and coumaric acid (149 mg/L), which can be used both as final products and as precursors in the production of other compounds in the industry.

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Português

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Tipo de item:Publicação, Tese de doutorado
Biotransformação de ácidos hidroxicinâmicos por Micrococcus luteus TG3.30: uma abordagem bioquímica, genômica e in silico
(Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2026-08-07)
Biancheti, Lara Maria
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Gomes, Eleni
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Santos, Maitê Bernardo Correia dos
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Vilela, Nathália
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Gross, Jeferson
A valorização de compostos fenólicos derivados da biomassa lignocelulósica representa uma estratégia relevante para o desenvolvimento de processos sustentáveis associados à bioeconomia circular. Entre esses compostos, o ácido ferúlico destaca-se como precursor renovável para a produção de 4-vinilguaiacol (4VG), molécula aromática de interesse para as indústrias de alimentos, fragrâncias, cosméticos e química fina. Esta tese investigou a capacidade de Micrococcus luteus TG3.30 em converter ácido ferúlico em 4VG, integrando caracterização bioquímica, aplicação em hidrolisado fúngico, análise genômica, proteômica e modelagem in sílico. Inicialmente, foi realizada uma revisão crítica sobre compostos fenólicos derivados da lignina e suas aplicações tecnológicas. Em seguida, extratos enzimáticos de M. luteus TG3.30 foram obtidos e avaliados quanto à atividade descarboxilante sobre ácido ferúlico comercial, considerando diferentes frações celulares, tempos de reação e pH. A atividade foi predominantemente associada ao extrato intracelular, sendo 60 min e pH 6,5 definidos como condições adequadas para os ensaios. Posteriormente, hidrolisados fúngicos obtidos por fermentação em estado sólido de bagaço de cana-de-açúcar e farelo de trigo com Myceliophthora heterothallica e Myceliophthora thermophila foram utilizados como substratos para a conversão enzimática. Ambos os hidrolisados de 8 dias permitiram a formação de 4VG pelo extrato intracelular de M. luteus TG3.30, atingindo 49,67 mg L⁻¹ para M. heterothallica e 51,91 mg L⁻¹ para M. thermophila. O sequenciamento completo do genoma de M. luteus TG3.30 revelou um genoma de 2,58 Mb, com 72,92% de conteúdo GC, mas não identificou genes codificantes para ferulato descarboxilases canônicas. Diante disso, foram investigadas enzimas alternativas com atividade descarboxilase anotada ou domínios relacionados, incluindo hemQ, sucA, pyrF e panD. Análises proteômicas por LC-MS/MS e modelagem molecular indicaram a coproheme descarboxilase, codificada por hemQ, como candidata prioritária para a atividade observada. As predições in silico indicaram afinidade da enzima pelo ácido trans-ferúlico e sugeriram a participação de resíduos como His163, Tyr140, Trp188 e Phe142 na estabilização do substrato. Em conjunto, os resultados demonstram que M. luteus TG3.30 é capaz de converter ácido ferúlico em 4VG por um sistema enzimático intracelular, possivelmente associado a uma rota não canônica de descarboxilação. Esta tese contribui para ampliar o conhecimento sobre a biotransformação de ácidos fenólicos por actinobactérias ambientais e propõe uma abordagem integrada para valorização de resíduos lignocelulósicos e produção sustentável de compostos aromáticos de maior valor agregado.

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Tipo de item:Unidade,
São José do Rio Preto, Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas - IBILCE
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Campus: São José do Rio Preto

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