Estudo do proteoglicano agrecano e do padrão de citocinas associado ao nanismo em equinos da raça Mini-Horse no Brasil

Abstract

O nanismo é um distúrbio de desenvolvimento que acarreta em um crescimento anormal, podendo ser classificado como proporcional ou desproporcional, dependendo da sua fisiopatogenia. Na raça Mini-Horse, sabe-se que o nanismo desproporcional é de caráter autossômico recessivo e envolve o gene aggrecan (ACAN) presente no cromossomo 1. São observados crescimento fisário retardado em membros e costelas, crânio desproporcionalmente maior que o corpo e malformado e, membros, tronco e pescoço encurtados como principais sinais clínicos. Diante do grande impacto do nanismo na raça Mini-Horse, objetivou-se realizar o estudo histológico da cartilagem articular e placa epifisária de animais afetados desta raça, detectar e quantificar o proteoglicano agrecano na cartilagem articular através da técnica de Western Blot e correlacionar com a expressão gênica das principais citocinas pró inflamatórias (IL-1β, IL-6 e TNF-α). Para isso, foram selecionados 8 Mini-Horse anões (GA) e três Mini-Horse sem o fenótipo do nanismo (GC). A condrodisplasia foi encontrada apenas nos equinos anões (100%) quando comparado ao grupo controle, em diferentes graus e a expressão gênica do proteoglicano agrecano apresentou-se maior no grupo dos anões (p = 0,0119). A quantificação indireta por Western blotting do agrecano apresentou tendência de valores maiores dos equinos anões quando comparados ao GC. Em relação às citocinas, não foram detectadas diferenças significativas entre os grupos. Conclui-se que o agrecano é expresso nos equinos anões da raça Mini-Horse, porém, esta molécula defeituosa parece estar intimamente relacionada ao desenvolvimento da enfermidade na raça, devido aos achados histopatológicos na cartilagem articular e placa epifisária e os achados fenotípicos observados.

Dwarfism is a developmental disorder leading to an extreme abnormal growth that can be classified as proportional or disproportional, depending on its pathophysiology. In the Mini-Horse breed it is known that disproportional dwarfism is autosomal recessive and involves the aggrecan gene (ACAN) in the chromosome 1. Delayed physeal growth in limbs and ribs, disproportionately large and malformed skull and shortened limbs, trunk and neck as main clinical signs are observed. With the great impact of dwarfism in the Mini-Horse breed, the aim was to perform the histological study of the articular cartilage and epiphyseal plate of affected animals from this breed, detect and quantify the aggrecan glycoprotein in cartilages using the Western Blot technique and correlate with the gene expression of the main pro inflammatory cytokines (IL-1β, IL-6 and TNF-α). Eighteen dwarf Mini-Horse (DG) and five Mini-Horse without this phenotype (CG) were selected. Chondrodysplasia was observed only in dwarf horses (100%) when compared to the control group, in different degrees and the gene expression of the aggrecan proteoglycan was higher in the dwarf group (p = 0.0119). The indirect quantification by Western blotting of the aggrecan showed a tendency for higher values of the dwarf horses when compared to the CG. Regarding cytokines, no significant differences were detected between groups. It is concluded that aggrecan is expressed in MiniHorse dwarf equines, however, this defective molecule seems to be closely related to the development of the disease in this breed, due to the histopathological findings in the articular cartilage and epiphyseal plaque and the phenotypic findings observed