Expressão gênica de proteínas de fase aguda em fígado de vacas leiteiras durante período seco

Abstract

O período seco em vacas leiteiras corresponde à interrupção programada da produção de leite ao final da lactação, sendo essencial para a regeneração do tecido mamário e o desempenho produtivo futuro. A secagem abrupta pode desencadear resposta inflamatória sistêmica devido ao acúmulo de leite, levando à liberação de citocinas e à produção de proteínas de fase aguda (PFA). Níveis elevados de citocinas estão associados a maior incidência de mastite e redução produtiva. Entre as PFA positivas, a haptoglobina (Hp) destaca-se como marcador de gravidade e prognóstico, com alta sensibilidade a infecções e propriedades antioxidantes. A amiloide sérica A (SAA3) apresenta resposta rápida e intensa, com funções imunomoduladoras e antimicrobianas. Já a α1-glicoproteína ácida (AGP) é considerada um marcador de inflamação crônica, atuando também no transporte de moléculas lipofílicas. Este estudo teve como objetivo avaliar a expressão gênica das proteínas de fase aguda Hp, SAA3 e AGP em vacas leiteiras durante o período seco. Foram utilizadas seis vacas clinicamente saudáveis, com produção superior a 15 kg/dia. Amostras de tecido hepático foram obtidas por biópsias percutâneas, tendo a área de punção sido previamente identificada por ultrassonografia nos momentos M0 (dia da secagem), M1(10 dias após) e M2 (20 dias após). A expressão gênica foi determinada por qPCR (TaqMan), utilizando GAPDH como gene de referência. Na análise estatística para medidas repetidas no tempo, cada animal atuou como seu próprio controle. Para os dados normais, aplicou-se ANOVA ( P ≤ 0,05) e, para não paramétricos, o teste de Friedman (P ≤ 0,05). As expressões relativas dos genes codificadores de Hp (p = 0,3), SAA3 (p = 0,4) e AGP (p = 0,7) não apresentaram diferenças estatísticas significativas entre os momentos avaliados. No entanto, a Hp apresentou maior sensibilidade relativa de resposta em comparação às demais proteínas (SAA3 e AGP). Esses achados sugerem que a expressão gênica dessas proteínas pode refletir alterações inflamatórias iniciais da involução mamária. Contudo, os resultados devem ser interpretados com cautela devido às limitações do estudo, como o reduzido tamanho amostral e a ausência de dados zoossanitários, nutricionais e de avaliações complementares, reforçando a necessidade de abordagens experimentais mais integradas.

The dry period in dairy cows corresponds to the planned interruption of milk production at the end of lactation, being essential for mammary tissue regeneration and future productive performance. Abrupt drying-off may trigger a systemic inflammatory response due to milk accumulation, leading to the release of cytokines and the production of acute phase proteins (APPs). Elevated cytokine levels are associated with a higher incidence of mastitis and reduced productivity. Among the positive APPs, haptoglobin (Hp) stands out as a marker of severity and prognosis, with high sensitivity to infections and antioxidant properties. Serum amyloid A (SAA3) shows a rapid and intense response, with immunomodulatory and antimicrobial functions. Meanwhile, α1-acid glycoprotein (AGP) is considered a marker of chronic inflammation and also acts in the transport of lipophilic molecules.This study aimed to evaluate the gene expression of the acute phase proteins Hp, SAA3, and AGP in dairy cows during the dry period. Six clinically healthy cows with production above 15 kg/day were used. Liver tissue samples were obtained through percutaneous biopsies, with the puncture area previously identified by ultrasonography at time points M0 (day of drying-off), M1 (10 days after), and M2 (20 days after). Gene expression was determined by qPCR (TaqMan), using GAPDH as the reference gene. In the statistical analysis for repeated measures over time, each animal served as its own control. For normally distributed data, ANOVA was applied (P ≤ 0.05), and for non-parametric data, the Friedman test (P ≤ 0.05) was used. The relative expression of the genes encoding Hp (p = 0.3), SAA3 (p = 0.4), and AGP (p = 0.7) did not show statistically significant differences among the evaluated time points. However, Hp showed a greater relative magnitude of response compared to the other proteins (SAA3 and AGP). These findings suggest that the gene expression of these proteins may reflect early inflammatory changes during mammary involution. However, the results should be interpreted with caution due to study limitations, such as the small sample size and the lack of zootechnical, sanitary, nutritional, and complementary evaluation data, reinforcing the need for more integrated experimental approaches.