Screening de biblioteca de mutantes de Xanthomonas citri pv. aurantifolii patótipo C para genes relacionados à patogenicidade e virulência.

Abstract

The study of genes in bacteria of the genus Xanthomonas that cause citrus diseases is essential to understand the biology of interaction of these pathosystems. The species Xanthomonas citri pv. aurantifolii pathotype C (XauC), which causes type C canker, have the ability to infect only two citrus species due to the virulence variation profile and genes present in its genome, when compared to more aggressive species. There are few studies on the role of these variations in XauC, which can lead to a better characterization of the Xanthomonas-Citrus pathosystem. Thus, the identification of new genes related to the pathogenic processes of this bacterium was carried out using the screening approach of a mutant library by transposons (EZ-Tn5 System) from XauC. Two hundred and sixteen mutants were inoculated in the abaxial part of Citrus aurantifolia young leaves and the cancrose symptoms were evaluated for 25 days. Eight mutants showed altered cancer symptoms in the first inoculation in planta, however, in subsequent inoculations, seven of them returned to classic canker symptoms. The mutant, ΔXauC_P4G7, showed reproducibility in the results and revealed a total absence of type C canker classic symptoms, relating a genomic region to XauC pathogenic processes. These results contribute to a better understanding of the XauC-citrus interaction biology.

O estudo dos genes em espécies de bactérias do gênero Xanthomonas causadoras de doenças cítricas é imprescindível para compreender a biologia de interação destes patossistemas. A espécie Xanthomonas citri pv. aurantifolii patótipo C (XauC), causadora da cancrose tipo C, possui a capacidade de infectar apenas duas espécies de citros devido à variação no perfil de virulência e genes presentes em seu genoma, quando comparado com espécies mais agressivas. Poucos são os estudos sobre o papel dessas variações em XauC, que podem levar a uma melhor caracterização do patossistema Xanthomonas Citros. Assim, a busca por novos genes relacionados à processos patogênicos desta bactéria foi realizada utilizando-se a abordagem de screening de uma biblioteca de mutantes por transposons (EZ-Tn5 System) de XauC. Duzentos e dezesseis mutantes foram inoculados na parte abaxial de folhas jovens de Citrus aurantifolia e os sintomas de cancrose foram acompanhados durante 25 dias. Oito mutantes apresentaram sintomas de cancrose alterados na primeira inoculação in planta, porém, em 3 repetições subsequentes, sete deles voltaram a apresentar sintomas clássicos de cancrose. O mutante ΔXauC_P4G7 apresentou reprodutibilidade nos resultados e revelou ausência total dos sintomas clássicos de cancrose tipo C. Dessa forma, o mutante ΔXauC_P4G7 pode estar relacionado a uma região do genoma envolvido no processo de patogenicidade de XauC, apesar de não ter sido possível identificar a região mutada.