Atividade quimiopreventiva das substâncias de Inga laurina por abordagem proteômica em células de hepatocarcinoma

Abstract

Inga laurina, é uma árvore nativa da América tropical e subtropical, distribuída em todo o mundo, sendo utilizada amplamente como árvore de sombra e seus frutos comestíveis seus frutos são do tipo vagem e contém grande quantidade de sementes, e ainda são comestíveis. A composição química deste vegetal é rica em compostos fenólicos, os quais podem ser responsáveis pela atividade antioxidante relatada em seus extratos e frações. O presente estudo teve como objetivo avaliar a citotoxicidade, por meio do ensaio de MTT, genotoxicidade e antigenoxidade através do ensaio do cometa, além de verificar a capacidade quimiopreventiva com o ensaio de indução da enzima quinona redutase. As amostras avaliadas foram três substâncias puras, isoladas da fração acetato de etila obtida de folhas e ramos de Inga laurina através do Ensaio do Cometa. Os experimentos demonstraram que as substâncias testadas não são citotóxicas, não induzem a enzima quinona redutase e não causam danos genotóxicos pelo ensaio do cometa. Foi observada uma proteção na avaliação da antigenotoxicidade em todas as substâncias testadas e um reparo contra danos causados por peróxido de hidrogênio em três das substâncias. No experimento de proteômica, avaliaram-se as proteínas expressas em células HepG2 na condição de reparo observada no ensaio de antigenotoxicidade. Foram encontradas proteínas diretamente relacionadas com a eliminação de ROS (espécies reativas de oxigênio), reparo de DNA, proteínas tumorais e de apoptose. Não foi possível identificar uma via especifica de reparo, já que muitas dessas proteínas são multifuncionais.

Inga Laurina is a tree native to tropical and subtropical America, distributed worldwide and is widely used as a shade tree and its edible fruit its fruits are pod type and contains lots of seeds, and are still edible . The chemical composition of this plant is rich in phenolic compounds, which may account for their reported in extracts and fractions antioxidant activity. The present study aimed to evaluate the cytotoxicity through MTT assay, genotoxicity and antigenotoxicity through the comet assay, besides verifying the chemopreventive ability to test induction of quinone reductase enzyme. The samples were evaluated three pure, isolated compounds from the ethyl acetate fraction obtained from leaves and branches of Inga Laurina by Comet Assay. The experiments showed that the tested substances are not cytotoxic, do not induce quinone reductase enzyme and do not cause genotoxic damage by the comet assay. A protection was observed in the evaluation of antigenotoxicity in all tested substances and repair damage caused by hydrogen peroxide in three substances. In proteomics experiment, we analyzed the proteins expressed in HepG2 cells repair the condition observed in the test antigenotoxicity. Proteins directly related to the elimination of ROS (reactive oxygen species), DNA repair, apoptosis and tumor proteins were found. Unable to identify a specific repair, since many of these proteins are multifunctional pathway.