Estudo in vitro da atividade anti-inflamatória da N-acetilcisteína, Hidróxido de cálcio, Clorexidina e suas associações

Abstract

Objetivo: Este trabalho tem como objetivo avaliar a atividade da N-Acetilcisteína (NAC), Hidróxido de Cálcio [Ca(OH)2], Clorexidina (CHX) , e suas associações quanto a ação anti-inflamatória em cultura de osteoblastos humanos (MG-63) ativados por LPS. Material e Métodos: Células de osteoblastos humanos (MG-63) foram cultivadas por 24 h em placas de 24 poços. Após a incubação, adicionaram-se meios condicionados de cada medicação intracanal e LPS de E. coli (5 µg/mL), mantendose por mais 24 h a 37°C e 5% CO₂. Posteriormente, o sobrenadante foi coletado e utilizado para quantificação das citocinas pró e anti-inflamatórias (IL-8, IL-1β, IL-6, IL10, TNF e IL-12p70) por meio do ensaio BD Cytometric Bead Array (CBA) e analisadas em citômetro de fluxo. Os resultados foram avaliados estatisticamente pelos testes de Kruskal-Wallis e Dunn ou ANOVA e Tukey, adotando-se α ≤ 0,05 como nível de significância, utilizando o software GraphPad Prism 6. Resultados: As associações contendo NAC, NAC+Ca(OH)₂, NAC+CHX e NAC+Ca(OH)₂+CHX reduziram a IL-8, com destaque para NAC+CHX, que apresentou a menor liberação entre todos os grupos (p<0,05). Para IL-1β, IL-6, TNF e IL-12p70, os grupos com NAC em combinação mantiveram níveis baixos e semelhantes aos de Ca(OH)₂ e CHX isolados (p>0,05), indicando atenuação do perfil pró-inflamatório. Já a NAC isolada aumentou tanto marcadores pró-inflamatórios quanto a IL-10, sugerindo que sua ação antiinflamatória é favorecida no contexto de combinações, especialmente com CHX. Conclusão: Associações com NAC — especialmente NAC+CHX — reduziram a IL-8 sem elevar IL-1β, IL-6, TNF e IL-12p70, indicando modulação anti-inflamatória superior aos fármacos isolados. Já a NAC isolada aumentou marcadores próinflamatórios e IL-10. Recomenda-se ampliar a investigação com outras doses, tempos e modelos celulares.

Objective: This study aimed to evaluate the anti-inflammatory activity of Nacetylcysteine (NAC), Calcium Hydroxide [Ca(OH)₂], Chlorhexidine (CHX), and their associations in cultures of human osteoblasts (MG-63) activated by lipopolysaccharide (LPS). Materials and Methods: Human osteoblasts (MG-63) were cultured for 24 hours in 24-well plates. After incubation, conditioned media from each intracanal medication and E. coli LPS (5 µg/mL) were added and maintained for another 24 hours at 37 °C and 5% CO₂. Subsequently, the supernatant was collected and used for quantification of pro- and anti-inflammatory cytokines (IL-8, IL-1β, IL-6, IL-10, TNF, and IL-12p70) using the BD Cytometric Bead Array (CBA) assay and analyzed by flow cytometry. Results were statistically evaluated using Kruskal–Wallis and Dunn or ANOVA and Tukey tests, adopting α ≤ 0.05 as the significance level, with GraphPad Prism 6 software. Results: Combinations containing NAC, NAC + Ca(OH)₂, NAC + CHX, and NAC + Ca(OH)₂ + CHX reduced IL-8 levels, with NAC + CHX showing the lowest release among all groups (p < 0.05). For IL-1β, IL-6, TNF, and IL-12p70, NACcontaining combinations maintained low levels similar to Ca(OH)₂ and CHX alone (p > 0.05), indicating attenuation of the pro-inflammatory profile. NAC alone, however, increased both pro-inflammatory markers and IL-10, suggesting that its antiinflammatory action is enhanced in combination contexts, particularly with CHX. Conclusion: NAC-containing associations—especially NAC + CHX—reduced IL-8 without increasing IL-1β, IL-6, TNF, or IL-12p70, indicating superior anti-inflammatory modulation compared with the isolated drugs. In contrast, NAC alone increased proinflammatory markers and IL-10. Further studies with different doses, exposure times, and cell models are recommended.