Avaliação da resposta inflamatória em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) induzida pelo SARS-CoV-2 e proteína de Nucleocapsídeo (N).

Abstract

O presente estudo teve como objetivo avaliar a resposta inflamatória em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) após a inoculação do vírus SARS-CoV-2 inativado e da proteína de nucleocapsídeo, por meio da correlação entre os resultados de acúmulo celular no exsudato inflamatório, leucograma, atividade respiratória de leucócitos, parâmetros bioquímicos séricos, morfometria, neurotoxicidade e biomarcadores de toxicidade, estresse oxidativo e resposta antioxidante. O experimento foi conduzido em duas etapas distintas, correspondentes aos tratamentos com o vírus inativado e com a proteína de nucleocapsídeo. Para ambos os estudos foram utilizadas 144 tilápias do Nilo (± 300 g) acondicionadas aleatoriamente em 18 aquários (n=8), constituindo os seguintes tratamentos: V1= inoculado com vírus inativado (n=32); V2= inoculado com veículo do vírus (grupo controle) (n=32); N1= inoculado com nucleocapsídeo (n=32); N2= inoculado com veículo do nucleocapsídeo (grupo controle) (n=32); PF= Padrão fisiológico (n=8). Ambos os grupos foram inoculados por via intraperitoneal com seus respectivos tratamentos (vírus inativado ou proteína nucleocapsídeo). Após 15 dias, os animais receberam nova inoculação na bexiga natatória, na região dorsolateral esquerda, no volume de 0,5mL. Após a administração na bexiga natatória, os peixes foram amostrados 24, 48, 96 e 192 horas pós-desafio (HPD) para coleta de sangue e exsudato inflamatório. A inoculação do SARS-CoV-2 inativado e de sua proteína N em O. niloticus induziu respostas inflamatórias, oxidativas e metabólicas moduladas, sem causar toxicidade sistêmica. As alterações hematológicas, esplênicas e antioxidantes observadas indicam ativação imune inata frente ao estímulo viral. Esses resultados demonstram que, mesmo inativado, o vírus ou a sua proteína N mantém propriedades de ser reconhecido e modular o sistema imune inato de tilápias, reforçando o potencial desses animais como modelo experimental alternativo para estudos sobre imunomodulação e fisiopatologia associadas ao SARS-CoV-2.

This study aimed to evaluate the inflammatory response in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) after inoculation with inactivated SARS-CoV-2 virus and nucleocapsid pro-tein, through the correlation between the results of cellular accumulation in the in-flammatory exudate, leukogram, leukocyte respiratory activity, serum biochemical parameters, morphometry, neurotoxicity and biomarkers of toxicity, oxidative stress and antioxidant response. The experiment was conducted in two distinct stages, cor-responding to treatments with the inactivated virus and with the nucleocapsid pro-tein. For both studies, 144 Nile tilapia (± 300 g) were used, randomly housed in 18 aquariums (n=8), constituting the following treatments: V1 = inoculated with inacti-vated virus (n=32); V2 = inoculated with virus vehicle (control group) (n=32); N1 = inoculated with nucleocapsid (n=32); N2 = inoculated with nucleocapsid vehicle (control group) (n=32); PF = Physiological standard (n=8). Both groups were inocu-lated intraperitoneally with their respective treatments (inactivated virus or nucle-ocapsid protein). After 15 days, the animals received a new inoculation in the swim bladder, in the left dorsolateral region, in a volume of 0.5 mL. After administration in the swim bladder, the fish were sampled 24, 48, 96, and 192 hours post-challenge (HPD) for blood and inflammatory exudate collection. Inoculation of inactivated SARS-CoV-2 and its N protein in O. niloticus induced modulated inflammatory, oxi-dative, and metabolic responses, without causing systemic toxicity. The hematologi-cal, splenic, and antioxidant alterations observed indicate innate immune activation in response to viral stimulation. These results demonstrate that, even when inacti-vated, the virus or the N protein retain properties that allow it to be recognized by and modulate the innate immune system of tilapia, reinforcing the potential of these an-imals as an alternative experimental model for studies on immunomodulation and pathophysiology associated with SARS-CoV-2.