Análise da expressão de biomarcadores inflamatórios em vesículas extracelulares do líquido sinovial de equinos com osteoartrite experimental

A osteoartrite (OA) é uma enfermidade articular crônica caracterizada pela degradação progressiva da cartilagem e representa uma das principais causas de afastamento das atividades esportivas. Nos últimos anos, as vesículas extracelulares (VEs) têm se destacado como importantes mediadores da comunicação intercelular no ambiente articular, além de potenciais biomarcadores para diagnóstico precoce e monitoramento da doença. O objetivo deste trabalho foi avaliar a expressão de biomarcadores inflamatórios em VEs isoladas do líquido sinovial de equinos com OA experimentalmente induzida. O líquido sinovial de 13 animais foi coletado nos momentos D-7, D0 (indução com monoiodoacetato), D7, D14 e D35. As VEs foram isoladas pelo método de ultracentrifugação, caracterizadas por citometria de fluxo (CD9, CD63 e CD81, Alix e calnexina) e pela NTA. A expressão dos genes IL-6 e MMP- 13 foi avaliada por meio de RT-qPCR. Os resultados demonstraram um aumento significativo da expressão de IL-6 em VEs nos momentos D7 e D14, indicando uma sinalização pró-inflamatória detectável nas vesículas do ambiente articular. Por sua vez, a MMP-13 apresentou elevação marcante no D7 e D14, sugerindo o envolvimento das VEs no transporte de mediadores catabólicos relacionados à degradação da cartilagem. As alterações temporais observadas no perfil e na carga molecular das VEs demonstram que essas partículas refletem dinamicamente o microambiente articular ao longo da progressão da doença. Em conclusão, este estudo evidencia o potencial das VEs do líquido sinovial como fonte de biomarcadores inflamatórios e catabólicos em equinos com OA experimental em diferentes estágios da enfermidade, tornando o diagnóstico precoce, além de reforçar suas possíveis implicações translacionais para modelos humanos de doenças articulares degenerativas.

Resumo (inglês)

Osteoarthritis (OA) is a chronic joint disease characterized by progressive cartilage degradation and represents one of the main causes of withdrawal from sports activities. In recent years, extracellular vesicles (EVs) have emerged as important mediators of intercellular communication in the joint environment, as well as potential biomarkers for early diagnosis and disease monitoring. The aim of this study was to evaluate the expression of inflammatory biomarkers in EVs isolated from the synovial fluid of horses with experimentally induced OA. Synovial fluid from 13 animals was collected at time points D-7, D0 (induction with monoiodoacetate), D7, D14, and D35. EVs were isolated by ultracentrifugation, characterized by flow cytometry (CD9, CD63, and CD81, Alix, and calnexin), and by NTA. The expression of IL-6 and MMP-13 genes was evaluated by RT-qPCR. The results showed a significant increase in IL-6 expression in EVs at D7 and D14, indicating detectable proinflammatory signaling in the vesicles of the joint environment. In turn, MMP-13 showed a marked increase at D7 and D14, suggesting the involvement of EVs in the transport of catabolic mediators related to cartilage degradation. The temporal changes observed in the profile and molecular load of EVs demonstrate that these particles dynamically reflect the joint microenvironment throughout the progression of the disease. In conclusion, this study highlights the potential of synovial fluid EVs as a source of inflammatory and catabolic biomarkers in horses with experimental OA at different stages of the disease, enabling early diagnosis and reinforcing their possible translational implications for human models of degenerative joint diseases.

Palavras-chave

Ortobiológicos, Exosomos, Diagnóstico

Idioma

Português

Citação

FERRARI, Lorena Cardozo. Análise da expressão de biomarcadores inflamatórios em vesículas extracelulares do líquido sinovial de equinos com osteoartrite experimental. 2026. 62 p. Dissertação (Mestrado em Medicina Veterinária) – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista (UNESP), Botucatu, 2026.