Influência de cromossomos B na maquinaria de manutenção telomérica em diferentes estágios de vida de Psalidodon paranae (Characiformes: Acestrorhamphidae)
Carregando...
Data
Autores
Orientador
Foresti, Fausto 
Coorientador
Cano, Maria Isabel Nogueira
Pós-graduação
Ciências Biológicas (Genética) - IBB
Curso de graduação
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Dissertação de mestrado
Direito de acesso
Acesso restrito
Resumo
Resumo (português)
Os cromossomos B são cromossomos adicionais de natureza dispensável e estão amplamente distribuídos entre os genomas dos organismos eucariotos. No gênero de peixe Psalidodon, esses cromossomos parecem desempenhar papéis importantes na determinação sexual, embora muitos aspectos permaneçam desconhecidos. Em Psalidodon paranae observou-se expressão diferencial de genes envolvidos com a regulação sexual em machos e fêmeas, influenciados pela presença do cromossomo B. Em estudos anteriores realizados no nosso laboratório, foram identificados genes nos cromossomos B de P. fasciatus, como trf1 e ruvbl1, relacionados à regulação telomérica, sugerindo uma interação entre cromossomos B e a maquinaria de manutenção telomérica. Os telômeros são complexos nucleoproteicos presentes nas extremidades cromossômicas, formados por sequências de DNA não codificantes repetidas em tandem e por proteínas que formam o complexo shelterin. O encurtamento dos telômeros a cada divisão celular é evitado através da enzima telomerase, que promove o alongamento dos terminais cromossômicos. Considerando que os cromossomos B são replicados a cada divisão celular, que são elementos que demandam da célula uma quantidade maior desses componentes da maquinaria telomérica, além de ser um elemento capaz de influenciar a expressão de genes que favorecem sua própria manutenção e transmissão, supomos que sua presença no genoma poderia influenciar a operação da maquinaria de manutenção dos telômeros dos indivíduos portadores. Portanto, o objetivo deste estudo é analisar se existe alteração na maquinaria telomérica, em diferentes estágios de ciclo de vida de P. paranae, associadas à presença do cromossomo B. Para avaliar a influência do cromossomo B na maquinaria telomérica, foram conduzidas análises de expressão gênica por RT-qPCR. Além disso, foi realizada a padronização da técnica de Southern Blot para analisar os fragmentos teloméricos (TRF - Telomeric restriction fragments) da espécie estudada, possibilitando sua aplicação futura na análise do comprimento telomérico. Os resultados indicam que os indivíduos 1B apresentam subexpressão de genes relacionados à manutenção telomérica, como genes codificadores de proteínas de shelterin (pot1, tpp1, trf2 e rap1) e da subunidade catalítica da enzima telomerase (tert) sugerindo que a presença do cromossomo B influencia o desempenho da maquinaria telomérica.
Resumo (inglês)
B chromosomes are dispensable, additional chromosomes widely distributed among the genomes of eukaryotic organisms. In the fish genus Psalidodon, these chromosomes appear to play important roles in sex determination, although many aspects remain unknown. In Psalidodon paranae, differential expression of genes involved in sexual regulation has been observed between males and females, influenced by the presence of the B chromosome. Previous studies conducted in our laboratory identified genes on the B chromosomes of P. fasciatus, such as trf1 and ruvbl1, which are related to telomeric regulation, suggesting an interaction between B chromosomes and the telomere maintenance machinery. Telomeres are nucleoprotein complexes located at chromosome ends, composed of tandemly repeated non-coding DNA sequences and proteins forming the shelterin complex. Telomere shortening with each cell division is prevented by the enzyme telomerase, which elongates chromosome termini. Considering that B chromosomes are replicated during each cell division, thus requiring the cell to allocate a greater amount of telomeric maintenance machinery components and given that B chromosomes can influence the expression of genes favoring their maintenance and transmission, we hypothesize that their presence in the genome may affect the operation of the telomere maintenance machinery in carrier individuals. Therefore, this study aims to analyze whether alterations occur in telomeric machinery at different life cycle stages of P. paranae associated with the presence of the B chromosome. Gene expression analyses were performed using RT-qPCR to evaluate the influence of the B chromosome on the telomeric machinery. Additionally, the Southern blot technique was standardized to analyze telomeric restriction fragments (TRF) of the studied species, enabling its future application in telomere length analysis. The results indicate that 1B individuals show underexpression of genes related to telomere maintenance, including shelterin complex protein-coding genes (pot1, tpp1, trf2, and rap1) and the catalytic subunit of the telomerase enzyme (tert), suggesting that the presence of the B chromosome influences the performance of the telomeric machinery.
Descrição
Palavras-chave
Cromossomos B, B chromosomes, Telômeros, Telomeres, Maquinaria telomérica, Telomeric machinery, Psalidodon, Psalidodon paranae, Astyanax
Idioma
Português
Citação
NADAI, Pamela Cristina Ferreira. Influência de cromossomos B na maquinaria de manutenção telomérica em diferentes estágios de vida de Psalidodon paranae (Characiformes: Acestrorhamphidae). 2025. Dissertação (Mestrado em em Ciências Biológicas-Genética) - Instituto de Biociências, Universidade Estadual Paulista, Botucatu, 2025.
